Centro de Bachillerato Tecnolgico y de Servicios

Plantel No. 128

Mdulo 2: ejecuta mtodos qumicos y microbiolgicos en base

a las normas.

Submdulo 3: ejecuta mtodos de identificacin de microorganismos en base a

normas.
Practica #1.2 Medios de cultivo
Integrantes:
Almaraz Kareni, Atilano Leslie, Bonilla Baltazar, Cano Itzel, Carrasco Jennifer,
Castaeda Jos, Contreras Selhket, De La Torre Karen, Duarte Juan, Quiroz
Alexis.
Asesor: Ing. Acosta Jessica

Introduccin

Un medio de cultivo consta de

un gel o una solucin que cuenta
con los nutrientes necesarios para
permitir, en condiciones favorables
de pH y temperatura, el crecimiento
de virus, microorganismos, clulas,
tejidos o incluso pequeas plantas.
Segn lo que se quiera hacer
crecer, el medio requerir unas u
otras condiciones. Generalmente
se presentan desecados en forma
de polvo fino o granular antes de
ser preparados; ya preparados
pueden encontrarse en estado
slido, semislido o lquido. El
objetivo ltimo del cultivo es
variado:
antibiograma,
identificacin, multiplicacin. Uno
de los sistemas ms importantes
para
la
identificacin
de
microorganismos es observar su
crecimiento
en
sustancias
alimenticias artificiales preparadas
en el laboratorio. El material
alimenticio en el que crecen los
microorganismos es el Medio de
Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Se
han preparado ms de 10.000
medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan
adecuadamente en un medio de

cultivo artificial debe reunir una

serie de condiciones como son:
temperatura, grado de humedad y
presin de oxgeno adecuado, as
como un grado correcto de acidez
o alcalinidad. Un medio de cultivo
debe contener los nutrientes y
factores de crecimiento necesarios
y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante.
Los virus,
por
ejemplo,
son
obligados parsitos intracelulares,
por lo que necesitan un medio que
contenga clulas vivas.
La prctica fue realizada para el
prximo cultivo de diferentes
muestras y la determinacin de su
morfologa tanto colonial como
bacteriana y su observacin,
adems de aprender la preparacin
de estos medios de cultivo los
cuales son los ms comunes de los
medios de cultivo.

Resumen
Durante esta prctica lo que se
hizo fue preparar diversos medios
de cultivo entre ellos 6 cajas Petri
con caldo nutritivo, 2 cajas con
agar McConkey y 2 cajas Petri con
agar verde bilis brillante (VBB),

para esto se tuvo que leer

cuidadosamente las instrucciones
que contiene cada una de los
empaques de almacenamiento de
estos agares, los cuales varan
debido a que cada uno contiene
diversas sustancias, hacindolo
diferente a los otros. Despus que
estos
agares
estuvieran
preparados se esterilizaron en el
Autoclave, una vez acabada su
esterilizacin se vaciaron en las
cajas Petri, se esper que cuajaran
para ser guardados en el
refrigerador
Abstract- resumen

In this practice what became it was

to prepare various "growth media" among
them six Petri dishes with nutrient broth, 2
McConkey agar plates and 2 Petri dishes
with agar brilliant green bile (VBB), for this
we had to read carefully the instructions
contained in each of storage packaging of
these agares, that vary because each
contains various substances, making it
different from others. After these agares be
ready were sterilized by autoclaving, once
finished sterilization were emptied in the
Petri dishes, I hope it will curdle to be kept
in the refrigerator

Primero se prepara el agar (vase

como en clculos y resultados) en
el matraz Erlenmeyer.

Despus se calienta sobre el

mechero y con la ayuda del guante
de asbesto se agita siempre hacia
una misma direccin hasta que
ste
quede
de
un
color
semitransparente y finalmente se
esteriliza en la autoclave.

Para el vaciado se monta el

tringulo de seguridad y con
cuidado abrimos las envolturas de
las cajas Petri esterilizadas,
posteriormente
se
vacan
aproximadamente 20ml de agar
nutritivo en 6 de las cajas Petri
esterilizadas
(Las
otras
se
utilizaron para el agar VBB y
MaConkey realizado por otros
equipos).

Se dejan reposar de 18-20 minutos

hasta que se solidifique y despus
se almacenan en el refrigerador.

Clculos

Agar nutritivo

Para preparar el agar nutritivo

utilizamos las especificaciones de
la caja, donde deca utilice 23gr de
agar por litro de agua entonces
necesitbamos
sacar
cuanto
utilizar para 6 cajas de 20ml
aproximadamente cada una con
10ml de margen de error:

23gr

1000ml
20ml*6 = 120ml + 10ml de margen
de error

?gr 130ml
(23gr)/1000ml

Materiales
2 Matraces Erlenmeyer de 500ml
Balanza analtica
1 esptula
Agua destila (mililitros necesarios)
Guantes de asbesto
3 Mecheros bunsen
3 Mangueras de ltex.
1 Vidrio de reloj
Cajas
Petri
previamente
esterilizadas

Mtodos

?gr= (130ml)
gr= 2.99

Resultados

Se obtuvieron los medios de cultivo

como
se
esperaba,
las
circunstancias
que
estuvieron

presentes favorecieron el hecho

que las caja Petri obtuvieran una
cantidad muy aceptable, a pesar de
haber sido hecho al tanteo, el agar
obtuvo la coloracin que se
esperaba y no se tuvo problemas
para el cuajado de este.

Discusin

Por medio de esta prctica

aprendimos a preparar medios de
cultivo para la siembra de distintas
bacterias, usando la incubadora se
aceler el proceso de crecimiento
de estas bacterias que fueron
tomadas de distintas muestras de
carnes y una de agua.

Se llevaron a cabo anotaciones de

pasa por paso y da con da de las
actividades realizadas con los
cultivos. El objetivo de esta prctica
fue la observacin de distintas
colonias formadas en el medio de
cultivo adems te su identificacin.

nutrientes y factores de crecimiento

necesarios y debe estar exento de
todo
microorganismo
contaminante.

Atilano Leslie

Los medios de cultivo son

fundamentales
para
la
microbiologa, ya que sin no
podramos observar a las bacterias
correctamente, a pesar de parecer
que los agares vienen de un polvo
de un olor un poco desagradable,
al mezclado con agua y luego
calentado mientras se agita, se
obtiene un medio de cultivo,
aunque esto suene sencillo, es
bastante complicado porque en el
momento de la ebullicin es difcil
sostener el matraz, aun as son
muy importantes puesto que estos
dan desarrollo a la vida bacteriana,
con los nutrientes necesarios para
alimentarse,
tambin
logre
diferenciar diferentes tipos de
agares, lo cual me pareci bastante
interesante, ya que algunos son
exclusivos para hongos y me
gustara empezar a cultivarlos lo
antes posible, ya que es algo que
me llama mucho la atencin.

Bonilla Baltazar

Conclusiones

Almaraz Kareni

Podemos concluir que uno de los

sistemas ms importantes para la
identificacin de microorganismos
es observar su crecimiento en
sustancias alimenticias artificiales
preparadas en el laboratorio. El
material alimenticio en el que
crecen los microorganismos es el
Medio de Cultivo y el crecimiento
de los microorganismos es el
Cultivo. Se han preparado ms de
10.000
medios
de
cultivo
diferentes. Para que las bacterias
crezcan adecuadamente en un
medio de cultivo artificial debe
reunir una serie de condiciones
como son: temperatura, grado de
humedad y presin de oxgeno
adecuado, as como un grado
correcto de acidez o alcalinidad. Un
medio de cultivo debe contener los

Los medios de cultivo son muy

importantes para el anlisis de los
microorganismos estos se usan con varios
fines como lo son, la reproduccin,
identificacin de los microorganismos.

Estos nos brindan una informacin

demasiado
valiosa
para
identificarlos y saber con qu
bacterias se trabaja, es de suma
importancia tomar en cuenta que
para tener un trabajo de buena
calidad hay que tener una
esterilizacin
de
material
adecuada, un higiene perfecto para
no llegar a contaminar las muestras
y as
saber identificar los
microorganismos.

Cano Itzel

Los medios de cultivo se utilizan

para desarrollar distintas bacterias,
virus, microorganismos, clulas,
tejidos
vegetales
e
incluso
pequeas plantas tomando en
cuenta los nutrientes, temperaturas
y pH necesarios para que estos
crezcan
favorablemente,
normalmente tienen un objetivo en
especfico,
tales
como
identificacin y multiplicacin. En
nuestra practica aprendimos el
cmo preparar los agares y a
sembrar correctamente en nuestras
cajas Petri, gracias al apoyo que
nos brind la ingeniera al momento
de mostrarnos como se haca una
correcta siembra.

Carrasco Meliza

Los medios de cultivo nos sirven

para
la
identificacin
del
crecimiento
de
los
microorganismos, aunque para que
un microorganismo crezca es
necesario que cuente con la
incubacin adecuada y nutrientes
necesarios en ellos crecen la
mayora de las bacterias aunque
estas
tambin
pueden
ser
patgenas
para
cultivar
es
necesario la preparacin de un
agar existen distintos tipos de agar
aunque los ms utilizados son
McConkey VBB y Nutritivo.

Castaeda Mario

Conclu que los medios de cultivo

son muy tiles para identificar
bacterias ya que existen diversos
tipos de stos, podemos trabajar
con varios para hacer crecer algn
tipo de bacteria en especfico y as
poder identificar ms rpido las
bacterias (como son los selectivos)
o con algn otro para hacer crecer
todo tipo de bacterias con la
muestra (generales) y con muchos

otros tipos que facilitan

identificacin e bacterias.

la

De la torre Karen

Los medios de cultivo son

importantes ya que sin ellos no se
podra curar una enfermedad o
saber qu tipo de bacteria la causa,
estos tambin son usados para
identificar, adems de clasificar los
microorganismos segn su estilo
de vida y morfologa, tambin
ayudan a el avance en la medicina,
la conservacin de los alimentos,
productos de belleza, etc. en
conclusin esta prctica se realiz
para obtener el conocimiento de
cmo se realiza un agar general
que es el nutritivo, y el selectivo
como lo es el McConkey, adems
tambin
fue
realizada
para
aprender a identificar e inocular
diferentes tipos de bacterias y
muestras.

Duarte Carlos

Podemos decir que la

microbiologa empieza su
verdadero desarrollo como ciencia
en el momento en que se descubre
el microscopio y comienza la
observacin de los primeros
microorganismos, pero es
indudable que la puesta a punto de
los medios de cultivo y la utilizacin
del agar como solidificante, marcan
dos importantes puntos de inflexin
en su evolucin.

Quiroz Alexis

Los medios de cultivo son

fundamentales para esta materia
puesto que sin ellos tcnicamente
nunca podramos tener la base de
todo o que hacemos, a pesar de
parecer que vienen de algo tan
insignificante como un polvo que
da presencia un olor un tanto
desagradable
para
ciertas

personas mezclado con agua y

luego calentado mientras se agita
tal como un chocolate caliente, sin
embargo son muy importantes
puesto que estos dan desarrollo a
la vida proporcionado nutrientes
necesarios para su crecimiento, y
logre aprender que hay diferentes
tipos de agares, lo cual me parece
algo interesantes puesto que me
hizo preguntarme cuanto llegare a
usar, tambin aprend a quitarme
cuando el caldo est hirviendo
aunque mue a la mala ya que me
queme sin embargo es algo que
era de esperar

cultivo artificial debe reunir una

serie de condiciones como son:
temperatura, grado de humedad y
presin de oxgeno adecuado, as
como un grado correcto de acidez
o alcalinidad. Un medio de cultivo
debe contener los nutrientes y
factores de crecimiento necesarios
y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante.

mayora

patgenas

de

las

requieren

complejos

La

bacterias
nutrientes

similares

composicin

los

en
lquidos

orgnicos del cuerpo humano. Por

Bibliografa

eso, la base de muchos medios de

http://www.microinmuno.qb.fcen.ub
a.ar/SeminarioMedios.htm

https://sites.google.com/a/goumh.u
mh.es/practicas-demicrobiologia/indice/preparacionde-medios-de-cultivo

Anexos

Los medios
microbiologa

cultivo es una infusin de extractos

de carne y Peptona a la que se
aadirn otros ingredientes.

El agar es un elemento solidificante

muy empleado para la preparacin
de medios de cultivo. Se lica

de

cultivo

completamente a la temperatura

en

del agua hirviendo y se solidifica al

enfriarse

Uno

de

los

sistemas

mnimas

ms

40

grados.

excepciones

no

Con
tiene

importantes para la identificacin

efecto sobre el crecimiento de las

de microorganismos es observar su

bacterias y no es atacado por

crecimiento

aquellas que crecen en l.

en

sustancias

alimenticias artificiales preparadas

en

el

laboratorio.

El

material

La

Gelatina

es

otro

agente

alimenticio en el que crecen los

solidificante pero se emplea mucho

microorganismos es el Medio de

menos ya que bastantes bacterias

Cultivo y el crecimiento de los

provocan su licuacin.

microorganismos es el Cultivo. Se
han preparado ms de 10.000
medios de cultivo diferentes.

En los diferentes medios de cultivo

se

encuentran

materiales

de

numerosos
enriquecimiento

Para que las bacterias crezcan

como hidratos de carbono, suero,

adecuadamente en un medio de

sangre completa, bilis, etc. Los

hidratos de Carbono se adicionan

extractos de carne o extractos de

por dos motivos fundamentales:

levadura.

para incrementar el valor nutritivo

preparacin de estas sustancias

del

detectar

para su aplicacin a los medios de

reacciones de fermentacin de los

cultivo provocaba la prdida de los

microorganismos que ayuden a

factores nutritivos lbiles.

medio

para

Sin

embargo,

la

identificarlos. El suero y la sangre

completa se aaden para promover
el

crecimiento

de

microorganismos

Actualmente,
extendida

los

la
de

forma
aportar

ms
estas

sustancias a los medios es utilizar

menos

peptona que, adems, representa

resistentes.

una fuente fcilmente asequible de

Condiciones generales para el

nitrgeno y carbn ya que la

cultivo de microorganismos

mayora de los microorganismos,

que no suelen utilizar directamente

El desarrollo adecuado de los

las

microorganismos en un medio de

capacidad

cultivo se ve afectado por una serie

aminocidos y otros compuestos

de factores de gran importancia y

ms

que, en algunos casos, son ajenos

presentes en la peptona.

protenas

naturales,
de

simples

atacar
de

tienen
los

nitrgeno

por completo al propio medio.

Ciertas

bacterias

tienen

1- disponibilidad de nutrientes

necesidades nutritivas especficas

adecuados

por lo que se aade a muchos

medios sustancias como suero,

Un medio de cultivo adecuado para

sangre,

la investigacin microbiolgica ha
de

contener,

como

ciertos

inductoras

otra
del

carbohidratos

sales

magnesio, manganeso, sodio o

necesarias ciertas

etc.

minerales como las de calcio,

y sales inorgnicas. En muchos

vitaminas

asctico,

Igualmente pueden ser necesarios

mnimo,

carbono, nitrgeno, azufre, fsforo

casos sern

lquido

potasio y sustancias promotoras

sustancia

del crecimiento, generalmente de

crecimiento.

naturaleza vitamnica.

Siempre han de estar presentes las

sustancias adecuadas para ejercer
de

donantes

electrones

para

captadores
las

de

2- consistencia adecuada del

medio

reacciones

qumicas que tengan lugar.

Partiendo de un medio lquido

podemos modificar su consistencia

Todas

estas

suministraban

sustancias

se

aadiendo

originalmente

en

albmina, gelatina o agar, con lo

forma de infusiones de carne,

productos

como

que

obtendramos

medios

en

estado semislido o slido.

Los

medios

gelatina

solidificados

tienen

inconveniente

el

de

que

con

4- condiciones adecuadas de
humedad

gran
muchos

Un nivel mnimo de humedad, tanto

microorganismos no se desarrollan

en el medio como en la atmsfera,

adecuadamente

es imprescindible para un buen

temperaturas

inferiores al punto de fusin de este

desarrollo

de

solidificante y de que otros tienen

vegetativas

la capacidad de licuarla.

cultivos.

las

microbianas

Hay

que

mantenimiento

en

los

prever

el

de

estas

Actualmente los medios slidos

condiciones mnimas en las estufas

son de uso universal, por su

de

versatilidad y comodidad, pero hay

proporcionando

tambin gran cantidad de medios

adecuada de agua que mantenga

lquidos

est

la humedad necesaria para el

el

crecimiento de los cultivos y evitar

cuyo

ampliamente

uso

extendido

en

laboratorio.

clulas

cultivo

35-37C

una

fuente

as que se deseque el medio.

3- presencia (o ausencia) de

5- Luz ambiental

La mayora de los microorganismos

oxgeno y otros gases

Gran cantidad de bacterias pueden

crecen

crecer

con

oscuridad que en presencia de luz

normal.

solar. Hay excepciones evidentes

en

tensin

una

de

atmsfera

oxgeno

mucho

como

directamente de variados sustratos.

microorganismos fotosintticos.

los

anaerobios

estrictos

slo

se

atmsfera

sin

oxgeno

ambiental. En un punto intermedio,

los microorganismos microaerfilos
crecen

mejor

atmosfricas

en

condiciones
parcialmente

anaerobias (tensin de oxgeno

muy

reducida),

mientras

los

anaerobios facultativos tienen un

metabolismo capaz de adaptarse a
cualquiera
condiciones.

caso

de

la

los

microorganismos

6- pH

La

desarrollarn adecuadamente en
una

el

en

Algunas pueden obtener el oxgeno

Pero

sera

mejor

de

las

citadas

concentracin

de

iones

hidrgeno es muy importante para

el

crecimiento

de

los

microorganismos. La mayora de
ellos

se

desarrollan

mejor

en

medios con un pH neutro, aunque

los hay que requieren medios ms
o menos cidos. No se debe
olvidar que la presencia de cidos
o bases en cantidades que no
impiden el crecimiento bacteriano

pueden sin embargo inhibirlo o

37C, y los saprfitos tienen rangos

incluso

ms amplios.

alterar

sus

procesos

metablicos normales.

8- Esterilidad del medio

Todos los medios de cultivo han de

7- Temperatura
Los

microorganismos

crecen

de

forma

mesfilos
ptima

estar perfectamente estriles para

evitar la aparicin de formas de

temperaturas entre 15 y 43C.

vida que puedan alterar,

Otros como los psicrfilos crecen a

enmascarar o incluso impedir el

0C y los termfilos a 80C o

crecimiento microbiano normal del

incluso a temperaturas superiores

o de los especmenes inoculados

(hipertemfilos).

en dichos medios. El sistema

En

lneas

generales, los patgenos humanos

clsico para esterilizar los medios

crecen en rangos de temperatura

de cultivo es el autoclave (que

mucho ms cortos, alrededor de

utiliza vapor de agua a presin

como agente esterilizante.