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Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza


Carrera de Química Farmacéutica Biológica
Laboratorio de Microbiología II

AISLAMIENTO DE HONGOS DE
DIFERENTES FUENTES
Equipo:7

Integrantes:
 CEDILLO BRAVO JOSE NICOLAS
FLORES ALVAREZ ALEJANDRA ISELA
PEREZ LOPEZ OMAR JONATHAN
RICARDO GONZALEZ VICTORIA
REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
no son fotosintéticos

Son heterótrofos
 Saprofitos: Cuando
toman nutrientes de  Parásitos : Cuando se
materias orgánicas nutren de materia viva
muertas o en
descomposición
• Su estructura consta de un complejo llamado talo o micelio,
que a su vez esta constituida por múltiples filamentos (hifas)
• No poseen clorofila
• Presentan tanto reproducción sexual como asexual
• Los alimentos se disuelven mediante enzimas que secretan
los hongos; después se absorben a través de la fina pared de
la célula ( principalmente de quinina)
• Se distribuyen por difusión simple en el protoplasma.
teniendo un acidófilos,
rango de siendo su pH
temperatura optimo de 5.6
entre 20 y 30°C.

Temperatura pH

Condiciones
de
crecimiento
Base
Nutriente
Humedad Actividad de
agua
carbohidratos, sales
de nitrógeno,
humedad proteínas, agua y los
del 60% aw =0.80 iones inorgánicos
básicos.
• su fuente primordial es a base de CO2, H2O, sales de nitrógeno
y de carbohidratos, sobre todo la glucosa, sacarosa y maltosa.

• Necesitan de iones inorgánicos mas comunes.

• Pueden sintetizar vitaminas, que le son necesarias pero hay


especies que llegan a ser deficientes de estas y las toman del
medio externo, esto se presenta sobre todo con tiamina y
biotina.
Se deben estudiar las características siguientes:

Forma y tamaño
Color en la superficie o en el reverso.
Difusión del pigmento.
Coloración: blanca, rosada, gris ,anaranjada, verde, rojiza,
negra.
Textura: yesosa, glabra, terrosa, granulosa, vellosa, cérea,
cremosa.
Superficie: elevada o plana, levantamiento central.
Aspecto: plegado, radiado, cerebriforme, crateriforme.
Consistencia: dura, suave, firme, membranosa.
Rapidez de crecimiento: por ejemplo las levaduras y los
oportunistas crecen en 24 a 48 h, y los dermatófitos en 5 a 10
días.
IDENTIFICACIÓN PRELIMINAR DE
CULTIVOS DE HONGOS
• Se observa si una colonia de hongos es
filamentosa o levaduriforme.
• Observar la consistencia de la superficie de la
colonia
• El plegamiento
• La nitidez del borde de las colonias
• Presencia de pigmento en la superficie o el
reverso de la colonia o su difusión hacia el medio
circundante.
Penicillium sp.
• Presenta micelios de crecimiento
rápido
• Aspecto: Aterciopelado o
pulvurulento y rugosidades radiales.
• La colonia es inicialmente blanca y
vellosa; a medida que se producen
esporas pigmentadas, toman matiz
verde o verde azulado. A veces se
observan variantes amarillas o
tostadas. A menudo se forman
rugosidades radiales.

• CRECIMIENTO: 22-30º, 7-10


dias
Aspergillus sp

Macroscópicament
e crecen entre 3-6 días a
temperaturas de 25º y
37º, C 7-10 días las
colonias están cubiertas
con un micelio aéreo
blanco, velloso. A medida
que la colonia madura se
observa una superficie
cubierta de esporas
negras. El reverso de la
colonia presenta un color
claro o verdoso.
A. niger (Agar Czapek) Aspergillus sp. (Agar Micosel)

A. terreus (Agar Czapek) A. flavus (Agar Czapek)


Geotrichum sp.
• Es de rápido
crecimiento, presenta
una colonia gris o gris
amarillenta.
• Producen cadenas de
artroconidios hialinos,
lisos, de una sola célula,
semiglobosos o
cilíndricos a partir de
hifas no diferenciadas
Curvularia sp

•Micelio aéreo bien desarrollado, denso, algodonoso. Gris-blanco al comienzo


se forma pronto marrón oscuro a rojo púrpura. Bordes enteros. El reverso es
rojo púrpura a negro.
Alternaria sp

Macroscopicamente
las colonias tienen un
aspecto
denso,algodonoso gris-
blanco al comienzo,
tornandose
posteriormente a color
marrón oscuro.
Fusarium sp

En un principio las colonias


son blancas y cubiertas por
un micelio aéreo velloso
bien desarrollado. Con la
madurez se forman
delicados pigmentos
lavanda a rojo púrpura en
la superficie de la colonia y
en su reverso presenta
color naranja o violeta,
difusible al medio.
Mucor sp
Macroscópicamente
las colonias son de
crecimiento muy
rápido, algodonoso
color blanco
amarillento, que se
convierte a gris
oscuro con el
desarrollo del
esporangio.
Rhizopus ssp
Macroscopicamente las
colonias crecen
rapidamente en
aproximadamente 4
días a 37º C, cubriendo
la superficie del agar
con un crecimiento
denso con apariencia
algodonosa que
primero luce blanca,
posteriormente
grisacea, de amarillenta
a café y el reverso se ve
de color blanco.
Microsporum fulvum

•Aspecto inconfundible: vellosas,


algodonosas, pulverulentas.
•De vistosos y variados colores
•Crecen radialmente de modo
progresivo
•Colonias de mayor tamaño
Sacharomyces cerevisiae
(Levaduras)

Características macroscópicas
Anverso:
Forma colonias blancas cremosas, lisas.
Reverso:
-Pigmento: Blancas cremosas, que no difunden al
medio.
Trichosporon sp.
(Hongos levaduriformes)
Macroscopicamente las colonias crecen rapidamente en aproximadamente 8 días a
37º C , cubriendo la superficie del agar con apariencia cremosa blanca,
posteriormente amarillenta
MEDIOS DE CULTIVO

Medios de cultivo para aislamiento


Nutrientes básicos en medio de cultivo

• Materias nitrogenadas como peptona.

• Azucares como glucosa o maltosa.

• Un soporte solido como la gelosa.

• pH ácido (5 a 6).

• Vitaminas (impurezas de la peptona)


AGAR SABOURAUD
Composición:
*Peptona 10g USO:
Para cultivo de hongos
*Glucosa 20g patógenos y no patógenos,
*Agar-Agar 20g particularmente
dermatofitos, levaduras y
*Agua destilada 1000ml m.o. acidúricos.
pH 5.6 ± 0.2

AGAR PAPA DEXTROSA (PDA)


Composición: USO:
*Pulpa de papa 250g Para cultivo,
aislamiento y
*Glucosa 20g determinación del
*Agar 20g numero de hongos y
*Agua destilada 1000ml levaduras.

pH final 5.6 +- 0.2.


AGAR LITTMAN
USO:
Composición: Medio selectivo, que
*Peptona, 10.0g suplementado con
*Estreptomicina 15.0g estreptomicina, se emplea
*Dextrosa, 10.0g para el aislamiento primario y
*Cristal Violeta 0.01g cultivo de hongos,
*Agar 20.0g especialmente dermatofitos.

AGAR BIGGY

*Sulfito de bismuto  8,0g USO:


*Dextrosa  10,0g El Agar Biggy (por sus siglas en
*Extracto de levadura  1,0g inglés Bismuth-Glucose-Glycine-
*Glicina  10,0g Yeast) es utilizado para el
aislamiento y
*Agar  16,0g diferenciación de especies de
*Citrato de Amonio y Bismuto  5,0g Candida. También es conocido
pH 6.8 ± 0.2 como Agar de Nickerson.
HONGOS EN SUELO
• Fusarium solani
• Fusarium oxysporum
• Penicillium spp
• Aspergillus flavus
• Aspergillus fumigatus
• Rhizopus spp
• Rhizoctonia solani
• Macrophomina phaseolina
• Curvularia sp
HONGOS DEL AIRE
El aire no es un medio en el que pueden desarrollarse
los microorganismos pero es el portador de aerosoles
biológicos como polvo, gotitas de agua y otros, que
pueden estar cargados de los diversos grupos de
microorganismos .
De las capas de aire se han encontrado esporas de
hongos que proceden principalmente del suelo, de la
vegetación y del mar.
El aire es también el medio de diseminación de hongos
saprófitos
HONGOS EN FRUTAS Y
VERDURAS
• Rhizopus sp.
• Gloeosporium sp
• Sclerotinia sp.
• Fusarium sp.
• Botrytis sp.
• Alternaria sp.
• Penicillium sp.
• Trichotechium sp.
• Cladosporium sp.
• Venturia sp.
• Fusicladium sp.
• Mucor sp.
• Phytotphora sp.
Ejemplos de hongos que se encuentran en el
medio ambiente.
Aire Suelo Plantas
Penicillium
× ×
Cladosporium
× ×
Trichoderma
× × ×
Fusarium solani
×
Fusarium
×
Aspergillus
×
Fenómenos fúngicos
• DIMORFISMO
Fenómeno en el cual un hongo muestra en su ciclo
biológico tanto un micelio filamentoso como un aspecto
levaduriforme. algunos hongos principalmente las especies
patógenas presentan dimorfismo
•forma filamentosa a 25 °C y 20°C
Temperatura • forma de levadura a 37°C.
dependiente

temperatura de 37 °C necesita la
hongos dimorficos Temperatura y nutrición presencia de una atmósfera de CO2
dependientes de 15 a 20% para crecer en forma
levaduriforme

obedece a una variedad de


factores ambientales, como
Nutrición dependientes oxigeno, CO2, hexosas
(azucares), metales
pesados
Temperatura dependiente
Blastomices dermatitides

Temperatura dependiente
Candida albicas.
Diferentes formas de Candida albicans
Temperatura y nutrición dependientes
Histoplasma capsulatum

Nutrición dependientes
Mucor racemosus
(esporangios)
Polimorfismo
• Fenómeno que se da cuando un
mismo hongo a diferentes
condiciones de desarrollo presenta
diferente color.
Pleomorfismo
• Es un fenómeno
fúngico que se
presenta en los
medios de cultivo ,
consiste en la
transformación
irreversible de una
cepa por un exceso
de carbohidratos,
esta tiende a cambiar
dando un micelio
blanco, estéril y
algodonoso.
Pleomorfismo
Se debe a aberraciones y mutaciones cromosomicas
es propio de los dermatofitos.
En el caso de los dermatofitos, el pleomorfismo está
relacionado con la pérdida de su capacidad de
esporulación. Al final acaba formándose un micelio carente
de conidios o con muy pocas estructuras de reproducción.

Epidermophyton floccosum
Colonia, Pleomorfismo.
Metodo de aislamiento
Aislamiento de Hongos del aire
En una caja Exponerlas
Aislamiento de petri con agar Incubar a
hongos del aire abiertas a la temperatura
Saboraud y otra corriente de aire
con agar Litman ambiente
por 15 min.

Realizar lectura,
reportar
características
macroscópicas
Aislamiento de Hongos del suelo
25º -30º se añaden 2
Aislamiento de Pesar 0.5 g de Fundir Saboraud y gts de la mezcla de
hongos en suelo tierra y agregar Littman antibióticos.
a un tubo 4.5mL Penicilina-
de la solución Streptomicina 1:1
salina estéril
Dil 1:10

Añadir el
contenido

* Diluciones
hasta alcanzar
De las
10 6 diluciones del
paso ( * )
colocar 1 mL de
las diluciones
Incubar a en dos cajas
Realizar lectura, temperatura con agar
reportar ambiente Saboraud y dos
características con Littman
macroscópicas
Diluciones realizadas para el
aislamiento micologico del suelo
Aislamiento de hongos de verduras y
frutos
En el centro de
la caja y
fojandolo

Aislamiento de Colocar un Pasarlos unos Sembrar en


Hongo de poco de tejido minutos por agar Saboraud
verduras y de la verdura o hipoclorito y Littman
frutas fruta que
contenga el
hongo
Incubar a
temperatura
ambiente
No realizar si el
hongo es de
aspecto
polvoso Realizar lectura, reportar
características
macroscópicas
Bibliografía
1. Tay Z.J, Velasco C. O. micologia medica. Editorial Mendez editores.
Mexico, 1991
2. Arenas R. micologia medica. Editorial Mc Graw-Hill. México, 1993

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Contienntal S.A de C.V, (1981): pp 44-45
5. Hayas. P. R. Microbilogoa de los alimentos. España . Ed Acribia S.A Zaragoza,
(1993): pp 103-104