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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS


ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE GENTICA Y BIOTECNOLOGA

LABORATORIO DE FSICA GENERAL II


PRCTICA:
POTENCIAL DE REPOSO

HORARIO:

Mircoles 8 10 am

PROFESOR:

Prof. Jorge Huayta Puma

Fecha de entrega:

11 de Noviembre del 2015

INTEGRANTES

CDIGO

Valdiviano Toyco, Stefanny Fiorella

15100111

Vera Choqueccota, Lucero Samira

15100120

Contenido
INTRODUCCION ............................................................................................... 3
OBJETIVOS....................................................................................................... 4
MATERIALES Y EQUIPOS .................................................................................. 5
MARCO TEORICO............................................................................................. 6
DETALLES EXPERIMENTALES............................................................................ 8
RESULTADOS ................................................................................................. 15
DISCUSION DE RESULTADOS ......................................................................... 17
CONCLUSIONES ............................................................................................. 18
RECOMENDACIONES ..................................................................................... 18
CUESTIONARIO .............................................................................................. 19
BIBLIOGRAFIA................................................................................................ 21

INTRODUCCION
Como sabemos, el potencial de reposo de una membrana depende de las concentraciones
de los iones en el interior y el exterior de la clula, por lo cual en el presente informe
aprenderemos el uso de una herramienta llamada C-Clamp que fue diseada basada en la
membrana del axn gigante de calamar, realizaremos cambios en los datos del programa
para poder comprender el potencial al cual se encuentra en equilibrio una membrana,
mediante la simulacin por computadora con este programa, adems variaremos las
concentraciones de Na y K para ver en que afecta este cambio al potencial de membrana y
para saber cules son los potenciales de equilibrio de estos dos iones principalmente.
En el siguiente experimento tambin determinaremos como afecta a la clula y a su
potencial si agregamos un estmulo de corriente usando el programa C-Clamp y con los
grficos obtenidos trataremos de hacer un acercamiento a cul es el potencial de umbral
de la clula, es decir, la barrera que determina si el impulso se va a propagar o no a otras
neuronas.

OBJETIVOS
Entender y comprender las propiedades elctricas de la neurona ya que ella es el
elemento bsico que explica la generacin y propagacin de los impulsos
elctricos.
Comprender la importancia de la concentracin de los iones sodio y potasio en el
interior y exterior de la membrana para la generacin de los potenciales de reposo
y de accin.
Explicar los mecanismos de generacin del potencial de reposo y los potenciales de
accin en clulas excitables.
Mediante la simulacin por computadora calcular los potenciales de equilibrio de
los iones, el potencial de membrana de reposo y el potencial de umbral.
Comprender la importancia del potencial de umbral en la generacin del potencial
de accin.
Estudiar y analizar el comportamiento de la clula ante un estmulo de corriente
(pulsos de corriente) haciendo uso de la computadora.
Analizar cada uno de los parmetros fsicos de la membrana.

MATERIALES Y EQUIPOS

Una computadora
Un tutorial interactivo: C-Clamp Ver 3.2

MARCO TEORICO
POTENCIAL DE REPOSO
El potencial de reposo de la membrana celular es la diferencia de potencial que existe
entre el interior y el exterior de una clula.
Se debe a que la membrana celular se comporta como una barrera semipermeable
selectiva, es decir, permite el trnsito a travs de ella de determinadas molculas e impide
el de otras. Este paso de sustancias es libre, no supone aporte energtico adicional para
que se pueda llevar a cabo.
La membrana es mucho menos permeable a los iones de sodio, cuando est en reposo, es
entre 10 y 100 veces ms permeable al potasio que al sodio y, por lo tanto, la prdida de
iones de potasio no puede ser reemplazada fcilmente por el sodio. A causa de la salida
de potasio se genera una carga negativa en el interior de la membrana, que a su vez,
genera una diferencia de potencial conocida como potencial de la membrana. Entonces
decimos que el potencial de membrana en reposo, es el que presentan las clulas cuando
no participan en una respuesta fisiolgica importante en la que est implicada la
membrana plasmtica, tal como la contraccin, conduccin o la secrecin.

Donde:
Vi: Potencial en el interior de la clula
Vo: Potencial en el exterior de la clula
ECUACIN DE NERST

El potencial de equilibrio de Nernst, relaciona la diferencia de potencial a ambos lados


de una membrana biolgica en el equilibrio con las caractersticas relacionadas con los
iones del medio externo e interno de la propia membrana.

Donde:
Constante de Boltzmann

Carga elctrica elemental


Valencia del in
ECUACIN DE Goldman-Hodgkin-Katz
Calcula el potencial de membrana cuando dicha membrana es permeable a mas de un
ion.

DETALLES EXPERIMENTALES
EXPERIMENTO 1: POTENCIAL DE EQUILIBRIO
1. Se ingres al programa C-Clamp de la siguiente forma: C/ Neuron > C-CLAMP y en
la pantalla apareci el programa
2. Se presion la tecla O para abrir el archivo y seleccionamos REST.CCS y luego
presionamos la tecla Enter para seleccionar. Para observar los grficos iremos
presionando a tecla B.

Figura1. El grfico muestra el potencial de membrana del axn


gigante de calamar.

Figura2. En el grafico se puede


observar el potencial de equilibrio
del sodio

a) El potencial de equilibro del K


Para esto cambiamos:
8

Figura3. En el grfico se observa el


potencial de equilibrio del Potasio

b) El potencial de reposo de la membrana


Hallamos el potencial de membrana mediante la ecuacin de GHK(Goldman- HodgkinKatz)
(
(

)
(

EXPERIMENTO 2: EFECTOS DEBIDO A LOS CAMBIOS EN LA


CONCENTRACION DE LOS IONES
1. Regrese al men de la pantalla y cambie las concentraciones de los iones potasio:
[K+O] 135 y [K+i] 135. Luego presione la tecla Y para determinar la superposicin del
ltimo grfico con el presente.
9

Figura 4: De color azul se observa el potencial de membrana


con las concentraciones de iones potasio iguales

2. Al igual que en el paso anterior, se procede a cambiar las concentraciones del ion
Na+: [Na+O] 145 y [Na+i] 145

Figura 5: De color azul se observa el potencial de membrana


con las concentraciones de iones sodio iguales

10

3. Para examinar el potencial de membrana con nicamente la conductancia para el


sodio, presione la tecla O y cargue el archivo REST.CCS. Presione la tecla B para
repetir el experimento bajo condiciones de control. Ahora cambie pK = 1 por pk = 0
y anote el potencial de membrana y explique el porqu de dicho resultado.

Figura 6: Se observa el grafico del potencial de membrana


cuando la conductividad del potasio es 0

4. Reemplace pK = 0 por pK =10 y anote el potencial de membrana y explique el


porqu de dicho resultado

Figura 7: Se observa el grafico del potencial de membrana


cuando la conductividad del potasio es 10
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EXPERIMENTO 3: PROPIEDADES PASIVAS DE LA MEMBRANA

1. Usando la tecla O cargue y corra el archivo PASSIVE.CCS. Luego se procede a


cambiar el valor en injected current, esto simulara un impulso de corriente. Se
dan valores de: 0.5, 1.0, 1.5, 1.6 nA.

Figura 8: Grafica del potencial de membrana con


un valor injected current= 0.5 nA

Figura 9: Grafica del potencial de membrana con


un valor injected current= 1.0 nA

12

Figura 10: Grafica del potencial de membrana con


un valor injected current= 1.5 nA

Figura 11: Grafica del potencial de membrana con


un valor injected current= 1.6 nA

2. Experimentalmente se encontr que el potencial umbral es de:

3. Luego, se procede a variar la corriente de inyeccin con valores de 2nA y 10nA

13

Figura 12: Grafica del potencial de membrana con


un valor injected current= 2 nA

Figura 13: Grafica del potencial de membrana con


un valor injected current= 10 nA

4. Se calcula la resistividad y la conductancia de membrana por estmulos pasivos de


corriente.

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RESULTADOS
EXPERIMENTO 1: POTENCIAL DE EQUILIBRIO
El potencial de equilibrio del K se halla mediante la ecuacin de Nerst:

El potencial de equilibrio del Na tambien se halla mediante la ecuacin de Nerst:

Hallamos el potencial de membrana mediante la ecuacin de GHK(Goldman- HodgkinKatz)


(
(

)
(

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EXPERIMENTO 2: EFECTOS DEBIDO A LOS CAMBIOS EN LA


CONCENTRACION DE LOS IONES
Se puede deducir, respecto a la Figura 4, que un cambio de concentracin de los iones
potasio de tal manera que la concentracin interna y externa sean iguales (135). Se logra
un potencial de membrana de 1-2 mV. La superposicin se da con respecto al grafico en el
cual la conductividad del potasio es 0.
En la Figura 5, se observa que el cambio en las concentraciones de Sodio, con la finalidad
de que las concentraciones interna y externa sean iguales (145); nos resulta en un cambio
en el potencial de membrana, resultando en aprox. -101 mV. La superposicin del
presente grafico se da con respecto al grafico en el cual la conductividad del sodio es 0.
La figura 6, nos revela un potencial de membrana aprox. de -41 mV.
La figura 7, nos revela un potencial de membrana aprox. de -95mV.

EXPERIMENTO 3: PROPIEDADES PASIVAS DE LA MEMBRANA


Los resultados obtenidos en las figuras 8, 9, 10, 11; nos indican que una al inyectarse un
corriente, la diferencia de potencial no vara instantneamente, sino a travs del tiempo.

CORRIENTE DE
INYECCIN(nA)
0.5
1
1.5

VOLTAJE DE
MEMBRANA(mV)
+60
+55
+50

RESISTENCIA()

CONDUCTIVIDAD(S)

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DISCUSION DE RESULTADOS
EXPERIMENTO 1: POTENCIAL DE EQUILIBRIO
Los resultados de los potenciales de equilibrio del Na y K son diferentes a los resultados
del potencial de membrana. Esto se debe a que para calcular el potencial de equilibrio de
un ion en especfico, se usa la ecuacin de Nernst, esta ecuacin hace referencia a una
membrana biolgica permeable exclusivamente al ion del cual se quiere calcular su
potencial de equilibrio. Mientras, el clculo del potencial de membrana se da por medio
de la ecuacin de Goldman, en el cual se toma en cuenta las concentraciones externas e
internas de varios iones

EXPERIMENTO 2: EFECTOS DEBIDO A LOS CAMBIOS EN LA


CONCENTRACION DE LOS IONES
La figura 6, nos revela un potencial de membrana de -41 mV, que con los datos obtenidos
anteriormente es el potencial de equilibrio del Na+. Esto se debe a que cuando se cambia
la conductividad de los iones potasio a una conductividad igual a 0, experimentalmente se
simula una clula que no es permeable a dichos iones; por lo tanto el potencial de
membrana ser solamente a causa de las concentraciones internas y externas de los iones
Na+.
La figura 7, nos revela un potencial de membrana de aprox. -95mV, que con los datos
obtenidos anteriormente es muy cercano al potencial de equilibrio del K+. Esto se debe a
que cuando se cambia la conductividad de los iones potasio a una conductividad igual a
10, experimentalmente la membrana de la clula es mucho ms permeable a los iones
potasio (pK=10) que a los iones sodio (pNa=0.06), por lo tanto el potencial de membrana
estar dado casi en su totalidad por los iones potasio, y en mucho menor cantidad por los
iones sodio.

EXPERIMENTO 3: PROPIEDADES PASIVAS DE LA MEMBRANA


El porqu de la diferencia de potencial, la cual no vara instantneamente, sino a travs
del tiempo se debe a que es un circuito resistencia capacitor. Por lo tanto el cambio de
diferencia de potencial se produce lentamente. Como se observa en las grficas antes
mencionadas, esta potencia, no llega a la potencia umbral; caso contrario al que ocurre en
las figuras 12 y 13, en las cuales se puede interpretar que si llega a sobrepasar el potencial
umbral, dando como consecuencia despolarizacin y repolarizacin de la membrana.

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CONCLUSIONES
La membrana presenta canales, los cuales se abren para el paso de iones
dependiendo de la cantidad de iones tanto en el interior como en el exterior, por
lo tanto es correcto decir que es una membrana semipermeable, ya que no
presenta
canales
para
otro
tipo
de
iones
como
el
Cl
Los iones ms importantes de la membrana son el sodio (Na) y el potasio (K),
tomando como referencia en la prctica realizada, la membrana del calamar
gigante.
El ion sodio se encuentra en mayor cantidad en el medio externo y el ion (K) se
encuentra en mayor cantidad en el medio interno.

RECOMENDACIONES
Anotar siempre lo observado en el grfico y tambin interpretarlo con los
conocimientos que tengamos del tema.
Ser muy cuidadoso con los pasos a seguir indicados en la gua de prctica para un
buen desempeo y uso del programa C-Clamp.

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CUESTIONARIO
1. Cules son los principales factores que influencian en los movimientos de los
iones a travs de la membrana?
Difusin
La difusin se da en presencia de un gradiente de concentracin, lo cual provoca la
entrada de iones de potasio al interior de la clula.
Atraccin elctrica
La atraccin elctrica se da en presencia de un campo elctrico, lo cual provoca la
salida de iones de potasio del interior de la clula hacia al exterior.
Conduccin continua o no saltatoria
En este tipo de conduccin se da ms lenta la propagacin del impulso nervioso, ya
que cada segmento del axn debe despolarizarse y re polarizarse, lo cual implica
mayor movimiento de iones a travs de la membrana y, por lo mismo, un mayor
gasto de energa

2. Qu entiende por potencial de equilibrio de un ion en particular?


Es la diferencia de potencial a ambos lados de una membrana biolgica en
equilibrio, simulando que dicha membrana sea solo permeable a un ion en
particular. Esto se logra relacionando las concentraciones del ion en el medio
interno y externo. Se puede calcular por medio de la ecuacin de Nernst.

3. Cules son las diferencias del potencial de reposo y del potencial de accin?
El potencial de reposos es la diferencia de potencial que existe entre el interior y el
exterior de la clula debido a la concentracin de cargas. En cambio, el potencial
de accin es el cambio significativo del potencial de membrana debido a la
activacin de los canales inicos regulados por voltaje.

4. Si el potencial de reposo es 65 mV bajo condiciones normales, qu podra


pasar si se revierte las concentraciones de Na+ y K+ a travs de la membrana?
Cargue y corra REST.CCS y revierta las concentraciones para ver si Ud. Est en lo
correcto.

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La concentracin de Na en la membrana externa es de 145mM y en la membrana


interna es de 30mM, en el caso del K la concentracin en la membrana externa es
de 3.1mM y 135mM en la membrana interna. Al revertir estas concentraciones
unas con otras se puede observar en la grfica que la diferencia de potencial tena
5mV en condiciones normales pero ahora tiene 6mV.

5. Cargue y corra PASSIVE.CCS. Qu podra esperar que ocurra al potencial de


membrana y la respuesta al pulso de corriente de despolarizacin si se duplica
las permeabilidades del sodio y del potasio?
La permeabilidad en condiciones normales del Na es de 0.06 y la del K es de 1.
Primero se duplica la permeabilidad del K a 2, y se puede observar que la grfica no
genera pulsaciones, pues el pulso de corriente inducido no es suficiente para poder
llegar al potencial umbral y por lo tanto no hay convulsiones. Adems el potencial
que
apareca
en
condiciones
normales
ha
disminuido.
Luego se duplic la permeabilidad del Na a 0.12 y se pueden observar numerosas
pulsaciones pues la corriente inducida es suficiente para llegar al potencial umbral
y sobrepasar el nmero de convulsiones normales. Adems se puede observar que
el potencial de membrana aumenta

6. Por qu el potencial de equilibrio del potasio es -100 mV y del sodio +41mV si


ambos son iones positivos?
Las concentraciones de iones potasios internos son mucho mayores que los
externos. Por lo tanto se genera una gradiente de concentracin y se difunde al
exterior, mientras que otros componentes anionicos (como el Cl) que no son
permeables a la membrana biolgica, se quedan dentro de la clula. Entonces, se
encuentra un exceso de cationes fuera de la clula y un exceso aniones dentro de
la clula; generando as un potencial de equilibrio negativo, ya que este se define
como la diferencia de potencial interno y externo.
Las concentraciones de iones sodio externos son mayores que los internos, por lo
tanto se genera una gradiente de concentracin y se difunde al interior de la clula
dando lugar a potencial de membrana positiva.

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BIBLIOGRAFIA
Ramn Latorre, Biofsica y fisiologa celular (Universidad de Sevilla, 1996) p.p 94 y
103

Ecuacin de Nerst, 22:25:22 UTC, http://es.slideshare.net/arbysqueen/ecuacinde-nerst. Fecha de acceso: 6/11/15

Francisco Cordoba Garcia, Fundamentos Biologicos Del Aprendizaje Y La


Memoria, 2005.

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