Folin-Ciocalteau

Los fenoles reaccionan con el reactivo de Folin - Ciocalteau dando un

color azul propio de la reaccin con fenoles. El reactivo de Folin - Ciocalteau se
obtiene ya preparado de las casas comerciales (Sigma). Este reactivo contiene
una mezcla de wolframato sdico y molibdato sdico en cido fosfrico y
reacciona con restos fenlicos presentes en las protenas (tirosinas) y en
compuestos como cido glico y sus derivados, flavonoides, etc.
El cido fosfomolibdotngstico (formado por las dos sales en el medio
cido), de color amarillo, que al ser reducido por los grupos fenlicos da lugar a
un complejo de color azul intenso, es el que medimos a una longitud de 760 nm
(Singleton y Rossi, 1965).
Es un mtodo de medida del contenido en fenoles totales y otros
compuestos que no siendo fenlicos muestran una cierta capacidad de
reaccin. Esta reaccin es una medida tambin de la capacidad antioxidante.
Por lo que en muchos trabajos se ha asimilado como un mtodo de
determinacin de la capacidad antioxidante

Figura XX. Recta patrn del mtodo Folin-Ciocalteau

Para realizar la recta patrn (Figura XX) aadimos cantidades variables

de cido glico 0.25 mM (dilucin de 25/100 de cido glico 1 mM) a 600 L de
solucin de carbonato sdico al 7.5% y el agua correspondiente para alcanzar
un volumen total de 1.5 mL (Tabla XX). Posteriormente se aade a cada tubo
200 L de reactivo Folin-Ciocalteau, e incubamos los tubos 50C durante 10
minutos. A continuacin se mide la absorbancia a 760 nm en el
espectrofotmetro. Na2CO3

Concentracin (g)
1. Volumen L de Na2CO3
7.5%
2. Volumen L de cido
glico 0.25 mM
3. Volumen L de agua
4. Volumen L de reactivo

Blanco
0
600

P n1
4.3
600

P n2 P n3
8.5
12.8
600
600

100

200

900
200

800
200

700
200

P n4
17.0
600

P n5
21.3
600

P n6
25.5
600

300

400

500

600

600
200

500
200

400
200

300
200

Folin-Ciocalteau
Tabla XX. Preparacin de la recta patrn del mtodo Folin-Ciocalteau

La medida de los diferentes extractos de t se realiza sustituyendo en el

mtodo el patrn de cido glico por un volumen fijo de 10 L de extracto. Para
los clculos debemos tener en cuenta el volumen y concentracin del extracto
de partida (1 g de t en 100 mL de agua) y el volumen de extracto utilizado. Los
resultados se interpolan en la curva de calibrado 0.25 mM de cido glico y se
expresan en g equivalentes de cido glico por gramo de peso fresco (Figura
XX)

30
25

f(x) = 49.4x + 0.2

R = 1

20
15
10
5
0
0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

Figura XX. Recta patrn de cido glico expresada en g equivalentes de

cido glico por gramo de peso fresco.