AGENTES

DESCALCIFICANTES
DOCENTE:
Dr Edison Suarez
Buitrn
INTEGRANTES:
Chagua Romero
Gabriela
Paucar Ayllon Guliana
Ayzanoa Condori Soly
quino Sinche Rolando

DESCALCIFICACIN

La descalcificacion
elimina las sales
calcicas insolubles
conservando la
estructura y la afinidad
tintorial.

Las soluciones
descalcificantes son
sustancia acidas que al
ponerse al contacto los
huesos, dientes, quitina,
etc. posen la propiedad de
formar con ellas la
combinacin solubles e n
agua y fcilmente
descartables mediante el
lavado.

DESCALCIFICACIN

Los tejidos seos o cartilaginosos los

descalcificaremos tratndolos con un cido
fuerte,
naturalmente segn sea su tamao. Si se
trata de calcificaciones de reducido tamao,
basta
con aadir un cido (Actico, Tricloractico)
al liquido fijador, quedando as fijadas y
descalcificadas.

ESPECMENES SEOS
pueden clasificarse en muestras
obtenidas por

BIOPSI
AS

CURETAJ
ES

AMPUTACION
ES

A diferencia del procesamiento de otro tipo de tejido, las muestras

que contienen componentes seos requieren procedimientos
especiales que usualmente no son requeridos por otro tipo de
especmenes,

con

el

fin

de

poder

obtener

representativas que se puedan evaluar al microscopio.

muestras

DESCALCIFICACION
QUIMICA

Los principales agentes decalcificadores estn formados por cidos

fuertes o dbiles empleados solos o en conjuncin a distintos lquidos
fijadores.
ACIDOS
DEBILES

ACIDOS
INORGNICOS

ACIDOS
FUERTES
ACIDO NTRICO
ACIDO
CLORHDRICO
ACIDOS ORGNICOS

ACIDO
SULFUROSO

ACIDO FRMICO
ACIDO ACETICO
TRICLOROACTICO
DESCALCIFICANTES QUMICOS POR
QUELACION
ACIDO ETILEN DIAMINO- TETRACETICO (EDTA)

UN LQUIDO DESCALCIFICANTE IDEAL

DEBE REUNIR UNA SERIE DE
CUALIDADES. ESTAS CUALIDADES SON
LAS SIGUIENTES:
1. Debe producir una eliminacin
completa de los depsitos clcicos.
2.
No
debe
provocar
efectos
indeseables o artefactos
sobre los
tejidos tratados.
3. No interferir con los procedimientos
de
tincin
que
se
emplean
posteriormente..

NORMAS QUE DEBEN OBSERVARSE DURANTE EL

PROCESO DE DESCALCIFICACION
Para disminuir las alteraciones que
pueden producir los
descalcificaciones , la fijacin debe
haberse completado antes de iniciar
el proceso.
Las concentraciones del
descalcificante debe ser optima , de
manera que se alcance equilibrio
entre la mayor rapidez de las
disoluciones mas concentradas y el
menor efecto de alteracin tisular a
consecuencia de las soluciones
muy diluidas.

 Se usara
un volumen ptimo de liquido
descalcificadora (1:20) y ser renovado con
frecuencia.
La temperatura ideal es de 25C.
Para acelerar el proceso se utilizara la agitacin
Tras el proceso de descalcificacin qumica se
realizara lavados en soluciones neutralizantes
( agua corriente).
Es necesario un pre tratamiento de los cortes con
solucin acuosa de carbonato de litio al 1%, para
asegurar la neutralizacin de los cidos empleados
en la descalcificacin.

SOLUCIONES DESCALCIFICANTES
DE CIDOS FUERTES
ACIDO NITRICO

PROCEDIMIENTO:
Esta preparacin es para 1000 mil de reactivo.
Agua destilada 700ml
Acido ntrico.100ml
Alcohol absoluto ....200ml
1. En una probeta medir 700 ml de agua destilada, agregar el acido ntrico y
los 200 ml de alcohol absoluto.
2. Homogenizar bien y agregar a una botella color mbar.
3. No olvidar rotular el da de la preparacin.

Ventajas:
1. Provoca rpida decalcificacin

INCONVENIENTES:
La prolongacin
excesiva del tiempo de

2. Causa baja retraccin tisular.

3. Mejor coloracin de los
ncleos.

decalcificacin suele
anular la fijacin previa
y alterar
progresivamente el

ORMULINA ACIDO NTRICO

Formalina.100 mL
c. Ntrico concentrado100 mL
Agua destilada...800 mL
Tiempo medio de calcificacin para un bloque de tejido seo de 5 mm de espesor
es de 1 a 3 das.

Ventajas:

Inconvenientes:

1. Es de accin relativamente rpida.

1. Dificulta la tincin nuclear

2. Provoca menos alteraciones titulares

2. Antes de su procesamiento

que la solucin acuosa de acido ntrico.

los tejidos requieren

3. Por su facilidad de manejo es la

neutralizacin en sulfato sdico

solucin decalcificante ms utilizada

al 5% y un lavado posterior en

para tcnicas histolgicas de rutina.

agua corriente al menos

durante 2 horas.

CIDOS DBILES.

Acido frmico

Ventajas:
1. Fija y descalcifica
simultneamente.
2. No dificulta demasiado la
coloracin nuclear.
3. esta especialmente
recomendado para decalcificar
bien

Inconvenientes:
1. Accin muy lenta.
2. Requiere neutralizacin previa a la
inclusin en sulfato sdico al 5%
3. Lavado en agua posteriormente
durante 18 horas.

DESCALCIFICANTES QUIMICOS
POR QUELACION
Los quelantes qumicos son sustancias
capaces de combinarse con iones metlicos
en solucin o estabilizados en forma de
sales o constituir nuevos compuestos
generalmente solubles en agua.
El quelante que se utiliza normalmente es el
acido etiln-dianinotetractico.

El EDTA se combina con los iones metlicos

formando compuestos solubles en agua.
El EDTA sustrae calcio de una forma muy lenta y
son necesarios varios das incluso semanas
dependiendo del tamao de la muestra, si la
muestra ya ha sido fijada no se altera el resto de
los componentes celulares y tisulares.
PREPARACIN

Acido EDTA trisdico

..100gr.
Tris

33,3gr
Agua destilada

1000ml

TAMBIN SE PUEDE UTILIZAR ASOCIADO AL FORMOL O AL CITRATO SDICO, SEGN LAS SIGUIENTES
FRMULAS.

Solucin de Schmorl.
cido Frmico (90%) 500 ml
Formaldehido (35-40%) 50 ml
Agua destilada 450 ml
- Solucin de Krajlan.
cido Frmico (90%) 25 ml
Citrato de Na cristalizado 10 g
Agua destilada 75 ml

DESCALCIFICACIN POR
ELECTROFORESIS
La descalcificacin podramos acelerarla
utilizando la descalcificacin electroltica, que
consiste en hacer pasar una corriente contina
por la solucin (mezcla de cido Frmico y
Ntrico) en la que se introducen dos electrodos
inatacables por los cidos.
La descalcificacin electroltica presenta la
ventaja de la ganancia de tiempo pero la
calidad de sus resultados se presenta a
discusin.

RECORDA
R

Debemos mantener
el
detalle
celular
y
la
antigenicidad de las
Biopsias
usando
un
reactivo
descalcificador
con un pH optimo , para
no tener excesiva prdida
de la antigenicidad en la
inmunohistoqumica

Debemos utilizar un volumen

ptimo en relacin con el tejido
por descalcificar (mnimo 1:20).

RECOMENDACIONES

Realizamos una agitacin suave

del recipiente que contiene el
tejido con el descalcificante, por
cuanto est comprobado que
hacerlo acelera el proceso

Finalizado el proceso de
descalcificacin, barremos
el exceso de cido con
agua corriente como
solucin neutralizante.

GRACIA
S