Cromatografa De Capa Delgada Y Columna

Johana Marcela Feijooa, Katherine Minab, Tania alejandra Sierrac

a
johana.feijoo@correounivalle.edu.co, bkatherine.mina@correounivalle.edu.co,
c
Tania.sierra@correounivalle.edu.co
Universidad del Valle, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas Departamento de Qumica,
Cali-Colombia
Fecha de realizacin: 10 diciembre de 2015
Fecha de entrega: 14 diciembre de 2015

Discusin:

Preguntas:

1. Explique por qu y cmo se separan los compuestos de la mezcla de tintes?

La separacin de dos o ms componentes se logra en ltimo trmino por un equilibrio relativamente sutil de
todas las fuerzas involucradas1. En una cromatografa de columna, los tintes se separan debido a la adsorcin
en la superficie del slido con afinidades diferentes (fuerza de unin). La fase mvil arrastra y disuelve estos
componentes de acuerdo con su afinidad por la superficie slida y la solubilidad de la sustancia en la misma.
El factor relevante es el establecimiento del equilibrio.
La almina ayuda a la separacin de los tintes, debido a que retiene los componentes del mismo sobre la
superficie mediante una combinacin de fuerzas de cido de Lewis y base de Lewis, actuando con diferente
intensidad sobre la muestra. Cuanto mayor sea la relacin de adsorbente con respecto al peso total de la
mezcla problema, y mayor sea la longitud de la columna o de la placa, mejor ser la separacin. Esto se debe
a que las fuerzas que efectan la separacin tendrn ms oportunidad de actuar sobre cada componente. No
obstante, el aumento de la cantidad de adsorbente, significa un tiempo adicional en la separacin.
Las fases mviles utilizadas fueron etanol y agua los cuales arrastraron los tintes que podan disolver,
(mayor afinidad) con cada uno en contra posicin a la fase estacionaria. El etanol separ el azul de metileno
mientras el agua separ el otro tinte de color amarillo. El agua, desempea un papel importante en la
separacin de la mezcla debido a que arrastra los componentes que no son separados por el etanol, adems
de que agiliza la separacin gracias al cambio de solvente.
2. Qu es la cromatografa de columna seca? Y cmo se desarrolla?
La cromatografa en columna seca, se desarrolla a partir del empacado de la columna cromatogrfica con
material de relleno seco. La muestra se aade como una disolucin concentrada o seca sobre una pequea
cantidad de adsorbente antes de la introduccin. Se deja que el disolvente descienda a lo largo de la columna
por capilaridad hasta que el frente casi alcance la parte inferior. El flujo de disolvente se para y se sacan las
bandas de la columna, por corte. Luego se extraen con un disolvente adecuado.
No hay flujo de lquido a travs de la columna y no se forman canales; la zona de separacin est definida. La
cromatografa en columna seca realiza la separacin de manera rpida, y requiere poco disolvente. Cuando
se usa almina o gel de slice, las separaciones se pueden extrapolar directamente de las placas de TLC
analticas eligiendo el mismo adsorbente en la columna, por lo tanto, el mtodo es una variante de TLC
analtico con la misma resolucin.
La cromatografa en columna seca ha demostrado ser eficaz para un fraccionamiento inicial rpido de
extractos de plantas.
3. Cul es el desarrollo mltiple y el desarrollo bidimensional de la CCD?
La cromatografa de capa fina o delgada, se puede obtener por desplazamiento del disolvente en direcciones
ascendentes, descendentes, horizontal o radial. La modalidad ascendente tiende a minimizar el problema
que plantea el flujo preferencial del disolvente por canales. El desarrollo continuo implica la eliminacin del
disolvente a medida que alcanza el extremo del papel o de la capa fina. El desarrollo mltiple, implica la
vaporizacin del disolvente despus de que el frente de disolvente ha alcanzado el extremo de la hoja,
seguida de la repeticin del desarrollo en la misma direccin. El desarrollo escalona, consiste en el desarrollo
de una placa con un disolvente apolar seguido de su evaporacin luego de un segundo desarrollo con un

disolvente ms polar. Por ltimo, el desarrollo bidimensional, es utilizado en mezclas complejas que no se
separan por completo en un solo cromatograma en pape; en esta, la muestra se aplica en una esquina de una
hoja de papel filtro y el cromatograma se corre en forma paralela a uno de los bordes del papel. Luego de
que el cromatograma est completo y el papel se sec, la hoja se rota 90 y se realiza una cromatografa
paralela al segundo borde utilizando otro sistema de solventes. Dado que cada compuesto migra a una
velocidad caracterstica en un sistema de solventes determinado, la segunda cromatografa debera
incrementar en grado sustancial la separacin de la mezcla en sus componentes.

4. En qu consiste la cromatografa de CCD preparativa?

Para asilar una sustancia a partir de una mezcla compleja se pueden desarrollar separaciones en escala
analtica y separaciones en escala preparativa. Las primeras son importantes para el anlisis cualitativo y
cuantitativo de los productos naturales, mientras que las separaciones en escala preparativa son primordiales
para descubrir nuevas sustancias biolgicamente activas o an para disponer de sustancias de referencia.
El valor del Rf es variable respecto a factores como la temperatura del medio ambiente, el grado de pureza de
los solventes utilizados y las variaciones de homogeneidad de las diferentes placas de capa delagada. Debido
a estos factores, el uso de una substancia de referencia para garantizar la identificacin, es importante,
principalmente cuando se trata de extractos de plantas. falta
5. Qu es una resina de intercambio anionico? Y una resina catinica?
Las resinas de intercambio inico son aquellas en las que el sitio de intercambio se hallan limitados a una
delgada capa superficial. En forma de perlas de pequeo dimetro son tiles para las separaciones de
muestras pequeas a alta presin y elevada velocidad.
Una cromatografa de intercambio inico se utiliza cuando se requiere separar una mezcla de cuyos
componentes qumicos que en disolucin, y a un pH adecuado, se disocian en iones. El origen de este tipo
de separacin se efectu con el uso de arcillas y zeolitas, intercambiadoras de iones de origen inorgnico,
pero estas fueron reemplazadas por las resinas de origen orgnico. stas, son polmeros de gran masa
molar y muchos grupos ionognicos por molcula. En condiciones adecuadas estos grupos funcionales se
disocian generando iones fijos unidos a la matriz molecular e iones mviles o intercambiables, de carga

opuesta denominados contraiones. En funcin de si la carga del contrain es positiva o negativa, se distingue
entre intercambiadores de cationes o de aniones respectivamente. Los intercambiadores de iones constituyen
la fase estacionaria en este tipo de cromatografa, de forma que cuando entran en contacto con la fase mvil
se establecen equilibrios de intercambio inico.
Un ejemplo de un equilibrio en un intercambiador de cationes es el siguiente:

Donde xRSO3-H+ es una resina en su forma cida y Mx+ es cualquier catin de la disolucin.
En el caso de un intercambiador de aniones, el proceso anlogo queda ilustrado a continuacin:

Donde xRN(CH3)3+OH- es un ejemplo de resina en su forma bsica y Ax- es cualquier anin de la disolucin.
Del tratamiento del equilibrio se deduce que si uno de los contraiones est en exceso, tanto en la fase mvil
como en la resina, el cociente entre la concentracin del otro contrain en la resina y su concentracin en la
fase mvil ser constante, y su valor indica la afinidad de una resina determinada por ese contrain. El valor
de esta constante de distribucin est relacionado con la carga y el tamaoo del in hidratado.
Cuanto mayor es la carga del in, con ms fuerza se une ste a la resina; dentro de un grupo de iones con la
misma carga, la distinta habilidad para penetrar en la resina da lugar a constantes sistintas.

6. Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografa de adsorcin en columna.

Pregunta 5

Pregunta 6

Conclusiones

Referencias
[1] el de siempre
[3] Laitinen, H. A., & Harris, W. E. (1982). Anlisis qumico. Revert.
[2] Cruz, N. S. ., & Serrano, A. J. B. (2012). Tecnologa farmacutica. Editorial Club Universitario.
[4]Nicolai, S. (2002). Fundamentos de tecnologa de productos fitoteraputicos.Colombia: Ed.
Universidad del Tolima, 56.

[4] de Marcano, D., & Hasegawa, M. (1991). Fitoqumica orgnica. Universidad Central de
Venezuela, Consejo de Desarrollo Cientfico y Humanstico.