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TCNICAS

HISTOLGICAS

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO


FALCULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE LABORATORIO CLNICO E HISTOPATOLGICO

CATEDRA DE:
TCNICAS HISTOLGICAS

DOCENTE:
LIC. IVN PEAFIEL

GRUPO: N9
TERCER SEMESTRE

PERIODO ACADMICO: OCTUBRE 2015- FEBRERO 2016

GRUPO 9 |

BAO DE FLOTACIN - PROCESO DE


PESCA

TCNICAS

HISTOLGICAS

RIOBAMBA ECUADOR

GRUPO N-9

INTEGRANTES:

N-

APELLIDOS Y NOMBRES
Bonifaz Hidalgo Andrea Fernanda
Delgado Jimnez Deisy Johana
Ramirez Yurlendi Briggite

1
2
3

TEMA:

TCNICAS HISTOLGICAS

N1

25%

50%

GRUPO 9 |

75%

PARTICIPACIN
100% Observacin
100% No hubo inconvenientes al
momento de hacer la
investigacin
100% No hubo inconvenientes al
momento de hacer la
investigacin
100% No hubo inconvenientes al
momento de hacer la
investigacin

Cal. Docente

BAO DE FLOTACIN - PROCESO DE


PESCA

TCNICAS

HISTOLGICAS

INTRODUCCIN

En la actualidad para el diagnstico de ciertas patologas usamos las biopsias en vivos


y en casos de los cadveres las necropsias. En el rea del laboratorio de anatoma
patolgica llegan piezas quirrgicas las cuales debemos realizar una serie de procesos
como son la macroscopia, inclusin de tejidos, microtoma, bao de flotacin
Despus de realizar los cortes sucesivos del bloque gracias al micrtomo los tejidos
quedan encogidos de esta forma no se podra colocarlos directamente en el porta
objetos.
El bao de flotacin nos ayuda con este problema. Es decir que la funcin bsica de este
aparato es extender el listn de tejido para que posteriormente se adhiera a la laminilla.
En este aparato se debe coloca una sustancia par que el tejido se estire, como: agua,
gelatina sin sabor
Cabe recalcar que es conveniente tener este aparato cerca del micrtomo, evitando que
en el traslado de los listones de tejidos al equipo estos se rompan y toque realizar otros
cortes, desperdiciando tiempo.
Adems debe tomarse en cuenta que este equipo se debe tenerlo en una mesa firme
pues el movimiento del bao de flotacin produce que los listones se peguen unos
contra otros, dandose totalmente estos listones.
La importancia del bao de flotacin radica que este nos ayuda a que los listones de
tejido se extiendan, para posteriormente pescarlos y que estos queden fijos al porta
objetos.

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PESCA

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OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Conocer sobre el bao de flotacin y la pesca de los listones mediante la


adquisicin de conocimientos a travs de la investigacin para la obtencin de listones
de tejidos completamente estirados y fijos al porta objetos.
OBJETIVOS ESPECFICOS

Reconocer la importancia del bao de flotacin.


Identificar cual es la sustancia ms adecuada para que los listones de tejidos se
estiren en el bao de flotacin, mediante la bsqueda de conocimientos.
Conocer el equipo de bao de flotacin, sus caractersticas y a que temperatura
trabaja el mismo mediante la investigacin bibliogrfica o en la web para
informarnos sobre ello.
Identificar cules son los posibles problemas que pueden presentarse al
momento del uso de bao de flotacin mediante la investigacin de los mismos
en medios de consulta, para informarnos y de esta forma evitar futuros errores.

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MARCO TERICO
BAO DE FLOTACION
Estn constituidos por un tanque fabricado en material inoxidable, el cual tiene montado
en la parte inferior del mismo un conjunto de resistencias elctricas mediante los cuales
transfieren calor a un medio como agua o aceite, que se mantiene a una temperatura
preseleccionando a travs de un dispositivo de control.
Se pone en agua a 47C aproximadamente, se pone en un portaobjetos y se aade
alcohol, gelatina sin sabor, goma para extender y deslizar el tejido, ya deslizado este se
levanta y se coloca sobre una laminilla, entonces se pasa a la desparafinacion sobre una
platina o estufa a ms de 60C-70C para pasar luego a la tincin. (1)
Los cortes se extienden al depositarlos sobre la superficie del lquido ex tendedor
contenido en un recipiente Esto impide que se formen facetas desiguales en el filo de la
denominado bao de flotacin (ste mantiene la navaja producindose, con ello, un
afilado deficiente. temperatura entre 40o a 45o C). Las secciones se depositan en el
lquido procurando que la superficie brillante (aquella correspondiente al filo de la
navaja) se ponga en contacto con el lquido caliente. En caso que ciertas arrugas
persistan, se emplean unas pinzas finas o un pincel de pelo de camello, para ejercer
una ligera traccin entre los extremos de los cortes y as desarrugarlos totalmente.
Las secciones se extienden aisladas o formando cintas, estas se recogen y adhieren al
portaobjetos de la misma forma: en el caso que se requiere recoger los cortes aislados,
extendido previamente como una cinta, deben separarse utilizando las mismas pinzas
finas o agujas de diseccin. (2)
Para garantizar una mejor adhesin de los cortes a los porta objetos se recomienda
incorporar sustancias adherentes al lquido ex tendedor en ciertos casos al portaobjetos.
Estas sustancias suelen emplearse de los manetas:
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a) Extensin previa de la sustancia adherente a una de las superficies de la lmina


portaobjetos, por ejemplo, la albmina de Mayer, constituida por partes iguales de
glicerina y clara de huevo, a la mezcla se le aaden algunos cristales de timol
como ingrediente conservante. La mezcla se filtra y se guarda en refrigeracin. Se
le utiliza extendiendo una gota de la mezcla en el portaobjetos y se deja secar. Los
cortes se recogen cuidadosamente sumergiendo, por debajo de ellos, el
portaobjetos en forma oblicua.
Otra sustancia adherente que se emplea de la misma manera es la poli- L-lysina
(solucin de 25 miligramos de la sustancia en 25 ml de agua destilada). Una gota de
la solucin se extiende en el portaobjetos y stos se secan a 50 o - 55o C. durante
toda la noche y est lista para su uso
b) Al lquido de flotacin se le aaden sustancias. Uno de los procedimientos ms
sencillos es coloracin el que consiste en disolver, en el agua ya caliente del
bao de flotacin (dos litros) 0.5 g de gelatina.
En otros casos se emplea una solucin que posee los ingredientes siguientes:
- agua destilada --------------------------------- 1,000 ml
- bicromato de potasio--------------------------0.2 gramos
- gelatina -----------------------------------------0.2 gramos
El agua destilada se calienta a 60 o C para disolver en la gelatina y el bicromato de
potasio, sucesivamente. Se filtra y est lista para su uso. Este lquido previamente
filtrado se puede utilizar varias veces. (se recomienda guardarlo en el refrigerador). (2)

PARTES DEL BAO DE FLOTACION

Regulador
Termometro
Perilla de ajuste
Canastilla

CARACTERSTICAS
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Bao de flotacin para cortes de parafina


Parte interior fabricado en aluminio anodizado de color

negro para una ptima visualizacin de los cortes


Parte exterior recubierto de expoxi
Regulacin de temperatura desde ambiente hasta 90C
Presin +- 105C
Capacidad: 1.7 litros (3)

TIPOS DE BAOS DE FLOTACIN


BAO DE FLOTACION MODELO 2000

Regulacion de temperatura desde ambiente hasta 70C


Reborde superior calefactado para secado de preparaciones
Dimensione exteriores: 500x450x80mm
Peso: 4kg

BAO DE FLOTACION PARA CORTES DE TEJIDO

Bao de flotacin para cortes de parafina


Parte interior fabricado en aluminio anodizado de color negro
Control para microprocesador
Display para lectura digital de la temperatura
Memoria de temperatura
Regulacin de temperatura desde ambiente hasta 90C
Precisin:+- 1C (3)

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PROCESO DE PESCA
DESARROLLO DEL PROCESO
Este

proceso

consiste en

que

el corte de tejido se

transporta hacia el bao de flotacin con agua,


el cual se encuentra a una temperatura de entre
45 y 50C donde, gracias a las fuerzas de
tensin superficial que se generan en la
lmina de parafina y tejido al hacerla flotar
sobre el lquido, se eliminan posibles
pliegues.
El procedimiento para recuperar los mejores cortes del bao se denomina
coloquialmente pesca y consiste en introducir un portaobjetos en el bao hasta tocarla
seccin en uno de los lados del corte. Cuando empieza la adherencia de la seccin sobre
el cristal se extrae poco a poco el portaobjetos del bao, dejando drenar el agua por
gravedad. Si la orientacin o la disposicin del corte no es la adecuada, ste se puede
volver a reflotar y orientar. Al terminar el montaje de las preparaciones vaciamos el
bao y eliminamos cualquier vestigio de contaminacin con papel de filtro. (4)
Una vez

montados los cortes sobre el porta, y


antes de la tincin, las preparaciones
deben ser secadas meticulosamente
para evitar su desprendimiento. Estos

hace metiendo la preparacin en la

estufa a

60C durante 10/20 minutos, o a 37C

durante 24 horas. Una temperatura elevada (valores prximos a 100C, como suelen
hacer algunos tcnicos de mayor edad) puede deteriorar de forma irreversible la
mayor parte de los componentes bioqumicos y antgenos tisulares.

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RECOMENDACIONES PARA EL PROCESO DE SUMERGUIR LAS


LMINAS EN EL BAO DE FLOTACIN.

Al momento de colocar las lminas de parafina sobre la superficie del agua,

debemos realizar un movimiento de barrido suave.


Si se desea quitar las burbujas que posiblemente se pueden encontrar bajo las
lminas, debemos realizar ligeros movimientos de izquierda a derecha, para no

daar la morfologa de las lminas.


Examine cada seccin mientras flota en la superficie del agua, ya que las

imperfecciones se pueden ver fcilmente.


Deje la muestra seccionada en la superficie del agua el tiempo suficiente para
que se alise. Una expansin excesiva puede estropear la morfologa en secciones

sensibles.
Para propiciar un drenaje eficiente y para prevenir que la seccin se caiga del

portaobjetos, extraiga los portaobjetos del agua en posicin vertical.


Eliminar los restos de laminillas que se encuentran en el interior del bao de

flotacin, mediante el uso de los extremos del papel observante.


Para evitar cualquier posibilidad de mezcla, haga flotar las secciones de un
bloque simultneamente.
No debemos colocar lminas de diferentes bloques de parafina, ya que
cualquiera de las dos se puede contaminar de forma directa o indirecta.
PORTAOBJETOS Y LA PESCA
En el proceso de la pesca, los portaobjetos cumplen un papel
fundamental, ya que estos son los que sujetan las distintas lminas
de tejido, para su posterior proceso de desparafinizacin.
RECOMENDACIONES PARA UN CORRECTO PROCESO DE PESCA DE LAS
LMINAS
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Drene el agua

excedente de debajo

de la seccin antes de secarla. Esto es vital si los portaobjetos estn secos y

planos sobre una placa caliente.


El portaobjetos se debe introducir en el agua de manera horizontal, ya que esto
permite realizar movimiento para localizar y centrar las lminas en el

portaobjetos.
Los portaobjetos pueden ser almacenados en estantes en posicin vertical y

despus secados en un horno.


Siempre debemos sostener el portaobjetos desde la zona biselada.
No sacar bruscamente el portaobjetos del bao de flotacin, lo que podra
ocasionar el desprendimiento de las lminas.

PROBLEMAS QUE PUEDEN SURGUIR DURANTE LA PESCA DE


LAS LAMINILLAS
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PROBLEMAS

LOS CORTES NO SE
DESPLIEGAN

CAUSAS

Agua del bao de flotacin


se encuentra muy caliente,
lo que hace que la parafina
se funda antes de que hayan
desaparecido los pliegues de
las lminas.
Temperatura mayor a 45C.

SOLUCIONES

Vigilar la temperatura del


agua en el bao de flotacin

Agua del bao de flotacin


se encuentra
demasiado
fra, lo que causa que no se
ablande la parafina.

PRESENCIA DE
BURBUJAS BAJO LAS
LAMINAS DE
PARAFINA

LOS CORTES NO SE
ADHIEREN
AL PORTAOBJETOS O
SE
DESPEGAN MUY
RPIDAMENTE

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Aire procedente del agua,


durante su calentamiento,
retenido debajo de los
cortes durante el secado

Porta objetos contaminados


o sucios.

El corte ha sido mal


Colocado.

Mover
levemente
las
laminillas, con una aguja de
diseccin, permitiendo que
las burbujas emigren o se
desaparezcan.
Aplicar alcohol a 70 sobre
el portaobjetos, lo que
conseguimos que este corte
ya
est
prcticamente
estirado al meterlo en el
bao.

Emplear portaobjetos
limpios y nuevos.

Con las pinzas de diseccin


acomodar la lmina, y si se
ha
perdido
totalmente
obtener
ms
lminas
mediante microtoma. (5)

BAO DE FLOTACIN - PROCESO DE


PESCA

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CONCLUSIONES
En conclusin el bao de flotacin es importante debido a que este ayuda a que
el corte del tejido se pueda estirar completamente para posteriormente pescarlo
y de esta forma el tejido se mantenga intacto.
En conclusin se pudo determinar que el agua es una de las sustancias ms
adecuadas para usar en el bao de flotacin debido a que en esta podemos ver
las impurezas con mayor facilidad, adems de su limpieza se hace de manera
ptima.
Como conclusin el equipo de bao de flotacin es un equipo de forma circular
o rectangular dependiendo del modelo, el cual consta de una cubeta, de los
controles, botn de encendido y apagado
En conclusin uno de los principales problemas del bao de flotacin es que los
tejidos si los ubicamos al borde de la cubeta estos por accin del calor se pueden
quedar pegados al mismo daando el tefln del mismo.
RECOMENDACIONES

Se recomienda pescar el tejido introduciendo totalmente el portaobjetos.


Se recomienda usar agua para el bao de flotacin
Se recomienda tener a lado del micrtomo el bao de flotacin

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BIBLIOGRAFA
1.

Jos

de

Jess

Abad

Moreno

colaboradores.

LA

PRCTICA

HISTOLGICA.Segunda edicin. 155 pp. Ed. Mc Graw Hill, Mxico, 200.

SITIOS WEB
1. Jos de Jess Abad Moreno y colaboradores. LA PRCTICA
HISTOLGICA.Segunda edicin. 155 pp. Ed. Mc Graw Hill, Mxico,
200.
2. http://es.slideshare.net/luisepacheco/3-tecnica-histologica.
3. http://www.labolan.es/upload/familias/pdfs/es/pdf_19_es.pdf.
4. Rolls, Geoffrey. Microtoma y preparacin de la seccin en parafina.
http://www.leicabiosystems.com/fileadmin/img_uploads/histology_systems/2
010/Microtomy_booklet_spanish_online.pdf. [Online] LEICA-Microsystems, 03
2010. [Cited: 01 28, 2016.]
5. Antonio, Escobar Jos. El micrtomo.
https://es.scribd.com/doc/53678729/Tema-5-El-Microtomo. [Online] Scribd,
04 2011. [Cited: 01 28, 2016.]

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