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2- But :
Lisolement de micro-organismes partir du sol.
3- Principe :
Lisolement consiste raliser a partir dun chantillon des suspensions dilution.
Ces dernires sont ensemences sur milieu de culture solide. Au terme de
lincubation, les germes contenus dans le sol seront dvelopps. Chaque germe
sera lorigine dune colonie, le comptage des colonies permet par mthode de
calcul simple destimer la quantit de germes contenue dans le sol tudi.
4- Mode opratoire :
Prcautions gnrales de travail :
-
a- Dilution :
Le sol est trs riche en micro-organismes cest pour a on faire cette dilution
pour facilit le comptage de ces micro-organismes, lorsque la dilution augmente
le pourcentage de colonies diminu.
- 10g de sol tamis est pes et mlang 90ml deau distill la dilution 10
1
est ainsi ralise.
- 1ml de cette dilution est prlev et mlang 9ml deau distill strile, la
dilution 10 2 est ainsi ralise jusqu' la dilution 10 8 .
b- Ensemencement :
- Lensemencement a 0.1ml de chaque dilution de10 1 ,10 4 et 10 8 est
prlev a laide dune pipette et dpose dans une boite de ptri. Le milieu de
culture maintenu en surfusion a ltat liquide a 70c est refroidie et coul dans la
boite de ptri. Aprs solidification du milieu les boites sont retourns et mises a
incuber a 27c pendant une semaine.
5- Calculs et rsultats :
1- la concentration du sol en germes :
Le comptage :
Nome internationale : 300 > nombre de colonie >30
Dilution
Echantillon 1 Echantillon 2
1
10
164 colonies >300 limin
2
10
<30 limin
>300 limin
3
10
<30 limin
>300 limin
4
10
<30 limin
>300 limin
5
10
<30 limin
>300 limin
6
10
<30 limin
>300 limin
7
10
<30 limin
>300 limin
8
10
<30 limin
262 colonies
Calcul de la concentration :
Echantillon 1 :
0.1ml
164 colonies
10ml
X1 colonies
X1 =
10 164
0.1
10 262
0.1
26200 colonies
Y colonies
Y=
10 1 26200
10 8
10 8
10 1
= 262 10 9 colonies
2 La description macromorphologique :
Critres
Colonie
La couleur
N : 01
N : 02
N : 03
N : 04
La forme
Laspect
La taille
Llvation
lisse
A centre
plisse
A bord
plisse
plisse
0.65cm
0.9cm
0.7cm
1cm
0.7cm
0.2cm
0.5cm
convexe
Plate
Cartes
forme
Crates
forme
6- Interprtation :
Lorsquon observer les boites de ptri aprs une semaine on a trouve que :
Les deux chantillons sont riches en micro-organismes.
Les diffrents dilutions divers au nombre des colonies (germes).
Les bactries se dveloppent plus que les champignons.
Le sol nu contient des micro-organismes beaucoup plus que le sol
cultiv.
7- Conclusion :
Malgr les deux chantillons ayant une activit biologique mais le sol nu est le
plus riche en micro-organismes que le sol cultiv c'est--dire quil y a une
fertilit du sol au sol nu par contre le sol cultiv est moins fertile cest quon doit
conclue quil y a une utilisation des engrais qui influes au vie du microorganismes et au biologie du sol .