Grou

p
2

Review Jurnal

STANDARISASI DAN STUDI FITOKIMIA

Curcuma xanthorrhiza Roxb.
MOHDROHAIMIABHALIM,
MARINASHAHMUHAMMADZABRITAN,
SABARIAHISMAIL,danROZIAHANIMMAHMUD

ABSTRAK

Penelitian
terbaru
dilaporkan
analisis
fitokimia
yang
komprehensif
dari
potensial
tanaman
obat,
Curcuma
xanthorrhiza
Roxb.Standarisasi,
penentuan
kualitatif
dan
kuantitatif dari senyawa kimia, dan kromatografi
lapis tipis (KLT) profil metabolit sekunder dari
rimpang C. xanthorrhiza dilakukan.Selanjutnya,
GC-MS karakterisasi senyawa yang terkandung
dalam C. xanthorrhiza juga diamati.Data yang
dihasilkan memberikan dasar untuk penggunaan
yang luas sebagai therapeutant (terapi) dan
informasi
awal terhadap
pengembangan
produk
Kata kunci: Curcuma
xanthorrhiza,
Metabolit sekunder,
Standarisasi,
Analisis
Fitokimia,
Xanthorrhizol.
yang
memiliki
potensi
pada
tanaman ini.

PENDAHULUAN

Tanaman memiliki kemampuan

yang hampir tak terbatas untuk
mensintesis metabolit sekunder
yang beragam yang
memilikibermacam-macam fungsi
biologis yang berguna untuk
manusia.

Merupakan tanaman obat

yang penting dan
berpotensial, termasuk dalam
family Zingiberaceae dan
berbagai genus yang sama
seperti Curcuma longa Linn.,
umumnya dikenal sebagai
kunyit.Di Malaysia dan
Indonesia tanaman ini secara
tradisional dikenal sebagai
'temu lawak' atau 'koneng
gede'.

Curcuma xanthorrhiza Roxb.

Penggunaan secara empiris

dalam:

Industri
Makanan

2
Industri
Farmasi

Xanthorrhizol
SENYAWA MARKER

Aktivitas Biologis
Xanthorrhizol

Anti Candida

Anti bakteri

Anti metastatic

Penelitian ini bertujuan untuk menguji

secara sistematik fitokimia ekstrak
rimpang
C. xanthorrhiza baik dengan pelarut
organik (etanol) dan pelarut air sebagai
pendekatan awal untuk standarisasi,
karakterisasi, penentuan kualitatif dan
kuantitatif dari senyawa kimia, dan KLT
profil metabolit sekunder dari rimpang
C. xanthorrhiza.

BAHAN
&
METODE

 Bahan Tanaman

Rimpang C. xanthorrhiza segar

 Pelarut Kimia
Semua
pelarut
yang
digunakan
adalah
dari
kelas
analitis.Heksana, kloroform, kloroform yang dideuterasi, etanol
95%, diklorometana, asam asetat glasial, n-butanol, dietil eter,
amonium hidroksida dan asam sulfat berasal dari QreC Kimia
(Malaysia).Bismuth
nitrat,
polietilen
glikol-400,
diphenylboryionylamine, vanilin, katekin, kalium iodida dan besi (III)
klorida yang dibeli dari Sigma Chemical Company (St Louis, MO,
USA) sedangkan Folin & Ciocateu reagen, natrium hidroksida,
aluminium klorida, natrium nitrit, natrium karbonat, asam galat,
dan natrium klorida yang dibeli dari R&M Kimia (Kanada).Air yang
dimurnikan oleh Option Purelab-S System (Elga, UK).Lembaran
aluminium untuk analisis KLT, silika gel 60 F254, silika gel
7734(0,063-0,200mm) dan silika gel 9385(0,040-0,063mm) yang
berasal dari Merck (Darmstadt, Jerman).

Penyiapan Ekstrak
Ekstrak Etanol
Dilakukan dengan perendaman terus menerus dari
serbuk tanaman (50 g) dalam gelas 1 L ditutup dengan
aluminium foil dengan etanol sebagai pelarut
ekstraksi.Pelarut didiamkan selama tiga hari dan
prosedur ini diulang dua kali (total = 3 x 72 jam, 2.1
L).Ekstrak yang diperoleh disaring dengan kertas saring
Whatman (no 1) dan dipekatkan menggunakan rotary
evaporator (Buchi Rotavapor R215, Swiss) sampai
terbentuk ekstrak etanol yang kental.Ekstrak disimpan
pada suhu 4C sampai analisis selanjutnya.

Penyiapan Ekstrak
Ekstrak Air

Serbuk tanaman (50 g) diekstraksi dengan 800 ml

air
murni
yang
hangat
(60C)
selama
30
menit.Ekstrak
disaring
dengan
kertas
saring
Whatman (no 1) dan residu diekstraksi ulang pada
kondisi yang sama dua kali.Filtrat digabungkan dan di
freezedried (LABCONCO 7.753.037, Zona Bebas 6
Liter, USA) menjadi bubuk yang dihasilkan yang
kemudian disimpan pada suhu 4C.

Senyawa Referensi
Ar-curcumine dan xanthorrhizol diisolasi dari ekstrak heksana
dari C. xanthorrhiza di Pusat Penelitian Obat, Universiti Sains
Malaysia.Secara singkat, serbuk rimpang (100 g) diekstraksi
dengan n-heksana (2 L) dengan ekstraksi Soxhlet selama 24
jam.Penghilangan pelarut dengan rotary evaporator pada tekanan
tereduksi menghasilkan ekstrak heksana mentah (9,8 g).Kemudian
dipisahkan secara kromatografi dengan menerapkan ekstrak (4.0 g)
untuk kromatografi kolom gravitasi (GCC) menggunakan silika gel
7734 untuk pemisahan dan silika gel 9385 untuk pemurnian.Elusi
dengan pelarut petroleum eter-kloroform (9: 1, v/v) menghasilkan
minyak berwarna dikenal sebagai ar-curcumine (0,32 g). Selain itu,
xanthorrhizol (0,35 g) yang dikumpulkan adalah minyak kekuningan
dari
6:
4,
v/v
dielusi
dengan
pelarut
petroleum
eterkloroform.Senyawa diidentifikasi oleh perbandingan langsung dari
ionisasi elektron (EI) hasil spektral massa, 1H dan 13C resonansi

Analisis Kromatografi Gas & Spektrometri Massa

(GC-MS)
Analisis dilakukan pada GC Agilent-MS terdiri dari HP 6890
kromatografi gas N ditambah dengan HP 5973I detektor selektif
massa.Pemisahan yang dilakukan dengan HP- kolom 5ms (30 m panjang,
0,25 mm id, ketebalan 0,25 mm, 350C suhu selama 60 menit).
Suhu masuk diatur pada 280C dan detektor pada 250C. GC dilakukan
pada mode yang tidak terpisah. Suhu oven dimulai pada 70C selama 2
menit, kemudian meningkat menjadi 280C pada suhu 20C/menit dan
disimpan pada 280C selama 2 menit. Gas pembawa berupa helium
dengan laju alir 1,0 ml /menit dengan 1 ml sampel yang diinjeksikan.
Spektrometer massa dioperasikan dalam pengaruh ion elektron positif
(EI) dengan tipe energi ionisasi 70 eV. Identifikasi senyawa dilakukan
dalam mode full scan dalam kisaran scan 35-550 m/z. Kuantifikasi
dilakukan dengan pemantauan single-ion (SIM) menggunakan mode 119
m/z untuk ar-curcumine dan 132 m/z untuk xanthorrhizol dalam tiga kali
pengulangan. Senyawa diidentifikasi menggunakan pustaka Nasional
Standar Institut Teknologi (NIST) bersama-sama dengan perbandingan

Skrining Pendahuluan Fitokimia

Ekstrak terstandarisasi yang digunakan untuk
semua skrining pendahuluan fitokimia. Setiap
ekstrak
diencerkan
dengan
etanol
dan
dipisahkan pada plat kromatografi lapis tipis
(KLT) menggunakan campuran pelarut kloroform
dan diklorometana (4,5: 0,5). Plat KLT yang
dikembangkan kemudian diuji menggunakan
berbagai reagen semprot. Warna spot keduanya
terlihat di bawah sinar ultraviolet (UV 254 nm
dan UV 365 nm) dan cahaya tampak.

Penentuan Kandungan Total Fenolik (TPC) &

Jumlah Kandungan Flavonoid (TFC)

Metode Folin-Ciocalteu dengan sedikit modifikasi

digunakan
dalam
penentuan
TPC
dan
nilai-nilai
dinyatakan sebagai nilai mean ( SD) miligram per gram
setara dengan asam galat (mg GAE/g sampel). Sementara
itu, TFC dalam sampel ditentukan berdasarkan metode
kolorimetri yang uraikan sebelumnya dan nilai TFC
dinyatakan sebagai nilai mean ( SD) miligram per gram
catechin setara dengan (mg CE/g sampel). Absorbansi
diukur menggunakan spektrofotometer-UV (Shimadzu
UV-1800, Kyoto, Jepang) untuk penentuan kedua TPC dan
TFC. Semua Penentuan dilakukan dalam tiga ulangan.

Penentuan Jumlah Kandungan Saponin (TSC) &

Kandungan Total Alkaloid (TAC)

TSC dalam sampel diperoleh dengan metode

yang
ditunjuk
sebelumnya
dari
rimpang
C.xanthorrhiza.
Sampel
yang
diperoleh
dikeringkan dalam oven untuk berat konstan.
Demikian pula, TAC dilakukan berdasarkan
metode berikut dengan ekstraksi dari rimpang.
Sampel disimpan dalam oven sampai berat
konstan. Berat untuk TSC dan TAC dinyatakan
sebagai sampel mg/g tanaman.

HASIL

Gambar 1 : Tipikal kromatogram dari analisis GC-MS C.

xanthorrhiza (a) ekstrak etanol, (b) ekstrak air

Tabel 1. Kandungan kimia utama C. xanthorrhiza oleh GCMS

No.

Retensi watu
(min.)

Massa m/z

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9

6.03
7.93
8.16
8.23
8.46
8.58
8.63
9.23
10.04

152
204
204
204
202
216
204
218
218

Konstituen
Kamper
Zingiberene
elemen
Trans farnesene
Ar- curcumin
Benzofuran
- cedrene
- elemenone
Xanthorrizol

Gambar 2. spektrum massa dan

struktur kimia ( a) xanthorrhizol dan
(b ) ar-curcumine

Tabel 2 . Hasil Ekstraksi, kadar ar-kurkumin, kadar

xanthorrhizol, nilai TPC dan TFC ekstrak C.xanthorrhiza
CXEE; CXAE, Ekstrak etanol C. xanthorrhiza; Ekstrak air
C.xanthorrhiza; Cc, Kadar ar-kurkumin ; Xc, kadar
xanthorrhizol
Sampel

Hasil
Ekstrasi
(g)

Cc
(g/ml)

Xc
(g/ml)

Kadar TP
mg GAE/g

Kadar TF
Mg CE/g

CXEE

5.9

136.02
5.11

228.86
16.10

199.00
1.31

101.66
0.83

CXAE

4.5

21.08
0.10

34.09
0.93

19.99
0.16

10.58
0.83

Tabel 3. Skrining metabolit sekunder Curcuma

xanthorrhiza
Uji

Hasil positif

Ekstrak etanol

Ekstrak air

Terpenoid

Warna biru kuat, hijau,

merah dan coklat

+++

Fenol

Warna biru

+++

Flavonoid

jingga, jingga-kuning,
kuning-hijau dan warna biru
ungu

++

Saponin

Biru, violet dan hijau (UV365 nm)

++

Cardiac glycoside

Biru, coklat, hijau dan zona

fluoresen (UV- 365 nm)

++

Alkaloid

Coklat, jingga coklat

Kumarin

Kuning - hijau

Antraquinon

Merah, Fluoresen merah

(UV-365 nm)

Anthrone

Kuning terang (UV- 365 nm)

Tannin

Zona berwarna gelap

KESIMPULAN

Singkatnya, standarisasi, penentuan

kualitatif dan kuantitatif dari fitokimia dan
profil TLC berhasil dicapai. Selanjutnya,
hasilnya
mungkin
berguna
dalam
mengembangkan
potensi
produk
fitofarmasetikal pada C. xanthorrhiza.
Namun, dibutuhkan pengidentifikasian
lanjut khususnya flavonoid, saponin dan
senyawa alkaloid yang ada dalam ekstrak.