Penghitungan Bakteri dengan Standard McFarland

Mc Farland adalah peyetaraan konsentrasi mikroba dengan menggunakan larutan BaCl2

1% dan H2SO4 1%. Standar kekeruhan Mc Farland ini dimaksudkan untuk menggantikan
perhitungan bakteri satu per satu dan untuk memperkirakan kepadatan sel yang akan digunakan
pada prosedur pengujian antimikroba (Haris dkk, 2013). Sebelum menggunakan larutan standar
mcFarland terlebih dahulu harus dikocok dengan baik. Setelah homogen tabung harus tertutup
rapat untuk mencegah terjadinya penguapan. Sebelum digunakan, kocok terlebih dahulu untuk
memastikan bahwa barium sulfat (BaCl2) tercampur di seluruh larutan. Standar yang paling
umum digunakan di laboratorium mikrobiologi klinik adalah Standard McFarland 0.5, yang
digunakan untuk pengujian kerentanan antimikroba dan pengujian kinerja media kultur (Anonim,
2014)
Keuntungan dari penggunaan standar Mc Farland adalah tidak dibutuhkannya waktu
inkubasi yang cukup untuk memperoleh jumlah kepadatan bakteri yang diinginkan. Sedangakan
kerugiannya, akan terjadi perbedaan pandangan untuk menilai tingkat kekeruhan dari sel bakteri.
(Sutton 2011).

Gambar . Standar Kekeruhan menurut McFarland (Anonim, 2014)

PEMBUATAN LARUTAN STANDAR MCFARLAND 108 cfu/ml

0,36 N H2SO4, diambil
sebanyak 99,5 ml

0,048 M BaCL2 , diambil

sebanyak 0,5 ml

Dihomogenkan kedua
larutan dengan vortex

Simpan tabung pada suhu

ruangan, jika akan
digunakan kocok kembali
tabung
Prosedur Kerja
Diadopsi dari Hanif (2009) :
1. Biakan bakteri murni yang telah diinkubasi selama 24 jam dibuat suspense ke dalam
2,5 ml Nacl fisiologis sampai kekeruhan mencapai McFarland 0,5
2. Swap kapas dicelupkan ke dalam suspense bakteri lalu diperas dengan cara menekan
dan memutar swab kapas pada dinding tabung diluar cairan sebanyak 2 kali, lalu
diusapkan pada lempeng agar secara merata keseluruh permukaan agar
3. Biakann bakteri pada lempeng agar bakteri dapat berdifusi selama 15 menit
4. Kemudian letakan plat pada lempeng agar menggunakan pinset (dapat diletakan
sebanyak 6 plat).
5. Selanjutnya lempepng agar tersebut diinkubasi pada suhu 35oc selama 24 jam
6. Keesokan harinya dilihat ada tidaknya zona hambatan yang terbentuk.