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Unochapec

Prof. Murilo Cesar


Costelli

[EXERCCIOS
ENGENHARIA
BIOQUMICA]

Universidade Comunitria Da Regio


De Chapec
rea De Cincias Exatas e Ambientais
Engenharia Qumica Engenharia de
Alimentos
Disciplina: Engenharia Bioqumica
Professor: Murilo Cesar Costelli

Sumrio
- Gerais........................................................................................................... 2
- Processos Batelada...................................................................................... 4
- Processos Batelada Alimentada.................................................................12
- Processos Contnuos.................................................................................. 17
- Transferncia de Oxignio..........................................................................22
- Processos Enzimticos............................................................................... 25

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Engenharia Qumica Engenharia de
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Disciplina: Engenharia Bioqumica
Professor: Murilo Cesar Costelli

Exerccios Engenharia Bioqumica


- Gerais
01) Quais os elementos qumicos de que composta uma clula?
02) Qual a diferena entre fermentao e respirao?
03) Cite exemplos prticos de aplicao industrial de leveduras, bactrias e
mofos.
04) Quais os principais substratos utilizados na indstria para processos
fermentativos?
05) Como se calcula a produtividade em clulas para um fermentador
batelada e para um fermentador contnuo?
06) Faa um grfico identificando as fases de crescimento de um
microrganismo.
07) Como voc realizaria experimentos que lhe permitam determinar os
parmetros cinticos de Monod e o fator de converso de substrato em
clulas? Explique.
08) Tente descrever como o crescimento populacional e o ambiente no
qual se desenvolve uma cultura celular. Quais fenmenos ocorrem,
dificuldades de modelagem cintica, etc.
09) possvel formular um modelo com todos os fenmenos envolvido,
explique?
10) O que um modelo no estruturado ? e estruturado? Qual mais
idealizado e por qu?

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11) O que um nutriente limitante? Quando um nutriente passa a no ser
limitante?
12) Qual forma de velocidade especfica de crescimento dependente da
concentrao celular? Explique.
13) Proponha uma velocidade especfica de crescimento, funo
exponencial, que seja inibida pela concentrao de produto?
14) Que fatores influem na velocidade de crescimento?
15) Durante um processo de fermentao, ocorre considervel consumo de
substrato. Analisando a equao de Monod, nota-se que deveria haver uma
aparente diminuio na velocidade especfica de crescimento, o que no se
observa na prtica, por qu?
16) Comente sobre a cintica de formao de produtos.
17) Comente sobre modelagem de biorreatores: Processos fermentativos
descontnuo, descontnuo alimentado, semicontnuo, contnuos.
18) Apresente exemplos de produtos: a) associados ao crescimento; b)
parcialmente associados ao crescimento; e c) no associados ao
crescimento.
19) Explique como se determina a composio de um meio de cultivo.

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- Processos Batelada
01) Candida utilis cresce em glicerol com velocidade especfica de
crescimento mxima de 0,095h-1. Qual o tempo necessrio para esse microorganismo duplicar sua massa na fase exponencial de crescimento de um
processo batelada?

02) Em uma fermentao batelada a volume constante foram obtidos os


seguintes dados experimentais:
t (h)
X
(g/L)

0
1,0

1
1,1

2
1,6

3
2,5

4
3,8

5
5,9

6
7,0

7
7,9

8
8,5

9
8,5

10
9,3

11
9,6

12
9,3

13
9,5

Pede-se:
a) Identificar as diversas fases de crescimento do micro-organismo.
b) O tempo que o micro-organismo leva para duplicar a sua massa na fase
exponencial de crescimento.
c) A produtividade mxima em clulas que pode ser obtida desse processo.

03) Um ensaio em batelada para a produo de etanol e clulas floculantes


de Zymommonas mobilis foi realizado produzindo os seguintes resultados
(T=30C, pH = 5,5 e rpm = 700 min-1):
tempo
(h)
0
1,5
3,0
4,5
6,0
7,5
9,0
10,5
12,0
13,5
15,0
16,5
18,0

S (g/L)

P (g/L)

X (g/L)

155,5
151,1
150,0
144,3
137,2
120,3
113,6
105,4
89,4
80,0
65,8
44,5
25,6

0
0,52
2,00
2,71
1,93
6,57
10,35
14,81
20,90
27,28
33,91
44,05
52,66

0,015
0,015
0,017
0,025
0,034
0,050
0,058
0,080
0,106
0,200
0,238
0,382
0,600

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19,5
21,0

5,3
0,1

60,87
64,26

a) Os resultados obtidos foram bons?

0,667
0,777

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04) Uma cepa de Escherichia coli est sendo utilizada para produzir
hormnio de crescimento recombinante. A bactria cresce aerobiamente em
uma cultura em batelada com glicose como substrato limitante. As
concentraes de clulas e substrato, medidas em funo do tempo de
cultivo, esto na tabela abaixo.
tempo
(h)
0,00
0,33
0,50
0,75
1,0
1,5
2,0
2,5
2,8
3,0
3,1
3,2
3,5
3,7

X (kg/m3)

S (kg/m3)

0,20
0,21
0,22
0,32
0,47
1,00
2,10
4,42
6,90
9,40
10,90
11,60
11,70
11,60

25,0
24,8
24,8
24,6
24,3
23,3
20,7
15,7
10,2
5,2
1,7
0,2
0,0
0,0

a) Faa os grficos de X, S e x contra o tempo.


b) Qual o valor de mx e KS?
c) Qual a converso de substrato em biomassa observada?
d) Avalie os resultados obtidos.

05) Clulas de razes de plantas so produzidas atravs da transformao


gentica de plantas utilizando Agrobacterium rhizogenes. As concentraes
de biomassa e acar abaixo foram obtidas atravs de uma cultura em
batelada de razes de Atropa belladonna em um fermentador de coluna de
bolhas.
tempo
(d)
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55

X (g/L)

S (g/L)

0,64
1,95
4,21
5,54
6,98
9,50
10,30
12,00
12,70
13,10
13,50
13,70

30,0
27,4
23,6
21,0
18,4
14,8
13,3
9,7
8,0
6,8
5,7
5,1

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a) Faa os grficos de X, S, Y X/S e X contra o tempo. Quando ocorre a maior


velocidade especfica de crescimento?
b) Faa o grfico da velocidade especfica de consumo de substrato contra o
tempo.
c) Avalie os resultados obtidos.

06) Etanol produzido pela fermentao anaerbica de glicose por


Saccharomyces cerevisiae. Para uma certa linhagem de S. cerevisiae
empregada, o coeficiente de manuteno 0,18 kg.kg -1.h-1, YX/S 0,11 kg.kg1

, YP/X 3,9 kg.kg-1 e mx 0,4 h-1. Decidiu-se pesquisar a possibilidade de

se utilizar a bactria Zymomonas mobilis ao invs da levedura para produzir


etanol. Sabe-se que a Z. mobilis produz etanol sob condies anaerbias
utilizando uma rota metablica diferente da utilizada pela levedura. Os
valores tpicos de YX/S so 0,06 kg.kg-1 menores e o coeficiente de
manuteno 2,2 kg.kg-1 maior para a bactria quando comparada com a
levedura. O valor de YP/X para a Z. mobilis 7,7 kg.kg-1 e mx 0,3 h-1.
a) Qual a mxima converso estequiomtrica terica de glicose (C 6H12O6) para
etanol (C2H5OH)? Dica: a glicose convertida anaerobiamente a etanol e gs
carbnico (CO2).
b) YP/S mximo e igual ao rendimento terico quando no h crescimento e
todo o substrato que entra na clula utilizado na manuteno celular. Se o
etanol for o nico produto extracelular do metabolismo energtico, calcular o
P para cada micro-organismo.
c) S. cerevisiae e Z. mobilis so cultivadas em um cultivo batelada. Faa uma
previso dos rendimentos de produto (converso) a partir do substrato para as
duas culturas.
d) Qual a eficincia da produo de etanol pelos dois micro-organismos? A
eficincia definida como a converso observada dividida pela converso
estequiomtrica mxima calculada.
e) Qual a velocidade especfica de produo de etanol (kg EtOH/kg cel.s) dos
dois micro-organismos?
f) Compare as propores de produo de etanol associada e no-associada
ao crescimento para as S. cerevisiae e Z. mobilis. Para qual micro-organismo a
produo no-associada ao crescimento maior?
g) Para atingir a mesma taxa volumtrica de produo de etanol, qual a
relao entre a concentrao leveduras e a concentrao de bactrias?

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h) Com crescimento zero, a produtividade de etanol (kg.h -1) das duas culturas
a mesma. Sob estas condies, se utilizada a mesma concentrao de
bactrias e leveduras, qual a ralao entre o tamanho dos fermentadores
necessria para atingir esta mesma produtividade?
i) Faa uma previso da converso de biomassa partir do substrato
observada no meio de cultivo para os dois organismos. Para qual organismo a
disposio final da biomassa ser um problema maior?
j) Faa uma recomendao sobre qual micro-organismo mais adequado para
a produo industrial de etanol, e d suas razes.

07) Zymomonas mobilis utilizada para converter glicose a etanol em um


fermentador batelada sob condies anaerbias. Os valores de Y X/S e YP/X so
0,06 e 7,7 g.g-1 respectivamente. O coeficiente de manuteno 2,2 g.g -1.h, e o P 1,1 h-1. A velocidade especfica mxima de crescimento da Z.

mobilis 0,3 h-1. O inculo consistiu de 5 g de bactrias em 50 litros de


meio de cultivo contendo 12 g.L-1 de glicose. Determine o tempo de cultivo
para:
a) produzir 10 g de biomassa;
b) atingir 90% de converso de substrato;
c) produzir 100 g de etanol.

08) Compare as produtividades (g EtOH L -1.h-1) dos processos dos exerccios


9 (Processos Contnuos) e 7 (Processos Batelada) se o tempo morto do
processo em batelada fosse de 10 horas.

09) A equao estequiomtrica para a produo aerbica de cido actico


partir de etanol por bactrias acticas :
C2H5OH

+
O2
(etanol)

CH3CO2H
+
(cido actico)

H 2O

a) Qual a converso de etanol cido actico baseado na reao


estequiomtrica acima?
b) Uma linhagem de Acetobacter aceti foi adicionada a um meio
vigorosamente agitado contendo 10g/L de etanol. Aps algum tempo, a

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concentrao de etanol era 2g/L e haviam sido produzidas 7,5g/L de cido
actico. Qual a converso, YP/S, de etanol a cido actico do cultivo.
c) Discuta os resultados.

10) Dados experimentais do processo de produo de etanol a partir de


hidrolisado de mandioca.
Ensaio 1
t (h)
0,0
1,0
2,0
3,0
4,0
5,0
6,0
7,0

X (g/L)
0,378
0,652
1,17
1,54
1,84
2,36
2,20
2,23

S (g/L)
20,8
17,6
14,8
10,3
5,8
2,34
0,512
0,088

P (g/L)
1,92
2,54
3,54
4,65
5,96
6,64
7,19
6,74

t (h)
0,0
1,0
2,0
3,0
4,0
5,0
6,0
7,0
8,0
9,0

X (g/L)
0,845
1,08
1,88
2,98
3,92
5,77
7,14
10,6
10,3
7,7

S (g/L)
85,1
76,8
76,3
74,8
56,9
42,2
28,8
7,65
0,198
0,002

P (g/L)
2,44
2,88
3,54
5,34
7,52
10,5
10,7
22,8
24,7
24,4

t (h)
0,0
1,0
2,0
3,0
4,0
5,0
6,0
7,0
8,0
9,0
10,0
11,0
12,0

X (g/L)
0,410
0,819
1,14
1,72
2,57
4,01
4,68
6,60
9,51
12,6
12,3
14,2
15,2

S (g/L)
136
130
131
134
130
120
106
100
69,8
47,5
18,3
0,812
0,003

P (g/L)
2,71
2,78
3,06
3,43
4,78
6,78
8,34
11,7
15,4
23,0
28,1
38,2
37,7

t (h)
0,0
1,0
2,0

X (g/L)
1,12
1,29
2,29

S (g/L)
227
236
221

P (g/L)
2,02
2,56
2,90

Ensaio 2

Ensaio 3

Ensaio 4

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3,0
4,0
5,0
6,0
7,0
8,0
9,0
10,0
11,0
12,0
13,0

2,68
4,36
6,18
7,70
11,1
13,6
18,3
18,6
22,3
29,9
25,2

213
198
198
195
178
160
123
76,4
46,2
11,9
0,054

3,82
4,44
6,69
9,31
11,3
15,2
21,0
31,2
39,4
53,8
54,4

a) Faa os grficos de X, S, P e X contra o tempo.


b) Qual o valor de mx ?
c) Qual a converso de substrato em biomassa observada?
d) Qual a converso de substrato em produto observada?
e) Avalie os resultados obtidos.

11) De acordo com o balano material para o reator batelada, se voc


estivesse modelando o crescimento, qual parmetro teria de ser estimado e
de que forma voc procederia?

12) Um fermentador de 10 L inoculado com 500 mL de inculo de 4,1 g/L.


O crescimento do micro-organismo ocorre durante 6 h e atinge uma
concentrao de 6 g/L. Determine o tempo de duplicao e o tempo que a
cepa

deve

permanecer

no

fermentador

para

alcanar

mesma

concentrao que existia no inculo.

13) Um determinado tipo de micro-organismo foi cultivado em sistema


batelada e os seguintes dados foram obtidos:
t (h)
0,0
9,0
16,0
23,0
30,0
34,0
36,0
40,0

X (g/L)
1,25
2,45
5,10
10,50
22,00
33,00
37,50
41,00

10

S (g/L)
100,0
97,0
90,4
76,9
48,1
20,6
9,38
0,63

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a) Determine a velocidade especfica mxima de crescimento celular.
b) Calcule o fator de converso de substrato em clulas.
c) Qual a mxima concentrao celular que poderia ser obtida se fossem
utilizados 150 g/L de glicose no mesmo processo?

14) Uma fermentao em batelada de um cultivo bacteriano aerbio


crescendo sobre metanol fornece os resultados apresentados na tabela:
t (h)
0
2
4
8
10
12
14
16
18

X (g/L)
0,2
0,211
0,305
0,98
1,77
3,2
5,6
6,15
6,2

S (g/L)
9,23
9,21
9,07
8,03
6,08
4,6
0,92
0,077
0

a) Determine a velocidade especfica mxima de crescimento celular.


b) Calcule o fator de converso de substrato em clulas.
c) Qual o tempo de duplicao?
d) Qual o valor da constante de afinidade pelo substrato (K S)?

15) A concentrao celular em um meio de cultivo agitado de 0,5 g/L.


Sabe-se que o substrato limitante a glicose, cuja concentrao inicial de
10 g/L. Ao final do cultivo, depois de 5 h, a concentrao de microorganismo atingiu a concentrao de 10 g/L. Estime a percentagem de
carbono nesta cepa de micro-organismo.

16) Um cultivo em batelada, realizado a 15 C em um fermentador com 10


L de meio de cultivo, foi inoculado com 300 mL de meio com 5,5 g/L de
biomassa.

Depois de

transcorrido metade

do tempo de

cultivo,

temperatura foi aumentada para 35 C sendo mantida at ao trmino do


processo. Sabe-se que o tempo de duplicao desta cepa 32 minutos, 20
C, e 24 minutos, 30 C. Calcule o tempo total de fermentao sabendo

11

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que o rendimento da fonte de carbono 0,5 g/g, tendo sido adicionado 8g/L
desta.

17) Em um fermentador com 4,9 L de caldo fermentativo adicionou-se 100


mL de inculo bacteriano com uma concentrao de 25g/L. Deixando-se a
cepa

crescer

durante

horas

obteve-se

no

fermentador

uma

concentrao de biomassa de 35 g/L. Expresse, em funo de n, o valor do


tempo de duplicao (td). Determine o tempo que a cepa deveria
permanecer no fermentador para alcanar a mesma concentrao do
inculo.

18) Sabe-se que o crescimento de fungos filamentosos no exponencial,


tendo sido propostos modelos que representam este crescimento. Um
destes modelos o proposto por Koch: W1/3 = W01/3 + k.t. Onde W
corresponde a concentrao micelial, t a varivel tempo e k a constante
de velocidade de crescimento para fungos. Em um experimento foram
inoculados, simultaneamente, 0,2 g/L de uma bactria e o dobro de um
fungo em um mesmo meio de cultivo a 30 C, desenvolvendo-se sem
interao entre as cepas. Foi determinado previamente que nas condies
de cultivo k 0,22 (g/L)1/3h-1 e 0,44 h-1.
a) Determine o tempo de cultivo no qual ambas as populaes alcanam a
mesma concentrao, considerando desprezvel a fase de latncia para ambos
os casos.
b) Se depois de 5 h de cultivo sob 30 C a temperatura reduz para 25 C por
mais 5 h, calcule as concentraes finais de bactrias e fungos. A energia de
ativao da bactria 68 kcal/mol e sabe-se que k diretamente proporcional
ao cubo da temperatura absoluta.

19)

12

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- Processos Batelada Alimentada


01) Realiza-se um estudo cintico do crescimento de Candida utilis sobre
glicose em um fermentador batelada alimentada. O fermentador contm
inicialmente 5L de meio com 1g/L de glicose e 2g/L de levedura. Ao curso do
crescimento adiciona-se ao fermentador de uma forma contnua 100g/L de
glicose de forma a manter a concentrao desta constante e igual a 1g/L
dentro do fermentador. Nessas condies obtm-se as seguintes variaes
em funo do tempo do volume de meio e da concentrao de levedura:
tempo (h)
4
8
10
12
14

Volume (L)
5,2
5,6
5,9
6,3
6,9

X (g/L)
3,6
6,5
8,4
10,8
13,5

Avaliar a velocidade especfica de crescimento da levedura e o fator de


converso de glicose em biomassa.
02) Em uma produo de penicilina em biorreator batelada alimentada
inicia-se com um volume V i = 10000L, concentrao de clulas X i = 10g/L e
concentrao de penicilina Pi = 0,1g/L. A operao realizada a vazo
constante F = 200L/h, por 100h. A concentrao do substrato no meio de
alimentao S0 = 40g/L e no meio fermentativo praticamente nula.
Calcular:
a) a concentrao final de clulas e penicilina
b) a produo e a produtividade de penicilina, sabendo-se que o tempo de
preparo do fermentador de 10h.
Dados: p = 0,01 g de penicilina/g de clulas secas.h,
YX/S = 0,15 g clulas secas/g de substrato

03) Clulas de Nicotiana tabacum so cultivadas para a produo de uma


goma polissacardica em um reator de tanque agitado com 100 L de meio
de cultivo. A velocidade especfica mxima de crescimento da cultura de
0,18 d-1 e a converso de substrato em biomassa 0,5g.g -1. A concentrao

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do substrato limitante no meio de cultivo 3% (p/v). O reator inoculado
com 1,5 g.L-1 de clulas e operado at que o substrato acabe
completamente, ento inicia-se a adio de meio de cultivo na vazo de 4
L.d-1.
a) Estimar o tempo do cultivo em batelada e a concentrao final de
biomassa.
b) Se a alimentao ocorre durante 40 dias, qual a massa final de clulas no
biorreator?

04) Numa fermentao fed-batch (batelada alimentada) realizada num


fermentador de volume total de 200 litros, foram obtidos os seguintes
resultados:
t (h)
MX (g)

0
210

1
313

2
467

3
697

4
1040

5
1552

6
1797

7
2032

8
2267

9
2500

A fermentao foi parada quando o volume de caldo atingiu 80% do volume


total. As caractersticas das bactrias cultivadas so m = 0,4h-1, YX/S =
0,4g/g e KS = 0,01g/L, para o nutriente limitante utilizado. Sabendo que S F
constante, determine os valores de F e S F. Calcular as concentraes iniciais
de substrato e de clulas, considerando-se que o processo inicia-se com um
volume de 140 litros.
05) Em um processo industrial em batelada alimentada utiliza-se um
fermentador inicialmente com 30000 litros de meio. A alimentao contem
200 gramas de sacarose por litro e deve ser mantido um S de 0,2 h-1. O
micro-organismo tem um m de 0,33 h-1 e um KS de 0,050 g/L. A
concentrao celular no final da fase batelada de 10 g/L e passa a ser
alimentada durante 7 horas. O volume mximo de lquido no fermentador
de 40 m3. Determinar o fluxo no incio e no fim da alimentao, o
rendimento de sacarose, a concentrao final de clulas e a massa total de
sacarose alimentada.

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06) Uma fermentao batelada alimentada realizada usando uma
alimentao constante de 0,8 L/h, com uma concentrao de substrato
limitante de 120 g/L. O processo inicia com uma cultura em batelada com
um volume de lquido de 20 litros. A concentrao de clulas aps a
inoculao de 0,1 g/L, num meio de cultura contendo 7,5 g/L de nutriente
limitante. O cultivo em batelada continua at que a massa celular atinja o
seu quntuplo, em seguida, comea a alimentao. Determine:
a) As condies iniciais da cultura de batelada alimentada
b) Condies finais correspondentes ao tempo que o volume de caldo de
30 litros.

07) Deseja-se instalar um sistema de cultivo em batelada alimentada no


qual se obtenha crescimento exponencial com alimentao a fluxo
constante e concentrao de nutriente varivel com o tempo.
a) Deduza as equaes que representam o comportamento do sistema.
b) Determine o tempo de alimentao se no fermentador, inicialmente com
22m3 de meio, deseja-se obter 640kg de biomassa seca com um X de 0,5h1
. Calcule tambm a massa total de glicose alimentada e a concentrao
inicial e final no fermentador.
Dados: X0 = 8g/L , max = 0,62h-1 , KS = 0,045g/L , YX/S = 0,4 gX/gS , F = 1L/h

08) Lhe foi solicitado projetar uma fermentao em batelada alimentada


com alimentao constante (F e S F constantes). O micro-organismo a ser
cultivado uma bactria que possui max = 0,4h-1 , YX/S = 0,4 gX/gS , KS =
0,01g/L , quando se utiliza glicose como fonte de carbono e energia. Para
isso, dispe-se de um fermentador piloto de 200L de volume total. Usando
glicose como nutriente limitante, deve-se iniciar a alimentao, quando o
micro-organismo finalizar a etapa de crescimento exponencial, com um
fluxo de alimentao F de modo que se obtenha uma segunda fase de
crescimento exponencial que deve encerrara quando o volume de meio seja
80% do volume total. Os valores de S 0 e X0 no tempo inicial so 0 e 1,5g/L,
respectivamente. O tempo total de processo no deve ser maior que 6h,
partindo de um volume inicial de 140L.
a) Qual deve ser o valor de F para a segunda fase exponencial?
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b) Qual ser a concentrao de micro-organismos alcanada?
c) Quais sero os valores mximos de S que se obtm em cada fase
exponencial?
09) Deseja-se utilizar uma planta piloto para realizar uma fermentao em
batelada alimentada. A bactria de interesse apresenta uma velocidade
especfica mxima de crescimento de 0,34h-1, KS de 0,029g/L e YX/S de
0,41g/g. No perodo inicial em batelada, utiliza-se um volume de meio de
320L

obtendo-se

uma

concentrao

de

7g/L,

iniciando-se

ento

alimentao no instante em que a concentrao de maltose de 0,01g/L. A


alimentao, com uma concentrao de 66g/L de maltose, realizada de
acordo com a expresso: F = F 0 + 3,3t. No incio da alimentao a oferta de
maltose deve ser de 80% da necessria. Calcular o tempo de alimentao
necessrio para alcanar uma massa celular de 10kg em base seca e o
volume de caldo no fermentador.
10) Em um cultivo batelada alimentada se utiliza uma alimentao com
fluxo linear na forma F = 27t (L/h). O volume inicial de 1300L, com
concentraes X0 = 8,5g/L e S0 = 0,35g/L. A concentrao de nutriente
limitante na alimentao 170g/L, com um rendimento global de substrato
em clulas igual a 0,41gX/gS. A levedura possui um m = 0,44h-1 e KS = 0,06
g/L. Determine o tempo de alimentao para obter uma concentrao de
biomassa de 20kg e os valores de finais de S, X, V e .
11) Inoculam-se 20 litros de meios de cultivo, em um reator batelada
alimentada, com uma concentrao de substrato de 11,3g/L com 5 litros de
um preparado microbiano com 1,5g/L. A primeira etapa do cultivo
conduzida de forma batelada at que a massa microbiana alcance 4 vezes
seu valor inicial. Inicia-se ento uma alimentao varivel (F = 0,5t + 4) de
substrato, com uma concentrao de 180g/L. A fermentao interrompida
quando o volume de meio for de 165 litros. Determinar:

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a) Condies iniciais do cultivo alimentado
b) Condies finais do processo.
Dados: m = 0,5h-1, KS = 65mg/L, YX/S = 0,45g/g

12) Em um planta a produo de levedura conduzida em processo


batelada alimentada com alimentao exponencial de meio de cultivo a fim
de manter X constante e igual a 0,24h -1. O volume inicial de meio de
65000L. Depois de 6 horas, uma falha na bomba de alimentao requer a
troca da mesma por outra que passa realizar a alimentao de acordo com
a expresso: F = 100t3. Determine as condies no momento da falha da
bomba e aps 20h de trabalho com a nova bomba (V, X, X, e S).
Dados: X0 = 1g/L, YX/S = 0,52g/g, SF = 250g/L, KS = 0,1g/L, m = 0,48h-1

13) Para realizar uma fermentao em batelada alimentada, esta foram


inoculados 45 litros de meio de cultivo (12g/L de substrato) com 5 litros de
um preparado microbiano de 4g/L. A primeira etapa do cultivo se d de
forma batelada at que 90% do substrato seja consumido. Aps este
perodo, se inicia ento uma alimentao varivel de substrato, com uma
concentrao de 100g/L e um fluxo inicial de 5L/h. A fermentao
encerrada quando o volume atingir 100L. A cepa utilizada, Kluyveromyces
fragilis, tem um tempo de duplicao de 1,39h. Em relao ao substrato
utilizado, apresenta um KS = 20mg/L e um rendimento constante Y X/S = 0,45
g/g. Determine:
a) Condies iniciais do cultivo por batelada alimentada (X, S,t, V, )
b) Funo de fluxo se a transio ocorre aps 3 horas de iniciada a
alimentao.
c) Condies finais do cultivo por batelada alimentada (X, S,t, V, )

14) Para o projeto de um processo de fermentao batelada alimentada,


com alimentao exponencial do tipo (F = 2,85t 2 +1), dispe-se de um
fermentador com 50L de meio de cultivo que so inoculados com 2,5L de
um cultivo celular com 10g/L e uma concentrao de substrato limitante de
10g/L. Quando a concentrao de substrato chega a 0,1g/L, inicia-se a
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alimentao exponencial, com uma concentrao de substrato de 120g/L. O
micro-organismo a ser cultivado uma bactria que apresenta as seguintes
caractersticas: m = 0,5h-1, YX/S = 0,46g/g e KS = 40mg/L.
a) Calcular o tempo decorrido at que o processo passa a ser alimentado.
b) Determinar as concentraes de substrato, clulas, o volume e a
velocidade especfica de crescimento depois do crescimento exponencial .

15) Uma fermentao em batelada alimentada utiliza alimentao varivel


do linear, com uma concentrao de substrato limitante e 120g/L. O cultivo
inicia sendo conduzido em batelada com um volume de 20L. A concentrao
celular depois da inoculao de 0,1g/L, com um meio de cultivo de 7,5g/L
de nutriente limitante. O cultivo em batelada continua at que a massa
celular seja quintuplicada, iniciando-se ento a alimentao. O volume do
fermentador de 50 litros, sendo encerrada ao completar 70% deste.
Determine:
a) Condies iniciais do cultivo em batelada alimentada.
b) Condies finais.
Dados: m = 0,62h-1, KS = 80mg/L, YX/S = 0,45g/g ,
F = 0,6t + 2 (L/h)

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- Processos Contnuos
01) Um fermentador tipo CSTR se encontra em estado estacionrio.
Descreva qualitativamente o que acontece com a concentrao de clulas,
a concentrao de substrato e a velocidade especfica de crescimento se a
vazo de entrada for diminuda.

02) A produo em anaerobiose de etanol por Sacharomyces cereviseae


associada ao crescimento da levedura. A cintica de crescimento da
levedura em estado estacionrio segue o modelo de Monod. Pretende-se
produzir 10kg/h de etanol em m fermentador tipo CSTR ideal, alimentado
por uma soluo de 50g/L de glicose. Dimensione o fermentador para esse
fim, fixando a concentrao de biomassa sada do fermentador em 6,9g/L.
Dados: m = 0,1 h-1, kS = 0,5g/L , YX/S = 0,15 g/g , YP/S = 0,45 g/g

03) Qual a vantagem de se operar um fermentador CSTR com alimentao


de clulas? Justifique

04) A produo de etanol por Sacharomyces cereviseae associada ao


crescimento da levedura. A cintica de crescimento da levedura em estado
estacionrio segue o modelo de inibio de produto como proposto por Aiba.
Produz-se etanol em um fermentador tipo CSTR ideal de 10m 3, alimentado
por uma soluo de 50g/L de glicose. A vazo de alimentao de 400L/h.
Quais as concentraes de biomassa, glicose e etanol sada do
fermentador?
Dados: m = 0,1 h-1, kS = 0,5g/L , YX/S = 0,15 g/g , Y P/S = 0,45 g/g , kP =
18g/L

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= m

kP
S
S +k S k P+ P

05) Pretende-se produzir 240kg/dia de um determinado micro-organismo e


dispe-se de substrato glicose a 100g/L. Que tipo de fermentador (CSTR ou
PFR) seria o mais adequado? A concentrao de clulas na alimentao
0,1g/L e pretende-se que haja 95% de aproveitamento do substrato.
Suponha vlido o modelo de Monod.
Dados: m = 0,23 h-1, YX/S = 0,5 g/g , kS << 0,5g/L

06) Realiza-se a produo contnua de bactrias em um reator agitado de


20L, alimentado por uma soluo de 10g/L de glicose. Dados: m = 0,4 h-1,
kS = 0,6 g/L , 0 = 0,1 h-1, YX/S = 0,5 g/g , kd = 0,05 h-1. Pede-se:
a) Qual a vazo mxima de alimentao que permita, no estado
estacionrio, uma produo contnua de clulas?
b) Qual a vazo de alimentao que maximiza a concentrao de
clulas no estado estacionrio?

07) Uma gua residuria com concentrao de matria orgnica de 200 mg


DQO/L ser tratada aerobiamente em um reator CSTR sem reciclo. A DQO
do efluente dever ser de no mximo 20mgDQO/L. Determine o tempo de
reteno celular e a concentrao de clulas sada do reator.
Dados tpicos para lodo ativado: K S = 40mgDQO/L , k = m/YX/S = 5,0 d-1, Y =
YX/S = 0,4mgSSV/mgDQO e kd = 0,06d-1.

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08) Uma planta convencional de lodo ativado trata 2000m 3/d de gua
residuria com DQO de 200mg/L. O tempo de reteno celular de 5 horas
e a razo de reciclo 0,2. No h purga de clulas no sedimentador.
Determine a concentrao de clulas e poluentes no efluente tratado e a
concentrao de clulas no reciclo. A concentrao de SSV no tanque de
aerao 4000mgSSV/L, valor que minimiza os custos de sedimentador e
biorreator.
Dados tpicos para lodo ativado: KS = 40mgDQO/L , m/YX/S = 5,0 d-1, YX/S =
0,4mgSSV/mgDQO e kd = 0,06d-1.

09) Zymomonas mobilis utilizada em um cultivo contnuo em um


biorreator de 60 m3 sob condies anaerbias. Os valores de Y X/S e YP/X so
0,06 e 7,7 g.g-1 respectivamente. O coeficiente de manuteno 2,2 g.g -1.h, e o P 1,1 h-1. A velocidade especfica mxima de crescimento da Z.

mobilis 0,3 h-1. O inculo consistiu de 5 g de bactrias em 50 litros de


meio de cultivo contendo 12 g.L -1 de glicose. A alimentao contm 12 g.L -1
de glicose. O KS da Z. mobilis 0,2 g.L-1.
a) Qual a vazo necessria para manter a concentrao de substrato
estvel em 1,5 g.L-1?
b) Nesta vazo, qual a concentrao celular e qual a concentrao de
etanol que sai do reator?

10) Descreva o Reator Bioqumico abaixo e escreva a equao para o


componente i, supondo que o processo no est no estada estacionrio.
Que tipo de equaes resultam para i componentes?

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11) Explique o fenmeno de wash-out (use o recurso grfico e o modelo


matemtico para auxiliar na explicao).
12) Geralmente em um processo contnuo pode haver perda de viabilidade
celular (morte), ou decrscimo na concentrao celular, qual modificao
tem de ser levado em considerao no modelo cintico de crescimento para
este fenmeno?

13) No desenvolvimento de uma tecnologia microbiana para o tratamento


de efluentes industriais necessitasse opera um reator de 120 L com um
fluxo de 20 L/h. A populao microbiana apresenta um m de 0,22h-1, um KS
de 1000 ppm e um rendimento de substrato em clulas de 0,28g/g. Os
ensaios preliminares recomendam trabalhar a velocidade de diluio
equivalente a 82% do valor crtico. Determine a concentrao de substrato

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na alimentao, no efluente tratado e a concentrao celular no estado
estacionrio.

14) Duas cepas microbianas coexistem em um fermentador contnuo de


mistura completa e competem pelo mesmo substrato limitante. Suponha
que seja vlido o modelo cintico de Monod e que os rendimentos de
substrato em clulas so constantes e iguais para ambas as cepas.
Determinar as equaes que descrevem o sistema em funo dos
parmetros cinticos (m e KS), dos rendimentos e da velocidade de diluio.

15) Uma levedura cultivada em um fermentador de 110 L de volume de


meio. A levedura suscetvel a inibio pela fonte de carbono e energia de
acordo com:

X =m

S
( K S + S)(S+ K I )

O fermentador operado a uma velocidade de diluio de 0,21 h -1, obtendose uma concentrao celular no estado estacionrio de 7 g/L.
a) Especifique os estados estacionrios que se pode obter e analise sua
estabilidade.
b) Projetar um meio de cultivo adequado sob limitao de carbono.
Especifique somente as fontes de C, N, P e Mg.
c) Determine a produtividade volumtrica mxima de clulas (Q X)max

Dados: m = 0,39 h-1, KS = 0,098 g/L e KI = 0,5 g/L


16) Uma planta de tratamento de resduos industriais opera com um reator
de volume til de 200 L sob um vazo de alimentao de 35 L/h. O lodo
microbiano apresenta um m de 0,34 h-1 e um KS de 1500 ppm e um YX/S
igual a 0,44g/g. Em testes preliminares foi determinado que a taxa de
diluio deve ser 4/5 da taxa e diluio crtica para otimizar o processo.
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Determine a concentrao do efluente a tratar na entrada e na sada do
reator, a eficincia de remoo e a concentrao celular no estado
estacionrio.

17) Para o comportamento de um micro-organismo obteve-se o seguinte


comportamento em um cultivo contnuo, representado pela equao:

Como determinar KS, KI e m a partir deste grfico?

18) Considere um micro-organismo que segue a cintica de Monod, sendo


m = 0,5 h-1 e KS = 2 g/L. Em um reator continuo, perfeitamente agitado em
estado estacionrio, S0 = 50 g/L e YX/S = 1 g/g. Qual ser a velocidade de
diluio, sob a qual se deve operar o reator, para obter a mxima produo
de clulas?

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- Transferncia de Oxignio
01) cido ctrico (C6H8O7) produzido da glicose por Aspergillus niger
(CH1,8O0,5N0,2) em um tanque aerado. A fonte de nitrognio NH 4NO3. No h
formao de CO2. O fator de converso tpico nas condies do processo
68 g de cido ctrico/ 100 g de glicose.
a) Determine o consumo de oxignio, considerando que nenhum outro
produto, alm do cido ctrico e clulas, seja formado.
b) Qual a quantidade de calor gerado por mol de glicose consumida?
hc0(NH4NO3) = 216kJ/mol

02) O crescimento de Saccharomyces cereviseae (bakers yeast) em glicose


pode ser descrito de forma simplificada pela equao:
C6H12O6 + 3O2 + 0,48NH3 0,48C6H10NO3 + 4,32H2O + 3,12CO2
(levedura)
Em um reator batelada de 100000L, a concentrao desejada de levedura
50gDM/L. Usando a estequiometria acima:
a) Determine a concentrao e a quantidade total de glicose e
(NH4)2SO4 no meio de cultura.
b) Determine o fator de converso de substrato em biomassa (Y X/S) e o
consumo de oxignio pelas clulas (YO/X).
c) Determine a quantidade total de oxignio requerido.
d) Se a velocidade de crescimento for r X = 0,7gDM/L-h, determine a
quantidade de oxignio requerida (gO 2/L-h)
e) Calcule a remoo de calor requerida para o reator.

03) Uma cepa de Azotobacter vinelandii cultivada em um biorreator de


tanque agitado de 15m3 para a produo de alginato. Nas condies de
operao o coeficiente de transferncia de massa da fase lquida, k La, 0,17
s-1. A solubilidade do oxignio no meio de cultivo aproximadamente 8x10 -3
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kg.m-3. Qual a concentrao mxima de clulas possvel se a velocidade
especfica de consumo de oxignio das clulas 12,5 mmol g -1.h-1.

04) Utilizou-se o mtodo dinmico para o clculo do k La em um biorreator


operado a 30C. Os dados de concentrao e O 2 dissolvido com o tempo
durante a re-oxigenao esto na tabela abaixo. Determine o k La.
tempo (s)

10
15
20
30
40
50
70
100
130

CO2 (%
saturao do
ar)
43,5
53,5
60,0
67,5
70,5
72,0
73,0
73,5
73,5

05) Um biorreator de 15 litros foi usado para o estudo de uma fermentao


para a produo de penicilina. O objetivo do estudo estabelecer modelos
para representar a dinmica do micro-organismo e do reator. O principal
aspecto do estudo examinar como os efeitos de transferncia de massa
afetam a performance do processo. Uma srie de experimentos , ento,
estabelecida para examinar a transferncia de massa. O biorreator
considerado ideal, ou seja, no h gradientes de concentrao no biorreator.
A primeira srie de experimentos conduzida com o objetivo de
examinar a transferncia de massa do oxignio da fase gasosa para a fase
lquida, ou seja, determinar kla.
considerado que o ar de processo tem a composio 20,95% O 2,
0,03% CO2 e 79,02% N2. O volume total do biorreator, V T = 15 l. A
concentrao de oxignio dissolvido em gua a 25 oC e a 1 atm de O 2 Co* =
2,26 mmol/l. Todos os experimentos so conduzidos a 25 oC. A presso
sada do fermentador mantida constante a 1 atm em todos experimentos.
1. Determinao de kla pelo mtodo do sulfito
A determinao do kla pelo mtodo do sulfito baseado na reao:

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2

SO

catalisador
1
2
SO4
2 O2

Pela medida da concentrao de sulfito em funo do tempo, a


velocidade de consumo de oxignio pode ser calculada. O catalisador pode
ser Co2+ ou Cu2+.
A fim de se determinar k la no biorreator, sulfito adicionado no
fermentador contendo 10 litros de gua at uma concentrao de 10
mmol/l. Os resultados experimentais so mostrados na Tabela 1.
Tabela 1
Tempo (min)
CSO3--(mmol/l)

0
10

1
9,65

2
9,30

3
8,94

4
8,58

5
8,23

10
6,46

Calcule o kla no biorreator e discuta o mtodo do sulfito.

2. Determinao do kla pelo mtodo direto.


Ns agora gostaramos de determinar k la durante um experimento de
fermentao, e para isso implementamos um analisador de gases sada
do fermentador para medir O2 e CO2. Durante a fermentao de penicilina a
vazo de gs 10 l/min, e o volume de trabalho 10 litros. Em um certo
momento o contedo de O2 no gs de exausto 20,63% e a concentrao
de oxignio dissolvido medida constante e igual a 70% da concentrao
de equilbrio.
Calcule o kla durante a fermentao e explique a diferena do valor
determinado pelo mtodo do sulfito.

3. Determinao do kla pelo mtodo dinmico.


Ns agora queremos conferir as estimativas prvias de k la usando o
mtodo dinmico, o qual tambm pode ser aplicado durante a fermentao.
Aps a obteno do estado estacionrio para a concentrao de oxignio
dissolvido, voc desliga a alimentao de gs para o fermentador por um
breve perodo, depois do qual voc liga novamente a alimentao de gs no
instante t=0. No estado estacionrio a leitura do eletrodo c o = 0,8 e a
concentrao de oxignio dissolvido para t=0 c o = 0,5, onde: co = Co/Co*.
A leitura do eletrodo aps o gs ser religado apresentada na Tabela
2. Tambm a derivada com respeito ao tempo da leitura do eletrodo foi
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calculada numericamente e tambm apresentada. Calcule k la e discuta o
mtodo dinmico.
Tabela 2
Tempo (h)
co
dco/dt

0
0,50
0

0,01
0,56
8,96

0,02
0,65
7,78

28

0,03
0,71
5,10

0,04
0,75
2,99

0,05
0,78
1,65

0,06
0,79
0,87

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Engenharia Qumica Engenharia de
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- Processos Enzimticos
01) Defina enzima. Que tipo de protena uma enzima?
02) Qual a funo de um catalisador? Como ele atua?
03) As enzimas so catalisadores especficos?
04) Relacione os principais grupos de reaes catalisadas por enzimas?
05) O que significam os termos encaixe induzido e chave-fechadura?
06) O que o stio ativo de uma enzima?
07) Qual o mecanismo de reao enzimtica proposto por MichaelisMenten?
08) A velocidade de uma reao enzimtica depende da concentrao de
substrato? E da concentrao de enzima? Qual a relao?
09) Qual a definio de km e qual o seu significado?
10) Qual a dependncia da atividade enzimtica com o pH do meio e com a
temperatura?
11) O que inibidor enzimtico? Quais os tipos de inibio possveis?
12) Determine os valores de Vmax e km para os seguintes resultados obtidos
de uma reao enzimtica.
S (M)
2,5x10-6
4,0x10-6
1x10-5
2x10-5
4x10-5
1x10-4
2x10-3
1x10-2
2x10-2

V (M/min)
28
40
70
95
112
128
139
140
140

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13) Determine os valores de Vmax e km para os resultados da seguinte reao


enzimtica catalisada por uma protease.
Glicilglicina + H2O 2 glicina
S (mM)
1,5
2,0
3,0
4,0
8,0
16,0

V (mol/min)
0,21
0,24
0,28
0,33
0,40
0,45

14) A taxa de hidrlise de ATP em ADP influenciada pela protena


muscular miosina. Os seguintes dados esto tabelados a 25C e pH 7,0.
Encontre km e Vmax para a reao com miosina.
V (mol/s)
0,067
0,095
0,119
0,149
0,185
0,191
0,195

[ATP] (M)
7,5
12,5
20,0
32,5
62,5
155,0
320,0

15) Digamos que voc, desejando caracterizar uma enzima recm isolada,
preparou diversos tubos de ensaio, cada qual contendo 0,1 M da enzima,
com concentraes crescentes de substrato. Aps um perodo de incubao
na temperatura adequada, voc mediu as concentraes do produto
formado e obteve os dados como na tabela abaixo.
[S] (mM)
0
2
4

Vo (M/min)
0
28
38

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6
8
10
12
14

43
47
48
49

Qual o valor de Vmax e de km da enzima para o substrato utilizado?


16) Por que o grfico atinge um plat? Justifique a reposta.
a) a enzima inibida por altas concentraes de substrato
b) a afinidade da enzima pelo substrato se altera durante a catlise
c) a enzima provavelmente est sendo progressivamente degradada por
proteases
d) o stio ativo se satura com altas concentraes de substrato
e) o substrato vai sendo degradado

17) Para a reao catalisada por enzima, ilustrada abaixo, por que o termo
k-2 no est includo na Equao de Michaelis-Menten? Justifique cada
resposta.
k1
E+S

k2
ES

E+P

k-1

a) Esta reao jamais ocorre


b) A omisso do termo k-2 simplifica os clculos
c) A Equao de Michaelis-Menten apenas descreve as velocidades iniciais
de reao
d) O termo k-2 j est includo em Km

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e) A Equao de Michaelis-Menten apenas descreve a formao do
complexo ES

18) Para cada alternativa a seguir, indique se V ou F, justifique cada


resposta:
a) a unidade de medida de km velocidade por segundo;
b) km = (k2 + k-1)/k1 ;
c) km igual concentrao de substrato que resulta em velocidade
mxima de reao;
d) Em concentrao muitas altas de substrato, a velocidade de reao
independente da concentrao do substrato;
e) A concentrao do complexo ES permanece constante ao longo da
reao;
f)

A concentrao da enzima normalmente muito mais baixa que a


concentrao do substrato;

g) A velocidade de reao igual ao produto da concentrao do complexo


ES pela constante k2, ou: Vo = [ES] x k2.

19) Sobre as enzimas, indique se V ou F, justifique cada resposta:


a) Para funcionar eficientemente, precisam estar em concentraes
semelhantes s concentraes dos reagentes;
b) Aumentam o valor da constante de equilbrio, dessa forma favorecendo a
formao do produto;
c) Aumentam a velocidade de converso do reagente em produto;
d) Asseguram a converso completa de substrato em produto;

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e) Asseguram que o produto termodinamicamente mais estvel que o
substrato;
f)

Diminuem a energia de ativao para a converso de substrato em


produto;

g) So consumidas nas reaes que catalisam.

20) O que so enzimas alostricas?

21) Em presena de lcool desidrogenase, a velocidade de reduo do


acetaldedo a etanol aumenta medida que aumentamos a concentrao
de acetaldedo. Em um certo ponto, a velocidade da reao atinge um
mximo, e um aumento adicional da concentrao de acetaldedo no tem
mais efeito sobre a velocidade. Por qu? Justifique
a) Todas as molculas de lcool desidrogenase esto ligadas a molculas de
acetaldedo.
b) Em concentraes elevadas de acetaldedo, a energia de ativao da
reao diminui.
c) A enzima no mais especfica para o acetaldedo.
d) Em concentraes elevadas de acetaldedo, diminui a diferena de
energia livre da reao.

22) A invertase catalisa a seguinte reao de hidrlise:


Sacarose +

Glucose +

gua
Frutose
Foram realizadas uma srie de experincias com concentraes crescentes
da enzima (T = 25C e pH = 5,5) para uma s concentrao de substrato.
Cada ensaio foi realizado introduzindo num tubo 1ml de soluo enzimtica,
1 ml de solua tampo e 1ml de substrato em concentrao saturante. A
glucose foi quantificada a intervalos regulares de tempo (Tabela 1):

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Tabela 1 Quantificao ao longo do tempo (t) do teor em glucose


diferentes concentraes de invertase (CE)
CE (M)
CP (mol glucose)
1,0 x
0,8
1,5
2,5
3,3
4,1
5,0
10-6
3,6 x
2,9
5,8
8,7
11,5
14,4
16,8
10-6
5,6 x
5,0
10,0
15,0
17,8
19,5
21,0
10-6
t (min)
2,5
5,0
7,5
10,0
12,5
15,0

produzida (C P) a

5,8

6,6

18,4

19,5

21,7

22,0

17,5

20,0

a) Trace num s grfico as curvas C P = f(t) para cada uma das


concentraes de enzima.
b) Calcule as velocidades iniciais da reao para cada uma das
concentraes de enzima.
c) Trace e interprete a curva V0 = f(CE).

23) No estudo da cintica de uma enzima oxi-redutase na ausncia de


inibidores, obtiveram-se os resultados apresentados na Tabela 2.
Tabela 2 Estudo da cintica de uma enzima oxi-redutase. ([S] concentrao de substrato;
V0 velocidade inicial)
[S] (M)
V0 (mM min-1)
-4
1 x 10
0,080
2 x 10-4
0,122
5 x 10-4
0,182
1 x 10-3
0,213

a) Verifique graficamente se a enzima poder ser descrita por uma cintica


de Michaelis-Menten.
b) Na presena de uma substncia estranha ao meio reacional obtiveram-se
os resultados apresentados na Tabela 3. Indique qual a funo metablica
desempenhada por essa substncia e caracterize numericamente essa
funo.

Tabela 3 Estudo da cintica de uma enzima oxi-redutase. ([S] concentrao de substrato;


V0 velocidade inicial)
[S] (M)
V0 (mM min-1)
2 x 10-4
0,083
3 x 10-4
0,101
4 x 10-4
0,114
5 x 10-4
0,123

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24) Pretendeu-se estudar a fosfatase alcalina da Escherichia coli atravs da
hidrlise do para-nitro-fenil-fosfato (PNPP), composto cuja massa molecular
igual a 371,15 g.mol -1. Preparou-se uma soluo me de PNPP com a
concentrao de 1,3 g.L-1. Ao fim de 1 min de reaco quantificou-se a
formao de PNP, um dos produtos da hidrlise do PNPP, por leitura da
absorvncia a 410 nm. Utilizando os dados fornecidos na Tabela 4,
determine graficamente os parmetros cinticos da fosfatase alcalina.
Tabela 4 Hidrlise do para-nitro-fenil-fosfato a PNP, catalisada pela fosfatase alcalina
N tubo
0
1
2
3
4
5
Tampo (ml)
3,0
3,0
3,0
3,0
3,0
3,0
PNPP (ml)
0,0
0,2
0,3
0,5
1,0
1,5
gua (ml)
2,5
2,3
2,2
2,0
1,5
1,0
Enzima (ml)
0,2
0,2
0,2
0,2
0,2
0,2
Absorbncia aps 1 min
0
0,147
0,167
0,190
0,212
0,231

25) Quais as principais aplicaes industriais de enzimas?

26) Escreva sobre as principais metodologias de imobilizao de enzimas,


como so realizados e quais as vantagens e usos de cada um.

27) Quais os principais mtodos para determinar os parmetros cinticos de


equaes de velocidades?

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