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FACULTAD DE CIENCIAS Y FILOSOFIA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BIOLGICAS Y


FISIOLGICAS
Curso: U0009 Biologa I
Prctica # 6: Permeabilidad de la membrana
Autores de la gua: Dra. Margarita Arana, Dr. Oswaldo Ramrez
INTRODUCCIN
Las clulas estn separadas de su medio externo por la membrana plasmtica. Esta
estructura formada principalmente de lpidos y protenas, de 6 a 10 nm de grosor, no
slo rodea y contiene al citoplasma, sino que tambin regula qu sustancias entran y
salen de la clula.
En las clulas, tanto vegetales como animales, la membrana citoplasmtica es
permeable al agua. El movimiento del agua hacia adentro o fuera de las clulas ocurre
por difusin, movimiento molecular de una regin de alta concentracin a otra de baja
concentracin. La difusin del agua a travs de una membrana en respuesta a una
gradiente de concentracin se denomina smosis.
Cuando se coloca una clula vegetal en agua pura, el agua fluye hacia adentro por
smosis. El volumen celular se incrementa causando que la membrana plasmtica se
expanda contra la relativamente rgida pared celular. Ello ocasiona una presin osmtica
que se incrementa hasta que se alcance un equilibrio y no haya un flujo neto de agua
hacia adentro.
Cuando se coloca un eritrocito en agua pura, sta tambin ingresa por smosis y la
membrana, al igual que en las plantas, se expande, pero al no tener una pared celular
que la limite, la membrana se revienta y se libera el contenido celular, denominndose a
este fenmeno hemlisis.
Tanto el citoplasma como los lquidos que rodean la clula son soluciones acuosas, el
agua es el solvente y las protenas, azcares y otros materiales disueltos comprenden el
soluto. Tonicidad es un trmino fisiolgico que se utiliza para describir una solucin y
cmo sta afecta al volumen celular. La tonicidad no tiene unidades, se trata de un
trmino comparativo. Si una clula en una solucin gana agua y se hincha, se dice que
es una solucin hipotnica. Si la clula pierde agua y se encoge cuando se la coloca en
la solucin, se dice que la solucin es hipertnica. Si la clula no cambia de tamao, la
solucin es isotnica. Si se coloca tejido vegetal en un medio hipertnico, el agua
saldr del interior de la clula y como consecuencia la membrana plasmtica y el
contenido celular se contraen y se desprenden de la pared celular. Este proceso se
denomina plasmlisis (aunque la membrana no sufre lisis). Si la plasmlisis no se
prolonga demasiado, el dao no ser permanente y la clula plasmolizada podr
recuperarse si se transfiere a una solucin hipotnica, el agua fluir hacia el interior de
la clula vegetal hasta alcanzar el equilibrio y la clula estar turgente.
En el caso de clulas animales, como los eritrocitos, cuando se colocan en un medio
hipertnico, pierden agua y como resultado las clulas se contraen, en este caso se dice
que las clulas sufren crenacin. Cuando se colocan los eritrocitos en una solucin

hipotnica, el agua ingresa a la clula, y si se produce un incremento de volumen mayor


del 67% la clula se lisa (hemlisis).
OBJETIVOS DE LA PRCTICA:
Comprender el proceso de smosis
Comparar el comportamiento de clulas animales y vegetales en soluciones con
diferente osmolaridad.
Continuar con el entrenamiento al estudiante en el uso del microscopio compuesto y
en la medicin de estructuras microscpicas usando el ocular micromtrico.
MATERIALES
Microscopios con ocular micromtrico
papel lente, alcohol isoproplico
Lancetas (1 por alumno)
Algodn, alcohol
Solucin salina 0.15M (0.9%)
Solucin salina 0.5M (3%)
Agua destilada

Goteros
Estilete
05 Lminas portaobjetos
05 Laminillas cubreobjetos
Elodea (planta acutica)
Papel toalla
Guantes quirrgicos descartables

PROCEDIMIENTOS
Se dispondr de 10 ml de las siguientes soluciones en 3 frascos con goteros: 0.15M
NaCl (0.9%), 0.5M NaCl,(3%), agua destilada.
I. Clula animal: Hemlisis y crenacin.
1. Efecto de un medio isotnico.
Coloque 2 gotas de sangre en una lmina portaobjetos y sobre ellas agregue 2 gotas
de 0.15M NaCl. Cubra rpidamente con una laminilla cubreobjetos.

Examine la preparacin a 400X, fjese en la forma de las clulas cuando estn en


posicin frontal como de perfil. Mida el dimetro de 03 glbulos rojos con el ocular
micromtrico y saque un promedio. La preparacin debe observarse inmediatamente
ya que los eritrocitos en un montaje hmedo cambian pronto su forma. Dibuje sus
observaciones.
Glbulo Dimetro
Rojo #
1
2
3
Promedio

2. Efecto de un medio hipotnico.


Mientras observa al microscopio, aada una gota de agua destilada por un extremo
de la laminilla cubreobjetos de la muestra y en el otro extremo coloque un trozo de
papel toalla para drenar lquido y jalar el agua del lado opuesto.

Examine el montaje hmedo por varios minutos a 400X (Trate de enfocar el rea
cercana donde agreg el agua destilada). Qu cambios ocurren en la forma de la clula
casi inmediatamente? Trate de observar cerrando el diafragma para mejorar el contraste.
Dibuje sus observaciones.

3. Efecto de un medio hipertnico.


En otra lmina portaobjetos, coloque 2 gotas de sangre y sobre ellas agregue 2 gotas de
0.5M NaCl. Cubra rpidamente con una laminilla cubreobjetos.
Examine la muestra hmeda a 400X para observar signos de crenacin. Mida el
dimetro de 03 glbulos rojos con el ocular micromtrico y saque un promedio.
Qu cambios ocurren en la forma de la clula? Dibuje sus observaciones.
Glbulo
Dimetro
Rojo #
1
2
3
Promedio

II. Clula vegetal: Turgencia y plasmlisis


1. Efecto de un medio hipotnico.
Prepare un montaje hmedo de una hoja de Elodea (planta acutica) utilizando una gota
de agua destilada. Observe las clulas al microscopio (400 x). Mida el grosor de 03
clulas con el ocular micromtrico y saque un promedio. Anote las coordenadas de las
clulas observadas.
Dnde se ubican los cloroplastos? Qu proceso ocurri? Dibuje sus observaciones.
Clula de Longitud
Elodea #
1
2
3
Promedio

2. Efecto de un medio hipertnico.


Mientras observa al microscopio, aada una gota de ClNa 0.5M por un extremo de la
laminilla cubreobjetos de la muestra y en el otro extremo coloque un trozo de papel
toalla para drenar lquido y jalar la solucin hipertnica del lado opuesto.

Observe las clulas al microscopio (400 x) (Trate de ubicar las mismas clulas
observadas anteriormente con la ayuda de las coordenadas)
Mida el grosor de 03 clulas con el ocular micromtrico y saque un promedio.
Dnde se ubican los cloroplastos? Las clulas de Elodea cambiaron de forma? Qu
proceso ocurri? Dibuje sus observaciones.

Clula
de Longitud
Elodea #
1
2
3
Promedio

CONCLUSIN

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Albert, B., Johnson A., Lewis J., Roberts K. y Walter P. (2008). Biologa Molecular
de la clula. Ed. Omega
Campbell Biology. (2011). Jane B. Reece, Lisa Urry, Michael Cain, S. Wasserman,
P. Minorsky, R. Jackson. Ed. Pearson Education, Inc.
Alberts, B., Bray, D., Hopkin, K., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K.,
Walter, P. (2011). Introduccin a la Biologa cellular. Editorial Mdica
Panamericana.
Lodish H, Berk A, Kaiser C, Krieger M, Bretscher A, Ploegh H, Amon A, y Scott
M. Molecular Cell Biology. W.H Freeman and Company. New York. 7a Ed. 2013.
Enlaces de internet
Vacuola http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21743/
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26844/
Pared celular http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21709/
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26928/
Osmosis http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21739/
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26896/
Aiello, L. y Schuster, T. Microscopy - Teacher's Guide . 2005.
http://www.csun.edu/scied/7-microscopy/elodea_plasmolysis/
Rockwell, T. Video: Eritrocitos en solucin hipotnica
http://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=EA_ss8ZkjAM
Rockwell, T. Video: Eritrocitos en solucin hipertnica
http://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=IRQLRO3dIp8

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