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VILLARREAL
ESCUELA UNIVERSITARIA DE POST GRADO
PLAN DE TESIS
-------------------------------------------------------------------------------------------
INDICE
Pgina
Lugar
1.1. ANTECEDENTES
1.2. PROBLEMA
1.3. OBJETIVOS
10
11
2.1. CACAO
12
16
2.3. LEVADURAS
22
23
23
25
26
III. HIPOTESIS
26
26
IV. METODO
28
4.1. TIPO
28
4.2. FASES
28
4.3. VARIABLES
30
31
31
32
33
V. CRONOGRAMA
34
VI. PRESUPUESTO
35
36
ANEXOS
39
39
42
43
Lugar: - Cacao proveniente del distrito de Pangoa, provincia de Satipo, regin Junn.
-
1.1. ANTECEDENTES
Alas y Rios, (2012), en la investigacin Evaluacin del proceso de fermentacin
tradicional y no tradicional de la semilla de cacao Theobrama cacao del Ecotipo
Acriollado, para la determinacin de factores fsicos -qumico y microbiolgicos,
utilizando cuatro medios de cultivos y levadura Saccharomyces cerevisiae como
iniciador de fermentacin en el mtodo no tradicional, evaluaron la fermentacin del
cacao empleando cuatro medios de cultivo: a.- agar MRS, 2.- agar estndar, 3.- medio de
cido actico-etanol Rutherford (RAE) y 4.- agar dextrosa sabouraud, donde el medio
RAE contiene levadura Saccharomyces cerevisiae, a fin de determinar el efecto de la
adicin de levaduras y sacarosa para aumentar la calidad de las caractersticas
organolpticas de la especie de Theobroma cacao de tipo acriollado; realizaron anlisis
bromatolgicos para determinar la cantidad de Cenizas, Fibra, Grasa, Humedad y
Protena presentes en ambos experimentos: fermentacin tradicional y fermentacin con
adicin de medios de cultivo, presentado mejores resultados la fermentacin con medio
de cultivo RAE. El cacao con fermentacin tradicional posee fibra 24, 36 %, humedad
5,81 %, protena 11,17 %, grasa 20,63 %; en el cacao fermentado con adicin de medio
de cultivo RAE se tuvo los resultados siguientes: fibra 24, 76 %, humedad 4,57 %,
protena 12,07 %, grasa 21,09 %; entonces el cacao fermentado con cultivo RAE obtuvo
mejores caractersticas bromatolgicas.
Los mismos autores afirman, que el cacao CCN51 fermentado con enzima Prozyn otorga
mejores cualidades sensoriales que los tratamientos sin enzima y con proteasa de pia,
igualmente en cuanto a acidez sensorial el tratamiento con Prozyn posee mejores
cualidad, cercano a 3. De acuerdo al procesamiento estadstico el tratamiento con enzima
Prozyn establece diferencia significativa respecto al tratamiento sin adicin de enzima.
Entonces la calidad sensorial del cacao CNN51 tratado con enzima Prozyn mejora
significativamente, sin embargo no iguala a las caractersticas sensoriales del cacao
variedad criollo.
el uso de cultivos
En el Per el cultivo del cacao Theobroma cacao L., tiene una connotacin socioeconmica muy importante, constituyndose como uno de los principales cultivos
sustitutos del cultivo de la coca en muchas zonas de la selva Peruana y como un cultivo
atractivo y rentable de la agricultura nacional, involucra 75.000 familias productoras e
indirectamente a 500,000 familias, cultivando 112290 Ha y una produccin de 69678 Tm
(MINAG, 2014). Asimismo las exportaciones de cacao y derivados viene creciendo
sostenidamente cada ao en el 2013 de export 47221 Tm, por un valor de US $
119275,375 dlares, siendo los principales destinos Alemania, Italia, Holanda, Blgica,
Suiza y Estados Unidos (Aduanas 2014).
Por otro lado un factor que obstaculiza el desarrollo de la cadena productiva regional del
cacao, la imposibilidad de estandarizar los perfiles de aroma y sabor del mismo durante
los procesos de beneficio, como el caso de una mala prctica de fermentacin, teniendo
en cuenta que las caractersticas fisicoquicas y organolpticas del grano regional son
interesantes y demandan por lo tanto del desarrollo de procesos de fermentacin y secado
adecuado y que puedan ser adaptados a las exigencias de los mercados especializados.
De manera que el cacaocultor de Junn necesita de herramientas tecnolgicas con las que
pueda alcanzar niveles de productividad y calidad que lo hagan competitivo frente a
productores de otras regiones del Per y del mundo y por lo tanto mejoren sus
condiciones socioeconmicas y calidad de vida.
El cacao es una de las principales fuentes de polifenoles, estos compuestos se encuentran
relacionados con la actividad antioxidante y las caractersticas organolpticas del cacao y
sus subproductos que en parte se desarrolla durante la fermentacin, donde se forman
estos metabolitos.(Chvez y Ordoez 2013). El tiempo de fermentacin transcurre
normalmente de 4 a 6 das lo que genera un cuello de botella en el proceso de postcosecha, que incide directamente en el periodo de cosecha, a fin de fermentar mayor
cantidad de cacao muchos agricultores cortan este proceso afectando la calidad de este
grano para producto final. Por lo que se plantea los siguientes problemas:
General
Cmo interviene la enzima pectinolitica y levadura Sacharomyces Cereviseae en la
fermentacin y calidad del cacao?
Especficos:
Cmo influye la fermentacin con enzima pectinolitica y levadura sacharomyces
cereviseae en el contenido de compuestos bioactivos del grano de cacao?
Cules son las caractersticas de la fermentacin de cacao con enzima pectinolitica y
levadura Sacharomyces cereviseae, para obtener pasta de cacao que cumpla los
estndares de calidad internacional?
Cul es la aceptacin de la pasta de cacao a partir de grano fermentado con enzima
pectinolitica y levadura Sacharomyces cereviseae?
8
1.3.
OBJETIVOS
1.3.1. General
Identificar los efectos de la enzima pectinolitica y levadura Sacharomyces
cereviseae en las caractersticas de fermentacin del cacao y en la calidad
fisicoqumica y sensorial de esta.
1.3.2. Especficos:
- Evaluar las caractersticas de la fermentacin del cacao con enzima pectinolitica y
levadura Sacharomyces cereviseae y su efecto en el contenido de compuestos
bioactivos del grano.
- Identificar las caractersticas de la fermentacin del cacao con enzima pectinolitica y
levadura Sacharomyces cereviseae, para obtener pasta de cacao que cumpla los
estndares de calidad internacionales
- Evaluar la aceptabilidad de la pasta de cacao a partir de grano fermentado mediante
enzima pectinolitica y levadura Sacharomyces cereviseae
1.4.
JUSTIFICACION E IMPORTANCIA
Justificacin
La buena calidad del cacao no slo depende de su variedad, sino tambin en gran medida
del proceso post-cosecha al cual es sometido. Procesos como la fermentacin y secado,
en conjunto con el proceso tecnolgico del tostado del cacao para la obtencin de un
chocolate de calidad son de fundamental importancia. La pequea industria de chocolates
en el Per, presentan productos de diferentes calidades organolpticas an de no muy
buena aceptacin; bsicamente por no desarrollar adecuadamente el proceso de
fermentacin y secado del grano, pues en esta operacin se desarrollan los precursores
del sabor a chocolate tales como los aminocidos libres, pptidos y azcares reductores;
los mismos que interactan en el proceso de fermentacin, produciendo los componentes
especficos del aroma y sabor a chocolate, tales como alcoholes, tiazoles, teres, fenoles,
furanos, cidos, pironas, steres, aldehdos, cetonas, iminas, aminas, oxazoles, pirazinas y
pirroles que contribuyen a una agradable impresin sensorial (Zapata, 2013; Suazo,
2012).
En los ltimos aos diversos autores han demostrado que el cacao y sus productos: pasta
de cacao o licor de cacao, chocolate amargo, polvo de cacao o cocoa, son alimentos ricos
en estas sustancias, principalmente en catequinas (epicatequina, epigalocatequina,
galocatequina y catequina), adems de otros flavonoides como las procianidinas,
antocianinas, flavononas y flavonolglicosdicos (Rivera et al, 2011; Cadena, 2008).
En los ltimos aos se observa el creciente inters por el consumo de alimentos que
adems de nutrir tengan un impacto favorable en la salud, asimismo existe mucha
expectativa en el estudio de componentes naturales como los polifenoles presentes en
plantas y frutos, genera especial atencin debido a sus propiedades funcionales como
antioxidantes, anticancergenos, antiinflamatorios, antitrombticos, antimutagnicos,
antibacteriales y analgsicos1. Por ello y los precios internacionales crecientes de este
producto, el cacao en la regin Junn, genera expectativa como un cultivo rentable,
sustituto al cultivo de la coca, cultivo de caf; principalmente con una gran demanda
insatisfecha en el mercado externo, que implica mejorar la productividad y calidad de
este fruto, con tcnicas que sean aplicables por los cacaoteros a fin de obtener mejores
rentabilidades y reconocimientos que posicionen sosteniblemente en el mercado el cacao
de Selva central.
10
Importancia
La Comisin Nacional de Productos Bandera (COPROBA) organismo adscrita al
Ministerio de Comercio Exterior y Turismo (MINCETUR), declar al cacao como
producto bandera del Per, debido a su origen, caractersticas diferenciales, ventajas
comparativas y la imagen del Per como pas generador de productos de calidad con
valor agregado. Dicho anuncio fue publicado el da 6 de noviembre del 2013; En ese
sentido, esta comisin contemplo y ponder para otorgar el reconocimiento, el hecho de
que se trate de un producto sustituto al cultivo de coca, lo que ha impulsado que miles de
familias transformen sus cultivos e ingresen a una economa lcita, (Agraria, 2013).
Asimismo en el Foro de las Amricas 2013, se menciona que gracias a la estrategia de
mercado impulsado por el gobierno y privados, el cacao peruano, utilizado en las
iniciativas de reemplazo de cultivos de hoja de coca en el pas (el principal ingrediente de
la cocana) se est consolidando en los mercados internacionales. Un 70% del cacao
peruano se exporta. Asimismo tenemos un crecimiento sostenido de la produccin de
15% anual, dijo Rolando Herrera, presidente de la Asociacin Peruana de Productores
de Cacao (APPCACAO); donde el Per se mantiene como el segundo exportador
mundial de cacao orgnico. Adems Quie agreg que el 2014 la produccin de cacao
alcanz 81,300 toneladas distribuidas a lo largo 106,000 hectreas, lo que gener
alrededor de 7.7 millones de jornales anuales, beneficiando de manera directa a ms de
90 mil familias, e indirecta a 450,000 mil personas (Gestin, 2015)
La produccin de cacao de la Selva Central del Per, en este caso de las provincias de
Satipo
Chanchamayo,
cada
ao
viene
desarrollndose
apreciablemente,
2.1. CACAO
El rbol de cacao pertenece al gnero Theobroma, que, en griego, significa alimento
de los dioses. Este gnero contiene varias especies, pero solamente una, Theobroma
cacao, se cultiva comercialmente y es un cultivo de importancia econmica para muchos
agricultores que se dedican a este cultivo a tal punto de convertirse en el eje del sistema
12
productivo. La vasta mayora (70% a 90%), la cultivan los pequeos agricultores cuyas
plantaciones son menores de tres hectreas, y el resto se cultiva en reas mayores. El
cacao es una planta de bosque, y ha evolucionado para crecer bajo condiciones de sombra
(Arvalo, 2011).
2.1.1. Grupos germoplsmicos
Lachenaud (1997), mediante estudios moleculares y argumentos paleo climticos,
paleo geogrficos y etno botnicos, elabor una propuesta de clasificacin de grupos de
cacao, estableciendo 4 grupos o complejos germoplsmicos naturales: Criollo, Amazonas
o Forastero del Alto Amazonas, Guyanas o Forastero del Bajo Amazonas, y Nacional. Un
tercer grupo, el Trinitario, result ser una poblacin segregante que se origin de una
cruza entre una variedad amelonada de la Guyanas (Forastero del Bajo Amazonas) y
una variedad de Criollo de Venezuela.
Tabla 1. Complejos germoplsmicos naturales de cacao (Lachenaud, 1997)
Grupo de cacao
Distribucin geogrfica
Amrica central, Colombia, Per y
1. Criollo
Venezuela
2. Amazonas o Forasterodel Alto
Per, Ecuador, Colombia, Bolivia y Brasil
Amazonas
3. Guyanas o Forastero del Bajo
Guyanas, Venezuela, Surinam y Brasil
Amazonas
4. Nacional
cultivadas mundialmente hoy en da son hbridos de orgenes mixtos que no pueden ser
completamente incluidos dentro de esta divisin clsica
Hoy en da se cultivan en Per los cultivares tradicionales e hbridos de formas peruanas
de Forastero con cultivares que se introdujeron en la segunda mitad del siglo XX. Estas
familias de hbridos se han extendido a varios territorios de cultivo de cacao en Per. Un
estudio con 220 productores de cacao en el valle de Huallaga en Per mostr una alta
variabilidad gentica dentro de las plantaciones de productores individuales y document
que las formas utilizadas son hbridos de las formas Trinitario y Forastero de la cuenca
superior del Amazonas (Doster et al, 2011)
Garca (2012 b) menciona que en la zona norte del pas existe una variedad denominada
porcelana por el color blanco de las semillas (cacao blanco), caracterizada por
presentar una marcada uniformidad fenotpica en el color de la mazorca, arquitectura del
rbol, sabor a panela/malta. Esta variedad se cultiva en las provincias de Morropn y
Huancabamba (Piura), su origen probablemente se remonta a una variedad criolla que se
cultiva en la zona vecina de San Ignacio (Cajamarca). Esta variedad obtuvo el primer
lugar en el V Concurso Nacional de Cacao realizado en Lima en julio del 2011, debido
principalmente a su buen sabor, acidez frutal, toques florales, gusto a buen chocolate,
color muy atractivo y sabor agradable.
Asimismo la variedad Chuncho del Valle de La Convencin (Cusco) tiene su origen en la
variedad Forastero y criollo, de color blanco aromtico a frutal de excelente calidad
aromtica (Garca, 2010 a)
2.1.3. Produccin de cacao en el Per
La produccin peruana de cacao est creciendo a gran ritmo en los ltimos aos en
promedio de 21,21%, logrndose una produccin de 71813 tm, en el ao 2013; las
regiones productoras principales de cacao en el Per son: San Martn, Cusco, Junn,
14
Este proceso por lo general no debe llevarse a cabo por ms de cuatro das para el cacao
criollo y de ocho das para el cacao forastero. Algunos de los mtodos ms comunes en
esta prctica son la fermentacin en sacos, en cajas y en montones. Si este proceso se
realiza mal o de manera deficiente se produce el llamado cacao corriente (Agraria, 2013).
2.2.1. Caractersticas tecnolgicas de fermentacin de cacao
La fermentacin est afectada los siguientes factores condicionantes: por el origen
gentico del cacao, los intervalos entre cosechas, la cantidad de cacao a fermentar, la
cantidad de pulpa en la semilla, el mtodo de fermentacin utilizado y las condiciones
del medio donde se realiza el proceso. En la prctica, los mtodos de fermentacin varan
mucho de una zona de produccin a otra, e incluso de un productor a otro. El tipo de
cacao, el mtodo de fermentacin utilizado, conjuntamente con el tiempo de
fermentacin, la frecuencia de remocin, secado y las condiciones atmosfricas de la
zona determinan la calidad del cacao y al mismo tiempo condicionan el precio a pagar
por el mismo (Portillo 2006).
No hay sabor a chocolate en los granos sin fermentar, durante la fermentacin se forman
compuestos (precursores del sabor a chocolate) que reaccionarn entre ellos durante el
tostado para formar el sabor a chocolate. El sabor a Chocolate se forma en dos etapas:
fermentacin donde se forman los precursores del sabor y el tostado donde esos
precursores reaccionan, formando el sabor a chocolate (Rios, 2012)
16
Es un proceso que ocurre en dos etapas y en dos lugares: 1. Fermentacin de los azcares
de la pulpa que cubren los granos. Los azcares se transforman en alcohol y luego en
cido actico (similar a la fermentacin de la uva para producir vino y vinagre). 2. cido
acdico, producido externamente, penetra a travs de la cscara y produce reacciones
bioqumicas en el grano que son las responsables de la formacin de los precursores del
sabor a chocolate (Lambert, 2008).
Segn (Rodrguez, 2011), las almendras deben permanecer sin ser removidas, durante
las primeras 36 horas, tiempo que dura la fase de fermentacin anaerbica. Luego, es
necesario voltear la masa de cacao diariamente, a la misma hora, para permitir la
liberacin del CO2 generado en el proceso y que su lugar sea ocupado por aire con
oxgeno que garantice el proceso de oxidacin. El tiempo de fermentacin debe ser de 5 a
6 das, o mejor, de 120 a 144 horas contadas a partir del depsito del grano en los
recipientes. Para tener un cacao bien fermentado debemos atender las siguientes
recomendaciones:
Paso 1: Despus de la quiebra de las mazorcas echemos las semillas al fermentador
hasta dejarlo repleto.
Paso 2: Tapemos bien el fermentador con hojas de pltano para garantizar que caliente
bien las semillas y evitar que le caiga basura.
Paso 3: Esperemos 48 horas para hacer el primer volteo, revolviendo bien el grano con
ayuda de un palo.
Paso 4: Despus del primer volteo revolvemos las semillas diariamente a la misma
hora.
Paso 5: Despus de estos 5 o 6 das el grano pasa al secar.
17
2.2.5. Influencia de los parmetros de fermentacin en las caractersticas fsicoqumicas del cacao
La fermentacin del cacao es una etapa muy importante en el procesamiento del grano,
ya que se producen cambios bioqumicos que dan origen a los precursores del aroma y
sabor (Contreras et al., 2002). Entre los cambios bioqumicos est el desarrollo de la
18
Asimismo Suazo (2012), manifiesta que durante la fermentacin uno de los cambios
fisiqumicos que se presenta es lo relacionado a los polifenoles, que se estima que del
total de polifenoles en esta semilla, el 60% son flavanoides (monmeros individuales:
(+)-catequinas y (-)-epicatequinas; y procianidinas: (+)-catequinas y (-)-epicatequinas
condensadas. 37 y, aunque actualmente estos compuestos son objeto de mucha
investigacin, existe consenso sobre su efecto antioxidante y, su influencia en varios
procesos bioqumicos y fisiolgicos del ser humano.
morados,
Dgalactsido.Durante
la
como
cianidin-3--L-arabinosido
fermentacin,
estos
pigmentos
son
cianidin-3--
hidrolizados
por
19
Se estima que del total de polifenoles en esta semilla, el 60% son flavanoides
(monmeros individuales: (+)-catequinas y (-)-epicatequinas; y procianidinas: (+)catequinas y (-)-epicatequinas condensadas. 37 y, aunque actualmente estos compuestos
son objeto de mucha investigacin, existe consenso sobre su efecto antioxidante y, su
influencia en varios procesos bioqumicos y fisiolgicos del ser humano (Visioli y
Dvalos, 2011).
Los polifenoles de estas semillas son relacionados con la actividad antioxidante, se cree
que cuanto ms elevado sea la cuantificacin de polifenoles mayor es la actividad
20
antioxidante. Sin embargo, con el fermentado se pierde gran parte de los polifenoles de
esta semilla, bsicamente porque este proceso busca generar los precursores del sabor y
el color caractersticos de los derivados como el chocolate (Efraim et al, 2010).
[(monmeros
individuales:
(+)-catequinas
(-)-epicatequinas)
2.3. LEVADURAS
Las levaduras son hongos unicelulares, con una morfologa caracterstica esfrica u
ovalada. Las levaduras se hallan ampliamente distribuidas en la naturaleza y se
encuentran frecuentemente en forma de polvillo blanco que cubre los frutos y las hojas.
La mayora de las levaduras se reproducen asexualmente por gemacin multicelular o por
gemacin polar, mecanismo de reproduccin mediante el cual una porcin de
protoplasma sobresale de la pared de la clula de la levadura y forma una protuberancia;
esta protuberancia, o yema, aumenta de tamao y finalmente se desprende como clula
de levadura neoformada (Petrenko, 2004).
2.3.1. Gnero Saccharomyces cereviseae.
Estas levaduras pertenecen a la divisin Ascomycotina. Las clulas de estas
levaduras pueden ser redondeadas, ovaladas o alargadas y pueden producir seudohifas.
Se reproducen por gemacin multipolar mediante la produccin de ascosporas. Las
21
ascosporas, en nmero de una a cuatro por asca, suelen ser redondeadas u ovaladas. La
especie S.cerevisiae, se emplea cepas de levaduras y de su rendimiento celular, en
muchas industrias alimentarias, utilizndose cepas especficas en las fermentacin del
pan, en la fermentacin de la cerveza inglesa, en la fermentacin de los vinos, biomasas y
en la produccin de alcohol, glicerol e invertasa, (Petrenko, 2004).
2.4. ENZIMA PECTOLITICA
Las pectinasas son enzimas que se usan en la industria de vegetales, vinos, frutas y
en la produccin de jugos para la clarificacin, disminucin de la viscosidad y aumento
en los rendimientos de proceso. Las pectinasas comprenden la poligalacturunas,
pectinestearasa, petinaliasa y pectatoliasa, que catalizan la degradacin del polmero de
sustancias pcticas en diferentes tipos de enlaces. La poligalacturonasa presenta una
actividad pectoltica mxima a pH de 4.5 y temperatura de 50 C. (Puerta, 2009)
Enzimas pectinasas degradan las cademas homogalacturnicas de las pectinas. Estas
enzimas degradan la cadena principal de las pectinas y constituye el grupo de pectinasas
ms antiguo y mejor conocido. La endo-poligalacturonasa y la exopoligalacturonasa
catalizan la hidrlisis de los enlaces entre cidos galacturnicos no metilados y unidos en
(14). Su actividad es posible gracias a la accin previa de la pectina-metilesterasa
que liber el metanol unido por enlace ster a las funciones carboxlicas de los cidos de
las pectinas naturales de la uva y otros frutos de esta naturaleza (Andrade, 2009).
2.5. COMPUESTOS BIOACTIVOS
2.5.1. Antioxidantes
Un antioxidante es una molcula capaz de retardar o prevenir la oxidacin de otras
molculas. La oxidacin es una reaccin qumica de transferencia de electrones de una
molcula que pierde un electrn y por lo tanto se oxida a otra que gana el electrn y por
lo tanto se reduce. Las reacciones de oxidacin pueden producir radicales libres que
22
comienzan reacciones en cadena que daan las clulas. Los radicales se producen durante
la respiracin con la presencia de oxgeno que aunque es imprescindible para la vida
celular de nuestro organismo, tambin induce la formacin de stas molculas reactivas,
que provocan a lo largo de la vida efectos negativos para la salud debido a su capacidad
de alterar el ADN (los genes), las protenas y los lpidos o grasas "oxidacin" (Dreosti,
2000)
Los antioxidantes terminan estas reacciones quitando intermedios del radical libre e
inhiben otras reacciones de oxidacin oxidndose ellos mismos. Debido a esto es que los
antioxidantes como los polifenoles son a menudo agentes reductores y ejercen funciones
preventivas (neuroprotectoras) contra enfermedades tan importantes como las coronarias
y otras igualmente temidas como el hombre como el Alzheimer y Parkinson, que se
caracterizan particularmente por la disminucin de la funcionalidad de clulas cerebrales
(Lin, 2011).
2.5.2. Polifenoles
El creciente inters sobre los polifenoles ha incentivado el estudio de su
concentracin natural en plantas y frutos y los factores que le impactan, debido en parte a
sus propiedades funcionales como antioxidantes. En la semilla de cacao los polifenoles se
encuentran en la cascara y en el cotiledn, el cual se caracteriza por el color violeta
intenso, color relacionado con polifenoles especficos como las catequinas y antocianinas
(Cakirer et al, 2003).
23
compuestos, los de inters son aquellos que pertenecen a los flavonoides, como las
catequinas que han adquirido importancia por su actividad biolgica en el hombre, que al
consumirlos a travs de vegetales o derivados como el chocolate, ejercen funciones anti
inflamatorio, antioxidantes y por tanto preventivas ante diversas enfermedades como las
del tipo cancergenas (Rusconi et al, 2010)
Jimnez (2003), menciona que las cualidades organolpticas que deben reunir los granos
de cacao que son deseados por los fabricantes para procesar un producto de buena
calidad, siendo estas las siguientes: 1) capacidad para desarrollar un buen chocolate,
24
25
III. HIPOTESIS
3.1. General
Existen efectos de la enzima pectinolitica y levadura Sacharomyces cereviseae en la
fermentacin y calidad fisicoqumica y sensorial del cacao.
3.2. Especficos:
- La fermentacin del cacao con enzima pectinolitica y levadura Sacharomyces
cereviseae, tiene efecto en el contenido de compuestos bioactivos del grano.
- Intervienen operaciones tecnolgicos especficos en la fermentacin del cacao con
enzima pectinolitica y levadura Sacharomyces cereviseae, para obtener pasta de cacao
que cumpla los estndares de calidad internacionales
- Mejora la aceptabilidad de la pasta de cacao a partir de grano fermentado mediante
enzima pectinolitica y levadura Sacharomyces cereviseae, en relacin al fermentado
espontneamente.
3.3. OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES
Tabla N 3: Operacionalizacin de variables independientes
Variables
Independientes
- Tipo cultivo Iniciador (enzimalevadura)
- Cantidad de cultivo iniciador
(enzima y levadura)
Indicadores
- Caractersticas de la fermentacin
* temperatura
* acidez
* grados brix
* formacin de alcohol
* Cant, cido actico
* pH
* tiempo
* actividad enzimatica
- Caractersticas fisicoqumicas
* contenido de grasas
* humedad
* contenido de ceniza
* antioxidantes totales
* polifenoles
- Caractersticas sensoriales
olor y fragancia * acidez
Astringencia
* amargor
sabor afrutado * sabor floral
sabor a nueces * crudo
* otros sabores
* evaluacin global
26
Instrumentos
* Termmetro digital
* Equipo titulador
* Refractmetro
* Refractmetro
* Refractmetro
* Potencimetro
* Reloj
* Guillotina
* Equipo soxclet
* Estufa
* Mufla
* Cromatgrafo HPLC
* Cromatgrafo HPLC
* Por catadores
Dependientes
- Tiempo de fermentacin
- Caractersticas fisicoqumicas
del cacao
- Contenido de compuestos
bioactivos
- Caractersticas sensoriales de la
pasta de cacao
* guillotina y reloj
* contenido de grasas
* humedad
* contenido de ceniza
* Equipo soxclet
* Estufa
* Mufla
* Cromatgrafo HPLC
* Cromatgrafo HPLC
27
* Por catadores
IV. METODO
4.1. TIPO
Experimental y aplicativo
4.2. FASES
Para el desarrollo de la parte experimental se desarrollar de acuerdo al diagrama
de flujo de la figura 4
Cosecha
Seleccin y Clasificacin
Corte de mazorcas
Desgrane
Acondicionamiento
ESQUEMA EXPERIMENTAL
Fermentacin
Cultivo:
Cant:
Levadura
[L1]
[L2]
Lev + enz
[L3]
[LE1
[LE2
Enzima
[LE3
Secado
[E1]
[E2]
[E3]
T = 45 - 50
H=8%
Evaluacin de la Calidad
29
Evaluacin de la calidad
Los resultados de los tratamientos en estudio sern evaluados en el aspecto fisicoquimicas, fitoqumicas, microbiolgicas y sensorial a nivel de pasta de cacao.
Tabla N 4: Diseo de la investigacin
Tratamiento
Cdigo
T1
L1
0.05 %
0.0
T2
L2
0.10 %
0.0
T3
L3
0.15 %
0.0
T4
LE1
0.05 %
0.015 %
T5
LE2
0.10 %
0.020 %
T6
LE3
0.15 %
0.025 %
T7
E1
0.0
0.015 %
T8
E2
0.0
0.020 %
T9
E3
0.0
0.025 %
* Levadura Sacharomyces cereviseae, instantnea granulada Fleishmann
** Enzima comercial ROHAPECT VRC
4.3. VARIABLES
Variables independientes:
- Tipo cultivo Iniciador
- Cantidad de cultivo iniciador
Variables dependientes:
- Tiempo de fermentacin
- Caractersticas fisicoqumicas del cacao
- Contenido de compuestos bioactivos:
- Caractersticas sensoriales de la pasta de cacao
30
Muestra
05 kilogramos de cacao en baba por tratamiento (total 45 kg), 90 kg de mazorcas
de cacao, cosechados del fundo Gonzales, agricultor lder en cultivo de cacao.
Ubicado en el distrito de Pangoa, provincia de Satipo, cuya temperatura vara de 24
a 30 C; con cosecha promedio de 800 kg/Ha, a una altitud de 600 a 650 m.s.n.m.
31
b. Caractersticas biomtricas
-
Tamao de mazorcas.
Peso de mazorcas
Tamao de 10 almendras
Peso de 10 almendras
% de pulpa y cscara
b. Anlisis microbiolgico
-
32
33
= Media General
V. CRONOGRAMA
Actividades
1
1.Elaboracin
del x
proyecto
2. Revisin bibliogrfica x
3.Aprobacin del proyecto
de tesis
4. Preparacin de mater.
e Instrumentos
5. Ejecucin y recoleccin
de datos
6. Procesamiento
de
datos
7
.
Anlisis
e
Interpretacin
de
Resultados
8.
Elaboracin
de
Informe Final
2
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
34
Unidad
kg
kg
lt
Cantidad
C. Unit
225.00
1.00
1.00
2.50
80.00
450.00
Unid
9
9
18
50.00
450.00
100.00
ciento
62.00
Millar
Unid
Unid
Unid
1
1
1
1
28.00
5.00
32.00
5.00
Unid
Unid
35
10
8
300.00
120.00
35
C. Total
1092.50
562.50
80.00
450.00
7904.00
450.00
4050.00
1800.00
1500.00
62.00
42.00
70.00
28.00
5.00
32.00
5.00
785.00
300.00
240.00
245.00
4260.00
3000.00
960.00
300.00
1411.50
15523.00
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42
WACHER R. 2011.
43
General
Identificar los efectos de
la enzima pectoltica y
levadura
en
las
caractersticas
de
fermentacin del cacao y
en
la
calidad
fisicoqumica y sensorial
de esta.
General
Independientes:
Existen efectos de la enzima - Tipo
de
cultivo
pectoltica y levadura en la
iniciador (enzima
fermentacin
y
calidad
levadura)
fisicoqumica y sensorial del - Cantidad de cultivo
cacao.
iniciador (enzima
levadura)
- Caractersticas de la
fermentacin
* temperatura
* acidez
* grados brix
* formacin de alcohol
* Cant, cido actico
* pH
* tiempo
* actividad enzimatica
- Caractersticas
fisicoqumicas
* contenido de grasas
* humedad
* contenido de ceniza
* antioxidantes totales
* polifenoles
- Caractersticas sensoriales
44
Mtodo
Experimental, aplicativo
Diseo de la
investigacin
Tres tipos de cultivo,
tres cantidades de
cultivos, haciendo un
total de 9 tratamientos
en fermentacin de
cacao en baba
Tipo: aplicado
Nivel: explicativo
Experimental
Poblacin
Cacao variedad criollo,
de distrito de Pangoa,
provincia de Satipo
Especficos:
Cmo
influye la
fermentacin con enzima
pectoltica y levadura en
el
contenido
de
compuestos
bioactivos
del grano de cacao?
Cules
son
las
caractersticas
de la
fermentacin de cacao
con enzima pectoltica y
levadura, para obtener
pasta de cacao que
cumpla los estndares de
calidad internacional?
Cunto es la aceptacin
de la pasta de cacao a
partir
de
grano
fermentado con enzima
pectoltica y levadura?
Especficos:
Evaluar
las
caractersticas de la
fermentacin del cacao
con enzima pectolitica y
levadura y su efecto en
el
contenido
de
compuestos bioactivos
del grano.
Identificar
las
caractersticas
de la
fermentacin del cacao
con enzima pectoltica y
levadura, para obtener
pasta de cacao que
cumpla los estndares
de
calidad
internacionales
- Evaluar la aceptabilidad
de la pasta de cacao a
partir
de
grano
fermentado
mediante
enzima pectoltica y
levadura
Especficos:
- La fermentacin del cacao
con enzima pectoltica y
levadura, tiene efecto en
el
contenido
de
compuestos bioactivos del
grano.
Intervienen operaciones
tecnolgicos especficos
en la fermentacin del
cacao con enzima y
levadura, para obtener
pasta de cacao que cumpla
los estndares de calidad
internacionales
- Mejora la aceptabilidad de
la pasta de cacao a partir
de
grano
fermentado
mediante
enzima
pectoltica y levadura, en
relacin al fermentado
espontneamente.
45
Dependientes
- Tiempo de
fermentacin
- Caractersticas
fisicoqumicas del
cacao
- Contenido de
compuestos
bioactivos
- Caractersticas
sensoriales de la
pasta de cacao
Muestra
10 kg/tratamiento, total
90 kg de cacao en
mazorca
APPCACAO
ANEXO 2
FORMATO B
46
APPCACAO
ANEXO 3
10
Olor y fragancia
Acidez
Astringencia
Amargor
Sabor afrutado
Sabor floral
Sabor a nueces
Crudo
Otros sabores
Comentarios:
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
47