Problemas Tema 4

1.- En una columna de 122 cm de longitud y a una temperatura de 160C se obtuvieron

los siguientes tiempos de retencin en minutos: pico del aire 0.90, heptano 1.22 y
octano 1.43. El ancho en la base de los picos fue de 0.14 min para el heptano y de 0.20
min para el octano.
a) Calcular la retencin relativa y la resolucin para estos picos.
b)Qu longitud debera tener la columna para obtener una resolucin de 1.5?
2.- El 1,2,3-trimetilbenceno tiene un tiempo de retencin corregido de 21.3 min a 200C
y de 13.3 min a 225C. Sera posible eluir este compuesto en menos de diez minutos,
sabiendo que con la fase lquida que contiene la columna de cromatografa de gases se
puede trabajar hasta 275C?
3.- Para calcular el factor de respuesta en un anlisis cromatogrfico, se realizaron tres
determinaciones con cantidades diferentes de un analito A y de un estndar interno (EI),
obtenindose los siguientes resultados:
Muestra
A, mg/L
rea de A, u.a. EI, mg/L
rea EI, u.a.
1
0.200
25532
0.100
13320
2
0.100
11830
0.100
12320
3
0.200
24110
0.200
25150
Una vez establecido dicho factor de respuesta, se analiz por triplicado una muestra que
contiene el analito A y se aadieron 0.1000 mg/L del estndar interno a cada una de las
alcuotas, obtenindose los siguientes datos:
Muestra
rea de A, u.a.
rea de EI, u.a.
4
21010
11201
5
21315
11500
6
21240
11425
Calcular la concentracin de A en mg/L y su lmite de confianza.
4.- Se obtuvieron los siguientes datos por cromatografa de gases en una columna
empaquetada de 40 cm de longitud
Compuesto
Aire
Metilciclohexano
Metilciclohexeno
Tolueno

tr, min
2.5
10.7
12.6
14.5

w, s
78
84
108

Concentracin, mg/L
1.0
1.0
2.5

rea
1154
2024
4053

Calcular:
a) La resolucin para los pares metilciclohexano-metilciclohexeno y
metilciclohexeno-tolueno. Indicar si los picos estn resueltos.
b) Si se utiliza el metilciclohexeno como patrn interno en una concentracin de
1 mg/L y en un cromatograma de una muestra se obtienen reas de 2323 para el
metilciclohexano y de 3123 para el tolueno Cul ser la concentracin de estas
sustancias en dicha muestra?

5.- Para realizar un anlisis de drogas, se parte de 3 mL de orina, se somete a una

extraccin en fase slida, se eluye con un disolvente orgnico, se lleva a sequedad y
finalmente se redisuelve en 0.5 mL de metanol y se aade dionina hasta una
concentracin final de 10mg/L. Se inyecta 1 L de esta disolucin en un cromatgrafo
de gases con detector de nitrgeno-fsforo. Los datos obtenidos se encuentran en la
tabla 1. Se hace un calibrado preparando una mezcla de estndares de cocana, cafena y
su patrn interno dionna. Se inyecta 1L en el cromatgrafo de gases y se obtienen los
resultados que se muestran en la tabla 2. Los promedios de las recuperaciones obtenidas
son 82% para cafena y 92% para cocana. Calcular la concentracin en mg/L y los mg
por 100 mL de estas drogas en la orina.

Tabla 1 (muestras)
Compuesto
Cafena
Cocana
Dionina

rea
1736698
435122
1578336
Tabla 2 (calibrado)

Compuesto
Cafena
Cocana
Dionina

rea
2437783
845129
1522794

Concentracin . mg/L
5
5
10

6.- Se quiere determinar el contenido de cidos grasos en un aceite de origen vegetal

mediante cromatografa de gases. Para ello se esterifica previamente la grasa con KOH
en metanol de forma que se obtienen los steres metlicos de los cidos grasos
correspondientes (estequiometra de la reaccin 1:1). En el proceso de calibrado
mediante patrn interno (PI) se ha utilizado heptanoato de metilo en concentracin 1.0
mmol/L. Los datos de calibracin para el oleato de metilo y el palmitato de metilo se
muestran en la tabla:
Muestra

Oleato de
metilo,
(mmol/L)

rea oleato
de metilo
(u.a.)

Palmitato
de metilo,
(mmol/L)

1
2
3

2.0
1.0
2.0

25542
11830
24210

2.0
1.0
2.0

rea
PI
palmitato de (mmol/L)
metilo (u.a.)

36216
18115
35980

1.0
1.0
1.0

rea PI
(u.a.)

13320
12320
13075

Cuando se inyecta una muestra del aceite problema que contiene una concentracin de
PI de 1.0 mmol/L se obtienen reas de 21240 u.a. para el oleato de metilo, 15227 u.a.
para el palmitato de metilo y 12978 u.a. para el heptanoato de metilo.
a

Calcular las concentraciones de los steres del cido oleico y palmtico

inyectados.
b Sabiendo que el rendimiento del proceso de esterificacin es del 90% para el
cido oleico y del 95% para el cido palmtico, calcular la cantidad de dichos
cidos en la muestra de aceite en mmol/L.
7- a) Sabiendo que, a un caudal de 1 ml/min, el pico cromatogrfico de la serotonina
presenta un tiempo de retencin de 4.2 min y una anchura a media altura de 30 s,
calcule el factor de capacidad, el nmero de platos y la altura equivalente de plato
terico para una columna de 10 cm de longitud y 1.8 mL de volumen muerto
b) Para medir serotonina (5-hidroxitriptamina) por el mtodo del patrn interno, a una
alcuota de 1.0 mL de una disolucin de concentracin desconocida se le aade 1 mL de
una disolucin que contiene 30 ng de N-metil-serotonina (patrn interno). Esta mezcla
se trata adecuadamente para eliminar interferencias y se inyectan 10 L de la muestra,
obtenindose un rea de 2573832 para la serotonina y de 1719818 para la Nmetilserotonina. Cuando se inyect un volumen equivalente de una mezcla que contena
5 ng de serotonina y 5 ng de N-metil-serotonina se obtuvieron reas de 30885982 y
30956727 respectivamente. Calcular la cantidad de serotonina en ng en la muestra
original.
8.- En un laboratorio de control de calidad se quiere poner a punto un mtodo de
anlisis por HPLC en fase inversa de una mezcla de dos compuestos A y B. Se sabe que,
en columna de octadecil slice de 25 cm de longitud y utilizando una fase mvil de
metanol-agua, los tiempos de retencin son 6.25 y 7.10 min respectivamente, el tiempo
muerto es 1.4 min y la resolucin es 1.05.
a) Cul debe ser la longitud de la columna para conseguir una resolucin de 1.5?
b) Calcular los factores de retencin de A y B. Sern diferentes en la nueva columna?
c) A partir de la siguiente tabla calcular la concentracin de A y B en la muestra.
Muestra
1
2
3
4

A, mg/L
2.0
1.0
2.0
X

B, mg/L
2.0
1.0
2.0
X

P.I., mg/L
1.0
1.0
2.0
1.0

AreaA
25542
11830
24210
21240

AreaB
36216
18115
35980
15227

AreaPI
13320
12320
26150
11425

9.- El DDT fue el primer insecticida sinttico que se utiliz en todo el mundo despus
de la Segunda Guerra Mundial. En la actualidad es un contaminante universal debido a
su persistencia. Este insecticida no se utiliz como un solo compuesto: el componente
activo mayoritario es el p,p-DDT y el minoritario, y ms txico, p,p-DDD se
encuentra en menor proporcin.
Para analizar la cantidad de cada uno de estos compuestos en una muestra de pescado,
se toma 1 g de la misma, se extrae con 250 mL de n-hexano y se evapora parcialmente
el disolvente a 1.0 mL. Al extracto se le aade 1.0 mL de patrn interno que contiene
0.3 mg del mismo y 2 L de la mezcla resultante se inyectaron en un cromatgrafo de
gases que tiene un detector de nitrgeno-fsforo. Las reas obtenidas para la muestra se
encuentran en la Tabla 1.

Tabla 1. Muestra
Compuesto
rea, unidades arbitrarias
p,p-DDT
2343478
Patrn interno
894398
p,p-DDD
56758
Con el fin de poder cuantificar la composicin del insecticida, se realiz un calibrado de
patrn interno para lo cual se prepar una mezcla cuya composicin se especifica en la
Tabla 2 y de la cual se inyectaron 2 L en el cromatgrafo de gases, obtenindose las
reas descritas en la Tabla 2.
Tabla 2
Compuesto
Concentracin, ng/mL
rea, unidades arbitrarias
p,p-DDT
1700
1283148
Patrn interno 150
903410
p,p-DDD
125
61342
Sabiendo que los promedios de las recuperaciones obtenidas son 82% para p,p-DDT y
92% para p,p-DDD, calcular la concentracin de p-p-DDT y p,p-DDD en la muestra
de pescado en % en peso.
10- a) Cuando se separaron por cromatografa de gases 1.06 mmol de 1-pentanol y 1.53
mmol de 1-hexanol, dieron picos cromatogrficos con reas en unidades arbitrarias de
922 y 1570 respectivamente. Cuando se aadieron 0.57 mmol de pentanol (Patrn
interno) a una muestra problema que contena hexanol, las reas fueron de 843 para el
pentanol y 816 para el hexanol. Cunto hexanol contena la muestra problema?
b) Al inyectar en el cromatgrafo una mezcla de pentanol, hexanol y un compuesto no
retenido, se obtiene un pico intenso a 42 s correspondiente al compuesto no retenido. El
pentanol se eluye a 4.18 min y el hexanol a 5.55 min. Calcular los factores de retencin
y de selectividad.
c) Calcular la resolucin sabiendo que la anchura en la base para el pentanol es de 30 s y
para el hexanol es de 40 s.
d) Cmo afectara un aumento de temperatura a la resolucin? Justifique
adecuadamente la respuesta.
11.- Para la determinacin de ibuprofeno y su producto de degradacin el 2-hidroxi
ibuprofeno en muestras de plasma de rata se ha utilizado cromatografa lquida de alta
eficacia. El 2-hidroxi ibuprofeno presenta un tiempo de retencin corregido de 3.0 min
y el ibuprofeno de 5.3 min cuando se separan por cromatografa liquida en fase reversa
a una mezcla acetonitrilo-agua en presencia de cido frmico 5 mM. Los estudios
cromatogrficos de mezclas de patrones de ibuprofeno y 2-hidroxi ibuprofeno se
muestran en la tabla 1.
Concentracin
ibuprofeno, mgL
0.10
0.20
0.5
1.0
1.5
2.0

rea
-1

ibuprofeno
4472
9136
12329
13494
25062
34962

Concentracin
2-hidroxi ibuprofeno, mg L
0.010
0.020
0.05
0.10
0.15
0.20

rea 2-hidroxi
-1

515
981
1860
1505
2859
3654

3.0
4.0
6.0

44189
55290
68057

0.30
0.40
0.60

5016
5984
7724

Se administr por va oral una muestra de 10 mg/kg de ibuprofeno a una rata de

laboratorio y se tomaron muestras de sangre (0.5 mL) a diferentes tiempos despus de la
administracin del frmaco y se sometieron a anlisis por HPLC. Se obtuvieron los
siguientes resultados para las reas de pico correspondientes a 3.0 min (2-hidroxi
ibuprofeno) y 5.3 min (ibuprofeno).
Tiempo desde la administracin, h

0
0.5
1.0
1.5
2.0
3.0
4.0
6.0
8.0

rea 2-hidroxi ibuprofeno

rea ibuprofeno

0
569
890
1367
2345
3567
4567
5678
6756

0
56989
53564
34962
26456
20567
13457
7897
5678

Determine la concentracin de ibuprofeno y su producto de degradacin en mg/L a cada

tiempo y relacione la degradacin del ibuprofeno con la aparicin del producto de
degradacin.
12.-Se quiere determinar la concentracin de una serie de fenoles contaminantes prioritarios en
aguas superficiales y para ello se utiliza una separacin mediante cromatografa de gases con
detector de espectrometra de masas utilizando 2-bromofenol como patrn interno (PI).
Previa a la determinacin cromatogrfica se evalu utilizar la extraccin en fase slida con
cartuchos empaquetados con estireno divinilbenzeno.

a) Una disolucin acuosa de 100 ml, que contiene 2-clorofenol (200 ng/L), 2,4diclorofenol (100 ng/L) y pentaclorofenol (200 ng/L), se pasa por un cartucho de
extraccin en fase slida, acondicionado adecuadamente, y a continuacin se
eluye con 5 mL de metanol que contiene 0.1% de cido trifluoroactico, se
evapora el disolvente y se reconstituye la muestra con 1 mL de un disolvente
adecuado y se inyecta en el cromatgrafo. Calcule la recuperacin de la
extraccin con los datos de la tabla 1.
Tabla 1. Preconcentracin
Cantidad
Cantidad
aadida, ng/L
encontrada, ng/L
2-clorofenol
200
191
2,4-diclorofenol
100
82.5
pentaclorofenol
200
178
Compuesto

b) Con el fin de poder cuantificar la composicin de una muestra problema, se

realiz un calibrado con patrn interno para lo cual se prepar una mezcla cuya
composicin se especifica en la tabla 2 y de la cual se inyectaron 2 L en el
cromatgrafo de gases, obtenindose las reas descritas en la tabla 2.

Tabla 2. Calibrado
Compuesto
Cantidad
aadida, ng/L
2-bromofenol (PI)
200
2-clorofenol
200
2,4-diclorofenol
100
pentaclorofenol
200

rea, u.a.
903410
1245670
978950
130976

Para analizar la cantidad de cada uno de estos fenoles en la muestra de agua se toman 100 mL
de muestra se pasan por el cartucho de estireno-divinilbenceno, se eluyen como se describe en
el apartado a) y 2 L de la disolucin resultante se inyectaron en el cromatgrafo de gases con
detector de espectrometra de masas.
Las reas obtenidas para la muestra se encuentran en la tabla 3.
Tabla 3. Muestra

Compuesto
Patrn interno
200 ng/L
2-clorofenol
2,4-diclorofenol
pentaclorofenol

rea, u.a.
894398
1127890
828970
79000

Teniendo en cuenta las recuperaciones obtenidas en el apartado a) calcular la concentracin de

cada clorofenol en la muestra.
13.- Se requiere identificar y cuantificar, por cromatografa de gases, el contenido de
triglicridos en una muestra de grasa vegetal para uso alimentario. Para realizar el anlisis se
prepar una disolucin que contena los estndares necesarios en las siguientes concentraciones.

C8
C10
C12
C14
C16
C18
C18.1

Triglicrido
Tricaprilina
Tricaprina
Trilaurina
Trimiristina
Tripalmitina
Triestearina
Triolena

Concentracin, mg/mL
0.033
0.020
0.023
0.020
0.020
0.020
0.024

A esta disolucin se aadi 0.020 mg/mL de un patrn interno (PI) y se inyect 1.0 L de la
disolucin resultante en el cromatgrafo. El anlisis cromatogrfico proporcion los siguientes
resultados:
N de pico
Triglicrido
tr, min
rea, u.a.
1
C8
10.18
137315
2
C10
11.73
101252
3
C12
13.08
126558
4
C14
14.27
94368
5
C16
15.33
107682
6
C18
16.50
97061
7
C18.1
16.66
98597
PI
15.68
11945
Para el anlisis de la muestra se pesaron 1.5 gramos de la grasa vegetal, se disolvi esta muestra
en 10.0 mL de hexano, se aadi el PI de forma que la concentracin final es de 0.020 mg/mL y
de esta disolucin se inyect 1.0 L al cromatgrafo y se analiz en las mismas condiciones que

se haba obtenido la separacin de los patrones. Los datos cromatogrficos obtenidos se

muestran en la siguiente tabla:
N de pico
Triglicrido
tr, min
rea, u.a.
w1/2, min
1
15.36
171984
0.037
2
PI
15.68
12004
0.016
3
16.53
145681
0.059
4
16.71
148440
0.075

a) Cul de los triglicridos analizados en la mezcla patrn estn en la grasa

vegetal?
b) Cul es la resolucin entre cada par de picos del cromatograma?
c) Cul es la concentracin de cada uno de los triglicridos expresada en mg/g de
muestra?
14.- En la separacin por cromatografa de gases de aminas alifticas con una columna
cromatogrfica de 12.5 m se obtuvieron los siguientes datos:
aire
isopropilamina
n-propilamina

tr, min
0.395
4.59
4.91

w, s

Concentracin, g/L

rea

0.365
0.382

1.0
2.5

20240
40530

Calcule:
a) El factor de retencin para cada amina, el nmero de platos y la altura de plato para
la n-propilamina y la resolucin entre las dos aminas
b) Para realizar un control de toxicidad en trabajadores expuestos a aminas se parte de
3 mL de orina, se somete a una extraccin en fase slida, se eluye con un disolvente
orgnico, se lleva a sequedad y se aade isopropilamina como patrn interno en una
concentracin final de 1 g/L. Se inyecta 1 L de la disolucin resultante y un
cromatograma de una muestra presenta reas de 23220 para la isopropilamina y de
35421 para la n-propilamina, cul ser la concentracin de n-propilamina en la
orina en g/L?