Biol 3300L

Gentica

Descubrimiento del DNA

siglo XIX
Johan Friedrich Miescher (Suiza, 1844-1895), bilogo y mdico
suizo

en plena revolucin industrial

Cuando era estudiante, a partir de glbulos blancos de

pacientes, o sus ncleos, tratados con solucin salina
acidificada precipitado gelatinoso que consista en
sustancia rica en P y N, a la cual llam nuclena (= el DNA
que llamamos hoy).
No se le atribuy ninguna funcin biolgica en esa poca

Morgan recibi el premio Nobel en 1933.

A principios del siglo XX, en la Universidad de Columbia,

Thomas Morgan (1866-1945) y sus alumnos comprobaron que los
genes son entes que se encuentran alineados a lo largo de los
cromosomas, que vean al microscopio, consistentes con los
resultados de Mendel, y elaboraron mapas detallados de los
cuatro
cromosomas
de
la
mosca
de
la
fruta.

Nacimiento de la Biologa Molecular en el

mundo

Nace a partir de la Fsica

en el Siglo XX

Niels Bohr

fsico dans (1885-1962) que realiz

contribuciones fundamentales para la
comprensin de la estructura del
tomo y la mecnica cuntica. Premio
Nobel de Fsica en 1922.
Sin embargo, introdujo la idea de que los
conceptos fsicos tradicionales no son
suficientes para entender los fenmenos
biolgicos.
Estas ideas fueron presentadas en una
conferencia titulada Light and life (Luz y
vida), en el Congreso Mundial de
Luminoterapia en 1932, a la cual asiste
Max Delbrck

Reconoci la importancia de las

caractersticas atmicas, fundamentales en
las funciones de los seres vivos: certificado
de defuncin del vitalismo

Mientras tanto, escuelas de pensamiento ms biolgicas

experimento pionero de transformacin gentica (1928!!)

Frederick

Griffith

(UK)

mdico estudioso de la neumona, atrs Hoy se interpreta as: DNA de cepa dadora (WT) complement a
cepa receptora (mutante en algn gen de sntesis de la cpsula) mediante
de una vacuna (1879-1941)
recombinacin homloga

Max Delbrck (Berln, naci ya en siglo XX, 1906)

Promotor de las ideas de Bohr, creci en el mismo barrio en que viva el tambin fsico Max Planck.
Doctor en Fsica, Universidad de Gotinga, importante polo de desarrollo de la naciente mecnica cuntica.
Post-doc en Dinamarca con Niels Bohr.
Delbrck comenz a interesarse en la biologa gracias a las ideas de Bohr .
As, un pequeo grupo de fsicos y bilogos empezaron a reunirse en la casa de Delbrck desde 1934. A partir
de estas reuniones surgi su corto artculo de1935 en el que propona una explicacin a las mutaciones
inducidas por rayos X con base en la mecnica cuntica, primera teora molecular de la gentica con base en
principios fsicos, fuente de inspiracin a Schrdinger: libro What is life? en 1944.
Gracias a una beca Rockefeller, en 1937 emigr a USA para trabajar con Morgan en Caltech. Sin embargo,
encontr difcil adaptarse a la jerga de los estudiosos de la mosca de la fruta (Drosophila melanogaster), por lo
que empez a colaborar con Emory Ellis investigando sobre fagos.
Al estallar la Segunda Guerra Mundial, en 1939, Delbrck decidi permanecer en USA, en el Departamento de
Fsica de la Universidad de Vanderbilt (Nashville, Tennessee) y as conoci al italiano Salvador Luria
(Bloomington, Indiana) y naci el club de los fagos de los 1940s

la idea de gen como entidad responsable de

los fenotipos heredables en bacterias estaba
flotando
pero
no
era
formulada
claramentelos experimentos no incluan
estudios qumicos.

Salvatore Luria
Mdico
radilogo
y
estudiante posgr Fsica en Roma
y luego en Inst. Curie, de Pars a
USA (1940, plena II Guerra, Mussolini)
interesado igual que Barbara McClintock en
efectos biolgicos de rayos X funda el

club de los fagos junto a

Delbrck y Hershey (premios
Nobel 1969) : las bacterias
exhiben fenotipos, detectados
por seleccin artificial, resultado
de cambios (mutaciones) que
ocurren ocasionalmente (10-9)
pre-adaptativos, heredables

MUTATIONS OF BACTERIA FROM VIRUS

SENSITIVITY TO VIRUS RESISTANCE
S. E. LURIA and M. DELBRUCK. 1943
dicen:
adems descubrieron la restriccin
de los fagos de multiplicarse en cepas
bacterianas diferentes de la original:
concepto antecesor (30 aos) al de
los
sistemas
enzimticos
de
modificacin/restriccin
(=
escudo/armamento).

Oswald Avery

la idea del gen en el DNA estaba flotando.

(1877-1955). Mdico e investigador canadiense,
estudi en la Columbia Univ y trabaj en el
hospital del Instituto Rockefeller, NY, USA. Uno
de los primeros bilogos moleculares.
Repiti el experimento de Griffith con lisados de bacterias transformantes pero previamente
digiriendo enzimticamente azcares, protenas y RNA.

En 1944: el principio transformante era DNA!! (simultneo con el libro de Erwin

Schrdinger Qu es la vida?)
entonces los genes reportados por el club de los fagos estaban hechos de DNA!
(aunque Delbrck no cit a Avery)

Erwin Schrdinger
(1887-1961)

En 1944 public un pequeo libro titulado Qu es la vida? (What is life?). Aport dos ideas
fundamentales:
1) la vida no es ajena a las leyes de la termodinmica.
2) la qumica de la herencia debe basarse en un cristal aperidico, compatible con una
secuencia informativa.
Esta obra menor ha tenido gran influencia en James Watson y en el desarrollo posterior de la
biologa molecular.

por lo tanto, la idea del gen en el ADN ya era

aceptada.pero cul era su forma?

James
Watson
(1928-)
zologo de USA tesista
doctoral de Luria, Ph. D. a
los 22 aos!:
X-ray
inactivated acteriophages
a UK (a aprender Qumica!:
la estructura del DNA) con
Max Perutz y luego con
Crick.

Francis Crick (UK) fsico

Estructura de protenas por
rayos X (con Wilkins).
Se le unen Watson y Peter
Pauling en Cambridge (1951).
Despus tambin con Sidney
Brenner, Mathew Meselson:
concepto de mRNA (19601964)

Por fin lleg el modelo correcto* de estructura 3-D de DNA 1953

Inspirados por el libro de

Schrdinger y las reglas (1950) de
Erwin Chargaff
(Austria, 1905-2002)
*en oposicin al modelo incorrecto
de Linus Pauling (padre de Peter)
de triple hlice con los fosfatos
hacia adentro

1) se fortalece la Biologa como una ciencia en la cual se mide

2) el modelo era consistente con una supuesta fiel replicacin del DNA
tomando como templado a s mismo (A-T y C-G)

otros grosos en los 50s y 60s

cigarrillo!

Franois Jacob y Jack Monod

(con Andr Lwoff) introdujeron concepto de operones, operadores y
genes reguladores (1958) confirmado luego por Walter Gilbert, que
aisl la protena represora (1966)

otros grosos en los 60s

Walter Gilbert
Boston, USA (1932- )
purific el represor lac en 1967
Premio Nobel 1980

Severo Ochoa
Espaa (1905-1933)
descifr el cdigo gentico, en USA
Premio Nobel 1959 (junto a su discpulo Arthur Kornberg)
Dijo: el amor es la fundicin de fsica y qumica. Joaqun Sabina
reconoce haber tomado de ah el ttulo para su lbum "Fsica y
Qumica".

todos los brillantes cientficos nombrados se opusieron al

rgimen nazi imperante en Europa (1933-1945)
la bsqueda de la verdad fue acompaada de denuncias
a la brutal criminalidad y de sentimientos de humanidad

y en las dcadas siguientes.

los 70s: nacen la Biologa y Gentica Molecular, en Departamentos de
Bioqumica, como las entendemos hoy, con la posibilidad de manipular y
analizar el DNA:
1. vectores de clonado

2. enzimas de restriccin (Werner Arber, premio Nobel 1978)

3. tcnicas de secuenciacin (Maxam-Gilbert; Sanger, Nobel 2 veces)

4. Descubrimiento de RT por David Baltimore (premio Nobel 1975)

5. los 80s:
6. ribozimas (Thomas Cech, premio Nobel 1989)
7. tcnica PCR (Kary Mullis, premio Nobel 1993)


Niveles de
Condensacin

cido Nuclico
Polmero de
nucletidos.
RNA
DNA
Molcula larga
filamentosa, estable
y con capacidad de
autorreplicacin.

Nucletidos
Unidad estructural
bsica de DNA y RNA.
Contiene:

Grupo fosfato - unido al

azcar por enlace
fosfodister.
Azcar Pentosa (5 C).
DNA Desoxiribosa
RNA Ribosa

Base nitrogenada
Purinas: (Adenina y
Guanina)

Pirimidinas:

Citocina
Timina=DNA
Uracilo=RNA

Base Nitrogenada
Purinas: (A, G)
Formadas por dos
anillos

Pirimidinas: (T, C, U)
Formadas por un
anillo bsico que
contiene dos
molculas de
nitrgeno.

Base Nitrogenada
Se unen entre si mediante puentes de hidrgeno (su
funcin?)
Slo una purina con una pirimidina, produciendo una doble
hlice simtrica.
Adenina = Timina (DNA)
Adenina = Uracilo (RNA)
Guanina = Citocina

Estructura de DNA

Otras propiedades del

DNA

Las hlices son antiparalelas

53
35
Medidas
Distancia entre bases nitrogenada 3.4 A
Dimetro de la hlice 20 A
Vuelta de espiral (10 bases nitrogenadas) 34 A

Otras propiedades del

DNA

Regla de Apareamiento de Chargaff

Dice que las bases nitrogenadas se aparean de tal manera
que el nmero total de purinas es igual al nmero total de
pirimidinas. Sin embargo, la cantidad de A+T no es
necesariamente igual a la cantidad de C+G.
A+G / C+T = 1
(Purinas) (Pirimidinas)
Ej. 5 AAATTTCGGCGT 3
3 TTTAAAGCCGCA 5
7+5/5+7=1
A+T= 14
C+G= 10

Replicacin de DNA

DNA girasa Desenlaza los nudos o lazos en la cadena de

DNA.

DNA helicasa separa las dos hebras.

SSBP Evita que se unan las hebras.
RNA primasa Sintetiza el primer.
DNA polimerasa III Sintetiza la nueva hebra.
DNA polimerasa I Elimina las bases mal pareadas (3 5) y
elimina los primers (5 3).
DNA ligasa Une los terminales 3OH con los 5PO4 de los
fragmentos de Okasaki (fragmentos de DNA de la hebra
discontinua)

Replicacin de DNA

Replicacin de DNA

Replicacin de DNA

Autorreplicacin semiconservativa
Luego de la replicacin cada una de las dos nuevas
hlices va a poseer una hebra original y una copia.

Nucleosoma
unidades de
nucleoprotenas
formadas cada una por
un cilindro corto de
histonas en forma de
disco envuelto en
cido nuclico.
Formado por 8
molculas de histonas
conocidas como H2A,
H2B, H3 y H4.

Solenoide
anillos circulares y
continuos formados
cada uno por seis
nucleosomas

Cromatina
filamento de DNA
y protenas

Cromosomas
Estructuras de varias
formas y tamaos
formada por
nucleoprotenas.
Nucleoprotenas
combinacin de cido
nuclico y protenas
(histonas)
Formada por una
dos cromtidas
(hermanas), unidas por
un centrmero (DNA
no est contrado).

Base molecular de la
herencia
Genes: son unidades
hereditarias que se
transmiten de una
generacin a otra,
estos contienen
informacin codificada
para la caracterstica.