Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
Верховский
© Авторы, 1996
СОДЕРЖАНИЕ
• Введение
• Глава 1. Иммунная система: основные понятия
• Глава 2. Первичные (врожденные) иммунодефициты
• Глава 3. Вторичные (приобретенные) иммунодефициты
• Глава 4. Механизмы вирус-индуцированной иммуносупрессии
• Глава 5. Методы клинико-иммунологической диагностики
• Глава 6. Стратегия иммунокоррекции
• Заключение
Литература
1. Б.Альбертс, Д.Брей, Дж.Льюис и др. Молекулярная биология клетки. - М., Мир, 1987,
т.5, стр.6-67.
18. Brownlie J., Collins M.E., Heaton P.: Bovine-immunodeficiency - like virus: A potential
cause of disease in cattle. -Vet.Rec., 1994, 134,12, pp.289-291.
19. Chabanne L, Poliak S., Pham-Huu-Trung М. et al.: Primary immunodeficiencies of the dog:
overview and diagnostic approach. - Point-Veterinaire, 1993, 24, 150, рр.673-681.
20. Egberink H., Horzinek M.C.: Animal immunodeficiency viruses. -Vet.Microbiol., 1992, 33,
1-4, pp.311-331.
21. Flaming К., Van der Maaten М., Whetstone C. et al.: Effect of bovine immunodeficiency -
like virus infection on immune function in experimentally infected cattle. -Vet.lmmunol.
Immunopathol., 1993, 36, pp.91-105.
22. Gorman N.T.: Immunology. In: Textbook of veterinary internal medicine. Eds. S.J.Ettinger
and E.C.Feldman. - W.B. Saunders Co., Philadelphia, London, Toronto, Montreal, Sydney,
Tokyo, 1995, vol.2, pp.1978.
23. Greco D.S., Harpold L.M.: Immunity and the endocrine system. -Vet.Clin. of North Am.,
Small Anim. Prac., 1994, 24, 4, рр.765-782.
24. Halliwell R.E.W. and Gorman N.T.: Diseases associated with immunodeficiency. In:
Veterinary clinical immunology. Eds. Halliwell R.E.W. and Gorman N.T. - W.B.Saunders
Company, Philadelphia /London/ Toronto/ Montreal/ Sydney/ Tokyo, 1989, pp.449-466.
25. Jorgensen C.B., Agerholm J.S., Pedersen J. and ThomsenP.D.: Bovine leukocyte adhesion
deficiency in Danish Holstein. Friesian cattle. I.PCR screening and allele frequency estimation. -
Acta Vet.Scand., 1993, 34, pp.231-236.
26. Lewis P.M., Picut .A.: Veterinary clinical immunology. From classroom to clinics. - Lea &
Febiger, Philadelphia* London, 1989, pp.207-228.
27. Lopukhin J.M., R.V.Petrov, V.Y.Arion et al.: Preparation for control of T-system of
immunity and method for producing same. - United States Patent N4,377,511, Mar.22,1983.
30. Rovid A.H., Carpenter S., Roth J.A.: Monocyte function in cattle experimentally infected
with bovine immunodeficiency - like virus. - Vet.lmmunol. Immunopathol., 1995, 45, 1-2,
рр.31-43.
31. Sibille P., Avrameas A., Moraillon A. et al.: Comparison of serological tests for the diagnosis
of feline immunodeficiency virus infection of cats. - Vet.Microbiol., 1995, 45, pp.259-263.
32. Specter S., Bendinelly М. and Friedman H.: Viruses and immunosuppression. General
comments. In: Virus-induced immunosuppression. Eds. Specter S. et al. - Plenum Press, New
York and London, 1989, pp.1-19.
33. Thompson J.P.: Immunological diseases. In: Textbook of veterinary internal medicine. Eds.
S.J.Ettinger and E.C.Feldman.-W.B. Saunders Co., Philadelphia, London, Toronto, Montreal,
Sydney, Tokyo, 1995, vol.2, pp.2002-2029.
34. Thompson J.P.: Disorders of the immune system. In: The cat: Diseases and clinical
management. Ed. Sherding R.G. - New York, Churchill Livingstone, 1994, p.311.
35. Wilkins P.A., Deman-Mix S.: Efficacy of intravenous plasma to transfer passive immunity in
clinically healthy and clinically ill equine neonates with failure of passive transfer. -Corn.Vet,
1994, 84, pp.7-14.
ВВЕДЕНИЕ
Интерес к иммунодефицитам возрос в последние годы в связи с большой важностью их в
клиническом (им сопутствуют многочисленные патологические процессы) и
теоретическом отношении.
Обозначения на рис.1:
1.1. В-лимфоциты
В-лимфоциты - клеточные элементы иммунной системы, предназначенные для
реализации гуморального иммунного ответа с образованием специфических антител.
1.1.1. АНТИТЕЛА
В процессе инфекции антитела к антигенам (обычно белковой природы) синтезируются В-
лимфоцитами. В совокупности называемые иммуноглобулинами (Ig), антитела образуют
один из основных классов белков в крови, составляя по весу примерно 20% суммарного
белка плазмы. Антитела защищают позвоночных от инфекций, нейтрализуя вирусы или
бактериальные токсины, мобилизуя комплемент, фагоциты и киллерные клетки.
Несмотря на то, что роль антител при выздоровлении от первичных инфекций зачастую не
определена, они несомненно обеспечивают защиту при повторном инфицировании этими
или сходными по антигенной структуре микроорганизмами. Основным фактором при
первичных вирусных инфекциях является иммунный ответ клеточного типа. Например,
при персистентной вирусной инфекции даже с активной репликацией вируса, антитела
часто обнаруживают в сыворотке крови, иногда в значительных количествах. Этих
антител оказывается недостаточно для того, чтобы инфицированному организму
освободиться от вируса, однако эти антитела играют решающую роль в распространении
вируса и могут быть ключевым элементом в преобладании латентного периода при
многих персистентных инфекциях.
1.2.1. Т-ЛИМФОЦИТЫ
Лимфоциты тимусного происхождения (Т) являются эффекторами иммунного ответа на
воздействие различных вирусных, бактериальных, грибковых и других агентов. В этот
процесс вовлечены по крайней мере 3 субпопуляции клеток:
Особое значение для иммунной системы имеет синтез макрофагами интерлейкина-1 (IL-1)
и дополнительных растворимых факторов, которые могут подключать и активировать
другие клетки, в частности, покоящиеся Т-клетки. Наиболее интересными из известных
факторов макрофагов являются а-интерферон и фактор некроза опухолей. Через синтез ос-
интерферона макрофаги регулируют резистентность организма к вирусной инфекции.
1.3.1. КОМПЛЕМЕНТ
Комплемент представляет собой сложную систему из 11 сывороточных белков,
активность которых регулируется большим количеством факторов и является основой
защитных сил организма. Комплемент является важным элементом системы
резистентности, а также эффективным звеном гуморального иммунитета за счет своих
литических и опсонических компонентов. Существует прямая функциональная связь
между системой комплемента и фагоцитарной системой, поскольку прямое или
опосредованное через антитела связывание компонентов комплемента является
необходимым условием фагоцитоза.
1.3.2. ИНТЕРЛЕЙКИНЫ
Растворимые вещества, которые способствуют взаимодействию между лейкоцитами,
носят название интерлейкинов (IL). Особенно интенсивный синтез интерлейкинов
отмечают при Т-клеточной стимуляции. IL-1 секретируется макрофагами и другими
клетками и активизирует покоящиеся Т-лимфоциты. Эту же функцию осуществляет и
выделяемый Th интерлейкин-2, который стимулирует рост Т-клеток и участвует в
антивирусном и антиопухолевом иммунитете.
Кроме того, IL-1 активирует синтез белков острой фазы печени и является пирогенным,
что также оказывает влияние на патогены (в частности, на репликацию вируса) за счет
высокой температуры тела. Дополнительные факторы, такие как IL-3- IL-6, входят в
перечень веществ, участвующих в регулировании роста и дифференциации лейкоцитов.
1.3.3. ИНТЕРФЕРОНЫ
Интерферон (IFN) был впервые описан в 1957 году Isaacs and Lindenmann как
антивирусное вещество, секретируемое многими типами клеток в ответ на вирусную
инфекцию. Его действие непосредственно направлено на репликацию вируса, в основном
на его транспортный уровень. Известны 3 класса интерферонов:
Исследования показали, что у всех трех пораженных лошадей отсутствовали В-клетки, все
субклассы Ig при нормальном количестве Т-клеток. Несмотря на то, что животные были
нормальными при рождении и в течение всего раннего периода жизни, все три пациента
пали в возрасте 18 мес. На вскрытии отмечено отсутствие первичных лимфо-идных
фолликулов и зародышевых центров в лимфоузлах и селезенке. Ткани лишены
плазматических клеток. Другие поражения связаны с перемежающимися инфекциями,
которые возникают вследствие дисфункции гуморального звена иммунной системы.
Селективный IgG- дефицит - описан в виде дефицита IgG2 у красного датского скота.
Клинически животные с этим иммунодефицитом имеют повышенную чувствительность к
пиогенным инфекциям, гангренозным маститам, бронхопневмониям и перитонитам.
Способ наследования IgG-дефицита не установлен, нет данных по патогенезу и дефектам
клеток при его возникновении.
Вирус чумы собак (CDV), вирус лейкемии кошек (FeLV), парвовирусы вызывают вирус-
индуцированную иммунную дисфункцию через различные механизмы.
Вирус чумы собак тесно связан с вирусом кори, и хотя наличие эквивалентных вирусных
рецепторов на поверхности Т-клеток собак не доказано, имеются убедительные
клинические и экспериментальные данные, показывающие, что этот вирус также
вызывает состояние временной иммуносупрессии. В результате инфицирования им собак-
гнотобиотов наблюдается атрофия тимуса с генерализованным лимфоидным истощением,
приводящее к лимфопении. При этом нарушается бласттрансформация лимфоцитов in
vitro, однако способность отторгать аллогенный кожный трансплантат не изменяется.
Степень лимфоидного истощения, и, следовательно, появление Т-клеточной
иммуносупрессии коррелирует с исходом болезни. Более сильно поражены животные, у
которых отсутствует ответ на внутрикожное введение ФГА, они быстро погибают от
энцефалитов, в то время как животные, сохранившие Т-клеточный иммунный ответ, часто
выздоравливают.
Нарушение пассивной передачи материнских антител может иметь место у любого вида
домашних животных, но наиболее документировано у лошадей. Сообщения показывают,
что нарушение передачи материнских антител может достигать у 24% жеребят.
Нарушение передачи может определяться материнскими факторами, а также состоянием
самих новорожденных и факторами окружающей среды. У некоторых матерей может
нарушаться образование молозива с достаточной концентрацией иммуноглобулинов,
преимущественно из-за генетического дефицита. С другой стороны, матери с нормальной
продукцией молозива теряют иммуноглобулины в связи с преждевременной лактацией.
Преждевременная лактация является главной причиной нарушения пассивной передачи и
ассоциируется с плацентитами, двойневой беременностью и преждевременным
отделением плаценты у лошади. Концентрация колостральных иммуноглобулинов ниже
чем Юмг/мл, свидетельствующая о ненормальной продукции или преждевременной
лактации, вызывает нарушение в пассивной передаче.
Более точным методом, с помощью которого определяется уровень IgG в сыворотке крови
животных, является простая радиальная иммунодиффузия. Этот тест является
коммерчески доступным, но время инкубации (18-24 часа), необходимое для постановки
реакции, сдерживает его использование для диагностики пассивной передачи в течение
первых критических 12 часов жизни. Латекс-агглютинация является коммерчески
доступным тестом в практике для диагностики пассивной передачи и является более
точным, чем турбидиметрический тест. Данные латекс-агглютинации на 90% согласуются
с данными РИД в определении уровня IgG менее чем 4 мг/мл. Латекс-тест требует смеси 5
мкл исследуемой сыворотки с разведенным соответствующим образом набором с
последующей визуальной оценкой агглютинации. Главным недостатком этого теста
является то, что он не позволяет дифференцировать концентрацию 4 мг/мл от 8 мг/мл у
жеребят.
ВИРУСЫ: вирус чумы собак, парвовирус собак, вирус лейкемии кошек, вирус
панлейкопении кошек, герпесвирус 1 лошадей, вирусная диарея КРС
РАДИАЦИЯ
НАРУШЕНИЯ ЭНДОКРИННОЙ СИСТЕМЫ: дефицит гормона роста, эстрогенная
токсичность
Висны
Алеутской болезни
Лейкемии кошек
Болезни Марека
Лейкоза крс
Лейкоза мышей
I I
V V
ИЗМЕНЕННЫЕ ФУНКЦИИ
ИЗМЕНЕННЫЕ ФУНКЦИИ
ВЗАИМОДЕЙСТВУЮЩИХ ИЛИ
ПОРАЖЕННЫХ ИММУНОЦИТОВ
БЛИЗЛЕЖАЩИХ ИММУНОЦИТОВ
Гибель клеток
Истощение предшественников
Уменьшение пролиферации
Пониженная эффективность
Нарушение мембраны
клеточных взаимодействий
Измененная циркуляция
Экспансия определенных клеточных
Пониженная экспрессия рецепторов
клонов
Неспособность к антигенной >>> Поликлональная пролиферация
презентации
Несбалансированная продукция
Антигенная презентация
растворимых медиаторов
"неуполномоченными" клетками
"Антигенная гиперконкуренция"
Нарушение продукции растворимых
Неконтролируемое воздействие
медиаторов
интерлейкинов
Пониженная чувствительность к
Избыточная продукция клеток-
внешнему стимулу
супрессоров или факторов
Пониженная реактивность к
Излишняя активация регуляторных
растворимым медиаторам
циклов
I I
V V
СНИЖЕНИЕ ЭФФЕКТОРНЫХ ФУНКЦИЙ
Снижение фагоцитоза
I
V
ИММУНОСУПРЕССИЯ
Важным является то, что в лимфоидной системе должен быть хотя бы один подходящий
участок для персистенции вируса. Все вирусы, которые реплицируются в лимфоцитах и
макрофагах, известны. Высокоцитопатические вирусы, такие как адено- и энтеровирусы,
способны персистировать в этих клетках, устанавливая т.н. культуральное равновесие с
клеточной популяцией. В присутствии этих персистирующих вирусов инфицированные
клетки могут нормально функционировать, прекращать или изменять свои функции.
4.5.1. Возраст
Установлено, что очень молодые животные часто более восприимчивы к инфекциям, чем
взрослые. Это связано с иммунной компетенцией организма, особенно с Т-клеточной ее
функцией. Пожилые особи также более чувствительны к вирусным инфекциям, что
связано с их иммунным статусом. То, что молодые животные более восприимчивы к
иммунодепрессивному действию большинства вирусов, было показано в различных
системах, включая ретровирусы. Однако, если патологические процессы, вызываемые
вирусом иммунологически опосредованы, снижение иммунной компетенции в ряде
случаев может оказаться благоприятным. Примером может служить инфицирование
мышей вирусом лимфоцитарного хориоменингита (LCMV), летальный эффект которого
зависит от функционирования Т-лимфоцитов. У новорожденных мышей эти клетки
недостаточно развиты, поэтому вирус накапливается в высоких титрах, но болезнь
протекает не в острой форме. У этих мышей развивается Т-клеточная толерантность к
LCMV, которая, в свою очередь, вызывает проявление генерализованной
иммунодепрессии.
4.5.2. Генотип
Устойчивость к вирусным инфекциям контролируется на генетическом уровне. Эти гены
могут быть ассоциированы с главным комплексом гистосовместимости (МНС) или
присутствовать в другом месте генома. В некоторых случаях генетический контроль
макрофагальной или МК-клеточной функций требует сопутствующих действий генов
локусов МНС и других вовлеченных локусов. Было установлено, что у вирус-
резистентных мышей, как правило, не наблюдается подавления иммунной реактивности
при абортивных инфекциях, не учитывая поражения клеток.
Реакция
Т Лейкограмма гиперчувствительности
замедленного типа (in vivo)
Метод спонтанного Реакция
бласттрансформации
розеткообразования Реакция отторжения
трансплантата
(экспериментальная)
Метод иммунофлюоресценции
В Метод комплементарного Иммунизация (иммунный ответ in
розеткообразования vivo на введение вакцин)
Метод гемолитических бляшек
Радиальная иммунодиффузия
Ракетный
иммуноэлектрофорез
Иммуноферментный анализ
Радиоиммунный анализ
Реакция бласттрансформации
(с митогеном лаконоса)
Метод исследования
миграции лейкоцитов с
использованием камеры Бойдена
Лейкограмма Определение
фагоцитарного индекса
Нейтрофилы Световая микроскопия
Определение
Электронная микроскопия бактерицидной активности
Реакция восстановления
нитросинего тетразолия
Хемилюминесценция
Определение гемолитической
Комплемент Радиальная иммунодиффузия
активности комплемента (СН50)
Другие
Методы определения, используемые в возможные
Иммуно-дефициты
практике методы
определения
Селективные дефициты
РИД ИФА МГБ ИФМ
иммуноглобулинов
Гипоплазия тимуса
Метод спонтанного розеткообразования
(черно-пестрый 1
РГЗТ Гистология (тимус, селезенка, РБТЛ
датский скот,
лимфоузлы) Лейкограмма (лимфопения)
бультерьеры и др.)
Метод
Определение бактерицидной активности определения
Реакция восстановления нитросинего миграции
Гранулоцитопатия собак тетразолия Исследование мазков крови лейкоцитов \
(нейтрофилия, гиперсегментированные Определение
нейтрофилы) фагоцитарного
индекса
Определение
фагоци- >
Синдром Чедиак- Исследование мазков крови (аномальные
тарного индекса
Хигаши гранулы)
и бактерицидной
активности
Циклический
Лейкограмма
гематопоэз Колли
Определе- \ ние
СЗ дефицит у гемоли-тической
РИД
Британских спаниелей активности
комплемента
6.1. ИММУНОСТИМУЛЯТОРЫ
6.2. ИММУНОСУПРЕССАНТЫ
Исторически, глюкокортикоиды использовались как лекарственные препараты,
угнетающие иммунные функции у пациентов с заболеваниями иммунной системы.
Получение цитотоксических антираковых препаратов, способных вызывать
иммуносупрессию, дает возможность дополнительного выбора терапевтических средств
для лечения пациентов с аутоиммунными болезнями. Цитотоксические препараты
подразделяются на два типа: клеточно-циклические препараты, которые уничтожают
быстроделящиеся клетки (антиметаболиты) и неклеточно-циклические препараты,
являющиеся токсическими для всех клеток (алкилирующие агенты). Большинство из этих
препаратов используется в терапии рака и трансплантации органов, однако, некоторые из
них используются самостоятельно или в сочетании с глюкокортикоидами для лечения
аутоиммунных или других иммунологических нарушений.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Иммунодефициты - одна из главных проблем современной клинической иммунологии.
Последние годы характеризуются накоплением новых данных об отдельных клинических
формах первичных и вторичных иммунодефицитов, о возможных патогенетических
механизмах их развития, о подходах к диагностике и лечению. Этому способствуют
достижения в развитии иммунологии, подведение под нее прочного генетического
фундамента, совершенствование методологии иммунологических методов оценки
состояния организма на различных этапах онтогенеза.
Вместе с тем, даже имея в своем арсенале необходимые тесты, определенную трудность
для ветеринарного специалиста представляет интерпретация результатов лабораторных
показателей при оценке иммунного статуса. Традиционным считается, что снижение
показателей иммунного статуса указывает на иммунодефицитное состояние (в Т-, или/и
В-клеточных звеньях иммунитета), а повышение иммунологических показателей является
отражением аутоиммунных процессов. В действительности, увеличение количества Т- и
В-лимфоцитов, уровня иммуноглобулинов, повышение фагоцитарной активности может
быть следствием практически любого повреждения (механические, термические,
радиационные травмы, токсикозы и т.д.), а также реакцией на любой проникающий в
организм чужеродный агент. Еще более сложно интерпретировать результаты тестов,
связанных с определением относительного и абсолютного количества Т- и В-лимфоцитов
(Е- и ЕАС- розетко-образования), числа лейкоцитов и лимфоцитов в периферической
крови и т.д. В этих случаях, на фоне иммунодефицита, количество Т-супрессоров может
значительно возрастать, что приводит к нормальным показателям общего количества Т-
лимфоцитов. В этой связи необходимость использования разноплановых
иммунологических тестов первого и второго уровней очевидна.
Учитывая темпы роста научных знаний в иммунологии и свой первый опыт обобщения
большого круга столь сложных вопросов, мы, разумеется, не можем претендовать на
всестороннее освещение всех проблем, связанных с иммунодефицитами, а также избежать
упущений и неточностей. Тем не менее, читатели почерпнут из этой книги полезную
информацию по многим аспектам, связанным с недостаточностью иммунной системы.
Мы с благодарностью примем все замечания и пожелания, относящиеся к этой серьезной
проблеме.