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Manual de prácticas y talleres en Biología General - Universidad del Valle – Departamento de Biología 63

F. Castro, C. Rosero, F. Rondón , Enero 2006

PRACTICA 5
LA DIVISION CELULAR - MITOSIS

INTRODUCCION
La división celular es el proceso por el cual el material celular se divide entre dos nuevas
células hijas. En los Procariótas es un proceso relativamente sencillo, durante el cual dos
cromosomas hijos se unen a puntos diferentes de la membrana celular. Cuando la membrana
se alarga, los cromosomas se separan. La membrana celular luego se invagina y se forma una
nueva pared celular, completándose la división de las células hijas.

En los Eucariótas, éste proceso es más complejo, esto debido a la vasta cantidad de material
genético contenido en cromosomas diferentes. Las células en división pasan a través de una
secuencia regular de crecimiento y división, conocida como ciclo celular. Podemos resumir el
ciclo celular en el siguiente esquema:

Citocinesis

Fase
G1

División
celular Mitosis

Interfas
Fase
G2 Fase
S

Figura 1. El ciclo celular. El ciclo celular consiste en una fase G1, durante la cual las moléculas y
estructuras citoplasmáticas aumentan; Una fase S, durante la cual los cromosomas se duplican; una
fase G2, durante la cual comienza la condensación de los cromosomas y el ensamblaje de las
estructuras requeridas para la mitosis y la citocinesis. En la mitosis, los cromosomas duplicados son
distribuidos entre los dos núcleos hijos; y la citocinesis, durante la cual el citoplasma se divide,
separando a la célula materna en dos células hijas.

OBJETIVOS
1. Preparar placas teñidas con orceína acética para la observación al microscopio de la
división celular.
2. Identificar morfológicamente las características de la interfase y de las fases de la mitosis.
3. Reconocer las diferentes fases de la mitosis en el meristemo radical de la cebolla (Allium
cepa).
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MATERIALES

Cada estudiante debe traer:

Guantes quirúrgicos y tapa boca


Cuchilla nueva de afeitar
Pincel delgado
Laminas porta objetos
Laminillas cubre objetos
Una Bayetilla y papel absorbente.

Suministrado por el laboratorio:


Microscopio
Aceite de inmersión
Vidrio Reloj
Solución fijadora: Etanol, ácido acético glacial
Orceina acética diluida
Bulbos de cebolla blanca
Trozos de toallas de papel secante
Mechero de Alcohol
Papel limpia lentes inmersión
Xilol como disolvente
Placa de cromosomas preparada

PROCEDIMIENTO
Los bulbos de cebolla se colocan durante varios días (15 a 20 días) en frascos con agua de la
llave para estimular el crecimiento de las raíces. Esta agua se cambia cada 24 horas o menos.
Cuando las raíces alcanzan una longitud de 2 a 3 cm, Se corta el ápice transversalmente y se
coloca en solución fijadora a 4ºC hasta su uso en el laboratorio (Este proceso se les adelantará
en el salón de preparaciones para tener listo tejidos para el día de su práctica)

1. Saque las raíces de la solución fijadora y enjuáguelas con agua destilada. Remueva el
exceso de agua.

2. Pase las raíces a un tubito y agregue HCL 1N hasta cubrirlas completamente.

3. Incube los tubos con las raíces a 37 °C por 20 minutos

4. Saque las raíces de la solución ácida y enjuaguelas con agua destilada. Remueva el exceso
de agua

5. Ahora pase las raíces a un porta objetos y corte las puntitas, que son el tejido
meristematico; punta de la raíz de contorno romo, casi cónico, sitio de mucha actividad
mitótica permite el crecimiento primario.

6. Agregue una gota de colorante de orceina sobre las raíces cortadas y píquelas bien con un
bisturí o cuchilla. Deje actuar el colrante por 10 minutos.
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7. cubra la preparación con un cubre objetos y realice la disgregación y el aplastamiento de


los tejido; debe usar un borrador, se hace presión sobre toda la laminilla (cubre objetos)
para que el tejido se disperse, y no quede grumoso, debe observar cuidado para no partir
la laminilla.

8. Observe en el Microscopio comenzando por el objetivo de menor aumento

9. Realice esquemas de la interfase y de cada una de las etapas de la mitosis en cebolla.


Utilice el objetivo de mayor aumento, pero recuerde que debe agregar previamente una
gota de aceite de inmersión.

10. Después de usar el objetivo 100X, debe limpiarlo con papel para lentes impregnado con
xilol.

11. Calcule el Índice Mitótico (IM) observado en su placa previamente preparada. Para ello
utilice la siguiente fórmula:

IM = Número de células en Mitosis


500 células

RESPONDA
1. ¿Que tipo de colorante es la orceína? ¿Cuál es su composición química?
2. ¿Cuál es su efecto sobre la cromatina? ¿Qué diferencia tiene con el DNA?
3. ¿Por qué se eligió el meristemo radicular de cebolla y no otro tejido vegetal?
4. ¿Qué es meristemo?
5. ¿La mitosis en células vegetales es igual a la presentada en células animales? Cuáles son
las diferencias, si las hay?
6. ¿Cuántos cromosomas tiene la cebolla?
7. ¿Cómo se lleva a cabo la división celular en células de tejidos hematopoyéticos?
8. ¿En qué fases se encuentran los cromosomas más condensados?, los menos condensados?
9. ¿Qué significa la posición ecuatorial de los cromosomas? Y ¿qué la posición de los
cromosomas en los polos?

BIBLIOGRAFÍA

COCA PRADO, M. 1982, Cromatina. Investigación y Ciencia junio 1982. Pág. 80.

GLOVER, CAYETANO GONZALEZ & RAFF. 1993. Centrosoma. Investigación y


ciencia –Agosto 1993. Pág. 22.

LACADENA, J.R. 1985. Comportamiento cromosómico. Investigación y Ciencia noviembre


1985. Pág. 92.

MARTINEZ,M. J. Cinetocoro. Investigación y Ciencia. Septiembre 1993. Pág. 76.


McINTOSH, J. R. & K.L. McDONALD. 1989. Huso Mitótico. Investigación y Ciencia
diciembre 1989. Pág. 18.

MORENO, S. 1992.Así comienza la Mitosis. Investigación y Ciencia. Abril de 1992. Pág.


82.
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MURRAY, A.W. & M.W. KIRSCHNER. 1991. Control del Ciclo Celular. Investigación y
Ciencia. Mayo 1991. Pág. 26.

UN VISTAZO A LA RED

Google.com (motor de búsqueda para términos de interés)


http://www.dipbot.unict.it/tavole_es/tavola02/02a.html
http://www.dipbot.unict.it/tavole_es/tavola02/02c.html
http://www.dipbot.unict.it/tavole_es/tavola02/02d.html
http://www.dipbot.unict.it/tavole_es/tavola02/02e.html
http://www.ecc.cc.mo.us/acad/depts/BI/plant_mitosis_nolabels.html
http://www.fbmc.fcen.uba.ar/genetica1/GUIATP2003-2.pdf
http://genetica.fcien.edu.uy/protocolos/MITOS2002.doc
http://scidiv.bcc.ctc.edu/rkr/Biology201/labs/pdfs/Mitosis201.pdf
http://www.kean.edu/~breid/chrom2st.htm
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http://www.biology.arizona.edu/cell_bio/tutorials/cell_cycle/main.html
http://www.biologia.arizona.edu/cell/tutor/mitosis/mitosis.html
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http://www.park.edu/bhoffman/courses/bi320/recaps/mitosis.htm
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http://interbiologia.virtualave.net/celula/ccelular.html
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Replicación
DNA
División Meiótica 1

Cromosomas
homologos
plano ecuatorial

División
celular 1

Cromosom
as
homólogos,
División meiotica 2

individualm
ente en el
plano
ecuatorial

Div. celular 2
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Célula Parental

Cromatina condensada
Profase
en Cromosomas

Metafase
Cromosomas
alineados en el plano
ecuatorial

Cromatidas
Anafase hermanas separadas
Centrómeros
divididos

Telofase
Cromatina extendida
Citoplasma dividido

Dos células hijas diploides


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Homólogo
paterno Célula
parental

Homólogo
materno

Profase 1
Primera División celular

Metafase 1

Anafase 1

Telofase 1

2 Células hijas
Profase 2
Segunda división celular

Metafase 2

4 Células Hijas

Anafase 2
Telofase 2
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MITOSIS MEIOSIS
División celular caracterizada por la replicación de los Es la partición celular de un material genético igual para producir las
cromosomas y la formación de dos núcleos idénticos. células sexuales (gametos o esporas).
Resultan 4 células hijas (n) genéticamente variables
Sucede en célula somática
Resultan dos células hijas (2n) genéticamente iguales
Interfase

• Fase de mayor actividad metabólica. Solamente se ve la cromatina.

Profase Profase 1 Profase 2


• Los cromosomas se vuelven • Los cromosomas son visibles
• Los cromosomas son apenas visibles. visibles y condensados • Se forma huso acromático
• El huso acromático se forma. • Fase de tetradas
• Hay evidencia de nucleolos • Entrecruzamiento

Metafase Metafase 1 Metafase 2


• Cromosomas Homólogos se • Cromosomas ordenan individual/
• Los cromosomas se ordenan de manera individual en la placa ordenan en zona ecuatorial. pares de cromátidas
ecuatorial.
• Hay empaquetamiento del DNA, mayor grado de condensación.

Anafase Anafase 1 Anafase 2


• Cromosomas separados en las
• Ambas cromátides de un cromosoma • Separación de homólogos cromátidas y éstas son haladas a
• Se separan y son haladas hacia los polos. Reducción de cromosomas 2n a n polos.

Telofase Telofase 1 Telofase 2


• Cromosomas homólogos sé • Cromátidas se encuentran en
• Las cromátides han llegado a los polos. Encuentran en los Polos. los polos.
• Se evidencia la citocinesis • Se forman 4 células haploides
(n)
Interfase (La cromátina se descondensa se vuelve invisible)
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MAPA CONCEPTUAL: PRACTICA 5 LA DIVISION CELULAR - MITOSIS


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DIAGRAMA DE FLUJO: PRACTICA 5 LA DIVISION CELULAR - MITOSIS


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ESQUEMAS: PRACTICA 5 LA DIVISION CELULAR - MITOSIS

1. Observación de células en mitosis

Interfase Profase

Metafase Anafase

Telofase

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