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D O S A N A L I T I C O S E N A L I M E N T A R I A

M E T O D O S O F I C I A L E S D E A N A L I S I S

Productos
derivados de
la uva,
aguardientes
y sidras
PANREAC QUIMICA, S.A. publica una nueva
edición de sus folletos de Métodos Analíticos en Ali-
mentaria, en la que podrán apreciar a simple vista
un cambio de formato respecto a las anteriores.

M E T O D O S A N A L I T I C O S E N A L I M E N T A R I A

Esta nueva imagen, pretende ser una expresión de


los cambios que con el tiempo hemos experimentado
en nuestros campos de actividad, puesto que si con-
tinuamos manteniendo una importante implanta-
ción en el sector alimentario como fabricantes de
reactivos para análisis PANREAC y de los aditivos
alimentarios ADITIO, actualmente hemos aumen-
tado nuestra aportación de productos para el análisis
alimentario con nuestras líneas de Cromatografía en
Capa Fina PANREAC-TLC y Medios de Cultivo
Deshidratados para Microbiología CULTIMED.
La colección Métodos Analíticos en Alimentaria se
compone de 6 folletos monográficos, por campos de
alimentos, que recogen una transcripción íntegra
de los métodos oficiales de análisis en España, que
a su vez son publicados en los correspondientes
B.O.E. mencionados en el índice de cada
monografía incorporando los reactivos y productos
auxiliares PANREAC en la calidad considerada
más idónea, así como los medios de cultivo
CULTIMED.
M
Los títulos de las 6 monografías son:

Aceites y grasas
Aguas potables
de consumo público
y aguas de bebida envasadas
Carne y productos cárnicos
Cereales, derivados de cereales
y cerveza
Leche y productos lácteos
Productos derivados de la uva,
aguardientes y sidras
Obviamente esta edición ha sido actualizada con las
disposiciones publicadas hasta el momento, que
establecen nuevos procedimientos o que modifican
notablemente características anteriormente estable-
cidas.
Por último, comentarles que están a su disposición
además de esta colección, nuestros:
Catálogo General de Reactivos PANREAC
Catálogo ADITIO de Aditivos Alimentarios
Catálogo CULTIMED de Medios de Cultivo Deshi-
dratados
Catálogo PANREAC-TLC de Placas, Folios y
Accesorios para Cromatografía en Capa Fina.
Productos derivados
de la uva:
I N D I C E Vinos
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977,
25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977,
30-8-1979 Y 14-10-1981)
1- Examen organoléptico
(B.O.E. 22-7-1977) ............................ 9
2- Ensayos previos de conservación ....... 9
3a- Color (B.O.E. 14-10-1981) .................. 10
3b- Color de los vinos (aplicable a vinos
tintos y rosados (B.O.E. 22-7-1977) ... 14
4a- Masa volúmica y densidad relativa
(método picnométrico) ........................ 14
4b- Masa volúmica y densidad relativa
(método areométrico) ......................... 15
5a- Título alcohométrico (método
picnométrico)...................................... 22
5b- Título alcohométrico (método
areométrico) (B.O.E. 23-7-1977) ......... 29
6- Extracto seco total ............................. 31
7a- Azúcares reductores (defecación
plúmbica) (provisional) ........................ 34
7b- Azúcares reductores (defecación
mercúrica) (provisional) ....................... 36
7c- Azúcares reductores (valoración)
(B.O.E. 30-8-1979) ............................. 37
8- Glicerol (Glicerina) (B.O.E. 23-7-1977).. 38
9- 2,3-Butanodiol ................................... 40
10a- Sacarosa (método cualitativo
colorimétrico)...................................... 42
10b- Sacarosa (método cuantitativo) ........... 43
11- Cenizas ............................................. 43
12- Alcalinidad de cenizas ........................ 44
13- Fosfatos ............................................. 44
14- Calcio (método complexométrico) ....... 45
15- Magnesio ........................................... 46
16- Hierro (método colorimétrico del
sulfocianuro) ....................................... 47
17- Cobre ................................................ 48
18- Potasio (fotometría de llama) .............. 49
19- Sodio (fotometría de llama) ................. 49
20- Acidez total ........................................ 50
21- Acidez volátil ...................................... 51
22- Acido Sórbico en el destilado para
acidez volátil ...................................... 52
23- Acidez fija (B.O.E. 25-7-1977) ............ 53
24a- Acido Tartárico total (método del calcio
racemato)........................................... 53
24b- Acido Tartárico total (método
complexométrico) ............................... 54
25- Acido Láctico ..................................... 54
26- Acido Cítrico ...................................... 56
M
27- Sulfatos (B.O.E. 26-7-1977) ............... 58 7- Azúcares totales y reductores ............ 103
28a- Anhídrido Sulfuroso (método Paul) ......... 59 8- Acido Ascórbico ................................ 104
28b- Anhídrido Sulfuroso (método Ripper doble) 60 9- Relación glucosa/fructosa ................. 105
29- Acido Sórbico .................................... 61 10- Nitrógeno total .................................. 105
30- Cloruros (B.O.E. 30-8-1979) ............... 62 11- Etanol ............................................... 106
31- Acido Benzoico (B.O.E. 26-7-1977) .... 63 12- Indice de formol ................................ 107
32- Bromo total ....................................... 64 13- Prolina .............................................. 107
14- Acido Sórbico .................................... 108
33- Bromo orgánico ................................. 65
15- Acido Benzoico ................................. 108
34- Acidos Monobromoacético y
16- Hidroximetilfurfural ............................. 109
Monocloroacético de origen orgánico 17- Cenizas ............................................. 109
(método cualitativo) (provisional) ......... 66 18- Material mineral insoluble en Acido
35- Indice de Permanganato Clorhídrico al 10% ............................ 110
(B.O.E. 27-7-1977) ............................ 67 19- Fósforo total ...................................... 110
36a- Determinación de presencia de vino 20- Sulfatos ............................................. 111
procedente de “híbridos productores 21- Anhídrido Sulfuroso ........................... 112
directos” (método cualitativo) ............. 68 22- Potasio .............................................. 112
36b- Determinación de presencia de vino 23- Sodio ................................................ 113
procedente de “híbridos productores 24- Arsénico ............................................ 113
directos” (provisional) ........................ 68 25- Hierro ................................................ 114
37- Metanol (Alcohol metílico) (método del 26- Plomo ............................................... 115
ácido cromotrópico) .......................... 69 27- Estaño ............................................... 115
38- Nitrógeno (método Kjeldhal) .............. 70 28- Cobre ............................................... 116
29- Zinc ................................................... 116
39a- Flúor (provisional) .............................. 71
39b- Flúor (B.O.E. 30-8-1979) ................... 73
40- Hidroximetilfurfural (provisional)
(B.O.E. 27-7-1977) ............................ 74
Vinagres
41- Determinación cualitativa de Acido
Sórbico, Benzoico, p-Clorobenzoico, METODOS DE ANALISIS
Salicílico, p-Hidroxibenzoico y su éster (B.O.E. 27-7-1977, 30-8-1979
etílico ................................................ 75 Y 14-10-1981)
42- Investigación de derivados
monohalogenados del Acido Acético 1- Extracto total (B.O.E. 27-7-1977) ....... 119
(B.O.E. 30-8-1979) ............................ 77 2- Acidez total (grado acético) ................ 119
43- Grado alcohólico en potencia ............ 78 3- Acidez fija ......................................... 119
4- Acidez volátil ..................................... 120
44- Grado alcohólico total ....................... 78
5- Sulfatos ............................................. 120
45- Colorantes sintéticos ......................... 78
6- Acetilmetilcarbinol (Acetoína)
46- Mercurio ............................................ 79 (B.O.E. 30-8-1979) ............................ 121
47- Plomo ................................................ 81 7- Cenizas (B.O.E. 27-7-1977) ............... 121
48- Relación P/a ..................................... 82 8- Indice de oxidación ........................... 122
49- Anhídrido Carbónico (método aprobado 9- Metanol (Alcohol Metílico), método del
pero no publicado en el B.O.E.) ......... 82 Acido Cromotrópico (B.O.E. 30-8-1979). 123
50- Etanal (método aprobado pero no 10a- Acido Tartárico (método cualitativo) .... 123
publicado en el B.O.E.) ...................... 84 10b- Acido Tartárico (método cuantitativo) .. 124
51- Presión del Anhídrido Carbónico 11- Cobre ............................................... 125
(B.O.E. 14-10-1981) .......................... 85 12- Cloruros ............................................ 126
52- Antisépticos y Antifermentos (método 13- Grado alcohólico ................................ 126
microbiológico) .................................. 85 14- Arsénico ............................................ 127
15- Zinc ................................................... 128
Zumos de Uva 16-
17-
Prolina ..............................................
Acido Acético de síntesis
129

(B.O.E. 14-10-1981) .......................... 129


METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 7-5-1988)
Orujos, Heces y Lías
1- Grado Brix ........................................ 89
2- Densidad .......................................... 98 METODOS DE ANALISIS
3- pH .................................................... 99 (B.O.E. 30-8-1979)
4- Acidez total ...................................... 99
5- Acidez volátil ..................................... 100 1- Contenido alcohólico en orujos, heces
6- Sólidos solubles ................................. 101 y lías ................................................. 133
Aguardientes 8-
9-
Sacarosa ...........................................
Acidez total .......................................
160
161
10- Materias reductoras
compuestos: (Azúcares reductores) ........................
11- Plomo ................................................
161
163
Whisky 12- Zinc ...................................................
13- Cobre ................................................
163
164
14- Arsénico ............................................ 164
METODOS DE ANALISIS (Anexo I de la
Orden 3-4-1985, B.O.E. 13-4-1985)

1- Obtención del destilado ..................... 135


Anís
2- Furfurol ............................................. 135 METODOS DE ANALISIS
3- Extracto seco .................................... 136 (B.O.E. 13-5-1987)
4- Esteres .............................................. 136
5- Alcoholes superiores .......................... 137 1- Obtención del destilado ..................... 167
6- Metanol ............................................. 138 2- Peso específico del aceite esencial
7- Grado alcohólico ............................... 138 natural (en materia prima) ................... 167
8- Aldehídos .......................................... 139 3- Punto de fusión del aceite esencial
9- Acidez volátil ...................................... 140 natural (en materia prima) ................... 168
10- Cenizas (materia mineral total) ............ 140 4- Grado alcohólico ............................... 169
11- Plomo ................................................ 141 5- Azúcares totales ............................... 169
12- Zinc ................................................... 142 6- Anetol ............................................... 170
13- Cobre ................................................ 142 7- Metanol ............................................. 171
14- Arsénico ............................................ 142 8- Bases nitrogenadas ........................... 172
9- Aceites esenciales ............................. 173
10- Hidroximetilfurfural y furfural ............... 174
Ron 11-
12-
Arsénico ............................................
Plomo ...............................................
174
176
13- Zinc ................................................... 176
METODOS DE ANALISIS 14- Cobre ................................................ 177
(B.O.E. 24-10-1985)

1-
2-
Obtención del destilado ......................
Furfurol (Furfuraldehído) ......................
145
145
Sidras:
3-
4-
Extracto seco reducido ......................
Esteres ..............................................
146
147
Sidra y otras bebidas
5-
6-
Alcoholes superiores ..........................
Metanol (Alcohol Metílico) ..................
148
148
derivadas de la
7-
8-
Grado alcohólico ...............................
Aldehídos ..........................................
149
149
manzana
9- Acidez volátil ..................................... 150 METODOS DE ANALISIS
10- Azúcares reductores .......................... 150
(B.O.E. 28-7-1980)
11- Plomo ............................................... 153
12- Zinc ................................................... 153
13- Cobre ................................................ 154 1- Eliminación del Anhídrido
14- Arsénico ............................................ 154 Carbónico .......................................... 179
15- Sacarosa .......................................... 155 2- Grado alcohólico adquirido ................ 179
3- Azúcares reductores .......................... 179

Ginebra 4-
5-
Anhídrido Sulfuroso ............................
Metanol (Alcohol Metílico) ..................
179
179
6- Acidez volátil ..................................... 179
METODOS DE ANALISIS 7- Extrato seco total .............................. 179
(B.O.E. 25-10-1985) 8- Cenizas ............................................. 179
9- Hierro ................................................ 179
1- Obtención del destilado ..................... 157 10- Etanal ................................................ 179
2- Furfurol (Furfuraldehído) ..................... 157 11- Anhídrido Carbónico .......................... 180
3- Extracto seco .................................... 158
4- Bases nitrogenadas ........................... 158
5- Alcoholes superiores .......................... 158
6- Metanol (Alcohol Metílico) .................. 159
7- Grado alcohólico ............................... 160
M

Relación de reactivos
y productos auxiliares
que se utilizan en los
métodos analíticos,
Productos derivados de
la Uva, Aguardientes
y Sidras ....................................... 184

Aditivos y
coadyuvantes
tecnológicos para
uso alimentario
industrial ................................. 190
Productos derivados
de la uva:
Vinos

NOTA: Se han consignado todos los métodos


oficiales de análisis de vinos publicados en el
B.O.E., pero no los prescritos por el Reglamento
2676/90 de la C.E., por no estar suficientemente
extendidos en nuestro país y, por tanto, no tener
una aplicación generalizada.
M
METODOS DE ANALISIS Apreciar y caracterizar el olor a “vinoso”, que
(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977, acusa vino nuevo, el “afrutado”, el del vino que
25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977, comenzó la “crianza”, la riqueza alcohólica, olores
30-8-1979 Y 14-10-1981) ácidos volátiles, olores que acusen defectos de
elaboración, etc., y la presencia de enfermedades
1. EXAMEN ORGANOLEPTICO y alteraciones.
En degustación de más precisión, como será
1.1. Examen del color. la necesaria para definir características de un tipo
Determinar mediante apreciación visual las de vino y que han de servir de referencia, es nece-
características, bien definidas, del color del vino. sario reunir un grupo determinado de buenos
Observar el vino colocado en copas de cristal fino catadores, y realizar un nú-mero de catas sufi-
e incoloro, o bien en tazas de plata o de fondo cientes para obtener resultados satisfactorios
plateado, el cual presentará diferentes formas estadísticamente según las normas específicas
convexas o abolladas, para apreciar el vino en existentes.
diferentes espesores y sobre fondo brillante.
Utilizar las siguientes calificaciones del color 1.6. Referencia.
para vinos tintos: rojo rubí, rojo violáceo o mora- 1.6.1. Amerine, M.A., y Feduchy, E.: “Los
do, viraje a tono cebolla o amarillento. resultados de la cata del vino y del análisis quími-
Según la intensidad del color, el vino tinto pue- co”. Boletín I.N.I.A., 31, 353-375, 1956.
de calificarse en: vino tinto, rosado, clarete, y si
tiene mucho o poco color dentro de estos tipos,
2. ENSAYOS PREVIOS DE
se dirá que tiene mucha o poca capa.
CONSERVACION
En vinos blancos, utilizar las calificaciones de
tono verdoso, casi incoloro, amarillo, amarillo-oro, 2.1. Prueba del aire.
ambarino, pajizo claro u oscuro (rancia), etc., y en 2.1.1. “Quiebras” tánico-férricas o fosfatoférri-
todos los tipos, si el color es blanco, o si azulea, cas.- Dejar el vino en contacto con el aire (en una
pardea o ennegrece. copa mediada), en sitio fresco y al resguardo de la
1.2. Formación de espuma. luz. Observar al cabo de 12 o más horas. El entur-
Observar el aspecto de la espuma que se for- biamiento o el ennegrecimiento pone de manifies-
ma al agitar el vino en la copa y determinar si es o to la posibilidad de “quiebras” tánico-férricas o
no abundante, si desaparece rápidamente o, en fosfato-férricas.
caso de vinos tintos, si persiste unos momentos 2.1.2. “Quiebra oxidásica”.- Proceder como en
el color más o menos intenso. El vino de mucha 2.1.1., utilizando dos muestras de vino, una pas-
capa o el vino enyesado produce espuma que tar- terizada, para destruir la oxidasa, y la otra sin
da mucho en desaparecer. pasterizar. La formación de color pardo y precipi-
1.3. Presencia de gas carbónico. tado pulverulento oscuro son señales característi-
Verter vino en una copa. La formación de bur- cas de la “quiebra oxidásica”.
bujas indica la presencia de gas carbónico en el 2.1.3. “Quiebra cuprosa”.- Poner la muestra
vino. Este gas carbónico debe eliminarse para en botella cerrada, calentar en baño de agua a
continuar el examen de la muestra, agitando o en 357, y exponer a la luz. Si la riqueza en cobre es
la forma que se indica en los métodos analíticos. suficiente, aparece enturbiamiento característico
1.4. Limpieza. de la “quiebra cuprosa”.
Apreciar en copa o en taza de plata, al mismo
tiempo que el color, si el vino está turbio, claro o 2.2. Prueba del frío.
brillante. Enfriar el vino a la temperatura que normal-
Observar también si hay depósito y si al agitar mente se suponga va a estar expuesto, y com-
tiene aspecto cristalino o pulverulento que entur- probar si se produce precipitación de bitartrato.
bie el vino.
1.5. Degustación o cata. 2.3. Prueba de la estufa.
Proceder a la degustación recién destapada la Mantener una muestra de vino en estufa a 22-257
botella, consignando datos, referentes a la cali- durante 3-4 días. Examinar al microscopio el posible
dad, origen, edad y posibles alteraciones del vino. desarrollo microbiano distinguiendo si se trata de
Coger una copa de cristal ovoide por su platillo levaduras o de bacterias. Si es necesario, proceder al 9
con los dedos pulgar, índice y central de la mano conteo y la identificación de los microorganismos.
derecha, quedando la copa libre para examinar el 2.4. Examen microscópico.
vino. Llenar con vino sólo 1/3 o 1/4 de la copa, Realizar el examen microscópico sobre prepa-
para poder agitar bien y tener un espacio vacío ración del poso de la muestra, que puede apare-
donde se concentren los aromas. Agitar haciendo cer después de reposo en estufa o a temperatura
girar el vino y apreciar el aroma. ambiente.
Si el vino se presenta turbio en el envase origi- X Y
nal, hacer una preparación directamente del vino x = ————— y = —————
o del poso obtenido por centrifugación de ese X+Y+Z X+Y+Z
vino. Si no se presenta depósito y el vino está
poco turbio, hacer una preparación del poso X = 0,42 T625 + 0,35 T550 + 0,21 T445
obtenido por centrifugación. Y = 0,20 T625 + 0,63 T550 + 0,17 T495
Determinar en el examen microscópico si el Z = 0,24 T495 + 0,94 T445
depósito es microbiano, distinguiendo levaduras y
bacterias. Los valores triestimulares X, Y, Z, expresan las
proporciones de colores rojos, verdes y azules
que dan por mezcla el color del vino.
3(a). COLOR Cuando el espesor b de la cubeta sea inferior
a 1 cm, referir la transmitancia a 1 cm en la
3.(a).1. Principio. siguiente forma T = T’1/b y si la transmitancia viene
El color de los vinos se determina por trans- expresada en porcentaje.
parencia como se percibe por la vista, pero por 1/b
un procedimiento independiente de la aprecia- T’
ción personal, valiéndose de métodos espectro- T = ————–—
1/b -1
fométricos triestimulares de ordenadas seleccio- 100 ( )
nadas de Hardy, fundado en el sistema de la
Commisión Internationale de l’Echairage (C.I.E.), T = transmitancia referida a 1 cm de espesor
con relación a la luz producida por un cielo nubla- de cubeta.
do (fuente C). T’ = transmitancia obtenida para b cm de
espesor de cubeta.
3(a).2.1. Espectrofotómetro para medida en b = espesor en cm de la cubeta utilizada.
el espectro visible. Los valores de transmitancia
correspondientes a una misma muestra, no Como los espectrofotómetros están general-
mente graduados tanto en transmitancia T como
deben acusar diferencias superiores a 0,005 y
en absorbancia A, se puede también calcular la
cuando la escala del aparato esté graduada en
transmitancia en 1 cm de espesor del vino a par-
valores de transmitancia multiplicados por 100,
tir de la absorbancia observada en el espesor b, si
no debe haber diferencias superiores a 0,5.
la medida se ha hecho en cubeta de espesor infe-
Las cubetas de cuarzo o de vidrio de índice de
rior a 1 cm, teniendo en cuenta que:
refracción máximo 1,5, de paredes paralelas y
espesor interno b que se expresa en centíme-
1
tros y con una aproximación de ± 0,002.b.
A = log ———
Conviene disponer de cuatro pares de cubetas
T
en las que los espesores b, sean de 0,1 cm;
0,2 cm; 0,5 cm y 1 cm. Con este fin, se calculan las absorbancias A en
Según la intensidad del color se escogerán un un cm de espesor multiplicando respectivamente
par de cubetas de tal forma que la absorbancia A por 2,5 y 10 las absorbancias leídas en un espe-
quede comprendida entre 0,3-0,7 (transmitancia sor b de 0,5; 0,2 y 0,1 cm. Se obtienen después
0,5-0,2). los valores correspondientes de transmitancia
bien por aplicación de la relación anterior, bien
3(a).3. Procedimiento. refiriéndose a la tabla calculada a partir de esa
Si el vino no está limpio centrifugar previamen- misma relación.
te. Eliminar el gas carbónico, si es necesario, por
agitación con vacío parcial. 3(a).4.2. Luminosidad relativa.- Es el valor de
Medir directamente con el espectrofotómetro Y, expresado en porcentaje (siendo el negro y = 0
las transmitancias del vino a las cuatro longitudes y el incoloro y = 100).
de onda = 625, 550, 495 y 445 mm, empleando 3(a).4.3. Cromaticidad.- Para expresar la cro-
la cubeta de espesor conveniente, según intensi- maticidad (longitud de onda dominante y pureza)
10 dad del color del vino.
3(a).4. Cálculo.
se recurre al diagrama de cromaticidad, que
representa el “locus” de todos los colores del
Utilizar 131074 Agua PA-ACS como líquido de espectro, considerando que a 400 nm, corres-
referencia. ponde el azul, a 520 nm corresponde el verde y
3(a).4.1. Calcular las coordenadas (x, y) del a 700 nm el rojo. El punto 0 corresponde a la
punto representativo del color del vino en el dia- fuente luminosa utilizada, que, en este caso, es
grama tricromático de la C.I.E. el iluminante estándar Q, que representa la luz
M
de un día medianamente claro y cuyas coorde- esta longitud de onda prolongando la recta en la
nadas son: dirección de C hacia 0 para que ella corte el
“Spectrum Locus” como hemos visto antes.
xo = 0,3101 e y o = 0,3163 Este color complementario en el caso de vinos
de tono rojo púrpura se sitúa en el verde. Se ano-
3(a).4.4. Longitud de onda dominante. ta el valor de esta longitud de onda seguida de c
Conocidas las coordenadas x e y del color, se (complementario), por ejemplo 495 c.
une el punto de esas coordenadas C al punto 0. 3(a).4.5. Pureza.
En el punto en el que esta recta corta al “Spec- La pureza se calcula determinando la distancia
trum Locus” se encuentra la longitud de onda relativa del punto C que representa el color del
dominante que corresponde al matiz de este vino examinado y del punto S que corresponde al
color. Así en el caso de vinos de tono teja, la lon- “Spectrum Locus” al punto 0 que representa al
gitud de onda dominante se sitúa entre 585 y 598 iluminante.
nm aproximadamente. Para los vinos de un color Se expresa la pureza en porcentaje por la rela-
tinto franco, se sitúa entre 599 y 650 nm, mien- ción:
tras que para los vinos de tono rojo púrpura está Distancia del punto C al punto 0
caracterizada por la longitud de onda dominante 100 x —————————————––———
del color complementario. Se obtiene el valor de Distancia del punto 0 al punto S

11

Figura 3(a).I. Diagrama de cromaticidad de la C.I.E.


3(a).5. Observaciones. conocen las características cromáticas de las
3(a).5.1. El color de un vino queda completa- mismas. Los valores triestimulares X, Y, Z de la
mente definido por la luminosidad relativa Y en mezcla se obtienen por la suma de esos valores
porcentaje y las coordenadas tricromáticas x e y. multiplicando por su proporción para cada consti-
Se pueden preveer las características cromáti- tuyente.
cas de una mezcla de varios vinos cuando se

TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS


%
trans ,0 ,1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6 ,7 ,8 ,9

0 3,00 2,70 2,52 2,40 2,30 2,22 2,15 2,10 2,05


1 2,00 1,96 1,92 1,89 1,85 1,82 1,80 1,77 1,74 1,72
2 1,70 1,68 1,66 1,64 1,62 1,60 1,59 1,57 1,55 1,54
3 1,52 1,51 1,50 1,48 1,47 1,46 1,44 1,43 1,42 1,41
4 1,40 1,39 1,38 1,37 1,36 1,35 1,34 1,33 1,32 1,31
5 1,30 1,29 1,28 1,28 1,27 1,26 1,25 1,24 1,24 1,23
6 1,22 1,21 1,21 1,20 1,19 1,19 1,18 1,17 1,17 1,16
7 1,15 1,15 1,14 1,14 1,13 1,13 1,12 1,11 1,11 1,10
8 1,10 1,09 1,09 1,08 1,08 1,07 1,07 1,06 1,06 1,05
9 1,05 1,04 1,04 1,03 1,03 1,02 1,02 1,01 1,01 1.00
10 1,00 1,00 0,99 0,99 0,98 0,98 0,97 0,97 0,97 0,96
11 0,96 0,95 0,95 0,95 0,94 0,94 0,93 0,93 0,93 0,92
12 0,92 0,92 0,91 0,91 0,91 0,90 0,90 0,90 0,89 0,89
13 0,89 0,88 0,88 0,88 0,87 0,87 0,87 0,86 0,86 0,86
14 0,85 0,85 0,85 0,84 0,84 0,84 0,84 0,83 0,83 0,83
15 0,82 0,82 0,82 0,82 0,81 0,81 0,81 0,80 0,80 0,80
16 0,80 0,79 0,79 0,79 0,78 0,78 0,78 0,78 0,77 0,77
17 0,77 0,77 0,76 0,76 0,76 0,76 0,75 0,75 0,75 0,75
18 0,74 0,74 0,74 0,74 0,73 0,73 0,73 0,73 0,73 0,72
19 0,72 0,72 0,72 0,71 0,71 0,71 0,71 0,71 0,70 0,70
20 0,70 0,70 0,69 0,69 0,69 0,69 0,69 0,68 0,68 0,68
21 0,68 0,68 0,67 0,67 0,67 0,67 0,67 0,66 0,66 0,66
22 0,66 0,66 0,65 0,65 0,65 0,65 0,65 0,64 0,64 0,64
23 0,64 0,64 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,62 0,62
24 0,62 0,62 0,62 0,61 0,61 0,61 0,61 0,61 0,60 0,60
25 0,60 0,60 0,60 0,60 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59
26 0,58 0,58 0,58 0,58 0,58 0,58 0,57 0,57 0,57 0,57
27 0,57 0,57 0,57 0,57 0,56 0,56 0,56 0,56 0,56 0,56
28 0,55 0,55 0,55 0,55 0,55 0,54 0,54 0,54 0,54 0,54
29 0,54 0,54 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,52
30 0,52 0,52 0,52 0,52 0,52 0,52 0,51 0,51 0,51 0,51
31 0,51 0,51 0,51 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50
32 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,48 0,48
33 0,48 0,48 0,48 0,48 0,48 0,47 0,47 0,47 0,47 0,47
34 0,47 0,47 0,47 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46
35 0,46 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,44
36 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,43 0,43
37 0,43 0,43 0,43 0,43 0,43 0,43 0,42 0,42 0,42 0,42
12 38
39
0,42
0,41
0,42
0,41
0,42
0,41
0,42
0,41
0,42
0,40
0,41
0,40
0,41
0,40
0,41
0,40
0,41
0,40
0,41
0,40
40 0,40 0,40 0,40 0,40 0,39 0,39 0,39 0,39 0,39 0,39
41 0,39 0,39 0,39 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38
42 0,38 0,38 0,38 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37
43 0,37 0,37 0,37 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36
44 0,36 0,36 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35
M
TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS
%
trans ,0 ,1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6 ,7 ,8 ,9

45 0,35 0,35 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34
46 0,34 0,34 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33
47 0,33 0,33 0,33 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32
48 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31
49 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,30 0,30 0,30 0,30
50 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 0,29 0,29 0,29 0,29
51 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,28
52 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28
53 0,28 0,28 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27
54 0,27 0,27 0,27 0,27 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26
55 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25
56 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,24
57 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24
58 0,24 0,24 0,24 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23
59 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,22 0,22 0,22 0,22
60 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22
61 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21
62 0,21 0,21 0,21 0,21 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20
63 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,19 0,19
64 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19
65 0,19 0,19 0,19 0,19 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18
66 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,17 0,17
67 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17
68 0,17 0,17 0,17 0,17 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16
69 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16
70 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15
71 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,14 0,14 0,14 0,14
72 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14
73 0,14 0,14 0,14 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13
74 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13
75 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12
76 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,11 0,11 0,11
77 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11
78 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10
79 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10
80 0,10 0,10 0,10 0,10 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09
81 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09
82 0,09 0,09 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08
83 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08
84 0,08 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07
85 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07
86 0,07 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06
87 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06
88 0,06 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
89 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
90 0,05 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04
91 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0.04
92 0,04 0,04 0,04 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03
93 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03
94
95
0,03
0,02
0,03
0,02
0,03
0,02
0,03
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
13
96 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,01
97 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01
98 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,00
99 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
100 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
3(b). COLOR DE LOS VINOS 4(a). MASA VOLUMICA Y DENSIDAD
(Aplicable a vinos tintos y rosados) RELATIVA
(Método picnométrico)
3(b).1. Principio.
La intensidad de color se mide por la suma de 4(a).1. Principio.
las absorbancias del vino para un espesor de 1 La masa volúmica es el cociente de la masa de
cm correspondientes a las longitudes de onda de un cierto volumen de vino o de mosto por este
absorbancia mínima (420 nm) del vino tinto. volumen, Se expresa en g por ml y su símbolo es
La tonalidad se expresa por el ángulo que for- r20.
ma con el eje de longitudes de onda la cuerda La densidad relativa es el cociente de la masa
que une los puntos de la curva espectrofotométri- volúmica del vino por la masa volúmica del agua.
ca representativos de las absorbancias corres- Su símbolo es d ó simplemente d, cuando no
20

pondientes a las longitudes de onda de 420 y haya posibilidad de confusión.


520 nm. La masa volúmica y la densidad relativa de un
vino se determinan a 20°C.
3(b).2. Material y aparatos. El método picnométrico consiste en la deter-
Como en 3(a).2. minación ponderal del contenido en alcohol de un
destilado por medio de un picnómetro.
3(b).3. Procedimiento. 4(a).2. Material y aparatos.
Como en 3(a).3, excepto que las longitudes de 4(a).2.1. Picnómetro de vidrio de 50 ml de
onda utilizadas serán de 420 nm y 520 nm. capacidad, de cuello con diámetro interior de
3,5 mm. Embudo y sifón para picnómetros.
4(a).2.2. Termómetro contrastado dividido en
3(b).4. Cálculo.
1/5-1/10 de grado Celsius graduado de 10 a
Calcular la intensidad colorante y la tonalidad.
307C.
3(b).4.1. Intensidad colorante:
4(a).2.3. Termostato regulado a 207C ± 0,27.
1 4(a).2.4. Balanza con aproximación de 0,1 mg.
I = (A420 + A520) –––––
b
4(a).3. Procedimiento.
Lavar bien el picnómetro y enjuagarlo después
A420 = absorbancia a 420 nm.
con 131085 Etanol 96% v/v PA y luego con Eter
A520 = absorbancia a 520 nm.
Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-
b = espesor en cm de la cubeta.
ACS-ISO, escurrir bien y secar cuidadosamente
con paño de hilo o papel filtro el exterior, y con
3(b).4.2. Tonalidad.- La tonalidad se mide por
corriente de aire seco el interior, tapar, dejar en
el ángulo cuya tangente es igual a la diferencia del
reposo en la caja de la balanza durante 30 minu-
valor numérico de las dos absorbancias A 520-A420.
tos aproximadamente, y pesar.
Conocido este valor, se puede determinar el valor Llenar después con agua a 207 recién destila-
del ángulo por tablas expresadas en grados sexa- da, con cuidado de evitar burbujas de aire en el
gesimales. interior del picnómetro. Sumergir en el agua a la
temperatura comprobada de 207.
3(b).5. Observaciones. Mantener el picnómetro en el termostato
Con este método no se determina el color, durante 30 minutos, y enrasar el nivel del agua
sino la intensidad y la tonalidad del color, que son con la marca del cuello. Tapar el picnómetro,
características cromáticas convencionales. Por su secar exteriormente con las precauciones
rapidez y sencillez, es muy práctico para compro- expuestas, dejar nuevamente 30 minutos en la
bar la evolución de la materia colorante durante caja de la balanza y después pesar.
su “crianza” o añejamiento. Vaciar el picnómetro, enjuagar nuevamente,
primero con agua y después con Etanol 96% v/v
3(b).6. Referencias. PA y Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de
3(b).6.1. Determinación triestimular del color BHT PA-ACS-ISO, y secar como anteriormente,
de los vinos, método simplificado por C.Stella. llenar con el vino a temperatura de 207C, aproxi-
14 Comunicación al O.I.V. núm. 282 (2 febrero 1968).
3(b).6.2. Recueil des Méthodes Internationales
madamente, cuidando que no quede ninguna
burbuja de aire (en caso de que el vino tenga gas
d’Analyse des Vins. O.I.V. AO, 1-14. 1969. carbónico, se eliminará previamente como luego
se indica). Dejar el picnómetro con el vino en el
termostato a 207C ± 0,27 durante 30 minutos, lle-
nar hasta volumen con el vino y pesar.
M
4(a).4. Cálculo. un volumen de unos 250 ml del vino, en matraz
4(a).4.1. Cálculo de la densidad relativa a de 1.000 ml.
207C. Si el vino está turbio, se filtrará por papel de fil-
tración rápida, de pliegues y procurando airear lo
P” - P menos posible, tapando también el embudo con
d20
20 = –––––––– vidrio de reloj.
P’ - P Si el enturbiamiento es por suspensión de
levadura, la filtración corriente aludida no lo acla-
P = peso en g del picnómetro vacío. rará, siendo conveniente en este caso, dejar
P’ = peso en g del picnómetro más agua a decantar el vino en probeta tapada, durante dos o
207C. tres días en sitio fresco.
P” = peso en g del picnómetro más vino a
207C. 4(a).6. Referencia.

4(a).4.2. Cálculo de la masa volúmica r20. 4(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V., A1, 11-26. 1969.
r20 = 0,998203 d20
20
o bien 4(b). MASA VOLUMICA Y DENSIDAD
c RELATIVA
r20 = d20
20 - –––––––– (Método areométrico)
1.000
4(b).1. Principio.
El valor de c se encuentra en las tablas 4(a).I y Determinación de la masa volúmica a partir de
4(a).II. la lectura del areómetro que flota introducido
La aproximación de los resultados será de en el vino.
0,0003. Para mayor precisión, se tendrá en cuen-
ta el empuje del aire como en 5(a).5. 4(b).2. Material y aparatos.
4(b).2.1. Areómetro. Los areómetros empleados
4(a).5. Observaciones. deben responder a las siguientes normas (I.S.O.):
Si el vino contiene cantidad sensible de gas Parte cilíndrica sumergible y tallo de sección
carbónico, se eliminará todo lo posible agitando circular de 3 mm de diámetro como mínimo. Para

TABLA 4(a). I

Cálculo de la masa volúmica (r20) a partir de la densidad


relativa 20/20 y recíprocamente

Densidades 0,960 0,980 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100


Correcciones c 1,73 1,76 1,80 1,84 1,87 1,91 1,94 1,98
Densidades 1,120 1,140 1,160 1,180 1,200 1,220 1,240 1,260
Correcciones c 2,02 2,05 2,09 2,12 2,16 2,20 2,23 2,27
Densidades 1,280 1,300 1,320 1,340 1,360 1,380 1,400
Correcciones c 2,30 2,34 2,38 2,41 2,45 2,48 2,52

TABLA 4(a). II

Cálculo de la masa volúmica (r15) a partir de la densidad


relativa 15/15 y recíprocamente

Densidades 0,960 0,980 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100


Correcciones c 0,86 0,88 0,90 0,92 0,94 0,95 0,97 0,99 15
Densidades 1,120 1,140 1,160 1,180 1,200 1,220 1,240 1,260
Correcciones c 1,01 1,03 1,04 1,06 1,08 1,10 1,12 1,13
Densidades 1,280 1,300 1,320 1,340 1,360 1,380 1,400
Correcciones c 1,15 1,17 1,19 1,21 1,22 1,24 1,25
vinos secos, la graduación será de 0,983 a 1,003 r = lectura del tallo graduado del areómetro.
t

en milésimas y 0,2 milésimas. Las divisiones de c = valor de la corrección correspondiente a la


milésimas deben ser de 5 mm como mínimo. Para temperatura del vino en el momento de la lectura.
vinos desalcoholizados y vinos dulces, y eventual- Este valor se encuentra en las tablas 4(b). I y 4(b).
mente para mostos, se recomienda un juego de 5 II.
areómetros graduados de 1,000-1,030; 1,030- t = temperatura del vino en el momento de la
1,060; 1,060-1,090; 1,090-1,120; 1,120-1,150. lectura.
Estos aparatos estarán graduados en masas Los resultados se obtendrán con una precisión
volúmicas a 207C, en milésimas y 0,5 milésimas de 0,0003.
por lo menos. Cada división de una milésima será
de 3mm como mínimo. En los aparatos se indica- 4(b).5. Observaciones.
rá que las lecturas deben hacerse por la parte Si se utilizan areómetros que den d15 20
4 o d 20,
superior del menisco. hay que corregir la lectura en las tablas corres-
4(b).2.2. Termómetro contrastado, graduado pondientes, y después expresar los resultados en
por lo menos en 1/2 grados. d 20
20 o r 20 , empleando las fórmulas y tablas si-
4(b).2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diá- guientes:
metro interior y 320 mm de altura.
4(b).2.4. Plataforma con tornillos de nivelación, C
para mantener vertical la probeta sobre ella colo- d20 15
20 = d 4 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). III.
cada. 1.000

4(b).3. Procedimiento. C
Colocar en la probeta descrita 250 ml del vino d20 15
20 = d15 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). IV.
e introducir el areómetro y el termómetro. 1.000
El areómetro y especialmente el tallo graduado
deberán estar limpios y desengrasados. C
Agitar para uniformar la temperatura. Un minu- r20 15
20 = d 4 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). V.
to después, hacer la lectura del termómetro. Reti- 1.000
rar el termómetro y hacer la lectura de la masa
aparente sobre el tallo del areómetro, después de C
un minuto de reposo. r20 15
20 = d15 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). VI.
1.000
4(b).4. Cálculo.
Calcular la masa volúmica referida a 207C. 4(b).6. Referencias.
4(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
c (_ si t es inferior a 207C) d’Analyse des Vins. O.I.V. A1, 11-26.
r20 = rt ± –––––– 4(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de
1.000 (+ si t es superior a 207C) correspondance entre les diverses tables Alcoo-
métriques”. Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,
r20= masa volúmica referida a 207. 111-141, 1966.

TABLA 4(b). I
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 207
Tem- GRADOS ALCOHOLICOS
pera-
turas 0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

10º 1,45 1,51 1,55 1,58 1,64 1,70 1,78 1,88 1,98 2,09 2,21 2,34

11º 1,35 1,40 1,43 1,47 1,52 1,58 1,65 1,73 1,83 1,93 2,03 2,15
12º 1,24 1,28 1,31 1,34 1,39 1,44 1,50 1,58 1,66 1,75 1,84 1,94
16 13º 1,12 1,16 1,18 1,21 1,25 1,30 1,35 1,42 1,49 1,56 1,64 1,73
14º 0,99 1,03 1,05 1,07 1,11 1,14 1,19 1,24 1,31 1,37 1,44 1,52

15º 0,86 0,89 0,90 0,92 0,95 0,98 1,02 1,07 1,12 1,17 1,23 1,29

16º 0,71 0,73 0,74 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,91 0,93 0,99 1,05
17º 0,55 0,57 0,57 0,59 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,74 0,77 0,81
M
TABLA 4(b). I
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 207

Tem- GRADOS ALCOHOLICOS


pera-
turas 0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

18º 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,55
19º 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28

20º

21º 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,27 0,29 0,29
22º 0,43 0,45 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60
23º 0,67 0,69 0,70 0,71 0,72 0,74 0,77 0,79 0,82 0,85 0,88 0,91
24º 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,04 1,07 1,11 1,15 1,20 1,24

25º 1.16 1,19 1,21 1,23 1,26 1,29 1,33 1,37 1,42 1,47 1,52 1,57

26º 1,42 1,46 1,49 1,51 1,54 1,58 1,62 1,67 1,73 1,79 1,85 1,92
27º 1,69 1,74 1,77 1,80 1,83 1,88 1,93 1,98 2,05 2,12 2,20 2,27
28º 1,97 2,03 2,06 2,09 2,14 2,19 2,24 2,31 2,38 2,46 2,55 2,63
29º 2,26 2,33 2,37 2,40 2,45 2,50 2,57 2,64 2,73 2,82 2,91 2,99

30º 2,56 2,64 2,67 2,72 2,77 2,83 2,90 2,98 3,08 3,18 3,28 3,38

Tem- GRADOS ALCOHOLICOS


pera-
turas 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27

10º 2,47 2,60 2,75 2,90 3,06 3,22 3,39 3,57 3,75 3,93 4,12 4,31
11º 2,26 2,38 2,51 2,65 2,78 2,93 3,08 3,24 3,40 3,57 3,73 3,90
12º 2,04 2,15 2,26 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,05 3,19 3,34 3,49
13º 1,82 1,91 2,01 2,11 2,22 2,33 2,45 2,57 2,69 2,81 2,95 3,07
14º 1,59 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,13 2,23 2,33 2,44 2,55 2,66

15º 1,35 1,42 1,49 1,56 1,63 1,71 1,80 1,88 1,96 2,05 2,14 2,23

16º 1,10 1,15 1,21 1,27 1,33 1,39 1,45 1,52 1,59 1,66 1,73 1,80
17º 0,84 0,88 0,92 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36
18º 0,57 0,60 0,62 0,65 0,68 0,71 0,74 0,78 0,81 0,85 0,88 0,91
19º 0,29 0,30 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46

20º

21º 0,31 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22º 0,63 0,65 0,68 0,71 0,73 0,77 0,80 0,83 0,86 0,89 0,93 0,96
23º 0,95 0,99 1,03 1,07 1,12 1,16 1,21 1,25 1,30 1,35 1,40 1,45
24º 1,29 1,34 1,39 1,45 1,50 1,56 1,62 1,69 1,76 1,82 1,88 1,95

25º 1,63 1,70 1,76 1,83 1,90 1,97 2,05 2,13 2,21 2,29 2,37 2,45

26º 1,99 2,07 2,14 2,22 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,77 2,86 2,96
27º
28º
2,35
2,73
2,44
2,83
2,53
2,93
2,63
3,03
2,72
3,14
2,82
3,26
2,93
3,38
3,04
3,50
3,14
3,62
3,25
3,75
3,37
3,85
3,48
4,00
17
29º 3,11 3,22 3,34 3,45 3,58 3,70 3,84 3,97 4,11 4,25 4,39 4,54

30º 3,40 3,62 3,75 3,88 4,02 4,16 4,30 4,46 4,61 4,76 4,92 5,07
TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 137


Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 2,24 2,58 2,93 3,27 3,59 3,89 4,18

11º 2,06 2,37 2,69 2,97 3,26 3,53 3,78


12º 1,87 2,14 2,42 2,67 2,94 3,17 3,40
13º 1,69 1,93 2,14 2,37 2,59 2,80 3,00
14º 1,49 1,70 1,90 2,09 2,27 2,44 2,61

15º 1,25 1,42 1,59 1,75 1,90 2,05 2,19

16º 1,03 1,17 1,30 1,43 1,55 1,67 1,78


17º 0,80 0,90 1,00 1,09 1,17 1,27 1,36
18º 0,54 0,61 0,68 0,75 0,81 0,86 0,92
19º 0,29 0,33 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48

20º

21º 0,29 0,32 0,35 0,39 0,42 0,45 0,47


22º 0,57 0,64 0,70 0,76 0,82 0,88 0,93
23º 0,89 0,98 1,08 1,17 1,26 1,34 1,43
24º 1,22 1,34 1,44 1,56 1,68 1,79 1,90

25º 1,61 1,68 1,83 1,98 2,12 2,26 2,40

26º 1,87 2,05 2,22 2,40 2,56 2,71 2,87


27º 2,21 2,42 2,60 2,80 3,00 3,18 3,35
28º 2,56 2,80 3,02 3,25 3,47 3,67 3,89
29º 2,93 3,19 3,43 3,66 3,91 4,14 4,37

30º 3,31 3,57 3,86 4,15 4,41 4,66 4,92

TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207
MASAS VOLUMICAS VINOS DE 157
Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 2,51 2,85 3,20 3,54 3,86 4,02 4,46

11º 2,31 2,61 2,93 3,21 3,51 3,64 4,02


12º 2,09 2,36 2,64 2,90 3,16 3,27 3,61
13º 1,88 2,12 2,34 2,56 2,78 2,88 3,19
14º 1,67 1,86 2,06 2,25 2,45 2,51 2,77

15º 1,39 1,56 1,72 1,88 2,03 2,11 2,32

16º 1,06 1,27 1,40 1,53 1,65 1,77 1,88


17º 0,87 0,98 1,08 1,17 1,26 1,35 1,44
18º 0,60 0,66 0,73 0,80 0,86 0,91 0,97
19º 0,32 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51

20º

21º 0,32 0,35 0,38 0,42 0,45 0,48 0,50


22º 0,63 0,69 0,75 0,81 0,87 0,93 0,98
18 23º
24º
0,97
1,32
1,06
1,44
1,16
1.54
1,25
1,66
1,34
1,78
1,42
1,89
1,51
2,00

25º 1,66 1,81 1,96 2,11 2,25 2,39 2,52

26º 2,02 2,20 2,37 2,54 2,70 2,85 3,01


27º 2,39 2,59 2,78 2,98 3,17 3,35 3,52
28º 2,75 2,89 3,22 3,44 3,66 3,86 4,07
29º 3,16 3,41 3,65 3,89 4,13 4,36 4,59

30º 3,55 3,81 4,10 4,38 4,66 4,90 5,16


M
TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 177


Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 2,81 3,15 3,50 3,84 4,15 4,45 4,74

11º 2,57 2,89 3,20 3,49 3,77 4,03 4,28


12º 2,32 2,60 2,87 3,13 3,39 3,63 3,84
13º 2,09 2,33 2,55 2,77 2,98 3,19 3,39
14º 1,83 2,03 2,23 2,42 2,61 2,77 2,94

15º 1,54 1,71 1,87 2,03 2,18 2,32 2,47

16º 1,25 1,39 1,52 1,65 1,77 1,89 2,00


17º 0,96 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,52
18º 0,66 0,72 0,79 0,86 0,92 0,97 1,03
19º 0,35 0,38 0,41 0,45 0,48 0,51 0,53

20º

21º 0,34 0,38 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53


22º 0,68 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04
23º 1,06 1,15 1,25 1,34 1,42 1,51 1,59
24º 1,43 1,55 1,65 1,77 1,89 2,00 2,11

25º 1,80 1,94 2,09 2,24 2,39 2,52 2,66

26º 2,18 2,36 2,53 2,71 2,86 3,02 3,17


27º 2,58 2,78 2,97 3,17 3,36 3,54 3,71
28º 2,97 3,21 3,44 3,66 3,88 4,09 4,30
29º 3,40 3,66 3,89 4,13 4,38 4,61 4,82

30º 3,82 4,08 4,37 4,65 4,93 5,17 5,42

TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207
MASAS VOLUMICAS VINOS DE 197
Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 3,14 3,48 3,83 4,17 4,48 4,78 5,07

11º 2,87 3,18 3,49 3,78 4,06 4,32 4,57


12º 2,58 2,86 3,13 3,39 3,65 3,88 4,10
13º 2,31 2,55 2,77 2,99 3,20 3,41 3,61
14º 2,03 2,23 2,43 2,61 2,80 2,96 3,13

15º 1,69 1,86 2,02 2,18 2,33 2,48 2,62

16º 1,38 1,52 1,65 1,78 1,90 2,02 2,13


17º 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,53 1,62
18º 0,73 0,79 0,85 0,92 0,98 1,03 1,09
19º 0,38 0,41 0,44 0,48 0,51 0,52 0,56

20º

21º 0,37 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 0,56


22º 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 1,10
23º
24º
1,15
1,55
1,30
1,67
1,34
1,77
1,43
1,89
1,51
2,00
1,60
2,11
1,68
2,23
19
25º 1,95 2,09 2,24 2,39 2,53 2,67 2,71

26º 2,36 2,54 2,71 2,89 3,04 3,20 3,35


27º 2,79 2,99 3,18 3,38 3,57 3,75 3,92
28º 3,20 3,44 3,66 3,89 4,11 4,32 4,53
29º 3,66 3,92 4,15 4,40 4,64 4,87 5,08

30º 4,11 4,37 4,66 4,94 5,22 5,46 5,71


TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 217


Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 3,50 3,84 4,19 4,52 4,83 5,12 5,41

11º 3,18 3,49 3,80 4,09 4,34 4,63 4,88


12º 2,86 3,13 3,41 3,67 3,92 4,15 4,37
13º 2,56 2,79 3,01 3,23 3,44 3,65 3,85
14º 2,23 2,43 2,63 2,81 3,00 3,16 3,33

15º 1,86 2,03 2,19 2,35 2,50 2,65 2,80

16º 1,51 1,65 1,78 1,91 2,03 2,15 2,26


17º 1,15 1,25 1,35 1,45 1,54 1,63 1,71
18º 0,79 0,85 0,92 0,98 1,05 1,10 1,15
19º 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59

20º

21º 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59


22º 0,81 0,88 0,94 1,00 1,06 1,10 1,17
23º 1,25 1,34 1,44 1,53 1,61 1,70 1,78
24º 1,68 1,80 1,90 2,02 2,13 2,25 2,36

25º 2,11 2,25 2,40 2,55 2,69 2,83 2,97

26º 2,55 2,73 2,90 3,07 3,22 3,38 3,54


27º 3,01 3,20 3,40 3,59 3,78 3,96 4,13
28º 3,46 3,69 3,93 4,15 4,36 4,58 4,77
29º 3,95 4,20 4,43 4,68 4,92 5,15 5,36

30º 4,42 4,68 4,97 5,25 5,53 5,77 6,02

TABLA 4(b). III

Cálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/4

Vinos secos (d15


4 comprendida entre 0,97 y 1,03)

Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1


Correcciones c 0,9 0,8 0,8 0,8 0,7 0,7 0,7
Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1
Correcciones c 0,6 0,6 0,5 0,5 0,4 0,3 0,3
Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1
Correcciones c 0,2 0,1 0,0 0,0 -0,1 -0,2 -0,3

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

20

{
107 0,7 0,5 0,3 0,1 0,0 -0,2 -0,3
137 0,6 0,4 0,2 0,0 -0,1 -0,3 -0,4
Grados 157 0,5 0,2 0,0 -0,2 -0,3 -0,5 -0,6
Alcohólicos 177 0,4 0,1 -0,1 -0,3 -0,4 -0,6 -0,7
197 0,2 -0,1 -0,3 -0,5 -0,6 -0,8 -0,9
217 0,0 -0,2 -0,4 -0,6 -0,7 -0,9 -1,0
M
TABLA 4(b). IV

Cálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/15

Vinos secos

Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1


Correcciones c 0,1 0,1 0,1 0,2 0,2 0,2 0,3
Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1
Correcciones c 0,3 0,4 0,4 0,5 0,6 0,6 0,7
Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1
Correcciones c 0,9 0,9 1,0 1,0 1,1 1,2 1,2

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

{
107 0,2 0,4 0,5 0,7 0,8 1,0 1,1
137 0,3 0,5 0,6 0,8 0,9 1,1 1,2
Grados 157 0,5 0,7 0,8 1,0 1,1 1,3 1,4
Alcohólicos 177 0,6 0,8 0,9 1,1 1,2 1,4 1,5
197 0,8 1,0 1,1 1,3 1,4 1,6 1,7
217 1,0 1,1 1,2 1,4 1,5 1,7 1,8

TABLA 4(b). V

Cálculo de la masa volúmica a 207C ( r20 ) a partir de la densidad 15/4

Vinos secos

Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1


Correcciones c 0,9 1,0 1,0 1,0 1,1 1,1 1,1
Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1
Correcciones c 1,2 1,2 1,3 1,3 1,4 1,5 1,5
Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1
Correcciones c 1,6 1,7 1,8 1,8 1,9 2,0 2,1

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

21

{
107 1,1 1,3 1,5 1,7 1,8 2,0 2,1
137 1,2 1,4 1,6 1,8 1,9 2,1 2,2
Grados 157 1,3 1,6 1,8 2,0 2,1 2,3 2,4
Alcohólicos 177 1,4 1,7 1,9 2,1 2,2 2,4 2,5
197 1,6 1,9 2,1 2,3 2,4 2,6 2,7
217 1,8 2,0 2,2 2,4 2,5 2,7 2,8
TABLA 4(b). VI

Cálculo de la masa volúmica a 207C ( r20 ) a partir de la densidad 15/15


15
Vinos secos (d 15 comprendida entre 0,97 y 1,03)

Grados alcohólicos 5,11 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1


Correcciones c 1,81 1,9 1,9 1,9 2,0 2,0 2,0
Grados alcohólicos 12,11 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1
Correcciones c 2,11 2,1 2,2 2,2 2,3 2,4 2,4
Grados alcohólicos 19,11 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1
Correcciones c 2,65 2,6 2,7 2,7 2,8 2,9 3,0

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

{
107 2,0 2,2 2,4 2,6 2,7 2,9 3,1
137 2,1 2,3 2,5 2,7 2,8 3,1 3,2
Grados 157 2,2 2,5 2,7 2,9 3,0 3,3 3,4
Alcohólicos 177 2,3 2,6 2,8 3,0 3,1 3,4 3,5
197 2,5 2,8 3,0 3,2 3,3 3,6 3,7
217 2,7 2,9 3,1 3,3 3,4 3,7 3,8

5(a). TITULO ALCOHOMETRICO (1) 5(a).2.2. Picnómetro.- Como en 4(a).2.1, de


(Método picnométrico) vidrio pyrex.
5(a).2.3. Tara del picnómetro.- Recipiente de
5(a).1. Principio. vidrio del mismo volumen exterior que el picnómetro.
El título alcohométrico es igual al número de Se llena casi por completo con una solución de sodio
litros de etanol contenidos en 100 l de vino, medi- cloruro, de densidad tal que la masa de esta tara sea
dos ambos volúmenes a 207C, y se expresa en igual a la masa del picnómetro lleno de un líquido de
grados alcohólicos volumétricos, con una preci- densidad 1,01. Este recipiente cierra a la llama. Su
sión de 0,17C. capacidad exterior debe ser igual a la del picnómetro
Se determina por destilación simple de líquido lleno, con una aproximación de 1 ml de diferencia.
alcalinizado y medida de la densidad del destilado 5(a).2.4. Termostato y accesorios, descritos en
por picnometría. 4(a).2.
5(a).2.5. Balanza analítica de 0,1 mg y 100 g
5(a).2. Material y aparatos. de carga.
5(a).2.1. Aparato de destilación.- Consta de
las siguientes partes: 5(a).3. Reactivos.
5(a).2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 ml 131074 Agua PA-ACS
con rodaje esmerilado. 211234 Calcio Oxido natural,
5(a).2.1.2. Columna rectificadora de 20 cm de escoriforme QP
largo. 131325 Fenolftaleína PA-ACS
5(a).2.1.3. Disco metálico o de amianto con un 211835 Piedra Pómez gránulos QP
orificio de 8 cm de diámetro.
5(a).2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de 5(a).3.1. Lechada de cal. Solución de 120 g
longitud, con circulación rápida de agua y dis- de Calcio Oxido natural escoriforme QP en 1.000 ml
22 puesto verticalmente. de Agua PA-ACS.

(1).- Denominación adoptada para el grado alcohólico por la Oficina Internacional del Vino (O.I.V.).
M
5(a).4. Procedimiento. expuestas en 4(a). 3 con el destilado alcohólico a la
Para vinos jóvenes o espumosos, eliminar temperatura ambiente, llevar después al termosta-
previamente el gas carbónico. Agitar 250 ml de vino to, agitar el líquido haciendo girar el picnómetro por
en un matraz de 500 ml previamente siliconado el dos o tres veces, hasta que la temperatura que
interior del matraz por tres gotas de solución al 1%, marca el termómetro del picnómetro sea constante.
de silicona soluble en agua, y después de bien seco, Enrasar con el borde superior del tubo lateral, secar
añadir el vino. éste, colocarlo sobre el tapón receptor (para peque-
5(a).4.1. Destilación.- Medir 250 ml de vino en un ños rebordes) y anotar la temperatura tº utilizando
matraz aforado con cuello de 12 mm de diámetro una lupa. Secar con el mismo cuidado el exterior
interior como máximo, y anotar la temperatura. del picnómetro y llevarlo al platillo de la balanza.
Introducir el vino en un matraz de destilación que Equilibrar la tara del picnómetro colocada en el otro
contenga una docena de fragmentos de materia platillo.
porosa Piedra Pómez gránulos QP. Lavar el matraz
cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS. Añadir
5(a).5. Cálculo.
10 ml de la Lechada de cal. La materia colorante del
Calcular el título alcohométrico expresado en gra-
vino debe virar a la alcalinidad. En el caso de vinos
dos alcohólicos volumétricos.
muy ácidos, puede comprobarse por toques exter-
5(a).5.1. Cálculo de la masa volúmica aparente.
nos el viraje de la Fenolftaleína PA-ACS. Recoger el
destilado en el mismo matraz de 250 ml, conteniendo
unos 10 ml de Agua PA-ACS, en la que debe sumer- p + m - p’
girse el pico del tubo afilado, prolongación del refrige- r t = ——————————————
rante. Destilar por lo menos 200 ml. Después agitar y volumen del picnómetro a 20º
llenar hasta volumen con Agua PA-ACS, a la misma
temperatura que se midió el vino inicialmente. r t = masa volúmica aparente.
5(a).4.2. Tarado del picnómetro vacío.- Poner en m = masa del aire contenido en el picnómetro
un platillo de la balanza la tara y en el otro el picnóme- vacío.
tro vacío, limpio y seco, y a su lado, las masas nece- p = diferencia de masa entre la tara y el picnóme-
sarias p, para entre ambos equlibrar la balanza. tro lleno con destilado alcohólico.
La masa equivalente a la de la tara será: 5(a).5.2. Cálculo de grado alcohométrico.
Masa del picnómetro + m + p Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V. a
m = 0,0012 V. 207C utilizando la tabla 5(a). I de masa volúmicas a t7
m = masa en g del aire contenido en el picnóme- corregidas del empuje del aire.
tro vacío. Buscar sobre la línea horizontal correspondiente a
V = volumen en ml del picnómetro. la cifra de la parte entera de la temperatura, t, la cifra
0,0012 g/ml = masa volúmica del aire. de la masa volumen inmediatamente superior a rt. El
El volumen del picnómetro se considera, con sufi- grado alcohólico que encabeza la columna donde se
ciente aproximación, que es numéricamente igual a la encuentra esta cifra será la parte entera del grado
masa de Agua PA-ACS que llene el picnómetro. alcohólico a 207C.
Para calcular esta masa, colocar el picnómetro Determinar la masa volúmica r correspondiente a
lleno de Agua PA-ACS en el platillo de la balanza, si p’ la parte entera de la temperatura, t, utilizando la dife-
es la masa que hay que colocar a su lado para equi- rencia tabular que se lee por debajo de la masa
librar la de la tara, la masa m será:
volúmica inmediatamente superior a rt antes encon-
m = (p - p’) . 0,0012
trada, y la cifra decimal t, r = rt + (diferencia tabular x
Operar siempre a 207 exactamente para realizar el
parte decimal de t) 10-5.
enrase, utilizando el termostato. Si se opera a t7, para
Hallar la parte decimal del grado alcohólico a 207,
conocer el volumen del picnómetro a 207, hay que
buscando en las tablas sobre la línea horizontal que
multiplicar (p - p’) por un factor F, que da la tabla 5 (a). I
para picnómetro del vidrio pyrex. comienza con la cifra de los enteros de la temperatu-
Repetir estas operaciones de tara tres veces ra, t, la masa volúmica r‘ que sea inmediatamente
seguidas. Al cabo de un año, volver a comprobar la superior a r, y dividiendo la diferencia r‘ - r por la
tara del picnómetro. diferencia tabular que está a la derecha de la cifra de
Con balanza monoplato, proceder análogamente. la masa volúmica r‘.
Primero poner la tara, hacer la lectura correspondien-
5(a).6. Referencias.
23
te en la escala de pesos y después poner el picnó-
metro vacío. Anotar los pesos p que hay que añadir 5(a).6.1 Recueil des Méthodes Internationales
hasta marcar la pesada que alcanzó la tara. d’Analyse des Vins. O.I.V. A2,1-25. 1969.
Tara = picnómetro + aire + p 5(a).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de corres-
5(a).4.3. Determinación picnométrica.- Llenar el pondance entre les diverses tables alcoométriques”.
picnómetro lavado y seco con las precauciones Société Pharmacie Montpellier, 26: 2, 111-141. 1966.
24
TABLA 5 (a). I
Masas volúmicas aparentes de mezclas hidroalcohólicas (picnómetro Pyrex)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe-
raturas 0 1 2 3 4 5 6

10º 999 61 1 50 998 11 1 46 996 65 1 43 995 22 1 39 993 83 1 34 992 49 1 30 991 19 1 25


9 8 8 9 9 10 9
11º 999 52 1 49 998 03 1 46 996 57 1 44 995 13 1 39 993 74 1 35 992 39 1 29 991 10 1 26
10 10 10 10 10 10 1
12º 999 42 1 49 997 93 1 46 996 47 1 44 995 03 1 39 993 64 1 35 992 29 1 30 990 99 1 26
11 11 11 11 11 11 12
13º 999 31 1 49 997 82 1 46 996 36 1 44 994 92 1 39 993 53 1 35 992 18 1 31 990 87 1 26
12 12 13 12 13 13 13
14º 999 19 1 49 997 70 1 47 996 23 1 43 994 80 1 40 993 40 1 35 992 05 1 31 990 74 1 26
14 14 13 14 14 14 14
15º 999 05 1 49 997 56 1 46 996 10 1 44 994 66 1 40 993 26 1 35 991 91 1 31 990 60 1 27
14 14 15 14 14 15 16
16º 998 91 1 49 997 42 1 47 995 95 1 43 994 52 1 40 993 12 1 36 991 76 1 32 990 44 1 27
16 16 15 16 16 16 16
17º 998 75 1 49 997 26 1 46 995 80 1 44 994 36 1 40 992 96 1 36 991 60 1 32 990 28 1 28
17 17 17 17 18 18 18
18º 998 58 1 49 997 09 1 46 995 63 1 44 994 19 1 41 992 78 1 36 991 42 1 32 990 10 1 28
18 18 18 18 18 19 19
19º 998 40 1 49 996 91 1 46 995 45 1 44 994 01 1 41 992 60 1 37 991 23 1 32 989 91 1 29
19 19 20 20 19 19 20
20º 998 21 1 49 996 72 1 47 995 25 1 44 993 81 1 40 992 41 1 37 991 04 1 33 989 71 1 29
20 20 20 20 21 21 21
21º 998 01 1 49 996 52 1 47 995 05 1 44 993 61 1 41 992 20 1 37 990 83 1 33 989 50 1 30
21 21 21 21 21 22 22
22º 997 80 1 49 996 31 1 47 994 84 1 44 993 40 1 41 991 99 1 38 990 61 1 33 989 28 1 30
22 22 22 23 23 23 23
23º 997 58 1 49 996 09 1 47 994 62 1 45 993 17 1 41 991 76 1 38 990 38 1 33 989 05 1 31
24 24 24 23 24 24 25
24º 997 34 1 49 995 85 1 47 994 38 1 44 992 94 1 42 991 52 1 38 990 14 1 34 988 80 1 31
24 24 24 25 25 25 25
25º 997 10 1 49 995 61 1 47 994 14 1 45 992 69 1 42 991 27 1 38 989 89 1 34 988 55 1 31
25 25 25 25 25 26 26
26º 996 85 1 49 995 36 1 47 993 89 1 45 992 44 1 42 991 02 1 39 989 63 1 34 988 29 1 32
26 26 27 27 27 27 28
27º 996 59 1 49 995 10 1 48 993 62 1 45 992 17 1 42 990 75 1 39 989 36 1 35 988 01 1 32
27 28 27 27 28 28 28
28º 966 32 1 50 994 82 1 47 993 35 1 45 991 90 1 43 990 47 1 39 989 08 1 35 987 73 1 33
28 28 28 29 28 28 29
29º 996 04 1 50 994 54 1 47 993 07 1 46 991 61 1 42 990 19 1 39 988 80 1 36 987 44 1 33
29 29 29 29 30 30 30
30º 995 75 1 50 994 25 1 47 992 78 1 46 991 32 1 43 989 89 1 39 988 50 1 36 987 14 1 34
TABLA 5 (a). I
(Continuación)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe- 7 8 9 10 11 12
raturas

10º 989 94 1 19 988 75 1 16 987 59 1 13 986 46 1 11 985 35 1 08 984 27 1 04


10 11 11 12 13 14
11º 989 84 1 20 988 64 1 16 987 48 1 14 986 34 1 12 985 22 1 08 984 13 1 05
11 12 12 13 15 15
12º 989 73 1 21 988 52 1 16 987 36 1 15 986 21 1 14 985 07 1 09 983 98 1 07
12 12 14 15 15 17
13º 989 61 1 21 988 40 1 18 987 22 1 16 986 06 1 14 984 92 1 11 983 81 1 07
13 14 15 15 16 17
14º 989 48 1 22 988 26 1 19 987 07 1 16 985 91 1 15 984 76 1 12 983 64 1 09
15 16 16 17 18 19
15º 989 33 1 23 988 10 1 19 986 91 1 17 985 74 1 16 984 58 1 13 983 45 1 10
16 16 17 18 19 20
16º 989 17 1 23 987 94 1 20 986 74 1 18 985 56 1 17 984 39 1 14 983 25 1 11
17 18 18 19 20 21
17º 989 00 1 24 987 76 1 20 986 56 1 19 985 37 1 18 984 19 1 15 983 04 1 12
18 18 19 20 21 22
18º 988 82 1 24 987 58 1 21 986 37 1 20 985 17 1 19 983 98 1 16 982 82 1 13
20 20 21 21 22 23
19º 988 62 1 24 987 38 1 22 986 16 1 20 984 96 1 20 983 76 1 17 982 59 1 14
20 21 22 23 23 34
20º 988 42 1 25 987 17 1 23 985 94 1 21 984 73 1 20 983 53 1 18 982 35 1 16
22 22 22 23 24 25
21º 988 20 1 25 986 95 1 23 985 72 1 22 984 50 1 21 983 29 1 19 982 10 1 17
22 23 24 24 26 27
22º 987 98 1 26 986 72 1 24 985 48 1 22 984 26 1 23 983 03 1 20 981 23 1 17
24 25 25 16 26 27
23º 987 74 1 27 986 47 1 24 985 23 1 23 984 00 1 23 982 77 1 21 981 56 1 18
25 25 26 27 27 28
24º 987 49 1 27 986 22 1 25 984 97 1 24 983 73 1 23 982 50 1 22 981 28 1 20
25 26 27 27 29 30
25º 987 24 1 28 985 96 1 26 984 70 1 24 983 46 1 25 982 21 1 23 980 98 1 20
27 27 27 29 29 30
26º 986 97 1 28 985 69 1 26 984 43 1 26 983 15 1 25 981 92 1 24 980 68 1 21
28 29 29 29 31 31
27º 986 96 1 29 985 40 1 26 984 14 1 26 982 88 1 27 981 61 1 24 980 37 1 23
29 29 30 31 31 33
28º 986 40 1 29 985 11 1 27 983 84 1 27 982 57 1 27 981 30 1 26 980 04 1 23
29 30 31 31 32 33
29º 986 11 1 30 984 81 1 28 983 53 1 27 982 26 1 28 980 98 1 27 979 71 1 24
31 31 31 32 33 34
30º 985 80 1 30 984 50 1 28 983 22 1 28 981 94 1 29 980 65 1 28 979 37 1 25
M

25
26
TABLA 5 (a). I
(Continuación)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe- 13 14 15 16 17 18
raturas

10º 983 23 1 02 982 21 99 981 22 98 980 24 94 979 30 94 978 36 91


15 16 18 19 21 22
11º 983 08 1 03 982 05 1 01 981 04 99 980 05 96 979 09 95 978 14 93
17 18 19 20 22 23
12º 982 91 1 04 981 87 1 02 980 85 1 00 979 85 98 978 87 96 977 91 95
17 19 20 22 23 25
13º 982 74 1 06 981 68 1 03 980 65 1 02 979 63 99 978 64 98 977 66 96
19 19 21 22 24 25
14º 982 55 1 06 981 49 1 05 980 44 1 03 979 41 1 01 978 40 99 977 41 97
20 22 22 24 25 26
15º 982 35 1 08 981 27 1 05 980 22 1 05 979 17 1 02 978 15 1 00 977 15 97
21 22 24 24 26 28
16º 982 14 1 09 981 05 1 07 979 98 1 05 978 93 1 04 977 89 1 02 976 87 1 00
22 23 24 26 27 28
17º 981 92 1 10 980 82 1 08 979 74 1 07 978 67 1 05 977 62 1 03 976 59 1 02
23 24 26 27 28 30
18º 981 69 1 11 980 58 1 10 979 48 1 08 978 40 1 06 977 34 1 05 976 29 1 03
24 25 26 28 29 30
19º 981 45 1 12 980 33 1 11 979 22 1 10 978 12 1 07 977 05 1 06 975 99 1 05
26 27 28 28 30 32
20º 981 19 1 13 980 06 1 12 978 94 1 10 977 84 1 09 976 75 1 08 975 67 1 06
26 27 28 30 31 32
21º 980 93 1 14 979 79 1 13 978 66 1 12 977 54 1 10 976 44 1 09 975 35 1 08
27 29 30 31 32 33
22º 980 66 1 16 979 50 1 14 978 36 1 13 977 23 1 11 976 12 1 10 975 02 1 09
28 29 30 31 33 33
23º 980 38 1 17 979 21 1 15 978 06 1 14 976 92 1 13 975 79 1 11 974 68 1 11
30 30 32 33 34 36
24º 980 08 1 17 978 91 1 17 977 74 1 15 976 59 1 14 975 45 1 13 974 32 1 11
30 32 32 34 34 36
25º 979 78 1 19 978 59 1 17 977 42 1 17 976 25 1 14 975 11 1 15 973 96 1 13
31 32 34 34 36 37
26º 979 47 1 20 978 27 1 19 977 08 1 17 975 91 1 16 974 75 1 16 973 59 1 14
33 33 34 36 37 38
27º 979 14 1 20 977 94 1 20 976 74 1 19 975 55 1 17 974 38 1 17 973 21 1 15
33 35 35 36 37 38
28º 978 81 1 22 977 59 1 20 976 39 1 20 975 19 1 18 974 01 1 18 972 83 1 17
34 35 36 37 39 40
29º 978 47 1 23 977 24 1 21 976 03 1 21 974 82 1 20 973 62 1 19 972 43 1 18
35 36 37 38 39 40
30º 978 12 1 24 976 88 1 22 975 66 1 22 974 44 1 21 973 23 1 20 972 03 1 20
TABLA 5 (a). I
(Continuación)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe- 19 20 21 22 23 24
raturas

10º 977 45 89 976 56 90 975 66 91 974 75 91 973 84 94 972 90 94


24 25 27 29 32 32
11º 977 21 90 976 31 92 975 39 93 974 46 94 973 52 94 972 58 97
25 27 28 30 31 34
12º 976 96 92 976 04 93 975 11 95 974 16 95 973 21 97 972 24 98
26 27 30 31 33 35
13º 976 70 93 975 77 96 974 81 96 973 85 97 972 88 99 971 89 1 00
26 29 30 32 34 35
14º 976 44 96 975 48 97 974 50 98 973 53 99 972 54 1 00 971 54 1 02
28 29 31 33 35 37
15º 976 16 97 975 19 99 974 20 1 00 973 20 1 01 972 19 1 02 971 17 1 04
29 31 32 33 35 37
16º 975 87 99 974 88 1 00 973 88 1 01 972 87 1 03 971 84 1 04 970 80 1 06
30 31 33 35 36 38
17º 975 57 1 00 974 57 1 02 973 55 1 03 972 52 1 04 971 48 1 06 970 42 1 08
31 32 34 36 38 40
18º 975 26 1 01 974 25 1 04 973 21 1 05 972 16 1 06 971 10 1 08 970 02 1 09
32 34 35 36 38 39
19º 974 94 1 03 973 91 1 05 972 86 1 06 971 80 1 08 970 72 1 09 969 623 1 11
33 34 36 38 39 41
20º 974 61 1 04 973 57 1 07 972 50 1 08 971 42 1 09 970 33 1 11 969 22 1 13
34 35 36 38 40 41
21º 974 27 1 05 973 22 1 08 972 14 1 10 971 04 1 11 969 93 1 12 968 81 1 15
34 36 38 39 41 43
22º 973 93 1 07 972 86 1 10 971 76 1 11 970 65 1 13 969 52 1 14 968 38 1 16
36 37 38 40 41 43
23º 973 57 1 08 972 49 1 11 971 38 1 13 970 25 1 14 969 11 1 16 967 95 1 17
36 38 40 41 42 44
24º 973 21 1 10 972 11 1 13 970 98 1 14 969 84 1 15 968 69 1 18 967 51 1 19
38 39 40 41 44 45
25º 972 83 1 11 971 72 1 14 970 58 1 15 969 43 1 18 968 25 1 19 967 06 1 20
38 40 41 43 44 45
26º 972 45 1 13 971 32 1 15 970 17 1 17 969 00 1 19 967 81 1 20 966 61 1 22
39 40 42 43 44 46
27º 972 06 1 14 970 92 1 17 969 75 1 18 968 57 1 20 967 37 1 22 966 15 1 24
40 41 42 44 46 47
28º 971 66 1 15 970 51 1 18 969 33 1 20 968 13 1 22 966 91 1 23 965 68 1 25
41 43 44 45 46 48
29º 971 25 1 17 970 08 1 19 968 89 1 21 967 68 1 23 966 45 1 25 965 20 1 26
42 42 44 45 47 48
30º 970 83 1 17 969 66 1 21 968 45 1 23 967 22 1 24 965 98 1 26 964 72 1 28
M

27
28
TABLA 5 (a). I
(Continuación)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe-
25 26 27 28 29 30
raturas

10º 971 96 94 971 02 97 970 05 99 969 06 1 01 968 05 1 03 967 02 1 08


35 37 39 41 43 45
11º 971 61 96 970 65 99 969 66 1 01 968 65 1 03 967 62 1 05 966 57 1 09
35 38 40 42 44 46
12º 971 26 99 970 27 1 01 969 26 1 03 968 23 1 05 967 18 1 07 966 11 1 12
37 38 40 42 44 46
13º 970 89 1 00 969 89 1 03 968 86 1 05 967 81 1 07 966 74 1 09 965 65 1 14
37 40 42 44 46 47
14º 970 52 1 03 969 49 1 05 968 44 1 07 967 37 1 09 966 28 1 10 965 18 1 16
39 40 42 44 46 48
15º 970 13 1 04 969 09 1 07 968 02 1 09 966 93 1 11 965 82 1 12 964 70 1 17
39 41 43 44 46 48
16º 969 74 1 06 968 68 1 09 967 59 1 10 966 49 1 13 965 36 1 14 964 22 1 20
40 42 43 46 47 49
17º 969 34 1 08 968 26 1 10 967 16 1 13 966 03 1 14 964 89 1 16 963 73 1 20
41 42 45 46 48 50
18º 968 93 1 09 967 84 1 13 966 71 1 14 965 57 1 16 964 41 1 18 963 23 1 23
41 44 45 47 49 50
19º 968 52 1 12 967 40 1 14 966 26 1 16 965 10 1 18 965 92 1 19 962 73 1 25
43 44 46 48 49 51
20º 968 09 1 13 966 96 1 16 965 80 1 18 964 62 1 19 963 43 1 21 962 22 1 26
43 45 46 48 50 52
21º 967 66 1 15 966 51 1 17 965 34 1 20 964 14 1 21 962 93 1 23 961 70 1 27
44 45 47 49 50 52
22º 967 22 1 16 966 06 1 19 964 87 1 22 963 65 1 22 962 43 1 25 961 18 1 29
44 47 48 49 52 53
23º 966 78 1 19 965 59 1 20 964 39 1 23 963 16 1 25 961 91 1 26 960 65 1 31
46 47 49 51 52 53
24º 966 32 1 20 965 12 1 22 963 90 1 25 962 65 1 26 961 39 1 27 960 12 1 32
46 48 50 51 52 55
25º 965 86 1 22 964 64 1 24 963 40 1 26 962 14 1 27 960 87 1 30 959 57 1 33
47 48 50 51 53 54
26º 965 39 1 23 964 16 1 26 962 90 1 27 961 63 1 29 960 34 1 31 959 03 1 36
48 49 50 52 54 55
27º 964 91 1 24 963 67 1 27 962 40 1 29 961 11 1 31 959 80 1 32 959 58 1 36
48 50 52 53 54 56
28º 964 43 1 26 963 17 1 29 961 88 1 30 960 58 1 32 959 26 1 34 957 92 1 38
49 51 52 54 55 57
29º 963 94 1 28 962 66 1 30 961 36 1 32 960 04 1 33 958 71 1 36 957 35 1 40
50 51 53 54 56 57
30º 963 44 1 29 962 15 1 32 960 83 1 33 959 50 1 35 958 15 1 37 956 78 1 40
M
5(b). TITULO ALCOHOMETRICO 5(b).4.2. Determinación areométrica.- Como
(Método areométrico) en 4(b).3, teniendo en cuenta que se utiliza desti-
lado en vez de vino, y que el tallo del areómetro
5(b). 1.Principio. viene graduado en grados alcohólicos aparentes.
Como en 5(a).1. Hacer al menos tres lecturas del grado alcohólico
aparente, sirviéndose si es preciso de una lupa.
5(b).2. Material y aparatos.
5(b).2.1. Aparatos de destilación.- Como en 5(b).5. Cálculo.
5(a).2.1. Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V.
5(b).2.2. Aparatos de areometría. a 207C, utilizando la tabla 5(b).I, añadiendo o res-
5(b).2.2.1. Alcohómetro. tando al grado alcohólico aparente a t7 la correc-
5(b).2.2.2. Termómetro. ción correspondiente.
5(b).2.2.3. Probeta.
5(b).6. Referencias.
5(b).3. Reactivos. 5(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
Como en 5(a).3. d’Analyse des Vins. O.I.V. A2, 1-25. 1969.
5(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de
5(b).4. Procedimiento. correspondance entre les diverses tables alcoo-
Las generalidades como en 5(a).4. métriques”. Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,
5(b).4.1. Destilación.- Como en 5(a).4.1. 111, 141, 1966.

TABLA 5 (b). I
Correcciones a efectuar sobre el grado alcohólico aparente
para corregir la acción de la temperatura

Tempe- Grados alcohólicos aparentes


raturas
0 1 2 3 4 5 6 7 8

10º 0,84 0,87 0,88 0,92 0,96 1,01 1,08 1,16 1,24

11º 0,80 0,81 0,83 0,86 0,90 0,96 1,01 1,08 1,16
12º 0,74 0,76 0,78 0,80 0,84 0,88 0,94 1,00 1,07
SUMAR

13º 0,67 0,69 0,70 0,73 0,76 0,80 0,85 0,90 0,95
14º 0,60 0,61 0,62 0,65 0,68 0,71 0,75 0,79 0,85

15º 0,51 0,52 0,54 0,56 0,58 0,61 0,64 0,68 0,72

16º 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,50 0,53 0,55 0,58
17º 0,32 0,33 0,34 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,46
18º 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,30 0,31
19º 0,11 0,12 0,12 0,13 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16

20º - - - - - - - - -

21º - 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,15 0,16


22º - 0,26 0,27 0,28 0,28 0,29 0,30 0,32 0,34
23º - 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51
24º - 0,56 0,57 0,58 0,59 0,61 0,64 0,67 0,70

25º - 0,71 0,72 0,73 0,75 0,78 0,81 0,84 0,89


29
RESTAR

26º - 0,86 0,88 0,91 0,93 0,96 1,00 1,04 1,09


27º - - 1,05 1,08 1,10 1,14 1,18 1,23 1,28
28º - - 1,22 1,25 1,28 1,33 1,38 1,44 1,50
29º - - 1,40 1,44 1,48 1,52 1,58 1,64 1,71

30º - - 1,59 1,62 1,66 1,71 1,77 1,85 1,93


TABLA 5 (b). I (continuación)
Tempe- Grados alcohólicos aparentes
raturas
9 10 11 12 13 14 15 16 17
10º 1,34 1,44 1,58 1,73 1,89 2,06 2,24 2,43 2,63
SUMAR

11º 1,25 1,34 1,46 1,59 1,73 1,88 2,04 2,21 2,38
12º 1,15 1,23 1,32 1,43 1,55 1,68 1,82 1,97 2,13
13º 1,02 1,10 1,18 1,28 1,38 1,48 1,60 1,72 1,85
14º 0,90 0,96 1,03 1,11 1,19 1,28 1,39 1,49 1,59
15º 0,77 0,82 0,87 0,94 1,01 1,09 1,17 1,26 1,34
16º 0,62 0,66 0,71 0,76 0,82 0,88 0,94 1,01 1,08
17º 0,48 0,51 0,55 0,58 0,63 0,67 0,71 0,76 0,81
18º 0,33 0,34 0,36 0,39 0,42 0,45 0,47 0,50 0,53
19º 0,16 0,17 0,18 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28
20º - - - - - - - - -
21º 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28
22º 0,35 0,37 0,40 0,42 0,44 0,46 0,48 0,51 0,54
23º 0,54 0,56 0,60 0,63 0,67 0,71 0,74 0,78 0,82
24º 0,73 0,77 0,81 0,85 0,89 0,94 0,99 1,04 1,09
25º 0,93 0,98 1,02 1,07 1,12 1,18 1,24 1,32 1,38
RESTAR

26º 1,14 1,19 1,24 1,30 1,36 1,43 1,51 1,57 1,65
27º 1,34 1,40 1,46 1,53 1,60 1,68 1,76 1,85 1,93
28º 1,56 1,62 1,68 1,75 1,83 1,92 2,02 2,11 2,21
29º 1,78 1,85 1,92 2,00 2,08 2,17 2,28 2,39 2,50
30º 2,00 2,07 2,15 2,23 2,33 2,45 2,55 2,67 2,79
TABLA 5 (b). I (continuación)
Tempe- Grados alcohólicos aparentes
raturas
18 19 20 21 22 23 24 25 26
10º 2,84 3,01 3,15 3,29 3,44 3,58 3,70 3,82 3,93
SUMAR

11º 2,56 2,71 2,84 2,95 3,08 3,21 3,32 3,42 3,52
12º 2,27 2,40 2,51 2,63 2,73 2,84 2,93 3,02 3,10
13º 1,99 2,11 2,20 2,29 2,38 2,47 2,57 2,64 2,71
14º 1,71 1,81 1,89 1,96 2,03 2,11 2,19 2,25 2,30
15º 1,44 1,51 1,58 1,64 1,71 1,77 1,82 1,87 1,91
16º 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36 1,40 1,45 1,49 1,53
17º 0,85 0,90 0,95 0,99 1,02 1,06 1,09 1,12 1,15
18º 0,56 0,60 0,63 0,65 0,68 0,70 0,72 0,75 0,76
19º 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37
20º - - - - - - - - -
21º 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38
22º 0,57 0,60 0,62 0,65 0,67 0,69 0,71 0,73 0,74
23º 0,86 0,90 0,94 0,98 1,00 1,03 1,06 1,08 1,11
24º 1,14 1,21 1,27 1,31 1,35 1,38 1,42 1,46 1,50
30 25º 1,44 1,51 1,60 1,65 1,69 1,72 1,76 1,81 1,86
RESTAR

26º 1,73 1,82 1,90 1,97 2,02 2,06 2,12 2,18 2,23
27º 2,02 2,12 2,22 2,30 2,36 2,42 2,47 2,53 2,59
28º 2,31 2,43 2,54 2,63 2,70 2,76 2,83 2,90 2,96
29º 2,62 2,73 2,85 2,96 3,05 3,11 3,18 3,25 3,32
30º 2,91 3,04 3,16 3,28 3,38 3,38 3,46 3,54 3,61
M
TABLA 5 (b). I (continuación)

Tempe- Grados alcohólicos aparentes


raturas
27 28 29 30

10º 4,04 4,14 4,24 4,43

11º 3,61 3,69 3,78 3,86


12º SUMAR 3,18 3,25 3,32 3,39
13º 2,78 2,84 2,89 2,94
14º 2,36 2,42 2,47 2,52

15º 1,96 2,01 2,05 2,09

16º 1,56 1,59 1,62 1,64


17º 1,17 1,19 1,21 1,23
18º 0,77 0,79 0,81 0,82
19º 0,38 0,40 0,41 0,42

20º - - - -

21º 0,38 0,39 0,39 0,40


22º 0,76 0,78 0,79 0,81
23º 1,14 1,16 1,19 1,21
24º 1,53 1,56 1,58 1,60

25º 1,90 1,94 1,97 2,00

26º 2,28 2,31 2,35 2,39


RESTAR

27º 2,64 2,70 2,74 2,78


28º 3,02 3,07 3,12 3,16
29º 3,39 3,45 3,51 3,56

30º 3,76 3,83 3,89 3,95

6. EXTRACTO SECO TOTAL 6.3. Cálculo.


Calcular el extracto seco expresado en g/l a
6.1. Principio. partir de la densidad del residuo sin alcohol utili-
El extracto seco total o materias secas totales zando la tabla 6.I.
es el conjunto de todas las sustancias que, en 6.3.1. Determinar la densidad del residuo sin
condiciones físicas determinadas, no se volatili- alcohol como en 6.2.
zan. Estas condiciones físicas deben fijarse de tal 6.3.2. Calcular la densidad 20/20 del residuo
manera que las sustancias componentes de este sin alcohol según la fórmula de Tabarié:
extracto sufran el mínimo de alteración.
El extracto seco total se calcula indirectamen- dr = dv - da +1
te conociendo la densidad del “residuo sin alco-
hol”, que es el vino cuyo alcohol ha sido evapora- d = densidad 20/20 del residuo sin alcohol.
r

do y después se ha restablecido el volumen primi- dv = densidad del vino a 207.


tivo por adición de agua. da = densidad a 207 de la mezcla hidroalcohólica
del mismo grado que el vino.
6.2. Procedimiento. 6.3.3. Calcular la densidad del residuo sin
Llevar el residuo de la destilación del alcohol del alcohol a partir de las masas volúmicas.
vino (sin previa neutralización) al matraz en donde 31
se midió el vino. Lavar el matraz en donde se des- dr = 1,0018 (rv - ra) + 1
tiló el vino con varias porciones de agua, y llenar rv = masa volúmica del vino a 20º.
con estas aguas hasta volumen, el matraz con el ra = masa volúmica a 207 de la mezcla hidroalco-
residuo de la destilación, a la misma temperatura a hólica del mismo grado que el vino.
la que se enrasó el vino. Mezclar bien, verter en una Para valores de rv menores a 1,05 puede
probeta y determinar la densidad como en 4(a). tomarse 1 en vez de 1,0018.
6.4. Observaciones. 6.5. Referencia.
El extracto seco se expresa por la cantidad de 6.5.1. Recueil des Méthodes Internationales
sacarosa que, disuelta en agua hasta 1 l, da una d’ Analyse des Vins. O.I.V. A3, 1-6. 1969.
solución de la misma densidad que el residuo sin
alcohol. En la tabla 6. I se encuentra la equivalen-
cia de esta densidad, en extracto, expresada en
sacarosa.
TABLA 6. I
Contenido en extracto seco (g/l)

Densidad Tercer decimal de la densidad


con dos
deci-
males 0 1 2 3 4 5

Gramos de extracto por litro

1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9

1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8


1,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7
1,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7
1,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8

1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9

1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0


1,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2
1,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5
1,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8

1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2

1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6


1,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1
1,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7
1,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3

1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9

1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7


1,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5
1,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4
1,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3

1,20 527,8 - - - - -

32
M
TABLA 6. I
(Continuación)

Densidad Tercer decimal de la densidad


con dos
deci-
males 6 7 8 9

Gramos de extracto por litro

1,00 15,4 18,0 20,6 23,2

1,01 41,3 43,9 46,5 49,1


1,02 67,3 69,9 72,5 75,1
1,03 93,3 95,9 98,5 101,1
1,04 119,4 122,0 124,6 127,2

1,05 145,5 148,1 150,7 153,3

1,06 171,6 174,3 176,9 179,5


1,07 197,8 200,5 203,1 205,8
1,08 224,1 226,8 229,4 232,0
1,09 250,4 253,1 255,7 258,4

1,10 276,8 279,5 282,1 284,8

1,11 303,3 305,9 308,6 311,2


1,12 329,8 332,4 335,1 337,8
1,13 356,3 359,0 361,6 364,3
1,14 382,9 385,6 388,3 390,9

1,15 409,6 412,3 415,0 417,6

1,16 436,4 439,0 441,7 444,4


1,17 463,2 465,9 468,6 471,3
1,18 490,1 492,8 495,5 498,2
1,19 517,0 519,7 522,4 525,1

1,20 - - - -

TABLA INTERCALAR

4º decimal
de la densidad Extracto g/l

1 0,3
2 0,5
3 0,8
4 1,0
5 1,3
6 1,6
7
8
1,8
2,1
33
9 2,3
7 (a). AZUCARES REDUCTORES ACS hasta 1.000 ml. Comprobar esta solución
(Defecación plúmbica) poniendo en un vaso de vidrio 30 ml de solución
(Provisional) C, 100 ml de Agua PA-ACS y una gota de Hierro
II-1, 10 Fenantrolina. La coloración amarillo-ver-
7(a).1. Principio. dosa de esta mezcla debe virar a verde puro con
Eliminación previa de todas las materias reduc- una sola gota de Potasio Permanganato 0,02
toras distintas de los azúcares por defecación con mol/l (0,1N) SV. En caso contrario, añadir Potasio
plomo acetato neutro, y valoración basada en la Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV a la solución
acción reductora sobre solución cupro-alcalina. hasta conseguir el viraje descrito. Generalmente
Aplicable a vinos blancos y tintos de color no muy es necesario añadir 1-3 ml de Potasio Permanga-
intenso. nato 0,02 mol/l (0,1N) SV por l de solución C.
7(a).3.7. Solución de Hierro II-1,10 Fenantroli-
7(a).2. Material y aparatos. na. Mezclar 0,695 g de Hierro II Sulfato p2-hidra-
7(a).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeran- to PA , 100 ml de Agua PA-ACS y 1,485 g de
te de reflujo. 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS.
7(a).2.2. Filtro de vidrio G3 con capa fina de 7(a).3.8. Potasio Permanganato 0,02 mol/l
amianto de fibra fina y lavado con agua hirviendo. (0,1N) SV. En su defecto preparar disolviendo 3,16 g
7(a).2.3. Kitasatos de 500 ml con frasco de de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en Agua
seguridad intermedio. PA-ACS hasta 1 l. Comprobar esta solución por
valoración con una solución de di-Sodio Oxalato
7(a).3. Reactivos. PA-ACS
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS 7(a).4. Procedimiento.
121212 Calcio Carbonato precipitado PA 7(a).4.1. Vinos secos.- Llevar 100 ml de vino a
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO un matraz aforado de 125 ml, añadir (V-0,5) ml de
171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volu-
121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA men de solución N/10 utilizada para valorar la
121360 Hierro III Sulfato x-hidrato PA acidez total de 10 ml de vino, como en 20.4. Aña-
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato dir agitando 5 ml de solución saturada de Plomo
PA-ACS-ISO II Acetato y 1g de Calcio Carbonato precipitado
181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l PA, agitar varias veces y dejar sedimentar por lo
(0,1N) SV menos 15 minutos, enrasar con Agua PA-ACS,
(o preparar con 131527 Potasio Permangana- añadir 0,6 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.
to PA-ACS-ISO) 7(a).4.2. Vinos dulces.- En un matraz aforado
131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato de 100 ml colocar un volumen de vino variable
PA-ACS-ISO según su riqueza en azúcar. Para vinos dulces con
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97% masa volúmica comprendida entre 1,005 y 1,038,
PA-ACS-ISO tomar 20 ml de líquido a analizar, diluido al 20%.
182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV Para vinos abocados con masa volúmica entre
131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS 0,997 y 1,006, tomar 20 ml de vino no diluido.
Añadir 0,5 g. de Calcio Carbonato precipitado
7(a).3.1. Solución de Plomo II Acetato (aproxi- PA, unos 60 ml de Agua PA-ACS y cantidad (0,5-
madamente saturada). Añadir a 250 g de Plomo II 2,0 ml) de solución saturada de Plomo II Acetato
Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACS hasta el límite del enturbiamiento, agitar y dejar
caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolución com- reposar durante 15 minutos por lo menos, agi-
pleta. tando de cuando en cuando. Enrasar, añadir
7(a). 3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV 0,2 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.
7(a).3.3. Calcio Carbonato precipitado PA Un ml del filtrado corresponde a 0,04 ml de
7(a).3.4. Solución Cúprica A. Mezclar 40 g de vino dulce y 0,20 ml de vino abocado.
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO con 2 ml En el Erlenmeyer de 300 ml, poner 20 ml de
de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir Agua solución Cúprica A, 20 ml de solución Tartrato-
PA-ACS hasta 1 l. Alcalina B, 20 ml de solución azucarada conte-
34 7(a).3.5. Solución Tartrato-Alcalina B. Mezclar niendo de 10 a 100 mg de azúcar reductor. Hacer
200 g de Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS- hervir con reflujo (o con la boca del matraz tapada
ISO con 150 g de Sodio Hidróxido lentejas 97% con un pequeño embudo) durante 3 minutos,
PA-ACS-ISO y añadir Agua PA-ACS hasta 1 l. enfriar inmediatamente bajo una corriente de
7(a).3.6. Solución de Hierro III C. Mezclar 50 g Agua PA-ACS hasta refrigeración completa, dejar
de Hierro III Sulfato x-hidrato PA con 20 g de posar el Cobre I Oxido (inclinando el Erlenmeyer
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir Agua PA- en un cristalizador con algodón y descansando el
M
cuello en el borde), filtrar después por el filtro G3 Agua PA-ACS fría cada vez.
con la capa de amianto, ayudando la filtración con Valorar el Hierro II Sulfato formado, que se
la trompa de vacío. Tener la precaución de que, en encuentra en el líquido del Kitasato, con Potasio
lo posible, haya una capa de líquido sobre el pre- Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV, añadiendo
cipitado adherido al fondo, tanto en el filtro como previamente una gota de solución de Hierro II-
en el Erlenmeyer, para evitar que se oxide. Lavar 1,10-Fenantrolina. Dar por terminada la valoración
el precipitado del Erlenmeyer con Agua PA-ACS cuando el color pase de verde-naranja a verde
hirviendo y verter en el filtro, repitiendo tres veces franco.
la operación, agitar cada vez con precacución de
operar rápidamente para no dejar al descubierto 7(a).5. Cálculo.
el precipitado de Cobre I Oxido. Cambiar el Kita- La cantidad de azúcar contenida en la solución
sato y proceder a la disolución del Cobre I Oxido, azucarada utilizada se obtiene en la tabla 7(a).I.
añadiendo primero al Erlenmeyer unos 10 ml de
solución C de Hierro III Sulfato, que disuelve rápi- 7(a).6. Referencias.
damente el precipitado y verter la solución en el fil- 7(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
tro. Disolver el precipitado que queda en el filtro, d’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 8-10, 1969.
agitando con varilla de vidrio para facilitar la diso- 7(a).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, págs.
lución. Repetir tres veces estas adiciones y lavar 170-171, 1951.
Erlenmeyer y filtro cinco veces con unos 20 ml de

TABLA 7 (a). I
KMn04 Azúcar KMn04 Azúcar KMn04 Azúcar
N/10 invertido N/10 invertido N/10 invertido
ml mg ml mg ml mg
4,0 12,4 12,0 39,1 20,0 68,7
4,2 13,0 12,2 39,7 20,2 69,3
4,4 13,6 12,4 40,5 20,4 70,1
4,6 14,3 12,6 41,2 20,6 70,9
4,8 14,9 12,8 42,0 20,8 71,6
5,0 15,5 13,0 42,6 21,0 72,4
5,2 16,2 13,2 43,3 21,2 73,2
5,4 16,8 13,4 44,1 21,4 74,1
5,6 17,5 13,6 44,7 21,6 74,9
5,8 18,1 13,8 45,5 21,8 75,6
6,0 18,8 14,0 46,3 22,0 76,4
6,2 19,4 14,2 47,0 22,2 77,2
6,4 20,1 14,4 47,6 22,4 78,0
6,6 20,7 14,6 48,4 22,6 78,7
6,8 21,4 14,8 49,1 22,8 79,5
7,0 22,0 15,0 49,8 23,0 80,3
7,2 22,7 15,2 50,5 23,2 81,1
7,4 23,4 15,4 51,3 23,4 81,9
7,6 24,1 15,6 52,1 23,6 82,7
7,8 24,7 15,8 52,7 23,8 83,5
8,0 25,5 16,0 53,5 24,0 84,4
8,2 26,1 16,2 54,2 24,2 85,2
8,4 26,8 16,4 55,0 24,4 86,0
8,6 27,5 16,6 55,7 24,6 86,7
8,8 28,1 16,8 56,4 24,8 87,5
9,0 28,8 17,0 57,2 25,0 88,4
9,2 29,5 17,2 57,9 25,2 89,2
9,4 30,1 17,4 58,7 25,4 90,0
9,6 30,8 17,6 59,4 25,6 90,9
9,8 31,5 17,8 60,1 25,8 91,6
10,0 32,2 18,0 61,0 26,0 92,5
10,2 32,9 18,2 61,6 26,2 93,3
10,4
10,6
33,6
34,3
18,4
18,6
62,4
63,2
26,4
26,6
94,1
95,0 35
10,8 35,0 18,8 64,0 26,8 95,8
11,0 35,6 19,0 64,8 27,0 96,6
11,2 36,4 19,2 65,4 27,2 97,3
11,4 37,0 19,4 66,2 27,4 98,2
11,6 37,7 19,6 67,1 27,6 99,1
11,8 38,4 19,8 67,8 27,8 99,9
7(b). AZUCARES REDUCTORES completa, enfriar y añadir Agua PA-ACS hasta 1
(Defecación mercúrica) litro.
(Provisional) 7(b).3.2. Solución de Sodio Hidróxido 4N apro-
ximadamente. Tomar Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N)
7(b).1. Principio. SV y diluir convenientemente. Esta solución debe
Eliminación previa de todas las materias reduc- poder neutralizar exactamente un volumen igual al
toras distintas de los azúcares por defecación con suyo, de la solución de Mercurio II en presencia de
mercurio II acetato, y valoración por la acción Fenolftaleína PA-ACS. Se debe comprobar esta
reductora de los azúcares sobre la solución correspondencia antes de su empleo, en particu-
cupro-alcalina. Aplicable a vinos jóvenes, de color lar si se observa un depósito en la solución de
intenso y ricos en azúcar, o cuando se va a reali- Mercurio II y si es necesario diluir la solución só-
zar una valoración polarimétrica. Este método dica.
proporciona la menor pérdida de azúcares reduc- 7(b).3.3. Zinc metal, polvo PRS. Para eliminar
tores. el exceso de Mercurio.
7(b).3 (4,5,6,7,y 8). Como 7 (a). 3 (4,5,6,7 y 8).
7(b).2. Material y aparatos.
7(b).2.1. Aparato generador de ácido sulfhídri- 7(b).4. Procedimiento.
co. Filtrar el gas producido por la acción del ácido 7(b).4.1. Vinos secos y dulces, en los que se
clorhídrico diluido sobre el hierro II sulfuro por propone determinar el azúcar y la desviación pola-
paso a través de lana de vidrio y lavado en un rimétrica. Colocar 100 ml de vino en una cápsula
frasco lavador con agua. de 10-12 cm de diámetro y adicionar (V-0,5) ml de
7(b).2.2. Dispositivo para eliminar el exceso de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volu-
ácido sulfhídrico. Eliminar el ácido sulfhídrico en men de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
exceso después de la precipitación del exceso de empleado para valorar la acidez total de 10 ml de
mercurio, mediante aspiración conectada al tubo vino, como en 20.4. Evaporar en baño de agua
lateral de un Kitasato, en el que se encuentra el hirviendo con corriente de aire caliente sobre la
líquido a tratar. Tapar el matraz con un tapón atra- superficie del líquido, hasta reducir el volumen a
vesado por un tubo que se sumerge en el líquido. 50 ml, aproximadamente. Llevar a un matraz de
Humedecer el aire aspirado que entra en el tubo 100 ml, lavar tres veces la cápsula con Agua PA-
por borboteo en un matraz de un litro lleno hasta ACS, añadir 5 ml de solución de Mercurio II y, agi-
la mitad de agua. tando, 5 ml de solución de Sodio Hidróxido que
se corresponde, volumen a volumen, con la de
7(b).3. Reactivos. Mercurio II (solución de Sodio Hidróxido 4N apro-
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO ximadamente), dejar reaccionar 5 minutos por lo
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO menos; añadir 2 ml de solución de Mercurio II
131074 Agua PA-ACS Acetato y enrasar a 100 ml. Filtrar y recoger el fil-
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO trado en un Kitasato de 500 ml.
171321 1,10 -Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS Tratar el filtrado con una corriente de Acido
131325 Fenolftaleína PA-ACS Sulfhídrico para precipitar el Mercurio en forma de
121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA Sulfuro negro (este tratamiento puede detenerse
131426 Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS cuando el precipitado tome color negro). Después
181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l se hace barbotar aire (previamente saturado de
(0,1N) SV vapor de agua) a través del líquido, hasta que
(o preparar con 131527 Potasio Permanganato haya perdido todo su olor a Acido Sulfhídrico
PA-ACS-ISO (5-10 minutos) y se filtra. Un ml del filtrado corres-
131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato ponde a 1 ml de vino. Este líquido se emplea sin
PA-ACS-ISO dilución cuando se trata de vino seco o con unos
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97% 5 g/l de azúcar.
PA-ACS-ISO Con vino más rico en azúcar conviene diluir
181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV después del examen polarimétrico y antes del
182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV análisis químico.
182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV 7(b).4.2. Vinos secos y dulces en los que sola-
36 131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS mente se va a realizar el análisis del azúcar por el
141783 Zinc metal, polvo PRS método químico y no por polarografía. Tomar
20 ml de vino sin diluir o diluido según norma
7(b).3.1. Solución de Mercurio II. Mezclar 240 g anterior, añadir 20 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de
de Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS con 240 ml solución de Mercurio II Acetato y añadir, agitando,
de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y añadir 1 ml de la solución sódica.
Agua PA-ACS hasta 1 litro. Hervir hasta disolución Dejar actuar 5 minutos por lo menos, añadir
M
1 ml de solución de Mercurio II, enrasar con agua posterior valoración basada en la acción reducto-
y filtrar. Tratar con Acido Sulfhídrico y aire húmedo ra de los azúcares sobre una solución cupro-alca-
barbotando en la forma antes expuesta, y filtrar. lina.
Continuar como en 7(a). 4 después de la defe-
cación. 7(c).2. Material y aparatos.
7(c).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeran-
7(b).5. Observaciones. te de reflujo.
En los análisis de azúcar por el método quími- 7(c).2.2. Material necesario para volumetría.
co, para vinos no muy ricos en azúcar, en vez de 7(c).2.3. Baño de agua.
eliminar el exceso de mercurio por el ácido sulfhí-
drico, es más práctico eliminarlo mediante la adi- 7(c).3. Reactivos.
ción de Zinc metal, polvo PRS, de la siguiente 131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS
forma: Añadir 1 g de Zinc metal, polvo PRS al 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
líquido filtrado, agitar durante 2 horas de cuando 131074 Agua PA-ACS
en cuando, y filtrar. 171096 Almidón soluble RE
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
7(b).6. Referencias. 211835 Piedra Pómez gránulos QP
7(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales 131542 Potasio Yoduro PA-ISO
d’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 6-8. 1969. 131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO
7(b).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, pág. 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
176, 1951. 181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV

7(c). AZUCARES REDUCTORES 7(c).3.1. Solución Cupro-Alcalina:


(Valoración) Disolver por separado: 25 g de Cobre II Sulfa-
to 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-
7(c).1. Principio. ACS; 50 g de Acido Cítrico anhidro PA-ACS en
Eliminación de las materias reductoras distin- 300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Car-
tas de los azúcares reductores por defecación, y bonato 10-hidrato PA-ISO en 300-400 ml de Agua

TABLA 7(c).I
Azúcares reductores, expresados en mg

ml sodio Primera cifra decimal


tiosulfato
0,1N 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

0 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,9
1 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,1
2 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,4
3 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,7
4 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,1
5 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,5
6 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,9
7 23,2 23,5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,3
8 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,7
9 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,0
10 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,5
11 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,0
12 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,5
13 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,0
14 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,5
15 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,0
16 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,6
17 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,4
18 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,1
19 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,0 37
20 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,9
21 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,8
22 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,8
23 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,8
24 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,8
25 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8
PA-ACS caliente. Mezclar la solución de Acido 8. GLICEROL (Glicerina)
Cítrico y la de Sodio Carbonato. Añadir a continua-
ción la solución de Cobre II Sulfato y completar el 8.1. Principio.
volumen con Agua PA-ACS hasta un litro. La glicerina separada del vino, previa defeca-
7(c).3.2. Solución de Potasio Yoduro al 30%. ción, por extracción con acetona, se oxida con
Conservar en frasco topacio. ácido peryódico a formaldehído. La reacción
7(c).3.3. Solución de Acido Sulfúrico al 25% en coloreada del formaldehído con la fluoroglucina
volumen. permite la determinación espectrofotométrica a
7(c).3.4. Solución de Engrudo de Almidón de 480 nm. La presencia de sorbitol y de manitol
5 g/l; contendrá 200 g/l de Sodio Cloruro PA- son causa de error en la determinación de glice-
ACS-ISO para asegurar su conservación. Esta rina.
solución debe ser mantenida diez minutos en ebu-
llición en el momento de su preparación. 8.2. Material y aparatos.
7(c).3.5. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV. 8.2.1. Aparato de destilación. Compuesto de
las siguientes partes:
7(c).4. Procedimiento. 8.2.1.1. Matraz esférico de 500 ml.
Poner en el Erlenmeyer de 300 ml, 25 ml de la 8.2.1.2. Columna rectificadora.
solución Cupro-Alcalina y 25 ml del vino previa- 8.2.1.3. Columna Widmer con camisa de aisla-
mente defecado según 7(a) o 7(b). Este volumen miento.
añadido no debe contener más de 60 mg de azú- 8.2.1.4. Termómetro con escala de 0-1107 C.
cares reductores. 8.2.1.5. Refrigerante.
Añadir algunos granos de Piedra Pómez grá- 8.2.2. Frascos con tapón esmerilado de 1 l y de
nulos QP, y llevar a ebullición, que debe ser alcan- 60 ml.
zada en dos minutos, adaptando el Erlenmeyer al 8.2.3. Matraz aforado de 50 ml.
refrigerante de reflujo y mantener exactamente 8.2.4. Matraz aforado de 200 ml.
durante diez minutos la ebullición. 8.2.5. Matraces con tapón esmerilado de 60 ml.
Enfriar inmediatamente bajo corriente de agua 8.2.6. Matraces aforados de 100 ml.
fría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yodu- 8.2.7. Kitasato o recipiente para vacío de 250 ml.
ro al 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico 8.2.8. Filtro de porosidad número 4.
al 25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A conti- 8.2.9. Filtros de papel Schleicher et Schull 1574
nuación, valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l de 12,5 cm de diámetro o similar.
(0,1N) SV. 8.2.10 Espectrofotómetro con cubetas de 1 cm
Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo de espesor interior.
los 25 ml del vino previamente defecados por
igual volumen de Agua PA-ACS y tratar como se 8.3. Reactivos.
ha indicado antes para la muestra. 131007 Acetona PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
7(c).5. Cálculo. 181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV
La cantidad de azúcar, expresada en azúcar 131074 Agua PA-ACS
invertido contenida en la muestra analizada, se 211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP
obtiene en la tabla 7(c).1 en función del n’ - n de 131188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO
ml de tiosulfato utilizado. Fluoroglucina 0,2%
Siendo: 141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
n = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N 211456 Piedra Pómez gránulos QP
utilizados en la valoración de la muestra. 121523 Potasio meta-Peryodato PA
n’ = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N 181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
utilizados en la prueba en blanco.
Expresar el contenido del vino en g de azúcar 8.3.1. Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO.
invertido por litro, teniendo en cuenta las dilucio- 8.3.2. Arena de Mar lavada, grano fino QP
nes efectuadas en el curso de la defecación del 8.3.3. Acetona PA-ACS-ISO
volumen de la muestra analizada. 8.3.4. Sodio Hidróxido 1N SV.
8.3.5. Piedra Pómez gránulos QP
38 7(c).6. Referencia. 8.3.6. Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (IN) SV
7(c).6.1. Recueil des Méthodes Internationales 8.3.7. Solución 0,05 M de Acido Peryódico. En un
d’Analyse des Vins. O.I.V. A 4e 29-31. matraz aforado de 1 l, introducir 11,5 g de Potasio
meta-Peryodato (KIO4) y aproximadamente unos 800
a 850 ml de Agua PA-ACS. Si la sal utilizada es
K2H3IO6 se pesan 15,2 g. Añadir en seguida 15 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y calentar muy ligeramen-
M
te en baño de agua hasta disolución completa. Enfriar Destilar la Acetona con llama fuerte, hasta que el
a la temperatura ordinaria y llenar hasta volumen. termómetro marque 100ºC, y destilar después
8.3.8. Solución de Fluoroglucina 0,2%. Esta 20 ml más de Agua PA-ACS.
solución debe ser renovada cada 15 días. Añadir al residuo de la destilación aún caliente,
8.3.9. Solución madre de Glicerina. Diluir unos 5 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV, dejar
20 ml de Glicerina PRS-CODEX a 100 ml. Determi- enfriar y trasvasar a matraz aforado de 50 ml. Se
nar después la concentración exacta de esta solu- enrasa con las aguas de lavado del matraz, agitar y
ción midiendo su índice de refracción, y después, filtrar por filtro de papel.
por diluciones convenientes y sucesivas, llevar su 8.4.2. Valoración de la glicerina.- Esta operación
concentración a 0,1 g por l. hay que realizarla antes de las 2 o 3 horas siguien-
tes a la separación de los polioles.
8.4. Procedimiento. Llevar una alícuota de 5 ml del filtrado anterior a
Extraer los polioles y valorar la glicerina. matraz aforado de 100 ml y enrasar con Agua PA-
8.4.1. Separación de polioles.- Introducir en un ACS.
matraz de 100 ml, de tapón esmerilado, 5 g de Introducir 20 ml de esta dilución en un matraz de
Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO (no pulverizar), 5 g 60 ml con tapón esmerilado. Añadir 10 ml de solu-
de Arena de Mar lavada, grano fino QP y 10 ml de ción de Acido Peryódico 0,05 M. Agitar y dejar en
vino, que se deja deslizar por la pared del matraz. reposo 5 minutos.
Si el vino contiene más de 120 g de azúcar por Añadir después sucesiva y rápidamente, desli-
litro, se opera sólo con 5 ml. zando a lo largo de la pared, las siguientes solucio-
Agitar enérgicamente durante 30 segundos y nes: 10 ml de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y
dejar en reposo, agitando de cuando en cuando. 10 ml de solución de Fluoroglucina. Agitar después
Añadir después 50 ml de Acetona PA-ACS-ISO y de la adición de cada una de las soluciones.
agitar otra vez durante 30 segundos. Llevar el Llevar rápidamente la mezcla de soluciones a la
matraz a un termostato a 45ºC durante 5 minutos, cubeta del espectrofotómetro y medir la absorban-
agitando enérgicamente cada minuto. cia a 480 nm en un minuto, porque la coloración
Filtrar la solución caliente por un crisol filtrante de violeta que se obtiene es muy fugaz.
porosidad número 4 dispuesto sobre Kitasato de Ajustar el espectrofotómetro de forma que la
vidrio en el que se han puesto 40 ml de Agua PA- solución obtenida, al sustituir en las operaciones
ACS y 5 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. anteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PA-
Lavar el residuo tres veces con Acetona PA-ACS- ACS, dé una densidad óptica 0.
ISO, removiendo el precipitado con una espátula. 8.4.3. Obtención de la curva patrón.
Escurrir después el precipitado lo más posible. Tras- Diluir 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175 ml de solución
vasar después este precipitado al matraz del apara- inicial de glicerina de 0,1 g por l, a 200 ml.
to destilador, enjuagando bien el Kitasato con Ace- Tomar después 20 ml de cada una de estas dilu-
tona PA-ACS-ISO. ciones y 20 ml de la solución inicial, y llevar a fras-

TABLA 8.I

FACTORES DE CORRECCION PARA EL CONTENIDO EN GLICERINA


DE VINOS QUE CONTENGAN AZUCARES

Contenido en Contenido en
azúcar g/l Factor azúcar g/l Factor

5 1,020 80 1,123
10 1,030 90 1,134
20 1,045 100 1,145
30 1,060 110 1,156
40 1,073 120 1,168
39
50 1,086 130 1,180
60 1,099 140 1,191
70 1,111 150 1,202
cos de 60 ml con tapón esmerilado y tratar como en 9.3.9. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%.
8.4.2 para los 20 ml de la dilución del filtrado. Medir Conservar en la oscuridad y renovar semanalmente.
después las densidades ópticas correspondientes, 9.3.10. Solución de Piperidina al 10%. Renovar
ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2. cada 15 días.
Esta escala corresponde a riquezas en glicerina 9.3.11. Solución madre de 2,3-Butanodiol. Utili-
en 0,2 ml de vino, que varían de 0 a 2 mg zar 2,3-Butanodiol rectificado, desechando el pri-
mero y el último tercio. Pesar con exactitud 2 g y
8.5. Cálculo. disolverlos en 1.000 ml. Diluir esta solución hasta
Calcular el contenido en glicerina expresado en g/l. 1/10.

P 9.4. Procedimiento.
Glicerina = 50 —— f g/l Extraer los polioles y valorar el 2,3-Butanodiol.
V 9.4.1. Separación de polioles. Como en 8.4.1.
9.4.2. Valoración del 2,3-Butanodiol.
P = peso en g de glicerina obtenido de la curva Esta operación hay que realizarla antes de las 2
patrón. o 3 horas siguientes a la separación de los polioles.
V = volumen en ml de la muestra de vino. Llevar a un matraz de 60 ml con tapón esmerila-
f = 1 para contenido de azúcar en vinos inferiores a do 5 ml del filtrado, 5 ml de solución de Sodio Ace-
5 g/l. tato al 27% y 10 ml de solución de Acido Peryódico
f = valor del factor de corrección según la tabla 8.I 0,05M.
para contenidos de azúcar en vinos superiores a Agitar y dejar 2 minutos en contacto. Añadir
5 g/l. deslizando por las paredes del frasco: 5 ml de
8.6. Referencia. solución de Sodio Nitroprusiato al 2% y 5 ml de la
8.6.1. Recueil des Méthodes Internationales solución de Piperidina al 10%. Agitar después de
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9, 1969. la adición de cada una de las soluciones. Llevar
inmediatamente la solución a la cubeta de 1 cm
9. 2,3-BUTANODIOL y hacer la lectura en el espectrofotómetro a
570 nm. La coloración violeta que se obtiene con
9.1. Principio. la reacción alcanza el máximo de intensidad a los
El 2,3-butanodiol separado del vino, previa defe- 30-40 segundos y después disminuye rápida-
cación, por extracción con acetona, se oxida con mente.
ácido peryódico a acetaldehído. La reacción colo- Ajustar el espectrofotómetro de forma que la
reada del acetaldehído con el sodio nitroprusiato y solución obtenida al sustituir en las operaciones
la piperidina permite la determinación espectrofoto- anteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PA-
métrica a 570 nm. ACS dé una densidad óptica 0.
9.4.3. Obtención de la curva patrón.
9.2. Material y aparatos. Diluir 10, 20, 30, 40, 50, 60 y 70 ml de la solu-
9.2. (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10), como 8.2. (1, ción inicial hasta 100 ml. Tomar 5 ml de cada una de
2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10). estas diluciones y tratarlas como en 9.4.2 para los
5 ml del filtrado inicial. Determinar inmediatamente
9.3. Reactivos. las densidades ópticas máximas correspondientes,
131007 Acetona PA-ACS-ISO ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2.
Acido Peryodico 0,05 M Esta curva proporciona valores de contenido en
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO 2,3-Butanodiol en 5 ml de vino que varían de 0 a
181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV 0,7 mg.
131074 Agua PA-ACS
211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP 9.5. Cálculo.
121188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA 9.5.1. Vinos con contenido en azúcar inferior a
124551 2,3-Butanodiol PA 5 g/l. La cantidad de 2,3-butanodiol en g/l de vino
211456 Piedra pómez granulos QP es igual a la cantidad de 2,3-butanodiol en mg con-
162377 Piperidina PS tenido en 5 ml del filtrado.
121523 Potasio meta-Peryodato PA 9.5.2. Vinos cuyo contenido en azúcar está
40 131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS comprendido entre 5 y 120 g/l.
181691 Sodio Hidroxido 1 mol/l (1N) SV La cantidad calculada según 9.5.1 se corrige
121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA sumando o restando el factor encontrado en la tabla
9.I.
9.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7), como 8.3. (1; 2; 3; 4; 5; 9.5.3. Vinos con contenidos en azúcar superio-
6 y 7). res a 120 g/l.- (La defecación se realiza sobre 5 ml
9.3.8. Solución de Sodio Acetato al 27%. de vino). La cantidad calculada según 9.5.1 se corri-
M
ge como en 9.5.2, utilizando sólo la mitad del con- 9.6. Referencia.
tenido en azúcar. El resultado multiplicado por 2 es 9.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-
el contenido en 2,3-butanodiol en g/l de vino. nalyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9. 1969.

TABLA 9.I

Correcciones a realizar para expresar el contenido en


2,3-butanodiol de vinos con azúcares

Contenido en azúcar, g/l


Butanodiol
g/l
10 20 30 40 50 60 70 80

0- 0,2 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035


0,3 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03
0,4 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03

0,5 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02

0,6 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02


0,7 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 -0,01
0,8 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 0,00
0,9 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,01

1,0 -0,02 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,01 +0,01 +0,02

1,1 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,02 +0,02 +0,03


1,2 -0,01 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,03 +0,04
1,3 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,05
1,4 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07

1,5 0,00 +0,01 +0,02 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07 +0,08

1,6 +0,01 +0,02 +0,03 +0,05 +0,06 +0,07 +0,09 +0,10


1,7 +0,01 +0,03 +0,04 +0,06 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12
1,8 +0,02 +0,03 +0,05 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12 +0,13
1,9 +0,02 +0,04 +0,06 +0,08 +0,10 +0,12 +0,14 +0,15

2,0 +0,02 +0,05 +0,07 +0,10 +0,12 +0,14 +0,15 +0,17

41
TABLA 9.I

Correcciones a realizar para expresar el contenido en


2,3-butanodiol de vinos con azúcares

Contenido en azúcar, g/l

Butanodiol
g/l 90 100 110 120 130 140 150

0 - 0,2 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035


0,3 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03
0,4 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02

0,5 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,02 -0,01

0,6 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 0,00 0,00 0,00


0,7 -0,01 -0,01 0,00 0,00 0,00 0,00 +0,01
0,8 0,00 0,00 0,00 +0,01 +0,01 +0,01 +0,02
0,9 +0,01 +0,01 +0,01 +0,02 +0,02 +0,03 +0,03

1,0 +0,02 +0,03 +0,03 +0,03 +0,03 +0,04 +0,05

1,1 +0,04 +0,04 +0,04 +0,05 +0,05 +0,06 +0,07


1,2 +0,05 +0,05 +0,05 +0,06 +0,07 +0,07 +0,08
1,3 +0,06 +0,07 +0,07 +0,08 +0,09 +0,09 +0,10
1,4 +0,08 +0,09 +0,09 +0,10 +0,11 +0,11 +0,12

1,5 +0,09 +0,10 +0,11 +0,12 +0,13 +0,13 +0,14

1,6 +0,11 +0,12 +0,13 +0,14 +0,15 +0,16 +0 17


1,7 +0,13 +0,14 +0,15 +0,16 +0,17 +0,18 +0 19
1,8 +0,15 +0,16 +0,18 +0,19 +0,20 +0,21 +0,22
1,9 +0,17 +0,18 +0,20 +0,21 +0,23 +0,24 +0,25

2,0 +0,19 +0,20 +0,22 +0,24 +0,26 +0,27 +0,28

10(a). SACAROSA 121086 Etanol absoluto PA


(Método cualitativo colorimétrico) 211276 Magnesio Oxido QP
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
10(a).1. Principio. 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
El vino se defeca por plomo acetato, magnesio y 131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
potasio permanganato a pH = 8-9. Se trata el defe- 131252 Triclorometano estabilizado con etanol
cado a 100°C con difenilamina en medio clorhídrico PA-ACS-ISO
y acético. El producto de condensación obtenido en
presencia de sacarosa se extrae por cloroformo que 10(a).3.1. Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-
se colorea de azul. ISO.
10(a).2. Material y aparatos. 10(a).3.2. Magnesio Oxido QP.
42 10(a).2.1. Baño de agua con temperatura con-
trolada.
10(a).3.3. Potasio Permanganato al 2%.
10(a).3.4. Triclorometano estabilizado con etanol
10(a).3. Reactivos. PA-ACS-ISO.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO 10(a).3.5. Reactivo de Difenilamina. A 10 ml de
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO solución de Difenilamina PA al 10% en Etanol absolu-
131074 Agua PA-ACS to PA, añadir 20 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-
121828 Difenilamina PA ISO y 70 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
M
Para comprobar la pureza de este reactivo aña- 10(b). SACAROSA
dir 2 ml de reactivo de Difenilamina y 2 ml de Agua (Método cuantitativo)
PA-ACS, calentar en baño de agua hirviendo duran-
te 5 minutos. Enfriar la solución bruscamente por in- 10(b).l. Principio.
mersión en agua fría y extraer con 1 ml de Tricloro- La sacarosa se determina por la diferencia de los
metano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO, no poderes reductores antes y después de la hidrólisis
debiendo presentar el líquido extraído coloración clorhídrica del líquido procedente de la defecación
azul. del vino.

10(a).4. Procedimiento. 10(b).2. Reactivos.


Disolver en 10 ml de Agua PA-ACS 100 a 200 mg 131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
de Magnesio Oxido QP y unos 200 mg de Plomo II 131074 Agua PA-ACS
Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO. 131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
Llevar al baño de agua que se mantiene a 90-95°C PA-ACS-ISO
durante 3 a 5 minutos. Añadir 2 ml del vino que
debe estar limpio y con una riqueza en azúcar infe- 10(b).2.1. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO.
rior al 1%. 10(b).3. Procedimiento.
Diluir la muestra si la riqueza en azúcar es supe- Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 ml
rior a la indicada como límite. cada uno el mismo volumen del líquido de defeca-
Comprobar si la dosis de Plomo II Acetato ción, según las normas indicadas para el análisis de
3-hidrato PA-ACS-ISO es suficiente y no excesiva, azúcares. La defecación se realiza como en 7(b) con
lo que disminuiría la sensibilidad de la reacción. Para eliminación previa del alcohol.
ello añadir gota a gota, al líquido que sobrenada, Añadir a cada matraz un volumen de Acido Clor-
una solución concentrada de Plomo II Acetato, hídrico 35% PA-ISO a razón de 0,3 ml por 10 ml de
hasta que no se acuse enturbiamiento al caer la líquido azucarado.
gota sobre el líquido. Añadir entonces solución En uno de los matraces añadir inmediatamente
saturada de Sodio Sulfato para eliminar el exceso 0,3 ml de Sodio Hidróxido 12N (disolver Sodio Hidró-
de Plomo. xido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS y
Añadir 0,5 ml de la solución de Potasio Perman- ajustar a la concentración indicada), por cada
ganato y mantener la mezcla en el baño de agua a 10 ml de líquido azucarado procediendo a la valora-
90-95° durante 10 minutos. ción de los azúcares reductores.
Enfriar bruscamente por inmersión en agua fría, Llevar el otro matraz con el contenido sin neutra-
y filtrar. lizar a baño de agua hirviendo durante 2 minutos.
Puede aparecer una débil coloración amarilla, Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxi-
pero no influye en la reacción. do 12N que al otro matraz y valorar.
Poner en un tubo de ensayo 2 ml del líquido fil-
trado, añadir 2 ml del reactivo de Difenilamina; man- 10(b).4. Cálculo.
tener en baño de agua hirviendo, durante 5 minutos La diferencia entre las cantidades de azúcares
exactamente. Enfriar por inmersión en agua fría, reductores encontrada en los resultados de estas
añadir 1 ml de Triclorometano estabilizado con eta- dos valoraciones, multiplicada por 0,95 da la riqueza
nol PA-ACS-ISO y observar la coloración que se en sacarosa de la muestra en estudio.
forma. Este resultado se expresa en g por l de vino,
teniendo presentes las diluciones efectuadas even-
10(a).5. Expresión de los resultados. tualmente en el curso de la defecación y del volumen
Los vinos secos no adicionados con sacarosa de la muestra de vino que se sometió a la defecación.
pueden dar una coloración gris-azulada muy ligera,
pero, en presencia de sacarosa, aparece una franca 10(b).5. Referencia.
coloración azul. 10(b).5.l. Recueil des Méthodes Internationales
Los vinos ricos en azúcar dan una coloración d’Analyse des Vins. 0. I. V. A5, 4, 1969.-80
amarillo oro en ausencia de sacarosa, pero en pre-
sencia de ésta, la coloración es verde franco. 11. CENIZAS
Los resultados son sensibles para riquezas de
sacarosa desde 0,2 mg. 11.1. Principio. 43
Se denominan cenizas de un vino, al conjunto de
10(a).6. Referencia. los productos de incineración del residuo de evapo-
10(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales ración de un volumen conocido del vino, realizada
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A-S, 1-2. 1969. de manera que se puedan obtener todos los catio-
nes (excepto amonio) en forma de carbonatos y
otras sales minerales anhidras.
11.2. Materiales y aparatos. disolver en el mismo y en caliente, las cenizas, y
11.2.1. Horno eléctrico regulable. empleando el anaranjado de metilo como indicador.
11.2.2. Baño de agua y baño de arena.
11.2.3. Lámpara de infrarrojo. 12.2. Material y aparatos.
11.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de 12.2.1. Baño de agua.
70 mm de diámetro y 25 mm de altura, fondo plano. 12.2.2. Pipeta de 10 ml.
12.2.3. Varilla de vidrio.
11.3. Procedimiento. 12.2.4. Bureta de valoraciones.
Colocar 20 ml de vino en una cápsula tarada en
balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con pre- 12.3. Reactivos.
caución en baño de agua, después de evaporar 181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV
hasta consistencia siruposa, continuar el calenta- 171432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE
miento sobre baño de arena con moderación y 181693 Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV
durante una media hora. Es conveniente ayudar a la
evaporación con la aplicación de rayos infrarrojos 12.3.1. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.
hasta carbonización. Cuando ya no se desprendan 12.3.2. Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE.
vapores, llevar la cápsula al horno eléctrico a 525°C 12.3.3. Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV.
± 25° y con aireación continua.
12.4. Procedimiento.
Después de 5 minutos de carbonización com-
Añadir a las cenizas ya pesadas, 10 ml de Acido
pleta, sacar la cápsula del horno, dejar enfriar y aña-
Sulfúrico 0,05mol/l (0,1N) SV y llevar la cápsula a un
dir 5 ml de agua que se evaporan en baño de agua,
baño de agua hirviendo durante un cuarto de hora,
y llevar de nuevo al horno a 525°C.
frotando varias veces el fondo de la cápsula con una
Si la combustión de las partes carbonosas no se
varilla de vidrio para activar la disolución de las par-
consigue en 15 minutos, volver a comenzar la ope- tículas difíciles de disolver. Añadir en seguida dos
ración de adición de agua, evaporación y recalcina- gotas de Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE y
ción. valorar el exceso de Acido Sulfúrico con Sodio
Cuando se trate de un vino rico en azúcares, se Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV, hasta que el indicador
recomienda adicionar unas gotas de aceite puro vire a amarillo.
vegetal al extracto, antes de comenzar la calcina-
ción para impedir el desbordamiento de la masa del 12.5. Cálculo.
contenido. La duración de la primera carbonización Calcular la alcalinidad de las cenizas expresadas
deberá ser en este caso 15 minutos. en meq/l o en g/l de potasio carbonato.
Después de enfriar en el desecador cápsula y Alcalinidad de las cenizas = 5 (10 - V) meq/l
cenizas, se pesan. Alcalinidad de las cenizas = 0,345 (10 - V) g/l de
potasio carbonato.
11.4. Cálculo. V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N utili-
Calcular el contenido en cenizas expresado en g/l. zados.
Cenizas = 50 P g/l Dar los resultados con una aproximación de
P = peso en g de las cenizas contenidas en 20 ml 0,5 g por l en potasio carbonato.
de vino.
Dar los resultados con una aproximación de 12.6. Referencia.
0,03 g/l. 12.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A7, 1-2, 1969.
11.5. Referencias.
11.5.1. Recueil des Méthodes Internationales 13. FOSFATOS
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A6, 1. 1969.
11.5.2. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”, 13.1. Principio.
pág. 106. Ministerio de Agricultura, 1956. Oxidación del vino, evaporación e incineración.
Pre-cipitación del ácido fosfórico en ácido nítrico al
estado de amonio fosfomolibdato. Esta sal se
12. ALCALINIDAD DE CENIZAS disuelve por acción de un exceso de sodio hidróxi-
44 12.1. Principio.
do 0,5N en presencia de formaldehído. Valoración
del exceso de sodio hidróxido por ácido clorhídrico
Se denomina alcalinidad total de cenizas la suma 0,5N en presencia de fenolftaleína.
de los cationes, diferentes del amonio, combinados
con los ácidos orgánicos del vino.
La valoración se funda en la volumetría con
ácido sulfúrico, valorando en retorno después de
M
13.2. Material y aparatos. cia de Fenolftaleína solución 1% RE, para disolver el
13.2.1. Cápsula de sílice de 70 mm de diámetro. precipitado de Fosfomolibdato. Escurrir el filtro y
13.2.2. Baño de arena. extender sobre la pared del vaso, por encima del
13.2.3. Horno de mufla. líquido de la solución. Valorar el exceso de sodio
13.2.4. Erlenmeyer de 500 ml. hidróxido con Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV,
13.2.5. Vasos de precipitados y elementos para hasta decoloración de la Fenolftaleína, habiendo
volumetría. sumergido al final nuevamente el filtro.
13.2.6. Agitador mecánico.
13.5. Cálculo.
13.3. Reactivos. Calcular el contenido en fosfatos expresado en
181022 Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV meq de ácido fosfórico (considerado como triácido),
121737 Acido Nítrico 53% PA o en g de P 0 por l de vino.
2 5

131074 Agua PA-ACS Fosfatos = 0,577 (50 - V) meq de ácido fosfórico.


131134 Amonio Molibdato 4-hidrato Fosfatos = 0,01365 (50 - V) g de P205 por l de
PA-ACS-ISO vino.
131135 Amonio Nitrato PA-ACS-ISO V = volumen en ml de solución de ácido clorhí-
171327 Fenolftaleína solución 1% RE drico 0,5N.
131328 Formaldehído 36,5-38% p/v estabili- Dar los resultados con una aproximación de
zado con metanol PA-ACS 0,01 g/l.
181692 Sodio Hidróxido 0,5mol/l (0,5N) SV
13.6. Referencia.
13.3.1. Solución de Acido Nítrico al 25% (d 13.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
1,153). Añadir a 440 ml de Acido Nítrico 53% PA d’Analyse des Vins. 0. I. V. A16, 1-2 1969.
Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
13.3.2. Solución de Amonio Nitrato. Añadir, a
340 g de Amonio Nitrato PA-ACS-ISO, Agua PA- 14. CALCIO
ACS hasta 1.000 ml. (Método complexométrico)
13.3.3. Solución de Amonio Molibdato. Añadir, a
30 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO, 14.1. Principio.
Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. Valoración del calcio por complexometría sobre la
13.3.4. Solución de lavado. 50 g de Amonio solución nítrica o clorhídrica de las cenizas del vino.
Nitrato PA-ACS-ISO, 40 ml de Acido Nítrico al 25%
y Agua PA-ACS hasta 1 l. 14.2. Material y aparatos.
13.4. Procedimiento. 14.2. (1, 2, 3 y 4) como 11.2. (1, 2, 3 y 4).
Evaporar a sequedad 100 ml de vino en cápsu- 14.2.5. Matraces Erlenmeyer de 1.000 ml.
la de cuarzo en sucesivas adiciones. Añadir des- 14.2.6. Matraces Erlenmeyer de 100 ml.
pués 4 ml de Acido Nítrico 53% PA y calentar pro-
gresivamente en el baño de arena y después en el 14.3. Reactivos.
horno de mufla. 182318 Acido Clorhídrico 0,25 mol/l (0,25N) SV
Añadir a las cenizas 2 ml de Acido Nítrico 53% 182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
PA y evaporar a sequedad en el baño de agua para Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV (Acido
insolubilizar la sílice. Añadir 10 ml de Acido Nítrico al EDTA Na 2) (o preparar con 131669
25%; remover y arrastrar las cenizas a un filtro; lavar Acido Etilendiaminotetraacético Sal
la cápsula y filtro con 5 ml del mismo ácido y des- Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO)
pués con 20-30 ml de Agua PA-ACS. Recoger el fil- Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftila-
trado en un Erlenmeyer de unos 500 ml, adicionar zo)-4-Naftalensulfónico, Sal Sódica
25 ml de solución de Amonio Nitrato de 340 g por l (CALCON)
y agitar. 131074 Agua PA-ACS
Después añadir de una vez 80 ml de solución de 182241 Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV
Amonio Molibdato 3% y agitar mecánicamente (o preparar con 121212 Calcio Carbo-
durante 12 minutos a razón de 200 sacudidas por nato precipitado PA)
minuto. Decantar y filtrar por papel. Lavar luego el 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
precipitado con 75 ml de líquido de lavado dos 131687 Sodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO
14.3.1. Acido Clorhídrico 0,25 mol/l (0,25N) SV.
45
veces. Cada lavado no debe durar más de 10 minu-
tos. Lavar 8 veces más con Agua PA-ACS. 14.3.2. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Di-
Colocar el filtro y el precipitado en un vaso con sódica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto añadir
50 ml de Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV. Aña- a 18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal
dir 12,5 ml de Formaldehído 36,5-38% p/v, estabili- Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-ACS
zado con metanol PA-ACS neutralizado en presen- hasta 1.000 ml y disolver.
14.3.3. Lejía de Sodio Hidróxido al 40%. Añadir 14.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
a 40 g de Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO d’Analyse des Vins. 0. I. V. A26, 2-3, 1969.
Agua PA-ACS hasta 100 ml.
14.3.4. Indicador de Calcon. Mezclar 1 g de
Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftilazo)-4-Nafta- 15. MAGNESIO
lensulfónico, Sal Sódica con 100 g de Sodio Cloru-
ro PA. 15.1. Principio.
14.3.5. Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. En Valoración del magnesio por complexometría
su defecto disolver 5,05 g de Calcio Carbonato pre- sobre la solución nítrica o clorhídrica de las cenizas
cipitado PA en la cantidad necesaria de Acido Clor- del vino.
hídrico diluido y completar a 1 litro. Valorar esta
solución por medio de Acido Etilendiaminotetra- 15.2. Material y aparatos.
acético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en pre- 15.2. (1, 2, 3 y 4), como 11.2. (1, 2, 3 y 4).
sencia de Calcon en la forma que luego se des- 15.2. (5 y 6), como en 14.2. (5 y 6).
cribe.
15.3. Reactivos.
14.4. Procedimiento. 131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
Evaporar a sequedad en baño de agua hirviendo 182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
50 ml de vino colocados en cápsulas preferente- Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
mente de platino. Incinerar el residuo como en 11. 181397 Magnesio Cloruro 0,l mol/l (0,1M) SV
Disolver las cenizas en 8 ml de Acido Clorhídrico (diluir o preparar como se indica en 15.3.4)
0,25 mol/l (0,25N) SV, llevar a un matraz aforado de 211276 Magnesio Oxido QP (*)
50 ml; lavar varias veces la cápsula con Agua 171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
PA-ACS vertiéndola en el matraz. Enrasar y agitar.
171730 Solución Tampón pH 10 RE
Tomar 20 ml de la solución de cenizas y calentar
(o preparar con 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO,
hasta ebullición, en un Erlenmeyer de unos 100 ml.
121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA y 131074 Agua
Dejar enfriar y después añadir 0,5 ml de solución de
PA-ACS)
Sodio Hidróxido al 40%, 10 ml de Acido Etilendia-
minotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
15.3.1 Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disó-
y 100 mg aproximadamente de indicador Calcon.
dica 0,05 mol/l (0,05M) SV. Como en 14.3.2.
Si el color de la mezcla es rojo-vinoso, añadir
15.3.2. Solución Tampón pH 10 RE. En su
Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05
defecto preparar disolviendo 50 g de Amonio Clo-
mol/l (0,05M) SV en exceso hasta aparición de color
ruro PA-ACS-ISO en 350 g de Amoníaco 25% (en
azul-violeta. NH3) PA y añadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
Evitar una cantidad de Acido Etilendiaminotetra- 15.3.3. Indicador Negro de Eriocromo T. Mezclar
acético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en exce- 1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS,
so relativamente grande, que enmascara el punto con 100 g de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.
de viraje. 15.3.4. Solución de Magnesio Cloruro 0,05M. En
Valorar el exceso de Acido Etilendiaminotetra- un matraz aforado de 1 l introducir 500 ml de Mag-
acético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV añadien- nesio Cloruro 0,1mol/l (0,1M) SV, diluir y enrasar con
do Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. El indica- Agua PA-ACS o preparar disolviendo 2,25 g de
dor Calcon virará de azul violeta a rojo-vinoso al final Magnesio Oxido QP en la cantidad necesaria de
de la reacción. Acido Clorhídrico diluido y llevar después el volumen
a 1 litro. Valorar esta solución con Acido Etilendia-
14.5. Cálculo. minotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
Calcular el contenido en calcio como iones Ca (15.3.1) en presencia de Negro de Eriocromo T
en meq/l, o como iones Ca expresados en g/l. (15.3.3) como se indica a continuación.

Calcio = (10 - V) 5 meq/l de ion Ca. 15.4. Procedimiento.


Tomar 20 ml de la solución de cenizas antes pre-
Calcio = (10 - V) 0,1 g/l de ion Ca. parada, llevar a ebullición en un Erlenmeyer de unos
46 V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M.
100 ml, dejar enfriar y añadir 10 ml de Acido Etilen-
diaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M)
SV, 5 ml de Solución Tampón pH 10 RE, 50 mg
14.6. Referencias. aproximadamente de indicador Negro de Eriocro-
14.6.1. Castino, M. “Determinazione complesso- mo T.
metrica del Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivista Valorar después el exceso de Acido Etilendiami-
de Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960. notetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
M
con la solución de Magnesio Cloruro 0,05M. El indi- 121085 Etanol 96% v/v PA
cador vira del azul al rojo vinoso. 132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BTH PA-ACS-ISO
15.5. Cálculo. 141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
Calcular el contenido en magnesio expresado en PRS
meq/l o en g/l de iones Mg. 211934 Hierro metal, granulado fino QP
121534 Potasio Tiocianato PA
Magnesio = (V - V’) x 5 meq/l 141699 Sodio metal, barras PRS
(o 121237 Carbón Activo polvo PA o
Magnesio = (V - V’) x 0,06075 g/l de iones Mg. 142367 Manganeso IV Oxido 85%
precipitado PRS)
V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M utili- 131687 Sodio Hidróxido lentejas PA
zado para valorar el exceso de ácido EDTA Na2
0,05M en la determinación del calcio (14.4). 16.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
16.3.2. Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.
V’ = volumen en ml de solución de magnesio Usese Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.) PRS y
cloruro 0,05M. diluir convenientemente.
16.3.3. Eter Dietílico. Destilar el Eter Dietílico estabi-
(*) El magnesio óxido del comercio está general- lizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO antes de su
mente carbonatado, aun puro, por lo que debe cal- empleo o bien mantenerlo en presencia de Sodio metal,
cinarse. Tomar 5 g en cápsulas de platino; llevar al barras PRS o Carbón Activo polvo PA o Manganeso IV
rojo durante más de 30 minutos. Dejar enfriar y Oxido 85% precipitado PRS.
pesar los 2,25 g. 16.3.4. Solución de Potasio Tiocianato. Añadir a
200 g de Potasio Tiocianato PA Agua PA-ACS hasta
15.6. Referencias. 1litro, y disolver.
15.6.1. Castino, M. “Determinazione complesso- 16.3.5. Solución de Hierro III Cloruro de 0,1 g de
metrica del Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivista di Hierro metal, granulado fino QP por litro. Disolver 0,1 g
Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960. de Hierro metal, granulado fino QP en 10 ml de Acido
15.6.2. Recueil des Méthodes Internationales Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y 30 ml de Agua PA-ACS.
d’Analyse des Vins. 0. I. V., A26, 2-3, 1969. Añadir 1 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO y hervir. Enfriar
y añadir Agua PA-ACS hasta 1 litro.
También puede prepararse la siguiente solución de
16. HIERRO Hierro. Disolver 0,863 g de Amonio Hierro III Sulfato
(Método colorimétrico del 12-hidrato PA-ACS-ISO, 0,863 g de Amonio Cloruro PA-
sulfocianuro) ACS-ISO (*) y 10 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-
ISO en 100 ml de Agua PA-ACS y diluir hasta 1.000 ml.

16.1. Principio. (*). En el original indica “amonio”, entendemos se


El hierro oxidado por el agua oxigenada se com- trata de Amonio Cloruro.
bina con el ion sulfociánico en medio clorhídrico. El
color rojo se compara con escala patrón o se mide 16.3.6. Etanol de 20º. Usese Etanol 96% v/v PA y
por espectrofotometría. Para los vinos tintos, el hie- diluir convenientemente.
rro sulfocianuro se extrae con éter. Para valorar
solamente el hierro trivalente, se suprime la adición 16.4. Procedimiento.
del agua oxigenada. 16.4.1. Determinación del hierro total. (Férrico +
ferroso).
16.2. Material y aparatos. 16.4.1.1. Vinos blancos o poco coloreados. Colocar
16.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro para 10 ml de vino en un tubo de 200 x 20 mm, añadir 1 ml
lectura a 508 nm de longitud de onda. de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, 5 gotas de
16.2.2. Tubos de 200 x 20 mm. Hidrógeno Peróxido y 1 ml de solucion de Potasio Tio-
16.2.3. Bola de decantación de 50 ml. cianato.
A la aparición del color añadir 20 ml de Eter Dietíli-
16.3. Reactivos. co, agitar para mezclar las dos fases sin emulsionar y 47
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO dejar decantar 5 minutos. Determinar la absorbancia del
131036 Acido Nitrico 60% PA-ISO líquido decantado en espectrofotómetro colorímetro a
131074 Agua PA-ACS 508 nm. Ajustar el espectrofotómetro a cero, utilizando
131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO como prueba en blanco 10 ml de vino acidulados con
131365 Amonio Hierro lll Sulfato 12-hidrato 1 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluidos
PA-ACS-ISO con 1 ml de Agua PA-ACS. De esta forma se compen-
sa la influencia del color del vino y de la posible apari- 17.2.2. Bola de decantación de unos 100 ml.
ción de color o del reavivado del vino, ambas coloracio-
nes debidas a la acidez añadida al vino. 17.3. Reactivos.
Obtener una curva, procediendo en la forma 131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
anteriormente descrita y utilizando en vez de 10 ml Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
de vino mezclas de 5 ml de alcohol de 20° y por- (Acido EDTA Na2 2-hidrato) (o 131120
ciones de 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 ml, completadas di-Amonio Hidrógeno Citrato PA-ACS)
hasta 5 ml con Agua PA-ACS. Estas mezclas con- 131074 Agua PA-ACS
tendrán, respectivamente, 5,10, 15, 20 y 25 mg/l de 121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA
hierro. 131245 Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO
16.4.1.2. Vinos tintos.- Como en 16.4.1.1, pero 131091 Metanol PA-ACS-ISO
utilizando sólo 0,2 ml de Acido Clorhídrico 37% PA- 131668 Sodio Dietilditiocarbamato 3-hidrato
ACS-ISO. El exceso de acidez dificulta la extracción PA-ACS
del hierro sulfocianuro por el éter.
16.4.2. Determinación del hierro trivalente. 17.3.1. Solución acuosa al 0,1% de Sodio Dietil-
Como en 16.4.1, pero sin adicionar Hidrógeno ditiocarbamato.
Peróxido. 17.3.2. Suspensión de Acido Etilendiaminotetra-
acético Sal Disódica al 20%, o bien solución acuo-
16.5. Cálculo. sa de Amonio Citrato al 20%.
Calcular el contenido en hierro expresado en 17.3.3. Solución amoniacal al 15%. Diluir conve-
mg/l por comparación de la absorbancia con la nietemente el Amoníaco 25% (en NH3) PA con Agua
curva patrón. PA-ACS.
17.3.4. Metanol PA-ACS-ISO.
16.6. Observaciones. 17.3.5. Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO.
En lugar del éter algunos autores (16.7.2) reco- 17.3.6. Agua bidestilada en vidrio. Utilizarla tam-
miendan el empleo del etilo acetato, que no tiene el bién para la preparación de reactivos.
inconveniente de la posible presencia de peróxidos;
sin embargo, en algunos vinos de intenso color de 17.4. Procedimiento.
nuestro país se ha observado extracción de parte Poner en una bola de decantación 10 ml del
de la materia colorante con el etilo acetato, lo que vino, añadir 5 ml de una suspensión del Acido EDTA
no sucede con el éter. Na2 2-hidrato (o 5 ml de soluciónde Amonio Citrato)
y llevar a pH 8 con la solución amoniacal. Añadir
16.7. Referencias. 1 ml de reactivo de Sodio Dietilditiocarbamato y
16.7.1. Ribereau-Gayon, J., y Peynaud, E. 5 ml de Metanol PA-ACS-ISO (para evitar emulsión),
“Analyse et Controle des Vins”, pág. 194, 1958. y agitar durante 1 minuto.
16.7.2. Jaulmes, P.; Brun, S.; Tour, C.; Cabanis, Extraer varias veces con Carbono Tetracloruro
J.C. “Dosage direct du fer dans les vins”. Société PA-ACS-ISO (agitando cada vez durante 1 minuto)
Pharmacie Montpellier, 24:2, 1964. hasta recoger 20 ml, cuidando que no pasen restos
de agua, pues éstos dan enturbiamiento con el Car-
bono Tetracloruro PA-ACS-ISO. Si pasa alguna
17. COBRE gota, filtrar por papel de filtro puro, quedando las
trazas de agua en el papel.
17.1. Principio. Determinar la absorbancia en el espectrofotóme-
tro a 420 nm de longitud de onda.
El sodio dietilditiocarbamato reacciona con el Para la prueba en blanco utilizar los mismos
cobre (reacción de Delepine), dando la sal corres- reactivos en las mismas proporciones, sustituyendo
pondiente a este metal y coloración amarilla oro, el volumen de vino por otro igual de Agua bidestila-
cuya intensidad se mide por colorimetría o espec- da en aparato de vidrio.
trofotometría. La curva que previamente será construida a
Para evitar interferencias debidas a la presencia partir de lecturas correspondientes a escala de
de hierro y otros cationes polivalentes presentes en diferentes riquezas de cobre es una línea recta,
el vino se emplea la sal disódica del ácido etilendia- por obedecer a la ley de Lamber-Beer. En el inter-
48 minotetraacético, que forma complejos solubles y valo en que se opera con 1 ml de reactivo pueden
muy estables a pH = 8. También puede utilizarse el valorarse 10 ppm de cobre; para valores superio-
amonio citrato para evitar la interferencia del hierro. res, se añadirán 2 ml o se toma menor volumen
de muestra.
17.2. Material y aparatos.
17.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro con fil- 17.5. Cálculo.
tro para longitud de onda de 420 nm. El valor obtenido para la absorbancia a 420 nm
M
se lleva a la curva patrón y se expresa el correspon- ponentes, previamente disueltos en 400 ml de Agua
diente contenido en cobre en ppm. PA-ACS; enrasar después a 1 litro exactamente.
Para la conservación más segura de esta solu-
17.6. Referencia. ción se añaden 2 gotas de Alilo isotiocianato.
17.6.1. Garoglio, P. G., y Stella, C. “Methodi uffi- Con vinos dulces, añadir una cantidad de Saca-
ciali di analisi per i mosti, i vini e gli aceti”, pág. 75, rosa PA-ACS igual a la décima parte de la que con-
1958. tenga el vino.
Añadir a la solución de referencia una cantidad
de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS
18. POTASIO
equivalente al contenido en sodio del vino cuando
(Fotometría de llama)
este contenido sea superior al equivalente a 20 mg
18.1. Principio. de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS.
Se utiliza una solución de referencia con 100 mg En el caso del fraude por adición de 1 g/l de
de potasio por litro y con diversos aniones, cationes Sodio Salicilato, añadir 100 mg de Sodio Salicilato
y materia orgánica en proporciones tales que den (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX por litro de la solu-
un compuesto similar a un vino diluido a 1/10 con ción de referencia y de dilución. El Sodio Salicilato
agua. tiene una influencia muy marcada en el resultado del
análisis.
18.2. Material y aparatos.
18.2.1. Fotómetro de llama y accesorios. 18.4. Procedimiento.
18.2.2. Pipetas de 10 ml. Regular el aparato y establecer una curva de
18.2.3. Matraces aforados de 1.000 ml. calibración con la solución de referencia pura y con
diversas diluciones de la solución de referencia dilui-
18.3. Reactivos. da a 1/20, 1/10, 1/5, 1/2, con la solución de dilu-
131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS ción.
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO Diluir el vino a 1/10 con agua y hacer la determi-
131074 Agua PA-ACS nación en el fotómetro.
Alilo Isotiocianato Si la lectura no queda comprendida entre los
121221 Calcio Cloruro anhidro 95% polvo PA valores 40 y 100 de la escala del galvanómetro,
121085 Etanol 96% v/v PA diluir convenientemente el vino con solución de dilu-
141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX ción.
211794 Magnesio Cloruro p50% MgCl2 QP
121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA 18.5. Cálculo.
131621 Sacarosa PA-ACS Calcular el contenido en potasio expresado en
131965 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato g/l con una aproximación de ±0,02 g/l.
PA-ACS
141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.) Potasio = 10 L g/l
PRS-CODEX
L = valor correspondiente a la lectura de la esca-
18.3.1. Solución de referencia. Disolver 481,3 mg la del galvanómetro en la curva de calibración.
de Potasio Hidrógeno Tartrato PA en 500 ml de
Agua PA-ACS muy caliente y mezclar con una solu- 18.6. Referencia.
ción de 10 ml de Etanol 96% v/v PA, 700 mg de 18.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
Aido Cítrico anhidro PA-ACS, 300 mg de Sacarosa d’Analyse des Vins. 0. I. V. A8, 1-6, 1969.
PA-ACS, 1.000 mg de Glicerina (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX, 20 mg de Sodio di-Hidrógeno Fosfa- 19. SODIO
to 1-hidrato PA-ACS, 10 mg de Calcio Cloruro anhi- (Fotometría de llama)
dro 95% polvo PA y 10 mg de Magnesio Cloruro
p50% MgCl2 polvo QP en 400 ml de Agua PA-ACS. 19.1. Principio.
Completar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. Como en 18.1, referido a sodio.
Añadir dos gotas de Alilo Isotiocianato para con-
servación más segura de la solución. 19.2. Material y aparatos.
18.3.2. Solución de dilución. Igual que la ante- Como en 18.2. 49
rior, cambiando el Potasio Hidrógeno Tartrato PA
por 383 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO. 19.3. Reactivos.
Para preparar la solución de referencia, comen- 131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS
zar por disolver 481,3 mg de Potasio Hidrógeno 131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
Tartrato PA en medio litro de Agua PA-ACS muy 131074 Agua PA-ACS
caliente y mezclar esta solución con los otros com- Alilo Isotiocianato
121221 Calcio Cloruro anhidro 95%, polvo PA 20.4. Procedimiento.
121085 Etanol 96% v/v PA Poner 50 ml de vino en un Kitasato de 1l de
141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX capacidad, conectar al vacío agitando al mismo
211794 Magnesio Cloruro p50% MgCl2 QP tiempo el matraz. El desprendimiento de CO2 se
131621 Sacarosa PA-ACS aprecia a los pocos momentos. Observar atenta-
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO mente el momento en que dejan de desprenderse
141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.) las burbujas, desconectar del vacío.
PRS-CODEX Tomar 20 ml del vino sin CO2 y llevar a un vaso
de unos 100 ml de capacidad, introducir el electro-
19.3.1. Solución de referencia.- Como en do de vidrio en el vino y el de calomelanos en vaso
18.3.1, sustituyendo los 20 mg de Sodio di-Hidró- lateral con Potasio Cloruro solución saturada RE.
geno Fosfato 1-hidrato PA-ACS por 50,84 mg de Disponer un puente de la misma solución en tubo
Sodio Cloruro PA-ACS-ISO. de vidrio con los extremos uno en cada vaso esta-
19.3.2. Solución de dilución.- Como en 18.3.2, bleciendo contacto.
suprimiendo los 50,84 mg de Sodio Cloruro PA- Poner en marcha el agitador y añadir desde
ACS-ISO. bureta Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE al vino
hasta que la aguja del potenciómetro marque pH =
19.4. Procedimiento. 7, manteniendo el agitador en marcha durante la
Como en 18.4. Para la curva de calibración, uti- operación, que no debe durar más de cinco minu-
lizar la solución de referencia diluida a 1/20, 1/10, tos.
1/2, 3/4.
20.5. Cálculo.
19.5. Cálculo. Calcular la acidez total expresada en meq/l con
Calcular el contenido en sodio expresado en g/l una aproximación de 0,1 meq/l o en g de ácido tar-
con una aproximación de ± 0,05 g/l. tárico.

19.6. Referencia. V
19.6.1. Recueil des Méthodes Internationales Acidez total = 10 —— - 0,35 V - 0,25 V” meq/l
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A25, 1-2, 1969. 2

V
20. ACIDEZ TOTAL Acidez total = 0,75 ( —— - 0,035 V’ - 0,025 V”) g/l
2
20.1. Principio. de ácido tartárico.
La acidez total de un vino se considera como la
suma de los ácidos titulables cuando se lleva el vino V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N.
a pH = 7 por adición de un licor alcalino valorado. El
ácido carbónico y el anhídrido sulfuroso libre y com- V’ = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado para
binado no se consideran comprendidos en la acidez la oxidación de anhídrido sulfuroso libre (21.-).
total.
El gas carbónico se elimina previamente del vino V” = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado para
por agitación en frío y con vacío parcial. la oxidación del anhídrido sulfuroso combinado (21.-).

20.2. Material y aparatos. 20.6. Referencias.


20.2.1. Potenciómetro con electrodo de vidrio.
20.2.2. Agitador magnético. 20.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
20.2.3. Puente con solución saturada de ClK d’Analyse des Vins. 0. I. V. A10, 1-3, 1969.
para evitar la introducción del electrodo de calome- 20.6.2. Jaulmes, P. ”La mesure de l’acidité total
lanos en el vino. des vins”. Annal des Falsifications et des Fraudes,
20.2.4. Kitasato de un litro. 556, 1955.
20.2.5. Pipeta de 20 ml.
20.2.6. Vaso de 100 ml de capacidad. NOTA: Organismos como la American Society of
50 20.2.7. Bureta de 50 ml. Enologist y la Association of Official Analytical Che-
mist, aconsejan que el punto de viraje sea a pH 8,2
20.3. Reactivos. en lugar de 7,0 por tratarse de una valoración de
171495 Potasio Cloruro solución saturada RE ácidos débiles con una base fuerte.
171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE

20.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE.


M
21. ACIDEZ VOLATIL 96% v/v PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluir
convenientemente.
21.1. Principio. 21.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo
La acidez volátil está constituida por la parte de 0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 y
ácidos grasos pertenecientes a la serie acética que determinar el factor.
se encuentra en los vinos, ya sea en estado libre o 21.3.4. Almidón soluble RE.
de sal. Se determina mediante la separación de los
ácidos volátiles por arrastre con vapor de agua y 21.4. Procedimiento.
rectificación de los vapores. Se debe evitar con pre- Alimentar el generador de vapor con Agua de
caución la presencia de gas carbónico en el destila- Cal solución saturada RE o Agua de Barita solución
do. La acidez del anhídrido sulfuroso libre y combi- saturada RE limpia, manteniéndolo lleno hasta unos
nado arrastrados con el destilado no deben com- 2/3 de su volumen. Poner en el barbotador 20 ml
prenderse en la acidez volátil, por lo que hay que del vino exento de gas carbónico como en 20.4.
restar la equivalencia de su acidez de la del destila- Añadir al vino unos 0,5 g de Acido L(+)-Tartárico PA-
do, así como la del ácido sórbico eventualmente ACS-ISO, poner en marcha el generador de vapor,
presente. Para estas correcciones se sigue la norma manteniendo abierta la salida del tubo purgador del
Jaulmes (21.7.2), en la que se considera como vapor; después de cerrar ésta, calentar el barbota-
completa la influencia de SO2 libre y sólo la mitad de dor. Durante la operación se regula el calentamien-
la del combinado. to de forma que el volumen de líquido en el barbo-
tador no pase sensiblemente de los 20 ml iniciales.
21.2. Material y aparatos. Destilar en unos 12-15 minutos 250 ml.
21.2.1. Aparato para destilación aislada (fig.21.I). Valorar con Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
21.2.1.1. Matraz de generador de vapor de en presencia de dos gotas de Fenolftaleína como
3.500 ml. indicador.
El agua condensada en el tubo de unión del Valorar el sulfuroso libre en este destilado, aña-
matraz con el barbotador se purga por el purgador diendo al terminar la anterior valoración una gota de
(c). Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, para acidular
21.2.1.2. Barbotador (b).- Tubo cilíndrico de nuevamente y valorar el SO2 libre con solución de
Yodo 0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidón
3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tubo repo-
soluble RE como indicador y un cristal de Potasio
sa sobre un disco de amianto de 15 cm de diáme-
Yoduro PA-ISO.
tro, con un orificio central de 29 mm. El tubo (d) por
Para determinar el Acido Sulfuroso combinado
el que entra el vapor en el barbotador debe llegar a
con el Acetaldehído, añadir 20 ml de solución satu-
1 cm del fondo.
rada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACS-
21.2.1.3. Columna rectificadora (e) .- Constituida
ISO (el líquido toma un color rosa pálido) y valorar
por un tubo cilíndrico de 20 mm de diámetro y
nuevamente con solución de Yodo 0,01N.
50 cm de altura, conteniendo una hélice de tela de
acero inoxidable número 100 plegada, con 15 mm 21.5. Cálculo.
de paso. Calcular la acidez volátil expresada en meq/l,
21.2.1.4. Refrigerante de West (f).- De 40 cm de con una aproximación de 0,2 ml, o en g/l de ácido
longitud activa, colocado verticalmente. sulfúrico o de ácido acético, con una aproximación
de 0,1 g/l.
21.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO Acidez volátil = 5 (V - V’/10 - V”/20) meq/l
131066 Acido L (+)-Tartárico PA-ACS-ISO
171073 Agua de Cal solución saturada RE 0,49
(o 171071 Agua de Barita solución saturada RE) Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de
131074 Agua PA-ACS 2
171096 Almidón soluble RE ácido sulfúrico.
121085 Etanol 96% v/v PA
131325 Fenolftaleína PA-ACS 0,6
131542 Potasio Yoduro PA-ISO Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de
131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato
PA-ACS-ISO
2 51
ácido acético.
181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N.
V’= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la
21.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV. oxidación del anhídrido sulfuroso libre.
21.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Etanol V”= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la
oxidación del anhídrido sulfuroso combinado con el 22. ACIDO SORBICO EN EL DESTILADO
acetaldehído. PARA ACIDEZ VOLATIL

21.6. Observaciones. 22.1. Principio.


En la destilación del vino para la determinación En la destilación del vino para la determinación
de la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en su de la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en su
totalidad al destilado, junto con el ácido acético, fal- totalidad al destilado junto con el ácido acético, fal-
seando el resultado del análisis. Para corregir el seando el resultado del analísis. Para valorar este
resultado, determinar el ácido sórbico en el destila- ácido sórbico se parte de una muestra de 0,5 ml de
do como en 29, procediendo en la siguiente forma destilado (lo que no supone un error sensible) y se
simplificada: tomar 0,5 ml del destilado de la acidez valora por espectrofotometría en el ultravioleta.
volátil, llevar a la cubeta de 1 cm de espesor inter-
no, añadir 1,5 ml de la solución (a), dejar la cubeta 22.2. Material y aparatos.
al aire durante unos minutos y medir después la 22.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta.
absorbancia en el espectrofotómetro a 256 nm. 22.2.2. Cubetas de cuarzo de 1 cm.
Graduar el espectrofotómetro con 0,5 ml de la solu- 22.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml.
ción (b) y 1,5 ml de la solución (a).
22.3. Reactivos.
21.7. Referencias. 141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
21.7.1. Recueil des Méthodes Internationales 131074 Agua PA-ACS
d’Analyse des Vins. 0. I. V. All, 1-4, 1969. 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
21.7.2. Jaulmes, P. Analyse des Vins, 2a. ed., 121531 Potasio Sorbato PA
1951. 121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA

52

Figura 21.I.- Aparato para destilación aislada


M
22.3.1. Solución a): Mezclar 0,5 g de Sodio que precipite el calcio racemato y se solubilice el
Hidrógeno Carbonato PA con 0,001 g de Cobre II tartrato levógiro.
Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadir Agua PA- 24(a).2. Material y aparatos.
ACS hasta un litro. 24(a).2.1. Vaso cilíndrico de 600 ml.
22.3.2. Solución b): Llevar 20 mg de Acido Sór- 24(a).2.2. Filtros de porosidades números 4 y 2.
bico (USP-NF) PRS-CODEX a matraz de un litro que 24(a).2.3. Kitasato y trompa de agua para vacío.
contenga 900 ml de Agua PA-ACS caliente, agitar, 24(a).2.4. Material accesorio para una volume-
dejar enfriar y enrasar a un litro. En vez de Acido tría.
Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX puede emplearse 24(a).3. Reactivos.
26,8 g de Potasio Sorbato PA. 131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
22.4. Procedimiento. 131074 Agua PA-ACS
Tomar 0,5 ml del destilado de la acidez volátil, Amonio D(-)-Tartrato
llevar a la cubeta de 1 cm de espesor interno, aña- 121212 Calcio Carbonato precipitado PA
dir 1,5 ml de la solución a), dejar la cubeta al aire
durante unos minutos y medir después la absor- 24(a).3.1. Solución de Calcio Acetato de 10 g de
bancia en el espectrofotómetro a 256 nm. Graduar Calcio por litro. Mezclar en matraz aforado de
el espectrofotómetro con 0,5 ml de la solución b) y 1.000 ml 25 g de Calcio Carbonato precipitado PA
con 40 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y
1,5 ml de la solución a).
enrasar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
24(a).3.2. Calcio Racemato cristalizado. En un
22.5. Cálculo.
vaso, introducir 20 ml de una solución de Acido
Un gramo de ácido sórbico corresponde a
L(+)-Tartárico de 5 g por litro, 100 ml de Agua PA-
8,92 ml de solución normal y a 0,438 g de ácido sul-
ACS, 20 ml de una solución de Amonio Tartrato
fúrico. Para todo vino adicionado con 200 mg de
levógiro de 6,126 g por litro y 6 ml de la solución de
ácido sórbico por litro la corrección sustractiva que
Calcio Acetato.
corresponde hacer a la acidez volátil es de 1,7 meq Dejar precipitar durante dos horas. Recoger el
o 0,088 g del ácido sulfúrico o 0,107 g de ácido precipitado sobre un filtro de porosidad número 4,
acético por litro de vino. lavando y arrastrando cuatro veces. Secar en estu-
fa a 70° hasta peso constante. Se obtienen unos
22.6. Referencia. 340 mg de Calcio Racemato cristalizado.
22.6.1.Recueil des Méthodes Internationales Conservar en frasco tapado.
d’Analyse des Vins. O. I. V. All, 3. 24(a).3.3. Licor de precipitación. Introducir en
matraz aforado de 1.000 ml 150 g de Amonio D(-)-
23. ACIDEZ FIJA Tartrato levógiro, 8,8 ml de solución de Calcio de
10 g/l y enrasar con Agua PA-ACS.
23.1. Principio. Por ser el Calcio Racemato ligeramente soluble
Se considera convencionalmente como acidez en este licor, conviene saturarlo antes de su empleo,
fija la diferencia entre acidez total y acidez volátil, añadiendo 5 g de Calcio Racemato a un litro de este
ambas expresadas en ácido tartárico. licor. Agitar durante 12 horas y filtrar.
No es necesario hacer las correcciones por
eventual presencia de anhídrido sulfuroso combina- 24(a).4. Procedimiento.
do y libre. 24(a).4.1. Precipitación del Racemato.- En un
vaso cilíndrico de 600 ml introducir 500 ml de licor
de precipitación y 10 ml de vino. Mezclar y dejar
24(a). ACIDO TARTARICO TOTAL precipitar durante 24 horas.
(Método del calcio racemato) 24(a) 4.2. Valoración gravimétrica.- Filtrar sobre
filtro poroso número 2, tarado y puesto sobre el
24(a).1. Principio. Kitasato, recogiendo el precipitado. Lavar el vaso en
Adición al vino de ácido tartárico levógiro que en el que se ha efectuado la precipitación y arrastrar las
unión con el ácido tartárico dextrógiro del vino y en últimas partículas de precipitado con el líquido ya fil-
presencia de solución de calcio, forman en condi- trado.
ciones determinadas calcio racemato insoluble.
En el método adoptado se determinan las con-
Secar en estufa a 70° hasta peso constante. 53
diciones de precipitación del calcio racemato, fijan- 24(a).5. Cálculo.
do la solubilidad del calcio tartrato levógiro (que Calcular el ácido tartárico expresado en g/l de
también se forma) y las del calcio racemato en fun- vino o en g de potasio bitartrato.
ción del pH y de la riqueza en iones de calcio. Con
estos datos se ha fijado un pH conveniente para Acido tartárico = 28,84 x P g/l
Acido tartárico = 36,15 x P g de potasio bitar- 24(b).3.5. Acido Clorhídrico diluido a 1/5 (v/v).
trato. Diluir Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-
P = peso en g del calcio racemato, cristalizado ACS.
con cuatro moléculas de agua. 24(b).3.6. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.

24(a).6. Referencia. 24(b).4. Procedimiento.


24(a).6.1. Jaulmes, P.; Brum, S.; Cabanis, J. Disolver en 10 ml de Acido Clorhídrico diluido el
“Comunicación número 304 de Métodos de Análisis precipitado de Racemato recogido sobre el crisol fil-
de Vinos”. 0. I. V., 1969. trante. Lavar el crisol filtrante con unos 50 ml de
Agua PA-ACS. Añadir un volumen de Sodio Hidró-
xido 1 mol/l (1N) SV suficiente para neutralizar la
24(b). ACIDO TARTARICO TOTAL solución (unos 20-22 ml). Añadir después 5 ml de
(Método complexométrico) Solución Tampón pH = 9, 5 ml de sal de magnesio
0,05M y 50 mg de indicador Negro de Eriocromo T.
24(b).1. Principio. Valorar con Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Como en 24(a).1. Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV.
24(b).2. Material y aparatos. 24(b).5. Cálculo.
24(b).2. (1, 2, 3, 4) como 24 (a) .2. (1, 2, 3, 4). Acido tartárico en g/l de vino = (V - 5) 3,75.
Acido tartárico expresado en g/l de potasio bitar-
24(b).3. Reactivos. trato = (V - 5) 4,70.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO V = volumen en ml de ácido EDTA Na2 0,05M.
182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal La expresión de los resultados será en potasio
Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV bitartrato y con una aproximación de 0,5 miliequiva-
(Acido EDTA Na2 0,05M SV) (o prepa- lentes por litro, o de 0,05 g / l.
rar con 131669 Acido EDTA Na2
2-hidrato PA-ACS-ISO)
131074 Agua PA-ACS 25. ACIDO LACTICO
211276 Magnesio Oxido QP
171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS 25.1. Principio.
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO Aislamiento del ácido láctico mediante columna
181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV de resinas cambiadoras de aniones, oxidación a
272172 Tampón, Solución pH 9,00 ±0,02 (20ºC) ST acetaldehído y valoración colorimétrica por la reac-
(o preparar con 131121 Amonio Cloruro ción coloreada del acetaldehído con la piperidina.
PA-ACS-ISO, 121129 Amoníaco 25% (en NH3)
PA y Agua PA-ACS) 25.2. Material y aparatos.
25.2.1. Espectrofotómetro y accesorios.
24(b).3.1. Solución Tampón pH 9,00 ±0,02 25.2.2. Tubo de vidrio o bureta de 10-11 mm de
(20ºC) ST, o preparar mezclando 54 g de Amonio diámetro y 30 cm de longitud con llave en la parte
Cloruro PA-ACS-ISO, 350 ml de Amoníaco 25% (en inferior.
NH3) PA y completar con Agua PA-ACS hasta un 25.2.3. Lana de Vidrio, lavada QP.
litro. 25.2.4. Resina Lewatit ® MP 600 (*) (aniónica fuerte l)
24(b).3.2. Indicador de Negro de Eriocromo T.
Mezclar 1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) 25.3. Reactivos.
RE-ACS con 100 g de Sodió Cloruro PA-ACS-ISO. 131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
24(b).3.3. Solución de Magnesio 0,05M. Disolver 131034 Acido L(+)-Lactico 85% PA-ACS
2,25 g de Magnesio Oxido QP (para asegurar que 182105 Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV
no esté carbonatado se recomienda calcinar 5 g de 131074 Agua PA-ACS
Magnesio Oxido QP al rojo en horno eléctrico 121248 Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA
durante 30 minutos, enfriar y pesar 2,25 g). Hacer la 211376 Lana de Vidrio lavada QP
disolución en cantidad necesaria de Acido Clorhídri- 162377 Piperidina PS
co diluido (10%) y luego se enrasa a un litro. Resina Lewatit ® MP 600
54 Valorar esta solución con Acido Etilendiaminote- (aniónica fuerte I)
traacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en 131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS
presencia de Negro de Eriocromo T. 131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
24(b).3.4. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Di- 181691 Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV
sódica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto disolver 121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA
18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
2-hidrato PA-ACS-ISO en 1 litro de Agua PA-ACS. 141717 Sodio Sulfito anhidro PRS
M
25.3.1. Solución de Cerio IV Sulfato 0,1M en Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuan-
Acido Sulfúrico 0,7N. Disolver en frío 40,431 g de do el nivel del líquido se encuentre un poco más arri-
Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA en 350 ml de Acido ba del tapón de Lana de Vidrio lavada QP superior.
Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV exactamente valorado. No Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml.
calentar, pues se formaría un cerio IV óxido insolu- Eluir los ácidos fijados en el cambiador de aniones
ble. Llevar la solución a 1.000 ml con Agua PA-ACS. mediante adiciones de solución de Sodio Sulfito
25.3.2. Solución valorada de Sodio Hidróxido 0,5M (prepararlo disolviendo Sodio Sulfito anhidro
2,5N. Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS- PRS en Agua PA-ACS), hasta la señal trazada en el
ISO en Agua PA-ACS, ajustar a la concentración tubo.
indicada y determinar el factor. Resulta práctico, para realizar esta operación,
25.3.3. Solución de Sodio Acetato al 27%. Disol- colocar un frasco con la solución de Sodio Sulfito
ver 270 g de Sodio Acetato anhidro PA-ACS en unido por el cuello a la columna mediante un man-
Agua PA-ACS y completar 1.000 ml. guito de caucho y con unas pinzas para regular la
25.3.4. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV. caída del líquido en la bureta o tubo. Puestos así en
25.3.5. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%. comunicación los dos aparatos (frasco y bureta o
Disolver 2 g de Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA en tubo), abrir las pinzas del caucho de unión y la llave
Agua PA-ACS, después completar a 100 ml. Con- inferior, dejando caer el líquído a la bureta hasta
servar tapado en la oscuridad. La solución no debe unos 10 cm de altura, y sin que queden huecos
tener más de ocho días. vacíos. Se regula la salida del líquido a la proporción
25.3.6. Solución de Piperidina al 10%. Llevar a de 2-3 gotas por segundo, para llenar el matraz re-
un matraz de 100 ml, 10 ml de Piperidina PS y enra- ceptor hasta el enrase.
sar a 100 ml con Agua PA-ACS. 25.4.3. Valoración del Acido Láctico. Introducir
10 ml del eluido en un tubo de ensayo de paredes
(*). En el original indica “resina cambiadora de anio- que no sean gruesas y de unos 50 ml de capacidad
nes”. Consideramos apropiada la aniónica fuerte I. con tapón. Añadir 10 ml del reactivo de Cerio IV Sul-
fato. Agitar e introducir el tubo de ensayo en un ter-
25.4. Procedimiento. mostato a 65°C durante 10 minutos exactamente.
25.4.1. Preparación de la columna de resinas Inmediatamente después de la inmersión en el líqui-
aniónicas. Colocar Lana de Vidrio lavada QP en el do, destapar durante unos segundos, para dar sali-
fondo del tubo o bureta 25.2.2, formando tapón de da al aire dilatado. Cerrar rápidamente con el ta-
2-3 mm de altura proximadamente, añadir Agua PA- pón para evitar pérdidas del Acetaldehído formado.
ACS hasta una altura de unos 5 mm sobre el tapón Después de 10 minutos, retirar y enfriar el tubo con
de Lana de Vidrio, lavada QP. Añadir después la agua corriente hasta la temperatura de 20°C.
Resina Lewatit ® MP 600, que estará conservada en Añadir 5 ml de la solución de Sodio Hidróxido
Acido Acético glacial al 30%, agitar esta suspensión 2,5N, mezclar bien y filtrar.
y añadir rápidamente un volumen de unos 10 ml. Tomar 15 ml del filtrado y verterlos en probeta de
Dejar sedimentar y después depositar en la superfi- tapón esmerilado de 50 ml de capacidad, que con-
cie un tapón de Lana de Vidrio lavada QP que se tenga 5 ml de solución de Sodio Acetato al 27% y
conduce a través del líquido sin resinas con una 2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV. Añadir ade-
varilla de vidrio. más 5 ml de solución de Sodio Nitroprusiato y mez-
La Resina Lewatit ® MP 600 no sirve más que clar bien. Añadir después 5 ml de solución de Pipe-
para una sola vez. ridina, mezclar rápidamente, introducir en seguida
25.4.2. Aislamiento del Acido Láctico. Abrir la en la cubeta del espectrofotómetro de 10 mm
llave inferior de la columna y dar salida al Acido Acé- de espesor. Medir la coloración producida, que
tico diluido hasta unos 2-3 ml por encima del tapón varía, de verde a violeta, con relación al aire a la lon-
de lana superior. Añadir unos 10 ml de Acido Acéti- gitud de onda de 570 nm. Esta coloracion aumenta
co al 0,5%, vaciar hasta igual altura y repetir estos al principio, pero disminuye en seguida rápidamen-
lavados cuatro veces. te. Tomar como valor definitivo el valor máximo de la
Después del último lavado, y con llave cerrada, lectura de absorbancia.
adicionar 10 ml del vino y señalar la altura alcan- Si el eluido es muy rico en Acido Láctico y la
zada, con lápiz graso. Dejar salir goteando el vino densidad óptica es muy elevada, diluir el eluido con
a razón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml por solución de Sodio Sulfato al 7,1%.
minuto). Vaciar hasta el nivel del tapón de Lana de 25.4.4. Curva patrón. Tomar 10 ml de una solu- 55
Vidrio lavada QP superior. Llenar de nuevo la ción de Acido Láctico 1N exacta, y añadir 10 ml de
columna con Acido Acético al 0,5% hasta la señal Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y completar a un
de lápiz graso. Dejar salir a la misma velocidad litro con solución de Sodio Sulfato al 7,1%. Tomar 5,
que la vez anterior y lavar después en la misma 10, 15, 20 y 25 ml, respectivamente, e introducir
forma siete veces, cada vez con 10 ml de Agua cada alícuota en un matraz aforado de 100 ml.
PA-ACS. Enrasar con solución de Sodio Sulfato al 7,1%.
Mezclar bien, tomar 10 ml de las soluciones así 26.2. Material y aparatos.
obtenidas y determinar los valores de las absorban- 26.2.1. Columna cambiadora de aniones. En
cias respectivas. una bureta de llave de 25 ml de capacidad, colocar
Las diferentes soluciones corresponden a eluido un tapón de Lana de Vidrio, lavada QP en el fondo
del vino conteniendo 0,45; 0,90; 1,35; 1,80 y 2,25 y verter 20 ml de Resina Dowex 1 x 2.
g/l de Acido Láctico. Someter la Resina a dos ciclos completos de
La representación gráfica de las absorbancias regeneración con pasos alternos de Acido Clorhídri-
de estas soluciones en función de la riqueza en co 1mol/l (1N) SV y Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
Acido Láctico, es una recta. Lavar después con 50 ml de Agua PA-ACS, agitan-
do la Resina Dowex cuando los primeros ml de
25.5. Cálculo. Agua PA-ACS pasan por la columna para despe-
Llevar los valores de absorbancia obtenidos a la garla del fondo de la bureta.
curva patrón y deducir los correspondientes conte- Saturar la Resina de iones acetato, mediante el
nidos en ácido láctico expresados en g/l. paso de 250 ml de una solución de Acido Acético
4N. Lavar luego con 100 ml de Agua PA-ACS.
25.6. Observaciones. 26.2.2. Aparato para la oxidación. Aparato com-
Si el vino tiene más de 250 mg por litro de sulfu- puesto de matraz de cuello largo, atravesado late-
ralmente por el tubo afilado de embudo con llave, y
roso total, el resultado puede ser erróneo, por la
en comunicación con refrigerante, según dimensio-
presencia de ácido aldehído sulfuroso. En determi-
nes y forma del diseño (fig. 26.I).
naciones de precisión, conviene realizar una correc-
ción en la forma siguiente:
26.3. Reactivos.
Tomar 15 ml de eluido y llevar a probeta de
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
tapón esmerilado, en la que se habrá añadido 5 ml
181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
de sodio acetato al 27% y 2 ml de ácido sulfúrico
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
1,55N (77,5 ml de ácido sulfúrico 2N diluidos a 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
100 ml con agua destilada). Añadir 5 ml de sodio 131074 Agua PA-ACS
nitroprusiato al 2% y 5 ml de piperidina al 10%. 171096 Almidón soluble RE
Mezclar y hacer la determinación espectrofotométri- 121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA
ca a 570 nm que da el factor de corrección: 211376 Lana de Vidrio, lavada QP
131413 Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS
L = L’ - C x 0,25 211456 Piedra Pómez gránulos QP
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
L = contenido real de ácido láctico expresado en PA-ACS-ISO
g/l. 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
182114 Potasio Permanganato 0,01 mol/l
L’ = contenido aparente de ácido láctico expre- (0,05N) SV
sado en g/l. Resina DOWEX 1 x 2 (50-100 mallas)
181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
C = factor de corrección en g/l. 182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV
182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
25.7. Referencia. 181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV
25.7.1. Rebelein, M. “Deutsche Lebens-mittel 181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV
Rudshan”, 2: 36-41, 1961, y 59: 131, 1963.
26.3.1. Resina Dowex 1 x 2 (50-100 mallas)
26.3.2. Solución de Acido Acético 4N. Diluir
26. ACIDO CITRICO Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-
ACS a la concentración indicada y determinar el
26.1. Principio. factor.
El ácido cítrico es fijado junto con los otros áci- 26.3.3. Solución de Acido Acético 2,5N. Diluir
dos del vino por una resina cambiadora de aniones. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-
Después se procede a la elución, la que se realiza ACS a la concentración indicada y determinar el
56 fraccionadamente y separando el ácido citromálico
que es causa de error en la valoración del ácido
factor.
26.3.4. Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV.
cítrico. 26.3.5. Acido Sulfúrico diluido al 1/5 (v/v). Diluir
El ácido cítrico es transformado por oxidación Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
cuidadosa en acetona, la que se separa por destila- 26.3.6. Solución Tampón pH = 3,2-3,4. En un
ción. El etanal arrastrado se oxida a ácido acético y matraz aforado de 1 l introducir 150 g de Potasio di-
se valora sola la acetona por yodometría. Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO y 5 ml de Acido
M
orto-Fosfórico (d = 1,689) y enrasar con Agua PA- Agua PA-ACS hasta este volumen: añadir después
ACS. (Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO 4,5 ml de Acido Sulfúrico al 1/3 y 5 ml de una solu-
con Agua PA-ACS hasta obtener la densidad indi- ción de Potasio Permanganato 2N.
cada) Si el volumen del destilado excede de los 90 ml,
26.3.7. Solución de Manganeso Sulfato de 50 g/l. completar a 180 ml con Agua PA-ACS y utilizar la
Disolver Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS en dosis doble de reactivos.
Agua PA-ACS. En estas condiciones (medio Acido Sulfúrico
26.3.8. Piedra Pómez gránulos QP. 0,5N y Potasio Permanganato 0,1N), el alcohol etíli-
26.3.9. Potasio Permanganato 0,01 mol/l co es oxidado a ácido acético y la acetona perma-
(0,05N) SV. nece intacta.
26.3.10. Acido Sulfúrico diluido a 1 (v/v). Tapar el frasco, dejar en reposo durante 45
26.3.11. Solución de Potasio Permanganato 2N. minutos a la temperatura ambiente. Al cabo de este
Disolver Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en tiempo se destruye el exceso de permanganato adi-
Agua PA-ACS, ajustar a la concentración indicada y cionando solución de Hierro II Sulfato.
determinar el factor. Destilar después y recoger 50 ml aproximada-
26.3.12. Solución de Hierro II Sulfato de 40 g por mente de destilado en un frasco de tapón esmerila-
100. do que contenga 5 ml de Sodio Hidróxido 5 mol/l
26.3.13. Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV. (5N) SV.
26.3.14. Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV.
26.3.15. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N.
Diluir exactamente 1:5 de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l
(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor.
26.3.16. Almidón soluble RE.

26.4. Procedimiento.
26.4.1. Separación de los ácidos cítrico y citro-
málico. Hacer pasar 25 ml del vino a través de la
columna cambiadora de aniones Dowex 1 x 2 en
forma acética a razón de 3 ml cada dos minutos.
Lavar la columna con 20 ml de Agua PA-ACS en
tres veces. Eluir los ácidos con 200 ml de solución
de Acido Acético 2,5N que se hace pasar por la
columna a la misma velocidad. En esta fracción de
eluido se encuentra, entre otros ácidos, el ácido
citromálico que interesa eliminar.
Eluir los ácidos cítricos y tartáricos haciendo
pasar a través de la columna 100 ml de Sodio
Hidróxido 2 mol/l (2N) SV y recoger el eluido en el
matraz del aparato de oxidación y destilación des-
crito
26.4.2. Oxidación. En el matraz que contiene ya
el eluido anterior, añadir Acido Sulfúrico diluido al
1/5 (unos 20 ml) para llevar el pH a 3,2-3,8, 25 ml
de Solución Tampón pH = 3,2-3,4, 1 ml de solución
de Manganeso II Sulfato y algunos gramos de Pie-
dra Pómez gránulos QP. Tapar y conectar el matraz
con el refrigerante, calentando hasta ebullición.
Separar los primeros 50 ml destilados.
Colocar Potasio Permanganato 0,01 mol/l
(0,05N) SV en el embudo lateral de llave, y verter en
el matraz a razón de una gota por segundo, cayen-
do en el eluido en ebullición. El destilado se recoge
en frasco de 500 ml de tapón esmerilado que con-
57
tiene unos ml de Agua PA-ACS. Continuar la oxida-
ción hasta que la coloración parda del líquido acuse
un exceso de permanganato.
26.4.3. Separación de la acetona. Si el volumen
del destilado es inferior a 90 ml, completar con Figura 26.l
26.4.4. Valoración de la acetona, añadir al conte- 131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
nido del frasco 25 ml de Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV, 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
si la dosis de Acido Cítrico es superior a 0,5-0,6 g/l
será necesario añadir más solución de Yodo, hasta 27.3.1. Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV.
que quede color amarillento que indicará este exce- 27.3.2. Bario Cloruro, 100 g de Bario Cloruro 2-
so. Duplicar o triplicar las dosis de Yodo hasta llegar hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-ACS.
a este punto, pero si la riqueza en Acido Cítrico es 27.3.3. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
mayor de 1,5 g, comenzar otra vez el análisis con
sólo 10 ml de vino. 27.4. Procedimiento.
Dejar en contacto el Yodo añadido durante 20 27.4.1. Eliminación del anhídrido sulfuroso del
minutos permaneciendo el frasco tapado. Añadir vino. Introducir en el Erlenmeyer del aparato descri-
8 ml de Acido Sulfúrico al 1/5 y valorar el exceso de to 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Clorhídri-
yodo con Sodio Tiosulfato 0,02N en presencia de co 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solución para eli-
Almidón soluble RE. minar el aire del aparato. Introducir 100 ml del vino
Hacer una valoración en blanco en las mismas por la ampolla de llave evitando que la ebullición se
condiciones sustituyendo los 50 ml de destilado por pare durante esta adición. Continuar la ebullición
50 ml de Agua PA-ACS. hasta reducir el volumen del líquido a unos 100 ml,
26.5. Cálculo. eliminando así todo el SO2.
27.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar el
Calcular el contenido en ácido cítrico expresado
residuo de la evaporación anterior a un vaso de
en g/l.
400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad de
Agua PA-ACS suficiente para llevar el volumen total
V’ - V”
a 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l
Acido cítrico = 0,64 ———— g/l
(2N) y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota 10 ml
V
de solución de Bario Cloruro, con la precaución de
V = volumen en ml de la muestra de vino. no parar la ebullición y dejar reposar en caliente,
colocando el vaso sobre placa a 60° durante cuatro
V’ = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N uti- horas y en baño de agua hirviendo durante dos
lizado en la valoración en blanco. horas. En el caso de pequeñas cantidades de preci-
pitado, se recomienda un segundo reposo en frío
V” = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N uti- durante 12 horas. Filtrar por filtro sin cenizas, lavar
lizado en la valoración del yodo en exceso. el vaso y precipitado con Agua PA-ACS caliente
hasta que no dé reacción con Plata Nitrato PA-
26.6. Referencia. ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente plegado a
26.6.1. Recueil des Méthodes Internationales crisol de porcelana tarado, desecar, calcinar y, des-
d’Analyse des Vins. 0. I. V., A29, 1-3, 1969. pués de enfriar en un desecador, pesar.

27.5. Cálculo.
27. SULFATOS Calcular el contenido de sulfatos expresado en
meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproxima-
27.1. Principio.
ción de ± 0,05 g/l.
Precipitación del bario sulfato en el vino, previa-
mente desprovisto de anhídrido sulfuroso por ebulli- Sulfato = 85,68 P meq/l.
ción al abrigo del aire.
Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.
27.2. Material y aparatos.
27.2.1. Matraz cónico (Erlenmeyer) de 500 ml, P = peso de las cenizas en g.
provisto de ampolla con llave de 100 ml y de des-
prendimiento de vapor, atravesando ambos el 27.6. Referencias.
tapón. El matraz se coloca sobre disco metálico de 27.6.1. Deibner, P.; Bernard, P. “Industries Ali-
15 cm de diámetro con abertura circular de 8 cm de mentaires et Agricoles”, 71: 1, 23 y 5, 427,1954.
diámetro.
58 27.2.2. Vaso cilíndrico de 400 ml.
27.2.3. Baño de agua o plancha caliente a 60°C.
27.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V., A14, 1-4. 1969.

27.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV
131074 Agua PA-ACS
M
28(a). ANHIDRIDO SULFUROSO 28(a).2.3. Refrigerante que condense vapores y
(Método Paul) deje pasar el gas en recorrido seguro.
28(a).2.4. Frasco con agua y con tapón atrave-
28(a).1. Principio. sado por el tubo que comunica con el barbotador
Liberación de sulfuroso “libre” por acidificación para hacer vacío, y otro tubo sumergido en el agua
del vino, arrastre por corriente de aire, oxidación por para acusar la intensidad del vacío por la depresión
barboteo en agua oxigenada neutra y valoración de la columna de agua en el interior del tubo,
con sodio hidróxido del ácido sulfúrico formado. depresión que debe mantenerse entre 20-30 cm.
Liberación por ebullición moderada del sulfuroso El gasto de vapor será de 40 l/h.
“combinado”, que queda en el vino después de la 28(a).2.5. Baño de agua regulable a 10°C.
extracción del sulfuroso “libre”, y análogo tratamien-
to que en la determinación del sulfuroso “libre”. El 28(a).3. Reactivos.
sulfuroso “total” es la suma del sulfuroso “libre” y el 131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
sulfuroso “combinado”. Puede determinarse acidifi- 131074 Agua PA-ACS
cando el vino y calentando y procediendo como en 251170 Azul de Metileno (C.I. 52015) DC
los dos casos anteriores. 121085 Etanol 96% v/v PA
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
28(a).2. Material y aparatos. PRS
Utilizar el aparato representado en la figura 171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS
28(a).I. 181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
28(a).2.1. Matraz de 100 ml o de 250 ml.
28(a).2.2. Tubo barbotador provisto de bola hue- 28(a).3.1. Acido Fosfórico aI 25% (p/v). Diluir
ca en un extremo con unos 20 orificios de 0,2 mm convenientemente Acido orto-Fosfórico 85% PA-
de diámetro alrededor del círculo máximo hori- ACS-ISO con Agua PA-ACS.
zontal. 28(a).3.2. Hidrógeno Peróxido de 0,3 volúmenes

59

Figura 28(a).I. Las dimensiones están indicadas en mm. Los diámetros interiores de los cuatro tubos con-
céntricos que constituyen el refrigerante son 45, 34, 27 y 10 mm
por 100. Diluir convenientemente Hidrógeno Peróxi- Anhídrido sulfuroso = 32 V mg/l.
do 30% p/v (100 vol.) PRS con Agua PA-ACS.
28(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,01N. En un matraz V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,01N.
aforado diluir a 1:10, Sodio Hidróxido 0,1 mol/l
(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor 28(a).6. Observaciones.
de la solución obtenida 0,01N. Para vino sensiblemente picado (con más de
28(a).3.4. Indicador. Mezclar 100 mg de Rojo de 2 g/l de acidez acética) puede arrastrarse con el
Metilo (C.I. 13020) RE-ACS, 50 mg de Azul de Meti- anhídrido sulfuroso, ácidos volátiles, especialmente
leno (C.I. 52015) DC y 100 ml de Etanol de 50°. cuando la corriente de aire es intensa.
Diluir convenientemente Etanol 96% v/v PA con Corregir determinando la acidez volátil presente
Agua PA-ACS. en el líquido del barbotador, operando de la siguien-
te forma:
28(a).4. Procedimiento. Después de la neutralización con el sodio hidró-
28(a).4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre. xido al valorar la acidez, añadir un cristal de 131066
En el matraz de 100 ml del aparato poner 10 ml del Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO y llevar el conteni-
vino y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al 25%, colo- do del barbotador al aparato de determinación de la
cando acto seguido el matraz en su sitio. Si la rique- acidez volátil por destilación en corriente de vapor.
za en SO2 del vino es pequeña, se emplea el matraz Restar despues del resultado anterior la parte de
acidez correspondiente a los ácidos volátiles.
de 250 ml y se ponen 20-25 ml de vino.
Sumergir el matraz en un baño de agua a 10°C.
28(a).7. Referencias.
Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3
28(a).7.1. Paul, F. “Mitteilungen Klosternenberg”,
volúmenes y dos gotas del reactivo Indicador en el
A: 8, 21, 1958.
barbotador y neutralizar el Hidrógeno Peróxido con
28(a).7.2. Recueil des Méthodes Internationales
Sodio Hidróxido 0,01N.
d’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 1-8, 1969.
Adaptar el barbotador al aparato y hacer barbo-
tar el aire (o nitrógeno) durante 12-15 minutos.
Arrastrar el anhídrido sulfuroso libre y después oxi- 28(b). ANHIDRIDO SULFUROSO
dar a H2SO4. Retirar el barbotador y valorar el ácido (Método Ripper doble)
formado con solución de Sodio Hidróxido 0,01N.
28(a).4.2. Análisis del anhídrido sulfuroso combi- 28(b).1. Principio.
nado. Después de terminar la valoración del anhídri- Valoración yodométrica del SO2 operando direc-
do sulfuroso libre, colocar en el barbotador ya lim- tamente con el vino.
pio, los 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizado Para evitar el error introducido por la recombina-
y con las dos gotas del indicador. Calentar con lla- cion del sulfuroso liberado de su combinación con
los aldehídos, durante la valoración volumétrica, se
ma pequeña hasta llevar a la ebullición el vino que
hace una segunda valoración, después de nueva
quedó en el matraz despojado del anhídrido sulfuro-
liberación del SO2 recombinado.
so libre por la determinación anterior. Aplicar el fue-
go directo sobre el fondo del matraz, que des-
28(b).2. Material y aparatos.
cansará sobre chapa metálica perforada con orificio
28(b).2.1. Erlenmeyer de 500 ml y material para
de 30 mm de diámetro, para evitar la pirogenación
una volumetría.
de las materias extractivas del vino sobre las pare-
des del matraz. Mantener el paso del aire o nitróge- 28(b).3. Reactivos.
no durante la ebullición, que durará 12-15 minutos, Acetaldehído
tiempo que se considera suficiente para arrastrar 131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
todo el sulfuroso combinado, y después oxidarlo. Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
Continuar como en 28(a).4.1 a partir de “Colocar (Acido EDTA Na2 2-hidrato)
2-3 ml de Hidrógeno Peróxido...”. 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
28(a).4.3. Anhídrido sulfuroso total. Puede 131074 Agua PA-ACS
determinarse por la suma anhídrido sulfuroso libre 171096 Almidón soluble RE
más anhídrido sulfuroso combinado, pero tam- 121428 Mercurio II Yoduro rojo PA
bién puede determinarse directamente, actuando 182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
60 desde un principio con corriente de aire y con
calor.
182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV
182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV

28(a).5. Cálculo. 28(b).3.1. Sodio Hidróxido 4N. En un matraz


Calcular el contenido en anhídrido sulfuroso aforado diluir a 4:5, Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
expresado en mg/l con una aproximación de con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solu-
10 mg/l. ción 4N obtenida.
M
28(b).3.2. Acido Sulfúrico al 1/10 en volumen Adicionar a 50 ml del vino, colocados en un
(180 g/l). Diluir convenientemente Acido Sulfúrico Erlenmeyer de 300 ml, un exceso de Acetaldehído
96% PA-ISO con Agua PA-ACS. para que sea capaz de combinarse con todo el SO2
28(b).3.3. Engrudo de almidón preparado de la libre; dicha cantidad puede ser de unos 5 ml de
siguiente forma: solución de Acetaldehído, de 7 g por litro. Se tapa
Pesar 2,5 g de Almidón soluble RE y triturarlo en el matraz y después de un reposo de 30 minutos,
un mortero junto con 10 mg de Mercurio II Yoduro como mínimo, se añaden 3 ml de Acido Sulfúrico
rojo PA. Llevar a un vaso y añadir un volumen de diluido al 1/10 y después los de Yodo 0,025 mol/l
Agua PA-ACS suficiente para poder hervir la sus- (0,05N) SV necesarios hasta el viraje de almidón.
pensión con fluidez. Llevar después ésta a matraz Sea V’’’ el volumen en ml necesarios.
con 1 litro de Agua PA-ACS en ebullición, que se La presencia de ácido ascórbico también puede
mantiene durante 10 minutos. El líquido obtenido ser causa de error. Descontar el yodo correspon-
estará limpio y si es necesario se filtra. diente, considerando que 1 ml de Yodo 0,025 mol/l
28(b).3.4. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV. (0,05N) SV es consumido por 4,4 mg de ácido
28(b).3.5. Sodio Tiosulfato 0,01N. En un matraz ascórbico.
aforado diluir a 1:5, Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l
(0,05N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor 28(b).5. Cálculo.
de la solución 0,01N obtenida. SO2 libre = 32 (V - V’’’) mg/l.
28(b).3.6. Acido Etilendiaminotetraacético Sal SO2 combinado = 32 (V’ + V”) mg/l.
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO. SO2 total = 32 (V + V’ + V” - V’’’) mg/l.
Con aproximación de 10 mg/l.
28(b).4. Procedimiento.
Colocar en el Erlenmeyer de 500 ml, 50 ml del
28(b).6. Observaciones.
vino, 3 ml de Acido Sulfúrico al 1/10, 5 ml de Engru-
Para vinos pobres en SO 2, es conveniente
do de Almidón y 30 mg de Acido Etilendiaminote-
emplear yodo más diluido, solución 0,02N, reem-
traacetico Sal Disodica 2-hidrato PA-ACS-ISO (con
plazando entonces el coeficiente 32 por el de 12,8
el fin de evitar la oxidación del SO2 libre durante la
en los cálculos.
valoración).
En los vinos tintos es conveniente, para apreciar el
Homogeneizar la solución y añadir con bureta
viraje, iluminar con luz amarilla el fondo del Erlenmeyer
Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV hasta coloración azul
donde está el vino. Hay dispositivos sencillos a
del almidón, que primero será fugaz, y netamente
base de simple bombilla con filtro preparado con
persistente después, durante 10-15 segundos,
considerándola entonces aceptable. Sea V el volu- solución de potasio cromato, o bien con luz amarilla
men del yodo empleado. de lámpara de vapor de sodio.
Añadir 8ml de solución de Sodio Hidróxido 4N, Cuando haya un interés especial en la determi-
agitar una sola vez y dejar en contacto durante 5 nación del SO2 libre, debe dejarse la muestra en
minutos. Después verter, de un solo golpe y agitan- reposo durante 4 días, al abrigo del aire y a tempe-
do enérgicamente, 10 ml de Acido Sulfúrico a 1/10. ratura de 20°C. El análisis se realizará también a
Se valora inmediatamente con Yodo 0,025 mol/l 20ºC.
(0,05N) SV el SO2 liberado. Sea V’ el volumen en ml
de solución de yodo empleado. 28(b).7. Referencias.
Se añade después 20 ml de Sodio Hidróxido 28(b).7.1. Jaulmes, P. y Dienziede. “Méthode
4N, se deja en contacto durante 5 minutos después Ripper double d’analyse de SO2. Bol.”. O. I. V., 274.
de haber agitado una sola vez. Se diluye con 200 ml 52-54, 1959.
de Agua PA-ACS bien fría, agitar después enérgica-
mente y añadir 30 ml de Acido Sulfúrico al 1/10 y 28(b).7.2. Recueil des Méthodes Internationales
valorar con Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV el SO2 libe- d’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 7. 1969.
rado. Sea V” el volumen en ml de la solución de
yodo empleado.
Con estas valoraciones se corrige el error que 29. ACIDO SORBICO
puede originarse por la recombinación de parte del
SO2 ya liberado de los aldehídos, con el mismo 29.1. Principio.
aldehído que estará presente en el líquido que se El ácido sórbico arrastrado por el vapor de agua
(constante de volatilidad 0,59), se valora en el desti-
61
valora.
También es posible causa de error, y especial- lado por espectrofotometría en el ultravioleta.
mente cuando se trate de vinos tintos ricos en color
y extractos, el consumo de yodo por estas sustan- 29.2. Material y aparatos.
cias; para corregir este error se opera de la manera 29.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta y cubetas
siguiente: de cuarzo de 1 cm de espesor.
29.2.2. Matraces aforados de 20 ml y de 1 litro. 29.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
29.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml. d’Analyse des Vins. O. I. V., A30, 1-3, 1969.

29.3. Reactivos.
30. CLORUROS
141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
(o 121531 Potasio Sorbato PA) 30.1. Principio.
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO Determinación directa de cloruros por potencio-
131074 Agua PA-ACS metría utilizando el electrodo Ag/AgCl.
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 30.2. Material y aparatos.
121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA 30.2.1. pH-metro con escala que permita apre-
ciar 2mV.
29.3.1. Solución (a) (destinada a catalizar la oxi- 30.2.2. Agitador magnético.
dación del ácido sulfuroso por el aire). Mezclar 0,5 g 30.2.3. Electrodo Ag/AgCl, con una solución
de Sodio Hidrógeno Carbonato PA con 0,001 g de saturada de potasio nitrato como electrolito.
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadir 30.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.
Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
30.3. Reactivos.
29.3.2. Solución (b) de Acido Sórbico (USP-NF) 131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
PRS-CODEX de 20 mg/l. Introducir 20 mg de Acido 131074 Agua PA-ACS
Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX en un matraz afora- 121085 Etanol 96% v/v PA
do de 1 litro que contenga 900 ml de Agua PA-ACS 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
caliente, agitar, dejar enfriar y enrasar a 1 litro. Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)
En vez de Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
puede emplearse 26,8 mg de Potasio Sorbato PA. 30.3.1. Solución patrón de cloruros.- Disolver
2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)
29.4. Procedimiento. puro para análisis (máximo 0,005% de bromo) pre-
Destilar como en 21.4, 20 ml de vino adicionado viamente desecado, en Agua PA-ACS hasta 1 litro.
de 1-2 g de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO. 1 ml de esta solución contiene 1 mg de ion Cloro.
Recoger 320-330 ml de destilado para conseguir la 30.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver
más completa extracción del Acido Sórbico (USP- 4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en una solu-
NF) PRS-CODEX, que requiere unos 100 ml más ción al 10% v/v de Etanol 96% v/v PA en Agua PA-
que los necesarios para la acidez volátil. ACS, hasta un litro. 1 ml de esta solución corres-
Tomar 5 ml del destilado, colocar en un matraz ponde a 1 mg de ion Cloro.
aforado 20 ml y enrasar con la solución (a). 30.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
Llenar con esta mezcla una cubeta de cuarzo de
1 cm de espesor. Dejar la cubeta al aire durante 30.4. Procedimiento.
unos minutos. Determinar la absorbancia a 256 nm. 30.4.1. Determinación del potencial del punto de
Para la prueba en blanco, sustituir los 5 ml de desti- equivalencia.
lado por 5 ml de Agua PA-ACS. Introducir 5,0 ml de la solución patrón de cloru-
Para obtener la curva patrón, determinar la ros en un vaso de 150 ml.
absorbancia de soluciones que contengan 0,5, 1, Diluir aproximadamente a 100 ml con Agua PA-
2,5 y 5 mg/l de Acido Sórbico (USP-NF) PRS- ACS y acidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70%
CODEX obtenidas diluyendo con Agua PA-ACS la PA-ACS-ISO (30.3.3). Introducir los electrodos.
solución (b). La gráfica correspondiente a estos Añadir 10 ml de la solución de Plata Nitrato, agitan-
valores es una línea recta. do moderadamente: adicionar los cuatro primeros
ml en fracciones de 1 ml y leer las correspondientes
29.5. Cálculo. lecturas en milivoltios; los dos siguientes ml, en
Calcular el ácido sórbico expresado en mg/l. fracciones de 0,2 ml y continuar adicionando en
fracciones de 1 ml hasta que se hayan alcanzado
Acido sórbico = 0,2 . C . V mg/l. un total de 10 ml. Después de cada adición esperar
unos treinta segundos antes de hacer la correspon-
C = contenido en mg/l de ácido sórbico determi- diente lectura en milivoltios. Llevar los valores así
62 nado por comparación con curva patrón. obtenidos sobre un papel milimetrado en función
V = volumen en ml de destilado. de los correspondientes ml de solución de Plata
Nitrato y a partir del punto singular de la curva
29.6. Referencias. obtenida determinar el potencial del punto de equi-
29.6.1. Jaulmes, P.; Mestres, R. y Mandrou, B. valencia.
“Annales des Falsifications et de l’Expertise Chimi- Para comprobar el potencial del punto de equi-
que”, 111, 1961. valencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la
M
solución patrón de cloruros, 95 ml de Agua PA-ACS 31.3. Reactivos.
y 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Introducir 131007 Acetona PA-ACS-ISO
el electrodo y valorar agitando, justamente hasta el 121014 Acido Benzoico PA
potencial del punto de equivalencia. 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Repetir esta operación hasta obtener una buena 131074 Agua PA-ACS
concordancia de resultados. Este control debe 121086 Etanol absoluto PA
efectuarse antes de determinar la concentración de 121085 Etanol 96 v/v PA
cloruros en cada serie de muestras a analizar. 132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
30.4.2. Determinación. de BHT PA-ACS-ISO
Llevar a un vaso de 150 ml, 50,0 ml de vino. 131524 Potasio Nitrato PA-ISO
Añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 1,0 ml de Acido 131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Valorar a continuación 131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
siguiendo el procedimiento descrito anteriormente
hasta alcanzar el potencial del punto de equiva- 31.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
lencia. de BHT PA-ACS-ISO.
31.3.2. Mezcla Acetona-Etanol: Mezclar 1.000 ml
30.5. Cálculo. de Acetona PA-ACS-ISO con 1.000 ml de Etanol
absoluto PA.
La cantidad de cloruros se determina mediante
31.3.3. Mezcla Nitro-Sulfúrico: Añadir a 10 g de
las expresiones:
Potasio Nitrato PA-ISO, 100 ml de Acido Sulfúrico
96% PA-ISO.
0,02 n en g de ion cloro.
31.3.4. Solución Sodio Hidróxido-Etanol al 5%.
0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion clo-
Añadir a 5 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-
ro.
ISO (sin Na2 CO3) 50 ml de Agua PA-ACS.
0,0329 n en g de sodio cloruro por litro. Después de fría la mezcla se añade Etanol 96%
Siendo: v/v PA hasta 100 ml.
n = volumen, en ml, de solución de plata nitrato La solución debe quedar limpia.
necesario para alcanzar el potencial del punto de
equivalencia. 31.4. Procedimiento.
Vinos secos o con riqueza en azúcar de 100 g/l.
30.6. Referencia. Añadir a 10 ml de vino puestos en ampolla de
30.6.1. Recueil des Méthodes Internationales decantación 2 ml de Acido Sulfúrico al 25% y 25 ml
d’Analyse des Vins. O. I. V. A 15j. de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO, dos veces seguidas. Decantar y filtrar
el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
31. ACIDO BENZOICO PA-ACS-ISO, por papel seco, llevarlo a matraz afo-
rado de 50 ml y enrasar.
31.1. Principio.
Poner 20 ml de la solución de Eter Dietílico en
Extracción por el éter del ácido benzoico pre-
Erlenmeyer de 50 ml, evaporar aspirando los vapo-
sente en el vino. Tratamiento del extracto por la
res mediante vacío, permaneciendo el Erlenmeyer
mezcla nitro-sulfúrica y formación del ácido 3,5- sumergido en baño de agua fría. Añadir al residuo
dinitrobenzoico, que es extraído con éter y después 5 ml de la mezcla Nitrosulfúrica cuidando de empa-
recogido por la mezcla acetona-alcohol. La adición par bien todo el residuo. Llevar después al baño de
de sodio hidróxido da origen a una coloración viole- agua hirviendo durante 35 minutos y agitando de
ta. Esta reacción es sensible, específica y cuantitati- cuando en cuando, sobre todo al principio.
va, siempre que se opere en condiciones que ase- Enfriar en agua fría, añadir 5 ml de Agua PA-
guren la transformación del ácido benzoico en ACS, seguir enfriando y verter el contenido en una
compuesto coloreado medible en el espectrofotó- ampolla de decantación de 250 ml. Enjuagar el
metro a 570 nm. Erlenmeyer con 5 ml de Agua PA-ACS, volver a ver-
ter el contenido en la ampolla y añadir 30 ml de Eter
31.2. Material y aparatos. Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-
31.2.1. Espectrofotómetro que permita lecturas ISO. Agitar cinco minutos. Eliminar la fase acuosa
a 570 nm. después de cuidadosa decantación y lavar el Eter 63
31.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml. Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-
31.2.3. Matraces de 100 ml aforados. ISO con 5 ml de Agua PA-ACS. Decantar con cui-
31.2.4. Cápsulas. dado (un lavado más prolongado originaría pérdidas
31.2.5. Baño de agua. de dinitrobenzoico en la fase acuosa, por lo que es
31.2.6. Matraces aforados de 50 ml. preferible decantar bien, que volver a lavar).
31.2.7. Erlenmeyer de 50 ml. Filtrar el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO por filtro revestido con Sodio 32.2. Material y aparatos.
Sulfato anhidro PA-ACS-ISO, lavar el filtro en segui- 32.2.1. Cápsula de sílice de 7 cm de diámetro.
da con 10 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 32.2.2. Baño de agua.
ppm de BHT PA-ACS-ISO. Evaporar el filtrado en 32.2.3. Horno eléctrico, recomendable con
una pequeña cápsula a 35°, arrastrar con tres adi- regulador automático, para regular a 525°.
ciones de 5 ml de Acetona-Etanol, cada vez (previa- 32.2.4. Espectrofotómetro o colorímetro capa-
mente enfriado en nevera). Recoger todos estos ces para lectura a 584 nm.
líquidos en un tubo de ensayo de tapón esmerilado
y aforado a 15 ml. 32.3. Reactivos.
En un tubo de ensayo de tapón esmerilado y 182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV
con trazo de aforo a 15 ml, poner de 0,5 a 5 ml de 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
la anterior solución. Este volumen debe variar con la 131074 Agua PA-ACS
riqueza supuesta, para obtener la reacción colorea- 211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP
da con el ácido dinitrobenzoico originado por 0,1 a 142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)
0,5 mg de Acido Benzoico PA. El método es válido PRS-CODEX
entre 0,03 y 1 mg, si se utiliza aparato capaz de 121489 Potasio Bromuro PA
medir absorbancias superiores a 1,5. 171615 Rojo de Fenol RE-ACS
Diluir el volumen de líquido puesto en el tubo, 131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
con la mezcla Acetona-Etanol fría, hasta 14,7 ml y 181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
añadir después 0,3 m Sodio Hidróxido lentejas PA- 182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV
ACS-ISO diluido al 5% en Agua PA-ACS, agitar y 131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
sumergir en hielo fundente.
Hacer la determinación en cubeta de 1/2-1 cm a 32.3.1. Solución de Sodio Hidróxido al 50%.
570-580 nm después de 30 minutos y antes de 70 Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO en
minutos a partir del momento de la mezcla. Agua PA-ACS.
Utilizar como solución compensadora para com- 32.3.2. Lechada de Cal 4N (224 g de Calcio Oxido
paración una mezcla de 14,5 de Acetona-Etanol natural escoriforme QP por litro con Agua PA-ACS).
con 0,3 ml de Sodio Hidróxido al 5%. 32.3.3. Solución de Rojo de Fenol. Mezclar 0,24 g
Para obtener la curva patrón, preparar una solu- de Rojo de Fenol RE-ACS y 24 ml de Sodio Hidróxi-
ción valorada de 50 mg de Acido Benzoico PA en do 0,1 mol/l (0,1N) SV. Añadir Agua PA-ACS hasta
100 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de 1.000 ml.
BHT PA-ACS-ISO. Diluir esta solución a 1/10 con 32.3.4. Solución Tampón pH = 4,65. Mezclar
Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA- 500 ml de Acido Acético 2 mol/l (2N) SV, 250 ml de
ACS-ISO y tratar 10 ml de esta solución de 50 mg Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV y 250 mI de Agua
por litro, como se ha indicado antes para la mues- PA-ACS.
tra. 32.3.5. Solución oxidante. A 2 g de Cloramina T
La densidad de óptica varía linealmente con la 3-hidrato (BP, F. Eur.) PRS-CODEX añadir Agua
cantidad de Acido Benzoico. PA-ACS hasta un litro.
Preparar esta solución 48 horas antes de su
31.5. Cálculo. empleo y sólo será válida hasta quince días.
Llevar la absorbancia obtenida a la curva patrón 32.3.6. Solución reductora. Añadir a 25 g de
y expresar el correspondiente contenido de ácido Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO Agua
benzoico en mg/l. PA-ACS hasta un litro.
32.3.7. Solución valorada de Potasio Bromuro.
31.6. Referencia. Añadir a 1,489 g de Potasio Bromuro PA Agua PA-
31.6.1. Spanyar, E,; Kerel, E. y Kiszel, M. ACS hasta un litro.
“Zeitschrift für Lebenmittel Untersuchung und Fors- Esta solución contiene 1 g de Bromuro por litro.
chung”, 1958. En el momento de su empleo se hacen dos dilucio-
nes sucesivas a 1/10 y se tendrá la solución a em-
32. BROMO TOTAL plear que contiene 10 microgramos de Bromo por ml.

32.1. Principio. 32.4. Procedimiento.


64 Saponificación cuidadosa, para evitar pérdidas, Adicionar 0,5 ml de Sodio Hidróxido al 50% y
de los ésteres del ácido brómico, eventualmente 1 ml de Lechada de Cal 4N a 50 ml del vino coloca-
presentes en el vino, transformación del rojo de dos en una cápsula de cuarzo de 7 cm de diámetro.
fenol en azul de bromofenol, y valoración colorimé- Esta adición proporciona un soporte infusible que
trica o espectrofotométrica. permite una buena combustión del carbón. Si el vino
es muy ácido conviene añadir antes sodio hidróxido
para llevarlo a pH 10 por lo menos.
M
Si el vino contiene compuestos orgánicos de cia con fotocolorímetro o espectrofotómetro
bromo o antisépticos bromados, dejar por lo menos mediante medida a 584 nm.
24 horas la muestra de vino alcalinizada, tapando la Para obtener la curva patrón, tomar la solución
cápsula con un vidrio de reloj, con el fin de saturar de Potasio Bromuro con 10 mg de Bromo por litro,
los ésteres del ácido bromoacético, que son muy alícuotas de 0,25; 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50; 2,00
volátiles. y 2,50 ml y llevar a 5 ml con Agua PA-ACS.
Evaporar el líquido de la cápsula en baño de El contenido en bromo de estas soluciones es,
agua, calentar el residuo con pequeña llama o en respectivamente, 0,5; 1; 1,5; 2,0; 2,5; 3; 4 y 5 mg/l.
baño de arena para eliminar las últimas trazas de Tratar cada una de estas soluciones de 5 ml
agua. Incinerar hasta cenizas blancas en el horno como la solución de cenizas y hacer las correspon-
eléctrico regulado a 525°C, sin pasar de esta tem- dientes determinaciones en el espectrofotómetro a
peratura para evitar pérdidas por sublimación. 584 nm.
Para facilitar la obtención de cenizas blancas,
retirar la cápsula después de 15 minutos de incine- 32.5. Cálculo.
ración, dejar enfriar y humedecer las cenizas aún gri- Calcular el contenido en bromo expresado en
sáceas con unas gotas de Agua PA-ACS, evaporar mg/l mediante comparación con la correspondiente
y volver al horno, repitiendo esta operación las curva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilución.
veces necesarias hasta conseguir cenizas blancas.
Añadir a las cenizas 5 ml de Agua PA-ACS 32.6. Referencias.
hirviendo y remover con una varilla, llevar a pH 4,6- 32.6.1. Jaulmes, P., y Bruns, S. “Valoration du
4,5 con Acido Sulfúrico diluido 1:10 y ajustar con brome dans les vins”. Annales des Falsifications et
Acido Sulfúrico diluido a 1/100 y completar con de Fraudes. 1952.
Agua PA-ACS hasta 10 ml. 32.6.2. Saldoval, J. A., e Hidalgo, T. “Medida
Para calcular la cantidad de Agua PA-ACS a aña- espectrofotométrica de reacciones coloreadas muy
dir, tomar el volumen final igual a 10,2 ml, por consi- fugaces”. Boletín I. N. I. A. 19, 60, 40.
derar el aumento de volumen Agua PA-ACS más
Acido Sulfúrico, equivalente a 0,2 ml, que habrá sido
arrastrado en la precipitación de los 334 mg de Cal- 33. BROMO ORGANICO
cio Sulfato hidratado, formado al reaccionar parte
del Acido Sulfúrico con la Lechada de Cal 4N aña- 33.1. Principio.
dida. El coeficiente de dilución del ácido monobromo-
Las restantes causas de pequeña variación de acético entre el éter y el agua acidulada con ácido
volumen (como las del H2SO4 al pasar a Na2SO4 y sulfúrico (que anula la ionización) es próximo a 5.
K2SO4), se consideran sin sensible influencia. Los ésteres del ácido monobromoacético son
Triturar con varilla de vidrio el calcio sulfato preci- menos solubles en el agua que el mismo ácido, por
pitado y remover bien. lo que es más fácil su extracción por el éter. Tres
Diluir, si es necesario, la solución de cenizas has- lavados con un volumen de éter igual al del vino son
ta un contenido en bromo del vino de 1 mg/l, aproxi- suficientes para extraer todo el bromo orgánico.
madamente. Para comprobar cualitativamente si el
contenido en bromo del vino es superior o inferior a 33.2. Material y aparatos.
1 mg/l, tomar 1 ml de la solución de cenizas del 33.2. (1; 2; 3 y 4) como 32.2. (1; 2; 3 y 4).
vino, poner en tubo de ensayo y añadir una gota de 33.2.5. Ampollas de decantación de 50 y
solución tampón pH 4,65, una gota de solución 500 ml.
Rojo de Fenol y una gota de solución Cloramina T.
Después de un minuto exactamente, detener la 33.3. Reactivos.
reacción añadiendo una gota de solución de Sodio 182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV
Tiosulfato. Si la solución es amarilla, amarillo-parda 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
o amarillo-verdosa, el contenido en bromo es apro- 181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV
ximadamente inferior a 1 mg/l, y si es azul, violeta o 131074 Agua PA-ACS
violeta fugaz, el contenido en bromo es superior a 211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP
1 mg/l, siendo necesario diluir la solución. 142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)
Decantar el líquido y trasvasar a un tubo de PRS-CODEX
ensayo. 132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm 65
Poner en tubo de ensayo 5 ml de la solución de de BHT PA-ACS-ISO
cenizas y añadir 0,25 ml de Solución Tampón, 121489 Potasio Bromuro PA
0,25 ml de Rojo de Fenol y 0,25 ml de Cloramina T. 171615 Rojo de Fenol RE-ACS
Después de un minuto exactamente, paralizar la 131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
reacción con 0,25 ml de solución de Sodio Tiosulfa- PA-ACS-ISO
to 5-hidrato PA-ACS-ISO. Determinar la absorban- 181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV 34.2.6. Secador de aire.
131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS- 34.2.7. Campana o recipiente para cromatogra-
ISO fía y accesorios.
34.2.8. Pulverizador todo de vidrio y pulveriza-
33.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7) como 32.3. (1; 2; 3; 4; ción fina.
5; 6 y 7). 34.2.9. Campana de luz infrarroja.
33.3.8. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
34.3. Reactivos.
33.4. Procedimiento. 131007 Acetona PA-ACS-ISO
Colocar en una ampolla de decantación 20-200 ml 121050 Acido Pirogálico PA
de vino (según la riqueza supuesta), añadir 5 g de 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO por litro de vino, se 131074 Agua PA-ACS
añade después un volumen de Eter Dietílico estabi- 121118 Amonio Bromuro PA
lizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO igual al 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO
volumen de vino, agitar y decantar cuidadosamente 121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA
el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT 121085 Etanol 96% v/v PA
PA-ACS-ISO. Repetir tres veces esta operación. Fil- 131313 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
trar el Eter Dietilico estabilizado con p6 ppm de de BHT PA-ACS-ISO
BHT PA-ACS-ISO, evaporar en frío en cápsula de 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
cuarzo que contenga 0,5 ml de Sodio Hidróxido al
50% y 1 ml de Lechada de Cal 4N. Después de 34.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
unas 24 horas de saponificación de los ésteres, de BHT PA-ACS-ISO
durante las que permanece la cápsula tapada con 34.3.2. Solución de Acido Sulfúrico: solución en
un vidrio de reloj, incinerar progresivamente el resi- Agua PA-ACS al 1/3 en volumen.
duo a la temperatura de 550°C. Arrastrar y disolver 34.3.3. Amoníaco 25% (en NH3) PA (sin cloru-
las cenizas como en 32, realizando también en igual ros).
forma la valoración colorimétrica del bromo. 34.3.4. Mezcla Acetona PA-ACS-ISO-Agua
PA-ACS en la proporción 100/20 en volumen.
33.5. Cálculo. 34.3.5. Revelador de Plata Nitrato. Mezclar
Calcular el contenido en bromo expresado en 85 mg de Plata Nitrato PA-ACS-ISO, 1 ml de Agua
mg/l a partir de la correspondiente curva patrón. PA-ACS, 5 ml de Amoníaco 25% (en NH3) PA y Eta-
nol 96% v/v PA hasta 200 ml.
34. ACIDOS MONOBROMOACETICO Y 34.3.6. Revelador de Acido Pirogálico. Disolver
MONOCLOROACETICO DE ORIGEN 13 mg de Acido Pirogálico PA en 200 ml de Etanol
ORGANICO 96% v/v PA. La solución puede durar tres días si se
(Método cualitativo) (Provisional) conserva fría y al abrigo de la luz.
34.3.7. Solución testigo de Cloro. Disolver 100
34.1. Principio. mg de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO en Agua PA-
Siendo fraudulenta la presencia de compuestos ACS y enrasar a 1.000 ml.
orgánicos monohalogenados, es suficiente para 34.3.8. Solución testigo de Bromo. Disolver
investigar el fraude un análisis cualitativo. 100 mg de Amonio Bromuro PA en Agua PA-ACS y
Extracción de compuestos monohalogenados enrasar a 1.000 ml.
en medio ácido con éter y transformación por adi-
ción de amonio en glicocola y sal de amonio por 34.4. Procedimiento.
combinación del halógeno desplazado. Separación 34.4.1. Extracción del compuesto halogenado.
cromatográfica y revelado con plata nitrato, obte- Tomar 100 ml de vino, llevar el matraz de 500 ml
niéndose una mancha blanca para la plata cloruro y con tapón esmerilado, añadir 5 ml de Acido Sulfúri-
otra negra para la plata bromuro. co 1/3 y, acto seguido, 100 ml de Eter Dietílico
estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.
34.2. Material y aparatos. Agitar brevemente hasta formación de ligera emul-
34.2.1. Frascos de tapón esmerilado que ajuste sión, destapar unos momentos el frasco y observar
perfectamente, de 500 ml de capacidad. la facilidad de separación.
66 34.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml. A veces, como especialmente sucede con vino
34.2.3. Agitador mecánico de unas 150 agita- de prensa, la separación es difícil, siendo necesario
ciones por minuto. nueva adición de Acido Sulfúrico 1/3 y de Eter Dietí-
34.2.4. Papel Watman número 1 para cromato- lico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.
grafía. Observar si hay facilidad de separación y llevar
34.2.5. Pipetas, micropipetas de 0,2 ml capila- el frasco a un agitador mecánico, agitando durante
res divididas en milésimas. tres horas. Poner en ampolla de decantación de
M
250 ml de capacidad con el fin de separar el vino de 35.2. Material y aparatos.
la fracción etérea; eliminar el Eter Etílico por com- Los elementos necesarios para una volumetría.
pleto filtrando rápidamente por ligera capa de al-
godón. 35.3. Reactivos.
Añadir inmediatamente 10 ml de Amoníaco 25% 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
(en NH3) PA, agitar fuertemente durante tres minu- 131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
tos, con el fin de iniciar la formación del aminoácido 131074 Agua PA-ACS
correspondiente (glicocola) y evitar la de otros com- 251246 Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC
puestos. En este momento se forma la sal de amo- 121085 Etanol 96% v/v PA
nio por combinación del halógeno desplazado. 121515 Potasio Hidróxido lentejas 85% PA
Dejar reposar 24 horas para que la reacción sea 181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l
completa y proceder a la cromatografía. (0,1N) SV
34.4.2. Análisis cromatográfico.- Depositar con
micropipeta sobre papel Whatman número 1 para 35.3.1. Solución de Potasio Permanganato
cromatografía (28 x 15 cm) a lo largo de una línea 0,01N. Se conserva mal. Preparar a partir de Pota-
paralela al borde inferior y situada a 2,5 cm de este sio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV. En un
borde, 0,02 ml de soluciones testigo de Cl y de Br, y matraz aforado diluir a 1:10, Potasio Permanganato
de 0,02 a 0,06 ml, según el contenido en halogena- 0,02 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determi-
do, de las muestras de vino, separando cada apli- nar el factor de la solución 0,01N obtenida.
cación 2 cm por lo menos. Enrollar el papel y colo- 35.3.2. Indicador de Indigo. Preparar una solu-
car en el fondo de la cubeta con el disolvente y en la ción de 3 g/l de Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC.
cámara o campana de cromatografía. Filtrar, tomar 50 ml de esa solución, añadir 50 ml de
Retirar el papel de la cubeta cuando el frente Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y Agua PA-ACS hasta
del líquido ascendente se encuentre a 1 cm del 1.000 ml. Mezclar bien.
borde superior del papel, y dejar secar. Pulverizar
con la solución de Plata Nitrato y, estando húmedo 35.4. Procedimiento.
el papel, pulverizar nuevamente con solución de Colocar en un vaso de 50 ml del Indicador de
Acido Pirogálico. Para mayor uniformidad del reve- Indigo antes indicado y añadir 2 ml del vino. Inme-
lado, conviene desecar el papel con lámpara infra- diatamente adicionar gota a gota la solución de
rroja. Potasio Permanganato 0,01N, y al final, cada vez
La mancha correspondiente al Cl es de color más lentamente, hasta desaparición completa del
blanco y tiene un Rf de 0,29, y la mancha corres- color azul y aparición de amarillo oro.
pondiente al Br es de color marrón y tiene un Rf de En vinos nuevos, el viraje es menos neto, por lo
0,59. que conviene tomar sólo 1 ml de muestra.
Hacer la prueba testigo para eliminar el perman-
34.5. Referencia. ganato por sustancias no polifenoles, sustituyendo
34.5.1. Morales, J., y Vega, R. “Comunicación los 2 ml de vino por 2 ml de una solución de Acido
de los Métodos Internacionales de Análisis”. O. I. V., L(+)-Tartárico de 5 g/l, neutralizada hasta la mitad
número 245, 1967. con solución de Potasio Hidróxido y encabezada
hasta 10° de Etanol 96% v/v PA.
35. INDICE DE PERMANGANATO
35.5. Cálculo.
35.1. Principio. Calcular el índice de permanganato o el título de
Valoración con una solución de permanganato materias oxidables en frío del vino por permangana-
del poder reductor en frío de las sustancias polife- to expresado en meq/l.
nólicas del vino. Como todos los componentes
fenólicos del vino, a igual concentración no reducen Indice de permanganato = 5 (V-V’).
la misma cantidad de permanganato, se trata de
una valoración global que da un índice, al que se Materias oxidables en frío = 5 (V-V’) meq/l.
denomina “índice de permanganato”; I Mn.
Constituye una expresión del contenido en sus- V = volumen en ml de solución de potasio per-
tancias fenólicas que están en relación con los manganato 0,01N para oxidar el vino.
caracteres gustativos de dureza, astringencia o 67
aterciopelado sin que la relación sea absoluta. Es V’ = volumen en ml de solución de potasio per-
una determinación especial para vinos tintos; en manganato 0,01N gastados en la prueba testigo.
blancos es poco apreciable y se presta a confusio-
nes por consumo de permanganato por otros com- 35.6. Referencia.
ponentes del vino, que aquí tiene una influencia 35.6.1. Ribereau-Gayon et Peynaud. “Analyse et
relativa más marcada. Contrôle des Vins”. página 320, 1958.
36(a). DETERMINACION DE PRESENCIA 36(b). DETERMINACION DE PRESENCIA
DE VINO PROCEDENTE DE DE VINO PROCEDENTE DE
“HIBRIDOS PRODUCTORES “HIBRIDOS PRODUCTORES
DIRECTOS” DIRECTOS”
(Método cualitativo) (Provisional)

36(b).1. Principio.
36(a).1. Principio. Determinación de malvina en vinos tintos secos
Transformación de la malvina, por la acción con- por cromatografía de papel. La fase móvil es la
trolada de un oxidante apropiado, en una sustancia solución Britten-Robinson, en las condiciones del
que a la luz de Wood acusa viva fluorescencia de método. Observación del cromatograma a la luz de
color verde muy sensible. Wood de 366 nm.
36(a).2. Material y aparatos. Como escala de comparación se emplea una
36(a).2.1. Lámpara que emita luz fluorescente serie de manchas de soluciones de pinacianol, que
de 366 nm de longitud de onda (luz de Wood). da fluorescencia similar a la de la malvina, aunque
36(a).2.2. Tubos de ensayo. con coloración verdosa en vez de la roja ladrillo de
la malvina, pero con intensidades de la fluorescen-
36(a).3. Reactivos. cia proporcionales a las dosis aplicadas, haciendo
181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV comparativos los resultados.
131074 Agua PA-ACS
Amoníaco (gas) 36(b).2. Material y aparatos.
121085 Etanol 96% v/v PA 36(b).2.1. Fuente de luz de Wood (366 nm).
131703 Sodio Nitrito PA-ACS 36(b).2.2. Cámara o campana para cromatogra-
fía y accesorios (soporte, pinzas, etc.).
36(a).3.1. Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV. 36(b).2.3. Papel Arches para cromatografía.
36(a).3.2. Sodio Nitrito al 1%. Disolver Sodio
Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS y ajustar a la con- 36(b).3. Reactivos.
centración indicada. 131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
36(a).3.3. Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amo- 131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO
níaco (gas) 131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
36(a).4. Procedimiento. 121085 Etanol 96% v/v PA
36(a).4.1. Vinos tintos.- Para vinos tintos intro- Pinacianol o Azul de Quinaldina
ducir en el tubo de ensayo: 1 ml de vino, una gota (Yoduro de 1,1’-Dietilcarbocianina)
de Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV, y 1 ml de 131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
Sodio
Nitrito al 1%. Agitar y esperar dos minutos, después 36(b).3.1. Solución Britten-Robinson. Mezclar
añadir 6 ml de Etanol 96% v/v PA con el 5% de 3,92 g de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO,
Amoníaco (gas). Agitar, esperar cinco minutos, filtrar 2,40 g de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y
y observar el filtrado a la luz de Wood. Si hay malvi- 4,48 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO y añadir Agua
na se apreciará la fluorescencia color verde. PA-ACS hasta 1.000 ml. El pH de esta solución es
36(a).4.2. Vinos rosados o claretes.- Introducir 1,81.
en el tubo de ensayo 5 ml de vino, cinco gotas de 36(b).3.2. Pinacianol o Azul de Quinaldina (Yodu-
Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV y 1 ml de Sodio ro de 1,1’-Dietilcarbocianina).
Nitrito al 1%. 36(b).3.3. Etanol 96% v/v PA neutro. Destilar
Agitar, esperar dos minutos y añadir después Etanol 96%v/v PA rectificado en presenia de Sodio
Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amoníaco (gas). Hidróxido lentejas PA (5 g/l).
Agitar y observar a la luz de Wood (366 nm).
36(b).4. Procedimiento.
36(a).5. Cálculo. Hacer aplicaciones con micropipeta de 50 ul de
La intensidad de la fluorescencia verde es muy vino cada una, sobre papel a 2 cm del borde infe-
sensible y puede acusar netamente la presencia de rior, de tal forma que aparezcan manchas rectangu-
68 una dosis de 0,2% de híbrido Oberlein en el vino, lares de 2 cm de base por 0,5 cm de los bordes.
siendo la tolerancia admitida hasta un 2% de rique- Aplicar 12 gotas de 4 ul en cada punto, secando
za de híbrido Oberlein. cada vez con corriente de aire a temperatura no
superior a 30°.
36(a).6. Referencia. Llenar la cubeta hasta una altura de 2 cm con la
36(a).6.1. Ribereau-Gayon, J.; Peynaud, E. solución Britten-Robinson. Sumergir el papel sólo
“Analyse et Contrôle des Vins”, pág. 320, 1958. 1 cm y retirarlo cuando el líquido llegue a 1 cm del
M
borde superior. Ayudar a la desecación con corrien- 36(b).6. Referencias.
te de aire no superior a 30° y terminar la desecación 36(b).6.1. Dorier y Verelle. “Comunication a la
al ambiente. Société des Experts-Chemistes de France”. 6 enero
Para obtener una escala patrón preparar una 1965.
soIución en Etanol 96% v/v PA neutro de Pinacianol
o Azul de Quinaldina (Yoduro de 1,1’-Dietilcar- 36(b).6.2. Recueil des Méthodes Internationales
bocianina) de 0,5 g/l y diluir a 1/10. Tomar alí- d’Analyse des Vins. O. I. V. A18, 1-4, 1969.
cuotas de 0,3; 0,4; 0,6; 0,8; 1,2; 1,7; 2,4; 3,5 y 5 ml
y completar con Etanol 96% v/v PA hasta 5 ml. A
37. METANOL
estas mezclas les corresponde un contenido con-
(Alcohol Metílíco)
vencional de híbrido de 3; 4; 6; 8; 12; 17; 24; 35 y
(Método del ácido cromotrópico)
50%, respectivamente.
Aplicar cada una de estas mezclas como ante- 37.1. Principio.
riormente. Secar las manchas, recortar y pegar Oxidación del alcohol metílico a formaldehído
mediante una cola celulósica (aplicar en pequeñas por potasio permanganato en presencia de ácido
dosis para que no desborde) a lo largo del borde de fosfórico y medida espectrofotométrica de la reac-
una tira de cartulina negra. ción coloreada del formaldehído con ácido cromo-
Renovar la escala cada 30 o 45 días, pues pier- trópico. Coloración violeta específica del formal-
de intensidad, por lo que hay que conservarla al dehído.
abrigo de la luz.
Observar las manchas del cromatograma a la luz 37.2. Material y aparatos.
de Wood (366 nm) en cámara oscura y hacer rápi- 37.2.1. Matraces aforados de 50 ml.
damente la comparación con la escala. 37.2.2. Baño de agua con regulación a 60-75°.
Para comprobar la eficacia de la lámpara se 37.2.3. Espectrofotómetro que permita lectura a
hace el siguiente ensayo: Lavar por capilaridad con 575 nm.
Etanol 96% v/v PA el papel Arches de cromatogra- 37.2.4. Matraz esférico de cuello largo, de
fía. Aplicar solución alcohólica de Pinacianol de 500 ml y refrigerante con alargadera.
1 mg/l en cantidad tal que la mancha sea visible y la
misma cantidad diluida a la mitad de una mancha 37.3. Reactivos.
no visible en las mismas condiciones de observa- 171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica
ción. Regular la distancia de la lámpara a la hoja 2-hidrato RE
para conseguir este efecto. 131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
36(b).5. Cálculo. 131074 Agua PA-ACS
Si al observar el cromatograma del vino a la luz 121085 Etanol 96% v/v PA
de Wood en las condiciones expuestas se aprecian 131091 Metanol PA-ACS-ISO
manchas de color rojo ladrillo y fluorescentes de un 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
Rf = 0,55 ± 0,09 será clara manifestación de pre- 131698 Sodio Disulfito PA-ACS
sencia de malvina. 141717 Sodio Sulfito anhidro PRS
Para el análisis cuantitativo, comparar con la
escala patrón. 37.3.1. Solución de Potasio Permanganato.
La intensidad del color de cada mancha de la Disolver 3 g de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
escala testigo de solución de pinacianol será valora- y 15 ml de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
da por el número de mg de pinacianol por litro de en 100 ml de Agua PA-ACS. Preparar mensual-
solución alcohólica con que se ha hecho la mancha mente.
sobre el papel. 37.3.2. Solución de Acido Cromotrópico Sal
Con esta definición convencional de la intensi- Disódica 2-hidrato. Solución al 5%. Filtrar si no que-
dad del color de las manchas puede establecerse da clara. Preparar semanalmente.
también, por comparación de estas manchas con 37.3.3. Solución al 2% p/v de Sodio Sulfito anhi-
las correspondientes a las de cromatogramas de dro PRS.
vinos con mezcla conocida de “híbrido”, un coefi-
ciente proporcional a la riqueza de éste presente en 37.4. Procedimiento.
los mismos. Diluir o ajustar la muestra hasta una concen- 69
La sensibilidad de las manchas pueden acusar tración total de alcohol de 5-6% en volumen.
el 1% de híbrido Oberlein (elegido como patrón). Utilizando 50 ml de muestra, destilar en destila-
La dosis correspondiente al valor 2 de la escala dor simple, recogiendo 40 ml de destilado en
convencional, o sea el 2% de híbrido Oberlein, es la baño de hielo. Diluir hasta 50 ml con Agua PA-
máxima tolerada provisionalmente por la Conven- ACS (si se ha determinado previamente el alcohol,
ción Internacional. el destilado puede ajustarse a 5-6% de concentra-
ción de alcohol y utilizarse para esta prueba). Si hay 38. NITROGENO
más de 0,05% de metanol por volumen, diluir hasta (Método Kjeldhal)
aproximadamente esa concentración con Etanol
96% v/v PA previamente diluido al 5,5% con Agua 38.1. Principio.
PA-ACS. Para muestras que contengan menos de Transformación del nitrógeno orgánico en amo-
0,05% de metanol, poner 200 ml de destilador efi- nio sulfato por ataque con ácido sulfúrico en ebulli-
ciente de fraccionamiento, colocar el sistema de ción en presencia de sustancias catalizadoras que
destilación reflujo total durante 15 minutos y luego acortan el tiempo de la mineralización y adición de
destilar lentamente a elevada proporción de reflujo sal potásica que eleve el punto de ebullición. Desti-
(por lo menos 20:1). Recoger 10 ml de destilado y lación por ebullición de vapor recogiendo el destila-
diluir hasta 160 ml con Agua PA-ACS. do en volumen conocido de solución de ácido sul-
Pipetear 2 ml de solución de Potasio Perman- fúrico.
ganato en un matraz aforado de 50 ml. Enfriar en Valoración con solución de sodio tiosulfato, del
baño de hielo, añadir 1 ml de muestra diluida y fría y yodo liberado por el ácido sulfúrico al añadir al
dejar 30 minutos en baño de hielo. Decolorar con un destilado solución de potasio yoduro-potasio
poco de Sodio Disulfito PA-ACS seco (*) y añadir yodato.
1 ml de solución de Acido Cromotrópico. Añadir len-
tamente con agitado y en baño de hielo 15 ml de 38.2. Material y aparatos.
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y colocar 15 minutos 38.2.1. Aparato micro-Kjeldhal.
en baño de agua caliente (60-75°). Enfriar, añadir
una cantidad suficiente de Agua PA-ACS para llevar 38.3. Reactivos.
aproximadamente a la marca de 50 ml, mezclar y 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
diluir hasta volumen con Agua PA-ACS a la tempera- 182102 Acido Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV
tura ambiente. Leer la absorbancia a 575 nm utili- 131074 Agua PA-ACS
zando como reactivo en blanco Etanol al 5,5% trata- 171096 Almidón soluble RE
do análogamente a la forma descrita. Tratar solución 122726 Cobre II Sulfato anhidro PA
patrón de Metanol PA-ACS-ISO, que contenga 171327 Fenolftaleína solución 1% RE
0,025% por volumen de Metanol PA-ACS-ISO, en Papel Tornasol
Etanol al 5,5% simultáneamente en la misma forma, 131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO
y leer la absorbancia (la temperatura del patrón y de 131540 Potasio Yodato PA-ISO
la muestra no debe diferir en más de 1°, ya que la 131542 Potasio Yoduro PA-ISO
temperatura afecta a la intensidad del color). 141625 Selenio metal, polvo PRS
182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
37.5. Cálculo. 181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV
Calcular el contenido en metanol expresado en
porcentaje. 38.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
A 38.3.2. Catalizador de Selenio. Mezclar bien pul-
Metanol = 0,025 —— F verizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO,
A’ 20 g de Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio
A = absorbancia de la muestra. metal, polvo PRS.
38.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y Papel
A’ = absorbancia de la solución patrón de metanol. Tornasol.
38.3.4. Acido Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV.
F = factor de dilución de la muestra. 38.3.5. Potasio Yoduro solución al 4%. Disolver
Potasio Yoduro PA en Agua PA-ACS y ajustar a la
37.6. Observaciones. concentración indicada.
Si el color de la muestra es demasiado intenso, 38.3.6. Potasio Yodato solución al 5%. Disolver
diluir con reactivo en blanco. No diluir más de tres Potasio Yodato PA-ISO en Agua PA-ACS y ajustar a
veces porque la relación de ácido cromotrópico a la concentración indicada.
metanol se reduce demasiado. 38.3.7. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N. En
un matraz aforado diluir a 1:5 Sodio Tiosulfato 0,1
37.7. Referencia. mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el
70 37.7.1. “Association of Official Agricultural Che-
mists”. Official Methods of Analysis, pág.138, 1965.
factor de la solución 0,02N obtenida.
38.3.8. Solución concentrada de Almidón solu-
ble RE.
(*). En el original indica NaHSO3 seco. El Sodio 38.4. Procedimiento.
Bisulfito como tal fórmula sólo existe en solución Poner en el matraz Kjeldhal 50 ml de vino, eva-
acuosa y por tanto debe entenderse Sodio Disulfito, porar a ebullición lenta hasta unos 10 ml, añadir
seco, de fórmula Na2S2O5. 10 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 0,6 g de
M
la mezcla pulverizada y bien uniformada de Cobre 39(a). FLUOR
II Sulfato anhidro PA, Selenio metal, polvo PRS y (Provisional)
Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, continuar calentan-
do primero lentamente y después enérgicamente, 39(a).1. Principio.
hasta decoloración, y proseguir unos minutos Incineración de 525° del vino en presencia de un
más. Si es necesario se van añadiendo nuevas exceso de calcio o magnesio, destilación en
dosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO de 5 en corriente de vapor del ácido fluorhídrico a 135-
5 ml. 140°, valoración del ácido destilado a pH 3,6 por
Enfriar, pasar el contenido a matraz aforado de solución de torio nitrato en presencia de alizarina
100 ml arrastrando el residuo con pequeñas porcio- sodio suifonato.
nes de Agua PA-ACS para enjuagar varias veces el
matraz, comprobando que los últimos lavados no 39(a).2. Material y aparatos.
dan trazas de reacción ácida al papel de tornasol. 39(a).2.1. Aparato de Truhaut, que consta de
Tomar una alícuota de 20 ml y llevar al matraz generador de vapor, barbotador de pared doble,
del aparato de destilación, adicionando unas gotas ampolla para la introducción de la solución sulfúrica
de Fenolftaleína solución 1% RE. En un vaso cilín- de las cenizas magnéticas, refrigerante de retorno y
drico de unos 200 ml, se añaden 10 ml de Acido refrigerante de West para la salida del destilado
Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV. (figura 39.I.).
Añadir al matraz solución de Sodio Hidróxido 1 39(a).2.2. Cápsula de platino o níquel para las
mol/l (1N) SV (4%) en cantidad suficiente para viraje cenizas.
de la Fenolftaleína solución 1% RE y se encaja rápi- 39(a).2.3. Horno eléctrico regulable para 525°.
damente en su sitio. Conectar el aparato de destila- 39(a).2.4. Matraz de 250 ml.
ción con el generador de vapor de agua y comen- 39(a).2.5. Dos cápsulas de porcelana iguales, de
zará el arrastre del amoníaco pasando al unos 10 cm de diámetro.
refrigerante y recogiendo el destilado en la Solución 39(a).2.6. Material para volumetría.
Sulfúrica.
Después de 15-20 minutos, comprobar con 39(a).3. Reactivos.
papel tornasol si una gota del destilado no acusa 181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
reacción alcalina. En este caso separar el vaso y
171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica
proceder a la valoración.
2-hidrato RE
Añadir al vaso con el Acido Sulfúrico 0,01 mol/l
131057 Acido Sulfanílico PA-ACS
(0,02N) SV 4 ml de Potasio Yoduro al 4% y 2 ml de
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Potasio Yodato al 5%. Mezclar con una varilla y
131074 Agua PA-ACS
después de 20 minutos valorar el yodo liberado
171168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RE
con solución de Sodio Tiosulfato 0,02N emplean-
211376 Lana de Vidrio lavada QP
do como indicador 5-10 ml de solución de Almi-
131394 Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS
dón.
211276 Magnesio Oxido QP
38.5. Cálculo. 141801 Plata Sulfato PRS
Calcular el nitrógeno expresado en meq/l o en 171634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE
mg/l. 181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
10 - V Tetracloroetano
Nitrógeno = ——— x 100 meq/l Torio Nitrato 4-hidrato
50
39(a).3.1. Solución Tampón de pH = 3,1. Mez-
10 - V clar 100 ml de Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE,
Nitrógeno = ——— x 100 x 14 mg/l 303 ml de Agua PA-ACS y 97 ml de Acido Clorhídri-
50 co 1 mol/l (1N) SV.
39(a).3.2. Solución de Torio Nitrato 0,01N. Disol-
V = volumen en ml de solución de sodio tiosulfa- ver 1,3806 g de Torio Nitrato 4-hidrato, en un litro
to 0,02N. de Agua PA-ACS.
39(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.
39(a).3.4. Acido Sulfúrico al 1/10. Diluir conve-
nientemente Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua
71
PA-ACS.
39(a).3.5. Azul de Bromotimol solución 0,04%
RE.
39(a).3.6. Magnesio Oxido al 1/10. Suspensión
de Magnesio Oxido QP en Agua PA-ACS.
39(a).3.7. Magnesio Acetato al 1/10. Disolver PA-ISO diluido al 50% en Agua PA-ACS, 0,5 g de
Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS en Agua PA- Lana de Vidrio lavada QP y 0,5 g de Plata Sulfato
ACS. PRS, con el fin de retener el Acido Clorhídrico. Lle-
39(a).3.8. Solución Spadns. Añadir a 0,02 g de var el barbotador a 146°C por ebullición del Tetra-
Spadns, Agua PA-ACS hasta 100 ml. El Spadns cloroetano (punto de ebullición 146°) en la doble
resulta de la combinación del Acido Sulfanílico PA- pared (A) y forzar la corriente de vapor de agua a la
ACS con el Acido Cromotrópico Sal Disódica velocidad de 5 g por minuto. Conviene calentar pre-
2-hidrato RE. Su proceso de preparación es labo- viamente el Tetracloroetano en la doble pared del
rioso. Se encuentra preparado por Eastman-Kodak. aparato antes de que barbote el vapor en el líquido,
39(a).3.9. Plata Sulfato PRS. por haberse observado que así se evitan la forma-
ción de burbujas de espuma, que son un peligro
39(a).4. Procedimiento. por posible desborde y paso al refrigerante de sali-
39(a).4.1. Incineración.- Poner 20 ml de vino en da.
cápsula de platino o de níquel, añadir 2 ml de sus- Se continúa la destilación hasta recoger unos
pensión de Magnesio Oxido al 1/10 y 4 ml de Mag- 100 ml de destilado.
nesio Acetato al 1/10. Evaporar, desecar y calcinar Con estas operaciones queda el aparato des-
en el horno a 550°C. provisto de posible presencia de flúor.
39(a).4.2. Destilación.- Colocar en el barbotador Disolver las cenizas en el menor volumen posible
del aparato Truhaut 20 ml de Acido Sulfúrico 96% de Acido Sulfúrico al 1/10 e introducir en el barbota-

REFRIGERANTE DE BOLAS
DE REFUERZO 30 CM.
BOCAS 14 / 23
REFRIGERANTE LIEBIG-WEST
40 cm, BOCAS 14/23

Figura 39.I. Aparato de Truhaut

72 El barbotador (C) tiene una pared doble (A) donde se hierve el tetracloroetano a 146°. El tubo de entrada de
vapor de agua rodea (E) la pared interna y penetra en su interior, prolongándose verticalmente hasta casi el fondo.
El refrigerante de retorno para condensar los vapores de tetracloroetano se conecta en (B).
La ampolla (F), con llave y tapón esmerilado, se ajusta a la boca del barbotador y el tubo penetra hasta la
misma altura que el punto de entrada del tubo de vapor de agua. La salida del destilado comunica con refri-
gerante de West, vertical que se prolonga por alargadera tubular cuyo pico se sumerge en el agua que con-
tiene el matraz receptor.
M
dor, enfriando previamente el líquido del barbotador 39(b).2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.
antes de verter en él la solución sulfúrica de ceni- 39(b).2.5. Recipientes de plástico de 50-100 ml
zas. Proseguir la destilación con el barboteo de de capacidad para mezclas y matraces en material
vapor, comenzando por calentar previamente, de plástico para conservar las soluciones patrón.
como se ha indicado, el Tetracloroetano contenido 39(b).2.6. Pipetas de precisión graduadas en
en la doble pared. Recoger unos 100 ml de destila- microlitros.
do en un matraz de 250 ml que contenga 5 ml de 39(b).2.7. Agitador magnético.
Agua PA-ACS, de forma que quede sumergido el
pico de la alargadera del refrigerante. 39(b).3. Reactivos.
39(a).4.3. Valoración.- Descarbonatar el destila- 131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
do por agitación en frío y con vacío neutralizar con 131074 Agua PA-ACS
Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV en presencia de 131675 Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO
Azul de Bromotimol solución 0,04% RE como indi-
cador. Llevar después a una cápsula de porcelana 39(b).3.1. Solución patrón de fluoruros 10–2M

blanca bien limpia, siendo recomendable frotar pre- conteniendo 190 mg de F por litro. Pesar 0,4198 g
viamente su interior con pasta silícea y enjuagarla de Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO (desecado durante
con Agua PA-ACS. cuatro horas a 106°C antes de su utilización), disol-
Añadir a 50 ml del destilado 1 ml de solución ver y enrasar a un volumen de 1.000 ml.
acuosa de Spadns y 1 ml de Solución Tampón de 39(b).3.2. Solución Tampón de Acido orto-Fos-
pH = 3,1. Añadir con microbureta solución de Torio fórico 0,75 M. Diluir convenientemente Acido orto-
Nitrato 0,01N hasta viraje a rojo violeta. Fosfórico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
Para apreciar el punto del viraje se compara la
tonalidad del color con la de una valoración testigo 39(b).4. Procedimiento.
hecha en otra cápsula igual y con el mismo volumen 39(b).4.1. Verificación del electrodo y determina-
de Solución Tampón, 1 ml de Spadns y 0,05 ml de ción de su pendiente.
solución de Torio Nitrato. Se ha observado que con A partir de la solución 3.1 preparar, mediante
0,1 ml de Torio Nitrato es más clara la comparación diluciones, soluciones de concentraciones conoci-
de colores. dasde 10–3M, 10–4M y 10–5M, que contienen, res-
Restar del volumen de Torio Nitrato gastado en pectivamente, 19; 1,9 y 0,19 mg de F – por litro.
el líquido problema los 0,05 y 0,1 ml añadidos al Tomar dos vasos de precipitados; en uno de

testigo. ellos colocar 25 ml de la disolución 10–3M de F ,
adicionar 5 ml de solución Tampón de Acido orto-
39(a).5. Cálculo. Fosfórico y determinar su potencial agitando de
Equivalencia: 1 ml de solución de torio nitrato forma moderada mientras dure la medida. En el otro

0,01N < > 0,19 mg de flúor. vaso, poner 25 ml de disolución 10–4M de F , 5 ml
Expresar los resultados en mg de flúor por litro y de solución Tampón de Acido orto-Fosfórico y
con una aproximación de unos 0,5 mg. determinar su potencial, agitando como anterior-
mente. La diferencia entre los dos potenciales es la
39(a).6. Referencia. pendiente del electrodo (S) y cuyo valor debe ser,
39(a).6.1. Fabré, R.; Trumant, A.; Bouquet, A., y aproximadamente, 59 mV.
Bernuchon, J. (1960-1965), Cont. Rendu Aca. 39(b).4.2. Determinación.
Sciences.1965, 240, pág. 211; 1959, 248, pág. Tomar 25 ml de vino, adicionar 5 ml de la solu-
504. ción Tampón y determinar su potencial (E1). A conti-
nuación, y en el mismo vaso, adicionar un ml de

disolución 10–3M de F y determinar su potencial (E2)
39(b). FLUOR Si el salto de potencial es pequeño, indica que la

concentración de F es muy alta y hay que diluir la
39(b).1. Principio. muestra hasta que el salto alcanzado esté com-
Determinación directa del flúor total por poten- prendido alrededor de 20-40 mV.
ciometría utilizando un electrodo iónico específico. Los volúmenes de muestra y solución Tampón
Para eliminar las posibles causas de error se le pueden ser modificados en función de la forma y
adiciona al vino una solución tampón. disposición de los electrodos utilizados.
73
39(b).2. Material y aparatos. 39(b).5. Cálculo.
39(b).2.1. pH-metro con escala que permita La cantidad de flúor, expresada en mg/l, nos
apreciar 0,1 mV. viene determinada por la fórmula:
39(b).2.2. Electrodo selectivo de flúor.
39(b).2.3. Electrodo de referencia de calomela-
nos.
V.C 131090 2-Propanol PA-ACS-ISO
CF- = ——————————— 132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
mE de BHT PA-ACS-ISO
25 [(antilog —— ) - 1] 162378 P-Toluidina PS
S
Siendo: 40.3.1. Reactivo de p-Toluidina. Disolver 10 g de

CF- = concentración, en mg/l, de F en el medio. p-Toluidina PS en 50 ml de 2-Propanol PA-ACS-
V = volumen, en ml, de solución patrón de fluo- ISO. Llevar a matraz aforado de 100 ml, añadir
ruro añadida. 10 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y com-
C = concentración, en mg/l, de la solución pletar hasta el enrase con 2-Propanol PA-ACS-ISO.
patrón adicionada. Este reactivo dura 4 días.
S = pendiente del electrodo. 40.3.2. Reactivo de Acido Barbitúrico. Se intro-
m E = diferencia de los potenciales E1 y E2 obte- duce en matraz aforado de 100 ml, 0,5 g de Acido
nidos en 39(b).4.2. Barbitúrico desecado a 105°C y unos 70 ml de
Este valor se deberá multiplicar por el factor de Agua PA-ACS. Se calienta ligeramente en baño de
dilución correspondiente, en caso de haber sido ne- agua, se enfría y enrasa con Agua PA-ACS.
cesario efectuarla.
40.4. Procedimiento.
39(b).6. Observaciones. Llevar 10 ml del vino a embudo de decantación
39(b).6.1. Todas las soluciones deben conservar y añadir 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
una temperatura próxima a 25°C ±1°C durante la ppm de BHT PA-ACS-ISO. Agitar durante 3 minu-
medida . tos, decantar el Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO a cápsula de porcelana
39(b).7. Referencias. que contenga 2 ml de Agua PA-ACS, repetir cuatro
39(b).7.1. H. E. Haller y C. H. Junge, 1974, O. I. veces la extracción del residuo del embudo con
V. 317/FV/518 y 133/FV/439. otros 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
39(b).7.2. Deschreider, A., y Mme. R. Meaux, ppm de BHT PA-ACS-ISO cada vez y decantar
1974. Determination des fluor dans les vins et eaux igualmente a la cápsula. Dejar evaporar el éter en
minerales naturelles au moyen d’une electrode ioni- medio ambiente. Al residuo de evaporación añadir
que specifique. Agua PA-ACS hasta 10 ml, agitar y tomar 2 ml para
análisis.
40. HIDROXIMETILFURFURAL Mezclar los 2 ml tomados con 5 ml de Reactivo
(Provisional) de p-Toluidina y un 1 ml de Acido Barbitúrico lle-
vándolos inmediatamente a la cubeta del espectro-
40.1. Principio. fotómetro (de un cm de espesor del líquido) y hacer
El hidroximetilfurfural se produce al calentar en rápidamente la lectura de la absorbancia a 546 nm.
exceso los mostos para su concentración, desulfita- Emplear como líquido de referencia el Agua
ción o pasterización. La presencia de hidroximetil- PA-ACS en lugar de Acido Barbitúrico, o sea, 3 ml
furfural en ciertos vinos dulces se considera como de Agua PA-ACS más 5 ml de Reactivo de p-Tolui-
indicio de la adición de mostos. dina.
Este método está basado en la reacción de
Winckler (formación de un complejo rojo para la 40.5. Cálculo.
acción del hidroximetilfurfural sobre la p-toluidina y Determinar el contenido en hidroximetilfurfural
ácido barbitúrico). Se utiliza para los vinos blancos y expresado en mg/l por comparación con la corres-
tintos, previa extracción con éter etílico en los pondiente curva patrón teniendo en cuenta el factor
segundos. de dilución.

40.2. Material y aparatos. 40.6. Observaciones.


40.2.1. Espectrofotómetro y accesorios (cubeta En el caso de vinos turbios centrifugar previa-
para 1 cm de espesor del líquido). mente. Si hay presencia de CO2 eliminarlo agitando
40.2.2. Matraces aforados. el vino en un matraz.
40.2.3. Embudo de decantación con tapón
74 esmerilado y de 100 ml de capacidad. 40.7. Referencias.
40.2.4. Cápsula de porcelana de unos 10 cm de 40.7.1. Sandoval, J. A.; Hidalgo, T. “Puesta a
diámetro. punto de un método para análisis cuantitativo
espectrofotométrico de hidroximetilfurfural en los
40.3. Reactivos. vinos”. Boletín I. N. I. A., 16: 4. 454-469,1967.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO 40.7.2. Amerine, M. A. “Hydroximethyl-furfural in
Acido Barbitúrico California Wines”. Food Research. 13: 264-269, 1948.
M
41. DETERMINACION CUALITATIVA DE 131500 Potasio Dicromato PA-ISO
ACIDO SORBICO, BENZOICO, Revelador F 254
p-CLOROBENZOICO, SALICILICO, 131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS
p-HIDROXIBENZOICO Y SU 131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO
ESTER ETILICO 182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
131703 Sodio Nitrito PA-ACS
41.1. Principio. 131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
Extracción con éter etílico de los antisépticos del vino 131091 Metanol PA-ACS-ISO
previamente acidificados. Separación por cromato-
grafía de capa fina. Identificación a la luz ultravioleta y 41.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
reveladores específicos. de BHT PA-ACS-ISO.
41.3.2. Metanol PA-ACS-ISO.
41.2. Material y aparatos. 41.3.3. Etanol 96% v/v PA
41.2.1. Extractor en continua de Palkin (figura 41.I) 41.3.4. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO diluido a
que comporta un tubo A de 55 cm de longitud y 3,8 20% (v/v) con Agua PA-ACS.
cm de diámetro. La parte superior va unida a un refri- 41.3.5. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO.
gerante de bolas mediante boca esmerilada 34-25. A 41.3.6. Polvo de Poliamida para cromatografía
30 cm de la base y formando un ángulo de 60º se Macherey-Nagel o Merck.
encuentra un tubo lateral acodado a los 13 cm, for- 41.3.7. Revelador F 254 Merck o equivalente.
mando un ángulo de 120°. Este tubo lateral termina 41.3.8. Solventes:
en una junta esmerilada 24/40 en bisel, lo que permi- n-Pentano PA: 10 partes.
te su unión a un matraz de 50 ml que se calienta n-Hexano PA-ACS: 10 partes.
sobre una placa. En el tubo A se introducen bolitas de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO: 3 partes.
vidrio y el tubo interior (B) de 48,5 cm de longitud y 41.3.9. Soluciones patrones. Preparar solucio-
1,2 cm de diámetro, terminando en una placa de nes de 0,1 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA con
vidrio poroso. los Acidos Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX, p-Cloro-
41.2.2. Agitador mecánico (ver 41.6.1). benzoico, Salicílico (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,
41.2.3. Erlenmeyer de 500 ml de boca esmerilada. 4-Hidroxibenzoico PS y sus ésteres. Preparar una
41.2.4. Baño María. solución de 0,2 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA
41.2.5. Estufa eléctrica (200º C). con el Acido Benzoico PA.
41.2.6. Embudos de separación de 500 ml. 41.3.10. Preparación de las placas. 10 g de
41.2.7. Cápsulas de porcelana de 70-80 cm de Poliamida con el 3% de indicador fluorescente se
diámetro. homogenizan durante 20 segundos en agitador
41.2.8. Equipo de cromatografía de capa fina. mecánico con 35 ml de Metanol PA-ACS-ISO y
41.2.9. Placas de vidrio de 20 x 20 cm. 25 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-
ACS-ISO. Las placas impregnadas se secan duran-
41.3. Reactivos. te 1 hora a 80°C.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO 41.3.11. Solución hidroalcohólica conteniendo
121014 Acido Benzoico PA 0,15 g por 100 de Potasio Dicromato PA-ISO
182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV (41.6.2).
Acido p-Clorobenzoico 41.3.12. Solución saturada de Acido Tiobarbitú-
163231 Acido 4-Hidroxibenzoico PS rico en Etanol 96% v/v PA (0,1% aproximadamente)
141045 Acido Salicílico (USP, BP, F. Eur.) (41.6.2).
PRS-CODEX 41.3.13. Solución de 0,5 g de 4-Nitroanilina en
141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX 100 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV (41.6.3).
131057 Acido Sulfanílico PA-ACS 41.3.14. Solución de Sodio Nitrito al 5% (41.6.3).
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO Disolver Sodio Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS.
Acido Tiobarbitúrico 41.3.15. Solución de Sodio Acetato al 20%
131074 Agua PA-ACS (41.6.3). Disolver Sodio Acetato anhidro PA-ACS en
121086 Etanol absoluto PA Agua PA-ACS.
121085 Etanol 96% v/v PA 41.3.16. Solución de Sodio Carbonato al 15%
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm (41.6.3). Disolver Sodio Carbonato 10-hidrato PA-
BHT PA-ACS-ISO ISO en Agua PA-ACS. 75
132063 n-Hexano PA-ACS 41.3.17. Reactivo de Pauly. Disolver 4,5 g de
131252 Triclorometano estabilizado con etanol Acido Sulfanílico PA-ACS en 45 ml de Acido Clorhí-
PA-ACS-ISO drico 2 mol/l (2N) SV (calentando, diluir la solución a
164542 4-Nitroanilina PS 500 ml en Agua PA-ACS, 10 ml de la solución dilui-
122006 n-Pentano PA da se enfrían con hielo), se le añaden 10 ml de solu-
Polvo de Poliamida para Cromatografía ción acuosa de Sodio Nitrito al 4,5% también fría. El
reactivo resultante se mantiene durante 15 minutos Extraer tres veces con 20 ml de Eter Dietílico
a 0°C (a esta temperatura es estable de 1 a 3 días) estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO
y se le añade un volumen igual de solución acuosa cada vez, reuniendo las soluciones etéreas; o bien,
de Sodio Carbonato al 10% en el momento de pul- durante 6 horas en el extractor continuo de Palkin
verizar las placas (41.6.4). con 175 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO a una velocidad de reflu-
41.4. Procedimiento. jo de 500-600 ml/hora.
Acidular 100 ml de vino o mosto con 10 ml de Los extractos etéreos se desecan con 6 g de
Acido Sulfúrico al 20%. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO durante 12
horas. Filtrar y el Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO se evapora a sequedad
en baño María 40-45°. El residuo se disuelve en un
ml Etanol absoluto PA tomando cantidades de 5 a
10 el para cromatografía. Mediante el tratamiento
de los extractos etéreos con 5 ml de Sodio Hidróxi-
do 2,5N (diluir a 1:1 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
con Agua PA-ACS) y acidulado de nuevo con 5 ml
de Acido Sulfúrico al 20% se obtendrá en los cro-
matogramas las manchas correspondientes a los
ácidos liberados por efecto de la saponificación.
Para obtener el desarrollo de los cromatogra-
mas, depositar la muestra en forma de manchas
puntuales de 5-10 el.
El desarrollo se lleva a cabo en cámara saturada
con el eluyente y a temperatura ambiente. Dejar
migrar el solvente hasta una altura de unos 15 cm
(una hora y media a dos horas y media).
Retirar la placa de la cubeta y dejar secar a la
temperatura ordinaria.

41.5. Cálculo.
Observación a la luz ultravioleta (360 nm).
Los conservadores aparecen de abajo arriba en
el siguiente orden: ácido 4-hidroxibenzoico, éste-
res del ácido 4-hidroxibenzoico, ácido salicílico,
ácido p-clorobenzoico, ácido benzoico y ácido
sórbico.
Para detectar el ácido sórbico pulverizar prime-
ramente el cromatograma con la solución 41.3.11 y
seguidamente con la 41.3.12. Calentar la placa a
80°C, 5-10 minutos. La mancha de ácido sórbico
aparece de color rojo sobre fondo ocre.
Para detectar los ácidos salicílico y 4-hidroxi-
benzoico y éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoi-
co, pulverizar la placa con una mezcla compues-
ta de 2 ml de 41.3.13 más 3-5 gotas de 41.3.14
más 8 ml de 41.3.15, añadiéndolos en este
orden. Una vez seca la placa aparecen las man-
chas correspondientes a los tres componentes
citados de color amarillo. La materia colorante
propia de los vinos toma colores que van del
amarillo al naranja. Pulverizar de nuevo con la
76 solución 41.3.16. La manchas del ácido 4-hidro-
xibenzoico toman color rojo; las del éster etílico
del ácido 4-hidroxibenzoico, color rosa, y las del
acido salicílico, amarillo limón. Los distintos com-
ponentes de la materia colorante toman colores
que van desde distintos tonos de ocre al pardo y
Figura 41.l. Extractor continuo de Palkin también verde y azulado.
M
Para detectar los ácidos 4-hidroxibenzoico y 42.2.11. Cápsulas de porcelana 70-80 mm Ø.
salicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoi- 42.2.12. Tubos de 150 x 15 mm con tapón
co se utiliza empleando el reactivo 41.3.17. esmerilado.
42.2.13. Tubos de 150 x 15 mm con llave infe-
41.6. Observaciones. rior.
41.6.1. Para el análisis cualitativo.
41.6.2. Para detectar el ácido sórbico. 42.3. Procedimiento.
41.6.3. Para detectar los ácidos salicílico y 4-hi- Introducir en un Erlenmeyer de 500 cc y boca
droxibenzoico y éster etílico del ácido 4-hidroxiben- esmerilada 100 ml de vino, 5 ml de Acido Sulfúrico
zoico. (1+5) y, agitando, 100 ml de Eter Dietílico estabiliza-
41.6.4. Para detectar los ácidos 4-hidroxibenzoi- do con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, continuando
co y salicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxi- en un agitador durante una hora.
benzoico. Separar en embudo de decantación y descartar
la capa inferior. Añadir 8-10 g de Sodio Sulfato anhi-
42. INVESTIGACION DE DERIVADOS dro PA-ACS-ISO al extracto éter, agitando vigorosa-
MONOHALOGENADOS DEL mente. Verter el éter en otro embudo de 500 ml,
ACIDO ACETICO agregando sucesivamente: 5,0, 2,5 y 2,5 ml de
Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV, agitando un
42.1. Principio. minuto cada vez y reuniendo las tres capas inferio-
Extracción de los derivados monohalogenados res alcalinas obtenidas en un tubo con tapón esme-
del ácido acético con éter etílico previamente acidi- rilado, en el cual se habrá vertido previamente 1 ml
ficado. Formación de tioindigo, de color rojo, que se de la solución de Acido Tiosalicílico. Agitar enérgi-
extrae con cloroformo. camente durante treinta segundos y transferir el
El método permite detectar de 1,5 a 2 mg/l de contenido del tubo a una cápsula de porcelana,
ácido monocloroacético y las cantidades corres- evaporando durante una hora en baño de agua
pondientes de otros derivados monohalogenados. (90-100°C), tiempo que habrá de respetarse aun
cuando el agua se evapore mucho antes.
42.2. Material, aparatos y reactivos. Si se formara una costra sobre la superficie, es
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conveniente romperla con una varilla fina de vidrio, lo
Acido Tiosalicílico que facilitará la evaporación. Pasado este tiempo,
131074 Agua PA-ACS llevar la cápsula con el residuo seco a la estufa man-
131252 Triclorometano estabilizado con etanol tenida a 200°C durante treinta minutos exactamen-
PA-ACS-ISO te, pasados los cuales se retira y se deja enfriar a la
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm temperatura ambiente. Añadir 2 ml de Agua PA-ACS
de BHT PA-ACS-ISO que disolverá la mayor parte del extracto y recoger
131503 Potasio Hexacianoferrato lll PA-ACS en un tubo con llave en su parte inferior; agregar
181692 Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV otros 2 ml de Agua PA-ACS para lavar la cápsula y,
182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV por último, 3 ml de solución de Potasio Ferricianuro,
131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO recogiendo todo ello con los primeros, agitando bien
el tubo durante treinta segundos para facilitar la oxi-
42.2.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm dación. Conviene asegurarse de que todo el residuo
de BHT PA-ACS-ISO. se disolvió bien en los 4 ml de Agua PA-ACS antes
42.2.2. Acido Sulfúrico (1 + 4) (v/v) . Diluir Acido de añadir la solución de Potasio Ferricianuro. En pre-
Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS. sencia de un derivado monohalogenado se desarro-
42.2.3. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO llará una coloración rojo-anaranjado (apenas percep-
desecado en estufa a 105°C. tible para contenidos inferiores a 0,1 mg). Agregar
42.2.4. Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV. 3 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-
42.2.5. Acido Tiosalicílico (2 Mercaptobenzoico) ACS-ISO; agitar alternativamente tres-cuatro veces y
al 3% (p/v) en Sodio Hidróxido 1,5N (diluir Sodio decantar. Si el extracto clorofórmico inferior se colo-
Hidróxido 2 mol/l (2N) SV con Agua PA-ACS y ajus- rea de rojo-fucsia o rosado, indica la presencia de
tar a la concentración indicada). derivados monohalogenados del ácido acético.
42.2.6. Potasio Ferricianuro al 2% (preparar
inmediatamente antes de usar). Disolver Potasio 42.4. Referencias. 77
Hexacianoferrato lll PA-ACS en Agua PA-ACS. 42.4.1. Recueil des Méthodes Internationales
42.2.7. Triclorometano estabilizado con etanol d’Analyse des Vins. O. I. V. A 35h.
PA-ACS-ISO. 42.4.2. Cabezuco, Gorostiza y Garrido: Determi-
42.2.8. Baño de agua. nación de derivados monohalogenados del ácido
42.2.9. Estufa eléctrica. acético. Instituto de Fermentaciones (1971, ATA,
42.2.10. Embudos de separación. vol. II, núm. 1, páginas 145-151).
43. GRADO ALCOHOLICO EN dos a tres horas; transcurrido dicho tiempo, secar a
POTENCIA temperatura ambiente.
45.2.3. Papel para cromatografía Whatman
43.1. Principio. número 1 o similar.
Es el volumen en litros de alcohol susceptible de 45.2.4. Erlenmeyer de 50 ml de capacidad.
obtenerse por fermentación total de los azúcares 45.2.5. Ampolla de decantación de 200 ml de
contenidos en 100 litros de vino. capacidad.

43.2. Material y aparatos. 45.3. Reactivos.


Como en 7(a).2 o 7(b).2. 131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
43.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS
Como en 7(a).3 o 7(b).3. 131082 1-Butanol PA-ACS-ISO
121085 Etanol 96% v/v PA
43.4. Procedimiento. 141101 Aluminio Sulfato 18-hidrato escoriforme
Como en 7(a) o 7(b). (BP, F. Eur.) PRS-CODEX
141128 Amoníaco 20% (en NH3) PRS
43.5. Cálculo. 132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
N-1 121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA
Grado alcohólico en potencia = ———— 131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
17 PA-ACS-ISO

donde: 45.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm


de BHT PA-ACS-ISO.
N = g/l de azúcares reductores de la muestra. 45.3.2. Sodio Hidróxido al 5%. Disolver Sodio
Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.
44. GRADO ALCOHOLICO TOTAL 45.3.3. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.
45.3.4. Acido Acético diluido, 1/18 (v/v). Diluir
44.1. Principio. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
Se considera el grado alcohólico total como la 45.3.5. Acido Clorhídrico diluido 1/10 (v/v). Diluir
suma del grado alcohólico adquirido determinado Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.
según 5(a) o 5(b), y del grado alcohólico potencial, 45.3.6. Amoníaco 20% (en NH3) PRS.
determinado según 43. 45.3.7. Solvente número 1 para cromatografía
de colorantes de carácter básico:
44.2. Cálculo. 1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 ml
Grado alcohólico total = Grado alcohólico adquirido + Etanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
+ Grado alcohólico potencial. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO . . . 10 ml
Agua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
45. COLORANTES SINTETICOS 45.3.8. Solvente número 2 para la cromatografía
de colorantes de carácter ácido:
45.1. Principio. 1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 ml
Concentración mediante ebullición, extracción Etanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
con éter etílico y fijación de colorantes sintéticos Amoníaco 20% (en NH3) . . . . . . . . . . 10 ml
básicos y ácidos sobre lana y posterior confirmación Agua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
por cromatografía en papel.
45.4. Procedimiento.
45.2. Material y aparatos. 45.4.1. Determinación de colorantes de carácter
45.2.1. Hebras de lana blanca previamente básico.
desengrasadas con Eter Dietílico estabilizado con Poner 200 ml de vino en un Erlenmeyer de 500 ml
p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. y llevar a ebullición hasta que el vino se reduzca a un
45.2.2. Hebras de lana blanca mordentadas. tercio de su volumen. Enfriar y neutralizar con la
78 Disolver 1 g de Aluminio Sulfato 18-hidrato escori- solución de Sodio Hidróxido al 5% hasta claro vira-
forme (BP, F. Eur.) PRS-CODEX y 1,2 g de Potasio je del color natural del vino. Extraer dos veces, con
Hidrógeno Tartrato PA en 500 ml de Agua PA-ACS. 30 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de
Introducir en esta solución 10 g de hebras de lana BHT PA-ACS-ISO cada vez, y juntar las dos fases
blanca, previamente desengrasadas con Eter Dietí- etéreas; en ellas se encuentran eventualmente los
lico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO colorantes básicos; el residuo de la extracción debe
y secas, agitar durante una hora y dejar reposar de ser conservado con objeto de investigar los colo-
M
rantes ácidos. Lavar dos veces el Eter Dietílico esta- fijado sobre la lana. A continuación, retirar la lana del
bilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO emplea- Erlenmeyer, llevar el volumen de líquido a 100 ml y
do en la extracción con 5 ml de Agua PA-ACS, con hervir hasta evaporación completa del Amonio
el objeto de eliminar el Sodio Hidróxido; a continua- Hidróxido; una vez conseguida dicha evaporación,
ción, añadir 5 ml de Acido Acético diluido a la fase añadir 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5)
etérea; la presencia de un colorante básico colorea (comprobar que el líquido haya adquirido reacción
la fase ácido-acuosa; la presencia de este coloran- francamente ácida, llevando una gota de éste sobre
te puede confirmarse por su fijación sobre lana mor- el papel indicador). Poner en el Erlenmeyer 60 mg
dentada. de lana blanca y llevar a ebullición durante cinco
La fase ácido-acuosa obtenida se alcaliniza con minutos; retirar la lana y aclararla bajo el chorro de
Amoníaco 20% (en NH3) PRS previamente diluido al agua fría. Si después de esta operación la lana toma
5% con Agua PA-ACS; añadir 0,5 g de lana mor- coloración roja, cuando se trata de vino tinto, o
dentada y llevar a ebullición durante un minuto; amarilla, si se trata de vino blanco, confirma la pre-
aclarar la lana bajo el chorro de agua fría; de per- sencia de materia colorante orgánica artificial de
manecer coloreada, el vino contiene un colorante naturaleza ácida. Si la coloración adquirida es débil
básico. o dudosa, repetir el tratamiento con Amoníaco 20%
45.4.1.1. Caracterización por cromatografía de (en NH3) PRS y hacer una segunda fijación sobre
papel. A partir de la fase acético-acuosa que con- una hebra de lana de 30 mg. Si transcurrida esta
tiene el colorante básico, concentrar hasta 0,5 ml. segunda fijación se obtiene una coloración rosa,
Si el colorante ha sido fijado sobre lana, añadir a aunque sea débil, se deduce la presencia de colo-
ésta 10 ml de Agua PA-ACS, 10 gotas de Acido rante ácido. Recurrir para un análisis más completo
Acético glacial PA-ACS-ISO y llevar a ebullición, y a nuevas fijaciones-eluciones (hasta 4 o 5), operan-
una vez retirada la lana previamente escurrida, con- do siempre de forma idéntica a la empleada para la
centrar la solución hasta 0,5 ml. segunda fijación hasta que se obtenga una colora-
Depositar sobre papel de cromatografía 20 ción rosácea que, aunque sea pálida, no ofrece
microlitros de la anterior solución concentrada a lugar a dudas.
3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior. 45.4.2.1. Caracterización por cromatografía de
Introducir dicho papel en una cubeta que conten- papel.
ga el solvente 45.3.7. de forma que su borde infe- Añadir sobre la hebra de lana coloreada 10 ml de
rior esté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y Agua PA-ACS, 10 gotas de Amoníaco 20% (en NH3)
dejar secar al aire cuando se haya alcanzado una PRS y llevar a ebullición; retirar la lana previamente
altura del frente del solvente comprendido entre 20 escurrida y concentrar la solución amoniacal hasta
o 25 cm. Identificar el colorante por medio de 0,5 ml. Depositar sobre papel de cromatografía 20
soluciones de colorantes sintéticos básicos microlitros de la anterior solución concentrada, a
depositados simultáneamente sobre el cromato- 3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior;
grama. introducir dicho papel en una cubeta que contenga
45.4.2. Determinación de colorantes de carácter el solvente 45.3.8 de forma que su borde inferior
ácido. esté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y dejar
Partir del residuo de vino concentrado a un ter- secar al aire cuando se haya alcanzado una altura
cio y neutralizado después de su extracción con del frente del solvente comprendida entre 20 o
Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT 25 cm. Identificar el colorante por medio de solu-
PA-ACS-ISO; si no se realizó la determinación de ciones de colorantes sintéticos ácidos depositados
colorante de carácter básico, poner 200 ml de vino simultáneamente sobre el cromatograma.
en un Erlenmeyer de 500 ml y llevar a ebullición
hasta que el vino se reduzca a un tercio de su volu- 45.5. Referencia.
men. En uno u otro caso, añadir 3 ml de Acido Clor- 45.5.1. Recueil des Méthodes Internationales
hídrico diluido (45.3.5) y 0,5 g de lana blanca; hervir d’Analyse des Vins. A43k, páginas 1-6.
durante cinco minutos, decantar el líquido y lavar la
lana con Agua PA-ACS abundante. En el Erlenme-
yer que contiene la lana, añadir 100 ml de Agua PA- 46. MERCURIO
ACS y 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5);
hervir durante cinco minutos, decantar el líquido 46.1. Principio.
ácido y repetir esta operación hasta que el líquido Oxidación de la materia orgánica con ácido nítri- 79
de lavado sea incoloro. Después de haber lavado co y crómico, reducción de las sales mercúricas por
bien la lana, para eliminar completamente el líquido acción de Sn2+, volatilización del Hg metálico, arras-
ácido añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 10 gotas de tre del mismo por corriente de aire y determinación
Amoníaco 20% (en NH3) PRS; llevar a ebullición de su absorbancia a 253,7 nanómetros.
suave durante diez minutos a fin de disolver la mate- Este método es aplicable a concentraciones de
ria colorante artificial que eventualmente se haya mercurio superiores a 0,05 mg/l.
46.2. Material y aparatos. 131074 Agua PA-ACS
46.2.1. Espectrofotómetro de absorción. 471153 Cromo VI Oxido
46.2.2. Lámpara de mercurio. (máx 0,000005% de Hg) PA-ACS
46.2.3. Aparato para la reducción del ion mercú- 471303 Estaño ll Cloruro
rico a mercurio metal y posterior arrastre de éste (máx 0,000005% de Hg) PA-ACS-ISO
con corriente de aire (figura 46.1). 121925 Hidroxilamonio Sulfato PA
46.2.4. Matraces de reacción de forma cónica 313186 Mercurio solución patrón
de 100 ml de capacidad. Hg = 1,000 ± 0,002 g/l AA
46.2.5. Bomba peristáltica accionada con motor 251450 Parafina P. F. 55-60º C en pastilla DC
provisto de vaciador de velocidad.
46.2.6. Llave de purga en T de teflón. 46.3.1. Acido Sulfúrico 95-98% (máximo
46.2.7. Tubo flexible de tigón de 1/8 pulgada de 0,0000005% Hg) PA-ACS-ISO, exento de mercurio.
diámetro interior y un metro, aproximadamente, de 46.3.2. Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS.
longitud. 46.3.3. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)
PA-ACS exento de mercurio.
46.3. Reactivos. 46.3.4. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO PA-ACS exento de mercurio.
471058 Acido Sulfúrico 95-98% 46.3.5. Solución de Acido Crómico al 5%. Llevar
(máx 0,0000005% de Hg) PA-ACS-ISO a un vaso de 500 ml 25 g de Cromo VI Oxido y

80

Figura 46.l. Esquema de la instalación


M
disolverlos en 25 ml de Agua PA-ACS. Añadir lenta- 47.2.2. Lámpara de plomo.
mente y agitando Acido Sulfúrico concentrado 47.2.3. Cápsula de platino de 100 ml de capaci-
hasta enrasar a 500 ml cuando la solución esté fría. dad o similar.
46.3.6. Solución reductora.- Solución al 40% de 47.2.4. Baño de arena.
Estaño II Cloruro en Agua PA-ACS, acidulada con 47.2.5. Mufla con circulación de aire.
Acido Sulfúrico. 47.2.6. Matraces de 10; 100 y 1.000 ml de
46.3.7. Solución patrón.- Mercurio solución capacidad.
patrón Hg = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disol-
viendo 1,080 g de 131426 Mercurio ll oxido amari- 47.3. Reactivos.
llo PA en 100 ml de 131019 Acido Clohídrico 35% 131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
PA-ISO a 1000 ml. En ambos casos, mediante dilu- 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
ción 1/1.000 se obtiene la solución de 1 mg/l. 131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón
46.4. Procedimiento. Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
46.4.1. Preparación de la muestra.
Tomar 1 ml de muestra y colocarla dentro de un 47.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
matraz cónico. Añadir 2 ml de Acido Nítrico 70% PA- 47.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
ACS-ISO. Cerrar con película de Parafina P. F. 55- 47.3.3. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico
60°C en pastilla DC y dejarlo en digestión durante 70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
sesenta minutos a temperatura ambiente. Añadir 5 ml 47.3.4. Plomo solución patrón
de Acido Crómico al 5%, refrigerando durante la adi- Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo
ción en baño de hielo. Tapar el matraz y dejarlo 1,598 g de 131473 Plomo ll Nitrato PA enrasando a
durante sesenta minutos, agitando cada diez minu- 1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.
tos. Transcurrido este tiempo, añadir 15 ml de Agua
PA-ACS, enfriando durante la adición con baño de 47.4. Procedimiento.
hielo. Una vez fríos los matraces, añadir 2 g, aproxima- 47.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 ml
damente, de Hidroxilamonio Sulfato PA, agitar y aco- de la muestra en una cápsula de platino y llevarla a
plar los matraces al aparato de medida. Añadir 10 ml evaporación hasta consistencia siruposa en baño
de solución reductora. Continuar como en 46.4.3. de arena. Añadir a continuación 2 ml de Acido Sul-
46.4.2. Construcción de la curva patrón. fúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el
A partir de 46.3.7, tomar 0; 5; 10; 15; 20 y 25 ml. baño de arena. Seguidamente introducir la cápsula
Tratarlas a continuación como se indica en 46.4.1. en la mufla y mantenerla durante dos horas a
Estas soluciones contienen 0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 y 450°C; transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla
0,5 partes por millón de Hg. Anotar las absorban- enfriar. Añadir 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO,
cias obtenidas frente a las concentraciones corres- evaporar en el baño de arena e introducir en la
pondientes. mufla, repitiendo esta operación hasta obtener ceni-
46.4.3. Determinación. zas blancas. Disolver a continuación las cenizas con
Efectuar la lectura de la absorbancia de la mues- 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de
tra. Una vez preparada según 46.4.1. Agua PA-ACS, una vez disueltas filtrar y recoger el
filtrado en un matraz de 10 ml, lavando la cápsula y
46.5. Referencias. el filtro con Agua PA-ACS hasta el enrase.
46.5.1. A. Bouchard: “Determination of mercury 47.4.2. Construcción de la curva patrón.- A par-
aftersoon temperature digestion by flamaless ato- tir de la solución patrón 47.3.4, tomar alícuotas de
mic absorption.” Atom. Absorpt. Newsletter, vol. 12, 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 y 1 ml, y llevar a 100 ml con Acido
número 5 (115-117), 1973. Nítrico al 1% (v/v).
46.5.2. A. García de Jalón y J. Frías: “Un méto- El contenido en plomo de estas soluciones es,
do para la determinación de mercurio en vinos me- respectivamente, 2; 4; 6; 8 y 10 ppm Anotar las
diante espectrofotometría de absorción atómica sin absorbancias obtenidas frente a las concentracio-
llama.” Ministerio de Agricultura. Abril 1972. nes correspondientes.
47.4.3. Determinación.- Efectuar la lectura direc-
47. PLOMO ta de la muestra preparada según 47.4.1 a 283,3 nm.

47.1. Principio. 47.5. Cálculo. 81


Determinación del plomo por A. A. después de Calcular el contenido en plomo, expresado en
una concentración previa con objeto de conseguir ppm mediante comparación con la correspondiente
resultados suficientemente precisos. curva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilu-
ción.
47.2. Material y aparatos.
47.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.
48. RELACION P/a TABLA I

48.1. Principio. p/at K


Estimación de los contenidos relativos de gluco-
sa y fructosa, en mostos, vinos dulces y mistelas, - 1,19 0,006
mediante el establecimiento de la relación entre azú- - 1,41 0,007
cares reductores y desviación polarimétrica a 20°C. - 1,73 0,008
- 2,24 0,009
48.2. Material y aparatos. - 2,64 0,012
48.2.1. Como en 7(a).2; 7(b).2, o 7(c).2. - 3,20 0,012
48.2.2. Polarímetro con luz monocromática ama- - 4,06 0,013
rilla (lámpara de vapor de sodio) y tubo de 20 cm. - 5,56 0,014
- 8,8 0,022
48.3. Procedimiento. - 21 0,042
48.3.1. Determinar el contenido en azúcares
reductores según el método 7(a), 7(b) o 7(c).
48.3.2. Medida de la desviación polarimétrica.
Una vez verificado el correcto reglaje del polarí-
metro, comprobando la correspondencia del valor
“cero” con la existencia de un campo luminoso uni-
forme, ajustándolo si es necesario, introducir en el
tubo del polarímetro el líquido de defecación, sin 49. ANHIDRIDO CARBONICO
diluir, incoloro y limpio, utilizando para la determina- (Método aprobado pero no
ción de azúcares reductores, evitando la formación publicado en el B.O.E.)
de burbujas de aire. Anotar la temperatura del líqui-
do que debe ser lo más próxima posible a 20°C. 49.1. Principio.
Efectuar la lectura de la desviación polarimétrica Después de la oxidación en frío del anhídrido
varias veces sucesivas, tomando la media de los sulfuroso por el hidrógeno peróxido en presencia
resultados obtenidos. del ion de cobre II, el anhídrido carbónico desplaza-
do del vino por una solución tampón de fosfato y
48.4. Cálculo. ácido fosfórico es arrastrado en frío en circuito
Determinar el poder rotatorio y la relación P/a cerrado por una corriente de aire mediante una
aplicando las fórmulas siguientes: pequeña bomba de circulación hacia una solución
a20 = at+ at (t - 20) x K valorada de bario hidróxido. El exceso de esta base
P/a20 (expresado con su correspondiente signo) se determina inmediatamente con una solución
valorada de ácido clorhídrico en presencia de un
siendo: indicador mixto de timolftaleína-fenolftaleína.
Aplicable a contenidos inferiores a 6 g/l.
P = g/l de azúcares reductores.
49.2. Material y aparatos.
at = poder rotatorio en divisiones sacarimétricas 49.2.1. Aparato de vidrio para extracción del
a t°C (un grado polarimétrico = 4,615 divisiones CO2 en circuito cerrado (fig. l) compuesto de:
sacarimétricas). - un matraz de 250 ml (1) provisto de una bola
a20 = poder rotatorio en divisiones sacarimétri- antiespuma sobre la que va adaptada una
cas a20°C. bureta (5);
t = temperatura del líquido en el momento de la - dos barboteadores (2) y (3);
lectura. - una bomba (4) que garantice la circulación del
aire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo).
K = coeficiente variable con la naturaleza de los
azúcares, dado por la tabla I en función del valor 49.3. Reactivos.
P / at . 181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
82 48.5. Referencias. 131074 Agua PA-ACS
48.5.1. J. Blouin. Manual practique d’analyse 131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
des Moûts et Vins. 1977. 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
48.5.2. J. Ribereau Gayon, E. Peynaud. Scien- 121085 Etanol 96% v/v PA
ces et Techniques du Vin. Tome I. 1972. 131325 Fenolftaleína PA-ACS
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS
M
121677 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA enfriado a 0°C, 50 ml de vino. Colocar el matraz (1)
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97% en el circuito y esperar 10 minutos.
PA-ACS-ISO Conectar la bomba, e introducir mediante la
182157 Sodio Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV bureta (5) 20 ml de solución tampón. Dejar en fun-
171739 Timolftaleína RE cionamiento 30 minutos.
Parar la bomba y tomar del barboteador (2), 50 ml
49.3.1. Solución de Sodio Hidróxido 0,2N: En un de la solución de Bario Hidróxido; valorarla con Aci-
matraz aforado diluir exactamente a 1:1 Sodio do Clorhídrico 0,2N con indicador mixto. Sea V2 el
Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS. número de ml gastados.
49.3.2. Solución de Bario Cloruro de 90 g de Es indispensable valorar diariamente el Bario
BaCl2. 2H20 por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidra- Hidróxido utilizando 150 ml. Sea V1 el número de ml
to PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS. de Acido Clorhídrico 0,2N necesarios.
49.3.3. Solución de Bario Hidróxido. 49.4.2. Vinos que contienen más de 4 g de CO2
Mezclar 2 volúmenes de la solución de Bario por litro.
Cloruro de 90 g/l con 1 volumen de solución de La botella debe mantenerse en posición horizon-
Sodio Hidróxido 0,2N. Conservar en recipiente que tal a 0°C durante una noche. Abrir la botella con
evite la carbonatación. precaución. Para botellas de 750 ml sustituir 50 ml
49.3.4. Solución tampón: del vino por 50 ml de Sodio Hidróxido al 50%
Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida haciendo resbalar suavemente la solución por el
400 g de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA y cuello de la botella. Cerrar ésta inmediatamente y
añadir 50 ml de Acido orto-Fosfórico (d 20°C = homogeneizar su contenido agitándola; colocarla
1,63): Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO seguidamente en un baño de agua a 20°C.
con Agua PA-ACS hasta la densidad indicada que Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos de
corresponde a, aproximadamente, 79,4% y com- solución de Bario Hidróxido.
pletar hasta 1 l con Agua PA-ACS recientemente Introducir en el matraz (1) unos cristales de
hervida. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de
49.3.5. Sodio Hidróxido al 50% (p/p). Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.
Solución acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g Introducir lentamente la pipeta en la botella para
de Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en evitar desprendimiento de CO2 y tomar 50 ml del
100 g de solución. vino y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato y
Utilizarla 15 días después de su preparación dejarlo reposar 10 minutos.
para lograr la decantación del eventual Na2CO3. El volumen del vino tomado se deberá reducir a
Esta solución debe ser transparente. 25 ml, si éste contiene más de 8 g/l de anhídrido
49.3.6. Hidrógeno Peróxido en solución de 10 carbónico.
volúmenes. Esta solución contiene 30,4 g de H2O2 Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1)
por litro y libera 10 veces su volumen de oxígeno con una bureta (5), 40 ml de solución tampón.
por descomposición catalítica con MnO2 en medio Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos.
alcalino. Parar la bomba y tomar del barboteador (2) 50 ml
49.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO, de la solución de Bario Hidróxido. Valorarla con Aci-
pulverizado. do Clorhídrico 0,2N en presencia de indicador mix-
49.3.8. Disolver 1 g de Fenolftaleína PA-ACS y to. Sea V2 el número de ml utilizados. Sea V1 el
0,5 g de Timolftaleína RE en Etanol 96% v/v PA, número de ml de Acido Clorhídrico 0,2N consumi-
neutro y completar hasta 100 ml. dos para valorar 150 ml de solución de Bario Hidró-
49.3.9. Acido Clorhídrico 0,2N. En un matraz xido.
aforado diluir a 1:5 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solu- 49.5. Cálculo.
ción 0,2N obtenida. 49.5.1. Para vinos que contienen menos de 4 g
de CO2 por litro.
49.4. Procedimiento. Cantidades de CO2 en gramos por l en el vino.
49.4.1. Vinos que contienen menos de 4 g de CO2(g/l) = 0,088 (V1- 3V2).
CO2 por litro.
La botella de vino se debe mantener en posición 49.5.2. Para vinos que contienen más de 4 g de
horizontal durante una noche a 0°C. CO2 por litro. 83
Colocar en el barboteador (2) 150 ml exacta- Medir el volumen de líquido que queda en la bote-
mente medidos de solución de Bario Hidróxido. lla y añadir 50 o 25 ml de la muestra tomada para la
Introducir en el matraz (1) algunos cristales de determinación. Sea V el volumen total así determina-
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de do. Calcular seguidamente el factor de corrección f,
Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes. Poner, con necesario para tener en cuenta los 50 ml de Sodio
cuidado, en un matraz previamente enjuagado y Hidróxido al 50% introducidos en la botella:
V 50. ETANAL
f = ———— (Método aprobado pero no
V - 50 publicado en el B.O.E.)

Si la muestra para la determinación es de 50 ml, 50.1. Principio.


la cantidad de anhídrido carbónico en g/l es (2V1 - El etanal se determina en el vino, previamente
6V2) . 0,088 . f. decolorado con carbón, midiendo a 570 nm la colo-
Este resultado debe multiplicarse por 2 si la ración verde o violeta que da con el sodio nitropru-
toma de muestra es de 25 ml. siato y la piperidina.

49.6. Referencias. 50.2. Material y aparatos.


49.6.1. Jaulmes (P.), Meth. An. 1972, n° 422; 50.2.1. Espectrofotómetro capaz de efectuar
Ann. Fals. Exp. chim. 1973, n° 708, 96-109. lecturas a 570 nm.
49.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978. 50.3. Reactivos.
131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131064 Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
121237 Carbón Activo polvo PA
Etanal
171327 Fenolftaleína solución 1% RE
162377 Piperidina PS
182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA
181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV

50.3.1. Solución de Piperidina al 10% (v/v).


Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 ml
de Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.
50.3.2. Solución de Sodio Nitroprusiato al 0,4%
(p/v).
En un matraz aforado de 250 ml disolver 1 g de
Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado.
Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS.
50.3.3. Carbón Activo polvo PA.
50.3.4. Acido Clorhídrico diluido al 25% (v/v)
(aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientemen-
te Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua
PA-ACS.
50.3.5. Solución alcalina.
Disolver 8,75 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO en
400 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. Comple-
tar hasta un litro con Agua PA-ACS.

50.4. Procedimiento.
50.4.1. Determinación del Etanal.
Colocar 25 ml de líquido a analizar en un Erlen-
meyer de 100 ml, adicionar unos 2 g de Carbón
Activo polvo PA. Agitar enérgicamente durante
algunos segundos, dejar reposar durante 2 minutos
84 y filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino para
obtener un filtrado claro.
2 ml de filtrado incoloro se colocan en un Erlen-
meyer de 100 ml y se adiciona agitando 5 ml de solu-
ción de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solución de
Piperidina, mezclar y colocar inmediatamente la mez-
Figura 1 cla en la cubeta de lectura de 10 mm de espesor. La
M
coloración obtenida que varía del verde al violeta, se contiene Etanal libre, no combinado con el SO2 será
mide a 570 nm con relación al aire. Esta coloración necesario, antes de empezar a determinar el Etanal
aumenta para disminuir seguidamente con rapidez. total, pasarlo previamente al estado de combina-
Elegir como valor definitivo la máxima absorbancia ción con el SO2. Para efectuar esto, adicionar a una
que se obtiene al cabo de unos 50 segundos. parte del líquido a analizar un pequeño exceso de
La cantidad de Etanal contenido en el líquido SO2 libre y esperar algunas horas antes de proce-
analizado se deduce de una curva patrón. der a la determinación.
50.4.2. Construcción de la curva patrón.
Solución patrón de Etanal combinado con el 50.7. Referencias.
Anhídrido Sufuroso. 50.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit.
Tomar Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS, Rdsch 1970. 66, 5-6.
valorar en SO 2 determinar su cantidad exacta 50.7.2. Recueil des Méthodes Internationales
midiéndola con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV. d’Analyse des Vins. O. I. V. A-37, 1978.
En un matraz aforado de 1 litro colocar el volu-
men de esta solución que corresponda a 1.500 mg
51. PRESION DEL ANHIDRIDO
de SO2. Introducir en el matraz, ayudados con un
CARBONICO
embudo, alrededor de 1 ml de Etanal destilado
recientemente y recogido sobre una mezcla refrige-
51.1. Principio.
rante. Enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS, mezclar y
Medida de la presión gaseosa de un recipiente
dejar durante la noche.
cerrado herméticamente mediante un aparato ade-
La cantidad exacta de esta solución patrón de
cuado que disponga de un manómetro.
Etanal combinada con el SO2 debe determinarse
como sigue:
51.2. Material y aparatos.
En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml de
51.2.1. Equipo manométrico que conste de las
solución patrón de Etanal, adicionar 20 ml del Acido
siguientes partes:
Clorhídrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxi-
51.2.1.1. Aguja perforadora del tapón o del reci-
dar el SO2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1) SV en pre-
piente, hueca, con válvula que obture el orificio de
sencia de solución de Almidón soluble RE hasta
entrada de gas a la misma y sistema estanco
coloración azul débil.
de adaptación al tapón o recipiente.
Añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1%
51.2.1.2. Conducto que ponga en comunica-
RE y la suficiente solución alcalina hasta la desapa-
ción la aguja con el manómetro.
rición de la coloración azul y aparición de color rosa.
51.2.1.3. Manómetro que permita lecturas de
Valorar el SO2 combinado al Etanal con el Yodo
hasta 10 kg/cm2.
0,05 mol/l (0,1) SV hasta coloración azul débil. Sien-
do n el volumen gastado, la solución patrón de Eta-
51.3. Procedimiento.
nal combinado con el SO2 contiene: 44,05 n mg de
Mantener la muestra en reposo durante dos
Etanal por litro.
horas al menos. Llevar la temperatura aproximada-
Preparación de la curva patrón:
mente a 20°C y perforar el tapón o el recipiente
En matraces aforados de 100 ml colocar sucesi-
según el caso. Abrir la válvula con lo que el gas
vamente 5-10-15-20 y 25 ml de la solución patrón.
pasa al manómetro. Leer la presión que indica el
Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones corres-
manómetro.
ponden a cantidades de Etanal próximas a 40-80-
120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las dilu-
51 4. Expresión de los resultados.
ciones debe calcularse a partir del contenido en
La presión se expresará en atmósferas a 20°C.
Etanal de la solución patrón determinada anterior-
mente.
1 atm. = 760 mm de Hg = 1.034 kg/cm2
Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml de
cada una de estas soluciones como se indica ante-
riormente. La representación gráfica de las absor- 52. ANTISEPTICOS Y ANTIFERMENTOS
bancias de estas soluciones en función de la canti- (Método microbiológico)
dad de Etanal es una recta que no pasa por el
origen. 52.1. Principio.
Comparación del desarrollo, en vino problema y 85
50.5. Cálculo testigo, de las levaduras contenidas en láminas de
Calcular el contenido en Etanal mediante com- agar-extracto de levadura glucosado, tras perma-
paración con la correspondiente curva patrón. necer sumergidas 48 horas en ellos.

50.6. Observaciones. 52.2. Material y aparatos.


Si, de forma excepcional, el líquido a analizar 52.2.1. Hematímetro.
52.2.2. Cajas Petri. te sobre la superficie de cada portaobjeto, forman-
52.2.3. Portaobjetos rayados en zig-zag. do una lámína de agar. Acto seguido colocar hori-
52.2.4. Varilla en forma de U de unos 0,5 cm de zontalmente los portaobjetos apoyando sobre los
diámetro. dos brazos de la varilla en U y dejar en reposo
52.2.5. Tubos de ensayo aforados a 10 ml. durante un par de horas.
52.2.6. Tubos capaces de contener portaobje- 52.4.4. Formación de colonias: Asegurada la
tos normales de microscopía. solidificación del medio sembrado, sumergir com-
52.2.7. Autoclave. pletamente los portaobjetos en los tubos que con-
52.2.8. Microscopio. tienen el vino problema y el vino testigo. Tapar no
52.2.9. Estufa de cultivo. herméticamente los tubos y mantener en la estufa
de cultivo a 25°C durante 48 horas.
52.3. Reactivos y medios de cultivo. Finalizado este período eliminar el vino de los
141792 Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX tubos, dejando los portaobjetos en el interior de
131074 Agua PA-ACS ellos en contacto con el aire y a 25°C.
Etanal 52.4.5. Observación microscópica: Observar las
403687 Extracto de levadura CULTIMED láminas inmediatamente después de sacadas del
121341 D(+)-Glucosa PA vino. Si no se aprecia desarrollo de colonias incubar
en estufa a 25°C y repetir la observación microscó-
52.3.1. Solución acuosa de Etanal de 6,9 g/l (1 ml pica a las 24, 48 y 72 horas si es necesario.
de esta solución combina 10 mg de SO2). En los vinos de alto grado alcohólico puede
52.3.2. Mosto de 10º Bé. peptonado al 1 por retrasarse aún más el desarrollo de las colonias,
1.000. Esterilizar en autoclave a 112°C durante 20 como se comprueba en el vino testigo.
minutos.
52.3.3. Agar-extracto de levadura glucosado: 52.5. Interpretación de los resultados.
Extracto de levadura CULTIMED. . . . . 5 g La presencia franca de colonias indica la ausen-
D(+)-Glucosa PA . . . . . . . . . . . . . . . . 20 g cia de antisépticos y antifermentos.
Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX . 17,5 g
Agua PA-ACS . . . . . . . . . . . . . . . . 1.000 g 52.6. Referencia.
52.6.1. Método biológico español-argentino
Una vez fundido en baño de agua, distribuir a razón para la investigación de la presencia de antisépticos
de 10 ml por tubo y esterilizar a 120°C durante 20 en los vinos. E. Feduchy An. INIA. Serv. Tecnol. agr.
minutos. N 2. 1975.
52.3.4. Capa de levadura: Saccharomyces
bayanus.

52.4. Procedimiento.
52.4.1. Preparación del vino problema: Si la
dosis de SO2 libre es superior a 15 mg/l, proceder a
combinación del exceso mediante la solución acuo-
sa de Etanal, dejando transcurrir 24 horas, desde
su adición. Comprobar de nuevo que el contenido
de SO2 libre es inferior a 15 m/l.
52.4.2. Preparación del vino testigo: Utilizar un
vino de características lo más parecidas posibles al
vino problema, especialmente en grado alcohólico.
Respecto al SO2 libre se procederá como en 52.4.1
52.4.3. Siembra del Agar (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX y formación de la película: Una vez
fundidos en baño de agua los tubos con 10 ml de
agar-extracto de levadura glucosado y cuando la
temperatura baja a 45-50°C, sembrar, tras conteo
con hematímetro, 5 millones de levaduras/ml (50
86 millones por tubo) de un cultivo de 72 horas en
mosto peptonado de 10° Bé.
Tras homogeneizar rápidamente los tubos sem-
brados, verter su contenido sobre los portaobjetos
rayados, situados en posición inclinada, apoyados
sobre un brazo de la varilla en U colocada dentro de
la caja Petri; el agar fundido deslizará uniformemen-
M

87
Productos derivados
de la uva:
Zumos de uva

88
M
METODOS DE ANALISIS ser 1,3330; si no es así corregir adecuadamente la
lectura.
1. GRADO BRIX Situar el zumo de uva en un envase hermética-
mente cerrado en un baño a 20°C y esperar a que
1.1. Principio. alcance dicha temperatura. Tomar con una pipeta
Medida del índice de refracción y conversión en un poco de zumo de uva y poner unas gotas entre
grados Brix mediante las tablas adjuntas. los prismas del refractómetro. Medir el índice de
refracción.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Refractómetro provisto del equipo nece- 1.4. Expresión de los resultados.
sario para mantener la temperatura a 20ºC. A partir del valor obtenido del índice de refrac-
1.2.2. Matraces o recipientes de vidrio que cie- ción se obtiene el grado Brix mediante la tabla I.
rren herméticamente.
1.5. Observaciones.
1.3. Procedimiento. 1.5.1. Si se emplea otra temperatura para medir
Colocar el refractómetro en un lugar iluminado el índice de refracción, utilizar la tabla II para la
con luz difusa o frente a una fuente de luz artificial. corrección de temperatura a 20°C .
Circular agua a temperatura constante a 20°C a
través de los prismas del refractómetro. Ajustar el 1.6. Referencias.
instrumento colocando unas gotas de agua destila- Official Methods of Analysis, AOAC-1984.
da entre los prismas. El índice de refracción deberá

TABLA I

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado


20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,3330 0,009 1,3357 1,885 1,3384 3,736 1,3411 5,562


1,3331 0,078 1,3358 1,954 1,3385 3,804 1,3412 5,629
1,3332 0,149 1,3359 2,023 1,3386 3,872 1,3413 5,696
1,3333 0,253 1,3360 2,092 1,3387 3,940 1,3414 5,763
1,3334 0,288 1,3361 2,161 1,3388 4,008 1,3415 5,830
1,3335 0,358 1,3362 2,230 1,3389 4,076 1,3416 5,897
1,3336 0,428 1,3363 2,299 1,3390 4,144 1,3417 5,964
1,3337 0,498 1,3364 2,367 1,3391 4,212 1,3418 6,031
1,3338 0,567 1,3365 2,436 1,3392 4,279 1,3419 6,098
1,3339 0 637 1,3366 2,505 1,3393 4,347 1,3420 6,165
1,3340 0,707 1,3367 2,574 1,3394 4,415 1,3421 6,231
1,3341 0,776 1,3368 2,642 1,3395 4.483 1,3422 6,298
1,3342 0,846 1,3369 2,711 1,3396 4,550 1,3423 6,365
1,3343 0,915 1,3370 2,779 1,3397 4,618 1,3424 6,432
1,3344 0,985 1,3371 2,848 1,3398 4,686 1,3425 6,498
1,3345 1,054 1,3372 2,917 1,3399 4,753 1,3426 6,565
1,3346 1,124 1,3373 2,985 1,3400 4,821 1,3427 6,632
1,3347 1,193 1,3374 3,053 1,3401 4,888 1,3428 6,698
1,3348 1,263 1,3375 3,122 1,3402 4,956 1,3429 6,765
1,3349 1,332 1,3376 3,190 1,3403 5,023 1,3430 6,831
1,3350
1,3351
1,401
1,470
1,3377
1,3378
3,259
3,327
1,3404
1,3405
5,091
5,158
1,3431
1,3432
6,898
6,964
89
1,3352 1,540 1,3379 3,395 1,3406 5,225 1,3433 7,031
1,3353 1,609 1,3380 3,463 1,3407 5,293 1,3434 7,097
1,3354 1,678 1,3381 3,532 1,3408 5,360 1,3435 7,164
1,3355 1,747 1,3382 3,600 1,3409 5,427 1,3436 7,230
1,3356 1,815 1,3383 3,668 1,3410 5,494 1,3437 7,296
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado


20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,3438 7,362 1,3490 10,763 1,3542 14,079 1,3594 17,311


1,3439 7,429 1,3491 10,828 1,3543 14,141 1,3595 17,373
1,3440 7,495 1,3492 10,892 1,3544 14,204 1,3596 17,434
1,3441 7,561 1,3493 10,957 1,3545 14,267 1,3597 17,496
1,3442 7,627 1,3494 11,021 1,3546 14,330 1,3598 17,557
1,3443 7,693 1,3495 11,086 1,3547 14,393 1,3599 17,618
1,3444 7,759 1,3496 11,150 1,3548 14,456 1,3600 17,679
1,3445 7,825 1,3497 11,215 1,3549 14,518 1,3601 17,741
1,3446 7,891 1,3498 11,279 1,3550 14,581 1,3602 17,802
1,3447 7,957 1,3499 11,343 1,3551 14,644 1,3603 17,863
1,3448 8,023 1,3500 11,407 1,3552 14,707 1,3604 17,924
1,3449 8,089 1,3501 11,472 1,3553 14,759 1,3605 17,985
1,3450 8,155 1,3502 11,536 1,3554 14,832 1,3606 18,046
1,3451 8,221 1,3503 11,600 1,3555 14,894 1,3607 18,107
1,3452 8,287 1,3504 11,664 1,3556 14,957 1,3608 18,168
1,3453 8,352 1,3505 11,723 1,3557 15,019 1,3609 18,229
1,3454 8,418 1,3506 11,792 1,3558 15,082 1,3610 18,290
1,3455 8,484 1,3507 11,856 1.3559 15.144 1,3611 18,351
1,3456 8,550 1,3508 11,920 1,3560 15,207 1,3612 18,412
1,3457 8,615 1,3509 11,984 1,3561 15,269 1,3613 18,473
1,3458 8,681 1,3510 12,048 1,3562 15,332 1,3614 18,534
1,3459 8,746 1,3511 12,112 1,3563 15,394 1,3615 18,595
1,3460 8,812 1,3512 12,175 1,3564 15,456 1,3616 18,655
1,3461 8,878 1,3513 12,240 1,3565 15,518 1,3617 18,716
1,3462 8,943 1,3514 12,304 1,3566 15,581 1,3618 18,777
1,3463 9,008 1,3515 12,368 1,3567 15,643 1,3619 18,837
1,3464 9,074 1,3516 12,431 1,3568 15,705 1,3620 18,898
1,3465 9,139 1,3517 12,495 1,3569 15,767 1,3621 18,959
1,3466 9,205 1,3518 12,559 1,3570 15,829 1,3622 19,019
1,3467 9,270 1,3519 12,623 1,3571 15,891 1,6223 19,080
1,3468 9,335 1,3520 12,686 1,3572 15,953 1,3624 19,141
1,3469 9,400 1,3521 12,750 1,3573 16,016 1,3625 19,201
1,3470 9,466 1,3522 12,813 1,3574 16,078 1,3626 19,262
1,3471 9,531 1,3523 12,877 1,3575 16,140 1,3627 19,322
1,3472 9,596 1,3524 12,940 1,3576 16,201 1,3628 19,382
1,3473 9,661 1,3525 13,004 1,3577 16,263 1,3629 19,443
1,3474 9,726 1,3526 13,067 1,3578 16,325 1,3630 19,503
1,3475 9,791 1,3527 13,131 1,3579 16,387 1,3631 19,564
1,3476 9,856 1,3528 13,194 1,3580 16,449 1,3632 19,624
1,3477 9,921 1,3529 13,258 1,3581 16,511 1,3633 19,684
1,3478 9,986 1,3530 13,321 1,3582 16,573 1,3634 19,745
1,3479 10,051 1,3531 13.384 1,3583 16,634 1,3635 19,805
1,3480 10,116 1,3532 13,448 1,3584 16,696 1,3636 19,865
1,3481 10,181 1,3533 13,551 1,3585 16,758 1,3637 19,925
1,3482 10,246 1,3534 13,574 1,3586 16,819 1,3638 19,985
90 1,3483 10,331 1,3535 13,637 1,3587 16,881 1,3639 20,045
1,3484 10,375 1,3536 13,700 1,3588 16,943 1,3640 20,106
1,3485 10,440 1,3537 13,763 1,3589 17,004 1,3641 20,166
1,3486 10,505 1,3538 13,826 1,3590 17,065 1,3642 20,226
1,3487 10,570 1,3539 13,890 1,3591 17,127 1,3643 20,286
1,3488 10,634 1,3540 13,953 1,3592 17,189 1,3644 20,346
1,3489 10,699 1,3541 14,016 1,3593 17,250 1,3645 20,406
M
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado


20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,3646 20,466 1,3698 23,544 1,3750 26,551 1,3802 29,488


1,3647 20,525 1,3699 23,603 1,3751 26,608 1,3803 29,544
1,3648 20,585 1,3700 23,661 1,3752 26,665 1,3804 29,600
1,3649 20,645 1,3701 23,720 1,3753 26,722 1,3805 29,655
1,3650 20,705 1,3702 23,778 1,3754 26,779 1,3806 29,711
1,3651 20,765 1,3703 23,836 1,3755 26,836 1,3807 29,767
1,3652 20,825 1,3704 23,895 1,3756 26,893 1,3808 29,823
1,3653 20,884 1,3705 23,953 1,3757 26,950 1,3809 29,878
1,3654 20,944 1,3706 24,011 1,3758 27,007 1,3810 29,934
1,3655 21,004 1,3707 24,070 1,3759 27,064 1,3811 29,929
1,3656 21,063 1,3708 24,128 1,3760 27,121 1,3812 30,045
1,3657 21,123 1,3709 24,186 1,3761 27,178 1,3813 30,101
1,3658 21,183 1,3710 24,244 1,3762 27,234 1,3814 30,156
1,3659 21,242 1,3711 24,302 1,3763 27,291 1,3815 30,212
1,3660 21,302 1,3712 24,361 1,3764 27,348 1,3816 30,267
1,3661 21,361 1,3713 24,419 1,3765 27,405 1,3817 30,323
1,3662 21,421 1,3714 24,477 1,3766 27,462 1,3818 30,378
1,3663 21,480 1,3715 24,535 1,3767 27,518 1,3819 30,434
1,3664 21,540 1,3716 24,593 1,3768 27,575 1,3820 30,489
1,3665 21,599 1,3717 24,651 1,3769 27,632 1,3821 30,544
1,3666 21,658 1,3718 24,709 1,3770 27,688 1,3822 30,600
1,3667 21,718 1,3719 24,767 1,3771 27,745 1,3823 30,655
1,3668 21,777 1,3720 24,825 1,3772 27,802 1,3824 30,711
1,3669 21,836 1,3721 24,883 1,3773 27,858 1,3825 30,766
1,3670 21,895 1,3722 24,941 1,3774 27,915 1,3826 30,821
1,3671 21,955 1,3723 24,998 1,3775 27,971 1,3827 30,876
1,3672 22,014 1,3724 25,056 1,3776 28,028 1,3828 30,932
1,3673 22,073 1,3725 25,114 1,3777 28,084 1,3829 30,987
1,3674 22,132 1,3726 25,172 1,3778 28,141 1,3830 31,042
1,3675 22,192 1,3727 25,230 1,3779 28,197 1,3831 31,097
1,3676 22,251 1,3728 25,287 1,3780 28,253 1,3832 31,152
1,3777 22,310 1,3729 25,345 1,3781 28,310 1,3833 31,207
1,3678 22,369 1,3730 25,403 1,3782 28,366 1,3834 31,262
1,3679 22,428 1,3731 25,460 1,3783 28,422 1,3835 31,317
1,3680 22,487 1,3732 25,518 1,3784 28,479 1,3836 31,372
1,3681 22,546 1,3733 25,576 1,3785 28,535 1,3837 31,428
1,3682 22,605 1,3734 25,633 1,3786 28,591 1,3838 31,482
1,3683 22,664 1,3735 25,691 1,3787 28,648 1,3839 31,537
1,3684 22,723 1,3736 25,748 1,3788 28,704 1,3840 31,592
1,3685 22,781 1,3737 25,806 1,3789 28,760 1,3841 31,647
1,3686 22,840 1,3738 25,863 1,3790 28,816 1,3842 31,702
1,3687 22,899 1,3739 25,921 1,3791 28,872 1,3843 31,757
1,3688 22,958 1,3740 25,978 1,3792 28,928 1,3844 31,812
1,3689 22,017 1,3741 26,035 1,3793 28,984 1,3845 31,867
1,3690 23,075 1,3742 26,093 1,3794 29,040 1,3846 31,922
1,3691 23,134 1,3743 26,150 1,3795 29,096 1,3847 31,976 91
1,3692 23,193 1,3744 26,207 1,3796 29,152 1,3848 32,031
1,3693 23,251 1,3745 26,265 1,3797 29,208 1,3849 32,086
1,3694 23,310 1,3746 26,322 1,3798 29,264 1,3850 32,140
1,3695 23,369 1,3747 26,379 1,3799 29,320 1,3851 32,195
1,3696 23,427 1,3748 26,436 1,3800 29,376 1,3852 32,250
1,3697 23,486 1,3749 26,493 1,3801 29,432 1,3853 32,304
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado


20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,3854 32,359 1,3906 35,167 1,3958 37,914 1,4010 40,604


1,3855 32,414 1,3907 35,220 1,3959 37,967 1,4011 40,655
1,3856 32,468 1,3908 35,274 1,3960 38,019 1,4012 40,706
1,3857 32,523 1,3909 35,327 1,3961 38,071 1,4013 40,757
1,3858 32,577 1,3910 35,380 1,3962 38,123 1,4014 40,808
1,3859 32,632 1,3911 35,434 1,3963 38,175 1,4015 40,860
1,3860 32,686 1,3912 35,487 1,3964 38,228 1,4016 40,911
1,3861 32,741 1,3913 35,540 1,3965 38,280 1,4017 40,962
1,3862 32,795 1,3914 35,593 1,3966 38,332 1,4018 41,013
1,3863 32,849 1,3915 35,647 1,3967 38,384 1,4019 41,064
1,3864 32,904 1,3916 35,700 1,3968 38,436 1,4020 41,115
1,3865 32,958 1,3917 35,753 1,3969 38,488 1,4021 41,166
1,3866 33,013 1,3918 35,806 1,3970 38 540 1,4022 41,217
1,3867 33,067 1,3919 35,859 1,3971 38 592 1,4023 41,268
1,3868 33,121 1,3920 35,912 1,3972 38,644 1,4024 41,318
1,3869 33,175 1,3921 35,965 1,3973 38,696 1,4025 41,369
1,3870 33,230 1,3922 36,019 1,3974 38,784 1,4026 41,420
1,3871 33,284 1 3923 36,072 1,3975 38,800 1,4027 41,471
1,3872 33,338 1,3924 36,125 1,3976 38,852 1,4028 41,522
1,3873 33,392 1,3925 36,178 1,3977 38,904 1,4029 41,573
1,3874 33,446 1,3926 36,231 1,3978 38,955 1,4030 41,623
1,3875 33,500 1,3927 36,284 1,3979 39,007 1,4031 41,674
1,3876 33,555 1,3928 36,337 1,3980 39,059 1,4032 41,725
1,3877 33,609 1,3929 36,389 1,3981 39,111 1,4033 41,776
1,3878 33,663 1,3930 36,442 1,3982 39,163 1,4034 41,826
1,3879 33,717 1,3931 36,495 1,3983 39,214 1,4035 41,877
1,3880 33,771 1,3932 36,548 1,3984 39,266 1,4036 41,928
1,3881 33,825 1,3933 36,601 1,3985 39,318 1,4037 41,978
1,3882 33,879 1,3934 36,654 1,3986 39,370 1,4038 42,029
1,3883 33,933 1,3935 36,706 1,3987 39,421 1,4039 42,080
1,3884 33,987 1,3936 36,759 1,3988 39,473 1,4040 42,130
1,3885 34,040 1,3937 36,812 1,3989 39,525 1,4041 42,181
1,3886 34,094 1,3938 36,865 1,3990 39,576 1,4042 42,231
1,3887 34,148 1,3939 36,917 1,3991 39,628 1,4043 42,282
1,3888 34,202 1,3940 36,970 1,3992 39 679 1,4044 42,332
1,3889 34,256 1,3941 37,023 1,3993 39 731 1,4045 42,383
1,3890 34,310 1,3942 37,075 1,3994 39,782 1,4046 42,433
1,3891 34,363 1,3943 37,128 1,3995 39,834 1,4047 42,484
1,3892 34,417 1,3944 37,180 1,3996 39,885 1,4048 42,534
1,3893 34,471 1,3945 37,233 1,3997 39,937 1,4049 42,585
1,3894 34,524 1,3946 37,286 1,3998 39,988 1,4050 42,635
1,3895 34,578 1,3947 37,338 1,3999 40,040 1,4051 42,685
1,3896 34,632 1,3948 37,391 1,4000 40,091 1,4052 42,736
1,3897 34,685 1,3949 37,443 1,4001 40,142 1,4053 42,786
1,3898 34,739 1,3950 37,495 1,4002 40,194 1,4054 42,836
92 1,3899 34,793 1,3951 37,548 1,4003 40,245 1,4055 42,887
1,3900 34,846 1,3952 37,600 1,4004 40,295 1,4056 42,937
1,3901 34,900 1,3953 37,653 1,4005 40,348 1,4057 42,987
1,3902 34,953 1,3954 37,705 1,4006 40,399 1,4058 43,037
1,3903 35,007 1,3955 37,757 1,4007 40,450 1,4059 43,088
1,3904 35,060 1,3956 37,810 1,4008 40,501 1,4060 43,138
1,3905 35,114 1,3957 37,862 1,4009 40,553 1,4061 43,188
M
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado


20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4062 43,238 1,4114 45,820 1,4166 48,350 1,4218 50,833


1,4063 43,288 1,4115 45,869 1,4167 48,399 1,4219 50,880
1,4064 43,338 1,4116 45,918 1,4168 48,447 1,4220 50,928
1,4065 43,388 1,4117 45,967 1,4169 48,495 1,4221 50,975
1,4066 43,439 1,4118 46,016 1,4170 48,543 1,4222 51,022
1,4067 43,489 1,4119 46,065 1,4171 48,591 1,4223 51,069
1,4068 43,539 1,4120 46,114 1,4172 48,639 1,4224 51,116
1,4069 43,589 1,4121 46,163 1,4173 48,687 1,4225 51,164
1,4070 43,639 1,4122 46,212 1,4174 48,735 1,4226 51,211
1,4071 43,689 1,4123 46,261 1,4175 48,784 1,4227 51,258
1,4072 43,739 1,4124 46,310 1,4176 48,832 1,4228 51,305
1,4073 43,789 1,4125 46,359 1,4177 48,880 1,4229 51,352
1,4074 43,838 1,4126 46,408 1,4178 48,928 1,4230 51,399
1,4075 43,888 1,4127 46,457 1,4179 48,976 1,4231 51,446
1,4076 43,938 1,4128 46,506 1,4180 49,023 1,4232 51,493
1,4077 43,988 1,4129 46,555 1,4181 49,071 1,4233 51,540
1,4078 44,038 1,4130 46,604 1,4182 49,119 1,4234 51,587
1,4079 44,088 1,4131 46,652 1,4183 49,167 1,4235 51,634
1,4080 44,138 1,4132 46,701 1,4184 49,215 1,4236 51,681
1,4081 44,187 1,4133 46,750 1,4185 49,263 1,4237 51,728
1,4082 44,237 1,4134 46,799 1,4186 49,311 1,4238 51,775
1,4083 44,287 1,4135 46,848 1,4187 49,359 1,4239 51,822
1,4084 44,337 1,4136 46,896 1,4188 49,407 1,4240 51,859
1,4085 44,386 1,4137 46,945 1,4189 49,454 1,4241 51,916
1,4086 44,436 1,4138 46,994 1,4190 49,502 1,4242 51,963
1,4087 44,486 1,4139 47,043 1,4191 49,550 1,4243 52,010
1,4088 44,535 1,4140 47,091 1,4192 49,598 1,4244 52,057
1,4089 44,585 1,4141 47,140 1,4193 49,645 1,4245 52,104
1,4090 44,635 1,4142 47,188 1,4194 49,693 1,4246 52,150
1,4091 44,684 1,4143 47,237 1,4195 49,741 1,4247 52,197
1,4092 44,734 1,4144 47,286 1,4196 49,788 1,4248 52,244
1,4093 44,783 1,4145 47,334 1,4197 49,836 1,4249 52,291
1,4094 44,833 1,4146 47,383 1,4198 49,884 1,4250 52,338
1,4095 44,882 1,4147 47,431 1,4199 49,931 1,4251 52,384
1,4096 44,932 1,4148 47,480 1,4200 49,979 1,4252 52,431
1,4097 44,981 1,4149 47,528 1,4201 50,027 1,4253 52,478
1,4098 45,031 1,4150 47,577 1,4202 50,074 1,4254 52,524
1,4099 45,080 1,4151 47,625 1,4203 50,122 1,4255 52,571
1,4100 45,130 1,4152 47,674 1,4204 50,169 1,4256 52,618
1,4101 45,179 1,4153 47,722 1,4205 50,217 1,4257 52,664
1,4102 45,228 1,4154 47,771 1,4206 50,264 1,4258 52,711
1,4103 45,278 1,4155 47,819 1,4207 50,312 1,4259 52,758
1,4104 45,327 1,4156 47,868 1,4208 50,359 1,4260 52,804
1,4105 45,376 1,4157 47,916 1,4209 50,407 1,4261 52,851
1,4106 45,426 1,4158 47,964 1,4210 50,454 1,4262 52,897
1,4107 45,475 1,4159 48,013 1,4211 50,502 1,4263 52,944 93
1,4108 45,524 1,4160 48,061 1,4212 50,549 1,4264 52,990
1,4109 45,574 1,4161 48,109 1,4213 50,596 1,4265 53,037
1,4110 45,623 1,4162 48,158 1,4214 50,644 1,4266 53,083
1,4111 45,672 1,4163 48,206 1,4215 50,691 1,4267 53,130
1,4112 45,721 1,4164 48,254 1,4216 50,738 1,4268 53,176
1,4113 45,770 1,4165 48,302 1,4217 50,786 1,4269 53,223
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado


20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4270 53,269 1,4322 55,661 1,4374 58,011 1,4426 60,320


1,4271 53,316 1,4323 55,707 1,4375 58,056 1,4427 60,364
1,4272 53,362 1,4324 55,752 1,4376 58,101 1,4428 60,408
1,4273 53,408 1,4325 55,798 1,4377 58,145 1,4429 60,452
1,4274 53,455 1,4326 55,844 1,4378 58,190 1,4430 60,496
1,4275 53,501 1,4327 55,889 1,4379 58,235 1,4431 60,540
1,4276 53,548 1,4328 55,935 1,4380 58,279 1,4432 60,584
1,4277 53,594 1,4329 55,980 1,4381 58,324 1,4433 60,623
1,4278 53,640 1,4330 56,026 1,4382 58,369 1,4434 60,672
1,4279 53,686 1,4331 56,071 1,4383 58,413 1,4435 60,716
1,4280 53,733 1,4332 56,116 1,4384 58,458 1,4436 60,759
1,4281 53,779 1,4333 56,162 1,4385 58,503 1,4437 60,803
1,4282 53,825 1,4334 56,207 1,4386 58,547 1,4438 60,847
1,4283 53,871 1,4335 56,253 1,4387 58,592 1,4439 60,891
1,4284 53,918 1,4336 56,298 1,4388 58,637 1,4440 60,935
1,4285 53,964 1,4337 56,343 1,4389 58,681 1,4441 60,979
1,4286 54,010 1,4338 56,389 1,4390 58,726 1,4442 61,023
1,4287 54,056 1,4339 56,434 1,4391 58,770 1,4443 61,066
1,4288 54,102 1,4340 56,479 1,4392 58,815 1,4444 61,110
1,4289 54,148 1,4341 56,525 1,4393 58,859 1,4445 61,154
1,4290 54,194 1,4342 56,570 1,4394 58,904 1,4446 61,198
1,4291 54,241 1,4343 56,615 1,4395 58,984 1,4447 61,241
1,4292 54,287 1,4344 56,660 1,4396 58,993 1,4448 61,285
1,4293 54,333 1,4345 56,706 1,4397 59,037 1,4449 61,329
1,4294 54,379 1,4346 56,751 1,4398 59,082 1,4450 61,372
1,4295 54,425 1,4347 56,796 1,4399 59,126 1,4451 61,416
1,4296 54,471 1,4348 56,841 1,4400 59,170 1,4452 61,460
1,4297 54,517 1,4349 56,887 1,4401 59,215 1,4453 61,503
1,4298 54,563 1,4350 56,932 1,4402 59,259 1,4454 61,547
1,4299 54,609 1,4351 56,977 1,4403 59,304 1,4455 61,591
1,4300 54,655 1,4352 57,022 1,4404 59,348 1,4456 61,634
1,4301 54,701 1,4353 57,067 1,4405 59,392 1,4457 61,678
1,4302 54,746 1,4354 57,112 1,4406 59,437 1,4458 61,721
1,4303 54,792 1,4355 57,157 1,4407 59,481 1,4459 61,765
1,4304 54,838 1,4356 57,202 1,4408 59,525 1,4460 61,309
1,4305 54,884 1,4357 57,247 1,4409 59,569 1,4461 61,852
1,4306 54,930 1,4358 57,292 1,4410 59,614 1,4462 61,895
1,4307 54,976 1,4359 57,337 1,4411 59,658 1,4463 61,939
1,4308 55,022 1,4360 57,382 1,4412 59,702 1,4464 61,983
1,4309 55,067 1,4361 57,427 1,4413 59,746 1,4465 62,026
1,4310 55,113 1,4362 57,472 1,4414 59,791 1,4466 62,070
1,4311 55,159 1,4363 57,517 1,4415 59,835 1,4467 62,113
1,4312 55,205 1,4364 57,562 1,4416 59,879 1,4468 62,156
1,4313 55,250 1,4365 57,607 1,4417 59,923 1,4469 62,200
1,4314 55,296 1,4366 57,652 1,4418 59,967 1,4470 62,243
94 1,4315 55,342 1,4367 57,697 1,4419 60,011 1,4471 62,287
1,4316 55,388 1,4368 57,742 1,4420 60,056 1,4472 62,330
1,4317 55,433 1,4369 57,787 1,4421 60,100 1,4473 62,373
1,4318 55,479 1,4370 57,832 1,4422 60,144 1,4474 62,417
1,4319 55,524 1,4371 57,877 1,4423 60,188 1,4475 62,460
1,4320 55,570 1,4372 57,921 1,4424 60,232 1,4476 62,503
1,4321 55,616 1,4373 57,966 1,4425 60,276 1,4477 62,547
M
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado


20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4478 62,590 1,4530 64,823 1,4582 67,019 1,4634 69,181


1,4479 62,633 1,4531 64,865 1,4583 67,061 1,4635 69,222
1,4480 62,677 1,4532 64,908 1,4584 67,103 1,4636 69,263
1,4481 62,720 1,4533 64,950 1,4585 67,145 1,4637 69,304
1,4482 62,763 1,4534 64,992 1,4586 67,186 1,4638 69,346
1,4483 62,806 1,4535 65,035 1,4587 67,228 1,4639 69,387
1,4484 62,849 1,4536 65,078 1,4588 67,270 1,4640 69,428
1,4485 62,893 1,4537 65,120 1,4589 67,312 1,4641 69,469
1,4486 62,936 1,4538 65,163 1,4590 67,354 1,4642 69,510
1,4487 62,979 1,4539 65,205 1,4591 67,396 1,4643 69,551
1,4488 63,022 1,4540 65,248 1,4592 67,437 1,4644 69,593
1,4489 63,065 1,4541 65,290 1,4593 67,479 1,4645 69,634
1,4490 63,108 1,4542 65,333 1,4594 67,521 1,4646 69,675
1,4491 63,152 1,4543 65,375 1,4595 67,563 1,4647 69,716
1.4492 63,195 1,4544 65,417 1,4596 67,604 1,4648 69,757
1,4493 63,238 1,4545 65,460 1,4597 67,646 1,4649 69,798
1,4494 63,281 1,4546 65,502 1,4598 67,688 1,4650 69,839
1,4495 63,324 1,4547 65,544 1,4599 67,729 1,4651 69,880
1,4496 63,367 1,4548 65,587 1,4600 67,771 1,4652 69,921
1,4497 63,410 1,4549 65,629 1,4601 67,813 1,4653 69,962
1,4498 63,453 1,4550 65,672 1,4602 67,854 1,4654 70,003
1,4499 63,496 1,4551 65,714 1,4603 67,895 1,4655 70,044
1,4500 63,539 1,4552 65,756 1,4604 67,938 1,4656 70,085
1,4501 63,582 1,4553 65,798 1,4605 67,979 1,4657 70,126
1,4502 63,625 1,4554 65,841 1,4606 68,021 1,4658 70,167
1,4503 63,668 1,4555 65,883 1,4607 68,063 1,4659 70,208
1,4504 63,711 1,4556 65,925 1,4608 68,104 1,4660 70,249
1,4505 63,754 1,4557 65,967 1,4609 68,146 1,4661 70,290
1,4506 63,797 1,4558 66,010 1,4610 68,187 1,4662 70,331
1,4507 63,840 1,4559 66,052 1,4611 68,229 1,4663 70,372
1,4508 63,882 1,4560 66,094 1,4612 68,270 1,4664 70,413
1,4509 63,925 1,4561 66,136 1,4613 68,312 1,4665 70,453
1,4510 63,968 1,4562 66,178 1,4614 68,353 1,4666 70,494
1,4511 64,011 1,4563 66,221 1,4615 68,395 1,4667 70,535
1,4512 64,054 1,4564 66,263 1,4616 68,436 1,4668 70,576
1,4513 64,097 1,4565 66,305 1,4617 68,478 1,4669 70,617
1,4514 64,139 1,4566 66,347 1,4618 68,519 1,4670 70,658
1,4515 64,182 1,4567 66,389 1,4619 68,561 1,4671 70,698
1,4516 64,225 1,4568 66,431 1,4620 68,602 1,4672 70,739
1,4517 64,268 1,4569 66,473 1,4621 68,643 1,4673 70,780
1,4518 64,311 1,4570 66,515 1,4622 68,685 1,4674 70,821
1,4519 64,353 1,4571 66,557 1,4623 68,726 1,4675 70,861
1,4520 64,396 1,4572 66,599 1,4624 68,768 1,4676 70,902
1,4521 64,439 1,4573 66,641 1,4625 68,809 1,4677 70,943
1,4522 64,481 1,4574 66,683 1,4626 68,850 1,4678 70,984
1,4523 64,524 1,4575 66,725 1,4627 68,892 1,4679 71,024 95
1,4524 64,567 1,4576 66,767 1,4628 68,933 1,4680 71,065
1,4525 64,609 1,4577 66,809 1,4629 68,974 1,4681 71,106
1,4526 64,652 1,4578 66,851 1,4630 69,016 1,4682 71,146
1,4527 64,695 1,4579 66,893 1,4631 69,057 1,4683 71,187
1,4528 64,737 1,4580 66,935 1,4632 69,098 1,4684 71,228
1,4529 64,780 1,4581 66,977 1,4633 69,139 1,4685 71,268
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado


20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4686 71,309 1,4738 73,405 1,4790 75,469 1,4842 77,502


1,4687 71,349 1,4739 73,445 1,4791 75,508 1,4843 77,541
1,4688 71,390 1,4740 73,485 1,4792 75,547 1,4844 77,580
1,4689 71,431 1,4741 73,524 1,4793 75,587 1,4845 77,619
1,4690 71,471 1,4742 73,564 1,4794 75,626 1,4846 77,657
1,4691 71,512 1,4743 73,604 1,4795 75,666 1,4847 77,696
1,4692 71,552 1,4744 73,644 1,4796 75,705 1,4848 77,735
1,4693 71,593 1,4745 73,684 1,4797 75,744 1,4849 77,774
1,4694 71,633 1,4746 73,724 1,4798 75,784 1,4850 77,812
1,4695 71,674 1,4747 73,764 1,4799 75,823 1,4851 77,851
1,4696 71,714 1,4748 73,804 1,4800 75,862 1,4852 77,890
1 4697 71,755 1,4749 73,844 1,4801 75,901 1,4853 77,928
1 4698 71,795 1,4750 73,884 1,4802 75,941 1,4854 77,967
1,4699 71,836 1,4751 73,924 1,4803 75,980 1,4855 78,006
1,4700 71,876 1,4752 73,963 1,4804 76,019 1,4856 78,045
1,4701 71,917 1,4753 74,003 1,4805 76,058 1,4857 78,083
1,4702 71,957 1,4754 74,043 1,4806 76,098 1,4858 78,122
1,4703 71,998 1,4755 74,083 1,4807 76,137 1,4859 78,160
1,4704 72,038 1,4756 74,123 1,4808 76,176 1,4860 78,199
1,4705 72,078 1,4757 74,162 1,4809 76,215 1,4861 78,238
1,4706 72,119 1,4758 74,202 1,4810 76,254 1,4862 78,276
1,4707 72,159 1,4759 74,242 1,4811 76,294 1,4863 78,315
1,4708 72,199 1,4760 74,282 1,4812 76,333 1,4864 78,353
1,4709 72,240 1,4761 74,321 1,4813 76,372 1,4865 78,392
1,4710 72,280 1,4762 74,361 1,4814 76,411 1,4866 78,431
1,4711 72,320 1,4763 74,401 1,4815 76,450 1,4867 78,469
1,4712 72,361 1,4764 74,441 1,4816 76,489 1,4868 78,508
1,4713 72,401 1,4765 74,480 1,4817 76,528 1,4869 78,546
1,4714 72,441 1,4766 74,520 1,4818 76,567 1,4870 78,585
1,4715 72,482 1,4767 74,560 1,4819 76,607 1,4871 78,623
1,4716 72,522 1,4768 74,599 1,4820 76,646 1,4872 78,662
1,4717 72,562 1,4769 74,633 1,4821 76,685 1,4873 78,700
1,4718 72,602 1,4770 74,678 1,4822 76,724 1,4874 78,739
1,4719 72,643 1,4771 74,718 1,4823 76,763 1,4875 78,777
1,4720 72,683 1,4772 74,758 1,4824 76,802 1,4876 78,816
1,4721 72,723 1,4773 74,797 1,4825 76,841 1,4877 78,854
1,4722 72,763 1,4774 74,837 1,4826 76,880 1,4878 78,892
1,4723 72,803 1,4775 74,876 1,4827 76,919 1,4879 78,931
1,4724 72,843 1,4776 74,916 1,4828 76,958 1,4880 78,969
1,4725 72,884 1,4777 74,956 1,4829 76,997 1,4881 79,008
1,4726 72,924 1,4778 74,995 1,4830 77,036 1,4882 79,046
1,4727 72,964 1,4779 75,035 1,4831 77,075 1,4883 79,084
1,4728 73,004 1,4780 75,074 1,4832 77,113 1,4884 79,123
1,4729 73,044 1,4781 75,114 1,4833 77,152 1,4885 79,161
1,4730 73,084 1,4782 75,153 1,4834 77,191 1,4886 79,199
96 1,4731 73,124 1,4783 75,193 1,4835 77,230 1,4887 79,238
1,4732 73,164 1,4784 75,232 1,4836 77,269 1,4888 79,276
1,4733 73,204 1,4785 75,272 1,4837 77,308 1,4889 79,314
1,4734 73,244 1,4786 75,311 1,4838 77,347 1,4890 79,353
1,4735 73,285 1,4787 75,350 1,4839 77,386 1,4891 79,391
1,4736 73,325 1,4788 75,390 1,4840 77,425 1,4892 79,429
1,4737 73,365 1,4789 75,429 1,4841 77,463 1,4893 79,468
M
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado


20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4894 79,506 1,4946 81,480 1,4998 83,425 1,5050 85,343


1,4895 79,544 1,4947 81,518 1,4999 83,463 1,5051 85,379
1,4896 79,582 1,4948 81,555 1,5000 83.500 1,5052 85,416
1,4897 79,620 1,4949 81,593 1,5001 83,537 1,5053 85,452
1,4898 79,659 1,4950 81,631 1,5002 83,574 1,5054 85,489
1,4899 79,697 1,4951 81,668 1,5003 83,611 1,5055 85,525
1,4900 79,735 1,4952 81,706 1,5004 83,648 1,5056 85,562
1,4901 79,773 1,4953 81,744 1,5005 83,685 1,5057 85,598
1,4902 79,811 1,4954 81,781 1,5006 83,722 1,5058 85,635
1,4903 79,850 1,4955 81,819 1,5007 83,759 1,5059 85,672
1,4904 79,888 1,4956 81,856 1,5008 83,796 1,5060 85,703
1,4905 79,925 1,4957 81,894 1,5009 83,833 1,5061 85,744
1,4906 79,964 1,4958 81,932 1,5010 83,870 1,5062 85,781
1,4907 80,002 1,4959 81,969 1,5011 83,907 1,5063 85,817
1,4908 80,040 1,4960 82,007 1,5012 83,944 1,5064 85,854
1,4909 80,078 1,4961 82,044 1,5013 83,981 1,5065 85,890
1,4910 80,116 1,4962 82,082 1,5014 84,018 1,5066 85,927
1,4911 80,154 1,4963 82,119 1,5015 84,055 1,5067 85,963
1,4912 80,192 1,4964 82,157 1,5016 84,092 1,5068 86,000
1,4913 80,231 1 4965 82,194 1,5017 84,129 1,5069 86,036
1,4914 80,269 1 4966 82,232 1,5018 84,166 1,5070 86,072
1,4915 80 307 1,4967 82,269 1,5019 84,203 1,5071 86,109
1,4916 80 345 1,4968 82,307 1,5020 84,240 1,5072 86,145
1,4917 80,383 1,4969 82,344 1,5021 84,277 1,5073 86,182
1,4918 80,421 1,4970 82,381 1,5022 84,314 1,5074 86,218
1,4919 80,459 1,4971 82,419 1,5023 84,351 1,5075 86,254
1,4920 80,497 1,4972 82,456 1,5024 84,333 1,5076 86,291
1,4921 80,534 1,4973 82,494 1,5025 84,424 1,5077 86,327
1,4922 80,572 1,4974 82,531 1,5026 84,461 1,5078 86,363
1,4923 80,610 1,4975 82,569 1,5027 84,498 1,5079 86,399
1,4924 80,648 1,4976 82,606 1,5028 84,535
1,4925 80,686 1,4977 82,643 1,5029 84,572
1,4926 80,724 1,4978 82,681 1,5030 84,609
1,4927 80,762 1,4979 82,718 1,5031 84,645
1,4928 80,800 1,4980 82,755 1,5032 84,682
1,4929 80,838 1,4981 82,793 1,5033 84,719
1,4930 80,876 1,4982 82,830 1,5034 84,756
1,4931 80,913 1,4983 82,867 1,5035 84,792
1,4932 80,951 1,4984 82,905 1,5036 84,829
1,4933 80,989 1,4985 82,942 1,5037 84,866
1,4934 81,027 1,4986 82,979 1,5038 84,903
1,4935 81,065 1,4987 83,016 1,5039 84,939
1,4936 81,103 1,4988 83,054 1,5040 84,976
1,4937 81,140 1,4989 83,091 1,5041 85,013
1,4938 81,178 1,4990 83,128 1,5042 85,049
1,4939 81,216 1,4991 83,165 1,5043 85,086 97
1,4940 81,254 1,4992 83,202 1,5044 85,123
1,4941 81,291 1,4993 83,240 1,5045 85,159
1,4942 81,329 1,4994 83,277 1,5046 85,195
1,4943 81,367 1,4995 83,314 1,5047 85,233
1,4944 81,405 1,4996 83,351 1,5048 85,269
1,4945 81,442 1,4997 83,388 1,5049 85,306
TABLA Il

GRADO BRIX
Temp.
°C 0 5 10 15 20 25 30 40 50 60 70

10 0,50 0,54 0,58 0,61 0,64 0,66 0,68 0,72 0,74 0,76 0,79
11 0,46 0,49 0,53 0,55 0,58 0,60 0,62 0,65 0,67 0,69 0,71
12 0,42 0,45 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,61 0,63
13 0,37 0,40 0,42 0,44 0,46 0.48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55
14 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48
RESTAR
15 0,27 0,29 0,31 0,33 0,34 0,34 0,35 0,37 0,38 0,39 0,40
16 0,22 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,28 0,30 0,30 0,31 0,32
17 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,21 0,21 0,22 0,23 0,23 0,24
18 0,12 0,13 0,13 0,14 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,16 0,16
19 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,08 0,08

21 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08
22 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,15 0,16 0,16 0,16
23 0,19 0,20 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24
24 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 0,32
25 0,33 0,35 0,36 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,40 0,40 0,40
SUMAR
26 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,48 0,48 0,48
27 0,48 0,50 0,52 0,53 0,54 0,55 0,55 0,56 0,56 0,56 0,56
28 0,56 0,57 0,60 0,61 0,62 0,63 0,63 0,64 0,64 0,64 0,64
29 0,64 0,66 0,68 0,69 0,71 0,72 0,72 0,73 0,73 0,73 0,73
30 0,72 0,74 0,77 0,78 0,79 0,80 0,80 0,81 0,81 0,81 0,81

2. DENSIDAD 2.4. Procedimiento.


Si el líquido a analizar contiene una apreciable
2.1. Principio. cantidad de gas carbónico, conviene eliminar
La densidad (20°/20ºC) del líquido a analizar completamente éste agitando fuertemente en un
se determina por medio del picnómetro. Erlenmeyer y filtrarlo a continuación por medio de
un filtro cubierto de un vidrio de reloj.
2.2. Material y aparatos. 2.4.1 Determinación del peso del picnómetro
2.2.1. Estufa. vacío: Limpiar el picnómetro con Mezcla crómica
2.2.2. Desecador. DERQUIM, caliente si es necesario; después
2.2.3. Baño a 20°C. enjuagar cuidadosamente con Agua PA-ACS.
2.2.4. Balanza analítica sensible a 0,1 mg. Secar durante tres horas en la estufa a 105-
2.2.5. Picnómetro Reischauer de 50 ml o si- 108ºC. Enfriar en desecador hasta temperatura
milar. ambiente y expresar el resultado con cuatro cifras
El picnómetro Reischauer consiste en un decimales.
matraz de 50 ml de capacidad, cerrado con 2.4.2. Determinación del peso del picnómetro
un capuchón esmerilado provisto de un cuello de lleno de agua. Llenar el picnómetro hasta la marca
6 cm de longitud y 4 mm de diámetro interior. con Agua PA-ACS. Tapar y ponerlo en un baño de
2.2.6. Erlenmeyer de 500 ml. agua a 20ºC durante veinte minutos. Estando la
98 2.2.7. Embudo de 10 cm de diámetro. temperatura equilibrada, enrasar el picnómetro
2.2.8. Tubos capilares. (siempre sumergido en el baño de agua) con la
ayuda de un capilar.
2.3. Reactivos. Secar la parte vacía del cuello del picnómetro
131074 Agua PA-ACS por medio del papel de filtro.
502612 DERQUIM Mezcla crómica Colocar el tapón, retirar el picnómetro del
Papel de filtro baño de agua y secar cuidadosamente. El peso
M
del picnómetro lleno de agua debe ser determina- Tomar un volumen de muestra exento de dióxi-
do con una precisión de cuatro cifras decimales. do de carbono y determinar el pH.
2.4.3. Determinación del peso del picnómetro
lleno de muestra: Después de haber vaciado el 3.5. Expresión de los resultados.
picnómetro, lavar varias veces con la muestra y Expresar el pH medido a 20ºC con uno o dos
proceder como en 2.4.2., sustituyendo el Agua decimales, según la precisión del aparato.
PA-ACS por zumo de uva.
3.6. Observaciones.
2.5. Cálculos. 3.6.1. Antes de cada nueva medida, limpiar los
Calcular la densidad 20º/20°C aplicando la electrodos con agua destilada y secarlos con
siguiente fórmula: papel de filtro.
3.6.2. El electrodo de calomelanos debe ser
c-a llenado de tiempo en tiempo de solución saturada
d = ——— de ClK.
b-a 3.6.3. El electrodo de vidrio debe ser conser-
vado en agua y el de calomelanos en solución
Siendo: saturada de ClK. Los electrodos combinados
a = Peso picnómetro vacío. deben ser conservados en solución saturada de
b = Peso picnómetro lleno de agua hasta la ClK.
marca. 3.6.4. El calibrado se hace con ayuda de las
c = Peso picnómetro lleno de líquido para soluciones tampones siguiendo las indicaciones
analizar hasta la marca. particulares del fabricante del aparato.
La densidad obtenida debe expresarse con
una precisión de cuatro cifras decimales. 3.7. Referencias.
Federation International des Producteurs de
2.6. Referencias. Jus de Fruits. Método número 11, año 1968.
Federation Internationale des Producteurs de
Jus de Fruits. Método número 1, 1968.
4. ACIDEZ TOTAL

3. pH 4.1. Principio.
Valoración potenciométrica a pH=8,1 de la aci-
3.1. Principio. dez del zumo de uva, previa eliminación del dióxi-
Medida potenciométrica a 20ºC, previa elimi- do de carbono.
nación del dióxido de carbono por agitación en
frío y con vacío parcial. 4.2. Material y aparatos.
4.2.1. pH-metro con electrodo/s para medidas
3.2. Material y aparatos. de pH.
3.2.1. pH-metro. 4.2.2. Agitador magnético.
3.2.2. Electrodo/s para medida de pH.
4.3. Reactivos.
3.3. Reactivos. 171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE
131074 Agua PA-ACS
131481 Potasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO 4.4. Procedimiento.
272168 Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02 Tomar 20 ml del zumo de uva, exento de dióxi-
(20ºC) ST do de carbono, obtenido como en 3.4, y llevar a
272170 Tampón, Solución pH 7,00 ± 0,02 un vaso de unos 100 ml de capacidad. Poner en
(20ºC) ST marcha el agitador y valorar con solución 4.3 has-
ta pH 8,1 a 20ºC.
3.3.1. Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02 Mantener en marcha el agitador durante la
(20ºC) ST o prepararla disolviendo 10,211 g de operación, que debe durar, como mínimo, cinco
Potasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO (KHC6H 4O 4) minutos.
(secado una hora a 105ºC) en un litro de Agua PA-
ACS a 20ºC. 4.5. Cálculos. 99
Calcular la acidez total expresada en meq/l,
3.4. Procedimiento. con una aproximación de 0,1 meq/l, o en gramos
Introducir un volumen adecuado de muestra de ácido tartárico/l.
en un kitasato. Conectar a vacío agitando al mis-
mo tiempo el matraz, hasta eliminación del gas
carbónico.
V 181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV
Acidez total (meq/l) = 10 —— 5.3.1. Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N) SV
2 5.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Eta-
nol 96% PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluir
V convenientemente.
Acidez total (g ac.tartárico/l) = 0,75 —— 5.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo
2 0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 y
determinar el factor.
Siendo: 5.3.4. Almidón soluble RE.
V= Volumen, en ml, de solución de Sodio
Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE 5.4. Procedimiento
Alimentar el generador de vapor con Agua de
4.6. Referencias Cal solución saturada RE o Agua de Barita solución
Recuil des Méthodes Internationales d’Analyse saturada RE limpia, manteniéndolo lleno hasta
des Vins O.I.V. A 10 (1969), 1-3. unos 2/3 de su volumen. Poner en el borboteador
20 ml de zumo de uva exento de gas carbónico,
como en 3.4. Añadir al zumo de uva unos 0,5 g de
5. ACIDEZ VOLATIL Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO, poner en marcha
el generador de vapor, manteniendo abierta la sali-
5.1. Principio. da del tubo purgador del vapor; después de cerrar
Separación de los ácidos volátiles del zumo de éste, calentar el borboteador. Durante la operación
uva por arrastre con vapor de agua, evitando la se regula el calentador de forma que el volumen del
presencia de dióxido de carbono en el destilado. líquido en el borboteador no pase sensiblemente
Valoración con solución de sodio hidróxido, des- de los veinte ml iniciales.
contando los contenidos de ácido sórbico y de
Destilar en unos doce-quince minutos 250 ml.
dióxido de azufre libre y total.
Valorar con Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N)
SV en presencia de dos gotas de Fenolftaleína
5.2. Material y aparatos.
como indicador.
5.2.1. Aparato para destilación (ver figura 21.I
Valorar el dióxido de azufre libre en este mismo
pág. 52).
destilado, añadiendo al terminar la valoración
5.2.1.1. Matraz generador de vapor de 3.500 ml
anterior una gota de Acido Clorhídrico 37%
(a). El agua condensada en el tubo de unión del
PA-ACS-ISO, para acidular nuevamente, valoran-
matraz con el borboteador, se purga por el purga-
do el dióxido de azufre libre con solución de Yodo
dor (c).
0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidón solu-
5.2.1.2. Borboteador (b). Tubo cilíndrico de
3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tubo ble RE como indicador y un cristal de Potasio
reposa sobre un disco de amianto de 15 cm de Yoduro PA-ISO.
diámetro con un orificio central de 29 mm. El tubo Para determinar el dióxido de azufre combina-
(d) por el que entra el vapor en el borboteador do con el Acetaldehído, añadir 20 ml de solución
debe llegar a 1cm del fondo. saturada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-
5.2.1.3. Columna rectificadora (e). De 20 mm ACS-ISO (el liquido toma un color rosa pálido) y
de diámetro y 50 cm de altura. valorar nuevamente con solución de Yodo 0,01N.
5.2.1.4. Refrigerante de West (f). De 40 cm de
longitud útil, colocado verticalmente. 5.5. Cálculos.
Calcular la acidez volátil expresada en meq/l o
5.3. Reactivos. en g de ácido acético/l.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO Acidez volátil (meq/l)=5(V/2-V’/10-V’’/20)
131066 Acido L(+) Tartárico PA-ACS-ISO
171073 Agua de Cal solución saturada RE Acidez volátil (g/l ácido acético)=0,3(V/2-
(o 171071 Agua de Barita solución V’/10-V”/20)
saturada RE)
131074 Agua PA-ACS Siendo:
100 171096 Almidón soluble RE V = Volumen en ml utilizados de solución de
sodio hidróxido 0,05N.
121085 Etanol 96% PA
131325 Fenolftaleína PA-ACS V’ = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en
131542 Potasio Yoduro PA-ISO la oxidación del dióxido de azufre libre.
131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato V” = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en
PA-ACS-ISO la oxidación del dióxido de azufre combi-
182153 Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N) SV nado con el acetaldehído.
M
5.6. Observaciones. liza según la norma Jaulmes, descontándose Ia
5.6.1. La determinación de la acidez volátil se totalidad del contenido en dióxido de azufre libre y
efectuará inmediatamente después de la apertura la mitad del contenido de dióxido de azufre total.
del envase.
5.6.2. En la destilación del zumo de uva para
la determinación de la acidez volátil, el ácido sór- 6. SOLIDOS SOLUBLES
bico pasa casi en su totalidad al destilado, fal-
seando el resultado del análisis. Efectuar la El contenido en sólidos solubles expresado en
corrección. g/l se calcula a partir del valor de la densidad,
100 mg de ácido sórbico equivalen a 0,892 obtenida según el método oficial número 2 y utili-
meq = 0,0535 g de ácido acético. zando la tabla adjunta.
5.6.3. La corrección de la acidez volátil se rea-

TABLA 6.1

Estracto seco total (g/l)

Densidad Tercer decimal de la densidad relativa


relativa
con dos
decimales 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Gramos por litro del extracto

1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9 15,4 18,0 20,6 23,2

1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8 41,3 43,9 46,5 49,1
1,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7 67,3 69,9 72,5 75,1
1,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7 93,3 95,9 98,5 101,1
1,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8 119,4 122,0 124,6 127,2

1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9 145,5 148,1 150,7 153,3

1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0 171,6 174,3 176,9 179,5
1,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2 197,8 200,5 203,1 205,8
1,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5 224,1 226,8 229,4 232,0
1,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8 250,4 253,1 255,7 258,4

1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2 276,8 279,5 282,1 284,8

1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6 303,3 305,9 308,6 311,2
1,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1 329,8 332,4 335,1 337,8
1,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7 356,3 359,0 361,6 364,3
1,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3 382,9 385,6 388,3 390,9

1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9 409,6 412,3 415,0 417,6

1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7 436,4 439,0 441,7 444,4
1,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5 463,2 465,9 468,6 471,3
1,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4 490,1 492,8 495,5 498,2 101
1,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3 517,0 519,7 522,4 525,1

1,20 527,8 530,5 533,3 536,0 538,7 541,4 544,1 546,8 549,6 552,3

1,21 555,0 557,7 560,4 563,1 565,8 568,5 571,2 573,9 576,6 579,3
TABLA 6.1

(Continuación)

Densidad Tercer decimal de la densidad relativa


relativa
con dos
decimales 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Gramos por litro del extracto

1,22 582,0 584,8 587,5 590,2 593,0 595,7 598,4 601,1 603,9 606,6
1,23 609,3 612,1 614,8 617,5 620,3 623,0 625,7 628,4 631,2 633,9
1,24 636,6 639,4 642,1 644,9 647,4 650,3 653,1 655,8 658,6 661,3

1,25 664,0 666,8 669,5 672,3 675,0 677,7 680,5 683,2 686,0 688,7

1,26 691,4 694,2 697,0 699,8 702,5 705,3 708,1 710,8 713,6 710,4
1,27 719,1 721,9 724,7 727,4 730,2 732,9 735,7 738,5 741,2 744,0
1,28 746,7 749,5 752,3 755,1 757,8 760,6 763,4 766,1 768,9 771,7
1,29 774,4 777,2 780,0 782,8 785,6 788,3 791,1 793,9 796,7 799,5

1,30 802,3 805,0 807,8 810,6 813,4 816,2 819,0 821,8 824,6 827,4

1,31 830,2 833,1 835,9 838,7 841,5 844,3 847,1 849,9 852,7 855,5
1,32 858,3 861,2 864,0 866,8 869,6 872,4 875,3 878,1 880,9 883,7
1,33 886,5 889,4 892,2 895,0 897,9 900,7 903,5 906,4 909,2 912,0
1,34 914,8 917,7 920,5 923,3 926,2 929,0 931,8 934,7 937,5 940,3
1,35 943,1

TABLA DE INTERPOLAR

4° decimal
de la densidad
relativa g/l del extracto seco

1 0,26
2 0,52
3 0,78
4 1,04
5 1,30
6 1,56
7 1,82
102 8 2,08
9 2,34
M
7. AZUCARES TOTALES Y REDUCTORES Disolver 50 g de Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-
ISO en 500 ml de Agua PA-ACS y 143,7 g de Sodio
7.1. Principio. Carbonato anhidro PA-ACS-ISO en 350 ml de Agua
Eliminación previa de todas las materias reducto- PA-ACS tibia; cuando se haya enfriado, mezclar
ras distintas de los azúcares por defecación, inver- con cuidado ambas soluciones. Disolver 25 g de
sión y posterior valoración basada en la acción Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml
reductora de los azúcares sobre una solución de Agua PA-ACS. Añadir a la solución anterior y
cupro-alcalina. enrasar con Agua PA-ACS hasta 1 l.
7.3.10. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.
7.2. Material y aparatos. 7.3.11. Solución de Fenolftaleína: Disolver 0,1 g
7.2.1. Material necesario para volumetrías. de Fenolftaleína PA-ACS en 100 ml de Etanol 96%
7.2.2. Baño de agua. v/v PA.
7.2.3. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de
reflujo. 7.4. Procedimiento.
7.4.1. Preparación de la muestra: Tomar con
7.3. Reactivos pipeta 25 ml de la muestra en matraz aforado de
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO 500 ml. Añadir 150 ml de Agua PA-ACS y 5 ml de la
131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO solución Carrez I; mezclar y añadir 5 ml de la solu-
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO ción Carrez II. Mezclar y enrasar con Agua PA-ACS.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO Dejar en reposo diez minutos y filtrar.
131074 Agua PA-ACS 7.4.2. Inversión de los azúcares: Tomar con
171096 Almidón soluble RE pipeta 25 ml de la muestra preparada según (7.4.1.)
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y llevar a un matraz de 100 o 200 ml, según la dilu-
121085 Etanol 96% v/v PA ción a emplear. Diluir con Agua PA-ACS hasta 75 ml
131325 Fenolftaleína PA-ACS y añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 1-hidrato PA-
131505 Potasio Hexacianoferrato III 3-hidrato ACS-ISO. Antes de 5 minutos llevarlo a 67-70°C en
PA-ACS un baño de agua, mantenerlo durante cinco minu-
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO tos a esa temperatura. Comprobar la temperatura
con un termómetro introducido en la disolución.
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
Enfriar inmediatamente el matraz a 20°C, quitar el
172174 Reactivo de Luff-Schoorl RE
termómetro y aclararlo. Neutralizar el contenido con
131648 Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO
solución de Potasio Hidróxido al 30%, utilizando
181723 Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV
Fenolftaleína como indicador. Añadir unas gotas de
121787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO hasta que el
color de la Fenolftaleína desaparezca. Enrasar el
7.3.1. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % en
matraz con Agua PA-ACS.
volumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico
7.4.3. Determinación de los azúcares totales:
96% PA-ISO con Agua PA-ACS. La solución de la muestra no debe contener más
7.3.2. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO. de 50 mg de azúcares reductores. Tomar con
7.3.3. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. pipeta 25 ml de la muestra preparada según
7.3.4. Solución de Potasio Hidróxido al 30%. (7.4.2.) sobre un matraz que contenga 25 ml de la
Disolver unos gramos de Potasio Hidróxido 85% solución de Luff-Schoorl (7.3.9.). Añadir al matraz
lentejas PA-ISO en el volumen conveniente de Agua unas perlas de vidrio y conectar el refrigerante de
PA-ACS. reflujo. Calentar el matraz con llama potente
7.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%. Use- durante dos minutos y mantener a ebullición
se Potasio Yoduro PA-ISO, disuelto con Agua PA- durante diez minutos exactos. Enfriar inmediata-
ACS hasta la concentración deseada. Conservar en mente en agua. Cuando esté completamente frío,
frasco topacio. añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro
7.3.6. Solución de Almidón al 1%. Disolver 1 g (7.3.5.) y, con cuidado, 25 ml de la solución de
de Almidón soluble RE con Agua PA-ACS, enra- Acido Sulfúrico (7.3.1.). Añadir 2 ml de la solución
sando a 100 ml. de Almidón (7.3.6.) y valorar el contenido del
7.3.7. Solución de Carrez I: matraz con solución de Sodio Tiosulfato 0,1mol/l
Disolver 150 g de Potasio Hexacianoferrato III 3-
hidrato PA-ACS en un litro de Agua PA-ACS.
(0,1N) SV (7.3.10.) hasta obtener una coloración 103
blanca cremosa. Si se hubieran empleado menos
7.3.8. Solución de Carrez II: de 5 ml en la valoración, repetir la determinación
Disolver 300 g de Zinc Sulfato 7-hidrato PA en un utilizando una dilución de la muestra más ade-
litro de Agua PA-ACS. cuada.
7.3.9. Reactivo de Luff-Schoorl RE, o bien pre- Realizar en paralelo una determinación en blan-
pararlo de la siguiente forma: co, empleando 25 ml de Agua PA-ACS.
7.4.4. Azúcares reductores: Para la determina- 8. ACIDO ASCORBICO
ción de azúcares reductores seguir el mismo proce-
dimiento suprimiendo la inversión (7.4.2.). 8.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación del
7.5. Cálculos. ácido ascórbico por cromatografía de líquidos de
Sea D la diferencia entre lo gastado de Sodio alta eficacia, detectándolo en el ultravioleta a
Tiosulfato por el blanco y lo gastado por la muestra. 268 nm.
La concentración de azúcares totales expresados
en glucosa se obtiene del valor D en la tabla, inter- 8.2. Material y aparatos.
polando en caso necesario y multiplicando por el 8.2.1. Equipo de filtración de muestra y disolven-
factor de dilución. te para eliminar partículas superiores a 0,5 mm.
8.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con
7.6. Referencias. detector de ultravioleta de longitud de onda variable
Federation International des Producteurs de Jus y registrador.
de Fruits. Método número 4. Año 1985. 8.2.3. Columna NH 2 - Lichorsob de 250 x
4,6 mm fr 10 mm o similar.

8.3. Reactivos.
263093 Acetonitrilo-gradiente HPLC
131013 Acido L(+)-Ascórbico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
Tabla 7,1 PA-ACS-ISO

Para 25 ml de reactivo de Luff-Schoorl 8.3.1. Solución patrón de Acido Ascórbico de


300 mg/l, preparada con Acido L(+) - Ascórbico
D = ml de Tiosulfato mg de Glucosa Diferencia PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS y conservada en
matraz color topacio.
1 2,4 2,4 8.3.2. Solución A: Tampón fosfato pH 3,5. Diso-
2 4,8 2,4 lución 0,005M de Potasio di-Hidrógeno Fosfato
3 7,2 2,5 PA-ACS-ISO (KH2PO4): Filtrar esta solución con
4 9,7 2,5 (8.2.1.).
5 12,2 2,5 8.3.3. Solución B: Acetonitrilo-gradiente HPLC.
6 14,7 2,6
7 17,2 2,6 8.4. Procedimiento.
8 19,8 2,6 8.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas:
9 22,4 2,6 Fase móvil: Tampón Potasio di-Hidrógeno Fosfa-
10 25,0 2,6 to/Acetonitrilo-gradiente HPLC: 60/40 (v/v).
11 27,6 2,7 Flujo : 1 ml/minuto.
12 30,3 2,7 8.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafo
13 33,0 2,7 entre 10 y 20 ml de la solución patrón (7.3.1.) y cal-
14 35,7 2,7 cular el factor de respuesta.
15 38,5 2,8
16 41,3 2,9 Co
17 44,2 2,9 Factor de respuesta (F) = ––––
18 47,1 2,9 Ap
19 50,0 3,0
20 53,0 3,0 Siendo:
21 56,0 3,0 Co = Concentración en mg/l de ácido ascór-
22 59,1 3,1 bico.
23 62,2 Ap = Area del pico en el cromatograma de la
solución patrón.

104 8.4.3. Determinación: Homogeneizar. Filtrar


mediante (8.2.1.) e inyectar de 10 a 20 ml en el cro-
matógrafo.

8.5. Cálculos.
El contenido de ácido ascórbico, expresado en
M
mg/l (sin decimales), se obtendrá mediante la 9.4.2. Calibrado: inyectar en el cromatógrafo una
siguiente fórmula: cantidad conocida de la solución patrón y calcular
los factores de respuesta.
Acido ascórbico (mg/l) = F x Ac
Co
Siendo: Factor de respuesta (F) = ––––
F = Factor de respuesta. Ap
Ac = Area del pico del ácido ascórbico en la
muestra. Siendo:
Co = Concentración en g/l del patrón.
8.6. Observaciones. Ap = Area del pico patrón en el cromatograma.
8.6.1. La determinación del ácido ascórbico se
realizará inmediatamente después de la apertura 9.4.3. Determinación: Filtrar la muestra mediante
del envase. los equipos del apartado (9.2.1.) e inyectar una can-
8.6.2. Con este método no se determina ácido tidad conocida en la columna.
dehidroascórbico.
9.5. Cálculos
El contenido en glucosa y fructosa, expresado
9. RELACION GLUCOSA-FRUCTOSA en g/l, se obtiene mediante la siguiente fórmula:

9.1. Principio. Glucosa (g/l) = F1 x A1 x f


Separación, identificación y cuantificación de
glucosa y fructosa por cromatografía de líquidos de Fructosa (g/l) = F2 x A2 x f
alta eficacia con detector de índice de refracción.
Siendo:
9.2. Material y aparatos. F1 = Factor de respuesta de la glucosa.
9.2.1. Equipos de filtración de muestra y disol- F2 = Factor de respuesta de la fructosa.
ventes para eliminar partículas superiores a 0,5 mm. f = Factor de dilución.
9.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con A1 = Area del pico de glucosa en la muestra.
detector de índice de refracción y registrador. A2 = Area del pico de fructosa en la muestra.
9.2.3. Columna Sugar-Pack u otra columna que
permita la separación de glucosa y fructosa. 9.6. Observaciones.
9.2.4. Horno para columna. Los factores de respuesta deben calcularse
varias veces durante una sesión. Es pues recomen-
9.3. Reactivos. dable tener termostatizado el detector.
124559 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódico Cálcica PA
131074 Agua PA-ACS 10. NITROGENO TOTAL
212236 Agua Desionizada QP
121211 Calcio Acetato x-hidrato PA 10.1. Principio.
142728 D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP) Digestión del producto con ácido sulfúrico con-
PRS-CODEX centrado, en presencia de catalizador, en la cual se
121341 D(+)-Glucosa PA transforma el nitrógeno orgánico en iones amonio,
que en medio fuertemente básico es desplazado en
9.3.1. Soluciones patrón de Glucosa y Fructosa forma de amoníaco, y recogido sobre ácido bórico.
al 10% (p/v). Preparar ambas soluciones disolvien- La posterior valoración con ácido clorhídrico per-
do 10 g de D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP) PRS- mite el cálculo de la cantidad inicialmente presente
CODEX y D(+)-Glucosa PA en 100 ml de Agua PA- de nitrógeno orgánico y amoniacal en la muestra.
ACS.
10.2. Material y aparatos.
9.4. Procedimiento. 10.2.1. Aparato Kjeldahl.
9.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas
para la columna Sugar-Pack: 10.3. Reactivos. 105
Fase móvil: Solución de 20 mg/l de Calcio Ace- 131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO
tato x-hidrato PA o Acido Etilendiaminotetraacético 182107 Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV
Sal Disódico Cálcica PA en Agua Desionizada QP y 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Agua PA-ACS. 131074 Agua PA-ACS
Flujo : 0,4-0,5 ml/min. 122726 Cobre II Sulfato anhidro PA
Temperatura del horno : 90-95° C. 121085 Etanol 96% v/v PA
171327 Fenolftaleína solución 1% RE 700 (V1- V0)
Papel Tornasol Nitrógeno (mg/l) = –––––––––––––
131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO V
171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS Siendo:
141625 Selenio metal polvo PRS V = Volumen, en ml, utilizados de muestras.
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO V1 = Volumen, en ml, de solución de ácido clor-
171759 Verde de Bromocresol indicador hídrico empleado en la valoración.
RE-ACS V0 = Volumen, en ml, de solución de ácido clor-
hídrico empleado en el blanco.
10.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
10.3.2. Catalizador de selenio. Mezclar bien pulve- 10.6. Observaciones.
rizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, 20 g de Para efectuar el procedimiento Kjeldahl podrán
Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio metal pol- utilizarse sistemas automáticos o semiautomáticos,
vo PRS. adaptándose a las especificaciones del equipo.
10.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y Papel Tor-
nasol. 10.7. Referencias.
10.3.4. Indicador: Pesar 105 mg de Rojo de Metilo Recueil des Methodes Internationales d’Analyse
(C.I. 13020) RE-ACS y 150 mg de Verde de Bromo- des Vins. O. I. V. A. (40). 1969.
cresol indicador RE-ACS y disolver a 100 ml con Eta-
nol 96% v/v PA.
10.3.5. Solución de Acido Bórico al 1%. Pesar 11. ETANOL
10 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO, disolver con Agua
PA-ACS, añadir 10 ml del indicador (10.3.4.) y enrasar 11.1. Principio.
a 1 litro con Agua PA-ACS. Separación, identificación y cuantificación del
10.3.6. Solución de Sodio Hidróxido al 40%. Disol- etanol por cromatografía gaseosa.
ver Sodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS hasta la concentración deseada. 11.2. Material y aparatos.
10.3.7. Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV. 11.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con
detector de ionización de llama.
10.4. Procedimiento. 11.2.2. Columna cromatográfica. Columna de
Poner en el matraz Kjeldahl 5-10 ml de zumo de 2 m de longitud y 2 mm de diámetro interno, relleno
uva y añadir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. de Porapak Q 80-100 mallas o cualquier otra
Evaporar hasta consistencia siruposa. Añadir 10 ml columna que permita la separación y cuantificación
de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 7 g de catalizador del etanol.
(10.3.2.), continuar calentando primero lentamente y
después enérgicamente hasta decoloración, prose- 11.3. Reactivos.
guir unos minutos más. Si es necesario se van aña- 131074 Agua PA-ACS
diendo nuevas dosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO 351085 Etanol 96% v/v CG
de 5 en 5 ml. 354457 2-Propanol CG
Enfriar el matraz a temperatura ambiente, adicionar
unas gotas de Fenolftaleína solución 1% RE y llevarlo 11.4. Procedimiento.
al aparato de destilación. En un vaso cilíndrico de 11.4.1. Condiciones cromatográficas: Las condi-
unos 200 ml añadir 25 ml de Acido Bórico PA-ACS- ciones cromatográficas orientativas para la columna
ISO (10.3.5.). Añadir al matraz solución de Sodio de Porapak son: Gas portador nitrógeno 35 ml/min.;
Hidróxido (10.3.6.) en cantidad suficiente para viraje temperatura del horno: 130° C; temperatura del
de la Fenolftaleína solución 1% RE. Conectar el apa- inyector y del detector: 180° C.
rato de destilación con el generador de vapor de agua 11.4.2. Calibrado.
y comenzar el arrastre del Amoníaco recogiendo el 11.4.2.1. Patrón interno: Solución al 10% (v/v) de
destilado en la solución de Acido Bórico (10.3.5.). 2-Propanol CG en Agua PA-ACS
Después de quince-veinte minutos, comprobar 11.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución
con Papel de Tornasol si una gota del destilado no de Etanol 96% v/v CG-Agua PA-ACS que contenga el
acusa reacción alcalina. En este caso separar el vaso porcentaje de Etanol que se supone tiene la muestra.
106 y proceder a la valoración. Valorar con Acido Clorhídri- 11.4.2.3. Solución de calibrado: A 100 ml de la
co 0,05 mol/l (0,05N) SV (10.3.7). solución patrón (11.4.2.2.) se le ha de añadir 1 ml de
la solución del patrón interno (11.4.2.1.) y se inyecta
10.5. Cálculo. 1 microlitro en el cromatógrafo.
El contenido en nitrógeno expresado en mg/l 11.4.2.4. Muestra problema: A 100 ml de la mues-
vendrá por la siguiente fórmula: tra añadir 1 ml de la solución patrón interno
(11.4.2.1.) e inyectar 1 microlitro en el cromatógrafo.
M
11.5. Cálculos. Formaldehído (12.3.3.) y mezclar. Al cabo de un
Calcular el factor de respuesta y la concentra- minuto efectuar la valoración potenciométrica de la
ción de etanol en la muestra, aplicando las fórmulas solución problema con la solución de Sodio Hidróxi-
siguientes: do 0,25 mol/l (0,25N) SV hasta pH 8,1.
Si se hubieran utilizado más de 20 ml de la solu-
Ci x Ap ción de Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV,
Factor de respuesta (FR) = ––––––––– deberá realizarse de nuevo la valoración empleando
Ai 15 ml de solución de Formaldehído, en lugar de
Concentración en la muestra 10 ml.
Aim Si la muestra contiene Anhídrido Sulfuroso, aña-
(% en volumen) = FR x ––––––– dir algunas gotas de Hidrógeno Peróxido 30% p/v
Apm (100 vol.) PRS antes de la neutralización.

Siendo: 12.5 Expresión de los resultados.


Ci = Porcentaje en volumen del etanol en la El índice de formol de la muestra analizada es
solución patrón. igual a la cantidad de solución alcalina utilizada en la
Ap = Area del patrón interno en la solución valoración expresada en ml de sodio hidróxido 0,1N
patrón. y que corresponden a 100 ml de zumo de uva.
Ai = Area del etanol en la solución patrón.
Aim = Area del etanol en la muestra problema. 12.6. Referencias.
Apm = Area del patrón interno en la muestra Federation Internationale des Producteurs de
problema. Jus de Fruits. Analyses F.I.P.J.F. No. 30 Año 1984.

11.6 Observaciones. 13. PROLINA


La determinación de etanol se efectuará inme-
diatamente después de la apertura del envase. 13.1. Principio.
Determinación cuantitativa de la prolina por reac-
ción con ninhidrina en medio ácido.
12. INDICE DE FORMOL
13.2. Material y aparatos.
12.1. Principio. 13.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca.
Valoración de la acidez de los compuestos for- 13.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que
mados por la reacción del formaldehído con los a- permita efectuar lecturas a 517 nm.
aminoácidos.
13.3. Reactivos.
12.2. Material y aparatos. 131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS
pH metro. 131074 Agua PA-ACS
141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS
12.3. Reactivos. 132362 Ninhidrina PA-ACS
131328 Formaldehído 36,5-38% p/v 131090 2-Propanol PA-ACS-ISO
estabilizado con metanol PA-ACS
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.) 13.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílico
PRS del Etilenglicol PRS
182155 Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV 13.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS
13.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO-Agua PA-ACS
12.3.1. Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV. 1:1 (v/v).
12.3.2. Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS. 13.4. Procedimiento.
12.3.3. Solución de Formaldehído. Llevar el For- Diluir la muestra hasta que contenga de 5 a
maldehído 36,5-38% p/v estabilizado con metanol 50 mg/l de prolina. Tomar 0,5 ml de muestra diluida
PA-ACS, a pH 8,1 mediante la solución de Sodio e introducirla en un tubo de ensayo con tapón de
Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.), utilizando rosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico 98% PA-
el pH-metro. Comprobar cada hora. ACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al 3%. Cerrar 107
herméticamente el tubo e introducirlo en un baño de
12.4. Procedimiento. agua hirviendo durante catorce o quince minutos,
Poner 25 ml de zumo de uva en un vaso de pre- añadiendo mientras se enfría 5 ml de solución de
cipitados y neutralizar con Sodio Hidróxido 2-Propanol PA-ACS-ISO- Agua PA-ACS 1:1 (v/v).
0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.) hasta pH 8,1, utili- A continuación efectuar la lectura de la absor-
zando el pH-metro. Añadir 10 ml de la solución de ción a 517 nm después de cinco minutos y antes
de treinta minutos. Efectuar un blanco siguiendo el Co
procedimiento anterior, pero usando 0,5 ml de Agua Factor de respuesta (F) = –––––
PA-ACS en vez de la solución problema. Ap
Siendo:
13.5. Interpretación de los resultados. Co = Concentración en mg/l de ácido sórbico.
Calcular el contenido en prolina por compara- Ap = Area del pico en el cromatograma de la
ción con una curva patrón que comprenda concen- solución patrón.
traciones entre 5 y 50 mg/l. 14.4.3. Determinación: Poner 10 ml de zumo de
uva en un matraz de 50 ml y enrasar con Metanol
13.6. Referencias. HPLC. Homogeneizar. Filtrar con 14.2.1. e inyectar
C.S. Dugh J. of Food Science 34 (1969). 228. entre 10 y 20 µl en el cromatógrafo.

14.5. Cálculos.
14. ACIDO SORBICO El contenido en ácido sórbico expresado en mg/l
se obtendrá mediante la siguiente fórmula:
14.1. Principio. Acido Sórbico (mg/l) = F x A1 x f
Separación, identificación y cuantificación del
ácido sórbico por cromatografía de líquidos de alta Siendo:
eficacia y detección en ultravioleta a 230 nm. F = Factor de respuesta.
A1 = Area del pico del ácido sórbico en la
14.2. Material y aparatos. muestra.
14.2.1. Equipos de filtración de muestra y de f = Factor de dilución de la muestra.
solventes, para eliminar partículas superiores a
0,5 mm. 14.6. Observaciones.
14.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con La sensibilidad puede aumentarse efectuando
detector de ultravioleta de longitud de onda variable lecturas a 250 nm.
y registrador.
14.2.3. Columna C-18 de 250x4,6 mm de 10 mm 14.7. Referencias.
o similar. T. Stijve and Hischenhuber-Deutsche Lebensmit-
tel-Rundschau 80, Jahrf/Heft 3/1984.
14.3. Reactivos.
141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
15. ACIDO BENZOICO
131074 Agua PA-ACS
261091 Metanol HPLC 15.1 Principio.
122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidrato Separación, identificación y cuantificación del
PA ácido benzoico por cromatografía de líquidos de
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato alta eficacia y detección en el ultravioleta a 230 nm.
PA-ACS-ISO
15.2. Material y aparatos.
14.3.1. Solución patrón de 50 mg/l de Acido Como en 14.2.
Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX en Metanol HPLC.
14.3.2. Solución tampón de fosfatos de pH = 15.3. Reactivos.
6,6. Disolver 2,5 g de di-Potasio Hidrógeno Fosfato 121014 Acido Benzoico PA
3-hidrato PA (K2HPO4.3H2O) y 2,5 g de Potasio di- 131074 Agua PA-ACS
Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO (KH2PO4) en un 261091 Metanol HPLC
litro de Agua PA-ACS. Filtrar esta solución con 122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidrato
(12.4.1.). PA
14.3.3. Metanol HPLC. 131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
14.4. Procedimiento.
14.4.1. Condiciones cromatográficas orientati- 15.3.1. Solución patrón de Acido Benzoico PA
vas: Fase móvil: Metanol HPLC-tampón fosfato en Metanol HPLC de 50 mg/l.
108 10:90 (v/v). 15.3.2. Como en 14.3.2.
Flujo : 1 ml/min. 15.3.3. Como en 14.3.3.
14.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafo
entre 10 y 20 ml de la solución patrón (14.3.1.) y 15.4 Procedimiento.
calcular el factor de respuesta. Como en 14.4., siendo en este caso Co la concen-
tración en mg/l de Acido Benzoico en la solución
patrón (15.3.1.).
M
15.5. Cálculos. Siendo:
El contenido en ácido benzoico expresado en Co = Concentración, en mg/l, de hidroximetilfur-
mg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula: fural.
Acido benzoico (mg/l) = F x A1 x f Ap = Area del pico en el cromatograma de la
solución patrón.
Siendo:
F = Factor de respuesta. 16.4.3. Determinación: Inyectar en el cromató-
A1 = Area del pico del ácido benzoico en la grafo 20 µl de la muestra filtrada.
muestra.
f = Factor de dilución de la muestra. 16.5. Cálculos.
El contenido en hidroximetilfurfural expresado en
15.6. Observaciones. mg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula:
La sensibilidad puede aumentarse efectuando Hidroximetilfurfural (mg/l) = F x A1 x f
lecturas a 217 nm.
Siendo:
15.7. Referencias. F = Factor de respuesta
Como en 14.7. A1 = Area del pico de HMF en la muestra
f = Factor de dilución de la muestra.
16. HIDROXIMETILFURFURAL

16.1 Principio. 17. CENIZAS


Separación, identificación y cuantificación del
17.1 Principio.
hidroximetilfurfural por cromatografía de líquidos de
Incineración del residuo obtenido tras la evapo-
alta eficacia y detección en el ultravioleta a 285 nm.
ración del zumo de uva realizada de manera que se
16.2. Material y aparatos. puedan obtener todos los cationes (excepto amo-
16.2.1. Equipos de filtración de muestra y de nio) en forma de carbonatos y otras sales minerales
solventes, para eliminar partículas superiores a anhidras.
0,5 µm.
16.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con 17.2. Material y aparatos.
detector ultravioleta de longitud de onda variable y 17.2.1. Cápsulas de platino o cuarzo, de unos
registrador. 80 mm de diámetro, con fondo plano.
16.2.3. Columna C-18 de 200 x 4,6 mm de 5 µm 17.2.2. Baño de agua y arena.
o similar. 17.2.3. Horno eléctrico regulable.
17.2.4. Balanza analítica con sensibilidad de
16.3. Reactivos. 0,1 mg.
131074 Agua PA-ACS
Hidroximetilfurfural 17.3. Procedimiento.
261091 Metanol HPLC Poner 25 ml de zumo de uva en cápsula tarada.
Evaporar con precaución en baño de agua (17.2.2.)
16.3.1. Solución patrón: Solución de 20 mg/l de hasta consistencia siruposa.
Hidroximetilfurfural recientemente destilado en Añadir al residuo unas gotas de aceite de oliva,
Metanol HPLC. calentar lentamente en baño de arena (17.2.2.),
hasta que la mayor parte de la sustancia orgánica
16.4. Procedimiento. esté carbonizada. Introducir la cápsula en el horno
16.4.1. Condiciones cromatográficas orientati- (17.2.3.) a 525° C hasta que el residuo esté blanco
vas: Fase móvil: Agua Destilada y Desionizada. (generalmente a las seis u ocho horas). Enfriar
tiempo de retención aproximado: 7 minutos. enseguida la cápsula en un desecador (unos treinta
Flujo 1 ml/min. minutos) y pesar rápidamente.
16.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafo Puede, ocurrir, a veces, que el carbono no se
20 µl de la solución patrón (16.3.1.) y calcular el fac- quema completamente. En este caso, humidificar
tor de respuesta. las cenizas con Agua PA-ACS, evaporar de nuevo y
calcinar. Si fuera necesario, repetir esta operación 109
Co varias veces.
Factor de respuesta (F) = ––––––
Ap 17.4. Cálculos.
El contenido en cenizas, expresado en gramos
por litro, vendrá dado por la siguiente fórmula:
Cenizas (g/l) = 40 x P
Siendo: 18.5. Cálculos.
P = Peso en g de las cenizas contenidas en El contenido en cenizas insoluble en ácido,
25 ml de zumo de uva. expresadas en mg/l, vendrá dado por la siguiente
expresión:
17.5. Observaciones.
Un ligero color marrón rojizo de las cenizas, posi- Cenizas insolubles mg/l = (P1-P0) x 40
blemente de Fe2O3 es aceptado y no requiere un
posterior tratamiento. Siendo:
P0 = Peso, en mg, de la cápsula vacía o el crisol
17.6. Referencias. vacío.
Federation International des Producteurs de Jus P1 = Peso, en mg, de la cápsula o crisol con las
de Fruits. Método N° 9. Año 1962. cenizas insolubles en ácido.

18.6. Referencias.
18. MATERIAL MINERAL INSOLUBLE Instituto de Racionalización y Normalización del
EN ACIDO CLORHIDRICO AL 10% Trabajo, UNE 34-096-81.
18.1. Principio.
Tratamiento de las cenizas con ácido clorhídrico 19. FOSFORO TOTAL
al 10%, en las condiciones que se especifica en el
método. 19.1. Principio.
Transformación de los compuestos fosforados y
18.2. Material y aparatos. posterior valoración espectrofotométrica como fos-
18.2.1. El mismo que en (17.2.). fomolibdovanadato.
18.2.2. Papel de filtro, sin cenizas, de porosidad
media o crisol filtrante número 3. 19.2. Material y aparatos.
19.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro de
18.3. Reactivos. efectuar lecturas a 400 nm.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO 19.2.2. Cápsula de platino, cuarzo o similar.
131074 Agua PA-ACS
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO 19.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
18.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. 131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
18.3.2. Solución de Acido Clorhídrico al 10% 131074 Agua PA-ACS
(p/p). 131134 Amonio Molibdato 4-hidrato
18.3.3. Solución de Plata Nitrato de 100 g/l. PA-ACS-ISO
Disolver Plata Nitrato PA-ACS-ISO con Agua PA- 122352 Amonio meta-Vanadato PA
ACS hasta la concentración deseada. 131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
18.4. Procedimiento.
Añadir a las cenizas totales en la misma cápsula 19.3.1. Solución patrón de fosfatos. Disolver
que se ha utilizado para su preparación, de 15 a 0,2397 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-
25 ml de la solución de Acido Clorhídrico (18.3.2.). ISO (KH2PO4), desecado previamente en estufa
Llevar la cápsula y mantener a ebullición durante durante dos horas a 105° C, en Agua PA-ACS y enra-
diez minutos. Recubrir la cápsula con vidrio de reloj, sar a 250 ml.
para impedir cualquier proyección. 19.3.2. Solución de Amonio Molibdato. Disolver
Dejar enfriar y filtrar el contenido de la cápsula a 60 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO en
través del papel del filtro o crisol (18.2.2.). Lavar el 900 ml de Agua PA-ACS caliente, enfriar y enrasar a
papel de filtro o crisol con Agua PA-ACS hasta que 1 litro.
las aguas de lavado estén exentas de Acido Clorhí- 19.3.3. Solución de Amonio meta-Vanadato.
drico, lo que se comprueba con la solución de Plata Disolver 1,5 g de Amonio meta-Vanadato PA en
Nitrato (18.3.3.). 690 ml de Agua PA-ACS caliente, añadir 300 ml de
110 Evaporar cuidadosamente e incinerar en el hor- Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, enfriar y enrasar a 1
no regulado a 525° C durante una hora. Dejar litro.
enfriar la cápsula o el crisol y pesar con una preci- 19.3.4. Solución de metamolibdovanadato. Añadir
sión de 0,001 g. Repetir las operaciones de incine- lentamente la solución de Amonio Molibdato (19.3.2.)
ración hasta que la diferencia de masa entre dos sobre la solución de Amonio meta-Vanadato
determinaciones sucesivas sea inferior a 0,001 g. (19.3.3.), agitando. Conservar la solución en frascos
de polietileno.
M
19.3.5. Solución de Acido Clorhídrico. Acido ampolla con llave de 100 ml y tubo de desprendi-
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en miento de vapor, atravesando ambos el tapón. El
(1 + 3) (v/v). matraz se coloca sobre disco metálico de 15 cm de
19.3.6. Solución de Acido Clorhídrico. Acido diámetro con abertura circular de 8 cm de diámetro.
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en 20.2.2. Baño de agua y plancha caliente.
(1 + 9) (v/v).
20.3. Reactivos.
19.4. Procedimiento. 131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
19.4.1. Curva de calibrado. A partir de la solu- 182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV
ción patrón (19.3.1.) preparar una serie de solucio- 131074 Agua PA-ACS
nes que contengan 0,00; 0,05; 0,10; 0,15; 0,20; 131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
0,25; 0,30 y 0,35 mg de P2O5/10 ml respectiva- 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
mente. A continuación poner alícuotas de 10 ml de
cada solución en matraz aforado de 50 ml. Rápida- 20.3.1. Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV.
mente añadir a cada matraz 5 ml del reactivo de 20.3.2. Bario Cloruro. 100 g de Bario Cloruro
Metamolibdovanadato (19.3.4.), mezclar, enrasar y 2-hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-
tapar. Dejar reposar al menos treinta minutos. ACS.
Efectuar las lecturas de los patrones frente a la 20.3.3. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
solución 0,00 antes de una hora, a 400 nm. Repre-
sentar gráficamente concentraciones frente a 20.4. Procedimiento.
absorbancias leídas. 20.4.1. Eliminación del dióxido de azufre del
19.4.2. Preparación de la muestra. Tomar 25 ml zumo de uva. Introducir en el Erlenmeyer del aparato
de zumo de uva y obtener las cenizas según méto- descrito 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido
do oficial número 17. Disolver las cenizas en 10 ml Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solución
de solución de Acido Clorhídrico (19.3.5.) y evapo- para eliminar el aire del aparato. Introducir 100 ml de
rar en baño de agua. Disolver el residuo obtenido en zumo de uva por la ampolla de llave evitando que la
10 ml de solución de Acido Clorhídrico (19.3.6.) ebullición se pare durante esta adición. Continuar la
calentar en baño maría y transferir a matraz de ebullición hasta reducir el volumen del líquido a unos
100 ml, enfriar y enrasar con Agua PA-ACS. Agitar y 100 ml eliminando todo el dióxido de azufre.
filtrar para eliminar las materias insolubles presen- 20.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar el
tes. residuo de la evaporación anterior a un vaso de
19.4.3. Determinación. Tomar 10 ml de filtrado y 400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad de
continuar como en la curva de calibrado (19.4.1.). Agua PA-ACS suficiente para llevar el volumen total
Si el contenido de P2O5 en las cenizas es supe- a 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l
rior a 3,5 mg, llevar a matraz aforado superior a 100 (2N) SV y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota
ml o efectuar diluciones hasta que el contenido de 10 ml de solución de Bario Cloruro, con la precau-
P2O5 en la alícuota sea menor a 0,35 mg. ción de no parar la ebullición y dejar reposar en
caliente, colocando el vaso sobre placa a 60°C
19.5. Cálculos. durante cuatro horas y en baño de agua hirviendo
El contenido en mg de P2O5 en 100 ml de mues- durante dos horas. En el caso de pequeñas canti-
tra se obtendrá mediante la curva de calibrado, dades de precipitado, se recomienda un segundo
teniendo en cuenta las diluciones efectuadas. reposo en frío durante 12 horas. Filtrar por filtro sin
Para expresar el resultado como mg de P en cenizas, lavar el vaso y precipitado con Agua PA-
100 ml de muestra, multiplicar el resultado anterior ACS caliente hasta que no dé reacción con Plata
por 0,437. Nitrato PA-ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente
plegado a crisol de porcelana tarado, desecar, cal-
19.6. Referencias. cinar y, después de enfriar en un desecador, pesar.
Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ª edi-
ción, 1984. 20.5. Cálculos.
Calcular el contenido de sulfatos expresado en
20. SULFATOS meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproxima-
ción de ± 0,05 g/l.
20.1. Principio. Sulfato = 85,68 P meq/l. 111
Previa eliminación del dióxido de azufre por ebu- Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.
llición, se precipitan los iones sulfato como Bario P = peso de las cenizas en g.
Sulfato, se calcina y se pesa.
20.6. Referencias.
20.2. Material y aparatos. Recueil des Méthodes Internationales d’Analyse
20.2.1. Matraz Erlenmeyer de 500 ml provisto de des Vins. O.I.V., A 14, 1-4. 1969.
21. ANHIDRIDO SULFUROSO y valorar el ácido sulfúrico formado con Sodio
Hidróxido 0,01N.
21.1. Principio. 21.4.3. Anhídrido sulfurososo total. Puede deter-
Liberación del sulfuroso “libre” por acidificación minarse por la suma del anhídrido sulfuroso libre
del zumo de uva, arrastre por corriente de aire, más el anhídrido sulfuroso combinado, pero tam-
oxidación por borboteo en agua oxigenada neutra bién puede determinarse directamente, actuando
y valoración con sosa del ácido sulfúrico formado. desde un principio con corriente de aire o nitrógeno
Liberación por ebullición moderada del sulfuroso y con calor.
“combinado”, que queda en el zumo de uva des-
pués de la extracción del sulfuroso “libre” y análo- 21.5. Cálculos.
go tratamiento que en la determinación del sulfu- Calcular el contenido en anhídrido sulfuroso
roso “libre”. El sulfuroso “total” es la suma del expresado en mg/l, con una aproximación de
sulfuroso “libre” y el sulfuroso “combinado”. Puede 10 mg/l.
determinarse acidificando el zumo de uva y calen-
tando y procediendo como en los dos casos ante- 320 V1
riores. Anhídrido sulfuroso = –––––––– mg/l
Este método es aplicable para contenidos en V2
anhídrido sulfuroso superiores a 10 mg/l.
Siendo:
21.2. Material y aparatos. V1 = Volumen, en ml, de NaOH 0,01N gastados
Como en 28 (a).2. de Métodos de Análisis de en la valoración.
Vinos pág. 59. V2 = Volumen, en ml, de muestra para el análi-
sis.
21.3. Reactivos.
Como en 28 (a).3. de Métodos de Análisis de 21.6. Referencias.
Vinos pág. 59. 21.6.1. Paul, F. “Mitteinlungen Klosternenberg”,
A : 8, 21, 1958.
21.4. Procedimiento. 21.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
21.4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre. En d’Analyse des Vins. O.I.V., A17, 1-8, 1969.
el matraz de 100 ml del aparato, poner 10 ml de
zumo de uva y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al 22. POTASIO
25%, colocando acto seguido el matraz en su sitio.
Si la riqueza en SO2 del vino es pequeña, se emplea 22.1. Principio.
el matraz de 250 ml y se ponen 20-25 ml de uva. El potasio se determina por fotometría de llama
Sumergir el matraz en un baño de agua a 10° C. previa adición de litio cloruro, para evitar la ioniza-
Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3 volú- ción parcial de los metales en la llama.
menes y dos gotas del reactivo indicador en el
matraz B y neutralizar el Hidrógeno Peróxido con 22.2. Material y aparatos.
Sodio Hidróxido 0,01N. 22.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
Adaptar el matraz B al aparato y hacer borbotear mica.
aire (o, nitrógeno) durante 12-15 minutos. Retirar el 22.2.2. Material de uso normal en laboratorio.
matraz B y valorar el ácido sulfúrico formado con
Sodio Hidróxido 0,01 N. 22.3. Reactivos.
21.4.2. Análisis de anhídrido sulfuroso combina- 131074 Agua PA-ACS
do. Después de terminar la valoración del anhídrido 141392 Litio Cloruro PRS
sulfuroso libre, colocar en el matraz B, ya limpio, los 313190 Potasio solución patrón
2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizado y con K = 1,000 ± 0,002 g/l AA
las dos gotas del indicador. Calentar con llama
pequeña hasta llevar a la ebullición el zumo de uva 22.3.1. Potasio solución patrón K = 1,000 ±
que quedó en el matraz después de la determina- 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,907 g de
ción anterior. Aplicar el fuego directo sobre el fondo 131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO en un litro de
del matraz, que descansará sobre chapa metálica Agua PA-ACS.
112 perforada con orificio de 30 mm de diámetro, para 22.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 g
evitar la pirogenación de los azúcares del zumo de de Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS.
uva sobre las paredes del matraz. 22.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3; 5 y
Mantener el paso del aire o nitrógeno durante la 7 mg/l preparadas a partir de la solución de Pota-
ebullición que durará 12-15 minutos, tiempo que se sio, previa adición de la cantidad necesaria de Litio
considera suficiente para arrastrar todo el sulfuroso Cloruro PRS, para que el Litio se encuentre en una
combinado y después oxidarlo. Retirar el matraz B proporción de aproximadamente 2.000 mg/l.
M
22.4. Procedimiento. tidad necesaria de Litio Cloruro PRS para que el Litio
Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 200 ml con se encuentre en una proporción de aproximada-
Agua PA-ACS (previa adición de la cantidad necesa- mente 2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llama
ria de Litio Cloruro PRS para que el Litio se encuen- frente a las soluciones de referencia a 589 nm.
tre en una proporción de aproximadamente
2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llama frente 23.5. Cálculos.
a las soluciones de referencia a 766-770 nm. El contenido de sodio se calcula a partir del valor
obtenido en el espectrofotómetro por comparación
22.5. Cálculos. con la curva patrón, teniendo en cuenta la dilución
El contenido de potasio se calcula a partir del efectuada. Los resultados se expresan en mg de
valor obtenido en el espectrofotómetro por compa- sodio/l de la muestra.
ración con la curva patrón, teniendo en cuenta la
dilución efectuada. Los resultados se expresan en 23.6. Observaciones.
mg de Potasio/ 100 ml de la muestra. 23.6.1. Puede utilizarse una solución de 40 g/l de
cloruro de cesio en lugar de cloruro de litio, siendo
22.6. Observaciones. en este caso la concentración adecuada de cloruro
Puede utilizarse una solución de 40 g/l de cloruro de cesio en las disoluciones de la muestra y patro-
de cesio en lugar de cloruro de litio, siendo en este nes entre 0,1 y 0,4%.
caso la concentración adecuada de cloruro de cesio 23.6.2. Efectuar las diluciones necesarias para
en las disoluciones de la muestra y patrones entre que la muestra esté en el rango de la curva.
0,1-0,4%.
23.7. Referencias.
22.7. Referencias. 23.7.1. Federation International des Producteurs
22.7.1. Federation International des Producteurs de Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984.
de Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984. 23.7.2. Métodos Associations of Official Analyti-
cal Chemist. Ed. 1984.

23. SODIO
24. ARSENICO
23.1. Principio.
El Sodio se determina por fotometría de llama 24.1. Principio.
previa adición de litio cloruro, para evitar la ioniza- La muestra se somete a una digestión ácida con
ción parcial de los metales en la llama. una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
La determinación del arsénico se realiza por
23.2. Material y aparatos. espectrofotometría de absorción atómica, con
23.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica. generador de hidruros.
23.2.2. Material de uso normal en laboratorio.
24.2. Material y aparatos.
23.3. Reactivos. 24.2.1. Material de uso normal en laboratorio.
131074 Agua PA-ACS 24.2.2. Matraces Kjeldahl de 250 ml.
141392 Litio Cloruro PRS 24.2.3. Espectrofotómetro de absorción atómica
313192 Sodio solución patrón equipado con sistema generador de hidruros.
Na = 1,000 ± 0,002 g/l AA 24.2.4. Lámpara de descarga sin electrodos.
24.2.5. Fuente de alimentación para lámpara de
23.3.1. Sodio solución patrón Na = 1,000 ± descarga sin electrodos.
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 2,542 g de
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO (NaCl) en un 24.3. Reactivos.
litro de Agua PA-ACS. 131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
23.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 g 131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
de Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS. Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
23.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3 y 5 mg/l 131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
preparadas a partir de la solución de Sodio, previa 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
adición de la cantidad necesaria de Litio Cloruro 131074 Agua PA-ACS 113
PRS, para que el Litio se encuentre en una propor- 313171 Arsénico solución patrón
ción de aproximadamente 2.000 mg/l. As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas
23.4. Procedimiento. PA-ISO
Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 100 ml (ver 123314 Sodio Borohidruro PA
23.6.2.) con Agua PA-ACS (previa adición de la can- 131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
24.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. de la solución de Arsénico (24.3.14.) y someterlo al
24.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico al 32% mismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solu-
v/v. Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA- ción contiene 10 nanogramos de Arsénico. Prepa-
ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de rar un blanco con todos los reactivos utilizados
100 ml. siguiendo el tratamiento dado a la muestra.
24.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico al 1,5%. 24.4.3. Condiciones del espectrofotómetro:
Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS- Encender la fuente de alimentación de las lámparas
ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente
1.000 ml. para que se estabilice la energía de la lámpara.
24.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitud
24.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo
24.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1% con las condiciones del aparato. Encender el gene-
(p/v): Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA- rador de hidruros, colocando la temperatura de la
ACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un celda a 900° C, esperando hasta que se alcanza
volumen de 100 ml. dicha temperatura. Se ajustan las condiciones del
24.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3% generador de hidruros según las especificaciones
(p/v): Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y del aparato. Ajustar el flujo de argón de acuerdo
disolverlo hasta 100 ml con la solución de Sodio con las características del aparato.
Hidróxido al 1%. 24.4.4. Determinación: Las determinaciones de
24.3.8. Disolución de EDTA Sal Disódica 2-hidra- la concentración de Arsénico se realizan por el
to al 1%. Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacé- método de adición de patrones, por medio de
tico Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolver- medidas duplicadas en el espectrofotómetro en las
lo hasta 100 ml con Agua PA-ACS. condiciones especificadas en (24.4.3.), añadiendo
24.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%. al matraz de reacción 3 ml de la solución (24.3.8.).
Pesar 23,5 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA- Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de
ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu- Arsénico. Lavar los matraces antes y después de
men de 100 ml. cada uso, con Acido Clorhídrico 1,5% (24.3.3.). Al
24.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20% construir la gráfica de adición hay que descontar el
(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO valor de absorbancia del blanco obtenido en las
(24.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de mismas condiciones anteriores, pero añadiendo
100 ml. 3 ml de la solución blanco. En estas condiciones el
24.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% límite de detección de la técnica es de 5 ng.
(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
24.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 25. HIERRO
± 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsé-
nico III Oxido EQP en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al 25.1. Principio.
20% (24.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al Determinación del hierro por absorción atómica
20% (24.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfú- previa mineralización de la muestra.
rico 1% (24.3.11.).
24.3.13. Solución patrón de Arsénico de con- 25.2. Material y aparatos.
centración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución 25.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
patrón de Arsénico (24.3.12.), en un matraz aforado mica.
de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 25.2.2. Lámpara de hierro.
24.3.14. Solución patrón de Arsénico de con- 25.2.3. Los utilizados para el plomo en (26.2.3.),
centración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de (26.2.4.) y (26.2.5.).
Arsénico (24.3.13.), en un matraz aforado de
100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 25.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
24.4. Procedimiento. 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
24.4.1. Preparación de la muestra: En un matraz 131074 Agua PA-ACS
Kjeldahl, de 250 ml introducir 2 g de muestra con 313182 Hierro solución patrón
114 20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml de Fe = 1,000 ± 0,002 g/l AA
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. Llevar a ebullición
hasta reducir el volumen a 5 ml. Dejar enfriar y disol- 25.3.1. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
ver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml la 25.3.2. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico
solución resultante. 70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la con-
24.4.2. Preparación de los patrones de trabajos centración indicada.
y del blanco. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml 25.3.3. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
M
25.3.4. Hierro solución patrón Fe = 1,000 ± cir la cápsula en la mufla y mantenerla durante dos
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1g de 131365 horas a 450°C. Transcurrido dicho tiempo, sacarla y
Amonio Hierro III Sulfato 12-hidrato PA en 50 ml de dejarla enfriar.
la solución de Acido Nítrico (1+1) y diluir hasta Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el
1.000 ml con Acido Nítrico 1% (v/v). baño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-
tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-
25.4. Procedimiento. cas. Un ligero color marrón rojizo en éstas, posible-
25.4.1. Preparación de la muestra. Como en mente de Fe 2O3 es aceptado y no requiere un
(26.4.1.). posterior tratamiento.
25.4.2. Curva de calibrado. A partir de la solu- Disolver a continuación las cenizas con 1 ml de
ción patrón (25.3.4.), preparar una serie de solucio- Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-
nes conteniendo de 0,5 a 5,0 mg de hierro por litro, ACS, una vez disueltas filtrar y recoger en un matraz
con Acido Nítrico al 1% (v/v). de 10 ml, lavando la cápsula y el filtro con Agua PA-
25.4.3. Determinación. Igual que para el Plomo. ACS hasta el enrase.
Efectuar las lecturas a 248,3 nm. 26.4.2. Curva patrón.- Diluir alícuotas apropia-
das de la solución patrón con Acido Nítrico al 1%
25.5. Cálculos. para obtener una curva de concentraciones 2; 4; 6;
Obtener el contenido de hierro de la muestra por 8 y 10 mg/l.
interpolación a partir de la curva de calibrado y 26.4.3. Determinación.- Operar según las espe-
teniendo en cuenta las diluciones efectuadas. cificaciones del aparato, usando llama de aire-aceti-
leno. Medir las absorbancias de la muestra y patro-
nes a 283 nm. Si la solución está muy concentrada,
26. PLOMO diluirla con Acido Nítrico al 1%.
26.1. Principio 26.5. Cálculos.
Determinación del plomo por absorción atómica Calcular el contenido en plomo, expresado en
previa mineralización de la muestra. mg/l mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuenta el factor dilu-
26.2. Material y aparatos. ción.
26.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
mica. 26.6. Referencias.
26.2.2. Lámpara de plomo. 26.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.
26.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar. Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.
26.2.4. Baño de arena o placa calefactora.
26.2.5. Horno eléctrico (mufla) con dispositivo de
control de temperatura. 27. ESTAÑO

26.3. Reactivos. 27.1. Principio.


131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO Determinación de estaño por absorción atómica,
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO previa digestión ácida.
131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón 27.2. Materiales y aparatos.
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA 27.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
mica.
26.3.1. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. 27.2.2. Lámpara de estaño.
26.3.2. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS. 27.2.3. Material de uso normal en laboratorios.
26.3.3. Plomo solución patrón Pb = 1,000
± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de 27.3. Reactivos.
131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
1000 ml con Acido Nítrico al 1%. 212236 Agua Desionizada QP
26.3.4. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. 313180 Estaño patrón Sn = 1,000 ± 0,002 g/l AA

26.4 Procedimiento. 27.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. 115


26.4.1. Preparación de la muestra.- Poner 27.3.2. Solución de Acido Clorhídrico 7N. Diluir
100 ml de la muestra en una cápsula de platino o Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-
cuarzo y llevarla a evaporación hasta consistencia ACS hasta la concentración deseada.
siruposa en baño de arena. Añadir a continuación 27.3.3. Agua Desionizada
2 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el 27.3.4. Estaño solución patrón Sn = 1,000 ±
residuo en el baño de arena. Seguidamente introdu- 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de
141304 Estaño metal, granalla PRS en 100 ml de con Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones
Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluir hasta que contengan de 1 a 5 mg de Cobre.
1.000 ml con Agua Desionizada. 28.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo.
Medir a 324,7 nm.
27.4. Procedimiento.
27.4.1. Preparación de la muestra.- Medir de 1 a 28.5 Cálculo.
5 ml de la muestra directamente en un Erlenmeyer. Partiendo de los valores de absorbancia obteni-
Añadir 25 ml de solución de Acido Clorhídrico 7N. dos para la muestra, hallar mediante la curva patrón
Llevar a ebullición y mantenerla a fuego lento duran- las concentraciones de Cobre de la muestra,
te cinco minutos. Enfriar y transferir cuantitativamen- teniendo en cuenta el factor de dilución.
te a un matraz de 50 ml, enrasando con Agua PA-
ACS. Agitar y filtrar con papel Watman número 1. 29. ZINC
27.4.2. Curva de calibrado.- A partir de la solu-
ción patrón de Estaño, preparar una serie de solu- 29.1. Principio.
ciones conteniendo 50; 100; 150 y 250 mg/l de Determinación del zinc por absorción atómica,
Estaño. previa mineralización de la muestra.
27.4.3. Determinación.- Operar según las espe-
cificaciones del aparato usando una llama reductora 29.2. Material y aparatos.
de óxido nitroso-acetileno. Medir las absorbancias 29.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
de la muestra y patrones a 286 nm. mica.
29.2.2. Lámpara de zinc.
27.5. Cálculos. 29.2.3. Los utilizados para el Plomo en (26.2.3.),
Obtener el contenido de estaño de la muestra (26.2.4.) y (26.2.5.).
por interpolación a partir de la curva de calibrado.
29.3 Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
28. COBRE 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
28.1. Principio 313193 Zinc solución patrón
Determinación del cobre por absorción atómica, Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
previa mineralización de la muestra.
29.3.1. Los utilizados para el Plomo en (26.3.1.),
28.2. Material y aparatos. (26.3.2.) y (26.3.4.).
28.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató- 29.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002
mica. g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141783
28.2.2. Lámpara de cobre. Zinc metal, polvo PRS en el mínimo volumen nece-
28.2.3. Los utilizados para el Plomo, en (26.2.3.), sario de Acido Nítrico diluido con Agua PA-ACS
(26.2.4.) y (26.2.5.). (1:1) y diluir a un litro con Acido Nítrico al 1% (v/v).

28.3. Reactivos. 29.4. Procedimiento.


131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO 29.4.1. Preparación de la muestra.- Como para
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO el Plomo (26.4.1.).
131074 Agua PA-ACS 29.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
313178 Cobre solución patrón partes alícuotas de la solución patrón (29.3.2.), con
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5
a 1 mg/l.
28.3.1. Los utilizados para el plomo en (26.3.1.), 29.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
(26.3.2.) y (26.3.4.) La lectura se efectuará a 213,5 nm.
28.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 29.5 Cálculo.
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci- Partiendo de los valores de absorbancias obteni-
do Nítrico 70% PA-ACS-ISO 1:1. Diluir después a dos, hallar las concentraciones de Zinc para la
116 un litro con Acido Nítrico al 1%. muestra, teniendo en cuenta el factor concentra-
ción o dilución.
28.4 Procedimiento.
28.4.1. Preparación de la muestra.- Como para
el Plomo en (26.4.1.).
28.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
partes alícuotas de la solución patrón de Cobre
M

117
Productos derivados
de la uva:
Vinagres

118
M
1. EXTRACTO TOTAL ácidos volátiles y fijos que contiene el vinagre expre-
sada en gramos de ácido acético por 100 ml de
1.1. Principio. vinagre.
El extracto seco total se define como el conjunto La determinación se efectúa mediante una volu-
de todas las sustancias que, en condiciones físicas metría de neutralización en presencia de solución
determinadas, no se volatilizan. En estas condicio- alcohólica de fenolftaleína como indicador.
nes físicas deben fijarse de tal manera que las sus-
tancias componentes del extracto sufran el mínimo 2.2. Material y aparatos.
de alteración. 2.2.1. Bureta de 50 ml graduada en décimas de
El método está basado en una evaporación del ml.
vinagre en baño de agua con secado posterior en 2.2.2. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase.
estufa regulable a 100 - 105°C. 2.2.3. Matraces Erlenmeyer de 250 ml de capa-
cidad.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Balanza con aproximación de 0,001 g. 2.3. Reactivos.
1.2.2. Estufa con ventilación de aire regulable de 131074 Agua PA-ACS
100 a 105°C. 121085 Etanol 96% v/v PA
1.2.3. Desecador de vidrio con ácido sulfúrico 131325 Fenolftaleína PA-ACS
concentrado o gel de sílice (sílice amorfa impreg- 181692 Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV
nada con sustancia reveladora) como sustancia
desecadora. 2.3.1. Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV.
1.2.4. Baño de agua. 2.3.2. Solución indicadora de Fenolftaleína. Se
1.2.5. Cápsulas de fondo plano de 5 cm de diá- disuelven 10 g de Fenolftaleína PA-ACS en Etanol
metro construidas en platino, níquel o cuarzo. 96% v/v PA y se completa a un litro con el mismo
1.2.6. Pipetas aforadas de 10 ml con doble en- solvente.
rase.
2.4. Procedimiento.
1.3. Procedimiento. Medir 10 ml de vinagre, previamente filtrado, en
Agitar la muestra y filtrar a través de un papel de un Erlenmeyer de 250 ml. Diluir con 100 o 150 ml
filtro plegado (tipo jarabe). Medir 10 ml del vinagre de Agua PA-ACS recién hervida y fría hasta conse-
filtrado en una cápsula previamente tarada. Evapo- guir una solución débilmente coloreada. Añadir seis
rar en baño de agua hirviente durante 30 minutos y gotas de la solución indicadora de Fenolftaleína y
mantener en la estufa durante dos horas y media a agregar Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV conte-
105°C. Dejar secar la cápsula en el interior del nido en la bureta gota a gota y agitando hasta viraje
desecador y, una vez fría, pesar en la balanza de del indicador.
precisión.
2.5. Cálculo.
El valor de la acidez total o grado acético del
1.4. Cálculo.
vinagre en porcentaje se hallará mediante la fórmula
El valor del extracto total del vinagre , en porcen-
siguiente:
taje, se hallará mediante la fórmula siguiente:
Extracto total: (M - m) 10
Acidez total o grado acético = a x 10 x 0,0300
en la que:
en la que :
a =volumen, en ml, de sodio hidróxido 0,5N.
M = masa, en gramos, de la cápsula con el
extracto seco.
2.6. Referencias.
m = masa, en gramos, de la cápsula vacía.
2.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una norma española 33.101.
1.5. Referencias. 2.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
1.5.1. Instituto de Racionalización del Trabajo. 11a. ed , página 520, 30. 068.
Una norma española 33.101.
1.5.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
11a. ed., página 519, 30.061. 3. ACIDEZ FIJA
119
3.1. Principio.
2. ACIDEZ TOTAL La acidez fija se define como la totalidad de los áci-
(Grado acético) dos fijos que contiene el vinagre, expresada en gra-
mos, de ácido acético por 100 ml de vinagre.
2.1. Principio.
La acidez total se define como la totalidad de los
3.2. Material y aparatos. At - Af = acidez volátil
3.2.1. Baño de agua. en la que :
3.2.2. Bureta de 10 ml de capacidad graduada At = acidez total o grado acético, expresado en
en décimas de ml. gramos de ácido acético por 100 ml.
3.2.3. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase. Af = acidez fija de la misma muestra de vinagre,
3.2.4. Cápsulas de 200 ml de capacidad. expresada en gramos de ácido acético por
100 ml.
3.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS 4.3. Referencias.
121085 Etanol 96% v/v PA 4.3.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
131325 Fenolftaleína PA-ACS Una norma española 33.101.
181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV 4.3.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
11a. ed., página 520, 30.070.
3.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.
3.3.2. Disolución indicadora de Fenolftaleína PA- 5. SULFATOS
ACS al 1% en Etanol 96% v/v PA.
5.1. Principio.
3.4. Procedimiento. Precipitación del bario sulfato en medio ácido.
Medir 10 ml de vinagre previamente filtrado y lle-
varlo a una cápsula de porcelana. Evaporar a 5.2. Material y aparatos.
sequedad en baño de agua. Añadir de 5 a 10 ml 5.2.1. Vasos de precipitado de 250 ml.
Agua PA-ACS recientemente hervida y volver a eva- 5.2.2. Baño de agua.
porar a sequedad, repitiendo esta operación cinco 5.2.3. Estufa.
veces más. Añadir, aproximadamente, 180 ml de 5.2.4. Desecador.
Agua PA-ACS recientemente hervida y fría, añadir
seis gotas de la solución indicadora de Fenolftaleína 5.3. Reactivos.
y agregar Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV con- 181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
tenido en la bureta, gota a gota y agitando, hasta 131074 Agua PA-ACS
viraje del indicador. 131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
171461 Plata Nitrato solución 0,1% p/v RE
3.5. Cálculo.
El valor de la acidez fija del vinagre, expresado 5.3.1. Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV.
en gramos de ácido acético por 100 ml, se hallará 5.3.2. Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO.
mediante la fórmula siguiente:
5.4. Procedimiento.
Acidez fija = a x 10 x 0,00600 A 100 ml de muestra en vaso de precipitado de
en la que: 250 ml añadir 2 ml de Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N)
a = volumen, en ml de sodio hidróxido 0,1N. SV, calentar a ebullición e ir añadiendo gota a gota
10 ml de Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO (1 g
3.6. Referencias. /100 ml de BaCl2.2H2O) sin que deje de hervir la
3.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo. solución. Continuar hirviendo cinco minutos mante-
Una norma española 33.101. niendo el volumen constante, añadiendo Agua PA-
3.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis. ACS caliente siempre que sea necesario. Dejar en
11a. ed., página 520, 30.069. reposo hasta que el sobrenadante esté claro (una
noche es suficiente, aunque no conviene sobrepa-
sar ese tiempo). Filtrar por papel sin cenizas de poro
4. ACIDEZ VOLATIL fino, lavar con Agua PA-ACS caliente hasta que no
dé reacción con Plata Nitrato solución 0,1% p/v RE
4.1. Principio. las aguas del lavado, secar, calcinar, enfriar en
Se define convencionalmente como valor de la desecador y pesar.
acidez volátil de un vinagre la diferencia entre los
valores de su acidez total y fija, expresadas ambas 5.5. Cálculo.
120 en gramos de ácido acético por 100 ml de vinagre. La proporción de sulfatos = 7,465 P g/l de K2SO4
siendo;
4.2. Cálculo. P = peso, en g, del producto de la calcinación.
El valor de la acidez volátil del vinagre, expresa-
do en gramos de ácido acético por 100 ml, se halla- 5.6. Referencias.
rá mediante la fórmula siguiente: 5.6.1. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
11a. ed. (1970).
M
5.6.2. Instituto de Racionalización del Trabajo. nol PA de tal forma que a las soluciones que con-
Una norma española 33-104-73. tengan de 10 a 50 mg/l de Acetoína se le añadan
15 µl y a las que contengan de 50 a 500 mg/l se le
6. ACETILMETILCARBINOL (ACETOINA) añadan 35 µl e inyectarlas a continuación, obtenien-
do la curva de calibrado (se deben efectuar dos
6.1. Principio. curvas de calibrado, una que cubra el rango de
Determinación cuantitativa de la acetoína por 0-50 mg/l de Acetoína y otra de 50 a 300 mg/l).
cromatografía de gases. La inyección de la muestra puede efectuarse
directamente del vinagre, una vez añadido el patrón
6.2. Material y aparatos. interno, pero teniendo en cuenta que el tiempo de
6.2.1. Equipo de cromatografía de gases com- retención es elevado y la concentración del acético
puesto por: es muy grande, obliga a esperar un largo período
6.2.1.1. Detector de ionización de llama. de tiempo entre dos inyecciones sucesivas. Para
6.2.1.2. Horno con temperatura regulable. evitar esta dificultad, deben neutralizarse a pH = 7
6.2.1.3. Registrador. las muestras, preferiblemente con Calcio Hidróxido
6.2.1.4. Gases: Aire-nitrógeno. polvo, 90% (USP) PRS-CODEX para evitar variacio-
6.2.1.5. Columna: FFAP 2,5% sobre Chromo- nes de volumen. Téngase en cuenta que la concen-
sorb G (HP), añadiéndose un 0,5 de un reductor de tración de Acetoína en el medio neutro puede variar
colas (p. e., Carbowax 1.500) y de dimensiones 2 m con tiempo, por lo que la neutralización debe hacer-
de longitud y 1/8 de pulgada de diámetro externo se inmediatamente antes de inyectar en el cromató-
de la columna. grafo.
6.2.2. Microjeringa de 1 a 10 µl.
6.5. Cálculo.
6.3. Reactivos. Los cromatogramas obtenidos de las distintas
Acetoína soluciones patrón permiten representar gráfica-
131074 Agua PA-ACS mente la relación existente entre el cociente:
121884 1-Pentanol PA
121086 Etanol absoluto PA
Area del pico de la acetoína
142400 Calcio Hidróxido polvo 90% (USP)
–––––––––––––––––––––––––––––––
PRS-CODEX
Area del pico del alcohol n-amílico
6.3.1. Acetoína.
6.3.2. 1-Pentanol PA. La relación de áreas obtenida para la muestra se
6.3.3. Etanol absoluto PA. compara con la curva de calibrado (concentración
6.3.4. Calcio Hidróxido polvo 90 % (USP) PRS- de acetoína /relación de áreas ), obteniéndose la
CODEX. cantidad de acetoína de la muestra.

6.4. Procedimiento. 6.6. Referencia.


6.4.1. Disolución patrón. 6.1.1. E. F. Gorostiza, M. L. Gil de la Peña y M.
6.4.1.1. De Acetoína: A partir de Acetoína purifi- C. Gómez Cordobés. Instituto de Fermentaciones
cada de su posible contenido en Diacetilo mediante Industriales.
destilación, obtener soluciones de Acetoína que
cubran un rango de concentraciones de 10 a
500 mg/l en Agua PA-ACS. 7. CENIZAS
6.4.1.2. De patrón interno: Añadir 2 ml de
1-Pentanol PA en 100 ml de Solución Hidroalcohóli- 7.1. Principio.
ca al 50%. Se denominan cenizas de un vinagre el conjunto
de los productos de incineración del residuo de
6.4.2. Determinación. evaporación de un volumen conocido del vinagre,
6.4.2.1. Condiciones cromatográficas. Gas por- realizada de manera que se puedan obtener todos
tador: Nitrógeno (flujo de 12,5 mg/min.). los cationes en forma de carbonatos y otras sales
Temperatura horno: 70° C. minerales anhidras.
Temperatura inyector: 180° C.
7.2. Material y aparatos.
121
Inyección : 4 o 2 µl.
Patrón interno: 1-Pentanol PA. 7.2.1. Horno eléctrico regulable.
7.2.2. Baño de agua y baño de arena.
6.4.2.2. Método operatorio. 7.2.3. Lámpara de infrarrojo.
A cada una de las soluciones patrón de Acetoína 7.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de 70 mm
preparadas en 6.4.1.1., añadir solución de 1-Penta- de diámetro y 25 mm de altura, fondo plano.
7.3. Procedimiento. 8.2.7. Bureta de 50 ml de capacidad graduada
Colocar 20 ml de vinagre en una cápsula tarada en décimas de ml.
en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con
precaución en baño de agua hasta consistencia 8.3. Reactivos.
siruposa, continuar el calentamiento sobre baño de 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
arena con moderación y durante una media hora. 131074 Agua PA-ACS
Es conveniente ayudar a la evaporación con la apli- 171096 Almidón Soluble RE
cación de rayos infrarrojos hasta carbonización. 181528 Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV
Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cáp- 131542 Potasio Yoduro PA-ISO
sula al horno eléctrico a 525 ± 25° C y con aireación 181722 Sodio Tiosulfato 1mol/l (1N) SV
continua. Después de cinco minutos de carboniza-
ción completa, sacar la cápsula del horno, dejar 8.3.1. Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV
enfriar y añadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se eva- 8.3.2. Disolución valorada de Sodio Tiosulfato
poran en baño de agua, y llevar de nuevo al horno a 1 mol/l (1N) SV. En un matraz aforado diluir a 1:1
525°C. Sodio Tiosulfato 1 mol/l (1N) SV con Agua PA-ACS
Si la combustión de las partes carbonosas no y determinar el factor de la solución 0,5N obtenida.
se consigue en 15 minutos, volver a comenzar la 8.3.3. Disolución de Potasio Yoduro PA-ISO al
operación de adición de Agua PA-ACS, evapora- 50%. Ver 8.6.2. Disolver Potasio Yoduro PA-ISO en
ción y recalcinación. Agua PA-ACS y ajustar a la concentración indicada.
Después de enfriar en el desecador, pesar la cápsu- 8.3.4. Disolución indicadora de Almidón. Disol-
la con las cenizas. ver 5 g de Almidón soluble RE en 20 ml de Agua
PA-ACS y se vierte en 1 ml de Agua PA-ACS hir-
7.4. Cálculo. viente. Se continúa la ebullición durante cinco minu-
Calcular el contenido en cenizas expresado tos y se deja enfriar antes de su empleo. Conviene
en g/l. guardarla en frascos esterilizados.
8.3.5. Disolución de Acido Sulfúrico al 50% en
Cenizas = 50 P g/l. volumen. Diluir Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con
Agua PA-ACS.
P = peso, en g, de las cenizas contenidas en
20 ml de vinagre. 8.4. Procedimiento.
Dar los resultados con una aproxinación de Ajustar el vinagre a 4 g por 100 de acidez total,
0,03 g/l. expresada en ácido acético. Tomar 50 ml de vina-
gre, con la acidez debidamente ajustada, e introdu-
7.5. Referencias. cir en el matraz de destilación. Pasar a su través
7.5.1. Recueil des Méthodes Internationales una corriente de vapor de agua procedente del cal-
d'Analyse des Vins. O. I. V., AGI, 1969. derín descrito, a una velocidad regulada, de manera
7.5.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos, que cuando se hayan recogido 50 ml de destilado
Ministerio de Agricultura, 1971, pág. 66. se conserven en el matraz de destilación aproxima-
damente 45 ml. Comprobar que la temperatura del
destilado no sobrepase 25°C. Pasar los 50 ml del
8. INDICE DE OXIDACION destilado al matraz Erlenmeyer de 500 ml. Añadir
10 ml de la solución de Acido Sulfúrico 96% PA-
8.1. Principio. ACS y 25 ml Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N)
Oxidación con potasio permanganato de las SV. Mantener el matraz durante una hora en el baño
sustancias volátiles fácilmente oxidables de los de agua a 25°C.
vinagres. Trascurrido ese tiempo, añadir 20 ml de la diso-
lución de Potasio Yoduro. Tapar el matraz y mezclar
8.2. Materiales y aparatos. bien su contenido. Inmediatamente valorar el yodo
8.2.1. Matraz de destilación de 250 ml de capa- liberado con la dilolución de Sodio Tiosulfato 1 mol/l
cidad provisto de dispositivo de entrada de vapor (1N) SV. Simultáneamente, a la muestra de vinagre
de agua para destilación por arrastre de vapor. llevar, en las mismas condiciones, un blanco en que
8.2.2. Matraz Erlenmeyer de 50 ml de capacidad el destilado se sustituya por 50 ml de Agua PA-
122 provisto de boca esmerilada y tapón. ACS.
8.2.3. Matraz aforado de 50 ml de capacidad.
8.2.4. Refrigerante de serpentín de 25 cm de 8.5. Cálculo.
capacidad útil. El valor del índice de oxidación de hallará
8.2.5. Calderín generador de vapor. mediante la fórmula siguiente:
8.2.6. Pipeta aforada con doble enrase de 10;
20; 25 y 50 ml de capacidad.
M
a -b 9.3.3. Idem.
I = –––––– x grado acético del vinagre original 9.3.4. Etanol 96% v/v PA.
8
9.4. Procedimiento.
donde: Tomar 25 ml de vinagre, destilar en destilador
I = índice de oxidación. simple y recoger 15 ml de destilado en matraz afo-
a = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 mol/l rado de 25 ml sumergido en baño de hielo. Añadir
(1N) SV consumido en la valoración de la el Etanol 96% v/v PA suficiente para que una vez
muestra en blanco. enrasado a 25 ml con Agua PA-ACS la concentra-
b = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 moll ción del Etanol 96% v/v PA sea del 5-6% (9.6.1.).
(1N) SV consumido en la valoración de la Continuar como en 37.4. de los métodos oficiales
muestra de vinagre diluido. de análisis de vinos.

8.6. Observaciones. 9.5.Cálculo.


8.6.1. Si el índice de oxidación resulta mayor que Como en 37.5 de los métodos oficiales de análi-
15, ha de repetirse la determinación, usando 25 ml sis de vinos.
del vinagre ajustando a 4 grados acéticos, aña-
diendo 25 ml de agua. Repetir esta reducción a la 9.6. Observaciones.
mitad hasta que el índice de oxidación sea menor 9.6.1. En vinagres normales suele ser suficiente
que 15. Calcular el índice de oxidación, teniendo en añadir 1,5% de Etanol 96% v/v PA.
cuenta las diluciones efectuadas.
8.6.2. Esta disolución no se debe usar si presen- 9.7. Referencia.
ta color amarillento. 9.7.1. Association of Official Agricultural Che-
mists Official Methods of Analysis,1965, página
8.7. Referencias. 138.
8.7.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una norma española 33-102-73.
8.7.2. Métodos Oficiales de Análisis de la Asso- 10 (a). ACIDO TARTARICO
ciation of Official Agricultural Chemists de Estados (Método cualitativo)
Unidos (ed. 1970).
10 (a).1. Principio.
Precipitación del ácido tartárico en forma de po-
9. METANOL (Alcohol Metílico),
tasio bitartrato.
METODO DEL ACIDO
CROMOTROPICO
10 (a).2. Material y aparatos.
9.1. Principio. 10 (a).2.1. Centrífuga.
Como en 37.1 de los métodos oficiales de análi-
sis de vinos. 10 (a).3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
9.2. Material y aparatos. 131074 Agua PA-ACS
Como en 37.2 de los métodos oficiales de análi- 121085 Etanol 96% v/v PA
sis de vinos y matraz aforado de 25 ml. 131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO
121526 di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA
9.3 Reactivos. 131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato
171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica PA-ACS-ISO
2-hidrato RE
131032 Acido orto-Fosfórico 85% 10 (a).3.1. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.
PA-ACS-ISO 10 (a).3.2. Solución de Precipitación. Disolver
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO 300 g de Potasio Cloruro PA-ACS-ISO; 5,75 g de
131074 Agua PA-ACS Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO y
121085 Etanol 96% v/v PA 1,25 g de di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA y enrasar
131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO a 1.000 ml con Agua PA-ACS.
131698 Sodio Disulfito PA-ACS A baja temperatura la solución deposita peque- 123
141717 Sodio Sulfito anhidro (BP, F. Eur.) ños cristales, por lo que se debe calentar ligera-
PRS-CODEX mente antes de emplearse.
10 (a).3.3. Etanol 96% v/v PA.
9.3.1. Como 37.3.1 de los métodos oficiales de
análisis de vinos. 10 (a).4. Procedimiento.
9.3.2. Idem. Poner en un tubo de centrífuga 10 ml de vinagre,
0,4 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO, 7,5 ml 10(b).3.2. Acido Acético al 0,5 % (v/v).- Introdu-
de la solución de Precipitación y 2 ml de Etanol cir 5 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en un
96% v/v PA. Agitar con una varilla de vidrio hasta matraz aforado y completar hasta 1.000 ml con
que aparezca un enturbiamiento cristalino aproxi- Agua PA-ACS
madamente a los diez segundos. Mantener el tubo 10(b).3.3. Solución de Sodio Sulfato al 7,1 %
durante una hora a 8°C aproximadamente. Al cabo (0,5N).- Disolver 71 g de Sodio Sulfato anhidro PA y
de este tiempo agitar enérgicanente el contenido completar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.
del tubo con una varilla de vidrio, con la precaución 10(b).3.4. Reactivo Vanádico.- Disolver 10 g de
de mezclar bien con la solución que sobrenada. Amonio meta-Vanadato PA en 150 ml de Sodio
Dejar en reposo aproximadamente a 8°C durante Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. Pasar esta solución a un
una hora. Transcurrido este tiempo centrifugar. matraz aforado de 500 ml, añadir seguidamente
200 ml de una solución de Sodio Acetato anhidro
10 (a).5. Interpretación de resultados. PA diluido al 27 % en Agua PA-ACS y llevar luego a
La aparición de precipitado indica la presencia 500 ml con Agua PA-ACS.
de ácido tartárico en la muestra. 10(b).3.5. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV.
10(b).3.6. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.
10 (a) .6. Referencia. 10(b).3.7. Solución de Acido Peryódico 0,1N
10 (a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales (0,05M).- Introducir 10,696 g de Sodio meta-Peryo-
d'Analyse des Vins. O. I. V. A-12-h. dato PA en un matraz aforado de 1.000 ml, añadir
50 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV y com-
pletar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.
10 (b). ACIDO TARTARICO 10(b).3.8. Solución de Glicerina al 10 %.- Pesar
(Método cuantitativo) 10 g de Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,
bidestilada y llevarla a 100 ml con Agua PA-ACS.
10(b).1 Principio. 10(b).3.9. Solución de Acido Tartárico de 1 g
Aislamiento del ácido tartárico mediante colum- por l.- En un matraz aforado de 500 ml disolver
na de resinas cambiadoras de aniones y posterior 500 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO en 6,6
valoración colorimétrica. ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV y enrasar con
solución de Sodio Sulfato al 7,1% a 500 ml.
10(b).2. Material y aparatos.
10(b).2.1. Resinas aniónicas de basicidad fuerte 10(b).4. Procedimiento.
(III Merck o equivalente). Las resinas deben de 10(b).4.1. Preparación de las columnas de resi-
encontrarse en forma de acetato. Para ello deben nas aniónicas. Colocar en el fondo de la columna
estar al menos veinticuatro horas en contacto con [10(b).2.2.] Lana de Vidrio lavada QP formando
una solución de ácido acético al 30 %. tapón de 2-3 mm de altura, aproximadamente, y
10(b).2.2. Columnas de vidrio de 10-11 mm de añadir Agua PA-ACS hasta una altura de unos
diámetro y 30 cm de longitud con llave en la parte 5 mm sobre el tapón de Lana de Vidrio lavada QP.
inferior. Añadir la Resina Lewatit® MP 600 aniónica (*) con-
servada en Acido Acético al 30 %, agitar esta sus-
10(b).3. Reactivos. pensión y agregar rápidamente un volumen de unos
131008 Acido Acetico glacial PA-ACS-ISO 10 ml, evitando la formación de burbujas de aire,
181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV depositando en la superficie un tapón de Lana de
181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N)SV Vidrio lavada QP, que se conduce con una varilla de
182105 Acido Sulfúrico 1mol/l (2N) SV vidrio con el fin de no remover las resinas en los
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO sucesivos lavados anteriores en su superficie. Las
131074 Agua PA-ACS resinas solamente pueden servir para una sola vez.
122352 Amonio meta-Vanadato PA 10(b).4.2. Aislamiento del Acido Tártarico.- Abrir
141339 Glicerina (USP,BP,F. Eur.) PRS-CODEX la llave inferior de la columna y dar salida al Acido
211376 Lana de Vidrio, lavada QP Acético diluido hasta unos 2-3 ml por encima del
Resina Lewatit MP 600 (aniónica fuerte I) tapón superior de Lana de Vidrio lavada QP. Añadir
131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS seguidamente unos 10 ml de Acido Acético al 0,5%
181691 Sodio Hidróxido 1mol/l 1N SV y vaciar hasta igual altura; efectuar estos lavados
124 121700 Sodio meta-Peryodato PA cuatro veces.
121716 Sodio Sulfato anhidro PA Después del último lavado y con la llave cerrada,
adicionar 10 ml de vinagre a analizar y señalar la
10(b).3.1. Acido Acético al 30 % (v/v).- Introducir altura alcanzada con un lápiz graso, abrir a conti-
300 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en un nuación la llave y dejar salir vinagre goteando a
matraz aforado y completar a 1.000 ml con Agua razón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml por
PA-ACS. minuto) hasta un poco por encima del tapón supe-
M
rior de Lana de Vidrio lavada QP. Llenar de nuevo la En dos matraces (A) y (B) de 100 ml poner 20 ml
columna con Acido Acético al 0,5 % hasta la señal de cada una de estas soluciones y tratarlas idénti-
del lápiz graso y dejar salir a la misma velocidad que camente igual a los eluidos del vinagre anteriormen-
la vez anterior y lavar después en la misma forma te descrito.
siete veces con 10 ml de Agua PA-ACS. La representación gráfica de las densidades
Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuan- ópticas de estas soluciones está en función de la
do el nivel del líquido se encuentre un poco más cantidad de ácido tartárico. Para ello es recomen-
arriba del tapón superior de Lana de Vidrio lavada dable y más preciso partir de concentraciones 0,1;
QP. 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 y 1 g/l de ácido
Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml. Eluir tartárico.
los ácidos fijados en el cambiador de aniones, 10(b).5.2. Comprobar los valores obtenidos en el
mediante adiciones de solución de Sodio Sulfato ensayo con los correspondientes de la curva
[10(b).3.3.] hasta la señal trazada en el tubo. patrón.
Para hacer esta operación resulta práctico colo-
car un frasco con solución de Sulfato unido por el 10(b).6. Referencia.
cuello a la columna mediante un manguito de cau- 10(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
cho y con unas pinzas para regular la caída del líqui- d’Analyse des Vins. A12h.
do en la bureta o tubo. Puestos así en comunica- (*). En el original indica “Resina cambiadora de
ción los dos aparatos (frasco y bureta o tubo), abrir aniones”, entendemos que es apropiada la Resina
las pinzas del caucho de unión y la llave inferior, Lewatit“ MP 600 aniónica fuerte I.
dejando caer el líquido a la bureta unos 10 cm de
altura y sin que queden huecos vacíos. Regular la 11. COBRE
salida del líquido en la proporción de 2-3 gotas por
segundo, para llenar el matraz receptor hasta el 11.1. Principio.
enrase. Determinación directa por espectrofotometría de
10(b).4.3. Determinación del ácido Tartárico.- En absorción atómica.
dos matraces cónicos de 100 ml (A) y (B) introducir 11.2. Material y aparatos.
20 ml del eluido. El matraz (A) sirve para la medida y Espectrofotómetro de absorción atómica, con lám-
el matraz (B), en el cual el Acido Tartárico es destrui- para específica de cobre.
do por el Acido Peryódico, constituye el testigo.
Añadir al matraz (A) 2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l 11.3. Reactivos.
(2N) SV, 5 ml de Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) 131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
SV y 1 ml de Glicerina (USP,BP,F.Eur) PRS-CODEX 131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
al 10%. 131074 Agua PA-ACS
En el matraz (B), añadir 2 ml de Acido Sulfúrico 313178 Cobre solución patrón
1 mol/l (2N) SV, 5 ml de Acido Peryódico 0,1N, Cu = 1,000 + 0’002 g/l AA
esperar quince minutos y añadir 1 ml de Glicerina al
10 % para destruir el exceso de Acido Peryódico. 11.3.1 Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±
Esperar dos minutos. 0’002 g/l AA o preparar disolviendo 1’000 g de
Verter a continuación, agitando, primero en el Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci-
matraz (B) e inmediatamente después en el matraz do Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1 + 1) y diluir a 1 litro
(A), 5 ml del Reactivo Vanádico. Disparar inmediata- con Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO previamente
mente un cronómetro e introducir el contenido de diluido al 1 % (v/v) con Agua PA-ACS.
dichos matraces en las cubetas de caras paralelas 11.3.2. Soluciones que contengan de 1 a 10 mg/l
de 10 mm de espesor del espectrofotómetro. Al de Cobre.- Diluir partes alícuotas de la solución
cabo de un minuto y treinta segundos medir la den- patrón con Acido Acético al 5 % en Agua PA-ACS.
sidad óptica a 490 nm del líquido procedente del
matraz (A) (medida) después de haber reglado el 11.4. Procedimiento.
aparato para obtener la transmisión al 100 % con la 11.4.1. Calibrado del aparato.- Ajustar el aparato
cubeta conteniendo el líquido testigo (B). a una longitud de onda de 324,7 nm en condicio-
nes tales que se obtenga una respuesta lineal al
10(b).5. Cálculo introducirse las series de patrones preparados.
10(b).5.1. Preparación de la curva patrón.- 11.4.2. Determinación.- Efectuar la lectura direc- 125
Tomar 10; 20; 30; 40 y 50 ml de la solución ta de la absorbancia.
10(b).3.9. e introducir cada alícuota en un matraz
aforado de 100 ml. Enrasar con solución de sodio 11.5. Interpretación de los resultados.
sulfato al 7,1%. Las diferentes diluciones corres- Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos,
ponden a eluidos del vinagre conteniendo 1; 2; 3; 4 hallar mediante la curva de patrón las concentracio-
y 5 g de ácido tartárico por litro. nes de cobre de la muestra.
10 ml. Después de cada adición se debe esperar
11.6. Referencias. unos treinta segundos antes de hacer la correspon-
11.6.1 G. Charlot et D. Bezier: “Analyse quanti- diente lectura en minivoltios. Los valores así obteni-
tative minerale”. El Masson, París (1955), 749-752. dos se llevan sobre un papel milimetrado en función
11.6.2. H.E. Parker: “Atomic Absorption News- de los correspondientes ml de solución de Plata
letter” (1963), 13 Nitrato, y a partir del punto singular de la curva
11.6.3. Standart Conditions for Zn and Cu. obtenida, determinar el potencial del punto de equi-
Analytical Methods for atomic absorbtion spectro- valencia.
photometry “Perkin-Elmer”. Para comprobar el potencial del punto de equi-
11.6.4. F. Rousselet: “Spectrophotometrie par valencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la
absorption atomique Boudin”. Ed. Paris (1968), solución patrón de Cloruros, 95 ml de Agua PA-
págs 59-144. ACS y 1 ml de Acido Nítrico 70 % PA-ACS-ISO.
Introducir el electrodo y valorar agitando, justamen-
12. CLORUROS te hasta el potencial del punto de equivalencia.
Repetir esta operación hasta obtener una buena
12.1. Principio. concordancia con los resultados.
Determinación directa de cloruros por potencio- Este control debe efectuarse antes de determi-
metría utilizando el electrodo Ag/AgCl. nar la concentración de cloruros en cada serie de
muestras a analizar.
12.2. Material y aparatos. 12.4.2. Determinación.- Llevar a un vaso de
12.2.1. pH-metro con escala que permita apre- 150 ml, 50,0 ml de vinagre. Añadir 50 ml de Agua
ciar 2 mV. PA-ACS y 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
12.2.2. Agitador magnético. Valorar a continuación, siguiendo el procedimiento
12.2.3. Electrodo Ag/AgCl con una solución descrito anteriormente, hasta alcanzar el potencial
saturada de potasio nitrato como electrolito. del punto de equivalencia.
12.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.
12.5. Cálculo.
12.3. Reactivos. La cantidad de cloruros se determina mediante
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO las expresiones:
131074 Agua PA-ACS 0,02 n en gramos de ion cloro.
121085 Etanol 96% v/v PA 0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion clo-
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO ro.
Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br) 0,0329 n en gramos de sodio cloruro por litro.

12.3.1. Solución patrón de Cloruros.- Disolver Siendo:


2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de bro- n = volumen en ml de solución de plata nitrato
mo), para análisis, previamente desecado en Agua necesario para alcanzar el potencial del
PA-ACS hasta 1 litro; 1 ml de esta solución contiene punto de equivalencia.
1 mg de ion Cloro.
12.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver 12.6. Referencia.
4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en Etanol al 12.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
10% (v/v) hasta un litro. Diluir Etanol 96% v/v PA d’Analyse des Vins. OIV A-15j.
con Agua PA-ACS. 1 ml de esta solución corres-
ponde a 1 mg de ion Cloro.
12.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. 13. GRADO ALCOHOLICO

12.4. Procedimiento. 13.1. Principio.


12.4.1. Determinación del potencial del punto de Separación del alcohol por destilación, oxidación
equivalencia.- Introducir 5,0 ml de la solución del mismo por potasio dicromato y determinación
patrón de Cloruros en un vaso de 150 ml. Diluir del contenido por valoración del exceso de dicro-
aproximadamente a 100 ml con Agua PA-ACS y mato.
acidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-
126 ISO (12.3.3.). Introducir los electrodos. Añadir la 13.2. Material y aparatos.
solución de Plata Nitrato agitando moderadamente. Como en los apartados 5(a).2.1; 5(a).2.1.1;
Los cuatro primeros ml se adicionan en fraccio- 5(a).2.1.2; 5(a).2.1.3 y 5(a).2.1.4 de los Métodos
nes de 1 ml y se leen las correspondientes lecturas Oficiales de Análisis de Vinos.
en milivoltios; los dos siguientes ml, en fracciones
de 0,2 ml y se continúa adicionando en fracciones 13.3. Reactivos.
de 1 ml hasta que se hayan alcanzado un total de 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
M
131074 Agua PA-ACS exactamente medidos. Tapar el Erlenmeyer, agitar y
131368 Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato esperar por lo menos treinta minutos, agitando de
PA-ISO vez en cuando.
211229 Calcio Hidróxido natural, polvo QP 13.4.3. Valoración.- Valorar el exceso de Dicro-
171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS mato con la solución de Amonio Hierro II Sulfato.
131362 Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-ACS-ISO Cuando la coloración verde de la solución vire a ver-
131500 Potasio Dicromato PA-ISO de azulado, añadir cuatro gotas de reactivo de
131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO 1,10-Fenantrolina. Detener la adición de solución de
Amonio Hierro II cuando el líquido vire a marrón.
13.3.1. Solución de Potasio Dicromato.- Disolver A menudo se puede llegar a pasar el viraje, sien-
33,608 g de Potasio Dicromato PA-ISO en una can- do entonces necesario volver al punto preciso adi-
tidad suficiente de Agua PA-ACS y completar hasta cionando solución de Potasio Permanganato. Un
un litro a 20° C. Esta solución corresponde al grado décimo del volumen empleado de esta solución se
alcohólico internacional O.I.V. 1 ml de esta solución resta del volumen de empleado de Hierro II Sulfato.
oxida 7,8934 mg de alcohol. Hacer una prueba en blanco sustituyendo los 10 ml
de destilado por Agua PA-ACS.
13.3.2. Solución de Amonio Hierro II Sulfato.-
Disolver 135 g de Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato 13.5. Cálculo.
PA-ISO y 20 ml de Acido Sulfúrico 96 % PA-ISO en
una cantidad de Agua PA-ACS suficiente y comple- n’ - n
tar hasta 1 litro, un volumen de esta solución Grado alcohólico = –––––––
corresponde a medio volumen de solución de Pota- n’
sio Dicromato cuando está recientemente prepara-
da. Esta solución se oxida lentamente, por lo que Siendo:
debe ser valorada frecuentemente en la misma que n = volumen, en ml, gastados en la valoración.
se realiza la determinación del alcohol, sustituyendo n’ = volumen, en ml, gastados en la prueba en
la disolución alcohólica por Agua PA-ACS. blanco.
13.3.3. Solución de Potasio Permanganato.-
Disolver 1,088 g de Potasio Permanganato PA- 13.6. Observaciones.
ACS-ISO en una cantidad suficiente de Agua PA- Si el grado alcohólico del vinagre es superior a
ACS y completar hasta 1 litro. 0,8°, repetir la oxidación utilizando 10 ml de destila-
13.3.4. Solución de Acido Sulfúrico diluido.- A do diluido a 1/2.
500 ml de Agua PA-ACS añadir, poco a poco y agi-
tando, 500 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. Des- 13.7. Referencia.
pués de enfriado, completar hasta 1 litro con Agua 13.7.1. Recueil des Méthodes Internationales
PA-ACS. d’Analyses des vins. O. I. V. A-2-16.
13.3.5. Reactivo de Hierro II orto-Fenantrolina.-
Disolver 0,695 g de Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-
ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS, añadir 1,485 g 14. ARSENICO
de 1,10-Fernantrolina 1-hidrato RE-ACS. Calentar
para favorecer la disolución. 14.1. Principio.
13.3.6. Lechada de cal 4N.- Desleír en la con- Reducción del arsénico a arsenamina gaseosa
centración conveniente, Calcio Hidróxido natural, que reacciona con plata dietilditiocarbamato (disuel-
polvo QP con Agua PA-ACS. to en piridina), dando un complejo de color rojo.

13.4 Procedimiento. 14.2. Material y aparatos.


13.4.1. Destilación.- Medir 200 ml de vinagre en 14.2.1. Aparato Quickfit (figura I)
matraz aforado y anotar la temperatura. Introducir el 14.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que
vinagre en el matraz de destilación que contenga permita lecturas a 538 nm.
unos fragmentos de material poroso. Lavar el
matraz cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS. 14.3. Reactivos.
Alcalinizar con un ligero exceso de Lechada de cal 131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
4N. Recoger el destilado en el matraz aforado de 131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO 127
100 ml. Enrasar con Agua PA-ACS a la misma tem- 131058 Acido Sulfurico 96% PA-ISO
peratura que se midió el vinagre inicialmente. 131074 Agua PA-ACS
13.4.2. En un matraz Erlenmeyer, con tapón Arsénico
esmerillado, de 250 ml, poner 20 ml de solución 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
valorada en Potasio Dicromato, 20 ml de Acido Sul- 131303 Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
fúrico diluido y agitar. Añadir 10 ml de destilado 131457 Piridina PA-ACS
14.4. Procedimiento.
14.4.1. Preparación de la muestra.- En un matraz
Kjeldahl de 500 ml, introducir 100 ml de vinagre con
100 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, para evi-
tar las pérdidas de As. Llevar a ebullición hasta redu-
cir el volumen a 10 ml, añadir 5 ml de Acido Sulfúrico
96% PA-ISO y continuar la ebullición adicionando
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO gota a gota hasta la
total decoloración. Después de la expulsión de los
vapores nitrosos dejar enfriar, diluir con 10 ml de
Agua PA-ACS y calentar hasta casi sequedad. Una
vez frío el matraz, trasvasar el residuo al matraz de
valoración utilizando 40 ml de Agua PA-ACS.
14.4.2. Valoración.- Poner en el tubo en U, 3 ml
de la solución de Plata Dietilditiocarbamato. Colocar
en la parte superior del tubo intermedio del aparato
el algodón impregnado en Plomo II Acetato al 10 %
con objeto de retener el sulfhídrico y la fosfamina
que puedan desprenderse al mismo tiempo que la
arsenamina.
Introducir la muestra preparada en el Erlenmeyer
de 100 ml del aparato descrito y añadir sucesiva-
mente 10 ml de la solución de Estaño II Cloruro, 5 ml
de la solución de Potasio Yoduro y 1 ml de la solu-
ción de Cobre II Sulfato. Después de quine minutos
añadir 5 g de Zinc granulado y cerrar rápidamente el
aparato. Colocarlo en la oscuridad y dejar pasar
vapores por lo menos durante una hora.
Figura 14.1 14.4.3. Preparación de la curva de patrón.- A
partir de una solución 14.3.9, preparar soluciones
que contengan 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11;
122382 Plata Dietilditiocarbamato PA 12 mg de Arsénico por litro.
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
131542 Potasio Yoduro PA-ISO 14.5. Cálculo.
Zinc metal, granulado, exento Calcular el contenido en arsénico utilizando la
de Arsénico. correspondiente curva patrón.

14.3.1. Solución de Plata Dietilditiocarbamato 14.6. Observaciones.


PA.- Disolver 1.000 g de este reactivo en 200 ml de 14.6.1. Interfiere en la determinación el antimonio
Piridina PA-ACS. Esta solución puede conservarse cuyo complejo absorbe a 510 nm.
algunas semanas. 14.6.2. La Ley de Lambert-Beer se cumple entre
14.3.2. Plomo II Acetato en algodón.- Impregnar las concentraciones de 0 y 15 microgramos de As.
el algodón hidrófilo en solución acuosa de Plomo II 14.6.3. Este método tiene un límite de detección
Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO al 10%, escurrir el de 0,2 microgramos.
líquido en exceso y desecar al vacío.
14.3.3. Solución acuosa de Potasio Yoduro PA- 14.7. Referencias.
ISO al 15%. 14.7.1. Vasak, V y Sedivec, V (1952) Chem. Listy
14.3.4. Solución acuosa de Cobre II Sulfato 46, 341, citado por M.D. Garrido, M.L. Gil y C. Lla-
5-hidrato PA-ACS-ISO al 2% guno. An. Bromatología XXVI-2 (1974), 167-176.
14.3.5. Solución de Estaño Cloruro.- Disolver 14.7.2. Recueil des Méthodes Internationales
0,33 g de Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO d’Analyses des Vins. O. I. V. A-34f.
en 100 cc de Acido Clorhídrico al 32% (d=1,16).
128 Diluir Acido Clorhídrico 35 % PA-ISO con Agua PA- 15. ZINC
ACS.
14.3.6. Zinc metal granulado, exento de Arséni- 15.1. Principio.
co. Determinación directa por espectrofotometría de
14.3.7. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO absorción atómica.
14.3.8. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
14.3.9. Solución de 100 mg/l de Arsénico.
M
15.2. Material y aparatos. 132362 Ninhidrina PA-ACS
15.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica. 131090 2-Propanol PA-ACS-ISO
15.2.2. Lámpara de zinc.
16.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílico
15.3. Reactivos. del Etilenglicol PRS.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO 16.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS.
131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO 16.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS
131074 Agua PA-ACS 1:1 (v/v)
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 + 0,002 g/l AA 16.4. Procedimiento.
Diluir la muestra hasta que contenga de 0,05 a
15.3.1. Zinc solución patrón Zinc = 1,000 + 0,5 milimoles/ml de prolina. Tomar 1/2 ml de mues-
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de zinc tra diluida e introducirla en un tubo de ensayo con
puro en el mínimo volumen necesario de Acido tapón de rosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico
Nítrico 60% PA-ISO (1+1) y diluir a 1 litro con Acido 98% PA-ACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al
Nítrico al 1% (v/v) (diluir Acido Nítrico 60% PA-ISO 3%. Cerrar herméticamente el tubo e introducirlo en
con Agua PA-ACS). un baño de agua hirviendo durante catorce o quin-
ce minutos. Enfriarlo a unos 200°C de cinco a diez
15.4. Procedimiento. minutos, añadiendo mientras se enfría 5 ml de solu-
15.4.1. Preparación de la muestra.- No se nece- ción de 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS
sita preparación especial. En caso de elevada con- 1:1 (v/v).
centración, realizar una o varias diluciones hasta A continuación efectuar la lectura de la absor-
quedar dentro del rango de medida. ción a 517 nm después de cinco minutos y antes
15.4.2. Determinación.- Diluir partes alícuotas de de treinta minutos.
la solución (15.3.1.) con Acido Acético al 5% (diluir Efectuar un blanco siguiendo el procedimiento
Acido acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA- anterior, pero usando 0,5 ml de Agua PA-ACS en
ACS) para obtener soluciones de 0, 0,5, 1, 1,5 y vez de la solución problema.
2 ppm. Aspirar las soluciones patrón y a continua-
ción la muestra, anotando las absorbancias obteni- 16.5. Interpretación de resultados.
das a 213,8 nm. Calcular el contenido en prolina por comparación
con una curva patrón que comprenda concentra-
15.5. Interpretación de resultados. ciones entre 0,05 y 0,50 milimoles/ml.
Partiendo de los valores de absorbancia obteni-
dos, hallar las concentraciones de zinc de la muestra. 16.6. Referencia.
16.6.1. C.S.Ough J. of Food Science 34 (3),
15.6. Referencias. pág. 228 (1969).
15.6.1. H. E. Parker, Atomic Absorptions News-
letter (1963), 13.
15.6.2. Standart conditions for Zn and Cu. 17. ACIDO ACETICO DE SINTESIS
Analytical Methods for atomic absorption spectro-
photometry “Perkin-Elmer”. 17.1. Principio.
Separación del ácido acético mediante extrac-
ción con éter iso-propílico y medida de su conteni-
16. PROLINA do en C14 mediante espectrofotometría de cente-
lleo líquido.
16.1. Principio.
Determinación cuantitativa de la prolina por reac- 17.2. Material y aparatos.
ción con ninhidrina en medio ácido. 17.2.1. Pipeta automática de 100 µl.
17.2.2. Pipeta aforada de 10 ml.
16.2. Material y aparatos. 17.2.3. Viales para conteo, de vidrio con bajo
16.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca. contenido en potasio, dotados de un sistema de
16.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que
permita efectuar lecturas a 517 nm.
cierre de material plástico para evitar el ataque del
ácido acético.
129
17.2.4. Extractor líquido-líquido en continuo, con
16.3. Reactivos. capacidad para 2 litros de muestra y 3,5 litros de
131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS disolvente orgánico.
131074 Agua PA-ACS 17.2.5. Columna rectificadora de 1 cm de longi-
141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS tud y 3 cm de diámetro interno, rellena de anillos
rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa aislante cerrada cpm(M)
al vacío. A1 = –––––––––––––––
17.2.6. Columna de destilación fraccionada de 0,4 x E1 x g x e
40 cm de longitud y 3 cm de diámetro interno, relle-
na de anillos rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa cpm(F)
aislante cerrada al vacío y llave de salida a los A2 = –––––––––––––––
20 cm. 0,4 x E2 x g x c
17.2.7. Espectrofotómetro de centelleo líquido.
cpm (M+P) - cpm(M)
17.3. Reactivos. E1 (Eficacia de la muestra) = –––––––––––––––––
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO dpm (P)
Butil-PBD.
131314 Eter Di-iso-Propílico estabilizado con cpm (F+P) - cpm(F)
~50 ppm de BHT PA-ACS E2 (Eficacia del fondo ) = –––––––––––––––––––
Tolueno marcado con C14 dpm (P)

17.3.1. Eter Di-iso-Propílico estabilizado con g= gramos de la muestra o fondo en el vial.


~ 50 ppm de BHT PA-ACS. c= gramos de ácido acético por gramo de muestra
17.3.2. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. o de fondo.
17.3.3. Tolueno marcado con C14. cpm (M+P) = cuentas por minuto de la muestra
17.3.4. Solución de 8 g/l de Butil-PBD en Tolue- más el patrón.
no para centelleo. cpm (F+P) = cuentas por minuto del fondo más el
patrón.
17.4. Procedimiento. cpm (M) = cuentas por minuto de la muestra.
17.4.1. Extracción y purificación del ácido acéti- cpm (F) = cuentas por minuto del fondo.
co.- Extraer 2 litros de vinagre de 5 grados acéticos dpm (P) = desintegraciones por minuto del patrón.
(o la cantidad correspondiente si se trata de vina-
gres de otra graduación) en continuo con 3,5 litros
de Eter Di-iso-Propílico estabilizado con ~ 50 ppm
de BHT PA-ACS durante 24 horas al menos con lo
que se obtiene un extracto que debe contener
aproximadamente el 70% de ácido acético presen-
te en el vinagre.
Eliminar el disolvente por destilación en la colum-
na 17.2.5. y rectificar el residuo en la columna
17.2.5. Recoger, por la salida situada en el centro
de la columna, la fracción que destila a 114° des-
preciando las primeras gotas de destilado. El desti-
lado debe tener una riqueza de ácido acético mayor
del 95% en peso.
17.4.2. Medidas espectrofotométricas.
17.4.2.1. Fondo: En un vial se introducen 10,5 g
de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y 10 ml del
líquido del centelleo (17.3.4.).
17.4.2.2. Muestra problema: Introducir, en los
viales de conteo, 10,5 g de cada destilado y 10 ml
de líquido de centelleo (17.3.4.) Preparar al menos
2 viales por cada muestra problema y uno para el
fondo de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. Cada
vial se lee 300 minutos como mínimo.
Una vez efectuado el conteo añadir a cada vial
un volumen de patrón interno (17.3.3.) que dé apro-
130 ximadamente 40.000 dpm y contar durante 4 minu-
tos.

17.5. Cálculo.
Actividad específica (dpm C14/g de C) = A1 - A2
siendo:
M

131
Productos Derivados
de la Uva:
Orujo, Heces y Lías.

132
M
METODOS DE ANALISIS Destilar a continuación recogiendo 200 ml, o
bien las tres cuartas partes de este volumen
1. CONTENIDO ALCOHOLICO EN (150 ml).
ORUJOS, HECES Y LIAS. Añadir al destilado más gotas de Tornasol tintura
RE y comprobamos que el destilado toma color
1.1. Principio. azul, de franca alcalinidad, debida al NH3 que con-
Se determina por destilación de la muestra alca- tiene.
linizada y medida del contenido alcohólico por alco- Seguidamente, con una pipeta se adiciona Aci-
hometría. do Sulfúrico al 10% en cantidad suficiente para que
el destilado vire a rojo, añadiendo un poco más
1.2. Material y aparatos. (0,5 ml) para que el medio quede francamente áci-
1.2.1. Aparato de destilación.- Consta de las do.
siguientes partes: Completar con Agua PA-ACS el contenido de
1.2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 ml con los 200 ml del matraz y se procede a una segunda
rodaje esmerilado. Se puede utilizar de boca ancha destilación, como si de un vino se tratase.
o de boca estrecha. El destilado recogido de esta segunda destila-
1.2.1.2. Columna de rectificación de 20 cm de ción está ya en condiciones para determinar su gra-
largo. do alcohólico por aerometría y efectuar la correc-
1.2.1.3. Disco metálico o de amianto con un ori- ción a 20° C.
ficio de 8 cm de diámetro.
1.2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de longi- 1.5. Expresión de los resultados.
tud con circulación rápida de agua. El resultado se puede expresar:
1.2.2. Equipo de medida. - cm3 de alcohol absoluto / 100 g de muestra.
1.2.2.1. Alcohómetros.
1.2.2.2. Termómetros.- Graduados en grados y 1.6. Referencias.
décimas de grado y comprendiendo el intervalo de 1.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-
0 a 30°. nalyses des Vins. O. I. V. 1969, A2 1-19.
1.2.2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diáme- 1.6.2. De Bernadi, P.; García Viana, E. 1969.
tro y 320 mm de altura. “Determinación de grado alcohólico de heces y
1.2.3. Granatorio. lías”. Estación Enológica de Requena.
1.2.4. Matraz aforado de 200 ml.
1.2.5. Vaso de precipitados.

1.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
211234 Calcio Oxido natural, escoriforme QP
171748 Tornasol tintura RE

1.3.1. Lechada de Cal. Solución de 120 g de


Calcio Oxido natural, escoriforme QP en 1.000 ml
de Agua PA-ACS.
1.3.2. Acido Sulfúrico al 10%. Diluir Acido Sulfú-
rico al 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.

1.4. Procedimiento.
El producto a analizar es vertido en un vaso de
precipitados donde es agitado para su homogenei-
zación y al mismo tiempo para favorecer la expul-
sión de CO2 que pueda contener.
En el caso de orujos, el muestreo se realiza de
forma que la muestra sea lo más homogénea posi-
ble. 133
Pesar 200 g de muestra homogeneizada y vaciar
en el matraz de destilación, añadiendo 200 ml de
Agua PA-ACS, parte de los cuales se utilizan para
enjuagar el vaso que ha contenido la muestra y a
continuación se añade Lechada de Cal hasta neu-
tralizar el exceso (10 ml aproximadamente). Figura 1.1
Aguardientes
compuestos:
Whisky

134
M
METODOS DE ANALISIS 1.4.2. Muestras con más de 60% de etanol.
El procedimiento anteriormente descrito, difiere
1. OBTENCION DEL DESTILADO únicamente en que la muestra se mide en matraz
aforado de 100 ml, que se lava varias veces con
1.1. Principio. agua hasta alcanzar un volumen de aproximada-
Destilación de la muestra en condiciones deter- mente 230 ml. El destilado se recoge en matraz
minadas. aforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACS
dentro del baño de agua a 20°C.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad 1.5. Observaciones.
de fondo redondo y boca esmerilada. 1.5.1. El sistema de destilación debe compro-
1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar. barse en ambos casos como sigue:
1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth, (20-30 cm de Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al
longitud) o similar. 10% en volumen 5 veces sucesivas. Determinar en
1.2.3. Matraces aforados de 100 y 200 ml de la última destilación el título alcohométrico del desti-
capacidad. lado que no debe ser menor de 9,9% en volumen
1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas. de etanol.
1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-
1.3. Reactivos. do que el flujo del destilado sea uniforme.
131074 Agua PA-ACS 1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estará
comprendido entre 45 y 90 minutos.
1.4. Procedimiento.
1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol. 1.6. Referencia.
Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que 1.6.1. Instituto Español de Normalización.
antes de enrasar se mantiene en baño de agua de UNE 33-112-75.
20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-
piando el interior del cuello del matraz de posibles 2. FURFUROL
gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse
que queden burbujas de aire adheridas a las pare- 2.1. Principio.
des del matraz. Destilación y posterior medida espectrofotométrica
Pasar cuantitativamente el volumen medido al de su absorción a 277 nm.
matraz de destilación, lavando tres veces consecu-
tivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de 2.2. Material y aparatos.
Agua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas de 2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.
lavado al matraz de destilación. Cuando se trate de 2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.
bebidas siruposas, por su gran contenido en azú- 2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.
car, el lavado debe efectuarse consecutivamente 2.2.4. Aparato de destilación por arrastre de
con tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS. Pro- vapor, según figura I.
ceder a la destilación.
Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-
litar la ebullición suave. En algunos casos, si se
teme la formación de espuma, añadir un antiespu-
ma inerte (como silicona).
El matraz de recogida del destilado es el mismo
en que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml de
Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,
de forma que el destilado resbale por la pared sin
salpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría
a menos de 10°C. El refrigerante debe ir dotado de
una alargadera que penetre por lo menos 4-6 cm
en el cuello del matraz.
Cuando se hayan recogido aproximadamente
190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a 135
20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, den-
tro del mismo baño, enrasarse con Agua PA-ACS
mediante pipeta.
Tapar el matraz e invertirlo varias veces para
homogeneizar su contenido, antes de proceder a la
determinación del etanol. Figura 2.1
2.3. Reactivos. 3.2. Material y aparatos.
131074 Agua PA-ACS 3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a 105°C.
121085 Etanol v/v 96% PA 3.2.2. Cápsulas de platino o cuarzo de fondo
141334 Furfuraldehído PRS plano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de
altura.
2.3.1. Disolución patrón de furfurol (furfuraldehí- 3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácido
do) de aproximadamente 116 mg/l. Destilar Furfu- sulfúrico concentrado o gel de sílice como sustan-
raldehído PRS recogiendo solamente la fracción de cias desecadoras.
punto de ebullicion, 161,2°C. De este destilado 3.2.4. Baño de agua.
tomar 1 ml, llevarlo a un matraz aforado de 100 ml 3.2.5. Balanza analítica.
enrasando con Etanol 96% v/v PA. Tomar 5 ml de
esta disolución y diluir con alcohol al 50% en volu- 3.3. Procedimiento.
men en un matraz aforado de 500 ml. Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar a
2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de sequedad, en las cápsulas correspondientes pre-
(2.3.1.) obtener disoluciones de 0; 1 ;2; 3; 4 y viamente desecadas y taradas, en baño de agua
5 mg/l de Furfuraldehído PRS. hirviente y mantener en la estufa a 105° C durante
30 minutos.
2.4. Procedimiento. Dejar enfriar las cápsulas en el interior del dese-
2.4.1. Preparación de la muestra. cador y una vez frías pesar en la balanza.
Destilar 25 ml de la muestra en el aparato descri-
to en (2.2.4.) recogiendo 200 ml. 3.4. Cálculo.
Si se observa turbidez en el destilado añadir un El valor del extracto total de la muestra, en gra-
volumen conocido de Etanol 96 % v/v PA, hasta mos por litro, se hallará mediante la fórmula si-
lograr total limpidez en el destilado. guiente:
Extracto total (g/l) = ( M - m ) x 40
2.4.2. Determinación.
Leer la absorbancia en el espectrofotómetro a Siendo:
277 nm, comparando con las lecturas efectuadas a M = Peso, en g, de la cápsula con el extracto
las disoluciones de referencia o bien calculando la seco.
absorbancia de una disolución que contenga 1 mg/l m = Peso, en g de la cápsula vacía.
de Furfuraldehído PRS (valor aproximado 0,15).
3.5. Referencia.
2.5. Cálculo. 3.5.1. Instituto Español de Normalización.
El contenido en furfuraldehído se obtiene me-
UNE 33-106-74.
diante la fórmula:

A 4. ESTERES
Furfuraldehído (mg/l) = ––– x F
A’ 4.1. Principio.
Reacción cuantitativa de los ésteres con hidroxi-
Siendo: lamina en solución alcalina, formación de ácido
A = Absorbancia de la muestra. hidroxámico, acidificación, formación de un com-
A’ = Absorbancia de una disolución que contie- plejo coloreado con iones férricos y medida del
ne 1 mg/l de furfuraldehído. color desarrollado a 525 nm.
F = Factor de dilución.
4.2. Material y aparatos.
2.6. Observaciones. 4.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro que per-
2.6.1. La disolución de referencia se debe pre- mita lecturas a 525 nm.
parar inmediatamente antes de efectuar la medida. 4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y diá-
metro interno 2,5 cm.
2.7. Referencia.
2.7.1. Instituto Español de Normalización. 4.3. Reactivos.
UNE 33-109-74.
136 131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
3. EXTRACTO SECO 121085 Etanol 96% v/v PA
131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO
3.1. Principio. 131914 Hidroxilamino Cloruro PA-ACS-ISO
Evaporación de la muestra a 105° C y pesada 141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS
posterior del residuo. 131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
M
4.3.1. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato la solución de Acido Clorhídrico (4.3.4.), mezclar y
2M. Conservar en nevera. añadir 2 ml de destilado. Añadir 2 ml de la disolu-
4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5N. ción de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.
4.3.3. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato
1M en Sodio Hidróxido 1,75 N. Mezclar inmediata- 4.5. Cálculo.
mente antes de su uso, volúmenes iguales del reac- A partir de las lecturas obtenidas se halla el con-
tivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis horas. tenido en ésteres expresados en etilo acetato,
4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N. mediante las gráficas de calibrado.
4.3.5. Disolución de Hierro Tricloruro 0,37M.
Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos 4.6. Observaciones.
PRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un matraz 4.6.1. El mismo blanco puede ser usado para
aforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de Acido Clorhí- una serie de muestras de distinto contenido en
drico 4N y enrasar con agua. ésteres, pero de semejente graduación alcohólica.

4.4. Procedimiento. 4.7. Referencias.


4.4.1. Construcción de la curva patrón. 4.7.1. Association of Official Analytical Chemists.
4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de Etilo Ace- Edición 1975-9053-59.
tato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con alcohol de
4.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE
50° (preparar a partir de Etanol 96% v/v PA y Agua
33-111-77.
PA-ACS).
4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250 y
300 mg/l de Etilo Acetato. Tomar de la solución 5. ALCOHOLES SUPERIORES
(4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y 15,0 ml intro-
duciéndolos en matraces de 250 ml de capacidad y 5.1. Principio.
completar con alcohol de 50° hasta el enrase. Separación, identificación y cuantificación de los
4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml de la alcoholes superiores al etanol, por cromatografía de
solución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.) mez- gases.
clándolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mezclar y
añadir 2 ml de una cualquiera de las soluciones 5.2. Material y aparatos.
(4.4.1.2.). Introducir en una serie de tubos de ensa- 5.2.1. Cromatógrafo de gases equipados con
yo (4.2.2.), 2 ml de cada una de las soluciones detector de ionización de llama.
(4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.). 5.2.2. Columna cromatográfica.- Columna de
Agitar y dejar reaccionar entre uno y 20 minutos. 4 m de longitud de 1/8” de diámetro interno rellena
Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídrico 4N de Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W
y mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro III
80-100 mallas, lavado a los ácidos.
Cloruro 0,37 M a cada uno de los matraces, tanto al
5.2.3. Microjeringas de 1 ml.
de la solución de referencia como a los de las solu-
ciones (4.4.1.2.). Efectuar las lecturas colorimétricas
5.3. Reactivos.
a una longitud de onda de 525 nm.
5.3.1. Patrones cromatográficos:
Obtener las gráficas de calibrado mediante la
351082 1-Butanol CG
representación de las diferencias de absorción de
354330 iso-Butanol CG
las soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución de
referencia, en función de la concentración de Etilo 353851 2-Butanol CG
Acetato. 354539 2-Metil-1-Butanol CG
4.4.2. Preparación de la muestra. 351079 3-Metil-1-Butanol CG
Destilar siguiendo el procedimiento descrito en el 352516 4-Metil-2-Pentanol CG
método oficial nº 1. 351885 1-Propanol CG
4.4.3. Determinación.
Introducir en un tubo (4.2.2.) 2 ml del destilado y 5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.
4 ml de disolución de Hidroxilamina Clorhidrato
(4.3.3.), agitar y dejar reaccionar entre 1 y 20 minu- 5.4. Procedimiento.
tos. Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídri- 5.4.1. Condiciones cromatográficas.- Las condi-
co (4.3.4.) y mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de ciones cromatográficas orientativas son: Gas porta-
dor nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno
137
Hierro III Cloruro (4.3.5.) Efectuar la lectura colori-
métrica a 525 nm inmediatamente, tomando como 35°C, temperatura del inyector y del detector
blanco la solución de referencia preparada de la 150°C.
siguiente forma: 5.4.2. Calibrado.
Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolu- 5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en eta-
ción de Hidroxilamina Clorhidrato (4.3.3.) y 2 ml de nol de 40° de 4-Metil-2-Pentanol.
5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución TABLA 1
en etanol de 40° en las proporciones que se indican ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
en la Tabla 1. Compuesto Concentración (mg/l)
5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de la ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
solución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml de la 2-Butanol 10
solución del patrón interno (5.4.2.1.) y se inyecta 1-Propanol 125
1 ml en el cromatógrafo. iso-Butanol 175
5.4.3. Muestra problema.- A 10 ml de la muestra 1-Butanol 15
llevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno 2-Metil-1-Butanol 100
(5.4.2.1.) e inyectar 1 mlitro en las mismas condicio- 3-Metil-1-Butanol 300
nes en que se hizo para el calibrado. ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

5.5. Cálculo.
6. METANOL
Una vez identificados los picos por sus retencio-
nes relativas al patrón interno se calculan los facto-
6.1. Principio.
res de respuesta para cada uno de ellos y las con-
Separación, identificación y cuantificación del
centraciones en la muestra problema aplicando las
alcohol metílico por cromatografía gaseosa.
fórmulas:
6.2. Material y aparatos.
Ci x Ap
Como en (5.2.).
Factor de respuesta (Fr) = ––––––––
Ai
6.3. Reactivos.
Etanol pureza cromatográfica.
Aim
Metanol pureza cromatográfica
Concentración en la muestra (mg/l) = Fr x ––––– x f
352516 4-Metil-2-Pentanol CG
Apm

Siendo:
6.4. Procedimiento.
Ci = Concentración del compuesto en la solu-
6.4.1. Condiciones cromatográficas.
ción patrón.
Como en (5.4.1.)
Ap = Area del patrón interno en la solución
6.4.2. Calibrado.
patrón.
6.4.2.1. Patrón interno.- Como en (5.4.2.1.).
Ai = Area del compuesto en la solución
6.4.2.2. Solución patrón.- Preparar una solución
patrón.
de Metanol, en Etanol a 40º C, de concentración
Aim = Area del compuesto en la muestra pro-
similar a la esperada en la muestra.
blema.
6.4.2.3. Solución de calibrado.- A 10 ml de la
Apm = Area del patrón interno en la muestra
solución patrón (6.4.2.2.) se le añade 1 ml de la
problema.
solución del patrón interno (6.4.2.1.), y se inyecta
f = Factor de dilución de la muestra.
1 ml en el cromatógrafo.
6.4.3. Muestra problema.
El contenido en alcoholes superiores vendrá
Como en (5.4.3.).
dado por la suma de los valores individuales obteni-
dos de cada uno de ellos y se expresará en mg/100
6.5. Cálculo.
ml de alcohol absoluto.
Como en (5.5.).
5.6. Referencia.
5.6.1. Association of Official Agricultural Che- 7. GRADO ALCOHOLICO
mists
7.1. Principio.
Se determina por destilación del producto y
medida de la densidad del destilado por areometría.
Para bebidas con un contenido en extracto seco
138 menor o igual a 600 mg en 100 ml, se efectuará
directamente, sin destilación.

7.2. Material y aparatos.


7.2.1. Aparatos de destilación como en (1.2.).
7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° de
d 20/20 debidamente contrastado.
M
7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C. El grado alcohólico real es el leído en el destilado
7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá- obtenido según (7.3.1.).
metro interior y 320 mm de altura. Si en la obtención del destilado, 100 ml de
7.2.5. Baño termostático a 20°C. muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obte-
nida, debe ser multiplicada por 2.
7.3. Procedimiento. 7.4.2. Muestras con extracto seco menor o igual
7.3.1. Obtención del destilado.- Según método a 600 mg en 100 ml:
oficial nº 1 en el caso de bebidas con extracto seco, Para obtener el grado alcohólico real, adicionar
sea mayor de 600 mg/100 ml. al grado alcohólico aparente (leído directamente en
7.3.2. Determinación areométrica.- Limpiar y la muestra sin destilar) 0,2 grados alcohólicos por
secar el alcohómetro antes de su empleo. Dejar que cada 100 mg de extracto/100 ml.
el alcohómetro, termómetro, probeta y muestra,
alcancen en el baño termostatizado la temperatura 7.5. Referencia.
de 20ºC. 7.5.1. Association of Official Analytical Chemist.
Aclarar 2 o 3 veces con la muestra la probeta Edición 1980-9015-9.
que contiene el termómetro. Echar la muestra en la
probeta hasta un volumen conveniente, inclinarla
unos 45° para evitar la agitación y las burbujas (al 8. ALDEHIDOS
introducir luego el alcohómetro, el nivel del líquido
debe estar justo por debajo del borde de la probe- 8.1. Principio.
ta). Tapar la probeta con la palma de la mano, e Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.
invertirla 3 o 4 veces para igualar las temperaturas Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoración
de la probeta y del líquido. Secar el líquido de la del exceso de yodo con sodio tiosulfato.
parte exterior de la probeta (no poner las manos
sobre la probeta para no calentar el líquido conte- 8.2. Material y aparatos.
nido). 8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en décimas de
Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba a mililitro.
abajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la misma
temperatura y que se distribuya cualquier cambio 8.3. Reactivos
de temperatura en todo el líquido. Mantener el bul- 131074 Agua PA-ACS
bo del alcohómetro en el líquido, secar el vástago, 211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución 40%
dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocas p/v QP
décimas de grados estén mojadas. 182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV
Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro. 182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojo
justo debajo del plano de la superficie del líquido,
8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV.
levantar lentamente la cabeza manteniendo la visual
8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
perpendicular al alcohómetro, hasta que la superfi-
8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Pre-
cie varíe de elipse a una línea recta.
parar esta disolución a partir de Sodio Hidrógeno
Anotar el punto en que esta línea intersecciona
Sulfito solución 40% p/v QP y Agua PA-ACS.
con la escala del alcohómetro, siendo ésta la lectu-
ra del alcohómetro.
Levantarlo ligeramente por encima de dicha lec- 8.4. Procedimiento.
tura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el Poner 100 ml del destilado (obtenido según
alcohómetro y en el termómetro, comprobando así Método Oficial 1) en un matraz de 500 ml. Añadir
las primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohó- 100 ml de Agua PA-ACS y un exceso de la diso-
metro con aproximación de 0,05° y la del termóme- lución (8.3.3.) calculado de modo que equivalga
tro con 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertir por lo menos a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l
la probeta con la muestra varias veces para que se (0,05N) SV.
equilibre térmicamente todo el conjunto. Volver a Dejar el matraz bien tapado, durante 30 minutos
atemperar el alcohómetro, secar el vástago y reali- agitando de vez en cuando.
zar nuevas lecturas en el alcohómetro y en el termó- Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
metro. Los valores calculados son válidos si tienen Valorar el exceso de Yodo añadido con Sodio Tio-
sulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV, hasta decoloración
139
aproximación de 0,1 grados alcohólicos, si no fuera
así, realizar lecturas adicionales y calcular la media. completa.
Debe hacerse simultáneamente un ensayo en
7.4. Cálculo. blanco, para comprobar en cada serie de ensayos
7.4.1. Muestras con extracto seco mayor de la estabilidad de las disoluciones de Yodo y Tiosul-
600 mg en 100 ml: fato por ser tan diluidas.
8.5. Cálculo. a 100°C durante 30 minutos. Disolver y transferir el
El contenido en aldehídos, expresado como residuo con varias porciones de alcohol (llevando
acetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula: previamente a pH 8,2) de una graduación similar a
la muestra usando 50 ml de Etanol absoluto PA en
total.
Aldehídos (mg/100 ml 1,1 x 100 Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido
= (V - V1 ) x –––––––––––
de etanol absoluto) 2 (9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.
A
9.5. Cálculo.
Siendo:
V1 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 9.5.1. Acidez total (en V1 x 1,2 x 100
= ––––––––––––––
gastado en la muestra. mg/100 ml de etanol absoluto)
V2 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato A
gastado en el blanco.
A = Grado alcohólico. Siendo :
V1 = Volumen, en ml de sodio hidróxido
8.6. Observaciones. empleados en (9.4.1.).
8.6.1. La disolución de sodio bisulfito tiene A = Grado alcohólico de la muestra.
mayor tiempo de estabilidad si se le añade un 10 %
de alcohol. En cualquier caso esta solución es esta-
ble como máximo una semana. 9.5.2. Acidez fija (en V2 x 1,2 x 100
= ––––––––––––––
mg/100 ml de etanol absoluto)
8.7. Referencias. A
8.7.1. Association of Official Agricultural Che-
mists 1980-9052. Siendo:
8.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE V2 = Volumen, en ml, de sodio hidróxido
33-107-74. empleados en (9.4.2.)
A = Grado alcohólico de la muestra.

9. ACIDEZ VOLATIL 9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado en


mg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,
9.1. Principio. vendrá dado por la fórmula:
Se define convencionalmente como la diferencia Acidez volátil = Acidez total - Acidez fija.
entre los valores de la acidez total y fija, expresadas
ambas en mg de ácido acético por 100 ml de alco- 9.6. Referencia.
hol absoluto. 9.6.1. Association of Official Analytical Chemists.
Edición 1980-9046-9045.
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas.
9.2.2. pH-metro. 10. CENIZAS
9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana. (Materia mineral total)

9.3. Reactivos. 10.1. Principio.


131074 Agua PA-ACS Se denominan cenizas de un whisky, al conjunto
121086 Etanol absoluto PA de los productos de incineración del residuo de
181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV evaporación de un volumen conocido del whisky.

9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N. 10.2. Material y aparatos.


Diluir a 1:10 en matraz aforado Sodio Hidróxido 0,1 10.2.1. Horno eléctrico regulable.
mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS. 10.2.2. Baño de agua y baño de arena.
9.3.2. Etanol absoluto PA. 10.2.3. Lámpara de infrarrojo.
10.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de
140 9.4. Procedimiento. 77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura, fon-
9.4.1. Acidez Total. do plano.
Valorar 50 ml de la muestra con la disolución de 10.2.5. Balanza analítica.
Sodio Hidróxido (9.3.1.), a pH 8,2 utilizando el pH-
metro. 10.3. Reactivos.
9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño maría, en 131074 Agua PA-ACS
una cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarla
M
10.4. Procedimiento. 131074 Agua PA-ACS
Colocar 25 ml de whisky en una cápsula tarada 313189 Plomo solución patrón
en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
precaución en baño de agua hasta consistencia
siruposa, continuar el calentamiento sobre baño de 11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
arena con moderación y durante una media hora. 11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
Es conveniente ayudar a la evaporación con la apli- 11.3.3. Acido Nítrico al 1% v/v en Agua PA-ACS.
cación de rayos infrarrojos hasta carbonización. 11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±
Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cáp- 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de
sula al horno eléctrico a 525°C ± 25°C y con airea- 131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a
ción continua. 1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.
Después de cinco minutos de carbonización
completa, sacar la cápsula del horno, dejar enfriar y 11.4. Procedimiento.
añadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se evapora en 11.4.1. Preparación de la muestra.- Poner
baño de agua, y llevar de nuevo al horno a 525° C. 100 ml de la muestra en la cápsula (11.2.3.) y llevar-
Si la combustión de las partes carbonosas no se la a evaporación hasta consistencia siruposa en
consigue en quince minutos, volver a comenzar la baño de arena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml
operación de adición de Agua PA-ACS, evapora- de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el resi-
ción y recalcinación. duo en el baño de arena o placa. Seguidamente
Después de enfriar en el desecador, pasar la introducir la cápsula en la mufla y mantenerla duran-
cápsula con las cenizas. te dos horas a 450°C, transcurrido dicho tiempo,
sacarla y dejarla enfriar.
10.5. Cálculo. Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el
El contenido en cenizas vendrá dado por la baño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-
siguiente fórmula: tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-
Cenizas (g/l) = 40 x P cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas
(posiblemente de Hierro III Oxido) es aceptado y no
Siendo: requiere un tratamiento posterior.
P = Peso, en gramos, de las cenizas contenidas Disolver a continuación las cenizas con 1 ml de
en 25 ml de whisky. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-
ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavar
10.6. Referencias. la cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas del
10.6.1. Recueil des Méthodes Internationales lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.
d’Analyses des Vins. O.I.V., AGI, 1969. 11.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
10.6.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos, alícuotas apropiadas de la solución patrón (11.3.4.)
Ministerio de Agricultura, 1971, pág 66. con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curva
de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.
11.4.3. Determinación.- Operar según las espe-
11. PLOMO cificaciones del aparato; usando llama de aire-aceti-
leno. Medir las absorbancias de la muestra y patro-
11.1. Principio. nes a 283 nm. Si la solución está muy concentrada
Determinación del plomo por A.A., previa mine- diluirla con Acido Nítrico al 1%.
ralización de la muestra.
11.5 Cálculo.
11.2. Material y aparatos. Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/l
11.2.1. Espectrofotómetro de A.A. mediante comparación con la correspondiente cur-
11.2.2. Lámpara de plomo. va patrón y teniendo en cuenta el factor de concen-
11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar. tración o dilución.
11.2.4. Baño de arena o placa calefactora con
regulación de temperatura o estufa con control de 11.6. Referencia.
temperatura en el rango de 50 a 150°C. 11.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.
11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.
vitrina de extracción de humos. 141
11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml de
capacidad. 12. ZINC

11.3. Reactivos. 12.1. Principio.


131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO Determinación del Zinc por A.A. previa mineraliza-
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO ción de la muestra.
12.2. Material y aparatos. 313178 Cobre solución patrón
12.2.1. Espectrofotómetro de A.A. Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
12.2.2. Lámpara de Zinc.
12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.), 13.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),
(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.). (11.3.2.) y (11.3.3.).
13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ± 0,002
12.3. Reactivos. g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puro
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO en el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico (1:1)
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).
131074 Agua PA-ACS
313193 Zinc solución patrón 13.4. Procedimiento.
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA 13.4.1. Preparación de la muestra.- Como en
(11.4.1.).
12.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.), 13.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
(11.3.2.) y (11.3.3.). partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.) con
12.3.2. Zinc solución patron Zn = 1,000 ± 0,002 Acido Nítrico del 1% para obtener soluciones que
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782 Zinc contengan de 1 a 5 mg de cobre/l.
metal , granalla PRS en el mínimo volumen necesario 13.4.3. Determinación.- Igual que para el plomo.
de Acido Nítrico (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Nítrico Medir a 324,7 nm.
del 1% (v/v).
13.5. Cálculo.
12.4. Procedimiento. Partiendo de los valores de absorbancia obteni-
12.4.1. Preparación de la muestra.- Como en dos para la muestra, hallar mediante la curva patrón
(11.4.1.). las concentraciones de cobre de la muestra.
12.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.), con 13.6. Referencias.
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5; 13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption Newslet-
1; 1,5 y 2 mg/l. ter (1963),13”.
12.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo. 13.6.2. F. Rousselet: “Spectrophotometrie par
La lectura se efectuará a 213,8 nm. absorption atomique Boudin”. Ed. París (1968), pág
59-144.
12.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obteni-
dos, hallar las concentraciones de Zinc para la mues- 14. ARSENICO
tra, teniendo en cuenta el factor concentración o dilu-
ción. 14.1. Principio.
La muestra se somete a una digestión ácida con
12.6. Referencia. una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newslet- La determinación del arsénico se realiza por
ter (1963), 13. espectrofotometría de absorción atómica, con gene-
rador de hidruros.
13. COBRE
14.2. Material y aparatos.
13.1. Principio. 14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de 0,1 g.
Determinación del cobre por A.A., mineralización 14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de
por cenizas a ≤ 450°C y concentración previa a la capacidad.
lectura con objeto de conseguir resultados suficiente- 14.2.3. Pipetas de doble aforo.
mente precisos. 14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.
14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica
13.2. Material y aparatos. equipado con sistema generador de hidruros.
13.2.1. Espectrofotómetro de A.A. 14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.
13.2.2. Lámpara de cobre. 14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara de
142 13.2.3. Los utilizados para el plomo en (11.2.3.), descarga sin electrodos.
(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.). 14.2.8. Registro gráfico.

13.3. Reactivos. 14.3. Reactivos.


131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO 131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO 131669 Acido Etilendiaminotetraacético sal
131074 Agua PA-ACS Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
M
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO 14.4. Procedimiento.
131058 Acido Sulfúrico PA-ISO 14.4.1. Preparación de la muestra. En un matraz
131074 Agua PA-ACS Kjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con
313171 Arsénico solución patrón 20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml de
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a
123314 Sodio Borohidruro PA 5 ml.
131687 Sodio Hidróxido 97%, lentejas Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un
PA-ACS-ISO matraz de 50 ml la solución resultante.
14.4.2. Preparación del blanco y patrones de
14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO trabajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de la
(d= 1,19 g/ml). solución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al mis-
14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 32% v/v. mo tratamiento que la muestra.
Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS- 1 ml de la solución contiene 10 nanogramos de
ISO (d= 1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un Arsénico.
volumen de 100 ml. Preparar un blanco con todos los reactivos utili-
14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 1,5% v/v. zados siguiendo el tratamiento dado a la muestra.
Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS- 14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.
ISO (d=1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un volu- Encender la fuente de alimentación de las lámparas
men de 1.000 ml. de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente
14.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO para que se estabilice la energía de la lámpara.
14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d=1,84). Encender el espectrofotómetro, ajustar la longi-
14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%. tud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de
Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO acuerdo con las condiciones del aparato.
y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de Encender el generador de hidruros, colocando la
temperatura de la celda a 900°C, esperando hasta
100 ml.
que se alcanza dicha temperatura.
14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.
Se ajustan las condiciones del generador de
Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo
hidruros según las especificaciones del aparato.
hasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.
Ajustar el flujo de Argón de acuerdo con las
14.3.8. Disolución de Acido Etilendiaminotetra-
características del aparato.
acético al 1%. Pesar un gramo de Acido Etilendia-
Encender el registrador.
minotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-
14.4.4. Determinación.- Las determinaciones de
ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.
la concentración de Arsénico se realizan por el
14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.
método de adición de patrones, por medio de
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA- medidas duplicadas en el espectrofotómetro en las
ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu- condiciones especificadas en (14.4.3.), añadiendo
men de 100 ml. al matraz de reacción 3 ml de la solución (14.4.1.),
14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20% más 3 ml de la solución (14.3.2.), y 10 ml de la solu-
(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO ción (14.3.8.). Como patrones internos se usan 10,
con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 20 y 50 ng de Arsénico.
14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% Lavar los matraces antes y después de cada
(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con uso, con Acido Clorhídrico 1,5% (14.3.3.).
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. Al construir la gráfica de adición hay que des-
14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ± contar el valor de absorbancia del blanco obtenido
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsénico en las mismas condiciones anteriores, pero aña-
III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido diendo 3 ml de la solución blanco.
al 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al En estas condiciones el límite de detección de la
20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfú- técnica es de 5 ng.
rico 1% (14.3.11.).
14.3.13. Solución patrón de Arsénico de con-
centración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución
patrón de Arsénico (14.3.12.), en un matraz aforado
de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
143
14.3.14. Solución patrón de Arsénico de
concentración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la
solución de Arsénico (14.3.13.), en un matraz
aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con
Agua PA-ACS.
Aguardientes
compuestos:
Ron

144
M
METODOS DE ANALISIS homogeneizar su contenido antes de proceder a la
determinación del etanol.
1. OBTENCION DEL DESTILADO 1.4.2. Muestras con más del 60% de etanol. El
procedimiento anteriormente descrito difiere única-
1.1. Principio. mente en que la muestra se mide en matraz afora-
Destilación de la muestra en condiciones deter- do de 100 ml, que se lava varias veces con Agua
minadas. PA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximada-
mente 230 ml. El destilado se recoge en matraz
1.2. Material y aparatos. aforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACS
1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad dentro del baño de agua a 20°C.
de fondo redondo y boca esmerilada.
1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar. 1.5 Observaciones.
1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de 1.5.1. El sistema de destilación debe compro-
longitud) o similar. barse en ambos caso como sigue:
1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al
capacidad. 10% en volumen cinco veces sucesivas. Determinar
1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas. en la última destilación el título alcohométrico del
destilado, que no debe ser menor del 9,9% en volu-
1.3. Reactivos. men de etanol.
131074 Agua PA-ACS 1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-
do que el flujo del destilado sea uniforme.
1.3.1. Agua PA-ACS 1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estará
comprendido entre cuarenta y cinco y noventa
1.4 Procedimiento. minutos.
1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol.
1.6. Referencia.
Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que
1.6.1. Instituto Español de Normalización. UNE
antes de enrasar se mantiene en baño de agua a
33-112-75.
20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-
piando el interior del cuello del matraz de posibles
gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse 2. FURFUROL
que queden burbujas de aire adheridas a las pare- (Furfuraldehído)
des del matraz.
Pasar cuantitativamente el volumen medido al 2.1. Principio.
matraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua PA- Destilación y posterior medida espectrofotomé-
ACS cada vez, añadiendo las aguas del lavado al trica de su absorción a 277 nm.
matraz de destilación. Cuando se trate de bebidas
siruposas, por su gran contenido en azúcar, el lava- 2.2. Material y aparatos.
do debe efectuarse consecutivamente con tres por- 2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.
2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.
ciones de 50 ml de Agua PA-ACS.
2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.
Proceder a la destilación.
2.2.4. Aparato de destilación por arrastre de
Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-
vapor, según figura 1.
litar la ebullición suave. En algunos casos, si se
teme la formación de espuma, añadir un antiespu-
2.3. Reactivos
mante inerte (como silicona). 131074 Agua PA-ACS
El matraz de recogida del destilado es el mismo 121086 Etanol absoluto PA
en que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml de 141334 Furfuraldehído PRS
Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,
de forma que el destilado resbale por la pared sin 2.3.1. Disolución patrón de Furfuraldehído de
salpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría, aproximadamente 116 mg/l. Destilar Furfuraldehído
a menos de 10° C. El refrigerante debe ir dotado de PRS recogiendo solamente la fracción del punto de
una alargadera que penetra por lo menos 4-6 cm ebullición 161,2°C. De este destilado tomar 1 ml,
en el cuello del matraz.
Cuando se hayan recogido aproximadamente
llevarlo a un matraz aforado de 100 ml, enrasando 145
con Etanol al 95% en volumen. Tomar 5 ml de esta
190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a disolución y diluir con Etanol al 50% en volumen en
20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, den- un matraz aforado de 500 ml.
tro del mismo baño, enrasar con Agua PA-ACS 2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de
mediante pipeta. (2.3.1.) obtener disoluciones de 0, 1, 2, 3, 4 y
Tapar el matraz e invertirlo varias veces para 5 mg/l de Furfuraldehído.
2.6. Observaciones.
2.6.2. La disolución de referencia se debe prepa-
rar inmediatamente antes de efectuar la medida.

2.7. Referencia.
2.7.1. Instituto Español de Normalización. UNE
33-109-74.

3. EXTRACTO SECO REDUCIDO

3.1. Principio.
Evaporación de la muestra a 105°C y pesada
posterior del residuo, y aplicación de una fórmula
empírica.

3.2. Material y aparatos.


3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a los
105°C.
3.2.2. Crisoles de platino o cuarzo de fondo pla-
no, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura.
3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácido
sulfúrico concentrado o gel de sílice como sustan-
cia desecadora.
3.2.4. Baño de agua.
3.2.5. Balanza analítica.

Figura 2.1 3.3. Procedimiento.


Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar a
sequedad, en las cápsulas correspondientes pre-
viamente desecadas y taradas, en baño de agua
hirviente y mantener la estufa a 105ºC, durante
2.4. Procedimiento. treinta minutos.
2.4.1. Preparación de la muestra. Destilar 25 ml Dejar enfriar las cápsulas en el interior del dese-
de la muestra en el aparato descrito en (2.2.4.), cador y una vez frías pesar en la balanza de preci-
recogiendo 200 ml. sión.
Si se observa turbidez en el destilado, añadir un
volumen conocido de Etanol 95% hasta lograr total 3.4. Cálculo.
limpidez en el destilado. El valor del extracto total de la muestra, en gra-
2.4.2. Determinación. Leer la absorbancia en el mos por litro, se hallará mediante la fórmula siguiente:
espectrofotómetro a 277 nm, comparando con las
lecturas efectuadas a las disoluciones de referencia Extracto total (g/l) = (M-m)x40
o bien calculando la absorbancia de una disolución
que contenga 1 mg/l de Furfuraldehído PRS (valor Siendo:
aproximado 0,15). M = peso, en g, de la cápsula con el extracto
seco.
2.5. Cálculo. m = peso, en g, de la cápsula vacía.
El contenido en Furfuraldehído se obtiene mediante
la fórmula: El extracto seco reducido se calcula mediante la
fórmula siguiente:
A Extracto seco reducido = ESR en (g/l)
Furfuraldehído (mg/l) = ––– x F Extracto seco total = EST en (g/l)
146 A’ Azúcares totales = AT en (g/l) = sacarosa +
azúcares reductores
Siendo: ESR = EST - AT
A = absorbancia de la muestra.
A’ = absorbancia de una disolución que 3.5. Referencia.
contiene 1 mg/l de Furfuraldehído. 3.5.1. Instituto Español de Normalización. UNE
F = factor de dilución. 33-106-74.
M
4. ESTERES la solución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.)
mezclándolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mez-
4.1. Principio. clar y añadir 2 ml de una cualquiera de las solu-
Reacción cuantitativa de los ésteres con hidro- ciones (4.4.1.2.).
xilamina en solución alcalina, formación de ácido Introducir en una serie de tubos de ensayo
hidroxámico, acidificación, formación de un com- (4.2.2.), 2ml de cada una de las soluciones
plejo coloreado con iones férricos y medida del (4.4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.).
color desarrollado a 525 nm. Agitar y dejar reaccionar entre uno y veinte
minutos. Añadir 2 ml de la disolución de Acido
4.2. Material y aparatos. Clorhídrico 4N y mezclar. Añadir 2 ml de la disolu-
4.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro que ción de Hierro III Cloruro 0,37M a cada uno de los
permita lectura a 525 nm. matraces, tanto al de la solución de referencia
4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y como a los de las soluciones (4.4.1.2.).
diámetro interno 2,5 cm. Efectuar las lecturas colorimétricas a una longi-
tud de onda de 525 nm.
4.3. Reactivos Obtener las gráficas de calibrado mediante la
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO representación de las diferencias de absorción de
131074 Agua PA-ACS las soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución de
121085 Etanol 96% v/v PA referencia, en función de la concentración de Etilo
131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO Acetato.
131914 Hidroxilamonio Cloruro PA-ACS-ISO 4.4.2. Preparación de la muestra. Destilar
141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos siguiendo el procedimiento descrito en el método
PRS oficial número 1.
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO 4.4.3. Determinación. Introducir en un tubo
(4.2.2.), 2 ml del destilado y 4 ml de disolución de
4.3.1. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.), agitar y dejar
2M. Diluir convenientemente Hidroxilamonio Clo- reaccionar entre uno y veinte minutos. Añadir 2 ml
ruro PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. Conservar de la disolución de Acido Clorhídrico (4.3.4.) y
en nevera. mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro III
4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5 N. Cloruro (4.3.5.)
Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejas Efectuar la lectura colorimétrica a 525 nm
PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. inmediatamente, tomando como blanco la solu-
4.3.3. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro 1M ción de referencia preparada de la siguiente for-
en Sodio Hidróxido 1,75N: mezclar inmediata- ma:
mente antes de su uso, volúmenes iguales del Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolu-
reactivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis ción de Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.) y 2 ml de
horas. la solución de ácido clorhídrico (4.3.4.), mezclar y
4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N. añadir 2 ml del destilado. Añadir 2 ml de la disolu-
Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35% ción de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.
PA-ISO en Agua PA-ACS.
4.3.5. Disolución de Hierro III Cloruro 0,37M. 4.5 Cálculo.
Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, tro- A partir de las lecturas obtenidas se halla el con-
zos PRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un tenido en ésteres, expresados en mg de etilo ace-
matraz aforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de Aci- tato por 100 ml de alcohol absoluto, mediante las
do Clorhídrico 4N y enrasar con agua. gráficas de calibrado.

4.4. Procedimiento. 4.6. Observaciones.


4.4.1. Construcción de la curva patrón. 4.6.1. El mismo blanco, puede ser usado para
4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de Etilo una serie de muestras de distinto contenido en
Acetato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con Etanol ésteres, pero de semejante graduación alcohóli-
96% v/v PA convenientemente diluido en Agua ca.
PA-ACS hasta concentración 50º.
4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250 4.7. Referencias. 147
y 300 mg/l de Etilo Acetato PA-ACS-ISO. Tomar 4.7.1. Association of Official Analytical Che-
de la solución (4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y mists. Edición 1975-9053-59
15,0 ml introduciéndolos en matraces de 250 ml 4.7.2. Instituto Español de normalización. UNE
de capacidad y completar con Etanol de 50° has- 33-111-77.
ta el enrase.
4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml de
5. ALCOHOLES SUPERIORES
Aim
5.1. Principio. Concentración en la muestra (mg/l) = Fr x –––––– x f
Separación, identificación y cuantificación de los Apm
alcoholes superiores al etanol por cromatografía de
gases. Siendo:
Ci = concentración del compuesto en la solu-
5.2. Material y aparatos. ción patrón.
5.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con Ap = área del patrón interno en la solución
detector de ionización de llama. patrón.
5.2.2. Columna cromatográfica. Columna de 4 m Ai = área del compuesto en la solución patrón.
de longitud de 1/8” de diámetro interno rellena de Aim = área del compuesto en la muestra proble-
Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W ma.
80-100 mallas, lavado a los ácidos. Apm = área del patrón interno en la muestra pro-
5.2.3. Microjeringas de 1 µl. blema.
f = factor de dilución de la muestra.
5.3. Reactivos.
5.3.1. Patrones cromatográficos: El contenido en alcoholes superiores vendrá
131082 1-Butanol PA-ACS-ISO dado por la sumo de los valores individuales obteni-
354330 iso-Butanol CG dos de cada uno de ellos y se expresará en mg/100
353851 2-Butanol CG ml de alcohol absoluto.
354539 2-Metil-1-Butanol CG
351079 3-Metil-1-Butanol CG 5.6. Referencia.
4-Metil-2-Pentanol (patrón interno) 5.6.1. Association of Official Agricultural Che-
351885 1-Propanol CG mists 1980, 9075.

5.3.2. Etanol pureza cromatográfica. TABLA 1


–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
5.4. Procedimiento. Compuesto Concentración (mg/l)
5.4.1. Condiciones cromatográficas. Las condi- –––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
ciones cromatográficas orientativas son: gas porta- 2-Butanol 10
dor nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno 1-Propanol 125
85°C, temperatura del inyector y del detector iso-Butanol 175
150°C. 1-Butanol 15
5.4.2. Calibrado. 2-Metil-1-Butanol 100
5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en eta- 3-Metil-1-Butanol 300
nol de 40° C 4-Metil-2-Pentanol. –––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución
en alcohol de 40° en las proporciones que se indi- 6. METANOL
can en la tabla 1. (Alcohol Metílico)
5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de la
solución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml de 6.1. Principio.
la solución patrón interno (5.4.2.1.) Y se inyecta 1 µl Separación, identificación y cuantificación del
en el cromatógrafo. metanol por cromatografía gaseosa.
5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestra
llevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno 6.2. Material y aparatos.
(5.4.2.1.) e inyectar un litro en las mismas condicio- Como en 5.2.
nes en que se hizo para el calibrado.
6.3. Reactivos.
5.5. Cálculo. Metanol pureza cromatográfica.
Una vez identificados los picos por sus retencio- 4-Metil 2-Pentanol (Patrón interno).
nes relativas al patrón interno se calculan los facto- Etanol pureza cromatográfica.
148 res de respuesta para cada uno de ellos y las con-
centraciones en la muestra problema aplicando las 6.4. Procedimiento.
fórmulas. 6.4.1. Condiciones cromatográficas.- Como en
5.4.1.
Ap 6.4.2. Calibrado.
Factor de respuesta ( Fr ) = Ci x ––––– 6.4.2.1. Patrón interno. Como en 5.4.2.1.
Ai 6.4.2.2. Solución patrón. Preparar una solución
M
de Metanol en Etanol a 40°, de concentración simi- alcohómetro y en el termómetro, comprobando así
lar a la esperada en la muestra. las primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohó-
6.4.2.3. Solución de calibrado. A 10 ml de la metro con aproximación de 0,05° y la del termóme-
solución del patrón interno (6.4.2.2.), se le añade tro con 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertir
1 ml de la solución del patrón interno (6.4.2.1.) y se la probeta con la muestra varias veces (el termóme-
inyecta 1 µl en el cromatógrafo. tro quede en su sitio), para que se equilibre térmica-
6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3. mente todo el conjunto. Volver a atemperar el alco-
hómetro, secar el vástago y realizar nuevas lecturas
6.5. Cálculo. en el alcohómetro y en el termómetro. Los valores
Como en 5.5. calculados son válidos si tienen aproximación de
6.6. Referencia. 0,1 grado alcohólico, si no fuera así, realizar lectu-
Como en 5.6. ras adicionales y calcular la medida.

7. GRADO ALCOHOLICO 7.4. Cálculo.


El grado alcohólico real es el leído en el destilado
7.1. Principio obtenido según 7.3.1.
Se determina por destilación del producto y Si en la obtención del destilado, 100 ml de
medida de la densidad del destilado por areometría. muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obte-
nida, debe ser multiplicada por 2.
7.2. Material y aparatos.
7.2.1. Aparatos de destilación como en 1.2. 7.5. Referencia.
7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° de 7.5.1. Association of Official Analytical Chemists.
d 20/20 debidamente contrastado. Edición 1980-9015-9.
7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.
7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá-
metro interior y 320 mm de altura. 8. ALDEHIDOS
7.2.5. Baño termostático a 20°C.
8.1. Principio.
7.3. Procedimiento. Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.
7.3.1. Obtención del destilado. Según método Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoración
oficial número 1. del exceso de yodo con sodio tiosulfato.
7.3.2. Determinación areométrica. Limpiar y
secar el alcohómetro antes de su empleo. 8.2. Material y aparatos.
Echar el destilado en la probeta, inclinarla unos 8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en décimas de
45° para evitar la agitación y las burbujas. Tapar la ml.
probeta con la palma de la mano, e invertirla 3 o 4
veces para igualar las temperaturas de la probeta y 8.3. Reactivos.
el líquido. 131074 Agua PA-ACS
Dejar que el alcohómetro, termómetro, probeta y 211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución
destilado, alcance en el baño termostatizado la 40% p/v QP
temperatura de 20°C. 182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV
Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba a 182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
abajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la misma
temperatura y que se distribuya cualquier cambio 8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV.
de temperatura en todo el líquido. Mantener el bul- 8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
bo del alcohómetro en el líquido, secar el vástago, 8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Diluir
dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocas convenientemente Sodio Hidrógeno Sulfito solución
décimas de grados estén mojadas. 40% p/v QP en Agua PA-ACS.
Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.
Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojo 8.4. Procedimiento.
justo debajo del plano de la superficie del líquido, Poner 100 ml del destilado (obtenido según
levantar lentamente la cabeza manteniendo la visual Método oficial número 1) en un matraz de 500 ml
perpendicular al alcohómetro, hasta que la superfi- de Agua PA-ACS y un exceso de la disolución 149
cie varíe de elipse a una línea recta. (8.3.3.) calculado de modo que equivalga, por lo
Anotar el punto en que esta línea intersecciona menos, a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
con la escala del alcohómetro, siendo ésta la lectu- Dejar el matraz, bien tapado, durante treinta
ra del alcohómetro. minutos, agitando de vez en vez.
Levantarlo ligeramente por encima de dicha lec- Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
tura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el Valorar el exceso de yodo añadido con Sodio Tio-
sulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV hasta decoloración con la disolución de Sodio Hidróxido (9.3.1.) a
completa. pH 8,2 utilizando el pH-metro.
Debe hacerse simultáneamente un ensayo en 9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño María, en
blanco, para comprobar en cada serie de ensayos una cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarla
la estabilidad de las soluciones de Yodo y Tiosulfato a 100° C durante treinta minutos. Disolver y transfe-
por ser tan diluidas. rir el residuo con varias porciones de Etanol absolu-
to PA (llevando previamente a pH 8,2) de una gra-
8.5. Cálculo. duación similar a la muestra usando 50 ml de Etanol
El contenido en aldehídos, expresado como absoluto PA en total.
acetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula: Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido
(9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.

Aldehídos (mg/100 ml 1,1 x 100 9.5. Cálculo.


de alcohol absoluto) = (V2
- V1) x ––––––––––
A
Siendo: 9.5.1. Acidez fija (en V1 x 1,2 x 100
V1 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gasta- mg/100 ml de etanol absoluto) = –––––––––––––––
do en la muestra. A
V2 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gasta- Siendo:
do en el blanco. V1 = volumen, en ml, de sodio hidróxido em-
A = grado alcohólico. pleados en 9.4.1.
A = grado alcohólico de la muestra.
8.6. Observaciones.
8.6.1. La solución de sodio bisulfito tiene mayor
tiempo de estabilidad si se le añade un 10% de 9.5.2. Acidez fija ( en V2 x 1,2 x 100
alcohol. En cualquier caso esta solución es estable, mg/100 ml de etanol absoluto) = ––––––––––––––
como máximo una semana. A
Siendo:
8.7. Referencias. V2 = volumen, en ml, de sodio hidróxido em-
8.7.1. Association of Official Agricultural Che- pleados en 9.4.2.
mists 1980-9052. A = grado alcohólico de la muestra.
8.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE
33-107-74. 9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado en
mg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,
vendrá dado por la fórmula :
9. ACIDEZ VOLATIL
Acidez volátil = acidez total - acidez fija.
9.1. Principio.
Se define convencionalmente como la diferencia 9.6. Referencia.
entre los valores de la acidez total y fija, expresadas 9.6.1. Association of Official Analytical Chemists.
ambas en mg de ácido acético por 100 ml de alco- Edición 1980-9046-9048.
hol absoluto.
10. AZUCARES REDUCTORES
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas. 10.1 Principio.
9.2.2. pH-metro. Eliminación previa de todas las materias reduc-
9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana. toras distintas de los azúcares reductores por defe-
cación y posterior valoración basada en la acción
9.3. Reactivos. reductora de los azúcares sobre una solución
131074 Agua PA-ACS cupro-alcalina.
121086 Etanol absoluto PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO 10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeración
150 9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N. de reflujo.
Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejas 10.2.2. Material necesario para volumetría.
PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS. 10.2.3. Baño de agua.
9.3.2. Etanol absoluto PA.
10.3. Reactivos.
9.4. Procedimiento. 131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS
9.4.1. Acidez total. Valorar 50 ml de la muestra 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
M
131074 Agua PA-ACS 25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuación
171096 Almidón soluble RE valorar con Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.
121212 Calcio Carbonato precipitado PA Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PA-
211835 Piedra Pómez gránulos QP ACS y tratar como se ha indicado para la muestra.
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
131542 Potasio Yoduro PA-ISO 10.5. Cálculo.
122032 Sodio Carbonato 1-hidrato PA La cantidad de azúcar, expresada en azúcares
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO reductores contenida en la muestra analizada, se
181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV obtiene en la tabla adjunta en función del número
181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV n’ - n de ml de tiosulfato utilizado.

10.3.1. Solución de Plomo II Acetato 3-hidrato Siendo:


PA-ACS-ISO (aproximadamente saturada). Añadir a n = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-
250 g de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO, fato 0,1 N, utilizados para la valoración de la
Agua PA-ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta muestra.
disolución completa. n’ = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-
10.3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. fato 0,1 N, utilizados en la prueba en blanco.
10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA.
10.3.4. Solución cupro-alcalina. Disolver por Expresar el contenido en gramos de azúcares
separado 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA- reductores por litro, teniendo en cuenta las dilucio-
ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Aci- nes efectuadas en el curso de la defecación del
do Cítrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PA- volumen de la muestra analizada.
ACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en
300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar la
10.6. Referencia.
solución de Cobre Sulfato y completar el volumen
10.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
con Agua PA-ACS hasta un litro.
d’Analyses des Vins. O. I. V. A4e 106-107 (defeca-
10.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%.
ción y 126-127 (valoración).
Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISO
con Agua PA-ACS. Conservar en frasco topacio.
10.3.6. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % en
volumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico
96% PA-ISO en Agua PA-ACS.
10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.
10.3.8. Engrudo de almidón de 5 g/l. Diluir con-
venientemente 5 g de Almidón soluble RE en 1 l de
Agua PA-ACS; contendrá 200 g/l de Sodio Cloruro
PA-ACS-ISO para asegurar su conservación. Esta
solución debe ser mantenida diez minutos en ebulli-
ción en el momento de su preparación.

10.4. Procedimiento.
10.4.1. Defecación plúmbica. Llevar 100 ml de
ron a un matraz aforado de 125 ml. Añadir agitando
5 ml de solución saturada de Plomo II Acetato y 1 g
de Calcio Carbonatado precipitado PA, agitar varias
veces y dejar sedimentar, por lo menos quince
minutos, enrasar con Agua PA-ACS, añadir 0,6 ml
más de Agua PA-ACS y filtrar.
10.4.2. Valoración. Poner en el Erlenmeyer de
300 ml 25 ml de la solución cuproalcalina y 25 ml
de ron previamente defecado. Añadir unos gramos
de Piedra Pómez granulos QP y llevar a ebullición, 151
que debe ser alcanzada en dos minutos, adaptan-
do a Erlenmeyer al refrigerante de reflujo y mantener
exactamente durante diez minutos la ebullición.
Enfriar inmediatamente bajo corriente de agua
fría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro
al 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico al
152
TABLA 10.I
Azúcares reductores expresados en mg de glucosa

Primera cifra decimal


ml sodio
tiosulfato 0,1N
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

0 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,9
1 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,1
2 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,4
3 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,7
4 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,1
5 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,5
6 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,9
7 23,2 23,5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,3
8 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,7
9 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,0
10 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,5
11 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,0
12 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,5
13 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,0
14 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,5
15 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,0
16 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,6
17 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,4
18 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,1
19 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,0
20 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,9
21 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,8
22 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,8
23 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,8
24 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,8
25 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8
M
11. PLOMO 11.4.3. Determinación. Operar según las especi-
ficaciones del aparato, usando llama de aire-acetile-
11.1. Principio. no. Medir las absorbancias de la muestra y patro-
Determinación del plomo por A.A., previa mine- nes a 283 nm. Si la solución está muy concentrada
ralización de la muestra. diluirla con Acido Nítrico al 1%.

11.2. Material y aparatos. 11.5. Cálculo.


11.2.1. Espectrofotómetro de A.A. Calcular el contenido en plomo, expresado en
11.2.2. Lámpara de plomo. mg/l mediante comparación con la correspondiente
11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar. curva patrón y teniendo en cuenta el factor de con-
11.2.4. Baño de arena o placa calefactora con centración o dilución.
regulación de temperatura o estufa con control de
temperatura en el rango de 50 a 150° C. 11.6. Referencia.
11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de 11.6.1. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”.
vitrina de extracción de humos. Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.
11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1000 ml de capa-
cidad.
12. ZINC
11.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO 12.1. Principio.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO Determinación del zinc por A.A. previa minerali-
131074 Agua PA-ACS zación de la muestra.
313189 Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA 12.2. Material y aparatos.
12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. 12.2.2. Lámpara de zinc.
11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. 12.2.3. Los utilizados para el plomo en 11.2.3.,
11.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS 11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6.
(v/v).
11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ± 12.3. Reactivos.
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,589 g de 131074 Agua PA-ACS
131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
1.000 ml con Acido Nítrico al 1%. 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
313193 Zinc solución patrón
11.4. Procedimiento. Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
11.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 ml
de la muestra en la cápsula (11.2.3.), llevarla a eva- 12.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1.,
poración hasta consistencia siruposa en baño de 11.3.2. y 11.3.3.
arena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de Acido 12.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002
Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782
baño de arena o placa. Seguidamente introducir la Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumen
cápsula en la mufla y mantenerla durante dos horas necesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y
a 450° C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).
dejarla enfriar.
Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el 12.4. Procedimiento.
baño de arena o placa e introducir en la mufla, repi- 12.4.1. Preparación de la muestra. Como en
tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan- 11.4.1.
cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas 12.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
(posiblemente de Fe2O3 ) es aceptado y no requiere partes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.) con
un tratamiento posterior. Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,2;
Disolver a continuación las cenizas con 1 ml de 1; 1,5 y 2 mg/l.
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA- 12.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavar La lectura se efectuará a 213,8 nm. 153
la cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas de
lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente. 12.5. Cálculo.
11.4.2. Construcción de la curva de patrón. Partiendo de los valores de absorbancias obteni-
Diluir alícuotas apropiadas de la solución patrón dos, hallar las concentraciones de Zn para la mues-
(11.3.4.) con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener tra, teniendo en cuenta el factor concentración o
una curva de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l. dilución.
12.6. Referencia. 14. ARSENICO
12.6.1. H. E. Parker. “Atomic Absorption News-
letter” (1963),13. 14.1. Principio.
La muestra se somete a una digestión ácida con
una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
13. COBRE
La determinación del arsénico se realiza por
espectrofotometría de absorción atómica, con gene-
13.1. Principio.
rador de hidruros.
Determinación del cobre por A.A., mineralización
por cenizas a < 450° C y concentración previa a la
14.2. Material y aparatos.
lectura con objeto de conseguir resultados suficien-
temente precisos. 14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de
0,1 g.
13.2. Material y aparatos. 14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de
13.2.1. Espectrofotómetro de A.A. capacidad.
13.2.2. Lámpara de cobre. 14.2.3. Pipetas de doble aforo.
13.2.3. Los utilizados para el plomo, en 11.2.3., 14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.
11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6. 14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica
equipado con sistema generador de hidruros.
13.3. Reactivos. 14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.
131074 Agua PA-ACS 14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara de
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO descarga sin electrodos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO 14.2.8. Registrador gráfico.
313193 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA 14.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
13.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1., 131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
11.3.2. y 11.3.3. Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ± 131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci- 131074 Agua PA-ACS
do Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litro 313171 Arsénico solución patrón
con Acido Nítrico del 1% (v/v). As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO
13.4. Procedimiento. 123314 Sodio Borohidruro PA
13.4.1. Preparación de la muestra. Como en 131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
11.4.1.
13.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir 14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.) con 14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PA-
Acido Nítrico del 1%, para obtener soluciones que ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
contengan de 1 a 5 mg de Cu/l. 100 ml.
13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo. 14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PA-
Medir a 324,7 nm. ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
1000 ml.
13.5. Cálculo. 14.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO.
Partiendo de los valores de absorbancia obteni- 14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
dos para la muestra, hallar mediante la curva patrón 14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.
las concentraciones de cobre de la muestra. Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y
disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de
13.6. Referencia. 100 ml.
13.6.1. H. E. Parker “Atomic Absorption News- 14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.
letter” (1963),13. Pesar 3 g de Sodio Borohidruro PA y disolverlo hasta
13.6.2. F. Rousselet “Spectrophotometrie par 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.
154 absorption atomique Boudin”. Edición París (1968), 14.3.8. Disolución al 1% de Acido Etilendiamino-
páginas 59-144. tetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.
Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta
100 ml con Agua PA-ACS.
14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO
M
y disolverlo con Agua PA-ACS hasta el volumen de reacción 3 ml de la solución 14.4.1., más 3 ml de la
100 ml. solución 14.3.2. y 10 ml de la solución 14.3.8. Como
14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20% patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.
(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Lavar los matraces antes y después de cada uso,
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. con Acido Clorhídrico (14.3.3.).
14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% (v/v). Al construir la gráfica de adición hay que descon-
Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua tar el valor de absorbancia del blanco obtenido en las
PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. mismas condiciones anteriores, pero añadiendo 3 ml
14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ± de la solución blanco.
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsénico En estas condiciones el límite de detección de la
III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al técnica es de 5 ng.
20% (14.3.9), neutralizar con Acido Sulfúrico al 20%
(14.3.10), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico 1% 15. SACAROSA
(14.3.11.).
14.3.13. Solución patrón de Arsénico de concen- 15.1. Principio.
tración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsé- La sacarosa se determina por la diferencia de los
nico (14.3.12.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluir poderes reductores antes y después de la hidrólisis
hasta el enrase con Agua PA-ACS. clorhídrica del líquido procedente de la defecación del
14.3.14. Solución patrón de Arsénico de concen- ron.
tración 0,1mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsé-
nico (14.3.13.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluir 15.2. Reactivos
hasta el enrase con Agua PA