UNIVERSIDAD DE COSTA RICA

FACULTAD DE AGRONOMÍA
ESCUELA DE FITOTECNIA
AF-0109

RELACIONES HOSPEDERO – PATÓGENO. Demostración de ácido oxálico

De los miles de microorganismos existentes, sólo una pequeña parte es capaz de

causar enfermedad en un hospedante dado. Esto se debe a que deben cumplirse una
serie de requisitos como que debe ser capaz de abrirse paso al interior de ésta, obtener
nutrientes de ella y neutralizar sus reacciones de defensa.

Las superficies de la planta que se encuentran expuestas al medio, están

compuestas de celulosa o por una capa de cutícula que recubre las paredes de las
células epidérmicas. Es muy frecuente que la cutícula de partes jóvenes de una planta se
recubran de una capa de cera. En muchos casos, los patógenos logran infectar a las
plantas a través de la secreción de compuestos químicos que afectan éstos componentes
o algún mecanismo metabólico de su hospedante.

En el caso particular de la relación Mycena citricolor - cafeto, un grupo de

investigadores observaron la presencia de cristales tetrahédricos perfectos de oxalato de
calcio, tanto en los puntos de infección como en el tejido necrótico, lo cual dio lugar a la
sospecha de que dichos cristales jugaban un papel importante en la patogénesis del
hongo. Posteriormente, se descubrió que el ácido oxálico, una toxina no específica, es
liberado por el patógeno antes de la penetración, de manera que “captura” el calcio de las
paredes celulares del hospedero provocando que el tejido afectado se debilite,
permitiendo así la entrada de la hifa. Ante la sospecha de que las lesiones iniciales son
causadas por un descenso en el pH, se probaron soluciones de ácido oxálico,
observándose el mismo tipo de lesión.

De acuerdo a estos resultados, se cree que, al menos en una fase inicial, la lesión
causada por M. citricolor es consecuencia de una disminución en el pH debido a la
presencia del ácido. Esta disminución puede también activar ciertas enzimas como la
oxidasas del ácido indolacético, celulasa y poligalacturonasa, que pueden contribuir aún
más a la desintegración del tejido.

Objetivos:

Demostrar cómo la cutícula de la hoja sirve como barrera a la penetración de

patógenos.
Demostrar el mecanismo de patogénesis en un hongo de follaje.

Procedimiento:

- En el laboratorio encontrará tanto soluciones de ácido oxálico (0.1, 0.2, 0.4, y

0.8 %) como estructuras de reproducción (gemas o cabecitas) del hongo
Mycena citricolor, agente causal del ojo de gallo del cafeto.
 - Tome tres hojas de cafeto en identifíquelas con un pequeño trozo de cinta
adhesiva en el pecíolo. A una de ellas se le aplicará una de las
concentraciones de ácido oxálico, la segunda será inoculada con el patógeno,
y la última servirá como testigo.
- Con la ayuda de una aguja hipodérmica de 1 mL, provoque heridas
superficiales (no debe romper el tejido) a la mitad derecha de la lámina de
cada hoja, en el haz (figura 1).
- Aplique los siguientes tratamientos a ambas mitades de la hoja.

a) Acido oxálico al 0.1% con heridas

b) Acido oxálico al 0.1% sin heridas
c) Acido oxálico al 0.2% con heridas
d) Acido oxálico al 0.2% sin heridas
e) Acido oxálico al 0.4% con heridas
f) Acido oxálico al 0.4% sin heridas
g) Acido oxálico al 0.8% con heridas
h) Acido oxálico al 0.8% sin heridas
i) Mycena citricolor con presencia de heridas
j) Mycena citricolor sin heridas
k) Testigo (agua destilada estéril con y sin heridas)

inóculo

# # # #

heridas

- Coloque en una cámara húmeda y observe a los 4 días (martes). A los 8 días
(viernes próximo), determine el número de lesiones/tratamiento y mida el
tamaño de cada una de ellas.
- Con la ayuda de un microscopio, observe la presencia de cristales de oxalato
de calcio en el medio de cultivo donde está creciendo la colonia de Mycena
citricolor

Discusión:

- Utilizando la información del cuadro común, compare los resultados obtenidos

de la inoculación con el patógeno vrs. aplicación de soluciones de ácido
oxálico.
- Determine si hay diferencias en cuanto al tipo de lesión causada por el
patógeno de la provocada por el reactivo.
- En caso de que ambos tipos de lesión sean muy parecidas, ¿cómo podrían
diferenciarse las causas?