Cột C18 ( RP-18, ODS...

) là loại cột có nền là silica, được biến tính gắn vào mạnh
hydrocacbon C18H37 -(CH2)17-CH3. Các "dây" C18 chĩa ra để "nắm bắt, lưu giữ"
các cấu tử. Ngoài ra vẫn còn một tỷ lệ nhất định -OH vẫn còn của nền, do vậy
người ta phải end cap lại những tâm đó. Thực chất tỷ lệ silan hóa và end cap sẽ
quyết định cột của bạn tốt đến đâu, do vậy các hãng khác nhau sẽ có cột có chất
lượng khác nhau và giá cả khác nhau.
Tuyệt đối không bao giờ cho dung môi 100% nước qua cột C18- đi luôn đó, các
'dây" C18 sẽ nằm bẹp xuống và hết lưu giữ...Không đảo chiều cột, hết võ làm sạch
cột mới nên đảo

Như vậy, loại cột ở ví dụ trên có thể ký hiệu là "Purospher® STAR 250-4, RP-18e,
5µm", trong các báo cáo hay tạp chí khoa học, kiểu ký hiệu này được sử dụng để
cung cấp đầy đủ thông tin về loại cột mà tác giả đã sử dụng.

Về chi tiết bạn cho rằng không bao giờ được sử dụng 100% nước qua cột C18, mình
có một vài ý kiến sau. Trước đây, cột C18 được chế tạo tạo trên nên SiO2, và pha
tĩnh được siland hóa , quá trình này diễn ra với hiệu suất không cao làm cho trên bề
mặt SiO2 còn rất nhiều nhóm -OH, đương nhiên nó có tính acid, và dể bị thuỷ phân
(đặc biệt trong môi trường pH lớn hơn 7.5), điều này dẫn đến sự mất cấu trúc hạt và
làm giảm khả năng lưu giử.

Tuy nhiên, hiện nay, các cột C18 được sử lý endcap rất tốt, đặc biệt là với các loại
cột C18 bond phase theo kiểu polymeric, các nhóm -OH còn lại rất ít và hầu như
không có cơ hội tiếp xúc với H2O khi bạn chạy 100%, vì vậy, sự thủy phân xảy ra rât
ít và không ảnh hưởng đến chất lượng cột ( ngoại trừ trường hợp bạn bảo quản cột
trong H2O thì quá trình thẩm thấu vào sâu bên trong hạt có thể gây ra sự thủy phân
đáng kể). Như vậy, với thế hệ Cột C18 mới, việc cho H2O 100% chạy qua là hoàn
toàn được phép (vì nếu không được thì trong user guide của cột đã cấm rồi ),
thậm chí việc chạy với H2O 100% còn giúp cho việc rửa các loại đệm muối ra khỏi
cột nhanh chóng và hoàn toàn hơn.

Tóm lại, việc sử dụng H2O 100% hay không là tùy thuộc vào bản chất loại cột C18
đang sử dụng, với kinh nghiệm của mình thì các loại cột Purophers, Lichropher, ACE
C18 hầu như không bị suy giảm khả năng lưu giử do chạy 100% H2O trong vài chục
phút đến 1 giờ mỗi ngày.

Một vài ý kiến cùng trao đổi với các bạn