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w 

 
 

 w
ww

ë?
 , el estudio de los organismos
microscópicos, deriva de 3 palabras griegas:
©
 (pequeño),   (vida) y 
(ciencia) que conjuntamente significan el
estudio de la vida microscópica.
ë |sta ciencia trata de los seres vivos muy
pequeños, concretamente de aquellos cuyo
tamaño se encuentra por debajo del poder
resolutivo del ojo humano
ë OBJETO MATERIAL: os microorganismos
ë OBJETO FORMAL: Õodos los aspectos y
enfoques desde los que se pueden estudiar
los microorganismos conforman lo que
denominamos objeto formal de la
Microbiología:
c



 

  

  


 





















 


 


.
ë |l j t st is i li vi
t r i r l t l í r i
r r vi i , r st i r,
l s i r r is s.

ë Pr is t , l ri t r í l
i r i l í r l i tr s i i s
i l i s, l r i i t l s
últi l s tivi s s l s r l s
i r r is s, tri irl s l
r i , r t ti , l s
i str t s té i s rti t s.
ë Úobert Hooke observó que el tejido vegetal
estaba formado por celdillas e introdujo el
t rmino de c lula (1665).
ë as observaciones de Hooke fueron las bases
del desarrollo de la M
  ,
concluyendo que cada c lulas es una unidad
constitucional y funcional de los seres vivos,
capaz de mantener su propia existencia
independientemente.
ë Ênton van eeuwenhoek, utilizando un
microscopio simple, fue el primero en
observar los microorganismos (1673).
c

 



w c

  



ë |l t rmino



  
  se refiere al




  
 
 no a la ganancia de
talla de un individuo de la población.
ë cuando una población crece, es posible
determinar la î

 




 
midiendo el cambio en el n mero de c lulas por
unidad de tiempo. Êsí mismo podemos estimar
cuantas generaciones han transcurrido hasta el
momento y cuanto tiempo se tarda una
población en duplicar su n mero, lo que
conocemos como
 



.
ë as bacterias se reproducen mediante   
  , en donde se forman dos c lulas hijas a
partir de una sola c lula madre.
ë [urante el proceso, el material gen tico se
distribuye a lo largo de la c lula; a continuación
la pared celular comienza a estrangularse de
manera perpendicular hasta formar dos nuevas
c lulas.
ë Muy pocas especies bacterianas se reproducen
por 

, proceso en el que comienza a
brotar un pequeño ´chipoteµ que va creciendo
hasta alcanzar el tamaño de la c lula madre
para despu s separarse. Êlgunas bacterias
filamentosas producen
 

î o
simplemente se 
  en c lulas viables.
ë Matemáticamente, el tiempo de generación
se expresa como:

a





: es el tiempo de generación.
: es el tiempo expresado en 
: es el n mero de generaciones.
ë |l t fisi i r s ll v s r
r i l l i s li .
ë |l l t ti s ri ést ti
r i i t s:

a
 

! : s l ú r él l s ti M
!": s l l i i i i l( ú r i i i l
él l s)
’: s l ú r r i s (v l .
.)
ë Ñinosotros deseamos conocer el valor de ’ (el
n mero de generaciones) podemos despejarlo
de la ecuación 2 de la siguiente manera:

a

#
 |n un cultivo bacteriano en medio líquido, se pueden
diferenciar cuatro fases en la evolución de los
parámetros que miden el crecimiento microbiano:
‡ 3
  
 
: [urante la que los
microorganismos adaptan su metabolismo a las nuevas
condiciones ambientales (de abundancia de nutrientes)
para poder iniciar el crecimiento exponencial.
‡ 3



   
: en ella la velocidad
de crecimiento es máxima y el tiempo de generación es
mínimo. [urante esta fase las bacterias consumen los
nutrientes del medio a velocidad máxima. a evolución
del n mero de c lulas durante esta fase se explica con
el modelo matemático descrito anteriormente. |sta
fase corresponde a la de infección y multiplicación
dentro del organismo del agente infeccioso.
ë 3

 
 : en ella no se incrementa el
n mero de bacterias (ni la masa u otros parámetros
del cultivo). as c lulas en fase estacionaria
desarrollan un metabolismo diferente al de la fase de
exponencial y durante ella se produce una
acumulación y liberación de metabolitos secundarios
que pueden tener importancia en el curso de las
infecciones o intoxicaciones producidas por bacterias.

os microorganismos entran en fase estacionaria

porque:
ë se agota alg n nutriente esencial del medio,
ë los productos de desecho que han liberado durante la
fase de crecimiento exponencial hacen que el medio
sea inhóspito para el crecimiento microbiano.
ë o por la presencia de competidores u otras c lulas
que limiten su crecimiento.
‰ 3



: se produce una reducción del
n mero de bacterias viables del cultivo.

GÚ
c [| cc [| cÚ|cM|Õ [| Êc|Ñ.

 c
 
 

Ñe realizan diluciones seriadas de una suspensión bacteriana y
se distribuye sobre la superficie de un medio sólido. |xiste otra
variante en donde la muestra de la dilución se mezcla con el
medio a n sin melificar en la placa, incorporándose por medio
de giros hacia la izquierda y derecha as colonias que aparecen
en la placa son contabilizadas y reportadas como U
c (Unidades

ormadoras de colonias).
 3  

ë as bacterias pueden ser ´extraídasµ de una suspensión
empleando un filtro de membrana cuyos poros son tan
pequeños que no dejan pasar a las bacterias.

 
  

a?$
a muestra es diluida en una
serie de tubos con medio
líquido. |ntre mayor sea la
cantidad de bacterias en la
muestra original, mayor será
el n mero de diluciones que
se deberán realizar para
obtener una en donde no
haya crecimiento.
 c
   

  

 
ë |n ste m todo una muestra de la suspensión bacteriana
es colocada sobre un portaobjeto especial que contiene
una cuadrícula. con la ayuda del microscopio, se
contabilizan las c lulas por campo visual, se estima el
promedio de c lulas por campo y se multiplica por un
factor que estimará el n mero total de c lulas.
 %  
P r sti r l t r i z s l

   
 . | tr s
t ri s ist
l s s
si , ést s
r st r i

s l z r s r r
ll . |st s
r
istr 
  ’
 (t ié  i 
’  


).
&
î 


|l n mero de microorganismos puede ser deducido
estimando el tiempo requerido para producir ácido u
otros productos.

$



Úegistrar el peso seco de un cultivo es una de las
mejores opciones para contabilizar organismos
filamentosos, tales como los hongos
 


‰os macronutrientes: el carbono que constituye el 50% del peso
seco de una c lula; el itrógeno, de forma orgánica (proteínas,
bases nitrogenadas, aminoácidos) o inorgánica (amoniaco, nitratos
y nitrógeno molecular). tros macronutrientes son: , Ñ, K, Mg, ca
y a.
‰os micronutrientes son nutrientes que son necesarios pero en
concentraciones muy pequeñas. Êlgunos son: cr, co, cu, Mn, Mo,
i, Ñe, W, V, Zn y
e.

cuando existe ausencia de micro o macro nutrientes los

microorganismos son incapaces de crecer o no crecen
adecuadamente.
pH
Úegularmente las bacterias prefieren pHs de 6 a 8;
mientras que las levaduras crecen bien a pHs de 4.5 a 6.

ecesidades de gases

os gases principales que afectan al desarrollo microbiano

son el oxígeno y el dióxido de carbono.

Õemperatura

|l desarrollo de las bacterias depende de reacciones

químicas, y la velocidad con que se efect an estas
reacciones está influenciada por la temperatura, por lo
que la temperatura puede en parte determinar la
velocidad de crecimiento de los microorganismos. cada
especie microbiana posee una

   
  y   de crecimiento.
|s un cultivo balanceado mantenido por tiempo indefinido por un
sistema de flujo que se compone de:
ë una cámara de cultivo de volumen constante,

ë a la que llega un suministro de nutrientes,

ë y de la que se eliminan o separan los productos tóxicos de

desecho (por un dispositivo de rebosadero).
Una vez que el sistema alcanza el equilibrio, el n mero de c lulas
y la concentración de nutrientes en la cámara permanecen
constantes, y entonces se dice que el sistema está en estado
estacionario, con las c lulas creciendo exponencialmente.
|n otras palabras, todos los constituyentes aumentan
proporcionalmente por un mismo factor en la unidad de tiempo †
coeficiente exponencial de crecimiento —
Ñe deduce fácilmente la relación entre — y el tiempo de
generación (g):
— = 0.693/g (en h-1)
os parámetros a tener en cuenta son:
ë flujo (), medido en ml/h
ë volumen de la cámara de cultivo (î, en ml)
ë densidad celular en la cámara ()
ë factor de dilución [ = f/v (en h--1). |l inverso
de este factor de dilución es el tiempo medio
de residencia (1/[= ÕMÚ)
|xiste una p rdida de c lulas por el rebosadero:
-dx/dt = x·[
|l crecimiento bruto es dx/dt = x· —

or lo tanto, el crecimiento neto es

dx/dt = x· — - x·[ = x·(— - [)
Medio fresco desde Válvula para controlar el
reservorio flujo

f (en ml/h)

rdida neta c ls:

-dx/dt = x·[ [ = f/v
(en h-1)
crecimiento bruto:
dx/dt = x· —
v
crecimiento neto: x
dx/dt = x· — - x·[ = =
x (—-[)
|n equilibrio — = [;
luego dx/dt = 0 y x se f (en ml/h)
hace constante
ë Ñi logramos que el coeficiente de crecimiento (—) se
haga igual al factor de dilución ([), entonces dx/dt =
0, y por lo tanto la concentración de c lulas se hace
constante (x= x). |l cultivo se encuentra entonces en

   
 

   . as p rdidas de
c lulas por drenaje se compensan con las ganancias
por crecimiento.

Un procedimiento para obtener cultivos continuos es el

uso de un QUMÑÕÊÕ.
'


 



'

   


ë |l quimiostato es un aparato de laboratorio usado para
diversos experimentos con microorganismos.
ë Úeproduce experimentalmente una amplia variedad de
sistemas que van desde lagos hasta plantas de
tratamiento de aguas, pasando por numerosas
aplicaciones productivas.
ë |s un aparato que se utiliza para obtener un cultivo
continuo en medio renovado, permite mantener
poblaciones de c lulas en crecimiento exponencial por
largos periodos de tiempo.
ë odemos describirlo (de manera muy general) como un
recipiente con una apertura para que el flujo de
material est ril entre, y una salida para que el flujo
resultante del proceso salga (microorganismos, est ril o
nutriente, desechos, etc.).
|
  

 
     
x = concentración celular en equilibrio
Y = constante de rendimiento en el medio empleado (masa de
microorganismo formada/masa de sustrato consumida)
ÑÚ= concentración del sustrato limitante en el reservorio
Ñ = concentración de sustrato limitante en equilibrio en la cámara de
cultivo
[ = factor de dilución, regulable por el flujo.
KÑ= constante de saturación respecto del sustrato limitante
x = Y (ÑÚ  Ñ)
a fórmula nos dice que sabiendo Y, KÑ y — máx se puede fijar la densidad
celular (x) simplemente ajustando dos parámetros del aparato.
or otro lado, se puede demostrar tambi n que la concentración de
sustrato limitante en equilibrio en la cámara de cultivo Ñ es

Ñ= KÑ·[/(— máx- [)

|sta fórmula nos dice que el efecto principal de cambiar el flujo ([) es
alterar la concentración Ñ de sustrato limitante en el cultivo, lo que a
su vez afecta a la tasa específica de crecimiento (—).
Êportan una fuente continua de c lulas en fase
exponencial, lo que se aplica a 

    




 
 (producción de bebidas alcohólicas,
de antibióticos, de aminoácidos, etc).

|n el quimiostato, el crecimiento a bajas

concentraciones de sustrato permite estudiar:
ë 

   
 (por ejemplo, catabolismo del
sustrato limitante);
ë 



 
 


ë estudios



Microbiología Êplicada
ë as   
  
, ya sean de origen dom stico,
animal o industrial, debido a su alto contenido de
nutrientes constituyen un medio apropiado para el
crecimiento de microalgas, las cuales han
demostrado su capacidad de remover cantidades
apreciables de nitrógeno y fósforo  su
desarrollo.

ë Ñe evaluó el crecimiento, remoción de nutrientes y

materia orgánica de la microalga Ñ
’

©  y



   en   
  

dom sticas e industriales.
ë |n chubut, Êrgentina se han llevado a cabo algunos estudios
referidos a la depuración de efluentes de plantas pesqueras,
(ciccarone, 1997) a la evaluación de la tasa de crecimiento de



  en efluente cloacales de la ciudad de Õrelew
(Êlbarracín y col., 2005) y la potencialidad de 



  como biofertilizante. (Gigena, 2003)
ë |





 

 


' 



î

  
 ( c  
 &
  î

   

  
 
 ) 

   î 
    


  | 


  
 
 


  

   *
 î

  
   
 



 


ë Ñi consideramos a las microalgas
como plantas microscópicas, en
teoría, su crecimiento podría
favorecerse por las bacterias
promotoras de crecimiento en plantas
(pseudomonas bacillus,, M
M

pseudomonas,, bacillus M



 ’

, las cuales mejoran el
desarrollo de muchos cultivos de
importancia agronómica
agronómica..
ë Yara asegurar una estrecha
proximidad física entre la microalga y
la bacteria, es necesario atrapar a los
dos microorganismos en una matriz
esf rica transparente creando un
pequeño sistema biológico
biológico..
ë Yara ello se inmovilizaron los dos
microorganismos en esferas de
alginato..
alginato
ë [e esta manera, cuando el tratamiento del agua
residual finaliza, sólo es necesario recolectar las
esferas, dejando el agua tratada libre de la
población microbial.