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HOSPITAL SAN RAFAEL


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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

ELABORADO POR:

CAROLINA HOYOS VELASQUEZ


BACTERIOLOGA
COOPERATIVA COOMAN

LABORATORIO CLINICO

EMPRESA SOCIAL DEL ERSTADO


HOSPITAL SAN RAFAEL DE YOLOMBO
YOLOMBO
2008
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ACIDO URICO

1. Metodo
Análisis enzimático colorimétrico por ácido urico con factor aclarante de lípidos
(LCF) (PAP)

2. Fundamento
Determinación del Acido Urico por la reacción con la uricasa. El peróxido de
hidrógeno formado reacciona por la acción catalítica de la peroxidasa con ácido
3,5-dicloro-2-hydroxybenzenesulfónico (DCHBS) y 4-aminofenazona (PAP) para
producir un complejo rojo-violeta de quinonemina como indicador.

3. Muestras
Suero o plasma con heparina o EDTA, orina.
Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada.

4. Condiciones del paciente


Para determinación en suero.

Antes:
• Explicar el procedimiento al paciente.
• Llevar estrictamente los siguientes puntos.
• Suspender la medicación de drogas como: alopurinol, salicilatos, fenilbutazona,
calmantes o analgésicos, ácido ascórbico (vitamina C), buscapina, diuréticos
de la trazida, tioles libres, purinas metiladas, ácido homogentístico y altas
cantidades de glucosa.
• Dos días antes del examen evitar ejercicios violentos.
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24 horas antes del examen, el paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas,
mariscos y frijoles ya que contienen altos contenidos de purina.
48 horas antes de la venoclisis suspender el consumo de alcohol.

Durante:
Recoger 5 - 7 ml de sangre venosa en un tubo de tapón rojo.
• Retomar nuevamente la ingesta de cualquier medicamento que pueda alterar
los resultados.
Después:
• Aplicar presión en el sitio de punción.

Para determinación en Orina:

• Orina de 24 horas, teniendo en cuenta las indicaciones anteriores.

Nota
Las muestras lipémicas generalmente generan turbidez en la mezcla del reactivo
con la muestra, lo que lleva a resultados elevados falsos.
El LCF aclara completamente la turbidez causada por muestras lipémicas.
Los valores en sangre total varían con la proporción de células en la sangre
debido a que las células también contienen muchas más sustancias que interfieren
en la reacción.

5. Condición de la muestra
La sangre debe recogerse en tubos limpios, libres de metales pesados, ya que
estos y los cianuros son inhibidores enzimáticos.
La prueba no se ve influenciada por valores hasta 100mg/dl de hemoglobina o por
valores de bilirrubina hasta 20mg/dl.
La estabilidad de la muestra es:
Temperatura ambiente  3 días
Refrigerado  2 - 8°C por 5 días.
Congelado  20°C, seis meses.
En orina de 24 horas con preservativos y a temperatura ambiente → 2 días.

6. Metodo de determinacion
Longitud de onda: 520nm, Hg 546 nm.
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 20 - 25 °C ó 37°C
Medir: frente a blanco de reactivos
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7. Tecnica
Pipetear:

Blanco Estándar Muestra


Blanco ---- ---- ----
Muestra ---- ---- 25λ
Estándar ---- 25λ ----
Solución Reactiva 1000λ 1000λ 1000λ
Mezclar, incubar a 20-25°C durante 20-50 minutos, leer las extinciones frente a
blanco de reactivos.

Límite de dilución 15 mg/dl, con concentraciones superiores diluir la muestra 1 + 1


con solución de cloruro sódico al 0.9% y repetir la determinación, el resultado
multiplicarlo por 2.

8. Valores de referencia
Hombres: 3.7 - 7.0 mg/dl.
Mujeres: 2.4 - 5.7 mg/dl.

9. Interferentes de la prueba
El ácido ascórbico en concentraciones terapéuticas no interfiere en la prueba, pero
en cantidades excesivas puede dar resultados elevados.
Sustancias químicas con efecto antiuricosúrico.
Acido etacrínico, furosemida, diuréticos de la benzotiacida.
Sustancias que inhiben competitivamente la secreción tubular del urato.
El p- aminohipurato, lactato, acetoacetato y B. hidroxibutírico.

Por otra parte, ciertos fármacos como los salicilatos, fenilbutazona entre otros,
inhiben la secreción de ácido úrico a dosis bajas, pero causan un efecto urosúrico
intenso a dosis altas, debido a que estos fármacos pueden inhibir reabsorción
tubular a niveles altos.

El exceso del lactato también se asocia con la hiperuricemia en los casos de


ejercicio fuerte y toxemia del embarazo.

Notas
El etanol altera el metabolismo del ácido úrico aumentando la producción de urato
y por la supresión de la excreción renal de ácido úrico. Esta última es el resultado
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del exceso de lactato producido por la oxidación del etanol a acetaldehído, que
inhibe competitivamente la secreción tubular renal del urato.

10. Control de calidad


• Cada vez que se determine ácido úrico correr con las muestras un estándar
acuoso y dos suero control liofilizado.
• Asegurarse que la lectura del blanco esté dentro del rango permitido.
• Almacenamiento adecuado de los cartuchos reactivos.
• Evaluación permanente de resultados.
• Adecuada extracción y manipulación de muestras límites aceptables en los
controles.

Correlacion clinico patologica


Numerosas enfermedades, alteraciones fisiológicas, cambios bioquímicos e
incluso factores sociales y de comportamiento se asocian a modificaciones de la
concentración de ácido úrico en el plasma. El aumento del ácido úrico es mucho
más frecuente y clínicamente más significativo que su disminución. Entre las
etiologías más comunes de hiperuricemia se cuentan el fallo renal, la cetoácidosis,
el exceso de lactato y el uso de diuréticos. La hiperuricemia tiene también una
relación positiva con la hiperlipidemia, obesidad, aterosclerosis, diabetes mellitus,
hipertensión. En los pacientes hipertensos la reducción del flujo sanguíneo renal y
el aumento de la resistencia vascular pueden ser responsables de la disminución
de la fracción de filtración del urato. La ingestión de alimentos ricos en purinas,
por ejemplo carnes, vísceras y levaduras producen una hiperuricemia leve.

Es de mucha importancia la determinación de ácido úrico, pues los valores altos


son diagnóstico de “gota”.

La gota es un trastorno del metabolismo de purinas o de la excreción renal de


ácido úrico caracterizado por:

Hiperuricemia.
Precipitación de urato monosódico en forma de depósitos (tofos) por todo el
cuerpo, excepto por el SNC, aunque presenta predilecciones por articulaciones,
tejido subcutáneo y bolsas sinoviales.
Ataques clínicos recidivantes de artritis.
Nefropatía y a menudo nefrolitiasis.

Las reservas de ácido úrico pueden superar los 30 g.


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Se han identificado dos defectos enzimáticos ligados al cromosoma sexual como


etiología de la gota primaria:

Una deficiencia de (H 6 PRT) hipoxantin guanin - fosforrobosil transferasa.


Una hiperactividad de fosforribosil - fosfato
La presencia de amonio en cualquiera de los reactivos, anticoagulantes o agua
destilada aumentan los valores.

ALBUMINA

1. Metodo
Prueba fotometrica colorimetrica para Albumina
Metodo BCG

2. Fundamento.
El verde de bromocresol forma con la albumina en buffer de citrata un complejo
coloreado. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la
concentracion de albumina en la muestra.

3. Muestras
Suero ó plasma con EDTA ó heparina.
Estable 1 mes a 2-8 grados y 1 semana entre 15 y 25 grados

4. Condiciones del paciente


El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 8 horas y durante este periódo
no hacer esfuerzoz corporales intensos, ya que esto puede aumentar la
concentración de proteínas.
El uso del torniquete no ha de execeder los 30 segundos, su prolongación tiende a
aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero.

5. Condiciones de la muestra
No usar plasma heparinizado porque se puede alterar el valor.
Patron de albúmina y el RGT son estables hasta la fecha de vencimiento cuando
se almacenan de 2 a 25 grados centigrados, despues de abierto debe evitarse la
contaminación.
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6. Metodo de determinacion
Longitud de onda: Hg 546 nm, 578 nm
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 20 a 25
Medición: frente a blanco de reactivo por serie.

7. Tecnica
Pipetear en tubos de ensayo:
blanco patrón muestra
Patrón albúmina ------ 10 ul ----
Muestra ----- ---- 10 ul
Reactivo 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml

Mezclar bien y dejar los tubos durante 5 minutos a temperatura ambiente.


Leer la absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco de reactivo. El color
es estable durante al menos 30 minutos.

ABS muestra
____________ X 4 g/dl albúmina
ABS patrón

8. Valores normales
3.8 – 5.1 g/dl en hombres y mujeres.

9. Interferencias
La prueba no es influenciada por valores de Bilirrubina hasta 20mg/d.
Hemoglobina (1 g/L).
La reacción de la albúmina con el verde de bromocresol es inmediata.
Otras proteinas reaccionan lentamente, por lo que es conveniente no demorar la
lectura.

10. Correlacion clinicopatologica.


Hay 3 factores que pueden disminuir su concentración:
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1) Pérdidas cuantiosas o frecuentes, (hemorragias, albúminuria persistente,


paracentesis, catabolismo excesivo).
2) Por síntesis defectuosa como ocurre en la mayor parte de las hepatopatías.
3) Por carencia de materia prima como en la hipoalimentacion.

Otras:
Trastornos pulmonares.
Anemia persistente
Neoplasia nefrosis lipoidea.
Edemas carenciales.
La manifestacion clínica mas llamativa es el edema.

MICROALBUMINURIA

1. Metodo
Prueba de turbidimetría para la cuantificación de microalbúmina en orina humana.

2. Fundamento
Las partículas de látex con anticuerpos anti-albúmina humana, son aglutinadas por
uALB presente en la muestra del paciente. El proceso de aglutinación provoca un
cambio de absorbancia proporcional a la concentración de uALB de la muestra, y
por comparación conocida se puede determinar el contenido de uALB en la
muestra ensayada.

3. Muestra
Orina fresca.

4. Condiciones de la muestra
La orina debe ser lo más fresca posible, y se debe ajustar su pH a 7.0 con
NaOH/HCl 1 mol/L.
Es estable por 7 días cuando se le añade azida sódica para prevenir posibles
contaminaciones.

5. Metodo de determinacion
Longitud de onda: 540 nm (530-550 nm)
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 37°C
Medición: frente a agua destilada
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6. Tecnica

Reactivo de trabajo 1000 ul


muestra 7 ul

Mezclar y leer la absorbancia frente a agua destilada y leer a los dor minutos
después y se multiplica el valor por la concentración del calibrador.

7. Valores de referencia
Hasta 15 mg/L

8. Interferencias
No interfieren valores de Glucosa 2 g/L, hemoglobina 10g/L, creatinina 3 g/L.
La urea > de 1g/L y bilirrubina > 10mg/dl interfieren.

Correlacion diagnostica
Se define la microalbúmina como la tasa de excresión de albúmina en orina entre
20 y 200 ug/min, concentración que, siendo superior al valor normal, esta aun por
debajo de la concentración considerada como una proteinuria convencional.
La microalbuminuria es un marcador del riesgo de la nefropatía diabética, así
como de alteraciones cardiovasculares en pacientes que sufren diabetes mellitus
insulinodependientes o bien insulina no-dependiente.
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BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA.

Generalidades
La bilis se forma en el hígado y presenta muchos componentes, incluyendo sales
biliares, fosfolípidos, colesterol, bicarbonato, agua y bilirrubina.
El metabolismo de la bilirrubina proviene en un 80% de la descomposición de los
hematíes envejecidos en el sistema retículo endotelial (bazo, hígado y medula ósea).
Un 5% de los citocromos citoplasmáticos y mitocondriales hepáticos; y el otro
porcentaje de los eritrocitos defectuosos destruidos en la medula ósea antes de ser
liberados.

La hemoglobina es liberada desde los hematíes y descompuesta en moléculas de


Heme y globina. El heme es catabolizado después para formar biliverdina que se
transforma en bilirrubina.

Hem hem oxigenasa Biliverdina Biliverdina reductasa Bilirrubina.

Esta forma de bilirrubina se denomina no conjugada (indirecta) que es transportada


en el plasma en forma libre unida a la albúmina, hasta las células hepáticas en
donde es conjugada con el ácido glucoronico; conjugación catalizada por la enzima
Bilirrubin - glucoronil - transferasa.
La bilirrubina conjugada se excreta después por las células hepáticas hacia los
canalicemos intrahepáticos, que acaban conduciéndola a los conductos hepáticos, el
conducto biliar común y el intestino.

El riñón no excreta bilirrubina no conjugada puesto que es insoluble en agua y en


general se encuentra unida a la albúmina, por tanto no atraviesa la membrana
glomerular.
La orina normalmente contiene una pequeña cantidad de urobilinógeno, pero no de
bilirrubina, esta solo aparece cuando la concentración en plasma se encuentra
aumentada y siempre es de bilirrubina conjugada.
El examen de la orina para los pigmentos biliares (bilirrubina) y urobilinógeno se
emplea en la investigación de la ictericia.

La bilirrubina total del suero incluye la bilirrubina libre o no conjugada (reacción


indirecta) y una pequeña cantidad de bilirrubina conjugada o de reacción directa.
El nivel de la bilirrubina serica total, es útil para evaluar la extensión y el progreso de
la ictericia.
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La designación de Bilirrubina como directa e indirecta deriva de observaciones,


llevadas a cabo por Van Den Berg en 1913, de que parte de la bilirrubina reacciona
directamente con el reactivo de Erlich, mientras que la otra hay que adicionarle
alcohol.

1. Metodo
Método modificado de Jendrassik/Gróf.

2. Fundamento
La Bilirrubina reacciona con al ácido sulfanílico diazotado (DSA) formando un color
rojo. La absorbancia de este color a 546 nm es directamente proporcional a la
concentración de bilirrubina en la muestra. Los glucoronidos de la bilirrubina solubles
en agua reaccionan directamente con DSA mientras la bilirrubina indirecta conjugada
con albumina reacciona sólo en la presencia de un acelerador.
Bilirrubina total = bilirrubina directa + bilirrubina indirecta.

3. Muestra
Suero o Plasma con heparina.
Evitar muestras hemolizadas, y deben estar protegidas de la luz.
La muestra es estable por 3 días a una temperatura de 2 a 8 grados, alajada de la
luz.

4. Condiciones del paciente


Reposo de 15 minutos antes de la toma de muestra.
Ayuno de ocho horas. El ayuno prolongado produce aumento de bilirrubina ya que
parte de esta se almacena en el tejido adiposo y al suceder la lipolisis se libera y sale
a la circulación.
El uso de torniquete no debe prolongarse más de 30 segundos.

5. Condiciones de la muestra
No agitar el tubo, ya que en caso contrario los resultados de la prueba podrían ser
inexactos.
Proteger la muestra de sangre de la luz brillante.
Mencionar en el volante del laboratorio cualquier fármaco que pudiera afectar los
resultados de la prueba.
Debe procesarse la muestra el mismo día.
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6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 546 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 20 a 25 grados C
Medición: frente a blanco de muestra.

7. Tecnica

Bilirrubina total

Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz:

Blanco Muestra
Reactivo TBR 1 ml 1 ml
Reactivo TNR .... 1 gota

Mezclar cuidadosamente e incubar por 5 minutos.


Muestra 100 ul 100 ul

Mezclar e incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min.


Leer la absorbancia de la muestra frente al blanco.

Bilirrubina directa
Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz:

Blanco Muestra
Reactivo DBR 1 ml 1 ml
Reactivo DNR .... 1 gota

Mezclar cuidadosamente e Incubar por 2 minutos.


Muestra 100 ul 100 ul

Mezclar e incubar a temperatura ambiente exactamente por 5 minutos.


Leer la absorbancia frente al blanco.
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8. Valores de referencia
Bilirrubina total: 0.1 - 1.0 mg/dl o 5.1 - 17.0 umol/l.
Bilirrubina indirecta: 0.2 - 0.8 mg/dl o 3.4 - 12.0 umol/l.
Bilirrubina directa: 0.1 - 0.3 mg/dl o 1.7 - 5.1 umol/l.

Bilirrubina total en el recién nacido: 1 a 12 mg/dl ó 17.1 - 20.5 umol/l.

Para obtener la concentración de la Bilirrubian indirecta se resta o establece la


diferencia de la concentración de la Bilirrubina total y Bilirrubina directa.

Bilirrubina indirecta = B. total - B. directa.

9. Interferentes
La exposición prolongada (más de 1 hora) a la luz solar directa o artificial puede
causar disminución de la bilirrubina en un 50%.
La hemólisis de la sangre y la lipemia pueden producir resultados erróneos.
Entre los fármacos que pueden causar niveles aumentados de bilirrubina total se
incluyen: Esteroides, anabolizantes, antibióticos (Eritromicina), antipalúdicos, ácido
ascórbico, diuréticos, morfina, anticonceptivos orales, salicilatos y vitamina A, etc.
Entre los fármacos que reducen los niveles de bilirrubina total se incluyen
barbitúricos, cafeína, penicilinas y salicilatos (dosis elevadas).

10. Estabilidad
No es muy estable, se altera rápidamente con la luz, por lo tanto, debe procesarce la
muestra lo más rápido posible.
El almacenamiento no es conveniente, si se necesita debe refrigerarse por pocos
días (3 días a 2-8 °C) protegida de la luz.

11. Linealidad
La prueba es lineal hasta 25 mg/dl, si la concentración es mayor de 25 mg/dl, diluir la
muestra 1 + 4 con solución fisiológica y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por
5.

Correlacion diagnostica
La determinación de bilirrubina total es útil para evaluar la extensión y progreso de la
ictericia en problemas hepatocelulares, obstructivos y prehepáticos.
La ictericia es una coloración amarillenta de los tejidos corporales (piel, membranas
mucosas y escleróticas), causada por niveles sanguíneos de bilirrubina
anormalmente altos; el color amarillo se aprecia cuando la bilirrubina serica total
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supera los 2.5 mg/dl. La ictericia se debe a un defecto en el metabolismo o la


excreción normales de bilirrubina, defecto que puede ocurrir en cualquier fase del
metabolismo de la bilirrubina desde su formación hasta su excreción intestinal.

Ictericia pre – hepatica


Hay aumento de la bilirrubina indirecta. No hay bilirrubinuria.

Causas:
Metabolismo aumentado del Heme: esferocitosis hereditaria, enfermedad
drepanocitica, policitemia, etc.
Eritropoyesis ineficaz acelerada: Anemia megaloblástica, talasemia intoxicación por
plomo.
 Destrucción prematura de eritrocitos defectuosos.
 Hiperbilirrubinemia por derivación.
Cirrosis.
Insuficiencia cardiaca congestiva.
 Síndrome de Gilbert
 Recién Nacidos.
Síndrome de Cliger - Najjan I y II.

Ictericia hepatocelular
Hay aumento mayor de la bilirrubina directa y puede haber aumentos menores de B.
indirecta o estar normal y la bilirrubina total aumentada. En general hay bilirrubinuria.

Causas:
Shock por hipoxia.
Hepatitis viral, alcohol y tóxica.
 Cirrosis por alcohol.

Ictericia post - hepatica o colestasica


Hay aumento de bilirrubina directa y se presenta Bilirrubinuria.

Causas:
 Obstrucción intrahepática: debido a obstrucción por fármacos, hormonas
esteroideas, hepatitis aguda, virica o alcohólica, cirrosis biliar primaria, atresia de
conductos, tumores metastásicos etc.
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 Colestasis extrahepática o quirúrgica: debido a carcinoma en conducto, vesícula


biliar, páncreas o ampolla de Vater; cálculos biliares, por edema en la cabeza del
páncreas.

Nota
La bilirrubina directa diferencia la ictericia Pre-hepática de la hepatocelular y
obstructiva y la bilirrubina indirecta hace la diferenciación entre la hepatocelular
obstructiva y las Pre-hepáticas.
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PERFIL LIPIDICO MINIMO

Generalidades de lipidos
Los lípidos constituyen la principal reserva energética de los seres vivos y también
forman parte de la membrana celular y regulan la actividad de la célula y tejidos.
Los lípidos totales están compuestos por: colesterol libre, esteres de colesterol,
triglicéridos, fosfolípidos y ácidos grasos libres. Todos estos lípidos con excepción
de los ácidos grasos que están ligados a la albúmina, se encuentran en el plasma
como lipoproteínas.

Perfil lipidico minimo


El dato del colesterol total y los triglicéridos da una información global de los
lípidos que circulan en el organismo, pero sí se requiere tener un concepto claro
de cómo están incidiendo los lípidos en el aparato circulatorio, se debe tener un
estudio fraccionado de las lipoproteínas que es lo que se conoce como perfil
lipídico.

En el estudio del perfil lipídico mínimo se deben tener en cuenta los siguientes
parámetros:

Aspecto del suero: se realiza la prueba en frío en caso de obtener sueros


lechosos, se coloca el suero durante 12 horas en refrigeración (4ºC) esto con
el objeto de ayudar a clasificar las trigliceridemias así:
 Capa cremosa en la superficie y nadante transparente, significa presencia de
triglicéridos exógenos (quilomicrones).
 Capa cremosa en la superficie y nadante turbio significa triglicéridos exógenos
y endógenos (quilomicrones y VLDL).
Aspecto uniformemente lechoso significa presencia de triglicéridos endógenos
(VLDL).

El aspecto del suero no indica que el paciente este normal, porque valores de
colesterol aumentados no producen ninguna turbidez.
El colesterol total del cuerpo: comprende el colesterol libre y esterificado. 70%
esterificado, 30% libre. Transportado principalmente por LDL, HDL, IDL y VLDL.
Triglicéridos
HDL colesterol
VLDL colesterol: se evalúa mediante la formula trigliceridos/5, cuando estos son <
400 mg/ml.
LDL colesterol: se determina con la formula de Friedewald
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LDL C = CT- (VLDL C + HDL C ).


Indice arterial se determina mediante la formula CT/HDLC ö LDLC/ HDLc.

Interpretacion del perfil lipidico mínimo

Lípido mg/dl Deseable Riesgo potencial Riesgo alto


Colesterol Total <200 200-239 >=240
LDL Colesterol <130 130-159 >=160
HDL hombres >35 25-35 <25
HDL mujeres >45 40-45 <40
Trigliceridos <200 >200 >200

Indice arterial: Hombres <=5


Mujeres <=4.5

Estas cifras nos indican que la arteriosclerosis se esta verificando en forma


normal.
Cifras superiores establecen un alto riesgo de enfermedad coronaria.
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COLESTEROL TOTAL

1. Metodo
Prueba enzimática colorimétrica para colesterol con factor aclarante de lípidos
(LCF) CHOD-PAP

2. Fundamento
El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación. El
indicador es la quinonemina formada por el peróxido de hidrógeno y 4-
aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa.

3. Muestra
Suero o plasma con heparina o EDTA.

4. Condiciones del paciente


Esta prueba no necesita de ayuno pero como generalmente se realiza con el resto
del perfil lipídico, se deben seguir los requerimientos que para este se indiquen.
No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba.

5. Condiciones de la muestra
La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA.
Extraer 5-10 ml de sangre en un tubo seco.
Anotar cualquier fármaco que pueda modificar los valores de Colesterol.
Separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción,
para evitar la redistribución del Colesterol entre las diversas lipoproteínas.

6. Metodo de determinacion
Longitud de onda 500 nm, 546 nm
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25 ó 37 grados C.
Medición: frente a blanco de reactivo.
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7. Tecnica
Pipetear

Blanco Estándar Muestra


Blanco ---- ---- ----
Estándar ---- 10 µl ----
Muestra ---- ---- 10 µl
Rvo Color 1000 µl 1000 µl 1000 µl

Mezclar, incubar 10 minutos a 20 ó 25 grados, o 5 minutos a 37 grados C.


Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo.

8. Valores de referencia
Varían con la edad y el laboratorio.

RECIEN NACIDOS 53 – 135 mg/dl


LACTANTES 70 – 175 mg/dl
NIÑOS 120- 200 mg/dl
ADULTOS/ ANCIANOS < 220 mg/dl
Sospechoso mayor de 220
Elevado mayor de 260

9. Interferencias
La Ovariectomía aumenta los niveles de Colesterol.
Hay fármacos que elevan los niveles de Colesterol como:
Hormona adrenocorticotrópica, Esteroides anabólicos, Corticosteroides,
bloqueadores beta-adrenérgicos, Adrenalina, Anticonceptivos orales, sulfamidas,
Diuréticos tiacídicos, Vitamina D.
Hay otros que disminuyen los valores como:
Andrógenos, Allopurinol, Quelantes de las sales biliares, Captopril, Niaciana,
Nitratos, Colchicina, Colestipol, Eritromicina, Isoniacida, Liotironina (Cytomel),
Lovastatina (Mevacor), Neomicina (oral).

Notas
El test no se afecta con valores de hemoglobina inferiores a 200 mg/dl, ni de
Bilirrubina menor a 5 mg/dl.
Evitar el contacto con los reactivos ya que son muy corrosivos.
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Muestras lipémicas usualmente generan turbidez en la muestra que se va a


analizar, generando resultados falsamente elevados

9. Linealidad
El test es lineal hasta una concentración de Colesterol de 750 mg/dl (19.3 mmol/l).
Para concentraciones mayores diluir la muestra con solución salina al (0.9%), 1 +
2 y repetir la determinación, multiplicar el resultado por 3.

10. Control de calidad


Hacer control periódico a equipos y reactivos para evitar resultados falsos
positivos ó falsos negativos.
Para la técnica se debe montar un control Normal y uno Patológico.

Correlacion diagnostica
 Niveles sospechosos: 220 mg/dl ó 5.7 mmol/l
 Niveles elevados: 260 mg/dl ó 6.7 mmol/l
 Niveles superiores: 300 mg/dl Necesitan tratamiento.

Resultados anormales

Niveles aumentados en: Hipercolesterolemia, Hiperlipemias, Hipotiroidismo,


Síndrome nefrótico, embarazo, Hipertensión, Xantomatosis, Colestasis hepática,
Dieta rica en Colesterol, Infarto de miocardio, aterosclerosis, Cirrosis biliar, Estrés,
nefrósis, Diabetes Mellitus descontrolada.

Niveles disminuidos en: Sepsis, Desnutrición, Mala absorción, Hipertiroidismo,


Enfermedad hepática, Anemia hemolítica, Anemia perniciosa, Medicación
hipocolesterolemiante.
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COLESTEROL HDL

1. Metodo
Colesterol precipitnte.

2. Fundamento

Los quilomicrones, VLDL y LDL se precipitan por adición de ácido fosfotúngstico y


cloruro de magnesio. Despúes de centrifugar, el sobrenadante contiene las HDL
que se van a determinar.

3. Muestra
Suero o plasma con anticoagulante EDTA o heparina.

4. Condiciones del paciente


Ayuno de 12-14 horas previas a la extracción de sangre.
Debe señalarse que si bien la falta de ayuno no afecta los niveles de HDLc
sanguíneo, en la mayoría de las personas la lipemia posprandial interfiere con
muchos de los métodos analíticos.
Abstenerse de no ingerir alcohol por 72 horas antes de la toma de la muestra (no
es necesario).

5. Condiciones de la muestra
La muestra debe separarse del coagulo dentro de las dos horas de la extracción y
conservarse a 4ºC a menos que se analice de inmediato.
HDL es estable en la muestra de suero durante 7 días a 4ºC o durante 4 meses a
–20ºC.

6. Metodo de determinacion
Longitud de onda 500 nm, 546 nm
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25 ó 37 grados C.
Medición: frente a blanco de reactivo
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7. Tecnica

A. Precipitación

pipetear Macro Micro


muestra 500 ul 200 ul
precipitante 1000 ul 500 ul

Mezclar bien, incubar por 10 minutos a temperatura ambiente.


Centrifugar por 2 minutos a 10000 rpm ó 10 minutos a 4000 rpm.
Despúes de centrifugar, separar el sobrenadante claro del precipitado dentro de 1
hora y determinar la concentración del colesterol HDL con el reactivo de Colesterol
total.

B. Determinación

Blanco Estándar Problema


Agua destilada 100 ul
Estándar ---- 100 ul ----
Sobrenadante ---- ---- 100 ul
Reactivo de color 1ml 1ml 1ml

Mezclar, incubar todos los tubos a temperatura ambiente por 10 minutos ó a 37ºC
por 5 minutos.
Leer la absorbancia de la muestra y el estándar frente al blanco de reactivo antes
de una hora.

Notas
El sobrenadante debe ser claro. En las muestras con un contenido de triglicéridos
altos se pueden presentar precipitaciones incompletas de las lipoproteínas o
flotación por parte de las mismas sobre él liquido, observando un sobrenadante
turbio, en ese caso, se hace una dilución 1: 1 con solución cloruro de sodio al
0.9% y se repite la precipitación de la muesta diluida. El resultado se multiplica por
dos.

El ácido ascórbico disminuye los valores.


Limite de dilución 310 mg/dl.
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8. Valores de referencia
Mujeres > 45mg/dl
Hombres > 35mg/dl

9. Correlacion diagnostica
La HDL contrarresta la acción nociva que puede tener la LDL sobre nuestro
organismo, al evitar la arteriosclerosis excesiva porque remueve y elimina a través
de la bilis cantidades considerables de LDL en forma de ácidos biliares y
esteroides neutros.

La LDL juega un papel muy importante en el funcionamiento arterial y por esto


debemos tratar que el organismo tenga estrictamente la cantidad necesaria que
requieren sus funciones, para evitar la arteriosclerosis prematura, complementada
con un nivel de HDL lo más elevado posible, siendo esta la mejor forma de luchar
contra este mecanismo fisiológico.

Resultados Anormales.

Niveles aumentados de HDL correlacionan con disminución en el desarrollo de


enfermedad cardiocirculatoria. Se observa en: mayor producción de Apo I y Apo II
y actividad física fuerte.

Niveles disminuidos de HDL correlacionan con riesgo aumentado de enfermedad


cardiocirculatoria, obesidad, sedentarismo, hipertriglicéridemia, deficiencia familiar
de Apo I y Apo II, deficiencia de LPL 1 con afectación del metabolismo de
quilomicrones y VLDL.
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TRIGLICERIDOS

1. Metodo
Prueba enzimática colorimétrica para triglicéridos con factor aclarante de lípidos.
GPO-PAP

2. Fundamento
Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasa. El
indicador es Quinineimina formada a partir de peróxido de hidrógeno, 4-
aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa.

3. Muestra
Suero o plasma heparinizado o palsma con EDTA

4. Condiciones del paciente


El ayuno debe ser entre 12 y 14 horas.
No hacer ejercicio fuerte antes de la prueba.
No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba.
No consumir grandes cantidades de Carbohidratos y grasas 48 horas antes de la
prueba.

5. Condiciones de la muestra
La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA.
Extraer 5-10 ml de sangre en tubo seco y separar el suero de los glóbulos rojos en
la media hora siguiente a la extracción, para evitar la redistribución de los
Triglicéridos entre las diferentes lipoproteínas.

Notas
La lipemia, la hemólisis hasta 10 mg/dl ó 170 mmol/l, metabólitos y una serie de
fármacos de uso común NO interfieren con el método. Los volúmenes de la
reacción sugeridos se pueden modificar sin ningún cambio en los cálculos.

Los Triglicéridos permanecen estables 3 días a 4ºC, la temperatura de 25ºC


permite la liberación de glicerol de los fosfolipídos y produce un incremento
aparente del valor de los Triglicéridos.
Es importante describir el aspecto del suero.
Antes de procesar la muestra se debe observar y anotar el aspecto del suero ya
que si este está lechoso, se le debe hacer la prueba en frío, que consiste en
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colocarlo en la nevera por 12 horas, luego de las cuales se observa las


características que presenta el nadante y el sobrenadante.
Los Triglicéridos no permanecen en el suero a 25ºC, debido a que fácilmente se
libera el glicerol; a 4ºC son estables por 3 días.

6. Metodo de determinacion
Longitud de onda: 500 nm, 546 nm
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 20, 25 ó 37 grados C
Medición: frente a blanco de reactivo

7. Tecnica
Pipetear:

Blanco Estándar Muestra Control


Blanco ---- ---- ---- ----
Estándar ---- 10 µl ---- ----
Muestra ---- ---- 10 µl ----
Control ---- ---- ---- 10 µl
Reactivo 1000 µl 1000 µl 1000 µl 1000 µl

Mezclar, e incubar por 10 minutos a 25ºC o por 5 minutos a 37 grados C, leer con
Blanco de reactivo. Estabilidad de la reacción 1 hora.

Linealidad
El método es lineal hasta 1000 mg/dl (11.3 mmol/l) de Triglicéridos. Para
concentración superior diluir la muestra 1+5, con solución salina al 0.9%, repetir la
determinación y multiplicar el resultado por 6.

8. Valores de referencia

EDAD HOMBRES MUJERES


0 – 5 años 30 – 86 mg/dl 32 – 99 mg/dl
6 – 11 años 31 – 108 mg/dl 35 – 114 mg/dl
2 – 15 años 36 – 138 mg/dl 41 – 138 mg/dl
16 – 19 años 40 – 163 mg/dl 40 – 128 mg/dl
Adultos / ancianos 40 – 160 mg/dl 25 – 135 mg/dl
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9. Interferencias
Elevando los valores
Colestiramina, Estrógenos y anticonceptivos orales.
Disminuyendo los valores
Acido ascórbico, Asparraginasa, Clofibrato y colestipol.

10. Correlacion diagnostica

Niveles aumentados en: Hiperlipemias, Hipotiroidismo, Dieta rica en


carbohidratos, Diabetes mal controlada, Riesgo de enfermedad coronaria y
vascular, Hipertensión, Embarazo, Infarto de miocardio, Cirrosis alcohólica,
Síndrome nefrótico, Enfermedad con almacenamiento de glucógeno.

Niveles disminuidos en: Síndrome de mala absorción, Desnutrición,


Hipertiroidismo.

Nota:
Los trigliceridos elevados afectan el cálculo de las LDL, por lo tanto cuando esto
sucede las LDL no se deben reportar.
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CREATININA

Generalidades

Sus aumentos suelen ser proporcionales con respecto a los de la urea, aun
cuando en general son más tardíos. Tiene particular interés diagnostico y
pronóstico en los siguientes casos:

 Nefropatías: Cuando en una insuficiencia renal con uremia, se observan cifras


superiores a 5mg/100ml, él pronostico es fatal a corto plazo. Esto solo sucede
en las fases avanzadas, ya que en las precoces, dada la facilidad de
eliminación de la creatinina solo aumentan el ácido úrico y la úrea.
En las nefritis agudas generalmente no hay elevación; en los casos en que existe
(40%) es un cambio reversible y de escaso valor pronostico.
En las nefrósis por tóxicos (Hg y Ag.) es donde se observan mayores
elevaciones; en la insuficiencia cardiaca avanzada puede originarse una
retención discreta o moderada de creatinina aunque no exista verdadera
nefropatía.
 En obstrucciones urinarias (Afecciones de próstata, vejiga, uréter, etc.) y en la
anuria refleja (cálculos uretrales), se producen así mismo elevaciones
marcadas de creatinina incluso 30 mg o más, igualmente reversibles con la
reparación de la obstrucción.
 En el gigantismo y acromegalia se observan discretas elevaciones.

Cada 24 horas se transforma un 2% de creatina en creatinina. La cantidad de


creatinina por unidad de masa muscular es constante y por lo tanto la degradación
espontanea es constante.
Como resultado de este fenómeno la concentración plasmatica de creatinina es
estable y varia en menos de 10% diario en individuos normales.

1. Metodo
Reacción de Jaffe
Prueba fotométrica colorimértica para mediciones de punto final desproteinización.
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2. Fundamento
La creatinina en solución alcalina forma un complejo coloreado rojo-naranja con
ácido picrico. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la
creatinina en la muestra.

3. Muestra
Suero o plasma heparinizado u orina

4. Condiciones del paciente


La muestra de sangre no requiere ayuno previo ya que la excreción de creatinina
depende muy levemente de la alimentación y de la diuresis.
Por lo menos 8 horas antes del examen no realizar esfuerzos corporales intensos.

5. Condiciones de la muestra
La muestra de suero para creatinina es inestable a temperatura ambiente,
refrigerada de 2 – 4 ºC por 24 horas. Congelada a –20 ºC es estable por 6 meses
La creatinina puede ser determinada en cualquier líquido biológico, pero las
muestras mas usadas son suero, plasma y orina.

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 546 nm (500-550 nm)


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25° C
Medición: frente a blanco de reactivo

7. Tecnica

Estándar Muestra
Solución Trabajo 500λ 500λ
Estándar 50λ ----
Suero ---- 50λ

Mezclar y poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia a los 30 segundos


y a los 90 segundos.
A2-A1= Creatinina
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8. Valores de referencia

Creatinina en suero o plasma Mujeres 0.5 – 1.0 mg/dl.


Hombres 0.7 – 1.2 mg/dl.

Estos valores están influenciados por el sexo (siendo menor en la mujer), masa
muscular del individuo.

9. Interferentes de la muestra y la reaccion


• Interferentes positivos: Acido ascórbico, piruvato, acetona, ácido aceto-
acético, levulosa, glucosa, ácido úrico, proteínas, barbitúricos y antibióticos de la
cefalosporina. Las temperaturas altas y los prolongados tiempos de reacción (> a
5 minutos), aumentan esta interferencia.

El piruvato, acetona, ácido acético, aminoácidos y proteínas o cualquier


compuesto con un grupo metilo o metileno activo, introduce errores debido a su
acoplamiento con el picrato por un mecanismo análogo al de la creatinina; todos
estos compuestos pueden producir sustancias coloreadas que aumentan la
absorbancia en la reacción del complejo coloreado.

La bilirrubina y otros productos de degradación de la Hb, causan una interferencia


negativa probablemente por su oxidación en medio básico fuerte a compuestos
incoloros, dando como resultado una disminución de la absorbancia, lo que se
interpreta como una menor concentración de creatinina. Esta interferencia
negativa se observa con frecuencia en el análisis cinético de la creatinina.

10. Correlacion diagonstica


El nivel de creatinina en suero depende de 2 factores:

La velocidad de producción.
La velocidad de filtración.

Dado que la fuente de creatinina serica es la creatina muscular y la fosfocreatina,


una mayor cantidad de masa muscular produce un aumento de la creatinina
serica.

Los valores de creatinina exhiben una respuesta escasa o nula a las


modificaciones dietéticas o a las alteraciones del equilibrio electrolitico.
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La concentración de creatinina en sangre, como la de la urea, se aumenta con el


descenso de la función renal y el principal empleo de la determinación de
creatinina serica esta en la evaluación de la función renal.

En nefritis crónica cuando la concentración de BUN esta muy por encima de 50


mg/dl, el aumento de la creatinina es proporcional y las concentraciones de
creatinina mayores a 5 mg/dl se consideran de importancia diagnostica grave.

Niveles disminuidos se encuentran en la distrofia muscular.

Notas
La especificidad de la reacción depende del pH, temperatura y tiempo.
Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse del fotómetro, sin
que se alteren los resultados finales.
El ácido pícrico es tóxico. Evite la inhalación, ingestión y contacto con la piel, lavar
enseguida con polietilenglicol 400, con abundante agua.
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DEPURACION DE CREATININA

Generalidades
Es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva,
porque nos da información de cómo esta la filtración glomerular. La relación entre
la concentración de una sustancia en orina y sangre es el mejor índice de función
renal, que la concentración de dicha sustancia aislada en sangre o en orina.

La depuración de la creatinina endògena es un método útil para seguir el progreso


de una enfermedad renal evolutiva, siempre y cuando los resultados se interpreten
en forma comparativa y no absoluta.

1. Muestra
Técnica para el suero, el mismo procedimiento de creatinina en suero.
Técnica para la orina: Diluir 1:100 con Solución Salina 0.9%.

Valores de referencia:

Hombres: 98 – 156 ml/minuto


Mujeres: 95 – 160 ml/minuto

Limite de dilución: 500 mg/dl

2. Condiciones del paciente


La muestra de sangre debe obtenerse durante el periodo de recolección de la
orina.
La muestra de orina se recoge durante un periodo determinado, generalmente 24
horas aunque es posible reducirlo a 4, 8 ó 12 horas. El control cronológico de la
recolección de las muestras es esencial para la realización correcta de la prueba.

 Para la recolección de la orina el paciente debe fijar una hora cero. Descartar
la orina de esa hora y a partir de entonces recoger todo el volumen de orina,
inclusive la muestra del tiempo fijado para la recolección.
 Marcar en el frasco la hora de iniciación de la recolección.
 Guardar refrigerada y en frasco bien tapado.
 El paciente debe abstenerse de ingerir carne, té y café durante las 24 horas
anteriores a la recolección.
 Debe seguir tomando agua, para asegurar un volumen urinario de 1 ml por
minuto cuando menos.
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 Interrumpir toda terapia diurética.

3. Condiciones de la muestra
Muestra de suero libre de hemólisis fuerte y de ictericia (ya que una ligera
hemólisis no afecta la determinación).
La muestra de orina debe refrigerarse o agregarse un inhibidor bacteriano. La
concentración de creatinina debe determinarse antes de las 24 horas de recogida
la muestra, ya que los gérmenes producen variación en el pH promoviéndose así
la conversión de creatinina en creatina, la cual no puede medirse por la reacción
de Jaffé, además producen creatininasas que destruyen la creatinina.

4. Metodo de determinacion
Longitud de onda: 546 nm (500-550 nm)
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25° C
Medición: frente a blanco de reactivo

5. Tecnica

Pipetear:

Estándar Muestra
Solución Trabajo 500λ 500λ
Estándar 50λ ----
Orina diluida ---- 50λ

Dilución de la orina *
Hacer una dilución de la orina de 1: 50. 10 ml de orina + 490 ml de agua
destilada; el resultado se multiplica por 50.

Calculo
Creatinina en Orina* x Volumen (ml)
________________ _________
Creatinina en suero 1140 (Constante)
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6. Valores de referencia

Creatinina en suero o plasma Mujeres 0.8 – 1.2 mg/dl.


Hombres 0.9 – 1.4 mg/dl.
Creatinina en orina 1900 mg/24 h.
Depuración de Creatinina: Mujeres 75 – 115 ml/min.
16 – 22 mg/Kg peso/24 h

Hombres 85 – 125 ml/min.


21 – 26 mg/Kg peso/24 h

7. Interferencias

Los mismos de la guía anterior.

Notas

Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse proporcionalmente


según las necesidades del fotómetro, sin que se alteren los resultados finales.
Entre las causas de error están: mal cronometrado o recogida inadecuada de la
muestra de orina, ejercicio fuerte durante la prueba, lo cual aumenta los niveles
urinarios, la hidratación inadecuada del paciente, que seria una fuente de error
negativa.

8. Correlacion diagnostica

En enfermedades renales avanzadas la excreción urinaria de creatinina excede a


la velocidad de filtración glomerular a causa de la secreción tubular, por lo que el
verdadero valor de filtración glomerular esta por debajo de la depuración de la
creatinina.
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El filtrado glomerular disminuye notablemente en G.N.A. y crónica; ligeras


disminuciones se observan en pielonefritis crónica e hipertensión.

La filtración glomerular normal es en un adulto de 125 ml/min. Si la depuración


plasmatica de una sustancia es mayor que la filtración glomerular debe
interpretarse como que esta sustancia es secretada por el túbulo y si por el
contrario, la depuración es menor que la filtración, podemos concluir que esta
sustancia es reabsorbida.

La depuración de creatinina disminuye en personas de edad, en niños y personas


de baja estatura por esto se hace necesario realizar la corrección del valor
obtenido, multiplicando el resultado por 1.73/A para obtener el valor real de la
depuración en estos pacientes. En las personas obesas la depuración esta
alterada por lo tanto se hace necesario la corrección.
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GLICEMIA

Generalidades

Glucemia o glicemia: Este término se refiere a la presencia de la glucosa en


sangre.

La glucosa sanguínea proviene de dos fuentes:

La más importante es la absorción intestinal de glucosa alimenticia que


normalmente puede llevar los valores sanguíneos de glucosa hasta 138 -140
mg/dl.
La liberación de glucosa por el hepatocito mediante un mecanismo que se acelera
al disminuir la glicemia sanguínea.

Glucogenesis: Formación de glucógeno (hígado, músculo en mayor proporción y


también leucocitos, en el tejido nervioso en muy poca cantidad).

Glucogenolisis: Movimiento de glucógeno almacenado para producir glucosa-6-


fosfato.

Glucolisis: Llevar la glucosa-6-fosfato hasta piruvato para producir acétyl Co A


(ciclo de krebs).

Gluconeogenesis: Formación de glucosa a partir de otro sustrato diferente al


glucógeno ejemplo: aminoácidos.

1. Metodo

Prueba enzimática colorimétrica por glucosa. Metodo con desproteinización.


GOD-PAP.

2. Fundamento

La glucosa de determina despúes de la oxidación enzimática en presencia de


glucosa oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de
la peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo-violeta
usando la quinonemina como indicador.
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3. Muestra

Sangre total, suero o plasma

4. Condiciones del paciente

No se requiere preparación dietética especial, a menos que el paciente consuma


diariamente menos de 150grs. de hidratos de carbono.
Ayuno de diez a doce horas.
No tomar café, ni haber fumado antes o durante la prueba.
No realizar ejercicio antes o durante la prueba.
No presenta glucosuria positiva antes de dar la carga de glucosa. Umbral renal
(T.M.) 160-180 mg/dl.
En el momento de la toma de la muestra el paciente debe estar sentado erguido.

5. Condiciones de la muestra

La separación del suero debe hacerse dentro de los 20 o 30 minutos de la


extracción.
La estabilidad de la muestra es de 8 horas.

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 500 nm 546 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 20. 25 ó 37 °C
Medición: frente a blanco de reactivo

7. Tecnica

Pipetear:
Blanco Patron Muestra
BLANCO ---- ---- ----
PATRON ---- 10λ ----
MUESTRA ---- ---- 10λ
RVO. COLOR 1000λ 1000λ 1000λ

Mezclar, incube a temperatura de 20 - 25°C por 10 minutos ó 5 minutos a 37°C.


Leer la absorbancia de la muestra y el patrón contra el blanco de reactivo.
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8. Valores de referencia

Criterios de diagnóstico para DM por PTOG

Normal Diabetes mellitus Intol. A la glucosa


Adulto Niño Adulto Niño Adulto Niño
Ayunas < 115 < 130 >= 140 >= 140 115 - 139 130 – 139
P.T.O.G. < 140 < 140 >= 200 >= 200 140 - 199 140 – 199

9. Carga de glucosa
Niños: 1.75 gr de dextrosa por kilogra la prueba tamiz consiste en administrar la
carga de dextrosa y tomar una muestra después de una hora post-ingesta. Para
la P.O.T.G, 100 gr. de dextrosa en 300 ml.de agua.

Nota
El tiempo máximo para ingerir la carga de glucosa oral es de 5 minutos, a partir
de los cuales se empezara tomar los tiempos para la toma de las muestras asi:
Gestantes 1-2 y 3 horas, no Gestantes 2 horas postcarga.
Utilizar métodos de laboratorio previamente estandarizados y sueros control

Diagnostico de diabetes mellitus


El principal objetivo de diagnóstico es la indentificación de pacientes con riesgo de
hiperglicemia sintomática de cetoacidosis diabetica (CAD) o coma hiperosmolarno
no cetónico (CHNC) o de complicaciones clínicas tardías, descartando aquellos
pacientes que presentan fluctuaciones en el límite superior de la concetracion
plásmatica normal, que pueden no entrañar los riesgos asociados a la DM.

En los pacientes asintomáticos el diagnóstico de DM se establece cuando se


cumplen los criterios diagnósticos de los valores de glicemia recomendado por
diferentes asociaciones o grupos de estudio de diabetes asï:

National diabetes data group

Basal >= a 140 mg/dl en dos ocasiones consecutivas sea en adultos o en niños.

La prueba de tolerancia oral a la glucosa (P.T.O.G.) tiene como finalidad la de


descartar o de diagnósticar una diabetes mellitus tipo 2 (D.M.tipo 2.), cuando se
sospecha una diabetes a pesar de la ausencia de hiperglicemia en ayunas o
sistomática, por ejemplo en aquellos paciente que presentar trastornos clínicos
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que pudieran deberse a una DM no diagnósticada ejemplo: polineuropatía,


retinopatía y nefropatia, etc.

Los criterios diagnósticos por P.T.O.G. solo son válidos para individuos sanos que
no presentan infecciones, enfermedades cardiovasculares o vasculares
Cerebrales agudas, enfermedades endocrinas que deterioren la tolerancia a la
glucosa o enfermedades hepáticas, renales o del S.N.C., tampoco pacientes
tratados con fármacos que alteren la prueba de tolerancia oral a la glucosa
(tiazidas, glucocorticoides, ac. Nicotinico, anticonceptivos orales que contengan
estrógenos sintéticos).

No se debe realizar la P.T.O.G. a los pacientes que presenten naúseas, vómito,


sudoración, desmayos o palidéz durante la realización de la prueba.

En la P.T.O.G., por lo menos dos valores deben ser > = 200 mg/dl.
Adultos: dos horas y en cualquier otro momento de la P.T.O.G...
Niños: asintomaticos deben ser mas estricto en diagnóstico por P.T.O.G.,(dado el
mayor riesgo de un exceso de diagnóstico de DM).

La P.T.O.G, debe repetirse para corroborar el diagnóstico de DM, tanto en niños


como en adultos.
Los pacientes con intolerencia a la glucosa pueden presentar mayor riesgo de
hiperglicemia en ayunas o sintomatica, pero en muchos casos la intolerencia a la
glucosa no progresa, o puede también revertir a la normalidad.

Valores normales

Después de un ayuno de 10 a 12 horas los valores de glicemia deben estar


ubicados entre 70-110 mg/dl (según el método utilizado). Los valores de glicemia
posprandial pueden ir hasta 160 mg/dl. (Guillermo Farias quimica clínica, décima
edición).

*Criterios diagnosticos reportados por el comite de expertos en el diagnostico y


clasificacion de diabetes mellitus.

sintomas de diabetes, acompañados de una glicemia a cualquier hora mayor o


igual a 200 mg/dl.
Los sintomas clásicos incluyen poliuria, polidipsia y pérdida de peso.
2. Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl. Ayunas se define como la no
ingesta calórica al menos por 8 horas.
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3. Dos horas poscarga durante una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG)
mayor o igual a 200 mg/dl. Para ello se utiliza 75 gramos de glucosa anhidra
disueltos en 300 cc de agua.

En la ausencia de hiperglicemia inequívoca con descompensación aguda, estos


criterios deben ser confirmados por otra prueba realizada un día diferente.

Los valores normales para la glicemia en ayunas, se han establecido en 110


mg/dl, la razón para ello es la perdida de la primera fase de secreción de insulina a
partir de esta cifra.
La prueba de tolerancia utilizaba valores a la hora, hora y media y a las dos horas.
De acuerdo a los nuevos criterios solo se tiene en cuenta los valores a las 2 horas.

Se han establecido tres criterios para el diagnostico de diabetes, cada uno de ellos
debe ser confirmado con una prueba posterior. Por ejemplo, síntomas con una
glicemia al azar > de 200 mg/dl, debe ser confirmado subsecuentemente por una
glicemia en ayunas ≥ a 126 mg/dl, una glicemia 2 horas postcarga ≥ a 200 mg/dl, o
una glicemia al azar ≥ a 200 mg/dl.

Las categorias para la glicemia en ayunas quedan establecidas de esta foma:


* Glicemia normal: Menor a 110 mg/dl.
* Hiperglicemia en ayunas: Entre 110 mg/dl y 126 mg/dl.
* Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 126 mg/dl.

Para la prueba de tolerancia a la glucosa, las categorias, son:


* Glucemia normal: Menor de 140 mg/dl, 2 horas poscarga.
* Disminución de la tolerancia a la glucosa: Entre 140 mg/dl y 200 mg/dl, 2
horas poscarga.
* Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 200 mg/dl.

El comité no recomienda la utilización de los niveles de hemoglobina glicada para


el diagnostico de la diabetes, si bien los niveles de hemoglobina glicada presentan
una distribución similar a la glicemia, las pruebas utilizadas para ella no estan
estandarizadas, por lo cual asignar un valor diagnostico es difícil; por el momento
solo continua como prueba para el control y no para el diagnostico.

Diagnostico de hipoglicemia
Depende si el paciente presenta manifestaciones del sistema nervioso central
(S.N.C) inexplicadas o sintomas adrenergicos inexplicables.
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En ambos casos para el diagnóstico se requiere valores plásmaticos


anormalmente bajos, los cuales se corrigen al aumentar la glucosa sanguínea.
Por lo general una glucosa plásmatica anormalmente baja se define menor de
50mg/dl en el varón, menor de 45mg/dl en la mujer, y en lactante y niños menor de
40mg/dl . (Se pueden encontrar valores menores de los expuestos en un ayuno de
72 horas).
El paciente con deterioro de la conciencia o crisis convulsiva debe efectuarse la
glucosa con tirilla y gota de sangre obtenida al colocar un aguja para iniciar la
perfusión de líquido; si se obtiene un valor anormalmente bajo, se perfunde
glucosa de inmediato. La mejoría inmediata de los sintomas del S.N.C., tras un
aumento de glucosa, confirman el diagnóstico de hipoglicemia de ayuno o inducida
por fármacos.

El diagnóstico debe completarse con valoraciones de insulina proinsulina y peptido


C y también la busqueda de drogas que puedan estar ocasionando la
hipoglicemia (insulina alcohol, sulfas que producen un 50% de las hipoglicemias.
Otros fármacos como salicilatos, propanolol etc.)

Criterios diagnosticos para diabetes gestacional

Ayunas >= 105 mg/dl


1 hora >= 190 mg/dl
2 horas >= 165 mg/dl
3 horas >= 145 mg/dl
Normal: Hasta 135 mg/dl.
Anormales:
Valores de glicemia entre 135 - 180 mg/dl sugieren la realización de una P.T.O.G.
de 3 horas con una carga de dextrosa de 100 gramos.
Valores de glicemia > 180 mg/dl en más de una oportunidad son diagnósticos
de D.M.G
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UREA

1. Metodo

Metodo completamente enzimático para determinación cinética de urea.


GLDH.

2. Fundamento

La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir amonio y


dióxido de carbono. El amonio producido en esta reacción se combina con 2-
oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato-deshidrogenasa (GLDH) para
formar glutamato y NAD+.
La prueba ha sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima límite. La
disminución de la absorbancia es proporcional a la concentración de urea dentro
de los intervalos de tiempo dados. Ya que la prueba cinética es muy rápida, ha
sido diseñada para ser realizada preferiblemente en analizadores.

3. Muestra

Suero o plasma, orina diluida 1:1000 con agua destilada.

4. Condiciones del paciente

24 horas antes de tomar la muestra, el paciente debe llevar una dieta pobre en
proteínas y 12 horas de ayuno total.

5. Condiciones de la muestra

Por acción bacteriana se puede perder la urea, por lo tanto debe analizarse pocas
horas despúes de recogida o conservarse en refrigeración.
Sueros lipémicos causan turbidez en la solución final.
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6. Metodo de determinación

Logitud de onda: 340 nm, 334 nm, 365 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C
Medición: Lectura contra blanco de reactivo

7. Tecnica

Pipetear

Blanco Patrón Muestra


Muestra ---- ---- 10 ul
Patrón ---- 10 ul ----
Reactivo 1ml 1ml 1ml

Mezcle, lea la absorbancia de la muestra y el estandar despúes de 30 segundos y


lea nuevamente al minuto, calcule la diferencia

8. Valores de referencia

Suero 10-55 mg/dl


1, 7-9, 1 mmo1/1

Orina 20-35 mg/24 horas


333-583 mmo1/24 horas

El método es lineal hasta 200 mg/dl (33, 3 mmo1/1) de urea para suero o plasma y
200 g/L (330 mmol/L) para la orina. Para concentraciones más altas mezclar un
volumen de la muestra con un volumen igual de agua destilada, repetir el ensayo y
multiplicar el resultado por dos.

El patrón, la muestra y la solución 1 deben pipetear en el fondo de los tubos de


ensayo y mezclarse cuidadosamente.
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9. Interferencias

La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl, triglicéridos hasta


2000 mg/dl, bilirrubina hasta 60 mg/dl, glucosa hasta 500 mg/dl y ácido ascórbico
hasta 30 mg/dl.

10. Correlacion diagnostica

La urea se encuentra aumentada por encima de los valores normales en caso de


insuficiencia renal u obstrucción de vías urinarias, nefritis aguada, TBC renal, Gota
Crónica y en todas aquellas entidades donde el volumen del filtrado glomerular se
ha reducido una quinta parte de lo normal.

Cuando existe uremia los síntomas incluyen letargo, anorexia, náusea y vómito,
deterioro mental y confusión, sacudidas musculares, convulsiones y coma. La
anemia es un carácter prominente en la uremia crónica porque está deprimida la
eritropoyesis. El nitrógeno uréico de la sangre, el nitrógeno no proteico y la
creatinina están elevados y los niveles sanguíneos de estas sustancias se
emplean como índice de la gravedad de la uremia.
Los valores de la urea pueden disminuirse en alteraciones hereditarias de la
síntesis de urea o cuando existe una ingesta inadecuada de proteínas, o una
enfermedad hepática grave.

Determinacion de nitrogeno ureico

El nitrogeno ureico se saca de dividir el valor de la urea por un factor que es 2.14.
PROTEINAS TOTALES

Generalidades.
La cifra normal de las proteinas totales del suero está comprendida entre 6 y 8 mg/
ml encontrándose de 1 gramo menos en los pacientes que guardan cama por mas
de dos semanas las proteínas totales están integradas por la fracción albúmina y
bla fraccion globulina. La priemera regula la presión osmótica coloidal de la
sangre, aporta la nutricion celular, interviene en el equilibrio ácido-básico,
transporta los lipidos originando los compuesos que se denominan, lipo-proteínas
y sirve de medio de transporte a multitud de elemntos como esteroides, hierro,
cobre, vitaminas liposolubles. La fracción globulina se sintetiza especialmente en
las células plasmáticas y tienen como misión principal fabricar anticuerpos, de
donde se origianan el nombre de inmunoglobulinas.

1. Metodo
Prueba colorimétrica fotométrica para proteínas totales (Biuret)
2. Fundamento
Los iones cúpricos con las proteínas y peptidas en solución alcalina forman un
complejo púrpura. La absorbancia de este complejo es proporcional a la
concentración de proteínas en la muestra.

3. Muestras.
Suero y plasma heparinizado. Estable 8 dias a 2-8 C.
Los anticoagulantes quelantes interfieren.

4. Condiciones del paciente


La muestra ha de tomarse con 8 horas de ayuno.
Evitar todo esfuerzo corporal intenso por lo menos 8 horas antes de la toma de la
muestra. El ejercicio causa aumento de la concentración de proteínas en un 6 a
12%.

El uso de torniquete no ha exceder los 30 segundos, su prolongación tiende a


aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero en aproximadamente
0.5 g/dl.
5. Metodo de determincion
Longitud de onda: 340 nm, 334 nm ó 365 nm
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C
Medición: frente a blanco de reactivo

6. Tecnica

Pipetear en tubos de ensayo:


Blanco Patrón Muestra
Agua destilada 10 ul ----- -----
Patrón proteina ---- 10 ul -----
Muestra ---- ----- 10 ul
Reactivo 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml

Mezcle, lea la absorbancia de la muestra y estándar despúes de 30 segundos y


lea exactamente al minuto despúes calcule la diferencia y multiplique por 80.

ABS Muestra
____________ X 80= mg/dL proteína
ABS Patrón

7. Valores de referencia

Suero: 65 – 80 g/L
Plasma: 68 –83 g/L

8. Interferentes

La hemoglobina (0,2 g/L).


La bilirrubina (15 mg/dl)
La lipemia moderada no interfiere.
La presencia de dextrano (utilizado como expansor del plasma) ocasiona una
floculación de la mezcla de reacción que puede separarse por centrifugación sin
que afecte los resultados.
9. Corelacion clinicopatologica

Cuando hay hemoconcentración por shock, vómitos, diarreas profusas,


quemaduras, sudoracion excesiva, fistulas digestivas etc. Se obtienen falsas
hiperproteinemias.
Las cifras bajas generalmene corresponden a malnutricion, tambien puede estar
disminuida en:
Nefrosis lipoidea.
Edemas carenciales.
Neoplasias.
Afecciones hépaticas crónicas.
Anemia persistente.
De la cifra total que integran las proteínas, entre 3.5 y 5.5 g/ml corresponden a la
albúmina y entre 1.5 y 3g/ml a la globulina.
PROTEINURIA

Generalidades.

Tambien conocida como albúminuria, es la cantidad de proteína excretada por la


orina. Normalmente es de 40 a 80 mg con límite máximo, 150/24 horas, cantidad
no detectable por los sistemas habituales para dosificarla.
Es el indicador más importante de enfermedad renal complementado con el
sedimento microscópico. La albúmina constituye entre un 60 y un 90 % de la
prteína excretada y el resto está por globulinas principalmente globulina Alfa- 1 y
Alfa –2.
Tiene como mecanismo el aumento de la permeabilidad de las membranas
glomerulares, reabsorción tubular disminuida, aumento de la filtración glomerular o
alteraciónes en la composicion proteíca que la hace filtrar más facilmente.
La cantidad no permite valorar la gravedad de la afección, pero su dosificacion
periódoca si valora el progreso o regresión de la lesión.

1. Metodo

Metodo colorimétrico cuantitativo para determinación de proteínas en orina y


líquido cefalorraquideo.

2. Fundamento.

La proteina presente en la muestra reacciona en medio ácido con el complejo Rojo


rojo de pirogalol y el molibdato originando un complejo coloreado que se
cuantifica por espectofotometria.

3. Muestras.

Orina de 24 horas, orina ocasional ó líquido cefalorraquideo.


Recoger la orina, medir el volumen y conservarla a 2-8 C. Estable 8 dias.

4. Condiciones de la muestra

Se debe recoger orina de 24 horas u orina ocasional.


En caso de orinas muy turbias es conveniente centrifugarlas.
5. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 580 nm, 600 nm ó 620 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 37 °C
Medicion: frente a blanco de reactivo

6. Tecnica

Blanco patron muestra


Patron ---- 20 ul ----
Muestra ---- ---- 20 ul
reactivo 1 ml 1 ml 1 ml

Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37 °C leer la absorbancia contra el blanco

Calculos:
Proteinas de 24 horas: Muestra
Patron x volumen x 100

Proteina en orina ocasional: Muestra


Patron x 100

Proteínas en líquido cefalorraquideo: Muestra


Patron x 100

7. Valores de referencia

Orina de 24 horas 30 – 140 mg/24 h (hasta 160mg/24h en mujeres embarazadas)


Orina ocasional 25 mg/dl
Líquido cefalorraquideo 15 – 45 mg/dl (en adultos de más de 60 años se extiende
a 60 mg/dl)

8. Interferencias

La hemolisis puede ser causa de resultados falsamente aumentados tanto en


orina como en LCR.
Los conservantes para orina como ácido clorhídrico,, ácido benzoíco o timol
pueden causar resultados falsamente disminuidos.
Algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la reacción.
9. Correlacion diagnostica

Hay condiciones fisiológicas o benignas deonde se puede observar un aumento en


la excresión urinaria de proteínas como el ejercicio violento, la fiebre, hipotermia,
el embarazo.
La determinación de proteínas es importante en la detección de patologías
renales, como en la disfunción glomerular.
El LCR es útil para evaluar la permeabilidad de la barrera hematoencefálica en
muchas enfermedades inflamatorias o infecciosas del SNC, como ocurre en la
meningitis bacteriana, viral o de otros origenes.
TRANSAMINASAS

Generalidades

El hígado contiene un gran numero de enzimas, de todas ellas las de mayor


importancia clínica son la fosfatasa alcalina (Pa), las transaminasas (GOT ó ASAT
Y GPT ó ALAT) y la CGT (gamaglutamiltranspeptidasa o γGT).

Las transaminasas son enzimas que catalizan las reacciones de transferencia de


grupos aminos de un aminoácido a un cetoácido, para la síntesis de aminoácidos
distintos a los originales. Existen dos tipos de transaminasas, la transaminasa
glutamicopirúvica ó Alaninoaminotranferasa y la transaminasa
glutamicooxaloacética ó Aspartatoaminotransferasa , estas enzimas están
localizadas particularmente en el hígado, corazón, etc; la GPT es una enzima
exclusivamente citoplasmática, en tanto que la GOT es una enzima binocular, es
decir, que esta constituida por dos isoenzimas, una citoplasmática y otra
mitocondrial; se van a diferenciar por su movilidad elctroforética, pH óptimo de
acción, propiedades cinéticas e inmunológicas y a.a. que la componen.

En los eritrocitos se encuentra la GOT soluble y en los leucocitos y reticulocitos


están los dos tipos enzimáticos.

La GPT es un enzima que también se encuentra en riñón, corazón, músculo


esquelético pero en mayor concentración en el Hígado, la GPT se puede encontrar
en plasma, orina, LCR, y en eritrocitos pero en bajas concentraciones.
ASPARTATO AMINOTRASFERASA (GOT)

1. Metodo

Prueba liquiUV

2. Fundamento

Metodo cinético para la determinación de la actividad de ASAT o GOT de acuerdo


a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC. Sin activación por
piridoxalfosfato.

3. Muestra

Suero o plama con heparina o EDTA.

4. Condiciones del paciente

Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado.


Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado.

5. Condiciones de la muestra

Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina, se debe tener en
cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado.
Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. Se recomienda analizarlas después
dé una hora de tomada la muestra

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 365 nm, 340 nm, 334 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25, 30 ó 37°C
Medición: frente a aire
7. Tecnica

Temperatura 25-30ºC 37ºC


Muestra 200λ 100λ
Reactivo de trabajo 1000λ 1000λ

Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto


a los 2 y los 3 y hacer los cálculos

8. Valores de referencia

25 ºC 30 ºC 37 ºC
Hombres hasta 18 U/L 25 U/L 37 U/L
Mujeres hasta 15 U/L 21 U/L 31 U/L

9. Interferencias

Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la


actividad de la muestra.
Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto
pueden causar resultados erráticos en la absorbancia.
El oxalato inhibe la actividad de la enzima, no se debe usar como anticoagulante.
La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación
enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C
Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil
para función cardíaca y hepática.

Linealidad

En caso de sobrepasar la linealidad diluir 0.1ml mas 0.9ml de solución salina y


multiplicar por 10. En casos de baja absorbancia es debido a que por ser una
reacción enzimática se consume el NADH en la incubación, en estos casos
también se debe diluir.

10. Correlacion diagnostica

Los valores aumentados de esta enzima suceden cuando hay muerte en las
células del miocardio (infarto al miocardio), en las próximas 6-12h después de la
oclusión de una arteria coronaria; el grado del aumento es proporcional a la
magnitud del daño, osea que una lesión grande puede hacer elevar los valores
>200 unidades, los valores máximos se ven en al cabo de 48h y recupera sus
valores normales de 3-5 días.

Las cifras de GOT también se ven aumentadas en lesiones agudas de las células
hepáticas como en las hepatitis virales y lesiones por intoxicación con fármacos o
tóxicos como tetracloruro de carbono. Los aumentos moderados se observan en
las etapas finales de la cirrosis, ictericias obstructivas.
ALANINA AMINOTRANSFERASA (GPT)

1. Metodo

Prueba liquiUV para alanina aminotransferasa.

2. Fundamento
Es un método cinético para la determinación de la actividad de la GPT de acuerdo
con las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC sin activación por
piridoxalfosfato.
Los métodos para la medición de GPT son muy semejantes a los de la GOT; el
ácido pirúvico producido por la enzima a partir de alanina y ácido alfacetoglutarato
se transforma en ácido láctico por efecto de la deshidrogenasa láctica. La
transformación simultánea de NADH en NAD va seguida por una disminución de la
absorbancia a 340nm.

3. Muestra

Suero o plasma con EDTA o heparina.

4. Condiciones del paciente

Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado.


Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado.

5. Condiciones de la muestra

Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina, se debe tener en
cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado.
Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. Se recomienda analizarlas después
dé una hora de tomada la muestra

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 365 nm, 340 nm, 334 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25, 30 ó 37°C
Medición: frente a aire
7. Tecnica

Temperatura 25-30ºC 37ºC


Muestra 200λ 100λ
Reactivo de trabajo 1000λ 1000λ

Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto


a los 2 y los 3 y hacer los cálculos

Linealidad

Hasta 154mmol/L o 9gm/L (según el Kit utilizado).


Si sobrepasa la linealidad diluir 1 + 10 y multiplicar por 11

8. Valores de referencia

25ºC 30ºC 37ºC


Hombres hasta 5-23U/L 7-32U/L 9-43U/L
Mujeres hasta 5-19U/L 7-26U/L 9-36U/L

Precauciones

El Buffer/sustrato esta compuesto con sodio de azida 0.095% evitar contacto con
mucosas y piel.

9. Interferencias

Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la


actividad de la muestra.
Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto
pueden causar resultados erráticos en la absorbancia.
El oxalato inhibe la actividad de la enzima, no se debe usar como anticoagulante.
La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación
enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C
Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil
para función cardíaca y hepática.
10. Correlacion diagnostica

Las cifras de GPT pueden estar también ligeramente aumentadas en el infarto al


miocardio, pero esto se debe posiblemente al daño del hepatocito secundario por
alteración en la circulación.
Los niveles sericos de GPT se encuentran considerablemente aumentados en las
lesiones agudas de las células hepáticas, a veces es mayor el aumento que la de
la GOT, por esta razón se considera más específica la GPT en patologías del
hígado.

La determinación de la GOT y GPT se encuentran aumentadas en las


insuficiencias cardiacas y como consecuencia del estasis Hepático, si la
insuficiencia es aguda se pueden elevar los valores de 1000 a varios miles U/L, lo
que nos puede ayudar a diagnosticar un infarto del miocardio teniendo muy en
cuenta no llegar a confundirse con una hepatitis viral ya que en estas también
aumentan, se debe analizar todos los datos clínicos posibles para hacer un buen
diagnostico y reconfirmar con enzimas como γGT, CHE y GPT que son
hepatoespecificas.

En la ictericia hepática (hepatocelular) y la post-hepática se utilizan la GOT y GPT


para diferenciarlas. En la post-hepáptica es difícil encontrar valores superiores a
200U/L, en colestasis intra-hepática los niveles de GOT y GPT son análogos a los
de la ictericia post-hepática.

En la hepatitis viral se observa una elevación de ambas enzimas, en contraste con


la cirrosis hepática que se elevan poco las GOT y disminuyen las GPT. El análisis
de estas dos enzimas es de útil ayuda para detectar daño a nivel del hígado y
determinar una hepatitis ya sea viral o por tóxicos como drogas.

Los valores de La GPT, GOT, y la determinación de la fosfatasa alcalina son los


de mayor utilidad para el diagnóstico de las hepatitis, los valores elevados de
estas tres enzimas son característicos de las hepatitis agudas y enfermedades
necrotizantes del hígado en contraste con la elevación de la fosfatasa alcalina y
disminución de GOT y GPT que nos da indicios de una ictericia obstructiva.

Nota
Gran parte del éxito de obtener buenos resultados en este tipo de determinaciones
enzimáticas esta en el correcto manejo del tiempo a la hora de la lectura (pues las
enzimas actuaran hasta consumir el substrato), un buen trabajo organizado, un
buen lavado del material y no dejar de lado el uso de los controles.
AMILASA

GENERALIDADES

Las amilasas son enzimas contenidas en la secreción pancreática las cuales


catalizan la hidrólisis de los polisacáridos tales como : El almidón, amilopeptina,
glucógeno y sus productos parcialmente hidrolizados.
Actua sobre las uniones 1-4 de las cadenas rectas del almidón y también sobre las
uniones 1-6 glucosídicas de las cadenas ramificadas como las de amilopeptina y
glicógeno.

La α - amilasa es una endoenzima que se denominaasí porque todos los


productos de la hidrólisis tienen la configuración (α) en el C1 de la unidad de la
glucosa reductora.

La α - Amilasa suele estar presente en el páncreas ( 200 mg/kg ) glándulas


salivales, hígado, músculo, tejido adiposo, orina, sangre, heces, leche, semen,
riñón, cerebro, trompas de falopio, pulmón, intestino, bazo y corazón.

1. Metodo

Prueba colorimétrica para amilasa alfa-1,4-glucan-4-glucanohidrolasa.

2. Fundamento

La prueba colorimétrica utiliza un nuevo substrato, 2-cloro-4-nitrofenil-


maltotriósido. Este substrato reacciona directamente con la amilasa y no requiere
de enzimas de restricción. La liberación de 2-cloro-4-nitrofenol del substrato y el
resultante incremento de absorbancia por minuto es directamente proporcional a
la actividad de la amilasa en la muestra.

3. Muestra

Suero o plasma heparinizado, orina


No hay pérdida de la actividad en 5 días a 4°C.
4. Condiciones del paciente

No requiere ayuno.
Evitar la utilización del torniquete por más de 30 segundos.

5. Condiciones de la muestra

Puede utilizarse plasma heparinizado.


No utilizar citrato, oxalato o EDTA porque inhiben la actividad de la enzima.
Se recomienda el uso de pipetas automáticas para la medición de las soluciones
para evitar la contaminación de las mezclas con saliva.
Si la determinación excede el valor diluir la muestra con 500 ul de solución salina y
100 ul de muestra y multiplicar por 6.

6. Metodo de determinación

Longitud de onda: Hg 405 nm, 400 nm ó 410 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25 °C ó 37°C
Medición: frente a agua destilada

7. Tecnica

Temperatura 25°C 37°C


Muestra 20 ul 10 ul
reactivo 1000 ul 1000 ul
factor 9864 24820

Mezclar bien incubar por un minuto a la temperatura deseada. Leer la absorbancia


a los 1, 2 y 3 minutos
Y multiplicar por el factor correspondiente.

8. Valores de referencia

Temperatura 25°C 37°C IFCC


Suero, plasma 120 U/l 220 U/l 28-100 U/l
Orina espontánea 600 U/l 1000 U/l <460 U/l
Orina 24 horas 450 U/24h 900 U/24h <410 U/l
9. Correlacion diagnostica

Los nivele elevados en el suero son siempre transitorios.


Corresponden a episodios agudos y sólo duran 3 días, pero en la orina persisten
hasta por 10 días.
Cuando hay ruptura del embarazo ectópico, se libera una gran cantidad de
amilasay se produce una hiperamilasemia, dato útil para su diagnóstico.
La úlcera péptica perforada, aumenta los niveles de amilasa.
En la pancreatitis aguda, sus niveles aumentan en las primeras 24 a 36 horas,
obteniendo niveles normales al 3 día.

10. Interferencias

La aplicación de morfina produce contracción del esfinter de Oddi y eleva los


niveles hasta 900 unidades, dato que se debe tener en cuenta cuando se dosifica
en pacientes con posible pancreatitis aguda y han recibido este analgésico.
AMILASURIA

En condiciones normales se elimina una cantidad de amilasa por la orina,


comprendida entre 35 y 250 unidades, con cifras estremas en las 24 horas de 835
a 6150 unidades.
Este factor hay que tenerlo en cuenta y valorar el tiempo que ha durado la
recolección.
La dosificación urinaria a veces es más ventajosa que la hemática pues el suero
solo se eleva durante unas 72 horas y en la orina persiste por varios días.
También se eleva en la parotiditis y litiasis parotidea y marcada disminución en su
eliminación en el carcinoma pancreático, insuficiencia renal y pancreatitis crónica.
FOSFATASA ALCALINA

1. Metodo

Metodo espectofotómetro con tampon AMP

2. Fundamento

La fosfatasa alcalina cataliza en medio alcalino la transferencia del grupó fosfato


del 4-nitrofenilfosfato al 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP), liberando 4-nitrofenol.
La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de formación del
4-nitrofenol, medido a 405 nm.

3. Muestra

Suero o plasma
Es estable al menos por 7 días a una temperatura de 2 a 8 °C.

4. Condiciones del paciente

El paciente debe tener un ayuno minimo de 8 horas.


Debe permanecer en reposos 15 minutos antes de la toma de la muestra.
El ejercicio puede alterar el resultado.

5. Condiciones de la muestra

Puede trabajarse con plasma, pero este no debe contener floruros ni oxalatos.
La utilización de EDTA inhibe la reacción.
El mejor anticoagulante es la heparina, los valores obtenidos en plasma y suero
siempre son iguales

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 405 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 37°C
Medición: frente a vacio
7. Tecnica

Reactivo de trabajo 1000 ul


muestra 20 ul

Leer la absorbancia inicial y efectuar lecturas cada minuto por 3 minutos y


promediar los resultados y multiplicar por el factor 2764.

8. Valores de referencia

Adultos: 26 – 117 U/l

9. Interferencias

Los anticoagulantes como el floruro, EDTA, oxalato y citrato interfieren en la


reacción.
Las muestras hemolizadas interfieren por la fosfatasa alcalina eritrocitaria.

10. Correlacion diagnostica

Se origina principalmete en los huesos y en el higado, por lo tnto esta bien


establecida su relación con la formación osea, por eso cuando el crecimiento
disminuye sus niveles bajan a cifras similares al del adulto.
Cuando hay deficiencia de vitamina D, raquitismo, enfermedad de Paget,
hiperparatiroidismo, fracturas en consoliación y en metastasis óseas, sus niveles
aumentan.
También aumentan en la ictericia, en el abseso hepático.
CALCIO

1. Metodo

Determinación cuantitativa para calcio

2. Fundamento

El calcio en medio neutro, forma un complejo de color azul con arsenazo III (ácido
1,8-dihidroxi-3,6-disulfo-2,7-naftalenen-bis (azo)-dibenzenarsónico).
La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de calcio
existente en la muestra.

3. Muestra

Suero o plasma

4. Condiciones del paciente

No requiere ayuno.

5. Condiciones de la muestra

Debe ser separado lo antes posible de los hematíes.


No usar oxalato o EDTA como anticoagulante ya que interfieren en la
determinación de calcio.
Orina efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio.
Antes de la recogida adicionar al contenedor 10 ml de ácido nítrico al 50%
Diluir la orina ½ en agua destilada para el análisis y multiplicar por dos.

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 650 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 37°C
Medición: frente a agua destilada
7. Tecnica

blanco estándar muestra


Estándar --- 10 ul ---
Muestra --- --- 10 ul
reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul

Mezclar e incubar 2 minutos.


Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo.
El color es estable como minimo una hora.

8. Valores de referencia

Suero o plasma:
Adultos 8.5 – 10.5 mg/dl 2.1 –2.6 mmol/l
Niños 10 - 12 mg/dl 2.5 – 3 mmol/l
Recién nacidos 8.0 – 13 mg/dl 2.0 – 3.2 mmol/l

Orina:
Adultos 50 – 300 mg/24h
Niños 80 –160 mg/24h

9. Interferencias

Se recomienda utilizar material de plástico, si se utiliza material de vidrio debera


lavarse con ácido nítrico diluido con agua destilada.
La mayoria de los detergentes destinados al uso del laboratorio contienen agentes
quelantes. Trazas de los mismos, invalidan la determinación.

10. Correlacion diagnostica

El calcio es el mineral más abundante e importante del cuerpo humano, el 99% se


halla en los huesos.
Una disminución de los niveles de albúmina causa una disminución del calcio en
suero. Niveles bajos de calcio pueden atribuirse ahipoparatiroidismo,
pseudohipoparatiroidismo, deficit de vitamina D, mal nutrición o mala absorción.
La mayoria de las causas de hipercalcemia son debidas a enfermedades
oncológicas, intoxicación por vitamina D, aumento de la retención renal,
osteoporosis, sarcosidosis, tirotoxicosis e hiperparatiroidismo.
MAGNESIO

1. Metodo

Metodo colorimétrico – calmagita.

2. Fundamento

El magnesio forma un complejo de color púrpura al reaccionar con la calmagita en


medio alcalino. La intensidad del color es proporcional a la concentración de
magnesio.

3. Muestra

Suero o plasma heparinizado


Orina. Diluida 1:10 con agua destilada acidificada hasta 3.4 con HCL.

4. Condiciones del paciente

No requiere ayuno

5. Condiciones de la muestra

Utilizar material limpio

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 520 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25 °C
Medición: frente a blanco de reactivo.

7. Tecnica

blanco estándar muestra


Estándar --- 10 ul ---
Muestra --- --- 10 ul
reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul
Mezclar e incubar por 5 minutos
La coloración es estable por 30 minutos.

8. Valores de referencia

1.6 – 2. 5 mg/dl

9. Correlacion diagnostica

La hipomagnesemia implica manifestaciones similares a la hipocalcemia.


Niveles bajos son propios de trastornos gastrointestinales con malaabsorción,
perdida anormal de líquidos, tratamiento insulínico del coma diabetico,
hipertiroidismo, tratamientos con diuréticos, glomerulonefritis, pielonefritis entre
otros.
Los niveles altos implican una depresión del sistema nervioso central y la
excitabilidad neuromuscular.
FOSFORO

1. Metodo

Análisis fotométrico UV para la determinación de fosforo.

2. Fundamento

El fosforo reacciona con molibdato en un medio fuertemente ácido para la


formación de un complejo. La absorbancia de este complejo leido en Uvcercano
es directamente proporcional a la concentración de fósforo.

3. Muestra

Suero.

4. Condiciones del paciente

No requiere ayuno.

5. Condiciones de la muestra

No se debe usar plasma. Los anticoagulantes pueden causar resultados


falsamente bajos.

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 340 nm, Hg 334 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 20...25°C
Medición: frente a blanco de reactivo

7. Tecnica

blanco estándar muestra


Blanco ---- ---- ----
Estándar ---- 10 ul ----
muestra ---- ---- 10 ul
reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul
Mezclar e incubar por lo menos 1 minuto a temperatura ambiente.
Leer la absorbancia de la muestra frente a blanco de reactivo antes de 1 hora.

8. Valores de referencia

Adultos 2.5 – 5.0 mg/dl


Niños: 4.0 – 7.0 mg/dl

9. Interferencias

Muestras ictéricas y lipémicas requieren un blanco de muestra.


Sueros lipémicos o hemolízados no deben ser usados.
La contaminación del material de vidrio es la mayor fuente de error en este
análisis. Por lo tanto se recomienda material de plástico.

10. Correlacion diagnostica

Esta regulado por la hormona paratiroidea, la cual controla la excreción urinaria y


su movilización osea por medio de la vitamina D.
Los valores elevados se encuentran en la insuficiencia renal crónica, la
acromegalia, hipoparatiroidismo, fracturas evolutivas y la enfermedad de Addison.
Las valores bajos se encuentran en el raquitismo, osteomalacia, infecciones de
flora cocoide gram negativa en su forma septicémica y en la hipervitaminosis D.
CREATINCINASA (Ck)

Generalidades.
Normalmente los músculos estriados tienen una alta concentración, y muy poca se
encuentra en el miocardio y el cerebro (CK).
En el infarto de miocardio sus unidades se elevan entre 3 y 6 horas, despúes de
iniciado. Tiene su máxima concentración entre las 24 y 48 horas, empezando a
descender despúes de dicho tiempo, lentamente, para retornar a la normalidad
entre 3 y 6 dias despúes.

1. Metodo

Prueba líquida UV activada por NAC creatin kinasa.

2. Fundamento

La cratina quinasa (CK) cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina,
obteniéndose creatina y ATP. La concentración catalítica se determina, empleando
las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa,
apartir de la velocidad de formación del NADPH, medido a 340 nm.
Método estándar modificado de acuerdo con las recomendaciones del cómite
ECCLS.

3. Muestra

Suero o plasma heparinizado o con EDTA.

4. Condiciones del paciente

Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra,


porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en
plasma.
En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido
muscular que puede elevar los valores de la CK.
5. Condiciones de la muestra

La muestra de suero o plasma para Creatina quinasa es estable al menos 7 días


a 2-8 Centigrados.

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: Hg 365 nm, 340 nm o Hg 334 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25, 30 ó 37°C
Medición: contra aire

7. Tecnica

Precalentar el reactivo de trabajo a la temperatura ambiente durante unos


minutos.

25°C ó 30°C 37°C


Muestra 50 ul 25 ul
Reactivo 1000 ul 1000 ul

Mezclar y transferir de inmediato a una cubeta. Insertarla en el portacubetas


termotizado. Poner el cronómetro en marcha.
A los 3 minutos, anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada
minuto durante tres minutos.
Comprobar que las diferencias entre absorbancias sean sensiblemente iguales.
Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio.

Calculos.
Considerando que el coeficiente de absorción molar del NADPH a 340 nm es
6300, se deducen las siguientes fórmulas para calcular la concentración catalítica:

Macro: A/min x 4127 = U/L


Micro: A/min x 3333 = U/L
8. Valores de referencia

Temperatura de Hombres Mujeres


reaccion U/l U/l
25 °C 10-80 10-70
30 °C 15-125 15-110
37 °C 24-195 24-170

9. Interferencias

La hemólisis

10. Correlacion diagnostica

Se encuentra elevada en la distrofia muscular progresiva.


Traumatismos musculares, por aplicación de inyecciones y relajantes musculares,
e intervenciones quirurjicas elevan sus cifras ligeramente.

El valor cliníco está en una elevación manifiesta y su relación con el CK-MB y las
otras enzimas que se alteran en el infarto.
CREATINCINASA FRACCION MB

Generalidades.

Estudios electroforeticos demostraron que tiene dos cadenas M y B . la cadena M


deriva su nombre del músculo esquelético y la B de Brain ( cerebro ), tejido
nervioso. la combinación de las cadenas origina la CK-MB, reconociendose 3
isoenzimas, que toman el nombre según el sitio donde predomina.

Musculo esqueletico CK-MM.


Cerebro CK-BB.
Miocardio CK-MB.

La CK-MB predomina en el miocardio y sus niveles se elevan cuando existe


proceso necrótico del músculo cardíaco.
Tanto la enzima original CK como su isoenzima CK-MB, se elevan desde las 3
hasta las 6 horas post-infarto, las concentraciones máximas son a las 12-24 horas,
recuperándose los valores normales entre las 24 y 72 horas.
La CK-MB aumenta notablemente en el infarto. Cardíaco y lo hace
progresivamente según su extensión y evolución clínica.

Metodo

Prueba Humazym M-test


Método por inmunoinhibición para CK-MB.

Fundamento

La prueba se basa en una determinación enzimática de CK acompañada de un


método de inmunoinhibición.
Un anticuerpo es incoroporado al reactivo el cual se une especificamente a la
subunidad M, inhibiendo la actividad enzimática de esta subunidad B. Debido a
que la concentración de CK-BB en circulación es mínima, la actividad remanentre
multiplicado por el factor 2, representa la actividad de la izoenzima CK-MB.

Muestra

Suero, o plasma heparinizado o con EDTA.


Condiciones del paciente

Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra,


porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en
plasma.
En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido
muscular que puede elevar los valores de la CK-MB

Condiciones de la muestra

La Concentracion de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L. Si


es superior, diluir el suero con NaCl 150 mmol/L.
La CK-MB en suero es estable al menos 7 dias a 2-8 C.

Metodo de determinacion

Longitud de onda: Hg 334 nm, 340 nm, HG 365 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25°C, 30°C ó 37 °C
Medición: contra aire.

Tecnica

muestra 40 ul
Reactivo 1000 ul

Mezcle e incube por 10 minutos a temperatura ambiente lea la abosorbancia y


luego lea exactamente a los 5 minutos. Calcular la diferencia y multiplicar por el
factor 8254.

Valores de referencia

25 °C 30°C 37°C
CK total
hombres >80 U/l >130 U/l >195 U/l
mujeres >70 U/l >110 U/l >170 U/l
CK-MB >10 U/l >16 U/l >25 U/l

La actividad CK-MB esta en un rango entre 6 y 25 % de la actividad de la CK total.


Correlacion diagnostica

Presta una gran utilidad en los casos en que la CK se encuentra notablemente


aumentada por causas ajenas al infarto y la CK-MB esta dentro de los límites
normales.
Esta aumenta notablemente en los infartos cardiácos.
LACTATO DESHIDROGENASA (LDH)

1. Metodo

Prueba líquida para deshidrogenasa láctica.

2. Fundamento

Método modificado basado en las recomendaciones del SCE.

3. Muestra

Suero o plasma con EDTA o heparinizado.

4. Condiciones del paciente

Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas.


Seperar el suero antes de los 30 minutos.
El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos.

5. Condiciones de la muestra

No se recomienda congelar la muestra, por pérdida de la actividad.

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: Hg 334 nm, 340 nm, HG 365 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25°C, 30°C ó 37 °C
Medición: contra aire.

7. Tecnica

25°C ó 30°C 37°C


muestra 20 ul 10 ul
reactivo 1000 ul 1000 ul

Mezclar y leer la absorbancia después de 1 minuto y leer luego a los 1, 2 y 3


minutos hacer un promedio y multiplicar por el factor 16345
8. Valores de referencia

temperatura 25°C 30°C 37°C IFCC


adultos 120-240 U/l 160-320 U/l 225-450U/l
hombres <243
mujeres <244
Niños 12meses Hasta 500 U/l

9. Interferencias

El oxalato y el citrato interfieren en la reacción.

10. Correlacion diagnostica

En el infarto al miocardio sus niveles se aumentan entre las 24 ó 48 horas y tiene


su máxima concentración a los 2 ó 4 días, permaneciendo elevada hasta por 8 ó
14 días.
TROPONINA

1. Metodo

Prueba inmunocromatográfica en un paso para la detección de la troponina I


cardíaca humana en el suero o plasma.

2. Fundamento

La prueba emplea un conjugado de anticuerpo monoclonal anti cTnl y colorante en


fase móvil, anticueropos anti-cTnl (ratón), fijados en la línea de prueba, y
anticuerpos anti-ratón IgG (cabra) en la línea de control.
Como la muestra fluye por la almohadilla absorbente, la troponina humana I se
une al conjugado anti-cTnl-colorante para formar un inmunocomplejo, el cual se
liga a los anticuerpos anti-cTnl en la línea de prueba y produce una línea de
prueba rojo-violeta(T). El exceso de conjugado reacciona en la línea de control
formando una segunda línea rojo-violeta de control C, para demostrar el correcto
funcionamiento.

3. Muestra

Suero o plasma

4. Condiciones del paciente

Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas.


Seperar el suero antes de los 30 minutos.
El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos.

5. Condiciones de la muestra

Las muestras que contienen partículas de turbidez pueden dar resultados


inconsistentes.
Muestras lipémicas o hemolíticas no deben ser procesadas.

6. Tecnica

Lleve el test a temperatura ambiente


Dispense 2 gotas de la muestra enla ventana S.
Evite la formación de búrbujas en la ventana.
Lea los resultados a los 15 minutos.
Las muestras positivas desarrollan una línea de prueba T en los primeros
minutos.
No lea después de 15 minutos para evitar errores.

7. Valores de referencia

Negativo
Positivo

8. Interferencia

La prueba no puede determinar niveles inferiores a 0.5 ng/ml de troponina I.


El resultado negativo no excluye la posibilidad de un infarto al miocardio.
Debe considerarse repetir la prueba después de 12 horas de iniciado el dolor.
HEMOGLOBINA GLICOSILADA

1. Metodo

Método rápido de separación por resina de intercambio iónico.

2. Fundamento

La formación de glicohemoglobina ocurre irreversible y progresivamente en los


eritrocitos a través de los 120 días de vida normal de estas células. Dado que la
concentración de glicohemoglobina en el eritrocito refleja el nivel promedio de
glucosa en la sangre de las 4 a 6 semanas anteriores y es estable por la vida de
los eritrocitos, la medición es proporciona una prueba de gran valor para evaluar el
control a largo plazo de los pacientes diabéticos.

3. Muestra

Sangre total con EDTA.

4. Condiciones del paciente

Ayuno de 8 horas.

5. Condiciones de la muestra

No debe utilizarse muestras hemolizadas para no alterar el resultado.

6. Metodo de determinacion

Longitud de onda: 415 nm ó Hg 405 nm


Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25°C
Medición: frente a agua destilada.
7. Tecnica

Etapa de hemólisis
Reactivo lisante 500 ul Muestra 100 ul
Mezclar e incubar por 5 min 15°C ó 25°C
Determinación de HbA1
Pipetear 100 ul de hemolisado reactivo
Tapar a 1 cm aproximadamente
Mezclar por 5 min
Leer la absorbancia
Determinación de Hb total
Pipetear 20 ul de hemolisado 5 ml de agua destilada
Mezclar cuidadosamente
Leer la absorbancia

HbA1= F X HbA1 muestra


Hb total

8. Valores de referencia

pacientes %HbA1
Metabolismo normal 4.5 – 7.0 %
Diabéticos descontrolados >8.5%

9. Correlacion diagnostica

La dosificación de la hemoglobina glicosilada es importante en un diabético como


la glucosa.
BIBLIOGRAFIA

• Manual de quimica clinica. Colegio mayor de Antioquia

• Insertos de las técnicas.

Elaboró Revisó Aprobó

Carolina Hoyos Velásquez XXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXXX


Cargo: Bacterióloga Cargo: XXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX
FECHA: XXXXXXXXXXXX
Fecha: XXXXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXX
NOMBRE DE QUIEN LEE
FECHA FIRMA CARGO
EL MANUAL

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