Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
CATEDRA DE MICROBIOLOGIE
Importanta cursului
- Dobandirea notiunilor elementare de microbiologie generala
- Studiul microorganismelor. Proprietatile diferitelor grupe de microorganisme si
relatia lor cu organismul uman si mediul lor de viata.
- Aplicarea acestor notiuni in domeniile de baza in Medicina: cercetare medicala,
diagnosticul clasic si molecular al infectiilor.
1
LP 10 Antibiograma
- metoda E test
- metoda dilutiilor (CMI)
Curs 11 Antibiotice LP 11 Schema de diagnostic in bolile infectioase
Evaluare
Conditii pentru a fi acceptat in examen: o prezenta de 70% la cursuri (cel putin 10
cursuri pe perioada unui semestru) si o prezenta de 100% la laboratoare (lucrari practice)
(absentele de la laboratoare pot fi recuperate in cursul aceleasi saptamani sau la sfarsitul
semestrului, recuperarea fiind stabilita de catre asistentul de grupa)
2
Ce trebuie sa faca studentii
- Studentii trebuie sa aiba abilitati practice pentru efectuarea unui numar minim de tehnici
de laborator microbiologic, necesare unui medic de medicina generala in practica
medicala.
Bibliografie
1. Monica Junie. Microbiologie fundamentala, Editura U.M.F.“Iuliu Haţieganu” Cluj-
Napoca, 2004, ISBN: 973-693-052-1, 220 pag
2. Doina Matinca. Antibiotice. Editura Medicala Universitara “I. Hatieganu” Cluj-
Napoca, 2002.
3. George F. Brooks, Janet S. Butel, Stephen A. Morse, Joseph L. Melnick, Ernest Jawetz,
Edward A. Adelberg- Jawetz, Melnik Adelberg’s Medical Microbiology – a24-a editie,
McGraw-Hill Professional Ed., 2004, ISBN 0071412077, 9780071412070
Activitati facultative
Pregatirea si prezentarea unor lucrari pe o tema la alegere, in fata colegilor.
MORFOLOGIE BACTERIANĂ
Forme fundamentale bacteriene
Planul de organizare a celulei bacteriene
-Structuri obligatorii
-Formaţiuni facultative
Importanţa cunoştinţelor de morfologie bacteriană
METABOLISM BACTERIAN
GENETICĂ BACTERIANĂ
EREDITATEA
Structura ADN
3
Replicarea ADN
Repararea leziunilor ADN
Sisteme de reparare constitutive, replicative
Sistemul de modificare şi restricţie
Transcrierea informaţiei genetice
Traducerea informaţiei genetice
Reglarea biosintezei proteinelor
Reglarea funcţionării operonului
Operonul lactozei
Operonul triptofanului
VARIABILITATEA
TRANSPOZIŢIA
MUTAŢIA
Mecanisme moleculare de producere a mutaţiilor
Tipuri de mutaţii
Tipuri de mutante
TRANSFORMAREA
Rolul natural al transformării
Importanţa experimentală a transformării – transformarea artificială
PLASMIDE
CONJUGAREA BACTERIANĂ
Conjugarea prin pili de sex
Conjugarea prin feromoni
BACTERIOFAGI
Ciclul litic
Ciclul lizogen
TRANSDUCŢIA
Transducţia generalizată
Transducţia localizată
Conversia lizogenă
INGINERIA GENETICĂ
ROLUL MATERIALULUL GENETIC EXTRACROMOZOMIAL
ANTIBIOTICE ŞI CHIMIOTERAPICE
Capitole
INTRODUCERE
Tabla de materii (Subcapitole, teme, etc.)
Microbiologie: aspecte generale,
Generalităţi privind microorganismele
Particularităţile microorganismelor
4
Încadrarea microorganismelor
Elemente de diferenţiere între celule de tip eukariot şi prokariot
Taxonomia bacteriană
Clasificarea bacteriilor
Obiective educationale
Microbiologia este o disciplina vasta cu diverse specialitati; are un impact major
asupra medicinei, agriculturii, a stiintelor alimentatiei asupra ecologiei, asupra genticii,
biochimiei si asupra multor altor domenii de activitate.
Domenii fundamentale ale Microbiologiei: citologie microbiana, fiziologie
microbiana, genetica microbiana si biologie moleculara.
Domenii aplicative ale Microbiologiei: microbiologie medicala, microbiologie
alimentara si sanatate publica, microbiologie sanitara (ecologie microbiana), microbiologie
veterinara, microbiologie agricola.
Unele dintre diciplinele medicale cum ar fi: microbiologia, epidemiologia, bolile
infectioase si imunologia se ocupa cu aspecte referitoare la lumea microbiana.
Esential: Aspecte generale in Microbiologie: definitie, grupe de microorganisme
(virusuri, bacterii, alge, fungi si protozoare)
Bacteriologia Generala include morfologia bacteriana, fiziologia bacteriana,
genetica si chimioterapie microbiana. Bacteriologia medicala – se ocupa de cel
mai important grup de bacterii implicate in bolile infectioase umane.
Virusologia: prezinta caracterele generale ale virusurilor si cele mai importante
virusuri implicate in patologia umana.
Parazitologia: se ocupa cu principalii helminti si protozoare implicate in patologia
umana
Micologia: prezinta cei mai importanti fungi implicati in patologia umana (micoze).
Caracterele specifice ale microorganismelor. Lumea microorganismelor. Diferenta
dintre prokariote si eukariote. Taxonomie bacteriana, clasificarea bacteriilor.
Nomenclatura bacteriana. Hazard grup.
5
înrudirea filogenetică. Studiul ARN-ului ribozomal 16S a permis descrierea mai multor
grupe evolutive, a unui arbore filogenetic în lumea bacteriană. S-au conturat 10 grupe
filogenetice. Nomenclatura bacteriilor: Bacteriile au denumiri binominale latinizate:
numele genului si a speciei: exemple. Mycobacterium tuberculosis, Escherichia coli.
Util: Istoria microbiologiei: 1).lumea contagioasă; 2). Fermentaţia; 3). Realizările tehnice
în cunoaşterea microorganismelor. Microscopul (Antony van Leeuvenhock), Izolarea pe
medii de cultură şi cunoaşterea microorganismelor, cunoaşterea agenţilor etiologici ai
diverselor boli infecţioase
Facultativ: Contribuţiile lui Robert Koch şi Louis Pasteur in dezvoltarea Bacteriologiei,
Descoperirea şi introducerea în terapie a antibioticelor. Descoperirea vaccinurilor.
Aplicarea vaccinării a permis cunoaşterea mecanismelor de apărare a organismului uman
faţă de o boală infecţioasă, punîndu-se bazele Imunologiei. Haeckel (1866) definitia
Regnului Protista. Grupe de hazard: criterii, exemple.
Bibliografie
1. Monica Junie. Microbiologie fundamentala, Editura U.M.F.“Iuliu Haţieganu” Cluj-
Napoca, 2004, ISBN: 973-693-052-1, 220 pag
2. Doina Matinca. Antibiotice. Editura Medicala Universitara “I. Hatieganu” Cluj-
Napoca, 2002.
3. George F. Brooks, Janet S. Butel, Stephen A. Morse, Joseph L. Melnick, Ernest Jawetz,
Edward A. Adelberg- Jawetz, Melnik Adelberg’s Medical Microbiology – a24-a editie,
McGraw-Hill Professional Ed., 2004, ISBN 0071412077, 9780071412070
Intrebari
In diviziunea Gracillicutes sunt incadrate urmatoarele bacterii:
a) stafilococul b) bacilul coli c) meningococul d) bacilul difteric
e) bacilul dizenteric
MORFOLOGIE BACTERIANA
6
Tabla de materii (Subcapitole, teme, etc.)
formele bacteriilor,
dimensiunile bacteriilor
dispozitia bacteriilor
microscopia optică
preparate microscopice
coloraţii utilizate pentru evidentierea bacteriilor
Obiective educationale
Principii de identificare a bacteriilor: Sunt importante unele proprietăţi utilizate pentru
identificarea bacteriilor: proprietăţile morfo-tinctoriale, biochimice, antigenice,
sensibilitatea la bacteriofagi.
Forme bacteriene
Esential: Există bacterii cu forme fundamentale şi bacterii cu forme derivate din formele
fundamentale. Forme fundamentale: prin asemănarea bacteriilor cu un corp geometric:
sferă (coci), cilindru (bacili), cilindru helicoidal (forma spiralată)
a. Coci - formă rotundă, formă ovoidă
b. Bacili- bacterii cu formă cilindrică, de bastonaş.
c. Bacili ramificaţi - Bacterii filamentoase: Mycobacterium tuberculosis,
Corynebacterium diphteriae
d. Cocobacili: bacterii din genurile Haemophyllus, Brucella, Bordetella,
e. Forme spiralate:
Bacili încurbaţi: Vibrion holeric, Campylobacter, Helicobacter
Bacterii spiralate
- Spirili:
- Spirochete: Treponema pallidum, Leptospira, Borrellia.
f. Bacterii fără perete celular
- Bacteriile din genul Mycoplasma:
- Formele L (Lister)
Important: dimensiunile bacteriilor
Coci:: 1; 1m /1,5-2 m.
Bacili: 1 lăţime/3 lungime (bacili scurţi); 7-10m lungime (bacili lungi):
Cocobacili: 0,6 - 0,8 /1,5 - 2
Spirochete: 0,2 - 0,3 /5- 10 Treponema pallidum, Leptospira, Borrellia.
Util: Bacilii prezintă unele particularităţi, care permit identificarea lor: prezenta
endosporilor, a incluziilor, dispoziţia lor.
Facultativ: aspectul capetelor, grosimea cilindrului,
Dispoziţia bacteriilor
Esential: Dispoziţia bacteriilor rezultă în urma diviziunii lor, bacteriile putând rămâne
asociate în urma diviziunii fie pe verticală fie pe orizontală.
Important: Pentru o anumită specie, este caracteristică o anumită dispoziţie.
- coci: diplococi capsulaţi (pneumococi); coci în lanţuri (streptococi); coci în grămezi
(stafilococi);
- genul Bacillus (endospori cu diametrul<decât diametrul formei vegetative);
- Clostridium tetani (endospori cu diametrul>decât diametrul formei vegetative, dispuşi
terminal, conferind bacililor aspect de ac gămălie sau băţ de toboşar);
- bacili capsulaţi (ex. Klebsiella);
- bacili cu flagel terminal; Vibrion holeric (bacil încurbat mobil, cu aspect de virgulă);
- Mycobacterium tuberculosis: aspect de majuscule (X, Y, W)
7
- Corynebacterium diphteriae: aspect de litere chinezeşti (bacili încurbaţi, deformaţi la
capete, Gram pozitivi).
Microscopia optică:
Esential: preparate microscopice: preparat nativ, frotiu efectuat din produs patologic şi din
cultură bacteriană pură. Aspecte morfologice tipice de specie se evidenţiază în culturi tinere
de 18-24 ore.
Frotiul - preparat microscopic colorat: evidentiaza forma, dimensiunile, dispoziţia
bacteriilor, afinitatea tinctorială, prezenţa structurilor facultative.
Important: Coloraţii utilizate pentru evidentierea bacteriilor. Marea majoritate a
bacteriilor se evidenţiază prin coloraţia Gram, dar există şi bacterii necolorabile prin
coloratia Gram, care necesită coloraţii speciale, pentru evidenţierea bacteriilor: coloraţia
Fontana, Burri, Giemsa, Machiavello, Giemenez
Nucleoid
Esential: Evidenţiere, Cromozomul bacterian: ADN dublu catenar circular, superhelicoidal,
proteine histono-like, ADN giraza, mezozomi, sediul de acţiune al unor antibiotice:
Quinolone, Nitrofurani, Imidazoli, Rifamicine
8
- moleculă de ADN superhelicoidală, superspiralizată, structură pliată, 50-65 bucle
superspiralizate, G.M.2-3 ×109 Dal,
Important: Bacteriile nu au un nucleu adevărat, nu prezintă nucleoli, nici membrana
nucleară. Deţin o zonă în care se găseşte informaţia genetică: nucleoid, echivalent nuclear
sau genofor.
Facultativ: Material genetic extracromozomial: plasmide, bacteriofagi, elemente
transpozabile
Citoplasma bacteriilor
Esential: nu este compartimentată, nu există reticul endoplasmatic, aparat Golgi,
mitocondrii. Contine cromatofori (pigmentul fotosintetic bacterii cu capacitate
fotosintetizantă), vacuole, mezozomi, plasmide, citoschelet, aspect granular, ribozomi,
poliribozomi (polisomi); Incluzii: granulaţii Babeş Ernst (bacil difteric).
- Ribozomi: 70 S (50S, 30S) - sinteza proteinelor; Ţinta de acţiune pentru antibiotice
(subunitatea 50 S, 30S): Cloramfenicol, Tetracicline, Aminozide, Macrolide: inhibă sinteza
proteinelor.
Important: subunităţi ribozomale: 50S (rARN 23S, 5S; 34 proteine L1-34), 30S (rARN 16
S; 21proteine S1–21), ARN (rARN, mARN, t ARN), 3000 - 4000 molecule diferite: apă,
săruri minerale, ioni, acizi nucleici
Facultativ: Incluzii: material nutritiv de rezervă, polimeri: volutină, polimetafosfaţi (bacil
difteric), glicogen (enterobacterii), amidon (bacteriile din genul Clostridium), polimeri ai
acidului hidroxi butiric (la bacteriile din genul Bacillus)
Membrana citoplasmatică:
Esential: Evidenţiere, Compoziţia chimică; Structură: mezozomi, oxizomi. Ţinta de acţiune
pentru detergenţi şi antibiotice: Polimixine. Funcţiile membranei citoplasmatice,
Important: modelul structural Danielli Dawson, modelul mozaicului (Singer), particularitatile
membranei citoplasmatice la Mycoplasma, oxizomi, mezozomi
Util: Funcţiile membranei citoplasmatice, corelate cu: mobilitatea bacteriilor (receptori
chemotactici, motor ciliar); metabolismul bacterian: enzime hidrolazice, nutrienţi,
transport, energie, biosinteze, transformare bacteriană (import ADN, bacterii receptoare).
Facultativ: Forme L, Protoplaşti, sferoplaşti,
9
Important: Structura peptidoglicanului: (glican şi peptid), heteropolimer periodic,
monomeri repetitivi (subunităţi de bază): (dizaharid + peptid)n,
Util: Dizaharid: acid N acetilmuramic şi N acetilglucozamina.
- Pentapeptid: L Alanină, acid D Glutamic, Diaminoacid, D-Alanină, D-Alanină.
- Legătura interpeptidică: între a.a din poziţia 3 de pe o unitate şi D Alanina din
poziţia 4 de pe altă subunitate; la bacteriile Gram negative: reţea bidimensională, la bacterii
Gram pozitive: reţea tridimensională.
Facultativ: a.a din poziţia 3 la bacteriile Gram negative: acid diaminopimelic, reţea
bidimensională, la bacterii Gram pozitive: L-lizina, hidroxilizina, punte pentapeptidica,
reţea tridimensională.
Biosinteza peptidoglicanului
Esential: etape de biosinteză: în citoplasma bacteriilor, se sintetizează acidul N acetil
muramic. Se adiţionează primii 3 aminoacizi şi ulterior dipeptidul terminal DAla -DAla,
rezultând MurNAc - pentapeptid, care este preluată de un transportor lipidic, bactoprenol.
Urmează ataşarea moleculei de N acetil glucozamină. Rezultă subunitatea de bază, care
este transportată de Bactoprenol prin membrana citoplasmatică, la exteriorul bacteriilor,
unde se ataşează de peptidoglicanul existent. Ţinta de acţiune pentru unele antibiotice,
enzime (lizozim) şi dezinfectante antiseptice.
Important: Se produc breşe în peretele celular, unde pătrund noi subunităţi, având loc
legarea subunităţilor noi sintetizate de peptidoglicanul existent, prin: legături glicozidice
(transglicozilare); legături interpeptidice (transpeptidare), acompaniată de eliminarea D
Alaninei din poziţia 5 (carboxipeptidare). Transpeptidarea, transglicozilarea şi
carboxipeptidarea sunt funcţiile enzimatice normale ale PBP-urilor (penicilline binding
proteins; PLP - proteine de legare a penicilinelor).
Util: Enzimele muralitice: breşe în peretele celular, noi subunităţi, creşterea şi diviziunea
bacteriilor.
Facultativ: Peptidoglican: primer pentru propria sinteză (primer de polimerizare).
10
Util: proteine majore, minore. Outer membrane proteins – OMP, anchor proteins (AP).
Spaţiul periplasmic: enzime muralitice, hidrolazice, lactamaze, Enzimele muralitice:
breşe în peretele celular, noi subunităţi de peptidoglican creşterea şi diviziunea bacteriilor,
autoliza bacteriilor bătrâne sau moarte. Enzimele hidrolitice (hidrolazele): scindează
macromoleculele (polimeri organici) în nutrienţi. β Lactamazele: enzime de scindare a β
Lactaminelor.
Facultativ: Compoziţie chimică: peptidoglican, glucide, lipide, proteine. Stratul
lipoproteic: stabilitate, leaga peptidoglicanul de membrana externă. Componenta
polizaharidică internă (core, sâmbure polizaharidic), subunităţi repetitive (structura).
Lanţurile oligozaharidice laterale: împiedică pătrunderea substanţelor nocive pantru
bacterii (antibiotice, detergenţi, lizozim). Receptori pentru bacteriofagi, pili de sex.
Formaţiuni facultative:
Esential: sunt prezente la unele specii şi absente la alte specii, nu sunt esenţiale pentru
creşterea bacteriilor; conferă bacteriilor proprietăţi importante în natură (aderenţa,
rezistenţă la fagocitoză) şi în relaţia cu organismul uman (factori de patogenitate).
Tabla de materii (Subcapitole, teme, etc.):
1. Capsulă
2. Glicocalix.
3. Pili comuni (fimbrii)
4. Pili de sex
5. Spori,
6. Cili (Flageli)
11
Glicocalix, Mutan
Esential: definitie, aspect, compoziţia chimică, evidenţiere, rol, bacterii producatoare,
Important: aderarea bacteriilor pe suprafeţe, infecţii produse.
Mutan: glicocalix produs de Streptococus mutans, rol. Consecinte, factori favorizanti,
Util: sintetiza si compozitie chimica
Facultativ: coloraţie,
Pilii de sex
Esential: aspect, determinism genetic, Rol.
Important: transfer de material genetic, conjugarea bacteriană
Util: proces primitiv de sexualitate la bacterii,
Facultativ: dimensiuni, număr, receptor pentru bacteriofagi
Sporii
Esential: Definitie: forme de rezistenţă ale bacteriilor la factori fizici şi chimici. Bacterii
cu capacitate de sporulare. Endospori, spori liberi. Evidenţierea sporilor Identificarea
bacteriilor: coloraţii, dimensiunile şi dispoziţia endosporilor. Ultrastructura sporului,
corelata cu rezistenţa sporilor. Factori care explica termorezistenţa sporilor. Rolul sporilor.
Metode de sterilizare şi dezinfecţie capabile să distrugă sporii.
Important: condiţii, forma si timpul de supravieţuire a sporilor în natură.
Util: Sporularea (Sporogeneza): determinism genetic, etape.
Facultativ: Germinarea: etape (activarea, iniţierea, efectori germinării)
Cili (Flageli)
Esential: Definitie, organite de locomoţie ale bacteriilor. Evidenţierea cililor. Natură
cililor. Rolul cililor. Mobilitatea bacteriană. Antigenul “H”, Determinismul genetic al
flagelinei. Bacterii mobile si modalitati de identificare a bacteriilor mobile.
Important: forma si dimensiuni, Trichie (numărul şi dispoziţia flagelilor).
Util: structura cililor,
Facultativ: Tipuri de aparat locomotor la formele spiralate
Bibliografie
1. Monica Junie. Microbiologie fundamentala, Editura U.M.F.“Iuliu Haţieganu” Cluj-
Napoca, 2004, ISBN: 973-693-052-1, 220 pag
2. Doina Matinca. Antibiotice. Editura Medicala Universitara “I. Hatieganu” Cluj-
Napoca, 2002.
12
3. George F. Brooks, Janet S. Butel, Stephen A. Morse, Joseph L. Melnick, Ernest Jawetz,
Edward A. Adelberg- Jawetz, Melnik Adelberg’s Medical Microbiology – a24-a editie,
McGraw-Hill Professional Ed., 2004, ISBN 0071412077, 9780071412070
Intrebari
1. A. Peretele celular la bacteriile Gram pozitive
B. Peretele celular la bacteriile Gram negative; se caracterizeaza prin:
1) contine peptidoglican; 2) contine acizi teichoici; 3) are la suprafata stratul
lipopolizaharidic cu rol de endotoxina; 4) este tinta de actiune pentru
antibiotice; 5) este sediul antigenului bacterian “O”; 6) este sediul
antigenului “H”; 7) contine o cantitate mare de lipide si proteine; 8)
membrana externa contine proteine numite porine; 9) inveleste membrana
citoplasmatica; 10) este mai subtire; 11) este mai gros
2 A. Capsula bacteriana
C. Pilii comuni
D. Cilii (flagelii)
au urmatoarele proprietati:
1) au rol in patogenitate inhiband fagocitoza; 2) au structura proteica; 3)
pasrticipa in fenomenul de conjugare bacteriana; 4) au rol in mobilitate; 5)
intervin in aderarea de epitelii; 6) au rol de antigen bacterian “H”; 7) este o
formatiune structurala obligatorie; 8) structura este de obicei polizaharidica;
1 2 3 4 5 6 7 8
A_____________________________________________________________
B_____________________________________________________________
C_____________________________________________________________
METABOLISM BACTERIAN
Obiective educationale
Metabolismul bacterian este schimbul de substanţe, energie şi informaţie dintre bacterii
şi mediul lor de viaţă. Constituie ansamblul reacţiilor chimice prin care substanţele din
mediul extern sunt transformate în substanţe necesare bacteriilor, având la bază căi
metabolice, efectuate pe baza unui program genetic.
13
metabolism bacterian. În evoluţie, bacteriile s-au adaptat la condiţiile oferite de mediu şi şi-
au selectat căile metabolice necesare pentru utilizarea diverselor substanţe nutritive
existente în mediul lor de viaţă, supravieţuirea, creşterea şi multiplicarea lor, în diferite
habitate. Procesele metabolice se desfăşoară într-o singură celulă care vine în contact cu
mediul extern în mod direct. Metabolismul bacterian este activ, necompartimentat.
Bacteriile dispun de o reţea complexă şi completă de căi metabolice (diversitate
metabolică), de mecanisme de adaptare metabolică rapidă (flexibilitate metabolică),
mecanisme foarte fine şi precise de reglare ale metabolimului bacterian.
Important: Bacteriile pot utiliza o diversitate de substanţe nutritive şi pot sintetiza o
diversitate de polimeri
Util: schimbul cu mediul extern bacteriilor este mult mai intens decât la organismele
superioare, multiplicare rapidă a bacteriilor. Diversitatea metabolismului bacterian este
astfel influenţată de substanţele nutritive (nutrienţi), şi de condiţiile fizico-chimice, întâlnite
de bacterii în habitatul lor natural.
Facultativ: condiţiile întâlnite în mediul lor de viaţă, pot trece de la un set de reacţii
metabolice la alt set de reacţii metabolice, condiţii de stres nutritiv
14
explică formarea microbiocenozelor şi selectarea bacteriilor în habitate
cunoaşterea factorilor fizico-chimici este importantă pentru cultivarea bacteriilor
în condiţii de laborator, asemănătoare cu condiţiile oferite de organismul uman.
Util: În momentul în care sunt depăşite limitele permisive, bacteriile trăiesc în condiţii de
stres.
Facultativ: sisteme de adaptare a bacteriilor la condiţii de stres.
Căi catabolice
Esential: Substanţele nutritive (nutrienţi) utilizate de bacterii pot fi: glucoza, lactoza, alte
zaharuri, alte substrate. Sunt degradate prin căi catabolice (reacţii de clasă I): glicoliză
anaerobă, ciclul Krebs (ciclul acizilor tricarboxilici), dehidrogenări, se eliberează e- şi H+.
Important: transfer de protoni H+şi e-, de la donator la acceptor.
Util: căi alternative: calea pentozo - fosfat, calea Entner Doudoroff, ciclul Calvin.
Facultativ: Lactoza este scindată în glucoză şi galactoză.
15
Ce trebuie sa faca studentii:
Sa observe: Identificarea bacteriilor pe baza proprietăţilor metabolice
Sa faca personal, individual sau in echipa: unele reacţii biochimice, teste
metabolice utilizate pentru identificarea bacteriilor
Reacţiile biosintetice:
Esential: reacţii anabolice: sinteza monomerilor;
sinteza acidului folic: cale metabolică (enzime), rolul acidului folic la bacterii.
Important: Biosinteza polimerilor (principiu): sinteza homopolimerilor, heteroplimerilor
aperiodici; Homoplimeri bacterieni (exemple) Heteropolimeri bacterieni periodici
(exemple), aperiodici (exemple),
Util: subunităţi, enzime de polimerizare, primer de polimerizare, matrice de polimerizare
Facultativ: Incluzii bacteriene, Capsula, Glicocalix ac.teichoici peptidoglican, LPS
bacteriilor Gram negative (core, sâmbure polizaharidic Lipidul A Lanţurile
oligozaharidice laterale), Acizi nucleici şi proteine
Bibliografie
1. Monica Junie. Microbiologie fundamentala, Editura U.M.F.“Iuliu Haţieganu” Cluj-
Napoca, 2004, ISBN: 973-693-052-1, 220 pag
2. Doina Matinca. Antibiotice. Editura Medicala Universitara “I. Hatieganu” Cluj-
Napoca, 2002.
3. George F. Brooks, Janet S. Butel, Stephen A. Morse, Joseph L. Melnick, Ernest Jawetz,
Edward A. Adelberg- Jawetz, Melnik Adelberg’s Medical Microbiology – a24-a editie,
McGraw-Hill Professional Ed., 2004, ISBN 0071412077, 9780071412070
Intrebari:
16
obligator anaerobe g) este utilizata de bacterii aerobe-facultativ anaerobe h)
enumerati tipuri de fermentatie intalnite la bacterii si precizati caracterele lor.
GENETICĂ BACTERIANĂ
Obiective educationale
Genetica este stiinţa, care se ocupă de studiul eredităţii şi a variabilităţii
caracterelor, de-a lungul generaţiilor. Genetica modernă studiază fenomenele genetice la
nivel molecular. Bacteriile constituie un model de studiu şi de cercetare genetică.
VARIABILITATEA
Recombinarea genetică
Transpoziţia
Mutaţia
Transformarea
Plasmide
Conjugarea bacteriană
Bacteriofagi
Transducţia
Ingineria genetică
Rolul materialulul genetic extracromozomial
17
EREDITATEA: Metabolismul ADN (replicarea, repararea leziunilor ADN, restricţie
şi modificare), transcrierea şi traducerea informaţiei genetice)
Esential: Ereditatea: definiţie. Stabilitatea caracterelor unei specii. ADN: Structura, forme,
cod genetic, gene, segmente/secvenţe (funcţii), Repliconi bacterieni: definitie, exemple.
Replicarea ADN bacterian: etape, matriţă, direcţie, modele, timp, funcţii, proces biologic.
Replicarea cromozomului bacterian în diviziunea bacteriană, în transfer de material
genetic; Genotip/Fenotip.
Important: Avantajele utilizarii bacteriilor în studiile de genetică. dezvoltarea geneticii
moderne. ADN giraza (topoizomeraza 2), ADN polimeraza 3: structura, funcţii.
Util: replicarea bidirecţională (modelul θ), unidirecţională (modelul inelului în rotaţie-σ);
gene (structurale, reglatoare), secvenţe (semnal, repetitive, palindromice, de origine a
replicării, „ori”, a transcrierii, structuri cruciforme), replisom, primasom, catena leader,
catena întirziată. Plasmide, replicarea conjugativă,
Facultativ: Utilizarea bacteriilor în studiile de genetică: E. coli (Tatum şi Lederberg din
1930 -1940); Avery (pneumococ): ADN - depozitarul informaţiei genetice (1944). Watson
şi Crick: structura ADN şi modelul replicării semiconservative (1953). Tehnici noi de
genetică, biologie moleculare: clonări de gene, obţinerea de gene artificiale, tehnologia
ADN-ului recombinant, inginerie genetică (după 1970).
18
Important: gene structurale, secvenţe semnal, operator (O), promoter (P) şi gene
reglatoare: dispoziţie, rol
Util: promoteri cu secvenţe asemănătoare (exemple)
Facultativ: rata maximă de funcţionare a ARN polimerazei.
VARIABILITATEA: modificarea unui sau a mai multor caractere fenotipice ale unui
microorganism. Constã în apariţia de noi caractere, în generaţii succesive care deosebesc
descendenţii de parental sau descendenţii între ei
Esential: Variabilitatea caracterelor bacteriene: fenotipică, genotipică: definiţie, proprietăţi,
consecinţe asupra bacteriilor (tulpină, populaţie bacteriană). Mecanismele moleculare ale
variabilităţii: Mutaţia, Transfer de material genetic de la o bacterie donatoare la o bacterie
receptoare
Important: Transpoziţie, Transformare, Transducţia, Conjugarea bacteriană
Util: apariţia rezistenţei la mai multe antibiotice la o bacterie anterior sensibilă. caracterul
spontan al mutaţiilor la bacterii: teste
Facultativ: Testul însămânţării replicative (testul Lederberg): apariţia în cadrul unei tulpini
sensibile la Streptomicină a unei bacterii rezistentă la Streptomicină. Testul fluctuaţiei
(testul Luria Delbrűck): apariţia proprietăţii de rezistenţă la Bacteriofag, în cadrul unei
populaţii bacteriene sensibile.
Recombinare genetică.
Esential: Recombinarea genetică: definitie. Tipurile de recombinare
Important: Fenomene în care intervine.
Util: Reparare leziunilor ADN; integrarea şi excizia unor fragmente sau molecule de ADN;
transpoziţia elementelor mobile;
Facultativ: modificarea proprietăţilor bacteriene: a) variaţia de fază a antigenului H, b)
modificarea structurii de suprafaţă a bacteriilor (ex. gonococi, pneumococi).
Recombinarea omoloagă
Esential: definiţie, proprietăţi. Mecanismul molecular: etape. Fenomene în care intervine.
Consecinţe asupra bacteriilor. Modificarea structurii pililor la gonococ.
19
Important: diviziunea bacteriilor, reparare recombinatoriea a leziunilor ADN, “sistemul
S.O.S.”, transformarea.
Util: proteină „rec A”: mecanism de actiune.
Facultativ: Se poate produce între catene diferite ale aceleiaşi molecule de ADN sau între
molecule diferite de ADN: între molecule circulare sau între o moleculă circulară şi
fragment de ADN pătruns în celulă. recombinarea între o genă activă şi o genă incompletă,
cu apariţia unei noi gene active, ex. gonocul genă activă pentru pili).
Mutaţia
Esential: definiţie, material genetic în care intervine. Mecanismele moleculare de
producere a mutaţiilor. Tipuri de mutaţii. Consecinţe asupra bacteriilor. Tipuri de mutante.
Soarta mutantelor în natură, în organismul uman, în mediul spitalicesc.
Important: Rata mutaţiei, Frecvenţa mutaţiei. Consecintele mutaţiilor (extinse,
punctiforme, tăcute, sens schimbat, non sens, înainte, înapoi, supresoare, condiţionat letale
si a revers mutaţiei). Mutantele temperaturo-sensibile: aplicabilitate practica.
Mutante/clone, Mutante de rezistenţă la antibiotice (AB), supravieţuirea în mediul
spitalicesc.
Util: Caracterul spontan al mutaţiei (testul însămânţării replicative (testul Lederberg), testul
fluctuaţiei (testul Luria Delbrűck), Probabilitatea apariţiei concomitente a 2 mutaţii,
mutaţiile induse, sisteme de reparare (sistemul SOS, endonucleaze),
Facultativ: tautomeria bazelor azotate (forma ceto şi aminică, forma cetonică, aminică
forma enolică, iminică a bazelor azotate), codoni cu acelaşi sens, alţi codoni, codoni stop,
celulă bacteriană mutantă sau mutant, clone mutante, mutaţia si operonul lactozei.
20
Conjugarea bacteriană
Transducţia
Transformarea
Esential: definiţie, condiţii, etape, consecinţe asupra bacteriilor. Fragmentul de ADN
transferat: proprietăţi. Bacterii la care a fost evidenţiat fenomenul de transformare. Rolul
natural al transformării. Importanţa experimentală a transformării (transformarea artificială)
Important: recombinare omoloagă, proteina rec. A. Bacteriile receptoare. Starea de
competenţă. Modificarea structurii antigenice a pililor gonococilor şi evoluţia cronică a
uretritei gonococice. Transformarea artificială conditii, rol, tehnologia ADN-ului
recombinant şi ingineria genetică
Util: Frecvenţa recombinării, Transfecţia. Insulină, hormon de creştere, antigen HBs.
Facultativ: Experiment Griffith (1928), pentru elucidarea virulenţei pneumococilor:
pneumococi vii capsulaţi de tip S3, R2 vii, necapsulaţi, şi pneumococi S3 omorâţi prin
căldură.. Avery: elementul transformant este ADN-ul (1944). Fragmentul de ADN codifică
capsula pneumococică (recombinarea omoloagă dintre genele care codifică capsula).
Plasmide
Obiective educationale:
Plasmidele sunt minicromozomi sau cromozomi facultativi, cele mai simple
microorganisme, a căror mediu de viaţă sunt bacteriile. Se pot integra sau nu în
cromozomul bacterian sau în alte plasmide. Pot deţine gene pentru proprietăţi bacteriene.
Plasmidele circulă între tulpinile aceleaşi specii bacteriene, între specii şi chiar între genuri
diferite (de la bacterii Gram pozitive la bacterii Gram negative).
Esential: definiţie, tipuri (conjugante, episomale, criptice). Plasmide F, R,
bacteriocinogene „col”: definiţie, proprietăţi, specificitate, fenomene în care intervin,
consecinţe asupra bacteriilor (proprietăţi fenotipice conferite bacteriilor).
Important: Structură (gene), Replicarea plasmidelor în cursul diviziunii bacteriane
(autoreplicare). Bacteriocinele (colicine): definitie, bacterii producătoare, denumire,
mecanism de acţiune, spectru de acţiune, efect, importanta. Mecanismul de dobândire a
rezistenţei faţă de antibiotice la bacteriile Gram negative (rezistenţa în bloc faţă de
antibiotice, bacteriile multiplu rezistente la antibiotice, infecţii intraspitaliceşti).
Util: grupe de incompatibilitate, enzimele de modificare şi restricţie, integraze şi
excizionaze. Plasmide neconjugante.
Facultativ: cointegrarea a 2 molecule de plasmide. Transformarea tumorală şi producerea
de tumori la plante: Agrobacterium tumefaciens, o bacterie care deţine o plasmidă (gene de
inducere a transformării tumorale). Transferul plasmidelor la descendenţi.
Conjugarea bacteriană
Obiective educationale:
Transferul de material genetic la bacteriile Gram negative (prin pili de sex), la bacteriile
Gram pozitive (prin feromoni), prin transpozoni.
Esential: I. Conjugarea prin pili de sex: definiţie, fenomene în care intervine.
1) Transfer de materal genetic plasmidic: 2) Transfer de material genetic cromozomial. 3)
Transfer de material genetic plasmidic şi cromozomial: Sexducţia: definiţie, consecinţe
asupra bacteriilor. II. Conjugarea la bacteriile Gram (+):definiţie, etape, mecanism,
consecinţe asupra bacteriilor.
Important: Conjugarea bacteriana: etape; efect; conjugarea R+-R-, col+-col-, F+-F-:
consecinţe asupra bacteriilor, în mediul spitalicesc. Conjugarea Hfr-F-: definiţie, etape.
Particularitaţi ale bacteriilor, F+, Hfr, F-. Recombinare genetică cu frecvenţă crescută.
21
Localizarea (integrarea) plasmidei F în cromozomul bacteriei, importanţa pentru transfer de
gene în bacteria receptoare şi pentru proprietăţile dobindite de bacterii. Conjugarea
întreruptă: etape şi importanţă. Excizia plasmidei F din cromozomul bacterian, plasmida F’
plasmide F like, plasmidă hibridă: proprietăţi. Harta genetică a cromozomului bacterian la
Escherichia coli. Importanţa cunoaşterii hărţilor genetice,
Util: Replicarea de transfer a cromozomului bacterian: modelul, durată, consecinţe,
Recombinarea omoloagă. Bacterii donatoare (D) sau masculine, bacterii feminine sau
receptoare (R): proprietăţi, particularitati la bacterii Gram pozitive si negative; plasmidă:
replicarea plasmidei; rolul pililor de sex. Transferul genelor cromozomiale şi a proprietăţilor
codificate de acestea de la bacteria D la bacteria R: exemple. Feromoni de sex: bacterii
producatoare, natură, efect asupra bacteriilor donatoare. Proteine de ataşare (de aderare):
bacterii producatoare.
Facultativ: perechi de bacterii: Bacterie F+- Bacterie F-; Bacterie Hrf+-Bacterie F-, Bacterie
R+- Bacterie R-, Bacterie col+- Bacterie col-. Frecventa bacterilor Hfr şi F+ într-o populaţie
bacteriană. Clonări de gene întocmirea hărţilor genetice (în laborator),
Bacteriofagi - Transducţia
Esential: definiţie, tipuri, proprietăţi, consecinţe asupra bacteriilor. Forma si structură
bacteriofagilor, simetrie. Infectarea bacteriei: etape. Bacteriofagi litici: structura genomului.
Ciclul litic: etape. Fenomene genetice în care intervine: Transducţia: definiţie, tipuri,
proprietăţi (generalizată; localizată-specifică). Bacteriofag lizogen (temperat): structura
genomului. Ciclul lizogen. Conversia lizogenă: definitie, proprietăţi fenotipice bacteriene,
exemple. Factorii de patogenitate (toxine bacteriene) codificaţi de bacteriofagii temperaţi
Important: Transducţia generalizată: definitie, etape, efecte (consecinţe) asupra
bacteriilor; Transducţia localizată.
Util: Bacteriofagul al E. coli: proprietati, integrarea în cromozomul bacterian,
recombinare situs specifică. Excizia profagului din cromozomul bacterian: conditii,
consecinte. Bacteriofag defectiv, coinfectant: definitie, proprietati, frecventa, posibilitati
evolutive;
Facultativ: Transducţia completă, Transducţia abortivă: definitie, proprietate fenotipică
conferita bacteriei receptoare, evolutie in diviziunile bacteriene succesive
Ingineria genetică
22
Esential: tehnologia ADN-ului recombinant şi ingineria genetică, biotehnologia definiţie,
producere, aplicatii practice, exemple.
Important: Endonucleozele de restricţie, gene clonate: exemple, vector, recombinare situs
specifică, transcriere,
Util: produşi utili omenirii in prezent si in viitor:
Facultativ: arme biologice, măsuri de protecţie.
Rolul materialulul genetic extracromozomial
Esential: Materialul genetic extracromozomial reprezintă un element de variabilitate a
caracterelor bacteriene, conferind bacteriilor proprietăţi noi, uneori importante, cum ar fi
patogenitatea bacteriană, modificarea structurii antigenice, dobândirea unor proprietăţi
metabolice, rezistenţa la antibiotice şi la alţi factori antibacterieni.
Important: Toxine bacteriene codificate de bacteriofagii temperaţi: exemple. Toxine
bacteriene codificate de plasmide: exemple. Proprietăţi conferite bacteriilor prin plasmide:
exemple. Proprietăţi conferite bacteriilor prin bacteriofagi: exemple.
Util: Aderare bacteriană, Invazivitate bacteriană. Rezistenţa bacteriilor la antibiotice
Rezistenţa la mecanismele de apărare ale organismului uman (rezistenţa la efectul
bactericid al serului)
Facultativ: Proprietăţi metabolice conferite bacteriilor: exemple. Rezistenţa bacteriilor la
acţiunea unor factori de mediu, la antiseptice, detergenţi, radiaţii, bacteriofagi, colicine.
Modificări antigenice bacteriene datorate bacteriofagiilor .
Bibliografie
1. Monica Junie. Microbiologie fundamentala, Editura U.M.F.“Iuliu Haţieganu” Cluj-
Napoca, 2004, ISBN: 973-693-052-1, 220 pag
2. Doina Matinca. Antibiotice. Editura Medicala Universitara “I. Hatieganu” Cluj-
Napoca, 2002.
3. George F. Brooks, Janet S. Butel, Stephen A. Morse, Joseph L. Melnick, Ernest Jawetz,
Edward A. Adelberg- Jawetz, Melnik Adelberg’s Medical Microbiology – a24-a editie,
McGraw-Hill Professional Ed., 2004, ISBN 0071412077, 9780071412070
Intrebări
1. Repliconii bacterieni sunt:
a) bacteriofagul
b) cromozomul
c) plasmidele de virulenta
d) elementele genetice mobile
e) plasmidele R
2. Transductia:
a) se realizeaza prin intermediul pililor comuni
b) este un fenomen de transfer de material genetic
c) se realizeaza prin intermediul pililor sexuali
d) se realizeaza prin ADN liber
e) implica transfer de ADN prin intermediul bacteriofagului
ANTIBIOTICE ŞI CHIMIOTERAPICE
23
Tabla de materii (Subcapitole, teme, etc.)
Proprietăţile generale ale antibioticelor
Rezistenţa la antibiotice
Antibiotice care inhiba sinteza peretelui celular
Antibiotice cu acţiune asupra membranei citoplasmatice
Antibiotice care inhibă sinteza proteică
Antibiotice cu acţiune la nivelul aparatului genetic
Antibiotice care inhibă sinteza acidului folic
Proprietaţi generale
Esential: Antibiotice/Chimioterapice: definiţie, Dezinfectante/Antiseptice: definiţie. L
Antibioticele, Defensine: definiţie, celule producatoare (exemple), structura, efect
antibacterian, mecanism de acţiune, aplicabilitate practica, Familii de antibiotice: definiţie,
proprietăţi, enumerare. Antibiotice neîncadrate în familii. Structurile celulare bacteriene la
nivelul carora acţionează antibioticele: Structuri ţintă: exemple. Ţinta de acţiune a unui
antibiotic, la nivel molecular. Mecanism de actiune al AB: condiţii necesare pentru ca un
antibiotic sa fie activ asupra unei bacterii (în bacterie să existe ţinta de acţiune bacteria să
fie permeabilă şi să dispună de un transportor pentru antibioticul respectiv, antibioticul să
pătrundă în bacterie, să atingă ţinta de acţiune, să se menţină suficient timp în contact cu
ţinta de acţiune, să realizeze în bacterie o concentraţie minimă activă, care să inactiveze
reversibil sau ireversibil ţinta de acţiune).
Important: Proprietăţile generale ale antibioticelor: Spectrul de acţiune al AB (spectru
îngust, restrâns, larg, ultralarg). definiţie, exemple. Efectul antibacterian (AB
bacteriostatice, bactericide)
Util: Farmacocinetica (biodisponibilitatea) antibioticului,
Facultativ: Istoric: Antibioticoterapie Fleming, mucegai din genul Penicillium stafilococi,
1929 Chain şi Florey au purificat şi industralizat Penicilina, introdusă în 1940 în terapia
infecţiilor. Chimioterapie, Paul Erlich, efectul coloranţilor asupra bacteriilor, toxicitatea
selectivă. Paul Erlich, Salvarsan, efect anti Treponema pallidum, terapia sifilisului,
Domagk, care a introdus sulfamida roşie - Prontozil (1935) în terapia infecţiilor
streptococice.
24
dobândire a rezistenţei extracromozomiale: producerea de enzime de inactivare a
antibioticelor; modificarea structurii ţintă prin enzime, substituirea ţintei de acţiune - cu
afinitate scăzută sau fără afinitate pentru antibiotice, expulzarea antibioticului din bacterie
prin proteina de efflux).
Util: Caracterul spontan al mutaţiei: conjugarea R+ - R: Plasmidele R: (neconjugante,
conjugante), transmitere la alte bacterii (transducţie, cointegrarea în plasmide conjugante,
conjugare (la bacteriile Gram negative, Gram pozitive), proprietati conferite bacteriilor
(rezistenţa în bloc faţă de antibiotice bacterii multiplu rezistente la antibiotice se selectează
în special în mediul spitalicesc infecţii intraspitaliceşti)
Facultativ: testul însămânţării replicative (testul Lederberg),
25
Util: Aminoglicozide/aminociclitoli (Aminozide): spectru de acţiune,. Tetracicline: spectru
de acţiune. Fenicoli: spectru de acţiune. Grupul MLS: spectru de acţiune. Ketolide: spectru
de acţiune. Oxazolidinone: spectru de acţiune. Acid fusidic: spectru de acţiune.
Facultativ: Aminoglicozide/aminociclitoli (Aminozide): efect antibacterian. Tetracicline:
efect antibacterian. Fenicoli: efect antibacterian. Grupul MLS: efect antibacterian.
Ketolide: efect antibacterian. Oxazolidinone: efect antibacterian, Acid fusidic: efect
antibacterian.
Antibiotice cu acţiune la nivelul aparatului genetic
Esential: Rifamicine: ţintă de acţiune, mecanism de acţiune, rezistenţa. Quinolone (Acid
nalidixic, Fluoroquinolone): ţintă de acţiune, mecanism de acţiune, rezistenţa.
Novobiocina: ţintă de acţiune, mecanism de acţiune. Imidazoli: ţintă de acţiune, mecanism
de acţiune, rezistenţa. Nitrofurani: ţintă de acţiune, mecanism de acţiune, rezistenţa.
Important: Fluoroquinolone: reprezentanţi. Rifamicine: reprezentanţi. Imidazoli:
reprezentanţi. Nitrofurani: reprezentanţi.
Util: Quinolone (Acid nalidixic, Fluoroquinolone): spectru de acţiune. Rifamicine: spectru
de acţiune. Novobiocina: spectru de acţiune. Imidazoli: spectru de acţiune. Nitrofurani:
spectru de acţiune.
Facultativ: Quinolone (Acid nalidixic, Fluoroquinolone): efect antibacterian. Rifamicine:
reprezentanţi, Novobiocina, efect antibacterian. Imidazoli: efect antibacterian.
Tuberculostatice
Esential: Antibiotice clasice active asupra bacilului tuberculos, Tuberculostatice:
mecanism de acţiune, rezistenţa.
Important: Tuberculostatice: reprezentanţi..
Util: Tuberculostatice: spectru de acţiune, efect antibacterian
Facultativ: Asocieri medicamentoase
26
Bibliografie
1. Monica Junie. Microbiologie fundamentala, Editura U.M.F.“Iuliu Haţieganu” Cluj-
Napoca, 2004, ISBN: 973-693-052-1, 220 pag
2. Doina Matinca. Antibiotice. Editura Medicala Universitara “I. Hatieganu” Cluj-
Napoca, 2002.
3. George F. Brooks, Janet S. Butel, Stephen A. Morse, Joseph L. Melnick, Ernest Jawetz,
Edward A. Adelberg- Jawetz, Melnik Adelberg’s Medical Microbiology – a24-a editie,
McGraw-Hill Professional Ed., 2004, ISBN 0071412077, 9780071412070
Intrebari
1.Care dintre antibioticele notate a-j, actioneaza prin mecanismele notate de la 1-10:
a) cefalosporinele f) tetraciclinele
b) quinolonele g) aminoglicozidele
c) MLS h) sulfamidele
d) cloramfenicolul i) polimixinele
e) rifampicine j) peniciline
27