Kromatografi

Dari Wikipedia bahasa Indonesia, ensiklopedia bebas

Belum Diperiksa
Langsung ke: navigasi, cari

Kromatografi

Kromatografi adalah suatu teknik pemisahan molekul berdasarkan perbedaan pola pergerakan
antara fase gerak dan fase diam untuk memisahkan komponen (berupa molekul) yang berada
pada larutan.[1] Molekul yang terlarut dalam fase gerak, akan melewati kolom yang merupakan
fase diam.[1] Molekul yang memiliki ikatan yang kuat dengan kolom akan cenderung bergerak
lebih lambat dibanding molekul yang berikatan lemah.[2] Dengan ini, berbagai macam tipe
molekul dapat dipisahkan berdasarkan pergerakan pada kolom.[2]

Setelah komponen terelusi dari kolom, komponen tersebut dapat dianalisa dengan menggunakan
detektor atau dapat dikumpulkan untuk analisa lebih lanjut.[2] Beberapa alat-alat analitik dapat
digabungkan dengan metode pemisahan untuk analisis secara on-line (on-line analysis) seperti:
penggabungan kromatografi gas (gas chromatography) dan kromatografi cair (liquid
chromatography) dengan mass spectrometry (GC-MS dan LC-MS), Fourier-transform infrared
spectroscopy (GC-FTIR), dan diode-array UV-VIS (HPLC-UV-VIS).[2]

Daftar isi
[sembunyikan]

 1 Jenis Kromatografi
o 1.1 Kromatografi Cair (Liquid Chromatography)
 1.1.1 Reverse phase chromatography
 1.1.2 High performance liquid chromatography
 1.1.3 Size exclusion chromatography
o 1.2 Kromatografi Pertukaran Ion (Ion-Exchange Chromatography)
 2 Referensi
[sunting] Jenis Kromatografi
[sunting] Kromatografi Cair (Liquid Chromatography)

Kromatografi cair merupakan teknik yang tepat untuk memisahkan ion atau molekul yang
terlarut dalam suatu larutan. Jika larutan sampel berinteraksi dengan fase stasioner, maka
molekul-molekul didalamnya berinteraksi dengan fase stasioner; namun interaksinya berbeda
dikarenakan perbedaan daya serap (adsorption), pertukaran ion (ion exchange), partisi
(partitioning), atau ukuran. Perbedaan ini membuat komponen terpisah satu dengan yang lain
dan dapat dilihat perbedaannya dari lamanya waktu transit komponen tersebut melewati kolom.[3]
Terdapat beberapa jenis kromatografi cair, diantaranya: reverse phase chromatography, High
Performance Liquid Chromatography (HPLC), size exclusion chromatography, serta
supercritical fluid chromatography.[4]

[sunting] Reverse phase chromatography

Reverse phase chromatography merupakan alat analitikal yang kuat dengan memadukan sifat
hidrofobik serta rendahnya polaritas fase stasioner yang terikat secara kimia pada padatan inert
seperti silika.[4] Metode ini biasa digunakan untuk proses ekstraksi dan pemisahan senyawa yang
tidak mudah menguap (non-volatile).[4]

[sunting] High performance liquid chromatography

High performance liquid chromatography (HPLC) mempunyai prinsip yang mirip dengan
reverse phase.[4] Hanya saja dalam metode ini, digunakan tekanan dan kecepatan yang tinggi.[4]
Kolom yang digunakan dalam HPLC lebih pendek dan berdiameter kecil, namun dapat
menghasilkan beberapa tingkatan equilibrium dalam jumlah besar.[4]

[sunting] Size exclusion chromatography

Size exclusion chromatography, atau yang dikenal juga dengan gel permeation atau filtration
chromatography biasa digunakan untuk memisahkan dan memurnikan protein.[4] Metode ini
tidak melibatkan berbagai macam penyerapan dan sangat cepat.[4] Perangkat kromatografi berupa
gel berpori yang dapat memisahkan molekul besar dan molekul kecil.[4] Molekul besar akan
terelusi terlebih dahulu karena molekul tersebut tidak dapat penetrasi pada pori-pori.[4]

[sunting] Kromatografi Pertukaran Ion (Ion-Exchange Chromatography)

Kromatografi pertukaran ion (ion-exchange chromatography) biasa digukanan untuk pemurnian

materi biologis, seperti asam amino, peptida, protein.[5][6] Metode ini dapat dilakukan dalam dua
tipe, yaitu dalam kolom maupun ruang datar (planar).[5] Terdapat dua tipe pertukaran ion, yaitu
pertukaran kation (cation exchange) dan pertukaran anion (anion exchange).[6] Pada pertukaran
kation, fase stasioner bermuatan negatif; sedangkan pada pertukaran anion, fase stasioner
bermuatan positif.[6] Molekul bermuatan yang berada pada fase cair akan melewati kolom.[6] Jika
muatan pada molekul sama dengan kolom, maka molekul tersebut akan terelusi.[6] Namun jika
muatan pada molekul tidak sama dengan kolom, maka molekul tersebut akan membentuk ikatan
ionik dengan kolom.[6] Untuk mengelusi molekul yang menempel pada kolom diperlukan
penambahan larutan dengan pH dan kekuatan ionik tertentu.[6] Pemisahan dengan metode ini
sangat selektif dan karena biaya untuk menjalankan metode ini murah serta kapasitasnya tinggi,
maka metode ini biasa digunakan pada awal proses keseluruhan.[6]