Mecanismo FIJADORES

Características Datos Técnicos Ventajas Desventajas

de Acción SIMPLES
• Fuerte reductor,
incompatible con fijadores
oxidantes como el
dicromato de K y
• Preserva GLUCOGENO
• Liquido Inflamable, tetróxido de osmio.
y la actividad de
muy volátil y olor • Fija y deshidrata al • No fija adecuadamente
ciertas enzimas
agradable. mismo tiempo. la cromatina. Disuelve
Alcohol (fosfatasa, alcalina y
• Preparación: tomar • Gran velocidad de ac. nucleico y extrae
acidas)
Etílico 70-90 ml de OH y penetración parcialmente los lípidos.
• Fija pigmentos
(CH3- • Uso en extensiones
llevar hasta 100 ml • Precipita muy rápido • Endurece y contrae
CH2OH) de agua destilada. las proteínas y el excesivamente los tejidos.
citológicas
Tamaño corte : 5 glucógeno (fijación • Pierde su actividad al ir
(PAP, líquidos como la
No Aditivo mm rápida). interactuando con el
sangre y secreciones).
Coagulante Tiempo fijación : 2-4 • Agente bactericida agua.
• Buen fijador para IHQ
hrs (buen conservante). • Carece de efecto
(Altera escasamente
Renovación :3 mordiente (químicamente
las estructura
veces es un reductor, prepara
antigénica).
mal la tinción).
Deshidrata • Origina fenómeno de
desplazamiento de
ción sustancias.
celular • Agente no aditivo y
• Conserva bien
muy oxidante (su • Provocan una gran
estructuras
átomo de oxígeno contracción tisular y por
antigénicas y la
puede compartir un tanto grandes artefactos.
actividad enzimática.
par de electrones). • Fija muy rápido y
• Rrecomendada para
• Uso limitado: IQ y IHQ • Liquido Inflamable, endurece demasiado a los
ácidos nucleicos y en
Preserva muy muy volátil y olor tejidos.
Acetona IFD (detección de
exactamente la dulzon. • La rápida extracción del
(CH3-CO- complejos
estructura antigénica y • Preparación: Se usa agua desde el tejido
CH3) autoinmunes: biopsia
la actividad enzimática sin diluir a 4ºC provoca una contracción
renal, hepática, piel o
de estos. • Tiempo fijación: nuclear, que deja un halo
No Aditivo mucosa).
• Deshidrata 2hrs. Máximo. perinuclear epitelios).
Coagulante • Uso en determinados
violentamente. • *Piezas delgadas se • Tiempo fijación muy
estudios con MET.
• Miscible en agua e recomienda 20 min. controlado.
• Disuelve los lípidos y
incompatible con
los carbohidratos se
fijadores metálicos
conservan (correcta
bivalentes.
precipitación de las
Generalmente se la
proteínas).
emplea sola.
Mecanismo FIJADORES
Características Datos Técnicos Ventajas Desventajas
de Acción SIMPLES
• Fijador ideal de
nucleoproteínas y ac.
Nucleicos.
• Fijador ideal para
• Liquido • Penetra rápidamente
NÚCLEO, PROTEÍNAS Y
transparente, de y deja el tejido muy
ACIDO NUCLEICOS.
fuerte olor blando • Es mal fijador de
 MEZCLAS
PREPARACION USO ACCION
FIJADORAS
Bouin • Piel
SOLUCIÓN ACUOSA DE ÁC. PÍCRICO • Esuno de los mejores fijadores para el
• Órganos endocrinos
(ÁC. PÍCRICO AL 1-2% EN AGUA estudio del glucógeno; penetra rápidamente
DESTILADA)… 750.0 ml • Testículo a los tejidos.
 FORMALINA CONCENTRADA……………… • Tejido embrionario
250.0 ml. • Es un buen fijador general, salvo para el riñón
 ÁC. ACÉTICO GLACIAL……………... • Hígado (provoca distorsión).
…………...50.0 ml. • La expansión de volumen provocada por el
• ganglio
 PH. FINAL……………………………..……. ácido acético es contrastado por la
………… 2.2 •*Sin embargo no es retracción del ácido pícrico.
 TIEMPO DE FIJACIÓN……………….……. 2 recomendado para
a 24 horas la fijación de • Latinción amarilla producida por el ácido
biopsias renales pícrico se retira con la aplicación de Alcohol
sobre los cuales 70%, sino causa deterioro en la coloración.
provoca una severa
distorsión • Es
muy adecuado para las coloraciones de
Masson y Mallory.

• Produce poco encogimiento.

• El líquido completo es una solución estable.

• Este fijador produce lisis de los glóbulos

rojos y disminuye la cantidad de hierro
férrico demostrable. - Los tejidos no deben
permanecer por más de 12 a 24 h. pues sino se
vuelven duros y quebradizos.
• Una vez terminada la fijación se debe pasar
directamente a la deshidratación con alcohol
80°.
 ACETATO NEUTRO DE COBRE…………..……
2.5 gr.
ÁC. PÍCRICO……………………………….…….
• Es una variante del liquido de Bouin, indicado
…...4.0 gr.
para la fijación de los cilindros de biopsia de
FORMALINA CONCENTRADA………..
médula ósea cuando no es posible controlar el
…....10.0 ml.
tiempo de fijación de la muestra en éste
ÁC. ACÉTICO GLACIAL…………………….... líquido, la conservación, puede incluso
….1.5 ml. conservar las 48 horas sin que se produzca
AGUA excesivo endurecimiento.
DESTILADA……………………………..100.0 • Medula ósea
Bouin – ml.
Hollander
Para preparar la solución se disuelve
primero la sal de cobre en el agua
destilada luego se añade el ácido pícrico y
tras filtrarlos el formol y el ácido acético
glacial.
Esta solución se conserva indefinidamente
a temperatura ambiente el tiempo de
fijación oscila entre 48-72 horas.

Bouin
• Es una alternativa de líquido de Bouin, se usa
alcohólico
 ALCOHOL ETILICO • Glucogeno para fijaciones relativamente voluminosa porque
80%........................75.0 ml. • Hígado posee una velocidad de penetración mucho mas
 ÁC. PÍCRICO……………………………….. • Ganglios elevada.
………0.5 gr. • Piel
 FORMALINA CONCENTRADA……….
…...30.0 ml.
 ÁC. ACÉTICO GLACIAL……………………..
….7.5 ml.
 Mezclar antes de usar el tiempo medio de
fijación para fragmentos con un espesor
en torno a 5 milímetros es de 2 a 3 horas.

ZENKER
Solución stock de Zenker:  Bazo
 CLORURO  Medula ósea • Trata de combinar los efectos favorables del
MERCÚRICO………………………5gr. sublimado y del dicromato potásico. En la
 DICROMATO POTÁSICO………………. práctica habitual ha sido sustituido por B5.
…..2.5 gr.
 SULFATO SÓDICO • Su empleo ha quedado prácticamente
……………………………1 gr. restringido al proceso de refinación-
 AGUA DESTILADA C.S.P. ………….. descalcificación a que son sometidas las
…..100.0 ml. biopsias de médula ósea cuando se realiza una
fijación inicial con B5.

El ácido acético reacciona con el • El tiempo de fijación puede ser mas

dicromato y hace que la solución se prolongada que con la solución de b5 porque el
oscurezca progresivamente, por lo que ácido acético que contiene, produce un excesivo
debe recomponerse antes de su uso. endurecimiento. Pero no se deben sobreasar
las 48 horas.

•Tras la fijación el material debe ser tratado

con sulfato sódico al 5% durante 1-2 horas.

• El bicloruro de mercurio es una sustancia que

corroe el instrumental metálico.
• Es un fijador adecuado para las muestras a las
que se les aplique IHQ.

• Antes de emplear las tinciones es necesario

eliminar de los tejidos, los pigmentos
precipitados del bicloruro de mercurio
B5
CLORURO MERCÚRICO…………… 12.0 gr.
ACETATO SÓDICO....………………….2.5 gr.
AGUA DESTILADA……..………..…….200 ml.
Solución es inestable ya que formaldehído
reduce el sublimado.
Aparición de precipitados mercúricos
sobre los tejidos antes de ser coloreados.
Se someten a un tratamiento específico
mediante soluciones que eliminan estos
depósitos.
• Riñón
• Espesor
máximo de las muestras no
mas 4 mm (escaso poder de
penetración de la mezcla).
• Eltiempo de fijación no debe superar
las 4 horas.
• Tras la fijación los tejidos se pueden
conservar indefinidamente en alcohol
etílico al 70-80.
• Lamayor utilidad de estos fijadores
es que mejoran
considerablemente la tinción
nuclear, de hecho la fijación en una
mezcla que contenga sublimado es
hoy día prácticamente imprescindible
para el diagnóstico morfológico en las
patologías del sistema linfoide y
hematopoyético. Es debido a la gran
importancia que se da a la
observación de finos detalles
nucleares como es la presencia o no
de hendiduras o repliegues nucleares
y del nucleolo para catalogar un
tumor maligno de ganglios linfáticos,
o de médula ósea (leucemias) como
de alto o bajo grado de malignidad y
 por tanto recomendar la terapéutica
más oportuna.

• Además estas soluciones B5, zenker

formol son los fijadores de elección
para el riñón, hígado, fibras de tejido
conectivo y para fibrina. Se prefiere
la solución de B5 porque al no
contener dicromato, esto permite una
mejor conservación de la cromatina
nuclear y de la estructura antigénica
tisular

CARNOY
ETANOL ABOSLUTO……………....60.0 ml. • Glucogeno • Este fijador es muy adecuado para pequeños
CLOROFORMO…………………….30.0 ml. • Hidratos de carbono fragmentos tisulares, por Ej. obtenidos por
ÁC. ACÉTICO GLACIAL…………..10.0 ml. • Proteínas fibrilares raspado, que se fijan bien en 30 min. a 2 h.
• Miofibrillas
El tiempo de fijación puede ser acortado • Hígado • También inicia la deshidratación, es un buen
hasta 3 horas. fijador para el glucógeno, los núcleos se tiñen
Las muestras deben cambiarse Su acción fijadora es bien.
directamente a alcohol etílico absoluto. El extremadamente
mayor endurecimiento se produce al rápida deshidratando
prolongar demasiado la deshidratación en el tejido al mismo • Como inconvenientes podemos citar que
alcohol, para prevenirlo se puede sustituir tiempo, sin embargo produce lisis y encogimiento importante.
el etanol por metanol en la composición produce una excesiva
de líquido fijador y para conservar la pieza retracción mística y • Disuelve los lípidos y la mielina.
se deposita en alcohol etílico absoluto. una hemólisis masiva
de eritrocitos así
como una pobre •Es un fijador que posee un excelente poder
conservación de penetración y de difusión.
estructural del ADN.
• Las muestras delgadas de tejidos y órganos se
fijan en dos o tres horas.

• Produce lisis de los eritrocitos. Es el fijador

adecuado cuando se desea demostrar glucógeno
y la tinción de núcleos y especialmente
cromosomas.