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UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS

FILIAL AREQUIPA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE
FARMACIA Y BIOQUÍMICA

EVALUACIÓN DEL EFECTO ANTIDIARREICO DEL EXTRACTO


DE LAS HOJAS DE CAESALPINIA SPINOSA KUNTZE (TARA)
EN RATAS DE LABORATORIO

Trabajo de investigación
presentado por:

CALLATA ARTEAGA, María


CARRILLO ENRÍQUEZ,
Vanessa
SIFUENTES NEYRA, Liseth

AREQUIPA – PERÚ
2011
1

ÍNDICE

I.1.PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.................................................2


I.1.1.DESCRIPCIÓN DEL PROBLEMA....................................................................2
I.1.2.ANTECEDENTES TEÓRICOS.........................................................................2
I.1.3.FORMULACIÓN DEL PROBLEMA A INVESTIGAR...........................................2
I.1.4.HORIZONTES DE LA INVESTIGACIÓN..........................................................3
I.1.5.JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA..................................................................3
I.2.FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA INVESTIGACIÓN.............................4
I.2.1.MARCO TEÓRICO........................................................................................4
I.3.OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN................................................5
I.3.1.OBJETIVO GENERAL....................................................................................5
I.3.2.OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA Q. ORGÁNICA....................5
I.3.3.OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA FISIOLOGÍA........................5
I.3.4.OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA FÍSICA FARMACÉUTICA......5
I.3.5.OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA BOTÁNICA FARMACÉUTICA6
I.3.6.OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA BIOESTADÍSTICA...............6
I.4.FORMULACIÓN DE LA HIPÓTESIS..................................................6
I.5.VARIABLES.................................................................................7
I.6.DISEÑO OPERACIONAL................................................................8
I.6.1.TIPO Y NIVEL DE INVESTIGACIÓN................................................................8
I.6.2.MÉTODOS DE INVESTIGACIÓN....................................................................8
I.6.2.1.MÉTODOS PARA LA INVESTIGACIÓN EN QUÍMICA ORGÁNICA..................8
I.6.2.1.1.Determinación del pH...........................................................................8
I.6.2.1.2.Procedimientos para la identificación de los grupos funcionales
presentes en el extracto de Caesalpinia spinosa (tara)......................................9
I.6.2.2.MÉTODOS PARA LA INVESTIGACIÓN EN BOTÁNICA FARMACÉUTICA......12
I.6.2.2.1.Descripción taxonómica de Caesalpinia spinosa................................12
I.6.2.2.2.Método para la descripción macroscópica de Caesalpinia spinosa.....12
I.6.2.2.3.Método para la descripción microscópica de las hojas de Caesalpinia
spinosa.............................................................................................................13
I.6.2.2.4.Estudio etnobotánico de Caesalpinia spinosa.....................................13
I.6.2.3.MÉTODO PARA LA INVESTIGACIÓN EN FISIOLOGÍA................................14
I.6.2.3.1.Diarrea inducida por aceite de ricino..................................................14
I.7.RESULTADOS EN QUÍMICA ORGÁNICA.........................................16
I.8.RESULTADOS EN BOTÁNICA FARMACÉUTICA...............................17
2

I.1.PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

I.1.1. DESCRIPCIÓN DEL PROBLEMA

I.1.2. ANTECEDENTES TEÓRICOS

I.1.3. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA A INVESTIGAR


3

I.1.4. HORIZONTES DE LA INVESTIGACIÓN

I.1.5. JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA


4

I.2.FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA INVESTIGACIÓN

I.2.1. MARCO TEÓRICO


5

I.3.OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN

I.3.1. OBJETIVO GENERAL

Evaluar el efecto antidiarreico del extracto acuoso de las hojas de

Caesalpinia spinosa Kuntze (tara) en ratas de laboratorio.

I.3.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA Q. ORGÁNICA

− Determinar la naturaleza ácida o básica del extracto de las hojas de

Caesalpinia spinosa Kuntze.

− Identificar los grupos funcionales presentes en el extracto de las hojas de

Caesalpinia spinosa Kuntze

I.3.3. OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA FISIOLOGÍA

− Evaluar el efecto del extracto de las hojas de Caesalpinia spinosa Kuntze,

sobre el número de deposiciones en animales de experimentación.

− Evaluar el efecto del extracto de las hojas de Caesalpinia spinosa Kuntze,

sobre la masa total de deposiciones en animales de experimentación.

− Evaluar el efecto del extracto de las hojas de Caesalpinia spinosa Kuntze,

sobre la consistencia de las heces en animales de experimentación.

I.3.4. OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA FÍSICA

FARMACÉUTICA

− Estudiar el efecto del extracto de las hojas de Caesalpinia spinosa Kuntze,

sobre el tiempo de tránsito del tracto gastrointestinal en animales de

experimentación.
6

− Estudiar el efecto del extracto de las hojas de Caesalpinia spinosa Kuntze,

sobre la velocidad de tránsito del tracto gastrointestinal en animales de

experimentación.

− Estudiar el efecto del extracto de las hojas de Caesalpinia spinosa Kuntze,

sobre la motilidad (distancia recorrida) del tracto gastrointestinal en

animales de experimentación.

I.3.5. OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA BOTÁNICA

FARMACÉUTICA

− Describir la taxonomía y aspectos botánicos macro y microscópicos de la

Caesalpinia spinosa Kuntze.

− Realizar un estudio etnobotánico de la Caesalpinia spinosa Kuntze.

I.3.6. OBJETIVOS ESPECÍFICOS RELACIONADOS A LA BIOESTADÍSTICA

− Calcular las medidas de tendencia central: Promedio, Mediana y moda de

los parámetros fisiológicos y físico farmacéuticos.

− Calcular las medidas de dispersión: Desviación estándar, varianza y rango

de los parámetros fisiológicos y físico farmacéuticos.

− Realizar una prueba de hipótesis: ANOVA y prueba de Tukey de los

parámetros fisiológicos y físico farmacéuticos.

I.4.FORMULACIÓN DE LA HIPÓTESIS

Dado que la Caesalpinia spinosa (tara) es utilizada por la medicina tradicional

como antidiarreica, es probable que los extractos de las hojas también presenten

este efecto en ratas de laboratorio.


7

I.5.VARIABLES

TIPO DE VARIABLE INDICADORE SUBINDICADOR


S
Extracto acuoso de Extracto Composición
Independien
Caesalpinia spinosa
te acuoso química
(tara)
Número de
deposiciones
Parámetros Masa de
fisiológicos deposiciones.
Consistencia de
Dependient Actividad deposiciones
e antidiarreica
Tiempo de tránsito GI
Parámetros
Velocidad de tránsito
físico
GI
farmacéuticos
Distancia recorrida
8

I.6.DISEÑO OPERACIONAL

I.6.1. TIPO Y NIVEL DE INVESTIGACIÓN

La investigación es experimental, correspondiente a los experimentos

puros, con grupo de control.

Según el nivel de investigación es de aplicada.

I.6.2. MÉTODOS DE INVESTIGACIÓN

I.6.2.1. MÉTODOS PARA LA INVESTIGACIÓN EN QUÍMICA ORGÁNICA

I.6.2.1.1. Determinación del pH

I.6.2.1.1.1. Método

Potenciométrico

I.6.2.1.1.2. Fundamento

El pH o potencial de hidrógeno, es una medida relativa de la acidez o

alcalinidad de una solución. Si el pH de una solución es 7, entonces se trata de


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una solución neutra, es decir, que no es ácida ni alcalina. Si el pH es 5 se trata de

una solución ligeramente ácida; una solución con un pH de 3 es mucho más

ácida. Cuanto más baja es la lectura del pH más ácida será la solución evaluada.

El método empleado determina la concentración de iones hidrógeno por la

diferencia del potencial entre los electrodos, al sumergirse en una muestra

problema.

I.6.2.1.1.3. Procedimiento

En un vaso de precipitado se añade 1g de extracto y luego se agrega

50ml de agua destilada. Luego se procede a medir el pH de la muestra. Se

introduce los electrodos previamente calibrados en una solución tampón estándar

de pH. Esta medición se debe realizar por triplicado. Finalmente se procede a dar

lectura del pH en el panel del instrumento, sacar el promedio de las tres

mediciones.

I.6.2.1.2. Procedimientos para la identificación de los grupos funcionales

presentes en el extracto de Caesalpinia spinosa (tara).

I.6.2.1.2.1. Identificación de azúcares reductores

I.6.2.1.2.1.1. Prueba

Ensayo con reactivo de Fehling

I.6.2.1.2.1.2. Fundamento

Se basa en la reducción de Cu (II) a Cu (I) por parte de los azúcares

reductores por lo cual se va a dar la formación de un precipitado rojo ladrillo.


10

I.6.2.1.2.1.3. Procedimiento

Se toma 1ml de la solución A con 1ml de solución B del reactivo de

Fehling en un tubo de ensayo y calentar a fuego directo con 1ml del extracto de

Caesalipinia spinosa hasta obtener un precipitado rojo ladrillo de óxido cuproso.

I.6.2.1.2.2. Identificación de alcaloides

I.6.2.1.2.2.1. Prueba

Reacción de Dragendorff

I.6.2.1.2.2.2. Fundamento

En esta reacción el ácido nítrico extrae los protones H+ del alcaloide y

éste va a formar una sal con el anión BiI4; producto de la disociación del complejo

KBiI (tetraiodobismutato de potasio) que va a precipitar.

I.6.2.1.2.2.3. Procedimiento

Se toma 1ml del extracto y se le añade 1ml del reactivo de Dragendorff.

En presencia de alcaloides se forma un precipitado anaranjado de tetraiodo

bismutato del alcaloide correspondiente.

I.6.2.1.2.3. Identificación de taninos

I.6.2.1.2.3.1. Prueba

Reacción con cloruro férrico

I.6.2.1.2.3.2. Fundamento
11

Los taninos al ser mezclados con las sales férricas van a formar

complejos de Fe+++ dando lugar a coloraciones o precipitaciones de color verde y

azul intensos.

I.6.2.1.2.3.3. Procedimiento

Tomar 1ml de extracto de tara en un tubo de ensayo, añadir 0.5ml de

solución de tricloruro férrico al 5% y se agitó suavemente. El desarrollo inmediato

de la coloración azul o verde, indica intenso, indica la presencia de taninos gálicos

o catéquicos respectivamente.

I.6.2.1.2.4. Identificación de flavonoides

I.6.2.1.2.4.1. Prueba

Reacción de Shinoda

I.6.2.1.2.4.2. Fundamento

Se basa en la formación de quelatos por parte de los flavonoides con el

magnesio, dando lugar a la formación de diferentes coloraciones que dependen

de la estructura química de los flavonoides.

I.6.2.1.2.4.3. Procedimiento

Colocar en un tubo de ensayo 1ml de solución de extracto de material

vegetal, y añadir una porción de magnesio metálico para luego añadir 0.5ml de

ácido clorhídrico concentrado hasta reacción completa del magnesio metálico. En

presencia de flavonas la coloración es entre amarillo y rojo, en caso de flavononas

la coloración es entre rojo y violeta, las isoflavonas dan coloración amarilla. Para
12

identificar flavanonas se agregó al extracto ácido nítrico concentrado, debiendo

dar coloración amarilla.

I.6.2.2. MÉTODOS PARA LA INVESTIGACIÓN EN BOTÁNICA FARMACÉUTICA

I.6.2.2.1. Descripción taxonómica de Caesalpinia spinosa

Para la descripción taxonómica de la Ceasalpinia spinosa, se realizará una

investigación bibliográfica a fin de determinar el taxón, acorde al sistema de

clasificación de Adolfo Engler modificado por Soukoup (1983).

I.6.2.2.2. Método para la descripción macroscópica de Caesalpinia spinosa

Realizar una observación a los árboles de Caesalpinia spinosa (tara),

recolectando hojas, frutos y flores. Estos tres últimos órganos deben ser

observados con la ayuda de una lupa. Todos los parámetros longitudinales deben

ser descritos por triplicado a fin de sacar un promedio conforme a la ficha de

observación descrita en el anexo N°1. Detallar lo siguiente

− Aspecto y color de la corteza del tallo

− Aspecto y color de las ramas

− Tipo, forma y disposición de las hojas

− Color y disposición de las flores.

− Tipo y color de los frutos y semillas.

En base a los aspectos descritos y las mediciones realizadas según el

anexo mencionado, se confrontará estas características con una clave provisional

para el género Caesalpinia.


13

I.6.2.2.3. Método para la descripción microscópica de las hojas de

Caesalpinia spinosa

Siendo objeto de estudio las hojas de la tara, son estas las que se

observaran bajo microscopio para documentar sus características morfológicas.

I.6.2.2.3.1. Procedimiento

− Lavar unas cuantas hojas frescas en agua destilada.

− Con la ayuda de una hoja de afeitar de doble filo, proceder a realizar varios

cortes transversales muy finos de las hojas de tara.

− En dos láminas portaobjetos colocar tres cortes de hojas de tara en cada

una.

− Realizar una observación al fresco a 100X de una lámina portaobjetos, con

la ayuda de una gota de agua destilada. Documentar y distinguir aspectos

morfológicos.

− La otra lámina debe ser coloreada mediante azul de metileno, realizar

observaciones a 100X y documentar.

I.6.2.2.4. Estudio etnobotánico de Caesalpinia spinosa

I.6.2.2.4.1. Método

Encuesta

I.6.2.2.4.2. Técnica

Cuestionario
14

I.6.2.2.4.3. Procedimiento

Aplicar la encuesta recogida en el anexo N°2 en personas que se

dedican a la comercialización de Caesalpinia spinosa (tara).

Posteriormente realizar la tabulación de las respuestas, para el análisis

estadístico de las mismas y la exposición de los resultados.

I.6.2.3. MÉTODO PARA LA INVESTIGACIÓN EN FISIOLOGÍA

I.6.2.3.1. Diarrea inducida por aceite de ricino

Al evaluar el efecto antidiarreico del extracto acuoso de Caesalpinia

spinosa (tara) se observarán que parámetros fisiológicos serán modificados por

este extracto, luego de la inducción de diarrea en ratas de laboratorio, a través de

la administración per os de aceite de ricino. Sustancia con acción catártica debido

a que contiene ácido ricinolecio, potente irritante de la luz intestinal, que provoca

un aumento del tránsito intestinal y la secreción de agua y electrolitos. Se medirán

tres parámetros relacionados indirectamente a la fisiología de la motilidad y

secreción intestinal.

I.6.2.3.1.1. Procedimiento

− Los animales de experimentación, deben ser sometidos a ayuno 12 horas

antes de la prueba, pudiendo tomar solo agua en ayunas.

− Administrar al grupo control 10ml/kg de suero fisiológico.

− Administrar al grupo experimental 400mg/kg de extracto acuoso disuelto en

5ml de agua destilada.

− A los 60 minutos de administrados el suero y el extracto, administrar

mediante sonda orogástrica 1ml de aceite de ricino.


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− Inmediatamente introducir a sus respectivas jaulas a las ratas, y colocar un

recipiente de plástico previamente pesado, debajo del piso de la jaula.

− Observar en las próximas 4 horas luego de la administración del aceite de

ricino los siguientes parámetros: Número de deposiciones, masa total de

deposiciones, consistencia de las heces (siendo 1 deposición normal, 2

deposición semisólida y 3 deposición líquida).


16

RESULTADOS DE LA INVESTIGACIÓN

I.7.RESULTADOS EN QUÍMICA ORGÁNICA


17

I.8.RESULTADOS EN BOTÁNICA FARMACÉUTICA

I.8.1.1.1.1.1.1. Aletas
18

BIBLIOGRAFÍA
19

ANEXOS
20

ANEXO N°1: OBSERVACIÓN DE CAESALPINIA SPINOSA

Especie: Caesalpinia spinosa TARA


Medición Medición Medició Promedi
Descripción
1 2 n3 o
Altura especie
Número de hojas x
raquis
Largo de las hojas
Ancho de las hojas
Longitud de racimos
Largo de los frutos
Ancho de los frutos
Número de semillas por
fruto
21

ANEXO N°2: ENCUESTA SOBRE LA ETNOBOTÁNICA DE CAESALPINIA

SPINOSA

Muy buenos días Sr.(a) quisiera aprovechar sus conocimientos para


conocer más sobre la tara, esto ayudará mucho en mi formación como
farmacéutica. Muchas gracias por su colaboración.

1. Como se comercializa la tara?


a. A granel fresca
b. A granel seca
c. Embolsado seco
d. Otra:________________

2. Que parte de la tara vende Usted con fines medicinales?


a. Hojas
b. Frutos
c. Semillas
d. Corteza
e. Raíz
f. Otra:____________

3. Como se debe tomar la tara


a. En cocimiento en la siguiente proporción:_________________
b. En infusión (mate) en la siguiente proporción:______________
c. Otra:____________

4. Usted recomienda la tara sobre todo para que tipo de enfermedad?


a. _________________

5. Para esa enfermedad la tara debe ser tomada, por cuánto tiempo?
a. _________________

6. Existe algún riesgo por consumir preparados con tara regularmente


a. Si
b. No

7. Según edad que tipo de pacientes adquieren más tara


a. 20-40 (adultos jóvenes)
b. 41-60 (adultos medio)
c. >61 (adultos mayores)