Resumen: E-035

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2006

Titulacin potenciomtrica de cido flico en comprimidos

De Asmundis, Cecilia - Sarno, Mara del C. - Delfino, Mario R. Laboratorio de Qumica Analtica Instrumental. Facultad de Ciencias Exactas y Nat. y Agrim. UNNE. Av. Libertad 5640 (3400) Corrientes- Argentina TE:03783- 457996 int111/Fax: 03783- 473930/E-mail : mcsarno@exa.unne.edu.ar Antecedentes El cido flico pteroil- glutmico (Figura 1) es una vitamina del grupo B, hidrosoluble, cuya ingesta ayuda a prevenir malformaciones fetales relacionadas con el cerebro y la mdula espinal (defectos del tubo neural, principalmente espina bfida y anencefalia) slo si sta tiene lugar antes de la concepcin y durante la primera etapa del embarazo.

Figura 1: Estructura Qumica del cido Flico El cido flico procedente de los suplementos vitamnicos y alimentos enriquecidos es ms fcil de absorber por el organismo que el folato natural de los alimentos. Segn el Institute Of Medicine (IOM), el organismo humano absorbe aproximadamente el 50% del folato de los alimentos, mientras que puede absorber el 85% del cido flico presente en los alimentos enriquecidos y el 100% del cido flico de los suplementos vitamnicos. La coccin y el almacenamiento pueden destruir parte del folato de los alimentos. El IOM y los Centros de prevencin y control de enfermedades (CDC: Centers for Disease Control and Prevention) recomiendan que las mujeres que puedan quedar embarazadas consuman 4 a 5 mg al da de la forma sinttica del cido flico, incrementndose esta dosis en una fase ms avanzada del embarazo. El cido flico es importante para la produccin de glbulos rojos normales, y las personas con deficiencias de ste a veces desarrollan un tipo de anemia denominada megaloblstica, caracterizada por un nmero reducido de glbulos rojos. El informe de los expertos de la FAO/ OMS aconseja una ingesta diaria superior a los 350 g para mujeres embarazadas, dosis que no han producido ningn efecto txico, indicando adems que dosis superiores a 1 mg han provocado un estado epilptico en pacientes con anemia megaloblstica. Asimismo, estudios efectuados en la Universidad de California constataron que el consumo de cido flico puede disminuir el riesgo de que una persona desarrolle el mal de Alzheimer. La Planta de Medicamentos de Corrientes (PLAMECOR) elabora comprimidos de 5 mg de cido flico, los que son distribuidos para su uso en pacientes que acuden a hospitales y centros de salud de la provincia. El mtodo de referencia propuesto por la Food and Drugs Administration (FDA) para cuantificar el contenido de este principio activo en tabletas es HPLC con deteccin UV a 254 nm. En el presente trabajo se propone su determinacin por un mtodo de bajo costo, sencillo y de fcil automatizacin como lo es la titulacin con amonaco con punto final potenciomtrico. El uso de la primera derivada mejora su deteccin. Materiales y Mtodos Materia prima Principio Activo: cido flico Lote FB/006/03-04. Origen: Dinamarca. Pureza: 98% Comprimidos: de 5mg de cido flico. Lote 020. Elaborados por PLAMECOR Reactivos Amonaco concentrado, p-a. Solucin de amonaco 0,0100 M Solucin Buffer pH 7,00 0,02. Solucin Buffer pH 4,00 0,02.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2006 Equipos Celda de titulacin de vidrio encamisada p/ termostatizacin. Volumen til: 50 mL. PHmetro c/ control automtico de temperatura. Agitador magntico Bureta 25 mL c/ robinete de tefln Balanza analtica ( 0,1 mg) Procedimiento a) Principio Activo: Se pesa una masa de patrn de cido flico en el rango de 20 a 100 mg, se dispersa en 50 mL de agua destilada y se transfiere a la celda electroltica. Se sumerge la barra del agitador magntico y el electrodo de vidrio combinado. Se conectan el potencimetro y el agitador. Desde la bureta se van adicionando pequeos volmenes de solucin 0,0100 M de amonaco. Para cada agregado se registra el cambio del potencial de la celda electroqumica. Con los datos obtenidos se construyen las grficas de pH vs. Volumen de titulante y la correspondiente a la primera derivada de la curva de titulacin. b) Comprimidos: Se disuelven seis (6) comprimidos de 5 mg de cido flico en 50 mL de agua destilada y se repite el procedimiento descrito en a). Discusin de Resultados El cido flico no es enteramente soluble en agua, aunque la acidifica hasta alcanzar pH cercanos a 3 . Sin embargo, en soluciones alcalinas muestra una disolucin progresiva a partir de pH 5,5 aproximadamente, dependiendo de su concentracin original. La titulacin del cido flico con amonaco conduce a una curva, mostrada en la figura 2, en el transcurso de la cual puede localizarse un punto crtico de disolucin por un lado y luego una inflexin poco acentuada.

10 8 6 4 2 0 0 5 10 15 V (mL) 20 25 30

Figura 2: Titulacin de 25 mg de estndar de cido flico con NH3 0,01 M La leve inflexin puede ser bien manifiesta mediante el clculo de la primera derivada, con la consecuente transformacin de estos puntos en mximos, mejorando as su deteccin (Figura 3)

1 0,8
Deriv(pH/V)

0,6 0,4 0,2 0 -0,2 0 10

V (mL)

pH

Vprom

20

30

Figura 3: Primera Derivada de la titulacin de 25 mg de estndar de cido flico con NH3 0,0100 M

Resumen: E-035

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2006 Los resultados de la titulacin potenciomtrica de distintas masas de estndar de cido flico con amonaco 0,0100 M se dan en la tabla 1. M c. Flico estndar (mg) Mmol amonaco Consumido 0,0 0,0 26,0 0,081 50,0 0,153 60,0 0,198 75,0 0,261 100,0 0,342 7,10 x 10-3 A= Ord. al origen 3,46 x 10-3 B = Pendiente 0,998 R = Coef. Correl. lineal Tabla 1: Regresin lineal de la Titulacin de cido flico con amonaco 0,0100 M Si bien se trata experimentalmente de una simple titulacin, los resultados inducen a una estequiometra distinta de la asumida al considerarla nicamente como equilibrio cido-base. Es por ello que se recurre a una curva de calibrado. La regresin de los valores obtenidos confirma la relacin lineal entre el consumo de amonaco y la masa de cido flico. N determinacin Mmol amonaco M cido flico (mg) La aplicacin del mtodo, haciendo uso 1 0,092 28,60 de la curva de calibrado, aplicado a los 2 0,096 29,75 comprimidos de 5 mg de cido flico 3 0,098 30,33 elaborados por PLAMECOR condujo a 4 0,092 28,60 los resultados que se dan en la tabla 2. 5 0,099 30,62 Se efectuaron seis repeticiones del 6 0,096 29,75 anlisis de un pool de 6 pastillas (30mg Xmedio = 29,608 mg cido flico cido flico), con la finalidad de estimar S = 0,8506 mg su precisin. DRS % = 2,87% Tabla 2: Determinacin de cido flico en pool de 6 pastillas de 5 mg por titulacin con amonaco 0,01 M Conclusiones Ensayos realizados con soluciones de hidrxido de sodio, si bien disuelven al cido flico en medio acuoso, no condujeron a puntos de inflexin en las titulaciones, lo que demuestra la efectividad del amonaco para llegar a los resultados expuestos. Los anlisis realizados no permitieron demostrar la existencia de una reaccin que ayude a interpretar los resultados de los puntos finales de la titulacin. Cabe agregar que se ha operado en todos los casos a temperatura ambiente. Los resultados alcanzados permiten la aplicacin de esta metodologa analtica a preparados farmacuticos que contengan al cido flico como monodroga. Bibliografa Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Folic Acid Now Fact Sheet. www.cdc.gov/doc. Berry, R.J., et al. Prevention of Neural Tube Defects with Folic Acid in China. New England Journal of Medicine, vol. 341, N 20, 11/11/99, pag. 1485-1490. Mercereau, P., et al. Spina Bifida and Anencephaly Before and After Folic Acid Mandate United States, 19951996 and 1999-2000. Morbidity and Mortality Weekly Report, vol. 53, N 17, 7/05/04, pag. 362-365. Carter, H.K., et al. Use of Vitamins Containing Folic Acid Among Women of Childbearing Age United States, 2004. Morbidity and Mortality Weekly Report, vol. 53, N 36, 17/04. Centers for Disease Control and Prevention. Folate Status in Women of Childbearing Age, by Race/Ethnicity United States, 1999-2000. Morbidity and Mortality Weekly Report, vol. 51, N 36, 13/09/02, pag. 808-810. U.S. Food and Drug Administration. Folic Acid Fortification Fact Sheet. 29/02/96, www.cfsan.fda.gov~dms/whfolic.html. FAO/OMS Informe de Una Consulta Mixta de Expertos. Necesidades de Vitamina A, Hierro, Folato y Vitamina B12. Roma (Italia ) . 1991. Gindler, J. Zhu LI, Berry, R. J. et al. Folic acid supplements during pregnancy and risk of miscarriage. Lancet, 358: 796-800, 2001.