Ada empat atau lima tahap untuk menghasilkan etanol menggunakan pendekatan biologis: [7] Sebuah "pretreatment" fase,

untuk membuat bahan lignoselulosa seperti kayu atau jerami setuju untuk hidrolisis, hidrolisis selulosa (cellulolysis), untuk memecah molekul menjadi gula; Pemisahan larutan gula dari bahan-bahan sisa, terutama lignin; Mikroba fermentasi larutan gula; Distilasi untuk menghasilkan alkohol sekitar 95% murni. Dehidrasi dengan ayakan molekul untuk membawa konsentrasi etanol lebih dari 99,5% Namun, pada tahun 2010, strain ragi rekayasa genetika telah dikembangkan yang menghasilkan enzim sendiri mencerna selulosa. [14] Dengan asumsi teknologi ini dapat ditingkatkan ke tingkat industri, itu akan menghilangkan satu atau lebih langkah cellulolysis, mengurangi waktu yang dibutuhkan baik dan biaya produksi. [Sunting] Pretreatment Meskipun lignoselulosa adalah sumber daya tanaman bahan yang paling melimpah, kerentanan yang telah dibatasi oleh struktur kaku nya. Akibatnya, sebuah perlakuan awal yang efektif diperlukan untuk membebaskan selulosa dari lignin segel dan struktur kristalnya sedemikian rupa sehingga dapat diakses untuk langkah berikutnya hidrolisis. [15] Sejauh ini, pretreatments sebagian besar dilakukan melalui sarana fisik atau kimia. Dalam rangka mencapai efisiensi yang lebih tinggi, baik pretreatment fisik dan kimia yang diperlukan. pretreatment fisik sering disebut pengurangan ukuran untuk mengurangi ukuran fisik biomassa.Kimia pretreatment adalah untuk menghilangkan hambatan kimia sehingga enzim dapat mengakses ke selulosa untuk penghancuran mikroba. Untuk saat ini, teknik perlakuan awal yang tersedia meliputi hidrolisis asam, ledakan uap, ekspansi amonia serat, organosolve, sulfit pretreatment untuk mengatasi perlawanan dari lignoselulosa (SPORL), [7] alkali oksidasi basah dan treatment ozon. [16] Selain pembebasan selulosa efektif, suatu pretreatment ideal untuk meminimalkan pembentukan produk degradasi karena efek penghambatan terhadap hidrolisis berikutnya dan proses fermentasi [17] Keberadaan inhibitor tidak hanya akan semakin mempersulit produksi etanol, tetapi juga meningkatkan biaya produksi akibat langkah-langkah detoksifikasi terkandung..Meskipun pretreatment oleh hidrolisis asam mungkin yang tertua dan paling banyak dipelajari teknik pretreatment, menghasilkan beberapa inhibitor poten termasuk furfural dan hidroksimetil furfural (HMF) yang sejauh ini dianggap sebagai inhibitor paling beracun hadir dalam hidrolisat lignoselulosa [18]. Amonia Perluasan Fiber (AFEX) adalah pretreatment menjanjikan tanpa efek penghambatan dalam menghasilkan hidrolisat. [19] proses pretreatment Kebanyakan tidak efektif ketika diterapkan pada bahan baku dengan kandungan lignin tinggi, seperti biomassa hutan. Organosolv dan SPORL adalah dua proses yang dapat mencapai lebih dari 90 konversi selulosa% untuk biomassa hutan, khususnya spesies kayu lunak. SPORL adalah energi yang paling efisien (produksi gula konsumsi per unit energi di pretreatment) dan proses yang kokoh untuk pretreatment biomassa hutan dengan produksi yang sangat rendah inhibitor fermentasi. pembuburan organosolv sangat efektif untuk kayu keras dan menawarkan pemulihan mudah produk lignin hidrofobik oleh pengenceran dan curah hujan. [20] [Sunting] Cellulolytic proses Molekul-molekul selulosa terdiri dari rantai panjang molekul gula.Dalam proses hidrolisis, rantai

ini dipecah untuk membebaskan gula, sebelum difermentasi untuk produksi alkohol. Ada dua selulosa hidrolisis utama (cellulolysis) proses: reaksi kimia menggunakan asam, atau reaksi enzimatik. [Sunting] hidrolisis Kimia Dalam metode tradisional dikembangkan di abad ke-19 dan pada awal abad ke-20, hidrolisis dilakukan dengan menyerang selulosa dengan asam [21] Encerkan asam mungkin. Akan digunakan di bawah panas tinggi dan tekanan tinggi, atau asam lebih terkonsentrasi dapat digunakan pada suhu rendah dan tekanan atmosfer. Campuran selulosa decrystalized asam dan gula bereaksi dengan adanya air untuk menyelesaikan molekul gula individu (hidrolisis). Produk dari hidrolisis ini kemudian dinetralkan dan fermentasi ragi digunakan untuk menghasilkan etanol. Seperti disebutkan, kendala yang signifikan untuk melemahkan proses hidrolisis asam adalah bahwa begitu keras bahwa produk degradasi beracun yang dihasilkan yang dapat mengganggu fermentasi. BlueFire Etanol menggunakan asam pekat karena tidak menghasilkan hampir sebagai inhibitor fermentasi banyak tetapi harus dipisahkan dari aliran gula untuk mendaur ulang (simulasi tempat tidur bergerak (SMB) pemisahan kromatografi misalnya) secara komersial menarik. Agricultural Research Service ilmuwan menemukan bahwa mereka dapat mengakses dan fermentasi hampir semua gula yang tersisa di jerami gandum. Gula berada di dinding sel tumbuhan, yang sangat sulit untuk memecah. Untuk mengakses gula, ilmuwan pretreated jerami gandum dengan peroksida alkali dan kemudian digunakan enzim khusus untuk memecah dinding sel. Metode ini menghasilkan 93 galon etanol per ton jerami gandum. [2] [Sunting] hidrolisis enzimatis rantai Selulosa dapat dipecah menjadi molekul glukosa oleh enzim selulase. Reaksi ini terjadi pada suhu tubuh di dalam perut ruminansia seperti sapi dan domba, di mana enzim diproduksi oleh bakteri.Proses ini menggunakan beberapa enzim pada berbagai tahapan konversi ini. Menggunakan sistem enzimatik yang sama, bahan lignoselulosa dapat dihidrolisis secara enzimatis pada kondisi yang relatif ringan (50oC dan pH5), sehingga memungkinkan pemecahan selulosa efektif tanpa pembentukan produk samping yang dinyatakan akan menghambat aktivitas enzim. Semua metode pretreatment utama, termasuk encer pretreatment asam, memerlukan langkah hidrolisis enzimatik untuk mencapai hasil gula tinggi untuk fermentasi etanol laboratorium [19] Saat ini, studi pretreatment sebagian besar telah berbasis. Tapi perusahaan dengan cepat mengeksplorasi sarana untuk transisi dari laboratorium untuk pilot , atau produksi skala. enzim Berbagai perusahaan juga telah memberikan kontribusi terobosan teknologi yang signifikan dalam etanol selulosa melalui produksi massal enzim untuk hidrolisis dengan harga yang kompetitif. Jamur Trichoderma reesei digunakan oleh Iogen Corporation, untuk mengeluarkan "enzim khusus direkayasa" untuk proses hidrolisis enzimatik. [22] bahan baku mereka (kayu atau jerami) harus pra-diobati untuk membuatnya setuju untuk hidrolisis.Namun, Bahan Bakar Kebebasan, proses s Inc 'menggunakan campuran bakteri mengkonsumsi lignin dalam hidrolisis dipatenkan organik mereka, tetapi perbedaannya adalah bahwa organisme mikrobiologi juga mengandung gula difermentasi dan ketika diperkenalkan sebagai bahan baku tambahan ke dalam sistem etanol, mereka hampir dua kali lipat output tanpa membutuhkan tambahan pretreatment. [23]

Perusahaan lain Kanada, SunOpta pasar teknologi yang dipatenkan dikenal sebagai "Ledakan Uap" untuk melakukan pra-mengobati biomassa selulosa, mengatasi "perlawanan" untuk membuat selulosa dan hemiselulosa dapat diakses oleh enzim untuk konversi menjadi gula difermentasi. desain SunOpta dan insinyur biorefineries etanol selulosa dan teknologi proses dan peralatan yang sedang digunakan dalam 3 tanaman demonstrasi komersial pertama di dunia: [24] Verenium (dahulu Celunol Corporation) s fasilitas 'di Jennings, Louisiana, fasilitas Abengoa di Salamanca, Spanyol , dan fasilitas di China dimiliki oleh China Resources Alkohol Corporation (crac). Fasilitas crac saat ini memproduksi etanol selulosa dari brangkasan jagung lokal secara 24 jam sehari menggunakan proses SunOpta dan teknologi. Genencor dan Novozymes adalah dua perusahaan lain yang telah menerima Amerika Serikat Departemen Energi pendanaan untuk penelitian dalam mengurangi biaya selulase, enzim kunci dalam produksi etanol selulosa oleh hidrolisis enzimatik. enzim perusahaan lain, seperti diad Internasional, [25] sedang mengembangkan jamur rekayasa genetika yang akan menghasilkan volume besar dari selulase, xilanase dan enzim hemicellulase yang dapat digunakan untuk mengubah residu pertanian seperti brangkasan jagung, biji-bijian penyuling, jerami gandum dan tebu ampas tebu dan energi tanaman seperti rumput beralih menjadi gula difermentasi yang dapat digunakan untuk menghasilkan ethanol selulosa. Verenium, dibentuk oleh penggabungan Diversa dan Celunol, mengoperasikan pilot plant ethanol selulosa di Jennings, Louisiana dan sedang membangun galon 1,4 juta per tanaman tahun demonstrasi di daratan akan selesai pada akhir tahun 2007 dan mulai beroperasi pada awal 2008. Verenium adalah perusahaan publik pertama dengan kemampuan terintegrasi, endto-end untuk membuat biofuel selulosa. KL Energy Corporation, [26] dahulu KL Proses Design Group, memulai operasi komersial dari 1,5 juta galon per tahun fasilitas ethanol selulosa di Upton, WY pada kuartal terakhir tahun 2007.Biomassa Barat Fasilitas Energy saat ini mencapai hasil dari 40-45 galon per ton kering tulang. Ini adalah operasi komersial pertama etanol selulosa fasilitas di negara ini. Proses KL Energy menggunakan gangguan termo-mekanis dan proses konversi enzimatik. Bahan baku utama adalah kayu lunak, bagaimanapun, tes laboratorium telah terbukti proses KL Energi pada pomace anggur, ampas tebu, limbah padat kota, dan beralih rumput. [Sunting] fermentasi mikrobial Artikel utama: fermentasi Etanol Secara tradisional, ragi roti (Saccharomyces cerevisiae), telah lama digunakan dalam industri pembuatan bir untuk memproduksi etanol dari heksosa (6-karbon gula). Karena sifat kompleks dari karbohidrat hadir dalam biomassa lignoselulosa, sejumlah besar xilosa dan arabinosa (gula 5-karbon yang berasal dari bagian hemiselulosa dari lignoselulosa) adalah juga hadir dalam hidrolisat ini. Sebagai contoh, dalam hidrolisat dari brangkasan jagung, sekitar 30% dari total gula difermentasi xilosa. Akibatnya, kemampuan mikroorganisme fermentasi untuk menggunakan seluruh jajaran gula tersedia dari hidrolisat adalah penting untuk meningkatkan daya saing ekonomi etanol selulosa dan bahan kimia berpotensi bio-based. Dalam beberapa tahun terakhir, rekayasa metabolisme untuk mikroorganisme yang digunakan dalam produksi bahan bakar etanol telah menunjukkan kemajuan yang berarti. [27] Selain Saccharomyces cerevisiae, mikroorganisme seperti Zymomonas mobilis dan Escherichia coli telah ditargetkan melalui rekayasa metabolisme untuk produksi etanol selulosa.

Baru-baru ini, ragi rekayasa telah diuraikan secara efisien fermentasi xylose, [28] [29] dan arabinosa, [30] dan bahkan keduanya bersama-sama [31] sel Ragi adalah. Sangat menarik untuk ethanol selulosa proses karena mereka telah digunakan dalam bioteknologi untuk ratusan tahun, karena mereka toleran terhadap etanol tinggi dan konsentrasi inhibitor dan karena mereka dapat tumbuh pada pH rendah yang menghindari kontaminasi bakteri. [Sunting] Gabungan hidrolisis dan fermentasi Beberapa spesies bakteri yang telah ditemukan mampu konversi langsung dari substrat selulosa menjadi etanol. Salah satu contohnya adalah Clostridium thermocellum, yang menggunakan cellulosome kompleks untuk memecah selulosa dan mensintesis etanol. Namun, thermocellum C. juga memproduksi produk lain selama metabolisme selulosa, asetat termasuk dan laktat, selain etanol, menurunkan efisiensi proses. Beberapa upaya penelitian diarahkan untuk mengoptimalkan produksi etanol oleh rekayasa genetika bakteri yang fokus pada jalur yang memproduksi etanol