TINCIN DE UN FROTIS SANGUNEO

TINCIN GIEMSA
FUNDAMENTO Las tinciones hematolgicas utilizan azul de metileno y sus productos de oxi dacin como colorantes bsicos, combinndolos con la eosina como colorante cido. De este modo, obtenemos una tincin diferencial, es decir, una tincin que es capaz de discriminar entre las distintas estructuras celulares segn se tian stas con el colorante cido, con el bsico o con la mezcla de ambos. Utilizamos como colorante la mezcla de azul de metilen o y eosina propuesta por Giemsa. MATERIAL Frotis sanguneo Microscopio ptico. Puentes de tincin. Cristalizador Pipetas Pasteur. Frascos lavadores.

REACTIVOS Colorante en s olucin segn Giemsa Metanol. Aceite de inmersin.

PROCEDIMIENTO 1. Preparamos un frotis sanguneo segn la tcnica descrita con anterioridad. 2. Colocamos el frotis sobre el puente de tincin, en el cristalizador y en posicin horizontal. 3. Cubrimos el frotis con metanol durante 5 -10 minutos. Escurrimos y lo dejamos secar al aire. Con esto fijamos el frotis. 4. Cubrir con Giemsadiluda (3 gotas) durante 20 -30 minutos 5. Escurrimos y lavamos con agua. Dejamos secar en posicin vertical. 6. Observacin a microscopio: a. Eritrocitos color rosa b. Plaquetas color violeta c. Neutrfilos con ncleo violeta, citoplasma rosa y granulacin violeta rojizo.

TINCIN DE MAY GRNWALD GIEMSA

FUNDAMENTO Esta tcnica se basa en la accin complementaria de dos colorantes neutros y en la afinidad de los elementos celulares por los colorantes cidos o bsicos. Estos dos colorantes son MayGrnwald y Giemsa. Ambos colorantes son solubles en alcohol metlico y son, por lo tanto, inactivos: es el contacto del agua el que les da un poder colorante. Las sales se disocian entonces coloreando cido ( eosina) y bsico (azul de metileno). MATERIAL Frotis sanguneo Microscopio ptico. Puentes de tincin. Cristalizador Pipetas Pasteur. Frascos lavadores.

REACTIVOS Solucin de MayGrnwald y Giemsa. Agua destilada Aceite de inmersin.

PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. 4. 5. Preparamos un frotis sanguneo segn la tcnica descrita con anterioridad. Cubrir la extensin con 20 gotas de la solucin MayGrnwald durante 1 minuto. Aadir otras 20 gotas de agua y dejar actuar otro minuto. Retirar y cubrir con Giemsadiludo durante 15 minutos Lavar con agua, secar y observar a microscopio.

TINCIN PANPTICO RPIDO.

FUNDAMENTO Este mtodo de tincin diferencial es un sistema que ana la policroma y la calidad que proporcionan los mtodos clsicos (Giemsa y Wright) con una gran rapidez de ejecucin (15 segundos solamente). Frente a las tcnicas de tincin descritas anteriormente, donde el colorante se extenda sobre el frotis, sta presenta la peculiaridad de ser un mtodo de in mersin, donde el frotis se sumerge en la solucin colorante durante un tiempo determinado. MATERIAL Cubetas Frascos lavadores.

REACTIVOS Solucin n 1: Solucin alcohlica de triarilmetano. Solucin n 2: Solucin tamponada de xanteno Solucin n 3: Solucin tamponada de tiazina Agua destilada Aceite de inmersin.

PROCEDIMIENTO 1. En tres cubetas se disponen los colorantes solucin n 1, n 2 y n 3. 2. Realizar cinco inmersiones de un segundo en cada uno de los reactivos. Entre uno y otro reactivo, escurrir bien. 3. Secar y observar