METABOLISMO DE LOS COMPUESTOS NITROGENADOS

MVZ Cuauhtmoc Nava Cullar Introduccin El nitrgeno es un elemento sumamente importante para los organismo ya que forma parte de los aminocidos y los cidos nucleicos, por lo que su utilizacin debe ser optimizada los ms posible. Los aminocidos que sobrepasan las necesidades metablicas para sintetizar nuevas protenas y otras biomolculas, no pueden almacenarse como ocurre con los cidos grasos y la glucosa, por lo tanto son catabolizados. El nitrgeno que contienen es en su mayora excretado, el resto de la estructura es utilizado como fuente de energa. Parte del nitrgeno de los aminocidos degradados es utilizado para sintetizar las bases pricas y pirimidnicas. En este captulo se estudian las vas metablicas relacionadas con el catabolismo de los aminocidos, el destino del nitrgeno que contienen y la utilizacin del

esqueleto carbonado, as como, la sntesis y degradacin de las bases pricas y pirimidnicas

Transaminacin y desaminacin El grupo -amino (nitrgeno) de los aminocidos es separado del esqueleto de carbono, mediante el desarrollo coordinado de la transaminacin y la desaminacin oxidativa. Durante la transaminacin, el grupo -amino de los aminocidos proteicos, excepto lisina, treonina y prolina, se transfiere a un cetocido (esqueleto de carbono), en consecuencia se forma un nuevo aminocido y se libera el cetocido

correspondiente al aminocido inicial. Esta reaccin es catalizada por las enzimas aminotransferasas, tambin llamadas transaminasas, muchas de las cuales utilizan 1

-cetoglutarato como cetocido, por lo que tarde o temprano, el grupo amino de todos los aminoacidos es dirigido al glutamato. El piridoxal fosfato (PLP), el cual se forma a partir de la vitamina B6 (piridoxina), es el grupo prosttico de las aminotransferasas. El PLP se enlaza a la enzima y al sustrato formando lo que se conoce como base de Schiff. El grupo -amino es transferido al PLP crendose piridoxamina fosfato transitoriamente, posteriormente el cetocido aceptor toma el grupo amino de la piridoxamina fosfato, con lo que se genera el aminocido correspondiente y la piridoxamina fosfato vuelve a su estado original. Posteriormente, la desaminacin oxidativa del glutamato es catalizada por la glutamato deshidrogenasa. Esta enzima alostrica mitocondrial requiere de NAD o NADP como coenzima, es inhibida por el GTP y el ATP, mientras que el GDP y ADP la activan. As, una disminucin del nivel energtico incrementa la desaminacin. Mediante esta reaccin, el glutamato pierde su grupo amino en forma de amonio y libera su esqueleto de carbono como -cetoglutarato, esto ocurre en ambos sentidos; la glutamato deshidrogenasa tanto desamina al glutamato como lo sintetiza.

Transporte del amonio extraheptico al hgado El amonio generado en la desaminacin oxidativa es txico para las clulas, por lo que es convertido a urea en el hgado. Ya que todos los tejidos extrahepticos producen amonio, es necesario un sistema de transporte adecuado. La mayora utiliza a la enzima glutamina sintetasa para convertir el amonio en glutamina, producto atxico. La glutamina se trasporta por la sangre al hgado, en donde la glutaminasa la hidroliza y se libera el amonio. Por otro lado, dado que el msculo obtiene energa principalmente de la gluclisis, utiliza una ruta diferente, el ciclo de la glucosa-alanina. El piruvato que se genera en la gluclisis experimenta una transaminacin con glutamato, consecuentemente se forma alanina. El glutamato a 2

su vez ha obtenido su nitrgeno del amonio gracias a la glutamato deshidrogenasa. La alanina se transporta del msculo al hgado donde pierde su nitrgeno en forma de amonio mediante transaminacin y desaminacin. La transaminacin de alanina genera piruvato a partir del cual se sintetiza glucosa por gluconeognesis. La glucosa se libera a la sangre para dirigirse al msculo o para nutrir al cerebro. Este proceso cclico permite al msculo eliminar el amonio y tener glucosa disponible.

Ciclo de la urea Como ya se dijo, la acumulacin de amonio tiene consecuencias txicas. Por lo tanto se debe eliminar con la misma rapidez con la con la que se genera. Los animales acuticos eliminan directamente amonio gracias a que pueden captar y expulsar cantidades ilimitadas de agua. En cambio los animales terrestres necesitan trasformarlo en un compuesto que pueda excretarse sin que ello implique una prdida importante de agua. Las aves y los reptiles producen cido rico y los mamferos urea. La urea se forma a lo largo de una secuencia de cinco reacciones en el hgado, de la cuales cuatro forman un ciclo: 1) En la mitocondria, la enzima mitocondrial cabamoil fosfato sintetasa I, que tcnicamente no forma parte del ciclo de la urea, cataliza la reaccin limitante. Condensa amonio y bicarbonato para formar carbamoil fosfato, quien proporciona uno de los dos tomos de nitrgeno de la urea. Esta reaccin es irreversible y requiere de 2 ATP. En los eucariotas la carbamoil fosfato sintetasa II es citoslica, usa glutamina como donador de nitrgeno y esta involucrada en la sntesis de pirimidinas. 2) El grupo carbamoil del carbamoil fosfato es transferido a la ornitina formando citrulina. Esto ocurre dentro de la mitocondria gracias a la ornitina

transcarbamoilasa. La citrulina debe salir de la mitocondria para que pueda continuar el ciclo de reacciones. 3) La citrulina, en el citosol, se condensa con el aspartato produciendo argininsuccinato, el aspartato proporciona el segundo tomo de nitrgeno de la urea. La argininsuccinato sintetasa, responsable de la reaccin, requiere de dos enlaces de alta energa del ATP. 4) El argininsuccinato se convierte en arginina al liberar fumarato, con la

participacin de la argininosuccinasa. La arginina es el precursor inmediato de la urea. En el ciclo de Krebs el fumarato se transforma en oxalacetato, el cual por transaminacin se convierte nuevamente en aspartato. 5) Por ltimo la arginasa hidroliza a la arginina con lo que se restaura la ornitina y se libera la urea. La urea es excretada a travs de la orina y la ornitina es trasladada a la mitocondria, para que nuevamente reaccione con el carbamoil fosfato y el ciclo contine.

Destino de los esqueletos de carbono Los esqueletos de carbono (radicales carbonados) liberados durante la

transaminacin y desaminacin se transforman en

siete metabolitos, los cuales

pueden oxidarse hasta CO2 y agua produciendo ATP. De los que se producen en el hgado, algunos son usados como sustratos para la sntesis de glucosa y cuerpos cetnicos, dependiendo condicin energtica del organismo. Los aminocidos cuyos radicales carbonados se transforman en -cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato, oxalacetato o piruvato, originan glucosa, por lo que se denominan glucognicos. Aquellos que sus radicales carbonados se transforman en acetil-CoA o Acetoacetil-CoA originan cuerpos cetnicos y se llaman cetognicos. En condiciones fisiolgicas la mayor parte de los aminocidos originan glucosa, y slo unos cuantos cuerpos originan cetnicos. 4

El glutamato, la arginina, la glutamina, la histidina y la prolina producen -cetoglutarato. La isoleucina, la metionina, la treonina y la valina son generadores de succil-CoA. La fenilalanina y la tirosina generan fumarato. La asparagina y el aspartato producen oxalacetato. La alanina, cistena, glicina, serina, treonina y triptfano forman piruvato. La isoleucina, la leucina, la treonina y el triptfano

producen acetil-CoA. Por ltimo, la leucina, la lisina, fenilalanina, tirosina y el triptfano rinden acetoacetil-CoA. Los radicales carbonados de algunos aminocidos, como la isoleucina, la tirosina y el triptfano, pueden generar ms de un producto, por lo que son precursores tanto de glucosa como de cuerpos cetnicos.

Sntesis de nucletidos La mayora de los organismos pueden sintetizar todos los nucletidos de purina y pirimidina, en cantidades suficientes para satisfacer sus necesidades a partir del nitrgeno de algunos aminocidos y de la ribosa 5-P, a lo que se le llama sntesis de novo. Sin embargo, la mayora tambin los construyen a partir de los nuclesidos o las bases nitrogenadas obtenidas por la degradacin de los cidos nucleicos, que se realiza dentro las clulas o durante la digestin en el aparato digestivo. A esta ltima opcin se le llama ruta de salvamento o rescate. En los animales, la hidrlisis extracelular de los cidos nucleicos ingeridos constituye la principal forma de obtener las bases y los nuclesidos. El proceso es comparable a la digestin de las protenas. Primero las enzimas ribonucleasa y

desoxirribonicleasa pancreticas rompen los enlaces fosfodister del interior de las cadenas dando lugar a oligonucletidos. A continuacin las fosfodiesterasas atacan los extremos y producen mononucletidos. stos son absorbidos y posteriormente pierden su fsforo convirtindose en nuclesidos gracias a las

fosfomonoestearasas, tambin llamadas nucleotidasas. Otra enzima, la nuclesido 5

fosforilasa rompe el enlace glucosdico entre la ribosa y la base nitrogenada, mediante la adicin de fosfato inorgnico dando lugar a ribosa 1-fosfato ms la base correspondiente. La nuclesido fosforilasa tambin cataliza la reaccin en forma inversa, es decir, el primer paso en la sntesis de salvamento de nucletidos a partir de bases nitrogenadas libres. Cuando esto ocurre, el nuclesido producido puede fosforilarse por el ATP mediante una nuclesido quinasa. Estas enzimas no son universales, por ejemplo, los animales no contienen guanosina quinasa. La formacin de los nucletidos a partir de las bases nitrogenadas liberadas y del 5fosfo--D-ribosil-1-pirofosfato (PRPP), sintetizado en la clula, es otra alternativa en la ruta de salvamento, esta reaccin es catalizada por la fosforribosiltransferasa. El PRPP adems es un intermediario muy importante en la sntesis de novo de nucletidos de purina y pirimidina. En la sntesis de novo primero se forman los ribonucletidos y posteriormente los desoxirribonucletidos. El primer ribonucletido de purina totalmente formado es la 5monofosfato de inosina (IMP) o cido inosnico. Su doble anillo se va formando poco a poco sobre el PRPP, de sus cuatro tomos de nitrgeno dos provienen de la glutamina, uno de la glicina y otro del aspartato. Se requieren de cuatro ATP y de tetrahidrofolato. Este ltimo es una coenzima proveniente de la vitamina folacina. El IMP origina monofosfato de guanosina (GMP) y monofosfato de adenosina

(AMP) en vas separadas.

En el primer caso, el anillo de purina de la IMP se

hidroxila en una reaccin dependiente de NAD produciendo monofosfato de xantosina, que despus se convierte en GMP por una amidotrasferasa dependiente de glutamina y ATP. La sntesis de AMP involucra la transferencia de nitrgeno desde el aspartato. En primer lugar se genera adenilosuccinato como intermediario y a continuacin por eliminacin de fumarato se libera AMP. La energa que impulsa esta reaccin no proviene del ATP, sino del GTP.

El GMP y el AMP se convierten sus correspondientes trifosfatos a travs de dos reacciones de fosforilacin sucesivas. La conversin a difosfatos es catalizada por quinasas dependientes de ATP. La fosforilacin de ADP en ATP se produce principalmente en la fosforilacin oxidativa. Luego el ATP es el donador de fosfato para la conversin del GDP y otros dinucletidos, a sus formas trifosfatadas. La sntesis de novo de los ribonucletidos de pirimidina es diferente a los de purina. En este caso el anillo de pirimidina se sintetiza primero y por separado, posteriormente se une al PRPP para dar lugar al monofosfato de orotidina (OMP), a partir del cual se forman los otros nucletidos en forma secuencial. Los sustratos para la construccin de estos nucletidos son el carbamoil fosfato, aspartato y PRPP, el carbamoil fosfato se forma en los animales por la condensacin en el citosol de CO2 y el in amonio gracias a la carbamoil sintetasa II. ste y el

aspartato dan lugar al carbamoil aspartato que se transforma en dihidrooroato y finalmente en oroato, que es el pirimidina. primer metabolito que contiene el anillo de

Luego el oroato se une al PRPP producindose monofosfato de De

orotidina, el cual se descarboxila y genera monofosfato de uridina (UMP).

manera semejante a lo que ocurre con los nucletidos de purina, el trifosfato de uridina (UTP) se forma por fosforilacin del UMP, aunque en este caso se realiza en un slo paso con el gasto de 2 ATP. El trifosfato de citidina (CTP) se sintetiza a partir del UTP, el nitrgeno extra que contienen el anillo de citosina proviene de la glutamina, este paso requiere adems de la energa proveniente de un ATP. Los desoxirribonucletidos se forman a partir de los ribonucletidos mediante la reduccin de su ribosa catalizada por la enzima ribonucletido reductasa. En este proceso ADP, GDP, CDP y UDP son convertidos a correspondientes versiones reducidas: difosfato de desoxiadenosina (dADP), difosfato de desoxiguanosina

(dGDP), difosfato de desoxicitidina (dCDP) y difosfato de desoxiuridina (dUDP). Como es notorio en esta enzima no produce desoxirribonucletidos de timina, estos 7

se forman tanto de dUDP como de dCDP. El primer paso es la conversin de dUDP y dCDP a dUMP, lo cual se realiza por caminos separados. El segundo paso es la formacin del monofosfato de timidina (dTMP) a partir del dUMP, la enzima responsable es la timidilato sintetasa la cual requiere de 5,10 metilentetrahidrofolato como coenzima. Las versiones difosfato y trifosfato de este nucletido se forman gracias a posteriores fosforilaciones. Una vez sintetizados los nucletidos son utilizados para formar a los cidos nucleicos o a las coenzimas que ya se mencionaron, sino son utilizados se degradan y sus bases son convertidas en cido rico en el caso de las purinas y en -ureidopropionato en el caso de las pirimidinas.

Degradacin de las bases pricas y pirimidnicas Los nucletidos, como todas las molculas del organismo, desarrollan sus funciones durante un tiempo determinado al final del cual son degradados y dan lugar a la pentosa correspondiente, a fosfato y a bases nitrogenadas. El catabolismo de las bases pricas genera cido rico y el de las pirimidnicas produce urea. Los nucletidos AMP y GMP, o sus anlogos, pierden su grupo fosfato por accin de la enzima nucleotidasa con lo que se producen los nuclesidos adenosina y

guanosina. La adenosina es desaminada por la adenosina desaminasa y se convierte en inosina. A continuacin guanosina e inosina pierden su pentosa gracias a la nuclesido de purina fosforilasa, en consecuencia quedan libres las purinas guanina e hipoxantina respectivamente. Ambas se convierten en xantina por accin de las enzimas guanina desaminasa y xatina oxidasa, esta ltima tambin es se encarga posteriormente de transformar a la xantina en cido rico. El catabolismo de las purinas en los primates, aves y reptiles termina en el cido rico que se excreta. Sin embargo, la mayora de los mamferos oxidan en mayor medida el anillo de purina a alantoina.

En nitrgeno de las pirimidinas principalmente se libera como amonio el cual es convertido a urea. Los anillos son reducidos por el NADPH+H y posteriormente abiertos por hidrlisis. El resultado es -ureidopropionato (citosina y uracilo) y el

-ureidoisobutirato (timina), cuyos nitrgenos son eliminados en forma de amonio acompaados de dixido de carbono. Finalmente citosina y uracilo se convierten en alanina y timina en aminoisobutirato.

Molculas derivadas de los aminocidos Los aminocidos adems de constituir protenas son precursores de molculas sumamente importantes para el organismo. Las porfirinas que se forman a partir de la glicina son la base estructural del grupo hemo de la hemoglobina y la mioglobina las cuales transportan oxgeno y de los citocromos de la fosforilacin oxidativa los cuales trasportan electrones. A partir de glicina y Arginina se sintetiza fosfocreatina la cual es una forma de almacenamiento de energa en los msculos, ya que restaura rpidamente el ATP que se desfosforila durante la contraccin. La histamina se origina de la histidina, esta involucrada en la inflamacin, desencadena vasodilatacin, vasoconstriccin y movilizacin de clulas. La tirosina es el precursor de la melanina, las catecolaminas y las hormonas de la tiroides. La melanina es un pigmento del la piel y el pelo, que protege de los rayos ultravioleta. Las catecolaminas son un grupo de compuestos como la Dopamina, neurotrasmisor cerebral relacionado con las funciones motrices; la adrenalina, hormona secretada en situaciones de alerta que aumenta la glucemia, el ritmo cardiaco y la presin arterial; y la noradrenalina que desempea funciones

parecidas a la adrenalina. Las hormonas tiroxina y triyodotironina estimulan el metabolismo de los carbohidratos, lpidos y aminocidos.

La serotonina y la melatonina se forman a partir de triptfano. La serotonina es un neutrotrasmisor, induce el sueo, controla el apetito, inhibe la secrecin gstrica, aumenta el peristaltismo, estimula la secrecin de hormonas de la hipfisis, produce vasoconstriccin, disminuye la contraccin del corazn, aumenta la agregacin plaquetaria y es broncoconstrictor. La melatonina al igual que la serotonina modula el sueo, adems controla los ciclos reproductivos de acuerdo al fotoperido, recientemente se ha relacionado con el envejecimiento. El glutatin forma parte de un sistema de protege a las clulas contra la oxidacin; el glutamato, la cistena y la glicina son sus precursores.

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