ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA

Informe de Prácticas:
Micología General
ASIGNATURA :

Micología General

DOCENTE :

MSc. Gianina Llontop Barandiarán

ALUMNO :

Rómulo Aycachi Inga

CICLO :

2006 - II

Lambayeque, noviembre de 2006.

 PRÁCTICA Nº 01: MEDIOS DE CULTIVO

I.-INTRODUCCIÓN
Un medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes, en los que
crecen y se multiplican los microorganismos en el laboratorio, con el objeto
de aislar las diferentes especies en este caso de hongos, para luego
proceder a su identificación y llevar a cabo una serie de estudios
complementarios.
En los medios de cultivo empleados para la propagación de
microorganismos deben prevalecer condiciones adecuadas de humedad.
Por otro lado, un medio de cultivo debe tener una fuente de energía, de
carbono y de nitrógeno. De igual manera un pH (ligeramente ácido) y una
temperatura adecuada en un medio de cultivo son extremadamente
importantes para el crecimiento de los hongos.
Un medio de cultivo adecuado es aquel que contenga los elementos
nutricios esenciales en concentraciones adecuadas, la cantidad necesaria
de sal y el adecuado volumen de agua, se encuentra exento de sustancias
inhibitorias del organismo que se va a cultivar, que tenga la consistencia
deseada, el pH conveniente para el metabolismo del cultivo, y ser estéril.
Los medios de cultivo deben siempre almacenarse en atmósfera fría y
húmeda (refrigeración) para evitar su deterioro y su deshidratación.

II.- OBJETIVO
El propósito de la presente práctica es conocer las fórmulas de los medios
de cultivo y los materiales más utilizados en micología clínica.

III.-MATERIALES
 Para medios de cultivo
- Insumos (agar, agua destilada, glucosa, peptona, etc.)
 Para materiales empleados:
- Placas de Petri
- Tubos de ensayo
- Matraz
 - Probeta
- Balanza analítica
- Anzas, bisturí
- Mechero bunsen
IV.-PROCEDIMIENTO
Fórmula de algunos medios de cultivo para hongos:

Agar Sabouraud glucosado:

- Glucosa...................... 2.0 g
- Peptona...................... 10 g Se mezclan y se lleva a ebullición.
- Agar........................... 20 g pH: 5.6 –6.5. Este es el medio más

- Agua destilada............. 1000 ml utilizado, es el medio clásico para el

aislamiento de todo tipo de hongos.
Caldo glucosado:
- Peptona……….1.0g Su propósito es reactivar cepas
- Glucosa………. 2.0g deshidratadas. Es un elemento para
- Agua destilada... 100ml identificación de levadura del genero
Candida.

Medio de conservación:

- Agar........................... 20 g Permite conservar cepas por un

- Peptona...................... 30 g largo periodo de tiempo.
- Agua destilada............. 1000 ml

Medio arroz:
- Arroz........................... 1 g Estimula la esporulación del hongo.
- Agua destilada............. 2 ml Se recomienda de preferencia
utilizar un arroz superior. Evita el
pleomorfismo de los dermatofitos.
Agar almidón- arroz:
- Arroz........................... 2.0 g
- Agar........................... 2.0 g
- Agua destilada............. 1000 ml
Se hierve el arroz por 5 min, luego, colar en una gasa y en el líquido agregar
agar y se reparte en tubos de 3ml por cada uno y se lleva al autoclave. Ayuda a
estimular la producción de clamidosporas, blastosporas y pseudomicelio de C.
albicans.

Agar harina de maíz:

- Agar........................... 20 g Se somete a baño maría (60ºC por

- Harina de maíz............. 62 g 30 minutos) la harina de maíz con
- Glucosa............. ......... 20 g agua, luego se filtra con un gasa, y

- Agua destilada............. 1000 ml el filtrado se mezcla con el agar y la

glucosa. Este medio es utilizado en
microcultivo.

Agar Papa dextrosa: Se pela las papas y se corta en

- Papa ........................... 200 g trozos pequeños, hervir en 500 ml
- Glucosa....................... 20 g de agua por 30 minutos, filtrar y
- Agar........................... 20 g filtrado obtenido se mezcla con el

- Agua destilada ............. 1000 ml resto de ingredientes. Este medio

sirve para estimular la esporulación
y para conservación de cepas.

Caldo base (para zimogramas): Ajustar a pH 7, agregando el

- Peptona ........................... 1.0 g indicador rojo de fenol (0.02g.).
- Cloruro de sodio................ 0.5 g Luego agregar un carbohidrato en
- Extracto de carne............... 0.3g solución acuosa al 10%. Este medio

- Agua destilada............. 100.0 ml sirve para identificar al género

Candida según su poder
fermentativo a través del
Zimograma.
Reactivos:

KOH 10% : reactivo que permite disgregarlas celulas epiteliales

Azul de algodón: se usa en el examen directo de cultivo
Azul de metileno: se usa cuando se sospecha de pitiriacis
versicoides
Azul de metileno ………...3g
Alcohol …………… ….30.0ml
Agua destilada ………. 70.0ml
Antibiótico:

Cloranfenicol: se usa para medio agar saboroud

cloranfinicol ……………. 250mg
Alcohol ………………… 10ml

Una vez preparado se coloca 2 ml en un litro de agar saboroud,el

cloranfenicol se especialmente para que elimine las bacterias y esto
permite la proliferación del hongo esto porque la muestra viene mixta.
A más concentración se usa menor cantidad de antibiotico .
Se usa porque es de amplio espectro tanto en bacterias gram positivas
como gram negativas.

V. Resultados:
Preparación De Agar Sabouraud Glucosado

Glucosa Peptona Agua destilada

Agar

Matraz con
ingredientes
pesados en
balanza
 Dejar enfriar y
ajustar el pH

Llevar a
Matraz taponado autoclave y
con algodón y luego a estufa
cubierto con una para control de
tapa de papel esterilidad

VI.-Conclusiones:

- Se reconoció las fórmulas más utilizadas para la preparación de medios de cultivo

así como los materiales más utilizados en la Micología clínica.

VII.-Referencias:
- Facultad de Ciencias Biológicas (1987). Medios de Cultivo en
Microbiología: Manual de Laboratorio. 3º edic. Edit. Trilcem S.A.
Lima.
 PRACTICA No 02: TOMA DE MUESTRA

I. Introducción:
Las tomas de muestra son de suma importancia para el diagnóstico por
examen directo y cultivo como aislamiento primario.
Para realizar una buena toma de muestra, se deben tener en cuenta las sgtes.
consideraciones:
1. Se debe preguntar al paciente si es que esta recibiendo tratamiento
antimicótico.
2. Si la respuesta es positiva el tratamiento debe ser suspendida por los
menos 5 días.
3. Para el caso de dermatofitosis y micosis subcutánea desinfectar la zona
con alcohol de 70%.
4. La muestra debe ser representativa por Ejm: En Tiña corporis se debe
conocer los síntomas y sospechar de micosis . Esto se evidencia por
que los bordes son definidos y erimatosos rojisos.
5. La cantidad de muestra debe ser suficiente porque se usa para examen
directo y para el cultivo.

II. Objetivo:
- Adiestrar al alumno en las formas correctas de la toma de muestra para
el examen directo y cultivo para aislamiento primario.

III. Procedimiento:

Toma de muestra para dermatofitos

Muestra: Escamas de piel.
Examen directo : con KOH 10%
Siembra: en agar soboraud glucosado
Incubar: al medio ambientes de 2 a 3 semanas.

Toma de muestra para pelo

 Muestra: cabellos cortados de 1 cm con pinzas estériles. Extraer 8 a 10
cabellos de la raíz en placa petri estéril.
Sembrar: en agar saboraud.
Incubar: en el medio ambiente de 2 a 3 semanas.

Toma de muestra para uñas

Muestra: escamas del lecho ungeal o placa. Realizar raspado con hoja
de bisturí de primer uso.
Examen directo: con KOH 10%
Sembrar: en agar saboraud.
Incubar: en el medio ambiente de 2 a 3 semanas.

Toma de muestra para Micosis Profundas

1. Mucosas:
Mucosas oral: La muestra se obtendrá con hisopo o bisturí de punta
roma ambos estériles.
Mucosa vaginal: La muestra se obtendrá con hisopos una vez
obtenida la muestra el hisopo es intrododucido en un tubo estéril .Si el
procedimiento es largo colocarlo en solución salina fisiológica (2ml) y
además la toma debe ser duplicada, esto porque con uno se hace
examen directo y el otro sirve para el cultivo siembra.
Siembra: Agar saboraud glucosado
Incubación: en el medio ambiente por 2 semanas.

2. Muestras bronquiales:
Muestra: Para obtener la muestra es necesario una desinfección bucal
con lugol al 1% luego se procede a tomar el esputo para esto se debe
hacer una inspiración profunda , fuerte y tociendo. Tomar la muestra en
un frasco estéril.
Examen directo: se colorea con KOH.
Siembra: Agar saboraud glucosado.
Incubación: A temperatura ambiente por 4 semanas.

3. Líquido cefalorraquídeo:
 Realizar una Punción Lumbar: Tomar 5ml de líquido cefalorraquídeo y
centrifugar a 3000rpm durante 30 minutos.
Examen directo: a partir del sedimento, se realiza con KOH y tinta
china.
Siembra: Agar saboroud glucosado
Incubación: durante 2 semanas e temperatura ambiente

4. Orina
Muestra: tomar 40ml de orina y centrifugar a 3000rpm por 10 minutos.
Examen directo: a partir del sedimento, se realiza con KOH y tinta
china.
Siembra: Agar saboraud glucosado.
Incubación: todas las muestras deben incubarse a dos temperaturas a
medio ambiente y a 37 oC para que el hongo este acostumbrado.
Esto por 4 semanas.

Toma de muestras para Micosis Subcutanea

Muestra: Tomarla de abscesos cerradas, fístulas y úlceras.

Desinfectar la zona con alcohol de 70%.
Toma de muestra: Por punción y aspiración se inyecta 2ml de solución
salina fisiológica y se aspira 4ml.
De esta muestra se hace examen directo.
Siembra: Agar Saboraud glucosado por duplicado.
Incubar: A temperatura ambiente por 4 semanas

Toma de muestra de Líquidos Corporales

- Sangre
- Líquido Ascítico
- Líquido Pleural

Punción aspiración: Se realiza con solución salina estéril mas

anticoagulante esto para muestras no purulentas.
 Punción drenaje : Se realiza en un tubo tapa rosca. Esto para muestras
purulentas.
Muestra purulentas: se realiza el examen directo y luego se siembra en
agar saboraud.
Muestra no purulenta: hay que centrifugar, la centrifugación tiene
propósitos de concentración del hongo, se realiza un examen directo y
luego se siembra.
Para ambos casos por duplicado a temperatura ambiente y a 37oC por 4
semanas.

IV. Referencias:
- Microsoft ® Encarta ® 2007. © 1993-2006 Microsoft Corporation.
Reservados todos los derechos.
 PRÁCTICA No3: DIAGNÓSTICO DE MICOSIS
SUPERFICIALES
Pitiriasis Versicolor y Piedras

I. TOMA DE MUESTRA
a) Pitiriasis versicolor:
Muestra: Escamas de piel obtenidos por raspados con hojas de bisturí de
primer uso en viales , placas o con cinta adhesiva. No observar limpieza
Síntomas: Manchas pequeñas de color blanco a nivel del tronco anterior y
posterior.

b) Piedras: existe 2 tipos

Muestra: Cabellos
- Piedra blanca: Cabellos con nódulos de color blanco y fáciles de
desprender pero con mayor frecuencia en barba y axila.
- Piedra negra: Cabellos con nódulos oscuros y difíciles de
desprender.
Ambas muestra obtenerlas en placas ,viales o sobres estériles.

II. OBJETIVO
- Diagnosticar la P. versicolor mediante examen directo y las Piedras por
examen directo y cultivo.

III. MATERIAL
- Escamas de piel - Pitiriasis
- Cabellos – Piedras

IV. PROCEDIMIENTO
1. Colocar las escamas de piel, pelos o cultivos en una gota de KOH
depositada de antemano en el centro de portaobjeto.
2. Luego cubrir con laminilla y observar con objetivo de mediano aumento
 3. Para el caso de Pitiriasis versicolor si se ha tomado la muestra con cinta
adhesiva colocar esta en una gota de azul de metileno.

V. RESULTADOS
a) Pitiriasis versicolor
Técnica de
M. furfur M. ovali.
Diagnóstico
Examen Directo. Células redondas agrupadas en racimos y Células ovaladas con
(escamas) fragmento cortos en micelio. filamentos más largos
Cultivos Va a formar una colonia levaduriforme Colonia levaduriforme, que
que con el tiempo se oscurece con el tiempo oscurece.
Tinción Gram Se hace un gram y son gram positivos Son Gram positivos.
Levaduras ovaladas y
Cultivo. Van a formar colonias redondas y grandes. pequeños gemantes.

b) Piedras
Piedra Blanca Piedra Negra
Examen Directo Veremos nódulos formados por artrosporas Nódulo formado por un tejido
o hialino. organizado oscuro.
Cultivo. Formado por colonias levaduriformes, Colonia de color café oscuro.
aspecto seco y de color crema. Y de crecimiento lento.
Examen directo Micelio tabicado y oscuro
de cultivo Micelio artrosporado y cultivo hialino. pigmentado.

VI. OBSERVACIONES:

PRÁCTICA No4 Y No5: DIAGNÓSTICO DE

DERMATOFITOS
I. Introducción
Los dermatofitos son hongos que se nutren de la queratina de la piel, uñas y
pelos, ocasionando enfermedades conocidas como dermatofitosis, estas, si no
se tratan a tiempo pueden volverse crónicas y además son muy resistentes al
tratamiento; de ahí la importancia de un diagnóstico temprano.

II. Objetivo
- Diagnosticar dermatofitos por examen.directo.

III. MATERIAL
- Escamas de piel y de uñas.
- KOH al 10%
- Láminas
- Laminillas
- Mechero bunsen
- Microscopios

IV. PROCEDIMIENTO
A) Condiciones para toma de muestra
- En el caso de que la persona esta en tratamiento suspender al menos
cinco días antes.
- Eliminar infección secundaria por bacterias.
- Si se trate de escamas de piel realizar con hoja de bisturí de primer uso
pero colectar de la periferia puesto que es la zona de la inflamación por
ser sitio de mayor concentración de los hongos.
- Si es de uña, desinfectar la zona con alcohol al 70% y colocar algodón
humedecido sobre la uña por 3 a 5 minutos para contribuir al
reblandecimiento de placa ungueal, retirar la placa con ayuda de un
cortaúñas y realizar la extracción con hojas de bisturí de primer uso o
realizar el raspado del lecho ungueal
- Ambos muestra recepcionarse en placa de petri o vial estéril.
B) Examen directo
- Sobre una lámina porta objeto colocar la gota de KOH al 10%
- Con asa de siembra coger una pequeña cantidad de muestra y depositar
sobre la gota, cubrir con laminilla
- Dejar actuar por unos minutos.
- Observar a objetivo de 40x ( para disolver la queratina con la luz).

V. RESULTADO

- La muestra procede de escamas de uña y es positiva se observará hifas

tabicadas diferentes tanto en su longitud, forma y tamaño.
 PRACTICA No6: MÉTODO DE ESTUDIO PARA LA
IDENTIFICACIÓN DE DERMATOFITOS: CULTIVO

I. Introducción
Una vez que se ha determinado la presencia de hongos como hifas de una
muestra se debe llevar a cabo el cultivo de los mismos para poder identificar el
agente etiológico.
No basta determinar la presencia de hongo en examen directo sino que el éxito
en un 100% de la identificación radica en el cultivo.
El cultivo puede ser negativo por las siguientes causas:
1. Se debe a una mala toma de muestra.
- No hubo desinfección de la zona
- No se tomo del lugar adecuado.
- No fue suficiente.
- No fue representativa.
2. Infección bacteriana asociados.
3. El paciente en el momento de toma de muestra estuvo siendo tratado.

II. Objetivo
- Aislamiento primario de dermatofitos.

III. Material
- Escamas de piel o uña
- Agar sabouraud glucosado mas antibiótico
- Tubo estéril (15 x 150 mm)
- Alcohol absoluto
- Asa micológica
- Mechero bunsen

IV. Procedimiento

Preparación del medio mas antibiótico

 1. Disolver una cápsula de cloranfenicol de 250mg en 10ml de alcohol
absoluto.
2. A un litro de medio disuelto y a una temperatura corporal agregarle 2ml
de la solución del antibiótico al medio.
3. Distribuir el medio en tubos (15 x 150) y dejar enfriar en plano inclinado.
4. Comprobar esterilidad del medio en control de calidad (dejar 4 a 5
semanas) .
Siembra de la muestra : Llevar a cabo la siembra por punto y esterilizar bien
el asa
Incubación: Se realizará a temperatura ambiente 25oC a 27oC durante 2 a 3
semanas.

V. Resultados
- Al cabo del tiempo de incubación, una vez obtenida la colonia, realizar el
estudio de las características macroscópica y microscópica.

Siembra del microcultivo

 PRACTICA No7: ESTUDIO MACROSCÓPICO DE
DERMATOFITOS

I. Introducción
A partir de los cultivos obtenidos en Agar Saboraud glucosado se puede
identificar las especies más frecuentes de los dermatofitos teniendo en cuenta
las características macroscópicas del cultivo.
Los dermatofitos son hongos hialinos que forman colonias de diferentes colores
(blanquecinos, amarillentas, marronáceas ), pero si bien es cierto que las
características de color de la colonia ayuda a la identificación , son las
características microscópicas las que determinan este estudio.
Para la identificación de dermatofitos es necesario contar con una colección de
cepas de las especies más frecuentes para realizar dicha identificación por
comparación.
Para la conservación de la cepa se presentan dificultad debido al fenómeno del
pleomorfismo el cual se presenta con la resiembra continua este fenómeno
esta relacionado con la pérdida de de su capacidad de esporulación de la
colonia , esta pierde su color y al final acaban formando un micelio compacto.
Existen medios que evitan el pleomorfismo especialmente los que poseen baja
concentración de azúcar.
La técnica de Castellani que consiste en mantener una densa suspensión de
hongos en agua destilada estéril a temperatura ambiente. Los tubos deben
estar sellados a herméticamente.

II. Objetivo
- Familiarizarse con las características culturales de las principales de los
Dermatofitos para así describir las características culturales de las cepas
obtenidas en un aislamiento primario.

III. Material
- Cultivo puro o cepa.
 IV. Procedimiento
- Llevar a cabo una resiembra de cepa en Agar papa dextrosa (PDA) para
su conservación.
- Observar sus características culturales.

V. Resultados:

Aspecto del Tiempo de

DERMATOFITO Color Aspecto anverso
reverso desarrollo
T. rubrum Blanco Algodonoso Pigmento rojo púrpura 14 días
Pulverulenta,
Amarrillo parduzco, o
granulosa, yesosa
T. mentagrophytes Blanco o crema ámbar, o marrón, o rojo 7 a 10 días
zoofílicos, algodonosa
castaño.
antropofílicos.
Amarillo
inicialmente Placa poco pulverulenta Rojo caoba
T. tonsurans crema, grisácea inicialmente y plegada inicialmente rojizo 14 días
o marrón posteriormente. oscuro después.
posteriormente.
Amarillento o
E. flocosum Finamente velloso Amarillo azufrado 10 a 14 días
verde oliva
Pigmento naranja
M. canis Blanquecina Poco elevado, escaso 6 a 10 días
amarillo o marrón
Plana finalmente
M. grypseum Canela granulosa y Canela o crema 6 días
pulverulenta.

PRACTICA Nº 8:
 I. Introducción:
En los dermatofitos existen diferentes estructuras como clamidosporas y
estructuras como hifas en espiral o raqueta. No obstante, para el diagnóstico
definitivo nos ayuda la forma de las macroconidias y la disposición de las
microconidias. Cabe mencionar que en un primocultivo estas estructuras estás
ausentes (sobre todo si se siembran en medios con inhibidores). Se debe
resembrar la cepa en un medio carente de inhibidores (p.ej. agra papa
dextrosa) y a partir de este repicar un microcultivo.

II. Objetivo:
- Determinar las estructuras microscópicas de los dermatofitos en un examen
directo.

III. Materiales:
- Cepas de dermatofitos obtenidos con un aislamiento primario.
- Líquido de montaje (se recomienda azul de Amann).
- Láminas y laminillas
- Asa micológica
- Mechero bunsen

IV. Procedimiento:
- Se procede con el montaje de la muestra usando el colorante adecuado.
- Se pasa a la observación.

V. Resultados:

Hifas
HONGO Macroconidia Microconidia
Vegetativas
Piriformes con forma
Generalmente
de lágrimas y
ausentes. Alargadas,
T. rubrum dispuestas Ausentes
con varios lóbulos o
lateralmente en las
espacios
hifas
Alargadas, en forma Abundantes,
T. mentagrophytes de mazo, con varios redondeadas, En espiral
lóbulos o espacios. formando grupos.
T. tonsurans Alargadas, pero de Abundantes, de Abundantes
extremos curvos, con mayor tamaño y clamidosporas
 algunos en forma de e hifas en
varios lóbulos.
grupo. raquetas.
En huso, de paredes
gruesas y rugosas,
M. canis Ausentes
extremos afilados. De
6 a más lóbulos.
En huso, paredes
M. gypseum lisas, extremos Ausentes
redondeados
En clava, de 3 a 4
E. flocosum No hay No hay
lóculos
 PRACTICA Nº 9: ESTIMULACION DE LA
ESPORULACION

I. Introducción:
Una vez hecho el examen directo del primocultivo y no se observaron
estructuras microscópicas que ayudan a la identificación de los
dermatofitos, debemos recurrir a las técnicas especiales, tal es el caso del
microcultivo, en la cual los dermatofitos desarrollarán.

II. Objetivo:
- Identificación de dermatofitos mediante la técnica del microcultivo.

III. Materiales:
- Cepa
- Equipo de microcultivo
- Agua destilada estéril
- Agar Sabouraud glucosado (1 cm cada lado)
- Pinza y espátula estéril
- Mechero bunsen

IV. Procedimiento:
- Se sigue el procedimiento típico del microcultivo.

V. Resultados:
 PRACTICA Nº 10: ZIMOGRAMA O
FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS

I. Introduccion:
La identificacion de levaduras del género Candida mediante el proceso de
fermentación de carbohidratos.

II. Materiales:
- Cepa problema
- Carbohidratos: tubos servidos con carbohidratos conteniendo
campanas de Dirham. Deben ser preparados al 10%.

III. Procedimiento:
- Preparación de los carbohidratos:
o Glucosa, lactosa, sacarosa, maltosa.
o Preparados al 10%.
- Tubos con 9 ml de caldo base conteniendo campana de Dirham
invertida.
- A los tubos con caldo base agregar 1 ml del carbohidrato.
- Sembrar la cepa problema.
- Incubar a 37 ºC por 24 horas.

IV. Resultados:
- Presencia de gas (se lee) en las campanas de Durham.
- Se leerá fermentación de los carbohidratos (se evidenciará por el viraje
del medio).
PRACTICA Nº 11: IDENTIFICACION DE Candida
albicans

I. Introducción:
Esta se lleva a cabo por observación de examen directo de clamidosporas
(otras especies por fermentación)
II. Objetivo:
- Identificación de C. albicans estimulando la producción de clamidosporas
en un medio pobre de carbohidratos.
III. Material:
- Cepa problema
- Agar almidón arroz (servido en placa o lámina portaobjeto).
- Placas de Petri estéril.
- Equipo de microcultivo.
- Asas en anillo y en punta.
- Mechero bunsen.
- Agua destilada estéril.

IV. Procedimiento:
- Siembra en placa
o La placa servida con agar almidón arroz dividirla en
cuadrantes y en cada cuadrante sembrar una muestra y se
practican tres surcos no muy profundos, se cubren con
laminilla y se incuban por 24 horas a temperatura
ambiente.
- Siembra en lámina
o El agar almidón arroz servido 3 ml en tubo diluido, se vierte
sobre la lámina portaobjetos del equipo de microcultivo o
imaginariamente se divide la lámina en dos y en cada
extremo se siembra por estria con asa en punta. La cepa
problema, se cubre con laminilla y se incuba a temperatura
 ambiente por 24 horas (se le agrega agua antes de
incubar).

V. Resultados:
- Directamente se lleva a observar al microscopio con 40x (placa).
- Siembra en lámina: se observa en microscopio a 40x.
- La presencia de células redondas de doble pared y un pseudomicelio
identifican a C. albicans (clamidosporas).
 PRACTICA Nº 12: MICOSIS SUBCUTÁNEAS Y
SISTÉMICAS

I. Introducción:

II. Objetivo:
- Reconocimiento de las características de los hongos causantes de
micosis subcutáneas y sistémicas.

III. Materiales:
- Microcultivos coloreados con azul de lactofenol.

IV. Resultados: