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TP BIOCHIMIE

1re STL BGB

DOSAGE DE L'AZOTE D'UN LAIT PAR LA MTHODE DE KJELDAHL


1 talonnage d'une solution de soude (NaOH) par une solution d'acide sulfurique talonne. CNaOH = 0,1 mol/L CH2SO4 = 0,05____ mol/L Indicateur color utiliser : phnolphtaline. 2 Minralisation Dans un tube de minralisation, introduire : Vlait = 5 mL de lait

6 g de catalyseur de minralisation 15 20 mL d'H2SO4 concentr (distributeur automatique) Verser lentement avec prcaution l'acide le long de la paroi du matras et en agitant par rotation douce. Chauffer dabord doucement puis augmenter progressivement le chauffage jusqu bullition douce. Agiter de temps en temps. Poursuivre le chauffage pendant au moins 30 minutes aprs l'obtention dune solution limpide. La minralisation dure peu prs deux heures et a t effectue avant la sance de TP . Laisser refroidir le matras.

3 Montage de l'appareil distiller

Monter l'appareil distiller et le laver en distillant environ 200 mL d'eau distille : cette opration, outre le lavage, permet de vrifier le bon fonctionnement du montage.

Kjeldahl

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A PARTIR DE CETTE TAPE, LES LUNETTES DE SCURITS SONT OBLIGATOIRES JUSQU' LA FIN DE LA
MANIPULATION

4 Entranement de l'ammoniac Dans le tube de minralisation parfaitement refroidi, introduire en agitant : 30 50 mL d'eau distille

1 de sa capacit. 3 Transvaser quantitativement le contenu du tube de minralisation dans un ballon long col sans oublier d'y introduire galement les eaux de rinage. Ajouter 2 ou 3 billes de verre. Introduire quelques gouttes de phnolphtaline et ajouter avec prcaution 55 90 mL de lessive de soude (le contenu du ballon devient rose quand la soude est en excs). 2 Le ballon doit tre peu prs au de sa contenance. 3 Adapter le ballon long col et faire plonger l'allonge boule dans le bcher comme dans l'tape n3. Faire fonctionner le rfrigrant eau et distiller environ la moiti du contenu du ballon en chauffant modrment et rgulirement. Le distillat est recueilli dans le bcher contenant le volume Vexcs = 50 mL dune solution dH2SO4 0,05___ mol/L. Ajouter de l'eau distille, pour que le tube soit rempli peu prs au

5 Dosage de l'ammoniac par mthode indirecte Lammoniac a t recueilli dans un excs connu dacide sulfurique. Lexcs dacide sulfurique est dos par une solution talonne de soude CNaOH 0,1 mol/L, en prsence de phnolphtaline. 6 Expression des rsultats Donner les rsultats de l'talonnage sous forme d'un tableau. Dterminer la concentration molaire de la solution de soude (1 %). Donner les rsultats du dosage sous forme d'un tableau. Dterminer la concentration molaire en azote N du lait (5 %) puis la concentration massique en azote du lait.
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