Universidad Andrs Bello Facultad de Ciencias de la Salud Departamento de Ciencias Biolgicas Laboratorio de Biologa Celular BIO 035

TRABAJO PRCTICO n6: Mitosis, Meiosis y Fecundacin

Alumnos: Eduardo Valderrama Emerson Paineman Seccin: 12 Profesores: Carolina Klages

-abril, 20111

Introduccin: Segn el dogma central para que surja cualquier clula debe existir una preexistente, que es la forma en que la clula la unidad bsica de la vida, determina que de un ser vivo se genere otro ser vivo. Normalmente una clula se reproduce mediante una secuencia ordena de acontecimientos en los que duplica su contenido y luego se divide en dos. Este ciclo celular es el mecanismo esencial de reproduccin de las clulas. La divisin celular en clulas Eucariontes considera varias etapas, la interfase, etapa previa a la divisin en que se prepara la clula para dividirse, y la mitosis, la divisin propiamente tal. Despus de una divisin celular las clulas hijas generadas comienzan la interfase de un nuevo ciclo en la etapa G1, en la que ocurre una actividad biosinttica, luego pasa a la etapa S, en la cual la clula sintetiza ADN, que termina cuando el contenido de ADN se ha duplicado y los cromosomas se han replicado, continuando con la etapa final de la interfase, G2, en esta etapa se condensan los cromosomas ya duplicado en espera para la divisin celular. Despus de la interfase la clula se encuentra lista para la nueva divisin, en la etapa Mitosis. Esta gran etapa de divisin se divide en cuatro fases; primero, la profase, en que la cromatina se condensa para formar los cromosomas, los centriolos se ubican en los polos opuestos de la clula, y la envoltura nuclear se rompe, terminado esta etapa. La segunda fase la metafase, en que los cromosomas se alinean al centro como ecuador celular gracias al huso mittico. En la tercera fase, anafase, ocurre el movimiento de los cromosomas hacia los polos, y la cuarte fase, telofase, en la que se forma la envoltura nuclear, para finalizar ocurre la divisin citoplasmtica originando a dos clulas genticamente iguales entre s. La meiosis es la forma en que a partir de las clulas diploides (poseedoras de dos series de cromosomas o 2n) se dividen para formar gametos haploides (poseedoras de una serie de cromosomas o n), ovulos en hembras y espermatozoides en machos que son las clulas sexuales. En la fecundacin se fusionan los gametos de dos individuos (macho y hembra) de la misma especie formando un huevo o cigoto. La meiosis se produce en dos divisiones nucleares y citoplasmticas, nombradas como meiosis I y Meiosis II. En la Meiosis I los ms importante es que ocurre la recombinacin gentica y permutacin cromosmica, es decir migracin de cromosomas a los polos de manera aleatoria, esto genera variabilidad gentica. En la meiosis II muy parecida a la mitosis, en la que forman clulas con una cromatida (n). Cmo se comportan los espermatozoides en presencia de un ovulo?, cmo se diferencian las clulas en distintos estados de maduracin en un tejido sea ovrico o testicular?, qu estructuras las rodean? Y de manera independiente como gameto aislado cmo se comportan y que estructuras se presentan? Objetivos: Con esta actividad esperamos Reconocer las distintas etapas la divisin celular, los procesos de fecundacin, gametognesis y morfologa de de gametos, tejidos ovrico y Testicular, aplicando conocimientos de microscopia, las observaciones pertinentes se esquematizaran.
2

Materiales y mtodos:
Se dio inicio a la actividad preparando las primera muestras de observacin de la extraccin de gametos de choritos vivos lo cuales se mantuvieron en un acuario con agua de mar filtrada con oxigenacin. Para tener acceso a las gnadas se realizaron cortes de las placas corneas con un bistur en su extremo aboral. Se identificaron las gnadas por color, de los machos de color amarillo, de las hembras de color caf oscuro. Se tomaron muestras de gametos presionando suavemente, aspirando la solucin acuosa que sala de las gnadas con una pipeta Pasteur, depositndolo en un vaso pequeo. Esto se realizo para ambos casos hembras y machos, en distintos vasos. A cada vaso se le adiciono 2 ml de agua de mar filtrada, con el objeto de re suspender y as evitar deshidratacin. Utilizando 2 gotarios se prepararon 3 muestras (portaobjetos excavados rotulados), el primero conteniendo gametos femenino (1 gota), el segundo con gametos masculinos (1 gota) y el tercero una gota de una solucin de gametos femeninos y masculinos (procurndose el contacto entre ellos en una solucin previamente realizada en un vaso precipitado pequeo). Sobre las muestras se deposit un cubreobjetos y se observaron en el microscopio a cada muestra, luego se realizaron los dibujos esquemticos de lo observado. Se realiz una observacin de una preparacin permanente de tejido vegetal de allium cepa (L.), se identificaron clulas en distintos etapas de mitosis, se realizo un dibujo esquemtico de lo observado. Aplicando los conocimiento de microscopia se observaron dos preparaciones permanentes de tejidos se rattus novergicus (berkenhout), un tejido ovrico y un tejido testicular, se identificaron distintas etapas de maduracin de clulas germinales, se describieron sus caractersticas principales en un dibujo esquemtico. La ltima actividad de observacin se realiz con preparaciones permanentes de clulas espermatozoides de bos taurus (linnaeus) y espermatozoides humanos. Se adhiri aceite, se observo y se realizo un dibujo esquemtico de estructuras caractersticas con los 2 tipos de espermatozoides.

Resultados:
Durante las observaciones se observaron distintas caractersticas que se detallan y esquematizan a continuacin:
Fig1. Espermatozoides de choritos observados en microscopio a 40x

La observacin realizada en la muestra de Espermatozoide de choritos, Se puede observar una gran cantidad de espermatozoides (ms de 100). Estos tienen un color verde claro brillante en su cabeza y tienen gran movilidad

Fig.2 ovulo de choritos observados en microscopio a 40x

La observacin realizada en la muestra de vulos de choritos, nos ha sido posible distinguir un ovulo sin movimiento, rodeado por una capa externa negra y una parte interior de color caf que son distinguidas como Zona Pelcida (a) y masa celular (ovulo) (b), respectivamente.

Fig.3 Fecundacin, entre ovulo y espermatozoide observados en microscopio a 100x

En la observacin de la muestra de solucin de gametos, se diferencia un ovulo central y muchos espermatozoides que se mueven alrededor rpidamente, haciendo muy difcil realizar un esquema de estos, el cual es estimado. Se ve la gran diferencia de tamaos del gameto femenino, ms grande, con respecto al gameto masculino, ms pequeo. No es posible observar una fecundacin como tal, pero es factible por la cantidad de espermatozoides alrededor.

Fig. 4. tejido vegetal de allium cepa (L.) observados en microscopio a 40x

En este tejido vegetal es posible observar clulas separadas por sus paredes celulares, algunas asociadas con su respectivo ncleo, sin fase de divisin aparente y otras en distintos fases de divisin celular, a, b, c, d, e, y f.

Fig. 5. tejido de ovario de rattus novergicus (berkenhout) hembra 10x de muestra permanente

En esta muestra son distinguibles algunas partes del tejido como: a. b. c. d. e. f. g. Epitelio germinal Folculos primarios Folculos secundarios Folculos Primordiales Ncleo Clulas foliculares Zona Pelcida

En los folculos se logran apreciar algunas diferencias.

Figura6: tejido de testculo de rattus novergicus (berkenhout) macho 40x de muestra permanente

En la observacin de la muestra de es posible distinguir unos de dominios separados por una pared de clulas (clulas mixoides) , 3 para ser exactos identificados como tbulos seminferos (a), En el tbulo puede ver un epitelio seminfero (b) de varias capas, se identifica un lumen (c) y espacios intertubulares (d). Y otras estructuras e, f y g que corresponden a clulas.

Dibujo de espermio humano 100x de una muestra permanente

Se observan 3 estructuras conocidas: Cabeza (a), la cual tiene una parte superior blanca y un inferior caf. Un Segmento intermedio (b), bastante difcil de apreciar y una Cola o Flagelo (c) es un filamento que puede vibrar, batir o girar impulsando al espermio.

fig.: espermio de bos

taurus (linnaeus) Al igual que el espermio humano se observen las 3 estructuras ya mencionadas. Cabeza (1), cola (2), segmento intermedio (3). Se observa que estos espermios son muy semejantes a los espermios humanos.

Discusin: Cuando observamos los espermatozoides de choritos, observamos su gran movilidad propia e independiente o motilidad, a la vez esta movilidad es vibrtil en desplazamiento. Estos impulsos que hacen que se muevan se logran gracias a un flagelo o cola que tiene el espermatozoide que est constituido por un axonema (estructura interna de eje o axial) rodeado por las fibras externas densas (uno por cada doblete) que intervienen en el movimiento del flagelo. Por fuera de estas fibras, existen otras estructuras rodeando el complejo axonema-fibras: la vaina mitocondrial, que est constituida por mitocondrias dispuestas en hlice que proporcionan la energa necesaria para el movimiento del flagelo. El ovulo no tiene movimiento, al no tener estructuras que le ayuden a moverse, el proceso de fertilizacin es un proceso que puede durar ms de 20 minutos, es necesario esperar a que el espermatozoide atraviese ayudado por el contenido de vescula del acrosoma, que es la parte superior de la cabeza, se liberan enzimas hidroliticas que ayudan a que en ncleo llego finalmente a la membrana plasmtica del ovulo, este ovulo pasa a llamarse ovulo fertilizado. Anteriormente observamos que en el tejido de allium cepa existan gran cantidad de clulas en divisin en la allium cepa (L.) Esta regin debiese corresponder a la de raz. Aunque el corte de la raz de cebolla captura muchas clulas en diferentes fases del ciclo celular, se tiene presente que el ciclo celular es un proceso continuo. Los cientficos han dividido el proceso en 5 fases, cada una caracterizada por importantes eventos, pero estas divisiones son arbitrarias, por eso se observan distintas etapas en distintas clulas del tejido. En la letra d se observa el ncleo, es cual es ms grande porque ha duplicado su material gentico y se presentan unas estructuras de filamentos, los cromosomas, corresponde a la interfase; en la a, se observa como el ncleo desaparece lo que corresponde a la profase; en la letra e se observa como los cromosomas se ubican en el ecuador celular, estn alineados, lo que corresponde a la metafase, esta alineacin se logra gracias a los micro tbulos (estructura proteica) apareados del cinetocoro de cada cromosoma, unidos a los polo opuestos (levemente observables) ; en la letra c se observa como las cromtidas hermanas estn en los polos lo que corresponde a anafase, esto se logra gracias a los micro tbulos del cinetocoro se acortan y los polos del huso tambin se separan, lo que ayud a que las cromtidas hermanas se segregaran a estos polos; en la letra b se observa los dos clulas unidas, con un ncleo cada una, lo que corresponde a telofase. En la estructura de tejido de ovario de rattus novergicus (berkenhout) hembra, en unas folculos que esquematizamos nos dimos cuenta de variadas diferencias, los folculos ovricos (unidades bsicas de la biologa reproductiva femenina), que se encuentran rodeando un ovocito, necesitan maduracin para realizar distintas funciones como mantener, nutrir y madurar al ovocito y liberarlo en el momento adecuado. Entonces podemos encontrar los folculos en distintos estados de maduracin: Los folculos primordiales, d en el esquema, son los ms abundantes en la corteza ovrica, estn formados por un ovocito central rodeado (parcialmente) por unas pocas clulas planas (clulas foliculares o clulas de la granulosa) que segregan mucopolisacridos que forman un halo protector, la zona Pelcida alrededor del ovocito. El folculo primario, b en el
8

esquema, se caracteriza por las clulas de la granulosa que son cbicas y forma una capa continua alrededor del ovocito que estn presentes parcialmente en folculos primordiales, finalmente el folculo secundario, c en el esquema, que se caracteriza por el crecimiento, mayor numero de clulas de la granulosa y su nmero de capa (multicapa), as como por varios espacios de gran tamao (antro), que termina rodeando al ovocito completamente hasta la ovulacin. En la estructura de tejido de testculo de rattus novergicus (berkenhout) macho, Los tbulos seminferos (3 en el esquema) tienen algunas caractersticas propias: estn rodeados por una pared de las clulas mioides. En el tbulo puede ver un epitelio seminfero de varias capas. Los tbulos seminferos estn separados por tejido conectivo laxo. Al examinar un corte transversal de tbulos seminferos, se observa, hacia la periferia, una capa de espermatogonios, luego, ms hacia el centro se ubican los espermatocitos primarios, que al evolucionar, se transforman en espermatocitos secundarios, luego stos dan paso a las espermtidas y al ir progresando hacia el lumen de los tbulos, las espermtidas se convierten en espermatozoides que cuando estn listos, se secretan en el lumen de los conductos para almacenarse en el epiddimo. Nos dimos cuenta que no exista diferencia aparente entre los espermios humano y de bos taurus (linnaeus), y sabemos que los toros no son iguales, morfolgicamente, que los humanos, explicamos que se diferencian a partir del nmeros de cromosomas que contienen que contienen la informacin de la especie como tal, bos taurus con 60 cromosomas (2n), sus espermatozoides 30 cromosomas (n) y en humanos 46 cromosomas, 23 cromosomas (n) para sus espermatozoides, el nmero de cromosomas de la especie no implica que el organismo sea ms o menos complejo o evolucionado que otro. Conclusin Observar de cerca el ciclo completo de la divisin celular nos permiti explicarnos y corroborar cmo sucede el milagro natural que hace que de una clula se originen otras clulas. Nos permiti apreciar las diferencias entre el proceso de mitosis en las clulas somticas y meiosis en las clulas germinativas. As como darnos cuenta de que los tejidos analizados son muy dinmicos, que siempre se pueden apreciar clulas en distintos estados de maduracin, que participan activamente con su entorno. Todos los seres vivos vivimos en un proceso interno y constante de transformacin y regeneracin celular, del que no somos testigos ni muy conscientes. Este maravilloso proceso de la naturaleza es lo que nos mantiene vivos y da lugar a nuestra descendencia en el planeta.

Bibliografa:
Bruce Alberts y Colaboradores, Introduccin a la Biologa Celular (2011). Editorial mdica panamericana, tercera edicin. Mexico, pp. 610-645. -Introduccin a la Divisin Celular e imgenes de divisin celular e imgenes de mitosis y meiosis-

http://www.wesapiens.org/es/life_sciences/?category=base%2Flife_sciences%2Fhuman_an d_animal_histology%2Forgans_and_systems%2Ffemale_reproductive_system%2Fovary% 2F&page=1&advanced=1 Fecha de ingreso: 9 junio 2011 -estructuras de tejidos de ovario.http://www.wesapiens.org/es/life_sciences/?category=base%2Flife_sciences%2Fhuman_an d_animal_histology%2Forgans_and_systems%2Fmale_reproductive_system%2Ftestis%2F &advanced=1fecha de ingeso:27 abril 2011 Fecha de ingreso: 9 junio 2011 -estructuras de tejidos de testculoshttp://es.wikipedia.org/wiki/Folculo_ovrico Fecha de ingreso: 9 junio 2011 -Folculos ovricoshttp://es.wikipedia.org/wiki/Espermatozoides Fecha de ingreso: 9 junio 2011

-esquema de espermatozoides.-

10