Вы находитесь на странице: 1из 4

OXIDATION OF WATER ОКИСЛЕНИЕ ВОДЫ

AND OXYGEN RELEASE


IN PHOTOSYNTHESIS И ВЫДЕЛЕНИЕ
V. V. KLIMOV МОЛЕКУЛЯРНОГО КИСЛОРОДА
Modern concept of the
ПРИ ФОТОСИНТЕЗЕ
mechanism of photosyn-
Ç. Ç. äãàåéÇ
thetic water oxidation and
èÛ˘ËÌÒÍËÈ „ÓÒÛ‰‡ÒÚ‚ÂÌÌ˚È ÛÌË‚ÂÒËÚÂÚ
oxygen release (a unique
biological process that
has global significance) is Способность окислять воду с выделением моле-
discussed. Data on the кулярного кислорода за счет энергии поглощенного
солнечного света – одно из важнейших эволюцион-
content, structural and ных приобретений живой природы на Земле. Более
functional organization of 2 млрд лет назад фотоокислению могли подвергаться
plant photosystem 2 лишь восстановленные вещества типа сероводорода,
представленные на Земле в довольно ограниченном
responsible for the photo- количестве. Фотоокисление воды растениями при-
synthetic oxidation of вело к появлению в атмосфере значительных (21%)
water as well as on its количеств молекулярного кислорода, включение
которого в окислительно-восстановительные мета-
high sensitivity to the болические реакции (дыхание) привело к переходу
action of stress factors биоэнергетики на качественно новый уровень аэ-
are presented. робного метаболизма, что позволило живым орга-
низмам со значительно более высокой эффективно-
стью сжигать органическое топливо. Появление мо-
é·ÒÛʉ‡˛ÚÒfl ÒÓ‚ÂÏÂÌ- лекулярного кислорода в атмосфере привело также к
Ì˚ Ô‰ÒÚ‡‚ÎÂÌËfl Ó ÏÂ- формированию озонового экрана на Земле (в резуль-
тате образования О3 из О2), защищающего все живое
ı‡ÌËÁÏ ÙÓÚÓÒËÌÚÂÚ˘Â- от жесткого ультрафиолетового излучения Солнца.
ÒÍÓ„Ó ÓÍËÒÎÂÌËfl ‚Ó‰˚ Ë Все это послужило основой для прогрессивного
‚˚‰ÂÎÂÌËfl ÍËÒÎÓÓ‰‡ – развития живой материи на Земле, и в настоящее
время фотосинтетическое окисление воды и выде-
ÛÌË͇θÌÓ„Ó ·ËÓÎӄ˘Â- ление молекулярного кислорода сохраняют свое
ÒÍÓ„Ó ÔÓˆÂÒÒ‡, Ëϲ- глобальное биосферное значение. Выяснив, каков
˘Â„Ó „ÎÓ·‡Î¸ÌÓ Á̇˜Â- механизм комплекса фотобиохимических реакций,
приводящих к высокоэффективному окислению
ÌËÂ. è˂‰ÂÌ˚ ‰‡ÌÌ˚ воды до О2 , можно ответить на вопрос о том, как
Ó ÍÓÏÔÓÌÂÌÚÌÓÏ ÒÓÒÚ‡- управлять этим процессом, как направленно моди-
‚Â, ÒÚÛÍÚÛÌÓÈ Ë ÙÛÌÍ- фицировать этот процесс с целью повышения его
эффективности и устойчивости к действию по-
ˆËÓ̇θÌÓÈ Ó„‡ÌËÁ‡ˆËË вреждающих факторов, как практически перейти к
ÙÓÚÓÒËÒÚÂÏ˚ 2 ‡ÒÚÂ- промышленному воспроизведению этого процесса
ÌËÈ, ÓÚ‚ÂÚÒÚ‚ÂÌÌÓÈ Á‡ с использованием солнечной энергии и воды в ка-
честве возобновляемого энергетического сырья.
ÙÓÚÓÒËÌÚÂÚ˘ÂÒÍÓ ÓÍËÒ- Воспроизведение этого процесса будет иметь боль-
ÎÂÌË ‚Ó‰˚, Ë Ó ÔËӉ шое значение для обеспечения молекулярным кис-
© äÎËÏÓ‚ Ç.Ç., 1996

 ‚˚ÒÓÍÓÈ ˜Û‚ÒÚ‚ËÚÂθ- лородом длительных космических экспедиций.


ÌÓÒÚË Í ‰ÂÈÒڂ˲ ÒÚÂÒ- Несмотря на то что фотосинтез был открыт анг-
лийским естествоиспытателем Дж. Пристли более
ÒÓ‚˚ı Ù‡ÍÚÓÓ‚. 200 лет назад именно по способности растений вы-
делять кислород при освещении, механизм этого
процесса остается малоизученным и пока не подда-
ется высокоэффективному искусственному воспро-
изведению, что во многом связано со сложностью

äãàåéÇ Ç.Ç. éäàëãÖçàÖ ÇéÑõ èêà îéíéëàçíÖáÖ 9


строения биохимической системы окисления воды
и чрезвычайно низкой устойчивостью при попыт-
ках ее выделения из хлоропластов. 43 47
D2 D1
Fe2+
Известно, что фотосинтетические реакции про- QA QB
исходят в хлоропластах – автономных цитоплазма-

cyt b559

cyt b559
тических тельцах, содержащих все, что требуется PQ
для фотосинтеза. В состав хлоропластов входят так Ph Ph
50 Å
называемые тилакоиды – замкнутые сплющенные L hν P680
“мешочки”, состоящие из двухслойных липидных
мембран. В эти мембраны толщиной около 50 Å по- TyrZ TyrD
гружены сложные пигмент-белковые комплексы, в
которых сосредоточен весь хлорофилл клетки и в
Mn Mn
которых происходит первичное преобразование Cl– Mn Mn
солнечной энергии. В одном из таких хлорофилл- –4H+
Ca2+
белковых комплексов, в так называемой фотосисте- 33 24
–4 e 17
ме 2 (рис. 1), осуществляется фотосинтетическое
окисление воды. Хлорофилл-белковый комплекс 2H2O O2
фотосистемы 2 можно условно разделить на три ос-
новных структурно-функциональных блока: 1) сис-
тема эффективного улавливания световой энергии Рис. 1. Схема расположения основных компонен-
путем ее поглощения и передачи энергии возбужде- тов пигмент-белкового комплекса фотосистемы 2,
ния хлорофиллов на специализированный фотохи- ответственной за фотосинтетическое окисление
мический центр; 2) фотохимический реакционный воды и выделение кислорода в тилакоидной мем-
бране. Р680 – димер хлорофилла, первичный до-
центр фотосистемы 2, который превращает энер- нор электрона, передающий свой электрон на мо-
гию возбуждения хлорофилла, поглотившего квант лекулу феофитина при возбуждении в результате
света, в энергию разделенных зарядов, в результа- поглощения кванта света; Ph – молекула феофи-
те чего образуется самый сильный биологический тина (безмагниевого производного хлорофилла),
промежуточный акцептор электрона; Q A – первич-
окислитель – хлорофилл P680, потерявший один ный донор электрона, комплекс молекулы пласто-
электрон (P680+), и 3) собственно энзиматический хинона с атомом Fe2+; QB – вторичный акцептор
центр выделения кислорода, который сначала сам электрона, молекула пластохинона (PQ), связан-
многократно окисляется (отдает свои электроны) с ная с пигмент-белковым комплексом фотосисте-
мы 2; Tyrz – вторичный донор электрона, остаток
помощью Р680+, а затем отбирает недостающие тирозина, входящего в состав белка D 1 (в положе-
электроны от молекул воды, превращая ее в молеку- нии 161 от N-конца); D1 и D2 – белки с молекуляр-
лярный кислород. ной массой около 32000, на которых расположены
основные компоненты фотохимического реакци-
В состав светособирающего (или “антенного”) онного центра; cytb559 – цитохром b559 , имеющий
комплекса фотосистемы 2 зеленых растений входит максимум поглощения при 559 нм, выполняющий,
около двухсот молекул пигментов (хлорофилл а, вероятно, защитную роль при фотоинактивации
хлорофилл b, каротиноиды), расположенных на фотосистемы 2 за счет ускорения рекомбинации
разделенных зарядов; 17, 24, 33, 43, 47 – белки с
белках с молекулярной массой от 25 000 до 47 000. молекулярной массой соответственно 17000,
У цианобактерий роль “антенны” выполняют также 24000, 33000, 43000, 47000; hν – квант света; L –
фикобилины – пигмент-белковые комплексы, по- липиды, образующие мембрану тилакоида.
глощающие зеленый свет, который недостаточно
эффективно улавливается хлорофиллом. При по-
шего такое название в связи с тем, что его спектр по-
глощении квантов света молекулы пигментов пере-
глощения характеризуется максимумом при 680 нм)
ходят в возбужденное состояние, и энергия возбуж-
на молекулу феофитина (Ph) – производного хло-
дения мигрирует между молекулами пигментов,
рофилла, в котором центральный атом магния за-
попадая в конечном счете на специализированные
мещен на два атома водорода. Этот процесс проте-
молекулы хлорофилла, входящие в состав фотохи-
мического реакционного центра. кает за несколько пикосекунд (1 пкс = 10−12 с), в
результате образуется состояние с разделенными
Все основные компоненты реакционного цент- зарядами Р680+Ph−, живущее лишь 10−8 с вследствие
ра фотосистемы 2 расположены на комплексе из рекомбинации зарядов (обратного возврата элек-
двух белков с молекулярной массой около 32000, трона от Ph− на P680+). Однако этот процесс предот-
так называемых D1 и D2 – белков, пронизывающих вращается благодаря более быстрому (2 ⋅ 10−10 с) пе-
насквозь фотосинтетическую мембрану (см. рис. 1). реносу электрона от Ph− на молекулу акцептора
По современным представлениям, первичная фо- электрона QA (комплекс пластохинона с атомом
тохимическая реакция в реакционных центрах фо- Fe2+). При этом теряется около 30% энергии, запа-
тосистемы 2 заключается в переносе электрона от сенной в результате первичного фотоакта, но обра-
возбужденной молекулы хлорофилла Р680 (получив- зуется более стабильное состояние P680 + PhQ −A

10 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹11, 1996


(время жизни 1,5 ⋅ 10− 4 с). В конечном счете элек- фотосистемы 2, хотя для его стабилизации сущест-
трон, оторванный от молекулы хлорофилла Р680, венную роль играют белок с молекулярной массой
передается на систему хиноновых переносчиков 33000, а также пигмент-белковый комплекс с моле-
электрона (и далее используется в фотосинтетичес- кулярной массой около 47000. На рис. 2 показана
кой фиксации СО2 с образованием первичных саха- наиболее вероятная структура марганцевого центра
ров), что приводит к стабилизации состояния реак- окисления воды, в котором четыре атома Mn обра-
ционного центра с окисленным хлорофиллом Р680. зуют два димера Mn–Mn с расстоянием около 2,7 Å
Таким образом, в результате первичного фотоак- между двумя атомами Mn в димере и около 3,3 Å
та в реакционном центре фотосистемы 2 образуется между двумя димерами. В процессе накопления
самый сильный биологический окислитель – Р680+, окислительных эквивалентов в марганцевом ком-
окислительно-восстановительный потенциал (отра- плексе (вследствие его окисления фотохимическим
жающий склонность вещества отдавать свои или реакционным центром) валентность марганца ме-
принимать дополнительные электроны) которого няется от +2 (или +3) до +4, а в результате последу-
(+1,1 В по отношению к нормальному водородному ющего окисления воды перешедшие на марганец
электроду) достаточен для окисления воды. электроны вновь понижают его валентность.
Для образования молекулы О2 из Н2О необходи-
мо отобрать у двух молекул воды четыре электрона
( e ) и четыре протона (Н+) согласно реакции:

2Н2О − 4 e − 4Н+ О2
2,7Å
Однако, как уже отмечалось, фотохимический
реакционный центр фотосистемы 2 функциониру-
ет как одноэлектронная “машина”, производящая 3,3 Å
один окислительный эквивалент (Р680+) на один
поглощенный квант света. Следовательно, для об-
разования молекулы О2 из двух молекул Н2О необ-
ходимы четыре фотохимических акта реакционного
центра. В связи с этим возникают вопросы: спосо-
бен ли реакционный центр фотосистемы 2 последо- 2,7 Å
вательно (четыре раза по одному) отрывать четыре
электрона от Н2О с образованием промежуточных
продуктов окисления воды, или же между фотохи-
мическим реакционным центром и водой есть не-
кий аккумулятор – система, накапливающая четы-
ре окислительных эквивалента в результате четырех
последовательных фотоактов в реакционном цент-
ре и лишь затем осуществляющая одномоментное Рис. 2. Схема четырехмарганцевого центра фо-
тосинтетического окисления воды. Красным цве-
четырехэлектронное окисление двух молекул Н2О с том обозначены ионы марганца, голубым – атомы
образованием одной молекулы О2 ? кислорода, зеленым – атомы углерода (по: Jachan-
Исходя из оценки окислительно-восстановитель- dra V.K. et al., 1993).
ного потенциала Р680+, можно с определенностью
сказать, что одноэлектронный путь окисления воды Цикличность процесса окисления воды и выде-
в растениях невозможен, поскольку для этого необ- ления кислорода при фотосинтезе подтверждается
ходим потенциал выше +2 В, тогда как потенциал экспериментально: при освещении растений сери-
Р680+ составляет лишь +1,12 В. В то же время этого ей коротких (микросекундных) вспышек света (за
потенциала вполне достаточно для эффективного время которых каждый реакционный центр фото-
окисления воды по четырехэлектронному механиз- системы 2 получает лишь один квант света и, следо-
му, для которого требуется около 0,81 В. вательно, каждый марганцевый комплекс окисля-
По современным представлениям, накопление ется лишь однажды) максимальное выделение
четырех окислительных эквивалентов, необходи- кислорода наблюдается на каждую четвертую по
мых для четырехэлектронного окисления воды, счету вспышку света, отражая четырехтактное на-
происходит на энзиматическом центре, располо- копление окислительных эквивалентов в марганец-
женном между фотохимическим реакционным содержащей системе окисления воды.
центром и водой и состоящем из четырех атомов
марганца – металла переходной группы, обладаю- На рис. 3 представлена упрощенная схема фото-
щего переменной валентностью. Местом связыва- накопления четырех окислительных эквивален-
ния этого марганцевого комплекса, вероятнее все- тов на системе окисления воды (S) и ее перехода
го, являются белки D1 и D2 реакционного центра из исходного состояния S0 в состояние S4 за счет

äãàåéÇ Ç.Ç. éäàëãÖçàÖ ÇéÑõ à ÇõÑÖãÖçàÖ åéãÖäìãüêçéÉé äàëãéêéÑÄ èêà îéíéëàçíÖáÖ 11


hν цесс получил название фотоинактивации, и фото-
Mn2+ Mn4+ Mn3+ Mn4+ система 2 обладает наиболее высокой чувствитель-
His His ностью к повреждающему действию света. Это во
Mn3+ Mn4+ Mn3+ Mn4+ многом связано со способностью фотосистемы 2 ге-
S0
S1 нерировать такой сильный окислитель, как Р680+,
O2 H+ e– который (в случае, если он не используется для

2H2O окисления воды по каким-то причинам) может
e– окислять ближайшее окружение, вызывая самосож-
Mn4+ Mn4+ S4 e– H+ S2 Mn3+ Mn4+ жение реакционного центра фотосистемы 2. Изве-
His+ 2H+ – His стно, например, что в процессе фотоинактивации
e
Mn4+ Mn4+ Mn4+ Mn4+ происходит разрушение белка D1 , входящего в со-
S3 став реакционного центра фотосистемы 2, и суще-
hν hν ствует специализированная системы замены по-
Mn3+ Mn4+
His+ врежденного белка D1 на вновь синтезируемый
Mn4+ Mn4+ такой же белок. Даже при нормальных (физиологи-
ческих) интенсивностях света обновление этого
белка происходит быстрее, чем любого другого бел-
Рис. 3. Схема индуцированных светом цикличес- ка растительной клетки, что, вероятно, является
ких переходов системы окисления воды (S) от ис-
ходного состояния S0 до состояния с четырьмя платой за способность растений окислять такое
потерянными электронами (S 4) при окислении ее трудноокисляемое вещество, как вода.
реакционным центром фотосистемы 2 и последу-
ющим возвращением в состояние S 0 в результате В заключение необходимо отметить, что, несмот-
окисления двух молекул воды, сопровождающе- ря на кажущуюся простоту процесса фотосинтети-
гося образованием одной молекулы О 2 . His – ос-
таток аминокислоты гистидина. ческого окисления воды, остается неясным молеку-
лярный механизм его ключевых этапов. Так, не
выяснен вопрос, за счет чего достигается такой вы-
последовательной потери ионами марганца четы- сокой окислительный потенциал хлорофилла Р680,
рех электронов, которая восполняется за счет четы- равный 1,1 В, тогда как у хлорофилла в растворе
рехэлектронного окисления двух молекул воды с этот потенциал не превышает 0,8 В. Точно так же не
образованием О2 и четырех ионов водорода. Не ис- ясно, за счет чего достигается понижение окисли-
ключено, что помимо марганцевого комплекса в тельно-восстановительного потенциала марганца,
фотонакоплении окислительных эквивалентов уча- входящего в состав системы окисления воды, по-
ствует также остаток тирозина (ароматической ами- скольку для окисления ионов Mn2+ в водном раст-
нокислоты, входящей в состав белка D1), выполняю- воре требуется потенциал, превышающий 1,2 В.
щего роль промежуточного переносчика электрона Окончательно не выяснены компонентный состав
между Р680+ и марганцевым комплексом, или оста- водоокисляющего комплекса, количество находя-
ток другой ароматической аминокислоты – гисти- щихся в нем атомов марганца и его валентность,
дина. Кроме того, в функционировании системы
место и химическая природа его связывания с фо-
фотосинтетического окисления существенную роль
тосинтетической мембраной, состояние воды, под-
играют такие кофакторы, как ионы Ca2+, Cl− и, ве-
вергающейся окислению, участие аминокислотных
роятно, HCO −3 .
остатков, ионов Ca2+, Cl− и HCO −3 в этом процессе.
Фотосистема 2 и система фотосинтетического
окисления воды являются одними из наиболее уяз-
вимых звеньев фотосинтетического аппарата, кото- êÖäéåÖçÑìÖåÄü ãàíÖêÄíìêÄ
рое, как правило, в первую очередь повреждаются
при действии таких стрессовых факторов внешней 1. Фотосинтез / Под ред. Р. Клейтона. М.: Мир, 1982.
среды, как повышенная и пониженная температу- 2. Фотосинтез / Под ред. Говинджи. М.: Мир, 1987.
ра, ультрафиолетовое излучение, высокая интен- Т. 1–2.
сивность видимого света, тяжелые металлы и другие
химические загрязнители. Действие более 50% гер- 3. Шувалов В.А. Первичное преобразование световой
бицидов, используемых в настоящее время, основа- энергии при фотосинтезе. М.: Наука, 1990.
но на их способности подавлять фотоперенос элек-
тронов в фотосистеме 2, что приводит к остановке * * *
всего процесса фотосинтеза.
Известно также, что видимое излучение Солнца Вячеслав Васильевич Климов, профессор, док-
(энергия которого запасается при фотосинтезе, что тор биологических наук, зав. лабораторией фото-
служит энергетической основой развития биосфе- синтетического окисления воды Института почво-
ры) обладает также повреждающим действием на ведения и фотосинтеза Российской Академии
фотосинтетический аппарат растений. Этот про- наук. Автор более 170 научных работ.

12 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹11, 1996