Вы находитесь на странице: 1из 6

BACTERIAL ЭЛЕКТРОДВИГАТЕЛЬ БАКТЕРИЙ

ELECTRIC MOTOR
V. P. SKULACHEV Ç. è. ëäìãÄóÖÇ
åÓÒÍÓ‚ÒÍËÈ „ÓÒÛ‰‡ÒÚ‚ÂÌÌ˚È ÛÌË‚ÂÒËÚÂÚ
ËÏ. å.Ç. ãÓÏÓÌÓÒÓ‚‡
Bacterial mobility is a
result of rotation of a fla-
gellum by means of a ÇÇÖÑÖçàÖ
diminutive electric motor Движение бактерий – одно из самых поразитель-
composed of several pro- ных явлений природы. Его исследование нанесло
сокрушительный удар по нашему высокомерному
tein molecules. These снобизму вроде того, что биологическая эволюция,
molecules form the basal имея в своем распоряжении миллиарды лет, так и не
body inlaid in the cell wall смогла изобрести колесо, пока не появился человек.
Выяснилось, что бактерии, древнейшие и наиболее
in the place of attachment просто устроенные живые клетки, изобрели для
of the flagellum. Rotation своего движения устройство, куда более сложное,
is supported by flow of чем колесо, а именно ротор, вращающийся под дей-
ствием электрического поля. По существу речь идет
the H+ or Na+ ions from об электродвигателе субмикронного размера, со-
the medium to the bacte- бранном из нескольких белковых молекул.
rial cell. Давно известно, что многие виды бактерий спо-
собны плыть сквозь толщу воды. Скорость такого
движения может достигать 150 микрон в секунду, то
Ñ‚ËÊÂÌË ·‡ÍÚÂËÈ ÂÒÚ¸ есть за одну секунду бактерия покрывает расстоя-
ÂÁÛÎ¸Ú‡Ú ‚‡˘ÂÌËfl Ê„Û- ние, примерно в сто раз превышающее ее длину.
Первоначально движение бактерий пытались объ-
ÚË͇ ÔÓÒ‰ÒÚ‚ÓÏ ÏËÌË- яснить в рамках общепринятой парадигмы, предпо-
‡Ú˛ÌÓ„Ó ˝ÎÂÍÚÓ‰‚Ë„‡- лагающей, что совершение всех видов механичес-
ÚÂÎfl, ҉·ÌÌÓ„Ó ËÁ ÌÂ- кой работы живыми существами происходит за счет
энергии гидролиза аденозинтрифосфорной кисло-
ÒÍÓθÍËı ÏÓÎÂÍÛÎ ·ÂÎ- ты (АТФ). Этот постулат, казалось бы, подтверж-
͇. ùÚË ÏÓÎÂÍÛÎ˚ Ó·‡- дался повсеместностью распространения в природе
ÁÛ˛Ú ·‡Á‡Î¸ÌÓ ÚÂÎÓ, ÔÓ- АТФ-зависимого движения. Открытое В.А. Энгель-
гардтом на мышцах животных, оно было затем про-
Ï¢ÂÌÌÓ ‚ ·‡ÍÚÂË- демонстрировано на сперматозоидах и двигательных
‡Î¸ÌÛ˛ ÒÚÂÌÍÛ ‚ ÏÂÒÚ реакциях растения (росянки). Когда выяснилось,
ÔËÍÂÔÎÂÌËfl ‚ ÌÂÈ что бактерии, подобно сперматозоидам, движутся
посредством жгутиков (флагелл), это послужило
Ê„ÛÚË͇. êÓÚÓ ÏÓÚÓ‡ еще одним доводом в пользу мысли об АТФ-зависи-
ÔË‚Ó‰ËÚÒfl ‚ ‰‚ËÊÂÌË мом движении бактерий.
ÔÓÚÓÍÓÏ ËÓÌÓ‚ ç+ ËÎË Однако аналогия между сперматозоидами и бак-
Na+ Ò̇ÛÊË ‚ÌÛÚ¸ ·‡Í- териями оказалась поверхностной. Различались уже
сами размеры жгутиков и их строение. Во много раз
ÚÂËË. более крупный жгутик сперматозоида – весьма
сложное, окруженное мембраной образование, в
котором находят микротрубочки и сократительные
белки, расщепляющие АТФ. Бактериальный жгу-
© ëÍÛ·˜Â‚ Ç.è., 1998

тик имеет в поперечнике всего около 0,01 микрона.


Он сделан из одного-единственного белка – фла-
геллина молекулярной массой от 20 до 60 килодаль-
тон (kDa) в зависимости от вида бактерии. Окончи-
лись неудачей все попытки найти у флагеллина
способность расщеплять АТФ. Не числится за ним
и каких-то других ферментативных активностей.
Работы последних лет показали, что бактериальный
жгутик вращается вокруг длинной оси (в отличие от

2 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹9, 1998


биения без истинного поворота на 360° в случае а б
жгутика сперматозоида). Источником энергии для
вращения служит не АТФ, а электрическое поле или
ионный градиент на внутренней мембране бактери-
альной клетки. Что же касается самого двигателя
бактериального жгутика, называемого базальным
телом, то он сделан из нескольких белков и закреп-
лен в стенке клетки.

ëíêéÖçàÖ ÅÄäíÖêàÄãúçéÉé ÜÉìíàäÄ


à ÅÄáÄãúçéÉé íÖãÄ
Сам по себе жгутик бактерии устроен просто: это
жесткая полая трубка в форме, как правило, левой
спирали длиной несколько микрон (иногда до 20), 0,1 мкм 0,1 мкм
крепящаяся к базальному телу. Часто между базаль-
ным телом и жгутиком вставлен искривленный уча- в
сток трубки, сделанный не из флагеллина (белка жгу-
тика), а из так называемого белка крюка (рис. 1, а).
Базальное тело выполнено из нескольких белков,
число которых не до конца ясно. Оно состоит из че-
тырех основных деталей: 1) стержня, стыкующегося
с крюком или прямо со жгутиком, 2) двух дисков,
нанизанных на стержень, 3) группы белковых ком-
плексов (от 10 до 16 в зависимости от вида бакте-
рий), локализованных во внутренней мембране и
окружающих расположенный в той же мембране
диск М, и 4) белкового колпачка, утопленного в ци-
тозоль. Кроме того, бактерии, имеющие кроме вну-
тренней и внешнюю мембрану, располагают двумя
дополнительными дисками, а также некими белко-
выми структурами, находящимися во внешней мем-
бране вблизи базального тела. Именно этот более
сложный тип базального тела изображен на рис. 2.
При разрушении бактериальной клетки удается
выделить комплекс, состоящий из жгутика, крюка и
стержня с дисками (рис. 1, а, б ). На ультратонких
срезах через бактериальную клетку можно видеть 0,1 мкм
жгутик и большую часть деталей базального тела
(рис. 1, в). На сколах замороженных бактерий обна- г
руживаются также белковые комплексы, окружаю-
щие диск М (рис. 1, г). У некоторых бактерий есть
всего один жгутик, у других их может быть до не-
скольких десятков. При движении бактерии ее жгу-
тик совершает истинное вращение вокруг своей
оси. Лучшей иллюстрацией этого может быть про-
стой опыт. Наблюдая под микроскопом движение
бактерий, мы заметили, что бактерии, плавая в кап- 0,1 мкм
ле воды, иногда зацепляются своим жгутиком за ка-
кие-то микроскопические неровности предметного
стекла, после чего их поступательное движение ста- Рис. 1. Структура базального двигателя: а – жгу-
новится невозможным. Вместо этого бактерия, как тик с базальным телом, полученный из кишечной
палочки (фото А. Метлиной); б – то же, из морско-
бы пойманная за жгутик, начинает вращаться сама. го вибриона (фото А. Метлиной); в – срез через
Мы выбрали в поле зрения асимметричную, напо- клетку морского вибриона. Видны часть бактери-
минающую полумесяц бактерию, прикрепившуюся альной клетки, окруженной двумя мембранами,
к стеклу росшим из “спины” жгутиком. Оказалось, начальная часть жгутика с базальным телом (фото
Л. Бакеевой); г – скол, прошедший по внешней по-
что такая бактерия вращается, обратив к наблюда- верхности внутренней мембраны стрептококка в
телю свою “впалую грудь”, никогда не показывая область базального тела. Приведены микрофото-
ему “сутулой спины” (рис. 3). графии десяти базальных тел (фото С. Хана)

ëäìãÄóÖÇ Ç.è. ùãÖäíêéÑÇàÉÄíÖãú ÅÄäíÖêàâ 3


Жгутик

Внешняя среда

Внешняя
мембрана ||||
Диск L ||||
|||
| ||| |||
||| |||| ||||
|| || |||
||| || ||
| || |||
||| ||| |||
| ||
||
|||
|| |
|||||
|| Диск P | | |||
| || ||
| |

Белки Mot A,B


Периплазма

Н+ Диск S Н+
||||| |||||||
||||| |||||
|||| Диск М ||| |||| ||
||| || |||||||
||||
||| ||||
|||
||| ||
|| || | | || | | |||
| ||
|||
|| ||| ||||
| ||
|||
||| |||
+ + ||
Н Н
||

Внутренняя
мембрана
Цитоплазматическая
часть мотора

Цитоплазма

Рис. 2. Схема устройства базального тела бактерии, имеющей внешнюю и внутреннюю мембраны. Вращающи-
еся части показаны зеленым цветом, неподвижные – синим, а белки Mot, вызывающие вращение за счет потока
Н+, – красным. Желтым цветом показаны мембраны

Обеспечение мышечной работы или вращения ращенные в среде с ионами К+, помещали в беска-
жгутика сперматозоида энергией дыхания описы- лиевую среду, содержащую калиевый переносчик
вается уравнением: валиномицин, а также цианид (ингибитор дыхания)
и олигомицин (ингибитор взаимопревращения энер-
дыхание ∆µ H+ АТФ
гии ∆µ H+ и АТФ). В этих условиях, когда ни дыха-
механическая работа, (1) ние, ни гидролиз АТФ не могли образовывать ∆µ H+ ,
где ∆µ H+ – разность электрохимических потенциа- единственным источником энергии оказывался ис-
лов ионов водорода на мембране митохондрий (о кусственно созданный градиент ионов К+ между
том, что такое ∆µ H+ , подробно рассказано в преды- бактерией и средой. Выход К+ из бактерии генери-
дущих номерах журнала). Оказалось, что эта схема ровал на бактериальной мембране разность элект-
не в состоянии описать бактериальное движение. рических потенциалов “правильного” направления
Дж. Адлером в США было показано, что мутант (внутри клеток знак “минус”). Оказалось, что этот
градиент способен поддерживать движение бакте-
бактерий, не способный превращать ∆µ H+ в АТФ,
рий в течение нескольких минут, необходимых для
полностью сохраняет подвижность за счет энергии выравнивания концентраций К+ внутри и снаружи
дыхания. Такую же ситуацию наблюдал в нашей ла- клетки. Именно таким должен был бы быть ответ
боратории А.Н. Глаголев на другом виде бактерий, бактерии, если принять, что жгутик вращается за
отравленных олигомицином – ингибитором фер-
счет переноса ионов Н+ из среды внутрь клетки: вы-
мента, катализирующего синтез АТФ за счет ∆µ H+ .
ход К+ создавал поле, благоприятное для переноса
На той же системе удалось запустить движение при ионов Н+ в направлении снаружи внутрь через вра-
отсутствии дыхания, создав искусственно ∆µ H+ на щающий жгутик “мотор”.
бактериальной мембране. При этом скорость дви- Но если наше предположение верно, то бакте-
жения была пропорциональна величине ∆µ H+ . рии, отравленные цианидом и олигомицином, мож-
Опыт ставили следующим образом. Бактерии, вы- но привести в движение и совсем иным способом –

4 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹9, 1998


точником энергии движения служит разность элек-
трохимических потенциалов ионов натрия ( ∆µ Na+ ).
У морского вибриона Vibrio alginolyticus бывают два
типа жгутиков в зависимости от внешний условий.
Если бактерия живет в морской воде, то у нее есть
только один крупный жгутик, имеющий “натриевый
Бактерия мотор”. Если же бактерия оказывается вне морской
среды, то она обрастает множеством более мелких
жгутиков, снабженных “протонными моторами”.
Дыхание создает ∆µ H+ (или ∆µ Na+ ) за счет от-
качки ионов H+ или Na+ из бактериальной клетки
во внешнюю среду. Соответственно вращение жгу-
тика обеспечивается обратным потоком ионов H+
Жгутик или Na+ из среды в клетку. Возвращаясь назад, ионы
H+ (Na+) движутся “под гору”, то есть в сторону их
меньшей концентрации и от плюса к минусу. Такой
процесс привел бы только к увеличению энтропии
и образованию тепла, если бы не участие каких-то
структур мотора. Эти структуры превращают часть
потенциальной энергии ∆µ H+ или ∆µ Na+ в механи-
ческую работу по вращению жгутика и как следст-
вие – перемещению бактериальной клетки в прост-
ранстве. Вращение предполагает наличие ротора и
статора, а перенос ионов H+ и Na+ – ионных кана-
Поверхность
стекла лов или переносчиков этих ионов.
Проблема переноса была решена, когда удалось
Рис. 3. Схема опыта, доказывающего, что при ра- получить в достаточном количестве так называемые
боте бактериального мотора жгутик претерпевает белки Mot (от motor). Именно они образуют белко-
вращение вокруг своей собственной оси вые комплексы, окружающие диск М. Как оказа-
лось, белки Mot способны к транспорту ионов Н+ в
просто подкислив среду. В этом случае ионы Н+ так- случае Н+-мотора или же ионов Na+ в случае Na+-
же имели бы тенденцию перемещаться из среды в мотора.
клетку, хотя никакого электрического поля подкис- Сложнее обстоит дело с ротором и статором. Оче-
ление среды само по себе создать не может. Опыт видно, что жгутик есть вращающийся элемент систе-
подтвердил и эту гипотезу. Добавление небольшого мы. Остается открытым вопрос, вращается ли что-
количества соляной кислоты к клеткам, обездви- либо еще, то есть какие-то компоненты базального
женным цианидом и олигомицином, вызывало тела, или все они детали статора. Долгое время рото-
движение, исчезавшее по мере выравнивания кон- ром считался диск М, поскольку это единственная
центраций ионов Н+ по ту и другую сторону бакте- деталь мотора, находящаяся во внутренней бактери-
риальной мембраны. Ни градиент К+, ни градиент альной мембране, несущей ∆µ H+ и ∆µ Na+ . Однако
кислотности не вызывали подвижности, если бак-
недавно было показано, что перенос определенных
терии были обработаны веществом, повышавшим
веществ (в частности, витамина В12) через внешнюю
проводимость мембраны для ионов Н+. В этом слу-
чае ионы Н+ поступали в клетку, минуя “мотор”. мембрану бактерии осуществляется за счет энергии
∆µ H+ на внутренней мембране. В процессе участвует
В результате этих опытов мы сформулировали
белок TonB, протянутый сквозь всю периплазму от
вывод о том, что вращение бактериального жгутика
одной мембраны к другой. Этот прецедент натолк-
поддерживается непосредственно ∆µ H+ , без участия
нул нас на мысль (см. рис. 2), что, может быть, один
АТФ:
из белков Mot выполняет ту же функцию, используя
дыхание ∆µ H+ механическая работа. (2) ∆µ H+ для вращения жгутика или какого-то из дис-
ков, локализованных в периплазме либо во внеш-
Устройство, вращающее бактериальную флагел- ней мембране (один из белков Mot действительно
лу, мы назвали протонным мотором. сильно выдается в периплазму). Тогда мы можем
Впоследствии в нашей и одной из японских ла- избежать предположения о роторной функции дис-
бораторий было показано, что некоторые морские ка М, что неизбежно должно было бы создавать для
бактерии используют “натриевый мотор”, где ис- клетки большие проблемы. Вращение диска М

ëäìãÄóÖÇ Ç.è. ùãÖäíêéÑÇàÉÄíÖãú ÅÄäíÖêàâ 5


(плоский цилиндр диаметра около 10 нм) в мембра- имеющиеся в цитозоле. Эти последние взаимодей-
не, несущей очень большую напряженность элект- ствуют с каким-то из белков базального тела, ответ-
рического поля (около 200 кВ на см), должен был ственным за переключение направления вращения
бы резко увеличить вероятность электрического мотора.
пробоя этой мембраны. Вот почему мы склонны от- Сигналы могут быть двух родов. Одни вызывают
нести диск М к статору, а вращение объяснить рит- переключение, другие запрещают его. Если бакте-
мичными движениями в периплазме одного из бел- рия плывет в благоприятном направлении (напри-
ков Mot, заставляющими вращаться какой-то из мер, в сторону увеличения концентрации глюкозы),
дисков в периплазме или внешней мембране. Дви- то рецептор глюкозы связывает этот сахар и посы-
жения белка Mot, в свою очередь, должны вызы- лает сигнал, запрещающий изменение направления
ваться переносом ионов H+ (Na+). В целом такую движения. Если же концентрация глюкозы падает,
систему можно было бы уподобить велосипеду, где то рецептор теряет глюкозу и посылает противопо-
поступательное движение ног велосипедиста при- ложный сигнал. В результате бактерия меняет на-
водит к вращательному движению колес. правление движения и получает шанс попасть в бо-
Однако следует подчеркнуть, что изложенная лее благоприятные для нее условия.
гипотеза не более чем одно из возможных объясне- Существует сложная система обработки и ин-
ний устройства бактериального мотора. В целом си- терпретации сигналов, между которыми устанавли-
туация весьма далека от ясности, и самые разные вается жесткая иерархия. В целом этот механизм
предположения имеют право на существование. позволяет бактерии неплохо ориентироваться в
Формулируя такие предположения, следует учиты- среде обитания. Поэтому когда наблюдаешь за дви-
вать некоторые уже измеренные параметры мотора. жением бактерий под микроскопом, создается впе-
1. Скорость вращения обычно колеблется между чатление, что каждая из них куда-то спешит по ка-
5 и 50 оборотами в секунду. ким-то только ей известным делам. Совсем иначе
2. Для одного оборота жгутика необходимо про- выглядит поле зрения микроскопа с так называе-
нести в клетку несколько сотен ионов H+ (Na+). мыми тенями бактерий. “Тени” – это как бы выпо-
трошенные клетки, из которых удален цитозоль со
3. Вращение может вызываться любой из состав- всеми белками, в том числе и с теми, которые пере-
ляющих ∆µ H+ ( ∆µ Na+ ), то есть электрическим по- дают сигналы рецепторов. В то же время мембраны
лем или разностью концентраций ионов Н+ (Na+). “теней” по-прежнему целы, так как способны са-
мозалечиваться после механических повреждений.
4. Существуют два пороговых значения ∆µ H+
Создав ∆µ H+ можно привести “тени” в движение.
( ∆µ Na+ ). Ниже первого порога вращения не проис-
Но это движение всегда в каком-то одном направ-
ходит. Между первым и вторым порогами скорость лении. Сигналы не поступают на мотор, и жгутик
вращения есть линейная функция ∆µ H+ ( ∆µ Na+ ). вращается в одну и ту же сторону. Под микроскопом
Выше второго порога дальнейшее увеличение ∆µ H+ вместо кипения жизни вы видите зрелище, достой-
ное фильма ужасов, где покойники встают из своих
( ∆µ Na+ ) уже не приводит к ускорению движения. гробов. “Тени” плывут по прямой, чтобы остано-
5. Мотор снабжен переключателем направления виться, когда ∆µ H+ снизится и уйдет под пороговую
вращения, так что бактерия может плыть как жгути- величину.
ком вперед, так и жгутиком назад при одном и том
же направлении ∆µ H+ ( ∆µ Na+ ). Это последнее об-
ÉÑÖ ÖôÖ Ç ÅàéãéÉàà
стоятельство служит ключом к пониманию биоло- àëèéãúáìûíëü åéíéêõ
гической функции движения бактерий.
Моторы, питаемые ∆µ H+ , используются не толь-
áÄóÖå ÅÄäíÖêàüå ÑÇàÉÄíúëü ко у бактерий, снабженных жгутиками. На том же
принципе устроен механизм скольжения многокле-
Движение бактерий позволяет им выбрать опти- точных цианобактерий по твердой поверхности.
мальные условия существования. Несмотря на ма- Цианобактерии лишены жгутиков, и тем не менее
лый размер, бактерии располагают множеством их движение поддерживается энергией ∆µ H+ . По-
датчиков, регистрирующих параметры внешней и
внутренней среды. Они измеряют температуру сре- видимому, их моторы вращают белковые тяжи, спря-
ды, освещенность, рН снаружи и внутри клетки, танные в периплазме.
концентрации многих метаболитов, а к изменениям Так же, вероятно, вращаются хлоропласты в клет-
вязкости среды бактерии чувствительнее, чем все ках некоторых эукариотических водорослей. Но, по-
известные в технике вискозиметры. Датчики – жалуй, самый экстравагантный пример движения за
особые белки-рецепторы, локализованные, как счет ∆µ H+ можно найти у простейших, живущих в
правило, во внутренней бактериальной мембране. кишечнике термита. Эти одноклеточные эукариоты
С рецепторов сигнал передается на особые белки, вступили в симбиоз с подвижными бактериями. В

6 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹9, 1998


результате сотни бактерий прикрепились снаружи к Для этого они “посадили себе на спину” множество
оболочке простейшего. Вращение их жгутиков при- бактерий, жгутики которых движут эукариотичес-
водит в движение клетку-хозяина, причем этот хо- кую клетку (ситуация, как если бы океанский лай-
зяин каким-то неизвестным образом может синхро- нер плыл с помощью винтов моторных лодок). Но
низировать и регулировать направление вращения такая попытка оказалась эволюционным тупиком.
бактериальных жгутиков.

êÖäéåÖçÑìÖåÄü ãàíÖêÄíìêÄ
áÄäãûóÖçàÖ

Движение бактерий обусловлено вращением их 1. Скулачев В.П. Биоэнергетика: Мембранные преоб-


жгутиков, осуществляемым за счет работы устрой- разователи энергии. М.: Высш. шк., 1989.
ства, представляющего собой миниатюрный элект- 2. Скулачев В.П. Энергетика биологических мембран.
родвигатель. Этот электродвигатель локализован в М.: Наука, 1989.
так называемом базальном теле, к которому крепит-
ся жгутик. Он сделан из нескольких белковых моле-
кул и встроен в стенку бактериальной клетки. Ротор * * *
мотора приводится в движение потоком заряжен-
ных частиц: ионов Н+ или Na+, перемещающихся Владимир Петрович Скулачев, действительный
через клеточную мембрану из среды внутрь клетки. член Российской академии наук, президент Рос-
Размер двигателя менее 0,1 микрона, в то время сийского биохимического общества, директор Ин-
как длина жгутика несколько микрон. Трудно пред- ститута физико-химической биологии им. А.Н. Бе-
ставить, что столь маленькое устройство может най- лозерского МГУ. Лауреат Государственной премии
ти применение, чтобы перемещать в пространстве СССР, премии им. А.Н. Баха Президиума АН. Осно-
организм, построенный из множества крупных эу- ватель отечественной школы энергетики биологи-
кариотических клеток. Вот почему эукариоты вы- ческих мембран. В течение многих лет читает курс
брали иной механизм движения, построенный на биоэнергетики для студентов биологического фа-
использовании энергии АТФ для сокращения мно- культета МГУ. Автор фундаментальных работ по
жества белковых (актомиозиновых) филаментов. энергетике клетки, 300 статей в российских и меж-
Лишь некоторым одноклеточным эукариотам уда- дународных журналах, шести монографий и одного
лось применить бактериальный механизм движения. учебника.

ëäìãÄóÖÇ Ç.è. ùãÖäíêéÑÇàÉÄíÖãú ÅÄäíÖêàâ 7

Оценить