Вы находитесь на странице: 1из 8

MOLECULAR MOTORS МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МОТОРЫ

Part 2. Molecular
mechanisms Часть 2. Молекулярные основы
of biological motility биологической подвижности
A. N. TIKHONOV
Ä. ç. íàïéçéÇ
The structure and mecha- åÓÒÍÓ‚ÒÍËÈ „ÓÒÛ‰‡ÒÚ‚ÂÌÌ˚È ÛÌË‚ÂÒËÚÂÚ
ËÏ. å.Ç. ãÓÏÓÌÓÒÓ‚‡
nisms of the functioning
of two motor proteins,
myosin and kinesin, are ÇÇÖÑÖçàÖ
considered to illustrate В предыдущей статье было описано устройство и
the main principles of рассмотрены механизмы действия двух уникальных
молекулярных моторов: протонной АТРсинтазы и
operation of the molecular флагеллярного мотора бактерий. Движущая сила,
motors which provide a вращающая роторы этих моторов, возникает за счет
cell motility and targeted разности электрохимических потенциалов ионов
водорода на мембране, в которую встроены моторы.
vesicle transport. Среди механохимических преобразователей энер-
гии, распространенных в живой природе, исключи-
тельно важную роль играют также линейные моле-
ê‡ÒÒÏÓÚÂÌ˚ ÒÚÓÂÌË кулярные моторы – белковые машины, которые
Ë ÏÂı‡ÌËÁÏ˚ ‡·ÓÚ˚ движутся вдоль полимерных нитей, используя в ка-
ÏËÓÁË̇ Ë ÍËÌÂÁË̇ – честве “топлива” молекулы АТР. К таким моторам
относятся белки актомиозинового комплекса, вхо-
ÏÂı‡ÌÓıËÏ˘ÂÒÍËı ·ÂÎ- дящего в состав сократительного аппарата мышц.
ÍÓ‚, ÓÚ‚ÂÚÒÚ‚ÂÌÌ˚ı Á‡ Движение микроворсинок (жгутиков и ресничек)
ÒÓÍ‡ÚËÚÂθÌÛ˛ ‡ÍÚË‚- определяется взаимодействием другой пары мотор-
ных белков – динеина и тубулина. Смещение голо-
ÌÓÒÚ¸ Ë ‚ÌÛÚËÍÎÂÚÓ˜- вок динеина относительно тубулиновых микротру-
Ì˚È Ú‡ÌÒÔÓÚ Ó„‡ÌÂÎÎ бочек белков обеспечивает волнообразные движения
‚ ÍÎÂÚÍÂ. микроворсинок (см. подробнее [1–3]). Кинезин и
другие родственные ему белки (некоторые формы
миозина) работают в клетке как переносчики орга-
нелл (митохондрии, лизосомы) и сравнительно
крупных частиц. В данной статье мы рассмотрим
работу линейных молекулярных моторов на примере
двух механохимических белков: миозина и кинези-
на. Среди большого числа моторных белков миозин
скелетных мышц и кинезин из клеток мозга являют-
ся наиболее изученными молекулярными мотора-
ми. Несмотря на то что функции миозина и кинези-
на в клетке различаются, они удивительно похожи
по своему строению и механизмам действия.

åõòÖóçéÖ ëéäêÄôÖçàÖ

åÓ‰Âθ ÒÍÓθÁfl˘Ëı ÌËÚÂÈ


© íËıÓÌÓ‚ Ä.ç., 1999

Скелетные мышцы состоят из многоядерных


клеток, связанных возбудимой плазматической мем-
браной, по которой приходит нервный импульс,
инициирующий сокращение мышцы [3]. Мышеч-
ные клетки состоят из множества сократительных
волокон – миофибрилл, расположенных параллель-
но друг другу. Структурно-функциональными еди-
ницами миофибрилл являются саркомеры, которые

íàïéçéÇ Ä.ç. åéãÖäìãüêçõÖ åéíéêõ. ó‡ÒÚ¸ 2 17


располагаются вдоль мышечных волокон через ветствует участку саркомера, где толстые нити не
каждые 2,3 мкм. На электронно-микроскопических перекрываются с тонкими нитями.
снимках продольного среза мышечной ткани вид-
но, что саркомер состоит из параллельных рядов Толстые нити, имеющие диаметр 15 нм, состоят
толстых и тонких нитей. Взаимное расположение главным образом из молекул миозина. Тонкие нити
толстых и тонких нитей саркомера схематически имеют диаметр 9 нм. Они содержат белки трех типов:
актин, тропомиозин и тропониновый комплекс. Ес-
показано на рис. 1, а. Вертикальные темные линии Z
ли посмотреть на поперечный срез саркомера в обла-
соответствуют специальным структурным белкам,
сти, где соседствуют толстые и тонкие нити (темный
разделяющим миофибриллы на саркомеры. Между участок полосы А), то можно увидеть, что каждая
ними видны горизонтальные нити сократительного тонкая нить окружена тремя толстыми нитями, а
аппарата. От Z-линий отходят тонкие нити, кото- каждая толстая нить окружена шестью тонкими
рым на электронно-микроскопических снимках со- нитями (рис. 1, б ). Толстые и тонкие нити взаимо-
ответствуют светлые полосы I. В центральной части действуют друг с другом с помощью поперечных
саркомера расположены толстые нити, которым со- мостиков длиной около 13 нм, которые через регу-
ответствуют темные полосы А. В середине каждой лярные промежутки выходят из толстых нитей и за-
полосы А видна более светлая полоса Н. Наличие полняют щели между соседними толстыми и тонки-
двух темных участков полосы А определяется тем, ми нитями.
что в этих зонах толстые нити перекрываются с тон-
кими нитями. Более светлая полоса (зона Н) соот- При сокращении мышцы ее длина укорачивает-
ся на одну треть. Как это происходит, стало понят-
но в начале 50-х годов, когда Эндрю и Хью Хаксли,
а
Р. Нидергерк и Ж. Хэнсон на основании исследова-
Z H Z H Z ния структуры мышечных волокон методами рент-
геноструктурного анализа, оптической и электрон-
ной микроскопии независимо пришли к модели
скользящих нитей. В основе этой модели лежат сле-
дующие факты:

• при сокращении мышцы длины толстых и тон-


ких нитей саркомера не изменяются;

A I A • саркомер укорачивается за счет перекрывания


толстых и тонких нитей, которые скользят друг от-
б носительно друга во время сокращения мышцы.
Это проявляется в том, что при сокращении мыш-
цы полосы H и I укорачиваются (рис. 1, в);

• сила, развиваемая мышцей, создается в про-


цессе движения соседних нитей.

Скольжение толстых и тонких нитей друг относи-


тельно друга совершается за счет энергии, выделяе-
в
мой при гидролизе АТР до ADP и неорганического
фосфата (Pi). Открытие АТРазной активности мио-
зина было сделано в 1939 году супругами В.А. Эн-
гельгардтом и М.Н. Любимовой, которые показали,
что препараты миозина способны расщеплять АТР
на ADP и Pi (АТР + H2O ADP + Pi). Ими было
F-актин
также показано, что добавление АТР к белковому
препарату, состоящему из нитей миозина, влияет
на его механические свойства. Вскоре после этого
Миозин А. Сцент-Дьорди (удостоенный впоследствии Но-
белевской премии) установил, что в растворе актин
Рис. 1. Схематическое изображение строения и миозин образуют так называемый актомиозино-
саркомеров мышечного волокна: а – продольный вый комплекс. Примечательно, что при отсутствии
разрез, б – поперечный разрез в области пересе- актина миозин плохо гидролизует АТР. В присутст-
чения толстых и тонких нитей, в – изменение дли-
ны саркомера в результате движения толстых и вии актина АТРазная активность миозина возраста-
тонких нитей ет приблизительно в 200 раз.

18 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹6, 1999


ëÚÓÂÌËÂ ÚÓÎÒÚ˚ı Ë ÚÓÌÍËı ÌËÚÂÈ го стержня (рис. 2, а), выполняют моторные функ-
Ï˚¯Â˜ÌÓ„Ó ‚ÓÎÓÍ̇ ции – в ходе работы сократительного аппарата на-
клон головок миозина относительно его хвоста
Элементарной структурной единицей толстых изменяется, в результате чего обеспечивается взаи-
нитей саркомера является молекула миозина. Мио- модействие миозина с актином.
зин скелетных мышц (миозин класса II) является
довольно крупным белком, состоящим из шести Моторный фрагмент миозина (S1) непосредст-
полипептидных цепей. Эта молекула представляет венно взаимодействует с тонкой актиновой нитью.
собой димер, образованный из двух сплетенных друг Фрагмент S1 включает в себя каталитический центр,
с другом одинаковых мономеров миозина (рис. 2, а). с которым связывается молекула АТР и где проис-
Каждый из этих мономеров состоит из одной тяже- ходит ее гидролиз до ADP и Pi . В ходе реакции гид-
лой цепи (молекулярная масса 230 кДа) и двух лег- ролиза АТР выделяется энергия, за счет которой
ких цепей (молекулярная масса 20 кДа). Тяжелая работает миозин. В 1993 году Айвэн Рэймент и его
цепь миозина неоднородна по своему строению. На коллеги методом рентгеноструктурного анализа ус-
одном конце ее полипептидная цепь свернута в ви- тановили пространственное строение головки мио-
де глобулы, образующей своеобразную “головку” зина. Согласно их данным, фрагмент S1 представ-
миозина (фрагмент S1). С помощью более тонкой ляет собой глобулу размером 16,5 × 6,5 × 4 нм. На
шейки (фрагмент S2) головка миозина соединяется картине трехмерного строения S1, полученной с
с длинным хвостом, который образован протяжен- разрешением 2,8 Å, четко видны оба функциональ-
ной полипептидной цепью, уложенной в виде вытя- но важных участка: место посадки АТР и выступаю-
нутой α-спирали. Хвосты двух мономерных единиц щий наружу участок полипептидной цепи, который
миозина сплетены друг с другом и образуют вытя- непосредственно взаимодействует с актином. Вра-
нутый стержень длиной 170 нм и толщиной 2 нм. щательная подвижность головки миозина обеспе-
Две подвижные головки, выступающие вбок из это- чивается за счет шарниров, которые представляют
собой гибкие участки полипептидной цепи. Один
S1 (моторный участок) из них находится в месте соединения фрагментов S1
а и S2, другой расположен между фрагментом S2 и
S2 (регуляторный участок) хвостом миозина (рис. 2, а). Наличие молекулярных
шарниров дает возможность фрагменту S1 присое-
16,5 нм“Шарниры”

диняться и отсоединяться от нити актина, а также


изменять свою ориентацию в ходе сократительного
170 нм
цикла (рис. 3, 4).
Функционально важным звеном молекулы мио-
зина является ее регуляторный участок, располо-
Актин Тропомиозин
женный в области шейки, соединяющей катали-
4 нм б
тическую головку с хвостом молекулы миозина.
Шейка образована α-спиралью полипептидной це-
пи длиной 8–9 нм, которая окружена двумя легки-
TnI TnT TnC ми полипептидными цепями S2. Шейка, по сути де-
Тропониновый ла, является рычагом, через который структурные
комплекс в
изменения в каталитическом центре передаются
хвостовой части молекулы миозина. Легкие цепи
придают этому рычагу необходимую жесткость и
выполняют важную роль в регуляции каталитичес-
кой активности миозина.
Молекулы миозина в мышцах работают не по-
одиночке, а образуют сравнительно толстые жгуты
из сплетенных друг с другом димеров. В саркомерах
4 нм поперечнополосатых мышц каждая толстая нить
10 нм состоит приблизительно из 300 сплетенных диме-
ров миозина. С обоих концов толстой нити высту-
20 нм пают многочисленные подвижные мостики, кото-
Миозин II Миозин I Миозин V рые могут связываться с окружающими их тонкими
нитями актина (рис. 1, б ).
Рис. 2. Строение молекулы миозина (а) и тонкой Тонкие нити мышечных волокон состоят из не-
нити (б ). В расслабленной мышце тропомиозин скольких белков (рис. 2, б ). Основной составляю-
препятствует взаимодействию головки миозина с
актином. Внизу (в) схематически показано разли- щей тонких нитей является актин, присутствующий
чие геометрических характеристик моторных уча- в них в форме вытянутых полимерных нитей. Эти
стков молекул миозина трех разных типов нити образованы из мономеров глобулярного белка

íàïéçéÇ Ä.ç. åéãÖäìãüêçõÖ åéíéêõ. ó‡ÒÚ¸ 2. åÓÎÂÍÛÎflÌ˚ ÓÒÌÓ‚˚ ·ËÓÎӄ˘ÂÒÍÓÈ ÔÓ‰‚ËÊÌÓÒÚË 19


Актин а белок TnT – с тропомиозином. Белок TnC принад-
лежит к классу регуляторных белков, называемых
кальмодулинами. Этот белок активируется при его
взаимодействии с ионами Ca2+. Тропониновые ком-
плексы расположены вдоль тонкой нити через ре-
ATP ADP гулярные интервалы, длина которых составляет
Pi
S1 38,5 нм, что соответствует длине молекулы тропо-
миозина.
Удар
ùÎÂÏÂÌÚ‡Ì˚È ‡ÍÚ Ï˚¯Â˜ÌÓ„Ó ÒÓÍ‡˘ÂÌËfl
Рис. 3. Схема, показывающая изменение поло-
жения головки миозина (S1) относительно тонкой Молекулы миозина и актина, взаимодействуя
нити в ходе структурных перестроек актомиози- друг с другом, образуют актомиозиновый комплекс,
нового комплекса, которые приводят к возникно- в котором и разыгрываются основные события,
вению силы, тянущей хвост миозина
приводящие к созданию силы, вызывающей сокра-
щение мышцы. В покоящейся мышце миозиновые
мостики не проявляют ATPазной активности, по-
скольку тропомиозин и белки тропонинового комп-
Pi ADP лекса препятствуют взаимодействию головок мио-
зина с нитью актина. Активация актомиозинового
5 ∆S комплекса инициируется ионами Ca2+. Концентра-
ция ионов Ca2+ в цитоплазме клеток покоящейся
ADP ADP (расслабленной) мышцы понижена (<0,1 мкМ).
4 6
Pi Это обусловлено работой кальциевого насоса сар-
коплазматического ретикулума, который использу-
ет энергию молекул АТР для перекачивания ионов
ADP Ca2+ из цитоплазмы в специальные цистерны. Под
действием нервного импульса ионы Ca2+ выходят из
ADP
3 7 кальциевых цистерн и связываются с TnC, регуля-
торным белком тропонинового комплекса. В ре-
Pi
зультате этого запускается цепь конформационных
2 1 превращений остальных белков тропонинового
ATP комплекса, что в конечном итоге вызывает измене-
ние положения тропомиозина относительно нити
ADP ATP F-актина. Таким образом, благодаря последова-
Pi
тельным структурным перестройкам белков тонкой
нити (тропонин тропомиозин актин),
инициированным повышением концентрации ио-
Рис. 4. Цикл структурных превращений актомио- нов Ca2+, головка миозина приобретает возможность
зинового комплекса, приводящих к смещению связываться с актином.
молекулы миозина вдоль нити актина
Тянущая сила, которая вызывает движение мо-
лекул миозина вдоль нитей актина, возникает за
(G-актин), имеющего молекулярную массу 42 кДа. счет структурных изменений, происходящих в ката-
В растворе мономеры G-актина могут связываться литическом центре миозина после гидролиза моле-
друг с другом, образуя вытянутые линейные поли- кулы AТP. Работа миозина напоминает функциони-
меры (F-актин) диаметром 6–7 нм, называемые рование механического устройства, в котором
микрофиламентами. Тонкие нити сократительного головка и шейка миозинового мостика выполняют
аппарата мышц, с которыми взаимодействуют мио- роль своеобразного рычага, позволяющего сущест-
зиновые мостики, наряду с актином содержат также венно увеличить амплитуду смещения миозинового
другие белки – тропомиозин и три белка тропони- хвоста. Этот рычаг одним из своих концов опирается
нового комплекса (рис. 2, б ), которые играют реша- на актиновую нить, другой конец рычага соединен с
ющую роль в регуляции взаимодействия миозина с хвостом молекулы миозина (рис. 3). После гидроли-
актином. По своей массе они составляют приблизи- за АТР и диссоциации Pi и ADP из каталитического
тельно треть от всей массы тонких нитей. Молекула центра в головке миозина происходят структурные
тропомиозина состоит из двух вытянутых α-спира- перестройки, в результате которых зацепленная за
лей длиной около 38 нм, инкрустированных в го- нить актина головка миозина поворачивается на
раздо более протяженную нить F-актина. Тропони- угол α ≈ 30–40°, увлекая за собой хвост миозина (см.
новый комплекс состоит из трех белков (TnC, TnI и рис. 3). Так возникает сила, вызывающая скольже-
TnT). Белок TnI непосредственно связан с актином, ние толстых нитей миозина вдоль нитей актина.

20 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹6, 1999


Структурные перестройки, которые происходят хвост миозина, который соединен с мостиком с по-
в каталитическом центре фрагмента S1, характери- мощью “шарнирного” сочленения. Благодаря про-
зуются сравнительно небольшими смещениями дольному смещению хвоста миозина происходит
атомов в активном центре. Однако эти изменения сокращение длины саркомера. После смещения го-
вызывают значительное перемещение хвоста мио- ловки миозина, инициированного диссоциацией
зина (3–5 нм для миозина скелетных мышц). Это фосфата, молекула ADP диссоциирует из каталити-
происходит в результате того, что рычаг, передаю- ческого центра, а ее место занимает новая молекула
щий смещение от каталитического центра к хвосту АТР (переход “состояние 7 ” “состояние 1 ”).
миозина, имеет неравные плечи – точка опоры ры- Это превращение сопровождается отсоединением
чага находится существенно ближе к активному головки миозина от актина, завершающим цикл
центру моторного фрагмента S1, чем конец шейки структурных преобразований, происходящих в ак-
миозинового мостика, соединяющийся с хвостом тивном центре миозина. В результате многократно
миозиновой нити (см. рис. 3). Интересно, что у мо- повторяющихся циклов гидролиза АТР возникает
лекул миозина, принадлежащих различным клас- направленное скольжение нитей миозина и актина
сам, амплитуда смещения хвоста за один рабочий друг относительно друга.
шаг может заметно отличаться. Это определяется
тем, что длина рычага у разных форм миозина не-
одинакова (рис. 2, в). Так, например, у молекул ми- äÓÓÔÂ‡Ú˂̇fl Ë “Ë̉˂ˉۇθ̇fl
озина V, выполняющего функции транспортного ÚÛ‰Ó‚‡fl ‰ÂflÚÂθÌÓÒÚ¸” ÏËÓÁË̇
белка, шейка в несколько раз длиннее, чем у миози-
на скелетных мышц (миозина II). Поворот головки В мышечных волокнах молекулы миозина рабо-
миозина V на угол α ∼ 30–40° приводит к смещению тают не индивидуально, а кооперативно, в составе
хвоста на расстояние 20 нм, что приблизительно в крупных макромолекулярных ансамблей. Как мы
пять раз больше рабочего шага миозина скелетных уже отмечали, в миофибриллах молекулы миозина
мышц. собраны в жгуты, из которых выступает множество
миозиновых мостиков в сторону нитей актина (см.
ꇷӘËÈ ˆËÍÎ ‡ÍÚÓÏËÓÁËÌÓ‚Ó„Ó ÍÓÏÔÎÂÍÒ‡ рис. 1). Установлено, что во время сокращения
мышцы лишь сравнительно небольшая часть мос-
В процессе сокращения мышцы каждая головка
тиков (10–15%) одновременно находится в контак-
миозина совершает многократные повороты, перио-
те с окружающими их нитями актина. Это значит,
дически изменяя угол своего наклона относительно
что каждый из мостиков большую часть времени
нити актина. В расслабленной мышце миозиновый
проводит в свободном состоянии, когда он непо-
мостик отделен от актиновой цепи (рис. 4, состояния
1 и 2 ). Свободная головка миозина обладает опреде- средственно не создает тянущей силы. При этом
ленной степенью подвижности; за счет шарниров, молекулы миозина, у которых мостики отсоединены
расположенных в местах соединения фрагментов S1 от актиновых нитей, во время сокращения саркоме-
и S2, угол ее наклона относительно хвоста может ра перемещаются вместе с остальными молекулами
изменяться. При связывании молекулы АТР с ак- миозинового жгута. Такое движение свободных (не-
тивным центром миозина его головка остается от- связанных) мостиков происходит за счет работы
соединенной от актина (рис. 4, состояние 1 ). В других мостиков, которые в это время непосредст-
каталитическом центре миозина молекула АТР рас- венно взаимодействуют с нитями актина. Это зна-
щепляется на ADP и Pi (рис. 4, переход “состояние чит, что каждый мостик не просто шагает вдоль ни-
1” “состояние 2 ”). Образующиеся при этом ти, равномерно ступая между соседними звеньями
молекулы ADP и Pi остаются прочно связанными с актиновой цепи, а как бы прыгает вдоль нее. Длина
каталитическим центром. Однако вслед за гидроли- таких прыжков составляет 36–38 нм (рис. 5, а), что
зом молекулы АТР происходит присоединение го- многократно превышает размер индивидуального
ловки миозина к актиновой нити: сначала образует- шага (∆s ≈ 4 нм). Таким образом, сокращение мы-
ся слабая связь (состояние 3), затем возникает более шечных волокон обеспечивается за счет коопера-
прочная связь (состояние 4). При этом вращатель- тивной работы большого количества молекул мио-
ная подвижность миозинового мостика становится зина, собранных в толстые нити. Движение пучка
ограниченной. Прочное связывание головки мио- молекул миозина вдоль нити актина можно срав-
зина с актином инициирует освобождение фосфата нить с перетаскиванием бревна большой группой
Рi из активного центра (переход “состояние 4 ” работников, из которых лишь небольшая часть тру-
“состояние 5 ”). Изменения, происходящие в жеников (10–15%) опирается ногами на землю, в то
каталитическом центре после диссоциации Рi , вы- время как остальные работники в это время висят
зывают дополнительное увеличение сродства мио- на бревне, не касаясь земли. Подобно мостикам мио-
зина к актину. В результате этого появляется сила, зина, работники периодически меняются ролями,
вызывающая поворот мостика в сторону хвоста (пе- однако в каждый момент времени активно работает
реход “состояние 5 ” “состояние 6 ”). Вместе с лишь небольшая часть тружеников, несущих брев-
поворотом мостика смещается вдоль нити актина но вместе с висящими на нем товарищами (рис. 5, б ).

íàïéçéÇ Ä.ç. åéãÖäìãüêçõÖ åéíéêõ. ó‡ÒÚ¸ 2. åÓÎÂÍÛÎflÌ˚ ÓÒÌÓ‚˚ ·ËÓÎӄ˘ÂÒÍÓÈ ÔÓ‰‚ËÊÌÓÒÚË 21


4 нм кальным слоем и мембраной вакуоли расположен
а слой движущейся цитоплазмы, в котором находят-
ся ядра, митохондрии и другие органеллы. Молеку-
лы миозина совершают круговое движения внутри
клетки, равномерно перемещаясь вдоль нитей ак-
ADP Pi тина и увлекая за собой сравнительно крупные ор-
ADP ADP ганеллы (митохондрии, эндоплазматический рети-
ADP ATP
Pi Pi кулум, ядра и др.). Скорость перемещения органелл
ATP составляет 50–75 мкм/с. Благодаря такому движе-
нию в гигантской клетке водоросли возникает цир-
куляция цитоплазмы, за счет которой ее содержимое
перемешивается гораздо быстрее, чем это происхо-
дило бы путем простой диффузии. Гигантские клет-
36 нм
ки зеленых водорослей достигают длины 2–5 см,
б поэтому без принудительной циркуляции цито-
ADP + Pi ADP + Pi плазмы молекулам белков потребовалось бы около
10 дней для диффузии с одного конца клетки на
ATP ATP
другой.
Интригующей загадкой, которая до сих пор ос-
тается без ответа, является движение хлоропластов
в цитоплазме клеток водорослей и высших растений.
Известно, что при освещении растений хлоропласты
быстро перемещаются внутри клетки, собираясь
Рис. 5. Схема перемещения молекулы миозина вблизи клеточной стенки. Другое удивительное яв-
вдоль нити актина ление, связанное с движением хлоропластов, было
открыто в 1839 году французским ученым Донне,
который показал, что хлоропласты зеленой водо-
Кооперативный способ работы молекул миози-
росли Chara могут часами вращаться (один оборот
на, характерный для скелетных мышц, встречается
за 2–3 с) в одном и том же направлении в капле про-
также в некоторых других сократительных систе-
топлазмы, выдавленной из клетки. Вращение хлоро-
мах. Известна, однако, большая группа моторных
пластов наблюдалось также в цитоплазме интактных
белков, которые работают индивидуально; цикл их
клеток водорослей (см. подробнее [4, с. 175–177].
механохимических превращений протекает в рав-
В.П. Скулачев с сотрудниками показал, что враще-
номерном режиме, а перемещение происходит от-
ние хлоропластов – это энергозависимый процесс,
дельными шагами, без длинных прыжков, харак-
который поддерживается за счет протонного по-
терных для миозина скелетных мышц. К таким
тенциала. В предыдущей статье мы говорили о том,
молекулярным моторам относятся некоторые клас-
каким образом энергия протонного потенциала ис-
сы внемышечных миозинов, работающих в клетках
пользуется для вращения роторов протонной АТР-
животных и растений в качестве перевозчиков мем-
синтазы и флагеллярного мотора бактерий. Воз-
бранных частиц. Простейшие молекулы миозина,
никает, однако, вопрос: что заставляет вращаться
выполняющие работу индивидуальных переносчи-
хлоропласты, которые в отличие от бактерий не
ков (например, миозин класса I), имеют глобуляр-
имеют на своей наружной поверхности вращаю-
ную головку и короткий хвост. Двигаясь вдоль нити
щихся жгутиков? Связано ли вращение хлоропласта
актина цитоскелета, молекула-переносчик может
в цитоплазме с существованием у них специальных
тащить за собой органеллу, к которой она прикреп-
пропеллеров, подобных тем, которые недавно были
ляется своим хвостом. Таким способом молекулы
обнаружены у некоторых цианобактерий, или же
миозина обеспечивают работу транспортной систе-
это вращение каким-то загадочным образом связа-
мы, предназначенной для переноса различных час-
но с направленным вращением роторов многочис-
тиц и органелл в клетке.
ленных АТРсинтазных комплексов, приводимых в
Движение органелл легко наблюдать в некото- движение за счет протонного потенциала? Ответы
рых крупных клетках, таких, как гигантские клетки на эти и многие другие вопросы, касающиеся по-
зеленой водоросли Nitella. Интересна структурная движности различных биологических структур, еще
организация транспортной системы, обеспечиваю- предстоит получить.
щей циркуляцию цитоплазмы в клетках зеленых во-
дорослей [3, с. 227]. На периферии клетки, рядом с äàçÖáàç
плазматической мембраной, находится слой хлоро-
пластов. Хлоропласты примыкают к так называемо- Одним из самых простых механохимических
му кортикальному слою, который содержит пучки белков является кинезин. Кинезин работает как пе-
актиновых нитей. Между неподвижными корти- реносчик различных органелл (митохондрии, лизо-

22 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹6, 1999


сомы) и супермолекулярных частиц. В клетках ты двух мономерных цепей сплетены вместе, а на-
дрожжей найдено шесть белков, похожих на кине- клоненные в разные стороны головки образуют
зин. В клетках мышей обнаружено более двух десят- своеобразную рогатину, которая непосредственно
ков подобных белков. Двигаясь вдоль микротрубо- взаимодействует с глобулярными мономерами мик-
чек (рис. 6), молекула кинезина может тянуть за ротрубочки, вдоль которой перемещается кинезин
собой сравнительно крупные субклеточные части- (рис. 6).
цы. Тубулиновые микротрубочки построены из гло-
булярных белков двух типов (α- и β-тубулин). Из Каждая из двух головок кинезина обладает
этих субъединиц образуются линейные полимеры АТРазной активностью. Связывание и гидролиз
(протофиламенты), в которых чередуются глобулы молекулы АТР в активном центре кинезина, а также
α- и β-тубулина. Из 13 протофиламентов, располо- последующие события, вызванные диссоциацией
женных по кругу, получаются микротрубочки диа- ADP и Pi , сопровождаются изменением положения
метром около 30 нм, с которыми непосредственно головок относительно тубулиновых мономеров, в
взаимодействуют молекулы кинезина. результате чего кинезин перемещается вдоль мик-
ротрубочки. Работа головок кинезина хорошо ско-
По структурным и биохимическим свойствам ординирована: связывание и гидролиз молекулы
кинезин напоминает миозин. Молекула кинезина АТР одной головкой димерного комплекса способ-
представляет собой димер, образованный двумя ствует освобождению молекулы АDP из активного
одинаковыми полипептидными цепями. Подобно центра другой головки. Головки кинезина попере-
молекуле миозина, с одной стороны каждой поли- менно связываются с мономерными звеньями мик-
пептидной цепи кинезина формируется глобуляр- ротрубочки. На рис. 6 показана одна из наиболее
ная головка, соединенная со сравнительно длинным вероятных схем работы кинезина, которая объясня-
хвостом. Линейные размеры головки сравнительно ет, каким образом происходит перемещение кине-
невелики, они составляют 7,5 × 4,5 × 4,5 нм. Хвос- зина вдоль микротрубочек. В ходе структурных пе-
рестроек моторных участков кинезина угол наклона
головок относительно микротрубочки изменяется,
ATP ADP Pi вследствие чего кинезиновый димер смещается
1 2 3 4 вдоль микротрубочки. Это движение по своему ха-
рактеру напоминает перемещение двуногого суще-
D D ства – головки кинезинового димера попеременно
T D T опираются на тубулиновые глобулы микротрубоч-
ки. До сих пор не совсем понятны детали того, ка-
ким образом молекула кинезина “шагает”. Весьма
вероятно, что на определенной стадии происходит
поворот рычагов относительно хвоста кинезиново-
го димера (рис. 6). В этом случае движение кинези-
нового димера вдоль микротрубочки можно было
бы сравнить с движением вальсирующего человека,
который перемещается в танцевальном зале, совер-
шая периодические повороты на 180° вокруг ноги,
Рис. 6. Схема перемещения молекулы кинезина опирающейся на пол. После каждого такого пово-
вдоль микротрубочки, состоящей из мономеров рота танцор переступает на другую ногу, совершая
тубулина α и β. Буквами T и D обозначены головки тем самым поступательное движение в пространстве.
кинезина, с которыми связаны соответственно
АТР или ADP. В исходном положении (состояние 1 ) В случае кинезина один шаг димерного комп-
головка кинезина, не связанная с микротрубоч-
кой, содержит молекулу ADP, вторая головка, ко- лекса приводит к его смещению вдоль микротру-
торая в это время контактирует с микротрубоч- бочки на расстояние ∆l = 8 нм. Длина шага ∆l в
кой, свободна от нуклеотидов. После связывания точности соответствует размеру двух мономерных
АТР второй головкой изменяется конформация глобул (α-тубулин и β-тубулин), из которых построе-
молекулы кинезина, в результате чего первая го-
ловка, содержащая ADP, смещается вправо (пере- на микротрубочка. Одна молекула кинезина обыч-
ход 1 2 ). После диссоциации ADP свободная но совершает не менее 100 шагов, прежде чем она
головка связывается с микротрубочкой (переход отделяется от микротрубочки. Кинезин движется с
2 3 ). Затем происходят гидролиз АТР и дис- поразительно быстрой скоростью. За одну секунду
социация фосфата (Рi), в результате чего головка,
с которой связана молекула ADP, отходит от мик- он делает приблизительно 100 шагов, перемещаясь
ротрубочки (переход 3 4 ). В конечном поло- за это время на расстояние 800 нм. При этом сила,
жении (состояние 4 ) углы наклона головок кине- развиваемая одной молекулой кинезина, составля-
зина относительно микротрубочки такие же, как в ет величину F ≈ 6 пН. Если бы такой мощностью в
исходном состоянии 1, но при этом молекула ки-
незина оказывается смещенной вдоль микротру-
расчете на единицу массы обладали автомобильные
бочки на расстояние, соответствующее двум мо- моторы, то они могли бы легко разгонять машины
номерным звеньям тубулина α и тубулина β до скоростей, существенно превышающих скорость

íàïéçéÇ Ä.ç. åéãÖäìãüêçõÖ åéíéêõ. ó‡ÒÚ¸ 2. åÓÎÂÍÛÎflÌ˚ ÓÒÌÓ‚˚ ·ËÓÎӄ˘ÂÒÍÓÈ ÔÓ‰‚ËÊÌÓÒÚË 23


звука. Коэффициент полезного действия кинези- физических методов регистрации подвижности
нового мотора также велик. Совершаемая им за белков, которые позволили непосредственно на-
один шаг работа равна ∆W = F ⋅ ∆l = 48 пН ⋅ нм, что блюдать за движением отдельных моторных белков
составляет ∼60% от энергии, выделяемой при гид- и их фрагментов.
ролизе одной молекулы АТР. Работая в качестве ин- Автор признателен В.П. Скулачеву за критичес-
дивидуального молекулярного извозчика, кинезин кие замечания и полезные советы.
может совершать перемещения на очень большие
расстояния (до 1 мм).
ãàíÖêÄíìêÄ

áÄäãûóÖçàÖ 1. Васильев Ю.М. Клетка как архитектурное чудо. 1.


Живые нити // Соросовский Образовательный Жур-
нал. 1996. № 2. С. 36–43.
Мы рассмотрели механизмы работы всего лишь
двух молекулярных моторов, которые ответственны 2. Васильев Ю.М. Клетка как архитектурное чудо. 2.
Цитоскелет, способный чувствовать и помнить // Там
за сократительную активность, подвижность и же. № 4. С. 4–10.
транспортные процессы в клетке. Этими примера-
ми далеко не ограничивается число моторных бел- 3. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж., Робертс К., Уотсон
Дж. Молекулярная биология клетки. 2-е изд. М.:
ков. Одних только механохимических белков типа Мир, 1994. Т. 2. С. 254–337.
миозина в клетках различных организмов насчиты-
4. Скулачев В.П. Биоэнергетика. М.: Высш. шк., 1989.
вается более 15 семейств и свыше 84 видов. Многие С. 175–177.
принципиально важные детали механохимических
процессов, происходящих при работе актомиози-
* * *
нового и кинезинового комплексов, стали понят-
ными благодаря недавним успехам в изучении мо- Александр Николаевич Тихонов, доктор физи-
лекулярной структуры их моторных белков методом ко-математических наук, профессор, главный на-
рентгеноструктурного анализа. С высоким разреше- учный сотрудник кафедры биофизики физического
нием получены картины пространственного строе- факультета МГУ. Область научных интересов – био-
ния моторных участков миозина, кинезина, динеи- физика фотосинтеза, биоэнергетика, магнитная
на и родственных им механохимических белков. радиоспектроскопия. Соавтор трех книг на русском
Другим важным достижением в исследовании мо- и английском языках, а также более 140 статей в
лекулярных моторов явилась разработка новых био- отечественных и зарубежных научных журналах.

24 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹6, 1999