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Tincin diferencial 1. Objetivo y Alcance

1.1 Objetivo. Que el estudiante clasifique algunas especies de bacterias en Gram+ o Gram negativas de acuerdo a la tincin de Gram. 1.2 Alcance. El alumno ser capaz de identificar bacterias Gram+ y Gram-.

2. Seguridad y declaraciones
2.1 Indicaciones de seguridad 1 El alumno deber ingresar al laboratorio con bata, botas o zapatos cerrados El alumno (a) con cabello largo deber amarrarlo y recogerlo antes de ingresar al laboratorio. La alumnas debern llevar las uas cortas. No se permite el ingreso al laboratorio con uas largas. El alumno (a) deber portar guantes de latex o nitrilo, cubre bocas y cofia. 2 NA (No aplica) 2.2 Trminos especficos Aerobio. Microorganismo que solo pueden vivir en un medio con oxgeno. Colonia. Agregacin macroscpica de clulas en un medio slido, cada una

de ellas se origina de una simple clula. Cultivo. Acumulacin visible de microorganismos en un medio de cultivo, tambin se refiere a la propagacin de organismos en varios medios. Esterilizacin. Cualquier proceso que remueve completamente o destruye a microorganismos viables presentes en un material o rea determinada. Estril. Completamente libre de todas las formas de vida, incluyendo esporas y virus. Gram negativas. Son aquellas bacterias que no se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram y lo hacen de un color rosado. Presentan dos membranas lipdicas entre las que se localiza una fina pared celular de peptidoglicano. Gram positivas. Slo presentan una membrana lipdica y la pared de peptidoglicano es mucho ms gruesa, no retiene el colorante durante la tincin de Gram. Incubar. Aislar un cultivo a una temperatura controlada para favorecer el crecimiento de microorganismos. Medio de cultivo. Consiste en un gel o una solucin que cuenta con los nutrientes necesarios para permitir (bajo condiciones favorables de pH y temperatura) el crecimiento de bacterias, hongos, clulas animales o vegetales o incluso pequeas plantas. Mesfilo. Microorganismos que crecen a temperaturas intermedias.

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Tincin diferencial

Morfologa. Estudio de la forma y estructura de los microorganismos. Tincin diferencial. Tcnica que utiliza dos colorantes que permiten contrastar o identificar entre diferentes grupos microbianos o partes de una clula. Tincin simple. Tcnica de tincin que usa un solo tipo de colorante para observar clulas en microscopio, la tcnica tie a las clulas del mismo color.

2.3 Vigencia Las prctica de laboratorio ser revisada cada 3 aos (Periodo de revisin del PPE)

3. Desarrollo de la prctica
3.1 Equipo necesario para el desarrollo de la prctica 1 Microscopio ptico Portaobjetos 1 Mechero Bunsen Cubre objetos 1 Asa microbiolgica

3.2 Sustancias o insumos Cant. 2g 1g 0.4 g 0.6 g 3.2 Profesor: Sera el responsable de verificar que se trabaje adecuadamente. Estudiante Reactivo Cristal Violeta Oxalato de amonio Yodo (I2) Yoduro de potasio (KI) Cant. 100 mL 2g 20 mL Reactivo Acetona Safranina C H19NaCl Alcohol etilico
20

3.3

Fase 1 de la prctica: 3.3.1 Seleccionar cultivos microbianos con crecimiento. Fase 2 de la prctica: 3.3. Fijar las muestras en un portaobjetos. Fase 3 de la prctica: 3.3.3 Teir las muestras. Fase 4 de la prctica:

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3.3.4 Observacin al microscopo.

4. Referencias
4.1) Procedimientos relacionados

Preparacin, fijacin y coloracin simple de frotis Tincin diferencial de Gram

4.2) Documentos de referencia Manual de asignatura. Universidades politcnicas Manual de prcticas de Microbiologa General. Universidad Autnoma Metropolitana Iztapalapa

5. Anexos
5.1) Formatos y diagramas:

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Tincin diferencial
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Actividades a desarrollar en la prctica:

5.2) Informacin:

Manejo de Residuos: Todos los residuos generados de los cultivos debern esterilizarse antes de depositarse en un recipiente destinado para estos.
6. Revisiones
No. Revisin Descripcin 0 Creacin del documento.

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Tincin diferencial Anexos 5.1 Formatos

ACUSE DE ENTREGA DE MANUAL

ELABORA: FECHA:

SE ENTREGA MANUAL DE ASIGNATURA PARA:

REVISION REVISION MODIFICACION ES APROBACION

Otros

TITULO:

OBSERVACIONES:

RECIBIO:

FECHA:

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Tincin diferencial 5.2 Formatos

LISTA DE DISTRIBUCION
SE ENTREGA UNA COPIA CONTROLADA DE MANUAL DE ASIGNATURA
TITULO: DESTINO DEL DOCUMENTO:
REVISION: RESGUARDO: SUSTITUYE AL ANTERIOR:

No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 OBSERVACIONES:

NOMBRE

FECHA

PUESTO

FIRMA

ELABORA:

ACADEMIA DE INGENIERIA QUMICA

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Tincin diferencial 5.2 Mapa de proceso del procedimiento.

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