Lasenzimasregulatorias.

Otoo

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PorDanielArturoZavalaOrtz.(E08020574)

Traduccindelcapitulo8dellibroBichemistryLehninger. Profesora:M.C.ZaidaOrtaFlores. Asignatura:BioqumicaI.

InstitutoTecnolgicodeVeracruz.

Enzimasregulatorias. Ahora enfocamos nuestra atencin a una clase especial de enzimas que presentan excepciones a algunos patrones descritos en este capitulo. En el metabolismocelulargruposdeencimastrabajanjuntasenvassecuencialespara realizar un proceso metablico dado, tal como los mltiples procesos de conversin de glucosa a lactato en msculos esquelticos las mltiples reaccionesdesntesisdeunaminocidoapartirdeunprecursorenunaclula bacteriana. En algunos sistemas enzimticos, el producto de la reaccin de la primeraenzimaseconvierteenelsustratodelasiguiente,yassucesivamente. La mayora de las enzimas en cada sistema siguen patrones cinticos ya descritos. Sin embargo, en cualquier sistema enzimtico hay por lo menos una enzimaquedeterminalatasadereaccindetodaslassecuenciasporquelimita latasadereaccinoeslaenzimaalaquepertenecelavelocidadlimitante.Estas enzimas regulatorias muestran incrementos o decrementos de su actividad cataltica en respuesta a ciertas seales. Con las acciones de estas enzimas regulatorias, los procesos metablicos son constantemente ajustados para satisfacerloscambiosenlasdemandasdeenergaybiomolculasrequeridasen el crecimiento y reparacin celular. En la mayora de los sistemas multi enzimticos la primera enzima en catalizar es una enzima regulatoria. En el procesodecatlisis,inclusolasprimerasreaccionesdeunavaqueconduceaun producto innecesario desvan energa y metabolitos de otros procesos mas importantes.Porlotanto,unexcelentesitiopararegularunavametablicaes el punto critico de la va metablica. Las otras enzimas en la secuencia de reaccin usualmente se presentan en concentraciones que proveen un gran excesodeactividadcataltica;estaspuedenestimularsusreaccionestanrpido comosussustratosestnsaliendodelasreaccionesprecedentesnecesarias. Laactividaddelasenzimasregulatoriasesmoduladamediantediversostipos demolculassealizadoras,lascualessongeneralmentepequeosmetabolitoso cofactores.Grossomodoexistendosclasesdeenzimasregulatoriasenlasvas metablicas.Lasenzimasalostricasqueactanreversiblemente,medianteuna uninnocovalenteconelmetabolitoregulatoriollamadomodulador.Eltermino

alostrico proviene del griego allos que significa otros y stereos que significa slido o figura. Las enzimas alostricas son aquellas que tienen otras formas u arreglos espaciales inducidos por la unin con los moduladores. La segundaclaseincluyealasenzimasreguladaspormodificacionesreversiblesde los enlaces covalentes. Ambas clases de enzimas regulatorias tienden a tener mltiplessubunidades,yenalgunoscasoselsitiositiosregulatoriosylossitios activossonunidadesseparadas. Existen por lo menos otros dos mecanismos por los cuales cada actividad enzimticaesregulada.Algunasenzimassonestimuladasoinhibidasporotras protenas de control que se unen a ellas y afectan su actividad. Otras son activadas por el desdoblamiento proteico, el cual a comparacin de los otros mecanismos es irreversible. Ejemplos importantes de estos dos mecanismos se puedenobservarenprocesosfisiolgicostalescomoladigestin,lacoagulacin delasangre,lasaccionesdelashormonasyenlavisin. No existe regla alguna que dicte la frecuencia de los diferentes tipos de regulacinenlosdiferentessistemas.Enciertogrado,laregulacinalostrica( sinenlacescovalentes)puedepermitirunajustedelasvasmetablicasqueson requeridas continuamente pero a diferentes niveles de actividad acorde a las necesidades celulares que cambian. La regulacin dada por modificaciones en enlaces covalentes tienden a inhibir o permitir totalmente la actividad enzimtica, sin embargo, ambos tipos de regulacin son estudiados en cierto numerodeenzimasregulatorias.

Las enzimas alostricas son reguladas por enlaces no covalentes con los moduladores. En algunos sistemas multi a LIsoleucina. En este sistema, la primera enzima, treonina deshidratasa es inhibida por la isoleucina, el producto de la ultima reaccin del conjunto de reacciones enzimticas. La isoleucina es bastante especifica como inhibidor. Ningn otro intermediario en esta secuencia de reacciones inhibe la treonina deshidratasa as como ningunaotraenzimaenlasecuencia de reacciones lo hace. La isoleucina no se une al sitio activo, sino a otro sitio especifico en la molcula enzimtica: el sitio regulatorio. Esta es una unin no covalente, y por lo tanto fcilmente reversible; si la concentracin de isoleucina disminuye, la tasa de accin de la treoninadeshidratasaaumenta.As la actividad de la treonina deshidratasa responde rpida y reversiblemente a las fluctuaciones delasconcentracionesdeisoleucina enlaclula.

enzimticoslaenzimaregulatoriaes inhibida especficamente por el producto final de las reacciones siemprequeelproductofinalexceda lasnecesidadescelulares.Cuandose reduzca la reaccin de la enzima regulatoria, las enzimas subsecuentes operaran a tasas de reaccin menores debido a que sus sustratos se agotan. As la tasa de produccindelproductofinaldelas vas enzimticas se encontrara en balance conocido con las necesidades control por celulares. Este tipo de regulacin es como retroaccin negativa, finalmente, la acumulacin de producto final desaceleraratodalavaenzimtica. Uno de los primeros ejemplos descubiertos de la inhibicin por retroaccin alostrica fue en un sistema enzimtico bacteriano que catalizalaconversindeLTreonina

Lasenzimasalostricas,excepcionesavariadasreglasgenerales. Los moduladores para las enzimas alostricas pueden ser inhibidores o estimuladores. Un activador es con frecuencia un sustrato, y las enzimas reguladorasqueescontroladaporunactivadoralostricoqueesunsustratoson llamadas homotrpicas. Cuando el modulador es otra molcula que no sea el sustrato la enzima es heterotrpica. Algunas enzimas tienen dos o mas moduladores. Como se puede ver, las propiedades de las enzimas alostricas son significativamente aquellas enzimas Alguna son regulacin. diferencias diferentes simples de de sin estas diferentes sitios de unin para cada uno de ellos. En las enzimas homotropicaselsitioactivoyelsitio reguladoreselmismo. Las enzimas alostricas mas largas son y

estructurales.

Adems para activar los sitios catalticos, las enzimas alostricas generalmente tienen uno o mas sitios alostricos o reguladores para unirse con el modulador. As como el sitio activo de la enzimas es especifico para su sustrato, el sitio alostrico es especifico para su modulador. Las enzimas con varios moduladores generalmente tienen

generalmente

complejas que las enzimas simples. La mayora de ellas tiene dos o mas cadenas polipeptdicas. o El subunidades aspartato

transcarbamoilasa el cual cataliza la primerareaccinenlabiosntesisde nucletidos pirimidicos, tiene 12 cadenas polipeptdicas organizadas en subunidades catalticas y reguladoras.

Otrasdiferenciasentreenzimasnoreguladasyenzimasalostricasinvolucrasus propiedades cinticas. Las enzimas alostricas muestran relacin entre V0 y el sustrato (S) que difieren del comportamiento normal MichaelisMenten. Estas muestransaturacinconelsustratocuando(S)ssuficientementealto,peropara algunas enzimas alostricas, cuando V0 es trazado contra (S) resulta en una curvadesaturacinsigmoideaenlugardelacurvahiperblicamostradaporlas enzimasnoregulatorias.Aunquepodemosencontrarunvalorde(S)enlacurva de saturacin sigmoidea en el cual V0 es la mitad de la velocidad mxima , no

podemos referirnos a ella como Km porque la enzima no sigue la relacin de Michaelismentelconsucurvaparablica.Ensulugarelsmbolo(S)0.5oK0.5es frecuentemente usado para representar la concentracin de sustrato dada a la mitad de la velocidad mxima de la reaccin catalizada por una enzima alostrica. El comportamiento Cintico sigmoideo generalmente refleja interacciones cooperativas entre mltiples subunidades proteicas. En otras palabras, los cambiosdelaestructuradeunasubunidadsonprovocancambiosestructurales en las subunidades adyacentes, un efecto que es mediado por interacciones no covalentesenlainterfaseentrelassubunidades.Losprincipiossonsimilaresa aquellos discutidos en la cooperacin del oxigeno en unirse a la hemoglobina. Las enzimas alostricas homotropicas generalmente tienen mltiples subunidades. En muchos casos el mismo sitio de unin en cada subunidad funciona como sitio activo y regulador. El sustrato puede funcionar como un activador porque las unidades actan simultneamente. La unin de una molculadelsustratoaunsitiodeuninalteralaconformacindelaenzimay mejoraconsiderablementelaunindesubsecuentesmolculasdesustrato.Esto explica porque se forma la grafica sigmoidea en lugar del incremento hiperblicoenv0conelincrementode(S). Con respecto a las enzimas heterotrpicas, en las cuales el modulador es un metabolito distinto al propio sustrato es difcil generalizar a cerca de la condicindelacurvadesaturacindelsustrato.Unactivadorpuedehacerquela curvadesaturacindesustratosehagacasihiperblica.Conundecrementoen K0.5peromanteniendoconstanteenVmax,loquedalugaraunincrementodela velocidaddereaccinaunaconcentracinconstantedesustrato.(V0)esmasalto que cualquier valor de (S). Otras enzimas alostricas responden a un activador medianteunincrementodeVmax,conunpequeocambioenK0.5.Porlotanto,las enzimas alostricas muestran diferentes tipos de respuesta en sus curvas de actividadconelsustratodebidoaquealgunastienenmoduladoresinhibitorios, otrasactivadoresyotrasambos.

Dos modelos explican el comportamiento cintico de las enzimas alostricas LadependenciasigmoidaldeV0sobre (S) refleja para subunidades explicar de estas cooperacin, y ha inspirado a dos modelos interacciones cooperativas. En el primer modelo (El modelo simtrico), propuesto por Jacques Monod y colegasen1965,unaenzimaalostrica puede existir solamente en dos conformaciones,laactivaylainactiva. Todas las subunidades estn en la forma activa o bien todas estn en la forma inactiva. Toda molcula de sustrato que se une incrementa la posibilidad de una transicin del estadoinactivoalactivo. En el segundo modelo (El modelo secuencial), propuesto pero por las Koshland en 1966, hay aun dos conformaciones, cambios subunidadespuedenexperimentar conformacionales individualmente. La unin de sustrato probabilidad incrementa de un Un la cambio cambio

conformacional.

conformacional en una subunidad provoca un cambio similar en la subunidad adyacente, as como la unindeunasegundamolculade sustratoyassucesivamente.Hay mas estados intermediarios posibles en este modelo que en el modelosimtrico.Ambosmodelos no son mutuamente excluyentes, el modelo simtrico puede verse como un sistema activo o no activo , limitando el modelo secuencial. El mecanismo preciso de las interacciones alostricas no ha sido establecido. Diferentes enzimas alostricas pueden tener diferentes mecanismos en sus interaccionescooperativas.

Otrosmecanismosdelasenzimasreguladoras En otra clase importante de enzimas reguladoras , la actividad es regulada por modificaciones covalentes en la enzima. La modificacin de grupos incluido el fosfato, la adenosina monofosfato, uridina monofosfato, ribosa de adenosin bifosfato, y grupos metilo. Estos son generalmente unidos y separados covalentementedelaenzimareguladoraporenzimasseparadas. Un ejemplo importante de regulacin mediante la modificacin de enlaces covalenteseslaglicgenofosforilasa(Mr94,500)demsculoehgado,elcual catalizalareaccin: (Glucosa)n+Pi Glicgeno (Glucosa)n1+Glucosa1Fosfato.

La glucosa1fosfato formada puede degradarse hasta lactato en msculo o ser convertidaenglucosayliberadaenelhgado.Laglucgenofosforilasaactade dos formas: La forma activa fosforilasa y la relativamente forma inactiva b fosforilasa.Lafosforilasatienedossubunidades,cadacualesconunespecifico tratamientodesuresiduoqueesfosforiladoenelgrupohidroxilo.Estosresiduos de serina fosfato son indispensables para una mxima actividad de la enzima. Losgruposfosfatopuedenserremovidosmediantehidrlisisdelafosforilasa porunaenzimaseparadallamadafosforilasafosfatasa: fosforilasa+2H2O (Masactiva) bfosforilasa+2Pi (Menosactiva) Enestareaccinlafosforilasaesconvertidaenbfosforilasaporladivisinde dosenlacescovalentesdeserinafosfato. La bfosforilasa puede reactivarse a fosforilasa mediante otra enzima, la fosforilasaquinasa,lacualcatalizalatransferenciadegruposfosfatodelATPa loshidroxilosdelosresiduosespecficosenlabfosforilasa.

bfosforilasa+2ATP (Menosactiva)

fosforilasa+2ADP (Masactiva)

Larupturadeglucgenoenelmsculoesquelticoyelhgadoestareguladapor variacionesdelasproporcionesdelasdosformasdelaenzima.Lasformas& b de la fosforilasa difieren en su estructura cuaternaria, el sitio activo sufre cambiosensuestructura,ycomoconsecuencia,cambiosenlaactividadcataltica cadavezquehaynterconversionesdeformas. Algunas de las enzimas regulatorias mas complejas se encuentran en los puntos de particular importancia en elmetabolismo,paraquerespondan a los mltiples a metabolitos travs alostricas de y regulatorios modificaciones manera alostrica por AMP, el cual es un activador de la b fosforilasa, y muchas otras molculasquesoninhibidoras. LaglutaminasintetasadeE.Coli,una de las enzimas regulatorias mas complejas conocidas, proporciona ejemplos alosterismo, de regulacin por modificaciones

covalentes. Glicgeno fosforilasa es un ejemplo. Aunque su regulacin primariaesatravsdemodificacin covalente,cabedecirquetambines modulada no covalentemente, de

covalentesreversiblesydeprotenas regulatorias. Tiene por lo menos ochomoduladoresalostricos.

La activacin de una enzima por divisin proteica es un mecanismo de regulacin un tanto diferente. Un precursor inactivo de la enzima, llamado zimgenooproenzima,secortaparaformarlaenzimaactiva.Muchasproteasas del estomago y pncreas son reguladas de esta forma. La quimotripsina y la tripsina son inicialmente sintetizadas como quimotripsingeno y tripsingeno respectivamente. Rupturas especificas provocan los cambios conformacionales queexponeelsitioactivodelaenzima.Debidoaqueestetipodeactivacines irreversible,otrosmecanismossonnecesariosparainactivarestasenzimas.Las enzimas proteolticas son inactivadas por protenas inhibidoras que se unen fuertemente al sitio activo de la enzima. El inhibidor de la tripsina pancretica

(Mr 6,000) se le une a esta y la inhibe; la 1 antiproteasa (Mr 53,000) primeramente inhibe la elastasa. Se cree que una insuficiencia de 1 antiproteasapuedesercausadaporlaexposicinalhumodecigarrillo,elcual conduceaundaopulmonarylacondicinconocidacomoenfisema. Otros ejemplos de activacin de zimgenos suceden en las hormonas, tejido conjuntivo, y el sistema de coagulacin sanguneo. La hormona insulina es producida a partir de la ruptura de la proinsulina, el colgeno es inicialmente sintetizado como un precursor soluble llamado procolgeno, y la coagulacin sanguneaesreguladaporunacomplejacascadadeactivacionesdezimgenos.