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Anlisis fsico qumico del agua

1.Objetivos 2.Introduccin. 3.Materiales Utilizados 4.Resultados 5.Reporte de los Resultados 6.Discusin de Resultados 7.Antecedentes 8.Post Laboratorio (Anexado) 9.Funciones del Agua como proceso en la Industria Alimentaria 10. Conclusin 11. Bibliografa Objetivo General: Realizar anlisis Fsico Qumicos del agua, evaluando los resultados frente a los estndar de calidad para agua potable. Objetivos Especficos: Determinar el material que queda en la cpsula luego de la evaporacin de la muestra de agua y secado en una estufa a una temperatura determinada. Determinar cual es la intensidad de la alcalinidad y acidez del agua, con la ayuda de un potencimetro. Determinar la alcalinidad del agua representada por el contenido de bicarbonatos, carbonatos e hidrxidos, utilizando un indicador para determinar su punto fina por la titulacin colorimtrica. (Esta va a ser denominada alcalinidad total). Determinar la alcalinidad fenolftaleinica del agua debido a la presencia de iones bicarbonatos, midindose con fenolftaleina como indicador. Determinar el contenido de sales carbonaticas y no carbonaticas asociadas con los iones calcio y magnesio (dureza total). Determinar si el agua contiene cloro residual.

INTRODUCCIN. En nuestro planeta, el agua (H2O) es la nica sustancia que coexiste abundantemente en los tres estados fsicos posibles. Es nuestro nico lquido comn y el slido pura mas ampliamente distribuido, estando siempre presente en todas partes de la atmsfera suspendido en forma de partculas de hielo o sobre la superficie terrestre en diversos tipos de nieve y hielo. Es esencial para la vida; como importante reguladora de la temperatura corporal, como disolvente y vehculo portador de nutrientes y productos catablicos, como reactante y medio de reaccin, como lubricante y plastificador, como estabilizante de la conformacin de biopolmeros, como probable inductora del comportamiento dinmico de macromolculas, incluyendo sus propiedades (Enzimticas) catalticas y de otras formas ignoradas. Es verdaderamente sorprendente que la vida orgnica dependa tan ntimamente de esta pequea molcula inorgnica y quizs mas destacable aun que muy pocas personas y cientficos se hayan percatado de ello.

Pero el agua como principal componente de muchos alimentos; realiza una serie de tratamientos tanto industriales como domsticos; para obtener los: Residuos totales PH Alcalinidad o Fenolftaleina o Total Dureza Total Cloro residual

Lo dicho anteriormente es lo que vamos a demostrar en el siguiente con una muestra de agua tomada en un hogar del Estado Cojedes Para saber que calidad tiene el agua que estamos consumiendo; todo estar respaldado de las normas COVENIN y referencias bibliogrficas. Materiales Utilizados:

Cpsula de porcelana Phmetro Bureta Fiola de 250 ml Fiola Yodomtrica Pipeta de 50 ml (volumtrica) Buffer pH 4 0,01 Buffer pH 7 0,01 Fenolftaleina (indicador) Anaranjado de Metilo (indicador) H2SO4 0,0113 N Solucin amortiguadora pH 10 Negro de eriocromo T (indicador) E.D.T.A 0,01 N Almidn soluble 1 % (indicador) H2PO4 25 %

Resultados (Sin comentarios) Muestra de agua tomada en el "pueblo nuevo" callejn "El trpico" casa n 51 56 Tinaco Edo Cojedes a las 6:00 am (25 02 04) por David Ramos C.I.: 15.628.626.

Los Anlisis Realizados 1. Residuos totales: a. Cpsula sin residuos = 47,15 gramos b. Cpsula con residuos = 47,16 gramos 2. pH: a. pH de la muestra de agua = 7,2 3. Alcalinidad a. Fenolftaleina: Alcalainidad result 0 (cero) "no dio color"

b. Total : se utilizaron con un volumen de 12 ml de H2SO4 al 0,0113 N para obtener la coloracin naranja. 4.Dureza total: se utiliz un volumen de 16,5 ml de EDTA al 0,02 N para obtener al punto final un "azul". 5.Cloro residual: se utiliz un volumen de 2,3 ml de tiosulfato de sodio al 0,001 N Reporte de los Resultados: 1.- Residuos Totales: RF = 47,16 gr 47,15 gr = 0,01 gr. 50 ml mustra = 0,05 lt 0,5 lt 0,01 gr 1 lt x (?) x = 0,01 gr x 1 lt / 0,05 = 0,2 gr / lt = 200 mg/lt 2.- pH: pH de la muestra de agua = 7,2. 3.- Alcalinidad:

4.- Dureza Total:

5.- Cloro Residual.

Discusin de Resultados: 1.Residuos Totales: a. Para el agua de tomar: el lmite es 500 mg/lt (0,5 gr/lt) segn las normas internacionales. b. Segn COVENIN 2342 86. Agua Potable. Establece que el residuo filtrante total a 180 C, debe ser menor de 0,5 mg. c. En la muestra de agua que se utiliz en el laboratorio, se puede decir que el residuo total, est en los parmetros de las normas internacionales. Porque fue de 200 mg/lt 0,2 gr/lt. 2.Determinacin del pH a. El valor normal del pH para el agua de consumo es de 7,6. b. Segn COVENIN 2187 84. Agua Potable. Establece que la determinacin de acidez en el agua, debe estar entre 6,5 8,5 pH. c. Entonces se puede decir que la muestra de agua utilizada, es apta para el consumo ya que se encuentra entre los rangos establecidos por COVENIN. (El agua tuvo un pH de 7,2). 3.Determinacin de la Alcalinidad:

a. Segn las normas COVENIN 2188 84. Agua Potable. Establece que para la determinacin de la alcalinidad en el agua potable, esta debe ser menor de 20 mg/lt de CaCo3. b. Comparando el resultado de la muestra de agua utilizada que fue de 2,71 mg/lt, con las normas COVENIN, se puede decir que la alcalinidad del agua es bastante baja. 4.Determinacin de la Dureza Total: a. Segn COVENIN 2408 86. Agua. Establece que para la determinacin de la Dureza Total del agua, debe ser menos de 5 mg/lt. b. Se puede decir que la muestra de agua utilizada es poco dura, ya que su resultado fue de 3,30 mg/lt. Antecedentes Acidez pH: La acidez de un agua es una medida de la cantidad total de substancias cidas (H+) presentes en esa agua, expresados como partes por milln de carbonato de calcio equivalente. Se ha demostrado que un equivalente de un cido (H+) es igual al equivalente de una base (OH-). Por lo tanto no importa si el resultado se expresa como cido o como base y, por conveniencia, la acidez se reporta como el CaCO3 equivalente debido a que en muchas ocasiones no se sabe con exactitud que cido est presente. Alcalinidad: Es una medida de la cantidad total de sustancias alcalinas (OH-) presentes en el agua y se expresan como partes por milln de CaCO3 equivalente. Tambin se hace as porque puede desconocerse cules son los lcalis presentes, pero stos son, al menos, equivalentes al CaCO3 que se reporte. "La actividad de un cido o un lcali se mide mediante el valor de pH. En consecuencia, cuanto ms activo sea un cido, menor ser el pH y cuanto ms activo sea un lcali, mayor ser el pH. Cloro Residual: La concentracin del cloro residual "libre", as como la porcin relativa entre los cloros residuales "libre" y "combinado", son importantes cuando se practica la cloracin q residual libre. En un determinado abastecimiento de agua aquella porcin del cloro residual total "libre", sirve como medida de la capacidad para "oxidar" la materia orgnica. Cuando se prctica la cloracin q residual libre, se recomienda que cuando menos, el 85 % del cloro residual total quede en estado libre. La cloracin es tambin un mtodo relativamente eficiente como tratamiento correctivo, si se aplica en las cantidades adecuadas, adicionales a las que se requieren para propsitos de desinfeccin. A veces se requieren tan grandes concentraciones de cloro, que se necesita de un decloracin posterior para que no se presenten sabores ni olores de cloro en el agua. Una tcnica de cloracin relativamente reciente, incluye el uso de cloruro de sodio junto con la cloracin ordinaria. En esta reaccin se produce bixido de cloro. Post Laboratorio (Anexado):

Tratamiento que recibe el H2O antes de su uso industrial o domstico: Los tratamientos recomendados para un H2O cualquiera dependern del uso al cual ella se destine: domstico, industrial, etc. El H2O que se utiliza para el abastecimiento de una poblacin (usos bsicamente domsticos) debe ser, especficamente, un agua exenta de organismos patgenos que evite brotes epidmicos de enfermedades de origen hdrico. Para lograr esto ser necesario desinfectar al agua mediante tratamientos fsicos o qumicos que garanticen su esterilidad microbiano patgena. Los tratamientos mas conocidos son la cloracin propiamente dicha, hipocloracin y cloraminacin; la aplicacin de ozono, rayos ultravioletas, cal y plata. De ellos, el primero es el casi universalmente adoptado, en razn, principalmente, a que el cloro deja residuos que pueden eliminar contaminaciones posteriores. Tratamiento de Desinfeccin de Agua para uso Industrial o Domestico: El Ozono (O3): Es en realidad oxigeno trimolecular, presentando la propiedad de desintegrarse fcilmente y convertirse en oxgeno nacientes, el cual tiende a oxidar rpidamente las materias orgnicas presentes en la reaccin. Si aplicamos ozono al agua, podremos con tal virtud obtener una desinfeccin cuyo procedimiento se denomina ozonificacin. Lo aparatos ozonificadores inyectan al agua el aire ozonificado; luego se mezcla ese aire durante un tiempo suficiente para que acte su poder desinfectante. Los Rayos Ultravioletas: Los rayos ultravioletas, producido en el espectro solar inmediatamente despus de los violetas, son invisible y poseen la propiedad de destruir bacterias y esporas en virtud de la longitud de onda de sus rayos. Esta desinfeccin se efecta haciendo pasar el agua, en filetes debe ser de un espesor de unos 10 cm. Esta tcnica motivo muchos gastos excesivos y diseos complicados, pocos prcticos, para desinfectar volmenes apreciables de agua, como es en el caso de abastecimientos municipales. Plata: Mediante el procedimiento denominado electrocadismo se puede desinfectar el agua con la ayuda de plata, metlica. La tcnica consiste en pasar el agua a travs de un tubo que contenga electrodos de plata metlica conectados a un generador de corriente directa de 1,5 voltios. Tratamiento del H2O ante del uso Industrial (Fsico o Qumico): La purificacin del agua para uso industrial puede ser muy compleja o relativamente simple, dependiendo de las propiedades del agua cruda y del grado de pureza requerid. Se emplean muchos mtodos y combinaciones de ellas, pero todos abarcan tres procesos bsicos: tratamiento fsico, qumico y fisicoqumico. Tratamiento Fsico:

El tratamiento fsico abarca los procesos mediante los cuales las impurezas se separan del agua sin producirse cambios en la composicin de las sustancias. Los mtodos mas comunes son sedimentacin, colado y filtrado, destilacin.

Sedimentacin En la sedimentacin se aprovecha la accin que ejerce la fuerza de gravedad sobre las partculas mas pesadas que el agua, que descienden depositndose sobre el fondo. Las aguas superficiales contiene diferentes cantidades de materia en suspensin y este mtodo se emplea para clarificar el agua cruda, ya sea por sedimentacin simple o mediante la adicin de coagulantes qumicos. Los recipientes donde se lleva a cabo este proceso se denominan tanque de sedimentacin.

Colado y Filtrado: Los coladores y filtros pueden utilizarse cuando se necesario eliminar slidos suspendidos o flotantes en el agua, ya sea como paso adicional, despus de la sedimentacin, o cuando el espacio disponible no permite la instalacin de depsitos de sedimentacin. Existen varios coladores de uso comercial, siendo los mas comunes los de tela, malla metlica, tambor giratorio y disco giratorio. Los filtros de tela y malla metlica se utilizan cuando os materiales suspendidos son relativamente finos y estn en concentraciones bajas.

Destilacin: La destilacin es el mtodo mas antiguo para obtener agua pura de alta calidad. Mediante este proceso puramente fsico de evaporacin y condensacin pueden eliminarse casi totalmente tanto slidos disueltos como los suspendidos. El equipo de destilacin debe estar diseado en tal forma que la eliminacin de lodos e incrustaciones pueda hacerse con un mnimo de mano de obra.

Tratamiento Qumico: El tratamiento qumico es uno de los procesos en los que la separacin de las impurezas del agua implica la alteracin de la composicin del material contaminante.

Precipitacin: Cuando se aaden a una solucin acuosa algunas sales solubles, parte de los iones libres pueden reaccionar para formar compuestos comparativamente insolubles.

Suavizamiento:

El primer proceso qumico de precipitacin que se emple comercialmente, fue la adicin de cal hidratada(Ca(OH)2) al agua para eliminar la dureza de bicarbonatos. La cal disminuye la dureza de bicarbonato formando carbonato de calcio relativamente insoluble: Ca(OH)2 + Ca(HCO3)2 2CaCO3 + 2H2O Mtodos Empleados para Eliminar la Dureza del H2O Agua: Los mtodos son:

Decantacin Filtracin El tratamiento depender de la dureza del H2O

La dureza puede ser carbontica y no carbontica, dependiendo de que las sales de Ca y Mg sean carbonatos y bicarbonatos o sulfatos y cloruros. La dureza puede ser reducida por el mtodo de cal soda, en el cual el xido de calcio, Ca(OH)2 cal viva o apagada reacciona con la dureza temporal bicarbontica, produciendo precipitados de Ca o Mg y la soda ash(Na2Co3) (sulfatos y cloruros), produciendo tambin precipitados de Ca y Mg. Estos precipitados son removidos por decantacin y filtracin. Cmo Influye la Dureza del H2O en la Calidad Final de los Alimentos?: el empleo de H2O con dureza (proviene del carbonato de calcio) y en el escaldado de vegetales reduce la absorcin de agua totalmente carente de cationes tambin ejerce efectos negativos en estos productos. En el caso de las frutas que contiene pectinas, los iones divalentes producen una mayor rigidez. El agua es el principal componente de muchos alimentos, teniendo cada alimento su propio y caracterstico contenido de este componente. El agua en la cantidad, localizacin y orientacin apropiados influyen profundamente en la estructura, aspecto y sabor de los alimentos y en su susceptibilidad a la alteracin debido a que la mayora de los alimentos frescos contienen grandes cantidades de agua, se necesitan modos de conservacin eficaces si se desea su almacenamiento a largo plazo. Cules son los Mtodos de Cloracin de H2O?: segn las normas COVENIN los mtodos son: 1.Mtodo de Mohr: Este mtodo se basa en que en una solucin neutra o ligeramente alcalina, el cromato de potasio puede indicar el punto final de la titulacin de cloruros con nitratos de plata. El cloruro de plata es precipitado cuantitativamente antes de que el cromato de plata rojo se haya formado. 2.Mtodo de Charpentier Volhard: En este mtodo los cloruros de un volumen conocido de agua precipitan en presencia de cidos ntricos por un exceso de nitrato de plata valorado.

Este exceso de sal de plata se determina con una solucin valorada de sulfocianuro amnico en presencia de alumbre de hierro que actan como indicador. 3.Mtodo de Nitrato de Mercurio: En este mtodo los cloruros pueden ser titulados con nitrato de mercurio debido a la formacin de cloruro de mercurio soluble y ligeramente disociado. En el intervalo de pH 2,3 2, 8 la difenilcarbonaza indica el punto final de la titulacin por la formacin de un complejo prpura con exceso de iones mercricos. Tratamiento que Recibe el Agua antes de Alimentar las Calderas: Adicin en fro de una determinada dosis de calcio: el calcio y el magnesio de los bicarbonatos precipitan bajo la forma de carbonatos que se eliminan por filtracin. Cambios inicos "Permutacin" debida a filtros de zeolitas (silicio aluminatos de sodio) que retienen los iones Ca2+ y Mg2+ y ceden, en su lugar iones Na+, Este intercambio tiene por efecto crear un agua rica en bicarbonatos de sodio (o carbonato de sodio, despus de la eliminacin del anhdrido carbnico durante la ebullicin), fuertemente alcalina y que no es aconsejable como agua bebida. Desmineralizacin por intercambio inico sobre Resinas Sintticas: los cationes presentes en el agua se reemplazan por iones hidrgeno y los aniones por iones hidroxilo; tan slo deja de eliminarse, si el agua la contiene, la slice (SiO2), que no est ionizada. Destilacin, aplicable especialmente cuando se dispone de un excedente de calor residual. Hay que resaltar que las aguas desmineralizadas por destilacin o intercambio de iones, son muy agresivas frente al hierro, porque los gases, concretamente el oxgeno y el anhdrido carbnico, son muy solubles en ellas; por lo tanto se necesita desgasificarlas antes de introducirlas en un generador de vapor.

Funciones del Agua como proceso en la Industria Alimentaria: En las industrias alimentarias el agua se utiliza para diversos fines: produccin de vapor, transporte lavado, seleccin y pelado de productos; fluido de intercambio trmico para el calentamiento y enfriamiento (incluido el enfriamiento de sistemas refrigerantes durante la compresin), condensacin de vapores, limpieza de locales y maquinaria, proteccin contra el fuego, ingrediente en los alimentos, etc. El agua utilizada para la preparacin o conservacin de alimentos deber satisfacer naturalmente las normas bacteriolgicas que existen, salvo que se desinfecte por un procedimiento apropiado o que durante los procesos sufra algn tipo de esterilizacin.

Ejemplos de Alimentos mas Comunes en la Industria y su Actividad de Agua: Contenido de agua medio Actividad de agua media

(en tanto por ciento) Carne fresca Queso (Cheddar) Mermelada Frutos secos Miel Solami CONCLUSIN: 65 40 33 18 20 30

(Aw) 0,98 0,97 0,88 0,76 0,75 0,83

El agua en todo proceso industrial o domstico, debe tener una calidad fsico qumica bastante buena para cualquier uso. En general se puede decir que segn las normas COVENIN, la normas internacionales y los anlisis practicados en el laboratorio; Al agua natural, potable o de desecho; se le debe determinar: El residuo filtrable total, que es el material que queda en el cpsula luego de la evaporacin de la muestra de agua. El pH del agua, el cual indica la intensidad de acidez que pueda presentar. La alcalinidad, la cual va a depender del pH del punto final utilizado en la determinacin La dureza total, que es la que va a medir el contenido de sales carbonticas y no carbonticas asociados con los iones calcio y magnesio (Ca+ mg) El Cloro residual, se bsa en que el cloruro a pH 8 o menor, libere el yodolibre de la solucin de yoduro de potasio que se encuentre en la muestra.

Bibliografa: 1. Gustavo Rivas Mijares. "Abastecimiento de Agua y Alcantarillados" Segunda edicin. Editorial Vegas Caracas. Pg. 301 2.OWEN R. FENNEMA. "Qumica de los Alimentos" segunda edicin. Editorial Acribia. Zaragoza (Espaa) Pg.21 3.ABERT LENNINGER. "Curso Breve de Bioqumica" ediciones Omega. Barcelona pg. 17 4. Norma Venezolana COVENIN N 2342 86. Agua Potable. Determinacin del Residuo Filtrable Total Secado a 180 C (slidos disueltos). 5.Norma Venezolana COVENIN N 2408 86. agua. Determinacin de Dureza Total y Calcio. Mtodo Volumtrico. Determinacin de Magnesio por Clculo.

6. Norma Venezolana COVENIN N 2188 84. Agua Potable. Determinacin de Alcalinidad. 7.Norma Venezolana COVENIN. N 2187 84. Agua Potable. Determinacin de Acidez. 8. Norma Venezolana COVENIN N 2138 84. Agua Potable Determinacin de Cloruros. 9.SHEPPARD T. POWELL. Manual de Aguas para usos Industriales. Ediciones ciencias y tcnicas. Volumen 4.

Documento cedido por: JORGE L. CASTILLO T. Comentarios al email: CIBERCRAZY5000[arroba]YAHOO.COM.MX

ANLISIS FSICO-QUMICOS DEL AGUA TOMA DE MUESTRAS TCNICAS GENERALES DE ANLISIS

PREPARACIN DE DISOLUCIONES

COLORIMETRA REFLECTOMETRA

ESPECTROFOTOMETRA CROMATOGRAFA

KIT

GRUPOS DE PARMETROS PARA ANALIZAR Y TIPOS DE ANLISIS

o o o o

ANLISIS NORMAL CARCTERES ORGANOLPTICOS CARCTERES FSICO-QUMICOS SUSTANCIAS NO DESEABLES

AGENTES DESINFECTANTES CLORO

o o
I. TOMA DE MUESTRAS

ANLISIS COMPLETO

ANLISIS DE AGUAS RESIDUALES

Cuidadosamente para que la muestra sea representativa. Hay tres tipos de muestreo: simple, compuesto y integrado.

simple: muestra puntual en espacio y tiempo.

En ros y canalizaciones abiertas debe procurarse sumergir el recipiente alejado de la orilla, de la superficie y del fondo. Si hay vertidos o corrientes debemos tomar la muestra aguas abajo para garantizar la mezcla.

compuesto: es una mezcla de varias muestras simples tomadas en el mismo punto a distintas horas.

Nos informa del estados general del agua a lo largo de un perodo de tiempo (24h) Es til para detectar vertidos puntuales de contaminacin sirve para valorar parmetros que se alteran con el tiempo, pH, temperatura media, cloro residual y gases en disolucin.

integrado: es un muestreo compuesto, acortando los tiempos de toma de muestras y en distintos puntos.

Nos da una idea general del estado del agua. Se requiere un equipo complejo de toma de muestras: bomba de captacin, filtro para retener los slidos en suspensin (SS) (columnas de material absorbente) El absorbente puede ser: carbn activo, espuma de poliuretano, resinas de distinta polaridad... Los contaminantes se extraen con disolventes y se analizan. A veces, se hacen valoraciones parciales, pues no todos los contaminantes sufren la misma absorcin ni se extraen igual. - Equipos de muestreo. Hay que tener en cuenta: a ) Tipo de envase. Segn el parmetro a analizar hay muestras que requieren vidrio y otras plstico. Si no se emplea el material adecuado pueden alterarse las caractersticas de la muestra. Los envases de vidrio pueden ser transparentes o de color topacio (para evitar alteraciones por la luz) Los volmenes de los envases pueden oscilar entre 100-200ml (los ms usuales son los de 500 y 1000ml) La abertura del envase debe tener un dimetro mnimo de 35mm. b ) Eleccin del equipo. Existen tres tipos:

o o

Tomamuestras simple: botella Tomamuestras especial: botella con un dispositivo especial de apertura y cierre para realizar captaciones a cierta profundidad sin desnaturalizar la muestra.

Equipo automtico: es bastante ms complejo y va provisto de un sistema de conduccin, una bomba de captacin y uno o varios depsitos de almacenamiento de las muestras. Tambin puede tener dispositivos para mantener refrigeradas las muestras o para adicionar reactivos estabilizantes. Se deben seguir las instrucciones del fabricante. - Protocolos de muestreo y etiquetado. Van a depender del tipo de muestra y del control que le vayamos a dar. Hay cinco pasos a seguir en el muestreo.

Establecer los puntos de muestreo. Hay que considerar el lugar ms adecuado segn el tipo de agua, el tipo de muestreo y la tcnica que vamos a realizar.

o o

Establecer la frecuencia y los perodos de muestreo. Conocer los parmetros a analizar. Segn los mtodos normalizados de anlisis.

Preparar el material necesario. Hay que determinar el nmero y el volumen de las muestras.

Mantener las condiciones ms adecuadas para el transporte y la conservacin de las muestras. Para evitar la inestabilidad de las muestras se les pueden aadir estabilizadores o bien mantenerlos refrigerados. Una vez tomada la muestra debe cerrarse hermticamente y etiquetarse correctamente. - Ejemplos de muestreo. Para identificar las muestras son necesarias las etiquetas y la hoja de muestras. En la etiqueta debe figurar:

o o o o

n de identificacin o cdigo de barras. Fecha y hora del muestreo Identidad de la persona que toma la muestra. n de recipientes e identificacin por cdigos segn el agente conservador que llevan. En la hoja debe aparecer:

n de identificacin de las muestras. Fecha y hora del muestre. Nombre y apellidos del solicitante del muestreo.

Lugar de la toma con localizacin exacta. n de recipientes y su naturaleza (segn cdigos) origen del agua (ro, pozo, fuente) Tcnica de muestreo utilizada: simple, compuesto, integrado. Condiciones ambientales de la toma de la muestra. Parmetros determinados in situ: temperatura, pH, O2 disuelto, turbidez, conductividad. Fecha y hora de entrada de la muestra en el laboratorio. Incidencias y observaciones. Manipulacin efectuada sobre la muestra.

Entregar la muestra junto con su acto cumplimentada y firmada por todos los presentes. Registrar la muestra en un libro con todos lo datos necesarios para poder reproducir todo el proceso de la misma forma. - Conservacin y transporte. En las mejores condiciones para que la muestra no se altere. Se mantienen en la oscuridad y a veces se aaden conservantes (tabla) Se suelen refrigerar a 4C Se envan al laboratorio lo antes posible. Los anlisis deben realizarse en 6 horas o mximo 24 horas. Algunos parmetros pueden analizarse in situ (los mencionados anteriormente) En la hoja de peticin de anlisis se especificarn los datos del etiquetado y cualquier circunstancia de inters. Cuando el laboratorio recibe la muestra se debe inspeccionar al precinto (cuando sea necesario) y la documentacin que la acompaa: hoja de muestreo y la peticin de anlisis. Despus el laboratorio la registra y la analiza inmediatamente o la almacena correctamente. II. TCNICAS GENERALES DE ANLISIS FSICO-QUMICO 1. Preparacin de disoluciones Una disolucin es una mezcla homognea de dos o ms componentes. La disolucin esta formada por el soluto, el componente minoritario, y el disolvente, el mayoritario. Concentracin: relacin entre la cantidad de soluto y la cantidad total de disolucin o de disolvente. Hay tres formas de expresar la concentracin: a) Masa/volumen

unidades: mg/ml " g/l, mg/l " g/dm3 " ppm SI: Kg/m3 b) En porcentajes: partes de soluto en cada 100 de disolucin. Hay tres formas: % en peso/volumen = x 100 Se usan unidades homogneas g/ml, Kg/l Esta forma se usa cuando el soluto es slido y el disolvente lquido. En disoluciones acuosas muy diluidas. % peso/peso = x 100 Se usa cuando soluto y disolvente son slidos. En el laboratorio lo denominamos riqueza. % volumen = x 100 Cuando soluto y disolvente son lquidos (grados alcohlicos) c) Unidades qumicas Molaridad- M = Son los moles que hay en un litro de disolucin mol/l Molalidad - m = = mol/Kg Normalidad - N = Equivalente es la cantidad de sustancia que reacciona con 12g de carbono. cidos eq = Bases eq = Sales eq = N = M valencia - Recomendaciones para preparar una disolucin.

Preparar el material y los reactivos.

Consultando las etiquetas realizar los clculos y obtener los datos. Tener en cuanta la capacidad del material volumtrico que necesite.

Para ser lo ms exacto posible es conveniente utilizar matraces aforados. Pesar los reactivos (si son slidos) o medir volmenes si son lquidos. Disolver el soluto con una fraccin de disolvente en un vaso de precipitados. Aadir al matraz aforado (embudo) y enjuagar varias veces con pequeas porciones de disolvente. Aadir disolvente en el matraz aforado hasta enrasarlo. Al final aadir el disolvente gota a gota.

Tapar el matraz y agitar suavemente para homogeneizar la disolucin. Almacenar la disolucin en un frasco y etiquetado (producto, concentracin fecha de preparacin...) Conservarla adecuadamente (al abrigo de la luz, refrigeradas...) Lavar el material usado.

- Preparacin de una dilucin. A veces se requiere disminuir la concentracin de una muestra para ello se aade a un volumen conocido de muestra un volumen calculado de disolvente y se establece una relacin entre ambas. Factor de dilucin - relacin entre el volumen de disolucin a diluir y el volumen total obtenido. = Es conveniente expresar el factor de dilucin en forma de fraccin con numerador 1. C=C C Siempre se debe homogeneizar bien la dilucin agitando suavemente varias veces. - COLORIMETRA (ESPECTROFOTOMETRA) Cuantificar el color de una disolucin por comparacin con una disolucin patrn. Se puede realizar de dos formas distintas:

Tcnicas de campo comparacin visual (no muy exacta) del color de una disolucin con una escala de patrones de diferentes intensidades del mismo color. Informa con menos precisin que una tcnica de laboratorio, pero es muy rpida. Tcnica de laboratorio espectrofotometra, aparato que compara las intensidades de absorcin de la muestra con uno o varios patrones. Se basa en que cada sustancia segn su estructura qumica absorbe radiacin electromagntica a determinadas longitudes de onda () y la cantidad que absorbe esta relacionada con su concentracin. Se definen dos magnitudes fsicas:

Transmitancia, T relacin entre la intensidad de la luz incidente en la muestra y la transmitida. %T = x 100

Absorbancia es una magnitud relacionada directamente con la concentracin de la muestra y se define en funcin de la transmitancia, T, que guarda una relacin logartmica con la concentracin. A = log

Ley de Lambert-Beer (emprica) A= cd

A absorbancia coeficiente de absortividad coeficiente de extincin molar c concentracin de la muestra d paso de la luz (ancho de cubeta) Existen tres mtodos de trabajo con el espectrofotmetro:

Conocido : se aplica directamente la frmula. Slo vlido cuando la sustancia a estudiar tiene color propio o absorbe sin necesidad de aadir ningn reactivo. Poco frecuente. Comparacin con una disolucin patrn: la disolucin patrn es de concentracin conocida se prepara en las mismas condiciones que la muestra y entonces es el mismo que el de la muestra. Am = Cm d Ap = Cp d c) Recta patrn: es una grfica donde representamos A frente C. Se preparan varias disoluciones patrn y se obtiene A en el aparato. Grficamente se obtiene Cm por extrapolacin. La ley de Lambert-Beer slo se puede aplicar en un determinado rango de concentraciones, si la muestra es ms concentrada debemos diluirla y luego calcular su concentracin multiplicando por el inverso. - REFLECTOMETRA Se trabaja con radiacin electromagntica y se mide la que es reflejada por la muestra. Se define una nueva magnitud: reflectancia %R = x 100 La relacin entre reflectancia y concentracin es compleja y por eso, estos aparatos (reflectometros) llevan unos microprocesadores que dan directamente la concentracin. Es una tcnica muy usada en anlisis de campo por su facilidad de manejo, su fiabilidad y su gran versatilidad. Para cada parmetro se usan tiras de plstico con una almohadilla de material poroso impregnado con los reactivos deshidratados (anlisis de qumica seca). La tira se introduce en la muestra y entonces los reactivos se rehidratan y se produce la reaccin con el parmetro estudiado, se introduce en el reflectometro y me da la medida de concentracin. Ej: calcio, cloro, fsforo, NO-3, NO-2, amonio, metales (Al, Zn, Mn, Ni, Mo...) - ESPECTROFOTOMETRA Espectrofotometra de absorcin-emisin atmica. Plasma de acoplamiento inductivo (PAI) Son muchos mtodos basados todos en la excitacin mediante energa de los elementos qumicos a determinar. Mtodos aqu englobados son:

Espectrofotometra de absorcin-emisin atmica:

De llama De vapor fro Electrotrmica (cmara de grafito caliente) Generacin de hidruros

Plasma de acoplamiento inductivo: la muestra se introduce en un plasma de argn, sufre temperaturas por encima de 6.000C lo que conlleva la ruptura de todos los enlaces qumicos (atomizacin) y la ionizacin de los elementos. Produce iones monoatmicos monopositivos. Esta tcnica permite la determinacin multielemental de casi todos los elementos del sistemas peridico (varios parmetros al mismo tiempo) (elementos que no se pueden analizar: C, H, N, O, F y gases nobles) Es una tcnica de alta sensibilidad (detecta trazas de elementos)

Estos mtodos tiene en comn:

Se usan principalmente para metales. Aplican la energa por distintos mtodos (llama, grafito calentado...) Los electrones de elemento a analizar absorben la energa y cambian de nivel energtico(excitacin) y despus la emiten al volver a su estado normal.

- La radiacin absorbida o emitida es proporcional a la concentracin. - El detector del aparato lo registra y lo cuantifica.

Se usan disoluciones patrn y sobre la grfica se extrapolan los resultados de la muestra.

- CROMATOGRAFA Permite separar, identificar los componentes de una mezcla compleja. La muestra se deposita en un lquido, en un gas, o en un gas licuado (fase mvil) y se hace pasar a travs de un slido con propiedades absorbentes (fase estacionaria) como carbn activo, resinas o gel de slice. A travs de esta fase las sustancias de la muestra tienen distinta velocidad de difusin procedindose as a su separacin. A la salida se coloca el detector adecuado (conductividad, radiacin UV, IR; espectrofotmetro de masas) y se puede identificar y cuantificar (se mide el rea a la altura del pico) los distintos componentes de la mezcla a medida que abandonan la fase estacionaria. Generalmente se acopla un ordenador para procesar los datos y obtener los resultados. En la reglamentacin tcnico sanitaria de Aguas Potables se recomienda la cromatografa para determinar compuestos orgnoclorados, hidrocarburos policclicos, aromticos y los plaguicidas. Tambin se pueden emplear para determinar aniones para ellos se usa HPLC (cromatografa lquida de alta resolucin)

- KIT (TCNICAS RPIDAS) Kit (neerlands) conjunto de productos y utensilios para conseguir un fin comn que se comercializan conjuntamente como una unidad. Se usan tanto en anlisis de campo como en el laboratorio. Hay dos formas bsicas de trabajo:

Por comparacin del color: tiras reactivas son soportes plsticos con un material que contiene los reactivos, se introducen en la muestra uno o dos segundos y generan un color que se compara con una escala; tcnicas de tubo cuando la reaccin se produce en pequeos tubos donde depositamos la muestra. Se aaden los reactivos siguiendo las pautas del tiempo marcadas y se compara el valor el color obtenido con las tarjetas patrn (con esta tcnica se puede preparar un blanco, muestra sin reactivos, y descartar colores de fondo). Ttulomtricos: valoraciones como en el laboratorio pero con jeringas en lugar de buretas, reactivos en frascos pequeos y se valoran en recipientes de plstico. Se procede hasta el viraje del indicador y de lee en la escala de la jeringa el reactivo gastado. Muchas jeringas van graduadas en unidades de concentracin y evitan los clculos posteriores. III. GRUPOS DE PARMETROS PARA ANALIZAR Y TIPOS DE ANLISIS Como el anlisis de aguas puede ser muy amplio, pues se puede analizar muchos parmetros se agrupan en estas seis categoras:

o o o o o o

Caracteres organolpticos: se pueden apreciar por los sentidos: olor, gusto, color... Caracteres fsico-qumicos: temperatura, pH, conductividad... Sustancias no deseables: no son siempre nocivas para la salud y se pueden tolerar dentro de unos lmites: NO-3, NO-2, amonio. Sustancias txicas: son nocivas para la salud y como mucho se permiten niveles mximos de concentracin. Caracteres microbiolgicos: se estudian todos los caracteres bacterianos que pueden indicar contaminacin. Caracteres de radioactividad: se estudian las sustancias que provocan la radioactividad (radioncleo) responsables de la misma y luego su concentracin mxima. En el BOE se recogen cinco tipos de anlisis de aguas potables segn parmetros estudiados:

o o o o

Anlisis mnimo: incluye un anlisis de olor, sabor, conductividad, NO-2, NH3, informe de bacterias coliformes totales y coliformes fecales, cloro residual (desinfectante) Anlisis normal: incluye todo lo del mnimo ms turbidez, temperatura, pH, NO-3, oxidabilidad, bacterias aerbicas (consumen O2) estudiadas a 37C y a 22C. Completo: todo lo del normal ms aquellos parmetros que se considere oportuno segn el origen del agua. Ocasional: anlisis realizados en situaciones particulares que requieren una vigilancia especial. Los realizan las Administraciones Sanitarias para garantizar la potabilidad del agua suministrada. Ej. Inundaciones que afectan al punto de captacin de agua, vertidos

Inicial: se realiza a una fuente de agua antes de aceptarla como fuente de agua potable. Como mnimo se realiza un anlisis normal ms aquellos parmetros que se consideren oportunos a la vista del punto de captacin. IV. ANLISIS NORMAL

CARACTERES ORGANOLPTICOSse determinan por apreciacin sensitiva y tiene carcter subjetivo y son: olor, sabor y turbidez.

Olorcuando la muestra de agua presenta olor siempre es signo de contaminacin o de la presencia de materia orgnica en descomposicin.

Es ms frecuente en aguas residuales o de vertidos. Las aguas potables no deben poseer ningn olor, salvo el caracterstico del desinfectante (cloro), dentro de unos lmites tolerables. No deben tener olor ni en el momento de la toma de muestra, ni transcurridos 10 das en un recipiente cerrado a una temperatura de 26C. Mtodo oficial: se recomienda un equipo de 5 personas (mnimo 2) ajenas al proceso analtico. Analizan distintas diluciones de la muestra y determinan cual es la dilucin con una concentracin mnima de muestra que presenta olor (el ndice de olor es el denominador del factor de dilucin) Siempre se debe trabajar a la misma temperatura. Se pueden hacer ensayos en fro " 20C y en caliente 60C. Con material limpio y exento de olor. Para las diluciones se requiere agua inolora (destilado y filtro de carbn activo que absorbe olores) Es difcil establecer el tipo de olor. La intensidad del olor se distribuye en categoras: 0 sin olor perceptible I olor perceptible slo por expertos II olor perceptible por el consumidor medio III olor fcilmente perceptible IV olor significativo V olor muy significativo

Saborslo se deben degustar aguas cuyo origen garantice su seguridad para le bebida.

El sabor de una agua puede deberse a la presencia de sales minerales, de materia orgnica o de partculas de tierra en suspensin en el agua. Ej. Sales mineralescloruros dan sabor salado, magnesio da sabor amargo, aluminio da sabor terroso. Materia orgnicaalgas verdes dan sabor a hierba, actinomicetos (hongos) dan sabor terroso, algas verde-azuladas dan sabor a podrido.

Se mide con el mismo fundamento y procedimiento que el olor y se expresa como umbral de sabor. Existen catadores de agua entrenados para distinguir ms de treinta sabores y olores diferentes. Las aguas potables deben tener sabor dbil y agradable. Tambin puede dar sabor el agente desinfectante (cloro) y se tolera dentro de ciertos lmites. Las aguas muy puras resultan sosas al tener menos sales en disolucin.

Turbidezse debe a la presencia de partculas de materia en suspensin o dispersas (arcillas, limos, partculas de slice, materia orgnica)

Algunas de estas partculas se pueden eliminar por decantacin o centrifugacin, otras no. Las aguas de pozos y manantiales suelen ser transparentes. Las aguas superficiales (ros, gargantas) suelen ser turbias debido al arrastre de partculas insolubles. En masas de agua (amblases, lagos, ros, mares) la turbidez puede impedir el paso de luz a las capas inferiores deteriorando el desarrollo de vida en los fondos. Las aguas turbias son rechazadas por el consumidor aunque renan condiciones sanitarias aceptables. Deben ser transparentes. Unidad de medida: UNT (NTU). Unidad nefelomtrica de turbidez. La reglamentacin espaola fija como lmite mximo 6 UNT y como ndice de calidad 1 UNT. La medida de turbidez es fundamental tanto en ETAP como en EDAR. Se analizan antes y despus del tratamiento. Antes el anlisis previo determina el coagulante que necesito para clarificarlos y es que la desinfeccin de aguas turbias mediante color es menos eficiente que en aguas transparentes, pues las partculas en suspensin engloban bacterias y virus que el cloro no puede destruir. Existen varios mtodos para determinarla. Algunos son de campo y otros de laboratorio. Siempre se recomienda realizar la medida tan rpido como se pueda tras la toma de la muestra (tiempo mximo de conservacin de la muestra 24 horas a 4C y en oscuridad)

Los mtodos de campo se basan en medir la profundidad a la que un objeto determinado deja de ser visible.(hilo de platino: dimetro 1mm y longitud 25mm) (discos de porcelana blanca de 20cm de dimetro) (fluoroscopio: tubo transparente: 0,3cm de dimetro y longitud 1,5m, en un extremo transparente tiene un tapn blanco con una cruz negra, cuando no se ve la luz se mide la altura del agua) En el laboratorio se pueden usar varios aparatos de medida que se basan en la dispersin de la luz( efecto Tyndall) y a la absorcin de la muestra debida a esas partculas (opacimetra)

Problemase generan muchas escalas de medida y es difcil encontrar la equivalencia. Mtodo oficialel de formacina o nefelometra. Se compara la medida de la muestra en unas condiciones determinadas con la medida obtenida por unas disoluciones patrn en las mismas condiciones. El aparato de medida es fotoelctrico y se denomina turbidmetro. Sustancia patrn es un polmero: formacina.

Se prepara una disolucin madre de formacina que tiene 400 UNT y slo se conserva un mes, a partir de ella se preparan diluciones (0-40 UNT) Con ellas se traza una recta de calibrado del aparato y luego se mide la muestra. Estas diluciones patrn son estables una semana, aunque es mejor utilizarlas recin preparadas. Tambin existen patrones ya preparados para calibrar el turbidmetro que simplifican la medida.

CARACTERES FSICO-QUMICOS son temperatura, pH y conductividad. Temperatura La medida debe hacerse in situ. En una zona representativa de la masa de agua que se va a analizar. Se suele medir en zonas de corriente (no en aguas estancadas)

La temperatura influye en la solubilidad de sales y gases y as condiciona la medida de pH y conductividad. La solubilidad de sales suele aumentar con la temperatura y la de los gases disminuye cuando la temperatura aumenta. La temperatura condiciona tambin el desarrollo de ciertas algas. El agua de consumo humano se recomienda entre 12C-25C aunque no existen lmites de temperatura. Para vertidos industriales se establece una temperatura mxima de 40C (en algunos casos hasta 50C) La normativa exige que cuando estos vertidos se devuelven a los cauces pblicos la variacin de temperatura no sea superior a 3C con respecto al valor nominal del cauce. La medida en superficie se realiza con un termmetro graduado en dcimas de grado y con proteccin antigolpes. Se pueden usar tambin sondas electrnicas. Para medir a distintas profundidades se usan termistores que tienen resistencias elctricas. Se suele toma tambin el valor del aire.

pH mide la alcalinidad o acidez del agua (escala) Se recomienda la medida in situ.

pH = Valores de 0-14 pH 0-7 cidas, pH 7-14 bsicas. En general, el pH de las aguas no presenta grandes variaciones y est alrededor de la neutralidad. El problema est en las aguas residuales o en los vertidos industriales que s pueden dar valores extremos de pH. Las aguas calcreas tienen pH ligeramente bsico. Las aguas que discurran por terrenos pobres en calizas o pobres en silicatos tiene pH prximo a 7 o inferior. Las aguas de ciertas regiones volcnicas suelen ser cidas. En la Reglamentacin tcnica Sanitaria (RTS) se establece el rango entre 6,5 y 9,2 de pH para aguas de consumo y como nivel de calidad pH = 7-8 Para las piscinas se establece un pH recomendado de 7,4 (que es el pH fisiolgico) Mtodo oficial usando el peachmetro, electrodo de membrana de vidrio selectiva a iones hidrgeno. Se calibra el aparato y se introduce en la muestra; se suele agitar durante un tiempo y se mide cuando se estabiliza la lectura. Se suele sealar la temperatura a la que se mide, pues influye en el valor del pH.

Otros mtodos no oficiales tiras reactivas, papel indicador, indicadores lquidos, se genera un color que se compara con una escala. Son mtodos rpidos, fiables y muy usados en el trabajo diario.

Conductividad capacidad de un material o de una disolucin para transportar la corriente elctrica.

La conductividad d jun agua depende de la concentracin y la naturaleza de los iones disueltos en ella, as como de la temperatura. Normalmente un aumento se sales supone un aumento de conductividad. Las aguas de pozos sobreexplotados, de terrenos salinizados o de vertidos industriales suelen presentar alta conductividad. Se mide mediante un aparato: conductmetro o conductivmetro. Este aparato tiene un electrodo de platino-platinado y tambin un compensador de temperatura. El aparato establece una diferencia de potencial () entre las placas del electrodo y nos da la medida de conductividad por comparacin con una disolucin de KCl. Las casa comerciales suelen suministrar las soluciones de calibrado. Hay que tener en cuenta la temperatura. El aparato suele estar calibrado para medir a 20C y se ajusta el valor de la medida a los factores de correccin que pueden ir indicados en las etiquetas de las soluciones de calibrado. Tambin existen tablas. La unidad de media es S/cm, microsiemens/cm, 1S = 1-1 En la RTS se establece como valor mximo de conductividad 1.500S y como valor gua 400 S/cm. Segn la conductividad podemos determinar los siguientes niveles de mineralizacin de las aguas potables: - muy dbil: por debajo de los 100 S/cm - dbil: 100-300 S/cm - media: 300-700 S/cm - alta: 700-1500 S/cm - excesiva: superior a 1500 S/cm Tambin se puede establecer una correspondencia entre conductividad y dureza del agua (normalmente en grados franceses)

SUSTANCIAS NO DESEABLES NO2-, amonio, NO3-, oxidabilidad. Nitritos son las sales del cido nitroso HNO2.

Son un estado de oxidacin intermedia del nitrgeno. Aparece como producto intermedio cuando el amonio se oxida a nitrato y tambin en la reduccin de los nitratos. Estas reacciones redox se pueden producir en las EDAR en los sistemas de distribucin del agua. Se usan los nitritos como protectores contra la corrosin del agua en muchos procesos industriales, en las aguas naturales La concentracin de NO2- se puede utilizar como indicador de contaminacin bacteriolgica pues son las bacterias las responsables de la reduccin del nitrato o ntrico o incluso a N2 gas.

En concentraciones elevadas originan metahemoglobinemia que consiste en la formacin de metahemoglobina por oxidacin de hierro de la hemoglobina . La metahemoglobinemia no puede transportar el oxgeno a los tejidos. Los nitritos oxidan al hierro de la hemoglobina en pH poco cido o prximo a la neutralidad. Esto sucede en el estmago de los lactantes y de personas con aclorhidria gstrica. Los sntomas son palidez de la piel, cefaleas, vrtigos, taquicardia y trastornos neurolgicos. Si el ndice de metahemoglobinemia es superior al 70% puede producir la muerte. El alto pH del estmago favorece la colonizacin por parte de bacterias que pueden reducir enzimticamente los nitratos del agua a nitritos y as empezar a actuar sobre le hemoglobina. Otro efecto no deseable de los NO2- es su combinacin con las aminas secundarias de los alimentos y producir nitrosaminas muchas de ellas carcinognicas. Segn RTS mximo 0,1mg/l. Mtodos de determinacin: Oficial espectrofometra, basado en la formacin de color amarillo cuando reaccionan con cido sulfanilico. = 435nm (410) Otros mtodos para realizar in situ: tiras reactivas, colorimetra en tubo, tambin hay espectrofometra de campo y reflectometra. En el laboratorio el mtodo es similar al oficial, mide a = 543nm

Amonio y amoniaco NH4+, NH3 gas.

Procede de la descomposicin de la urea y de compuestos orgnicos (desaminacin) Tambin pueden aparecer en vertidos industriales. En algunas ETAP se aade amoniaco para que reaccione con Cl y formar cloro residual combinado. Se pueden encontrar en aguas superficiales y en aguas residuales. En aguas subterrneas su concentracin suele ser baja porque las partculas y arcillas del suelo los absorben. Su concentracin junto con la de NO2- y NO3- y el nivel de coliformes fecales da una idea de la contaminacin de origen fecal del agua. Indican una degradacin incompleta de la materia orgnica. Concentraciones elevadas suponen un mayor aporte de oxgeno para la potabilizacin del agua y la hace ms agresiva para las tuberas de cobre. RTS se consideran valores mximos de 0,5mg NH4+/l. Mtodos de determinacin: Mtodo oficial se basa en la formacin de un complejo amarillo-pardo-rojizo del amoniaco con el reactivo de Nessler. = 435nm Otros in situ son tiras reactivas, colorimetra en tubo, espectrofotometra de campo y reflectometra.

En el laboratorio con un electrodo selectivo de iones amonio, que es parecido al peachmetro.

Nitratos sales del cido ntrico HNO3

Representan el mayor estado de oxidacin del nitrgeno. De forma natural aparecen en las aguas por solubilizacin de las rocas. Su valor no suele superar los 5mg/l. Pero tambin aparecen por oxidacin de compuestos orgnicos nitrogenados. Pueden proceder de abonos y aguas residuales y entonces se alcanzan valores mucho mayores de concentracin. Son nutrientes de organismos auttrofos fotosintticos y su aporte favorece el desarrollo de algas y provocan eutrofizacin del agua. En concentraciones altas provocan sabores desagradables en el agua. Tambin pueden ser reducidos a nitritos y producir metahemoglobinemia. Tambin se pueden combinar con aminas secundarias de origen alimenticio y producir nitrosaminas muchas de ellas cancergenas. El nivel gua de concentracin de NO3- es de 25mg/l y el mximo 50mg/l Mtodos de determinacin: Mtodo oficial espectrofotometra de UV = 220nm Laboratorio cromatografa de iones (admitido como oficial) y mtodo del salicilato sdico. Los nitratos forman un complejo con el salicilato de color amarillo. =420nm Otros mtodos in situ tiras reactivas, colorimetra en tubo, reflectometra, espectrofotometra de campo. Oxidabilidad cantidad de oxgeno necesaria para oxidar la materia orgnica presente en el agua. Mtodo oficial permanganato en condiciones normalizadas. Se define oxidabilidad al permanganato con el oxgeno necesario para oxidar la materia orgnica presente en 1 litro de agua durante 10 minutos exactos. (valor similar a la DQO) Se oxidan las sustancias reductoras presentes en el agua con KMnO4 (permanganato potsico) en medio cido durante 10 minutos. La reglamentacin establece un mximo de 5mg/l (en O2) Un nivel gua de 2mg/l. Agua de calidad de 1-4mg/l.

AGENTES DESINFECTANTES

Aunque existen otros agentes desinfectantes autorizados (KMnO4, O3, NH3, sales de plata), nos vamos a centrar en el cloro, por ser el ms utilizado. Hay tres razones para ello: es barato, fcil de comercializar y tiene un residual sobre el agua. El efecto residual se refiere a su capacidad oxidante que hace que reaccione con determinados compuestos del agua (amoniaco, hierro, manganeso y sulfuros) mejorando su calidad. Efectos adversos derivados de una concentracin elevada de cloro: intensificar el sabor y el color de compuestos orgnicos como los fenoles, formacin de compuestos organoclorados (ej. cloroformo HCCl3) son potencialmente cancergenos, formacin de compuestos combinados con amoniaco y aminas que afectan a la vida acutica. En el proceso de cloracin se forman dos tipos de coloro residual:

Cloro residual libre: cloro molecular Cl2, cido hipocloroso HClO, anin hipoclorito ClO-. La proporcin entre ellos depende del pH y de la temperatura. Cuando el pH es menor de 2 predomina Cl2. Cuando el pH esta entre 4-6 predomina HClO que es la forma ms desinfectante ms activa. Cuando el pH es mayor de 10 predomina ClO- que prcticamente es inactiva como desinfectante Cloro residual combinado: se forma al reaccionar con amoniaco y compuestos nitrogenados (cloroaminas) Tiene un efecto desinfectante ms lento y menos poder oxidante que el cloro libre.

Los niveles de cloro residual en el agua establecidos son:

0,4mg/l agua de bebida 0,6 - 0,8mg/l agua de piscinas

Mtodos de determinacin: Oficiales hay dos espectrofotometra de absorcin y yodometra. En al espectrofotometra el cloro forma un compuesto coloreado con N-N-dietil-para-fenilendiamina (DPD) = 515nm Se determina el cloro residual libre y luego el total (yoduro potsico) y la diferencia entre los dos valores me da el cloro combinado. Antes se utilizaba otro tipo de compuesto que es la ortotolidina ( = 440nm) pero se ha abandonado debido a su toxicidad. En la yodometra se genera yodo al poner la muestra de agua en contacto con yoduro potsico KI y se valora con tiosulfato sdico usando engrudo de almidn como indicador. Otros mtodos tiras reactivas, colorimetra y reflectometra. V. ANLISIS COMPLETO RST cita hasta sesenta parmetros fsico-qumicos en aguas potables. Se podran aadir ms para las aguas residuales. Slo varios a estudiar, aquellos parmetros ms habituales. Color caracterstica organolptica. El agua en principio es incolora. Las sustancias que lleve en disolucin pueden darle una coloracin verdadera, y adems si lleva sustancias en suspensin puede llevar una coloracin aparente. - verde: algas - tonos amarillos-pardos: formas solubles de Fe y Mn - amarillo: desechos de cromato (CrO4-) La determinacin del color puede hacerse por mtodos espectrofotometricos o por mtodos de comparacin visual. Mtodo del platino-cobaltoLa determinacin del color de la muestra se compara con una serie de disoluciones de referencia de platino-cobalto.

En el anlisis de campo se utilizan discos de vidrio coloreado que son ms fciles de usar. La disolucin de referencia tiene unas 500 unidades Hazen. Se prepara con: K2PtCl4 (cloruro-platino potsico) y cloruro de cobalto (CoCl2 6 H2O) con HCl comercial. (Aguanta un ao en oscuridad y en botella de vidrio) Los patrones coloreados se preparan en tubos Nessler de 50ml aadiendo 0-70mg/l de platino (unidades Hazen) La muestra de agua siempre se centrfuga o filtra y se deposita en otro tubo Nessler. Se observan de arriba-abajo segn el eje del tubo y sobre una superficie blanca que refleja la luz de la columna del lquido. Oxgeno disuelto el oxgeno disuelto en el agua es imprescindible para la vida de los seres acuticos. Su ausencia o sus bajas concentraciones pueden provocar procesos anaerbicos que generan sustancias txicas y no deseables. Ej. sulfuro de hidrgeno H2F / cido sulfhdrico. La solubilidad del oxgeno es directamente proporcional a la temperatura y a la concentracin de cloro en el agua. La solubilidad baja cuando la temperatura sube y la solubilidad tambin baja cuando la concentracin de cloro aumenta. Las aguas de montaa y las agua marinas costeras son las que presenta niveles mximos de oxgeno disuelto, alrededor de 10mg O2/l Mtodos de determinacin: Hay dos mtodos oficiales la electrometra y la yodometra. La electrometra se realiza con un aparato llamado oxmetro y es parecido al peachmetro, electrodo de membrana selectiva permeable al oxgeno. Es el mtodo ms utilizado y la medida se realiza in situ. Se realiza un calibrado con una disolucin de concentracin ya conocida por yodometra. Tambin se hace otra calibracin a valor 0, se coge un volumen de la muestra y se trata con un exceso de sulfito sdico (Na2SO3) y una pequea cantidad de cloruro de cobalto as se elimina el oxgeno disuelto. Los resultados del oxmetro se expresan en mg O2/l y se seala la temperatura de la muestra. La yodometra se denomina mtodo de Winkler. El oxgeno oxida al hidrxido de manganeso II, Mn(OH)2, y produce el cido de manganeso que en medio cido con HCl libera cloro gas, que es el que se evala con tiosulfato sdico y engrudo de almidn como indicador. Este mtodo tiene sus preparados para usarlo como mtodo de campo (kit) muy prcticos. Residuo seco es el peso de los slidos que contiene un volumen de muestra previamente filtrada a travs de membrana de dimetro de poro de 45na (micras) y sometida a evaporacin en condiciones normalizadas. La composicin del residuo seco es: carbonatos y sulfatos de calcio y magnesio. Tambin nos vamos a encontrar cloruros, nitratos y materia orgnica. Para su determinacin se necesitan cpsulas previamente taradas, se evapora a 110C en estufa (180C aguas potables) y as se pierde casi toda el agua. Puede quedar agua de cristalizacin de algn sulfato.

En la RTS se admite un nivel mximo admisible de 1.500mg/l. Aunque internacionalmente se recomienda 500mg/l como mximo. Si el residuo seco es alto da agua con sabor salobre y puede provocar transtornos gastrointestinales y renales. Dureza se corresponde con la cantidad de calcio y magnesio que contiene al agua. Las sales principalmente son carbonatos, CO3-, bicarbonatos HCO3-, sulfatos SO43- y cloruros Cl- y a veces s pueden valorar otros cationes como hierro, aluminio, manganeso y estroncio. Se distinguen tres tipos de dureza del agua:

Dureza temporal: se elimina fcilmente si la sometemos a ebullicin. Dureza permanente: la que permanece en disolucin tras la ebullicin. Sobre todo son sulfatos y tambin pequeas cantidades de cloruros, nitratos y silicatos alcalinotrreos. Total: es la suma de ambas.

Para medir la dureza, se mide en mg CaCO3/l y muchas veces se utilizan los llamados grados hidromtricos:

grados franceses F = 10mg CaCO3 grados ingleses 10mg CaCO3/0,7015 l grados alemanes d = 10mg CaO/l = 17,8mg CaCO3/l

Categoras de agua segn su dureza: 0-5 F agua dulce muy pura 5-15 F agua dulce 15-22 F agua potable de buena calidad 22-30 F agua calcrea 30-30 F agua inservible para usos domsticos > 60 F agua muy dura La RTS no cita valores gua ni mximos admisibles de dureza. Desde el punto de vista de la salud la dureza no supone ningn problema. Se consideran aceptables valores de hasta 500mg CaCO3/l. No es recomendable beber aguas que superen los 600mg CaCO3/l. La dureza origina problemas en las conducciones, en los electrodomsticos y en las calderas. Cuando el agua es blanda y en funcin del pH origina problemas de corrosin y cuando es muy dura origina incrustaciones (depsitos de CaCO3) en aguas duras el consumo de detergentes es mayor pues el calcio y el magnesio los precipitan. Mtodos de determinacin: Oficial complexometra. Se valora con EDTA que forma un complejo con el calcio y el magnesio ms fuerte que los indicadores utilizados. Dureza total calcio y magnesio a pH = 10 e indicador negro de eriocromo.

Dureza del calcio a pH 12 (precipita el magnesio y se elimina) e indicador la murexida. Otros in situ tiras reactivas y tritimetra de campo (no habitual) es el oficial adaptado a campo. Cloruros son compuestos muy abundantes en la naturaleza y tambin aparecen en pequea proporcin en las aguas. Concentraciones altas: en agua residuales urbanas (orina y heces los contienen), en agua subterrneas y acuferos sobreexplotados cercanos a la costa, aguas de vertidos industriales (depende del, proceso industrial) Ej. conserveras y desaladoras. En RTS se establece como nivel gua 25mg/l. No se fija un valor mximo pero se recomienda su superar los 200mg Cl-/l pero en presencia de sodio tiene un sabor salado desagradable. La medida de Cl- me permita ver el grado de salinidad y decidir sobre su uso para regado y otros menesteres. Mtodo oficial Mohr: valoracin con nitrato de plata (AgNO3) Se utiliza como indicador cromato potsico (K2CrO4) Al precipitar todo el cloruro de plata, AgCl, los iones Ag+ reaccionan con el cromato y dan color rojo a pH = 7-10 Otros mtodos de campo: tiras reactivas, colorimetra, espectrofotometra de campo, tritimetra porttil (mtodo de Mohr) De laboratorio Mtodo del nitrato de mercurio pero origina residuos txicos. El punto final de la valoracin es ms claro. Mtodo potenciamtrico: aparato que mide diferencias de potencial, usa AgNO3. Mtodo de ferrocianuro: automtico y colorimtrico. Cromatografa inica: es admitido como oficial. Sulfatos sales de cido sulfrico (H2SO4) En algunos tipos de suelos, como los yeseros, son abundantes y las aguas que los atraviesan pueden presentar concentraciones elevadas. Adems los sulfatos se utilizan en muchos procesos industriales y pueden formara parte de sus vertidos Ej. Sulfatos de aluminio, Al2(SO4)3, se usa como floculante; sulfatos de bario, BaSO4, en contraste radiogrfico; sulfatos de calcio, CaSO4, en yeso y cementeras; sulfato de manganeso, MnSO4, en funguicidas y fertilizantes. La RTS establece como nivel gua de sulfatos 25mg/l (SO4-) y como nivel mximo 250mg/l. Con concentraciones superiores a 300mg/l el agua es muy agresiva frente a hormigones y estructuras de hierro. Y con ms de 500mg/l el agua ya no sirve para riego agrcola. Mtodos de determinacin: Oficial espectrofotometra que consiste en precipitar el sulfato de bario en medio cido. A la muestra se le aade BaCl2 y se mide a = 420nm Gravimtrico que consiste en pesar el precipitado de BaSO4. Es muy laborioso y poco utilizado. Otros in situ: tiras reactivas, colorimetra en tubo, espectrofotometra de campo.

En laboratorio cromatografa de iones (oficial) y mtodo del cromato de bario (BaCrO4) o mtodo de Handbuch-Lebenser. En medio bsico aadimos a la muestra cromato de bario y se filtra. Se desprecia la primera parte del filtrado y al resto se le aade yoduro potsico y HCl. El yoduro producido se valora con tiosulfato sdico usando engrudo de almidn como indicador. El viraje es de azul a incoloro. Fosfatos sales del cido fsforico (H3PO4) Suelen formar parte de las muestras de aguas pues pueden tener varios orgenes:

Tienen diversas aplicaciones industriales (tratamiento del agua de calderas) Componentes habituales de detergentes y jabones. Componentes de fertilizantes agrcolas. Componentes de fosfatos orgnicos que se producen en procesos biolgicos (residuos corporales, residuos de alimentos, tratamientos biolgicos de aguas)

Junto con los nitratos son los mximos responsables de la eutrofizacin de las aguas. La RTS establece como nivel gua 400g/l (P2O3) y como nivel mximo admisible 1.500g/l Mtodos de determinacin: Oficial espectrofotometra de absorcin. Existen varias variantes segn las caractersticas de la muestra. Fundamentalmente el fsforico reacciona con vanadomolibdato formando un complejo en medio cido de color amarillo. Se mide a = 450470nm Anlisis de laboratorio se hace reaccionar el fosfato en medio cido con molibdato y se forma un complejo que reducimos aadiendo cloruro estaoso (SnCl2) y obtenemos una composicin de color azul. Se mide a = 690nm Otros campo: tiras reactivas, colorimetra, reflectometra, espectrofotometra de campo. Laboratorio cromatografa de iones. Se puede analizar simultneamente los siguientes aniones (con una buena separacin): fluoruros, cloruros, fosfatos, sulfatos, nitratos. Se admite como oficial. Para analizar fosfatos en el laboratorio hay que tener en cuenta la interferencia que pueden suponer los fosfatos que contienen los detergentes corrientes con los que se lava el material de vidrio. Se suele lavar con cido clorhdrico diluido t ras cada uso se lava con agua y se dejan llenos con agua destilada hasta el siguiente anlisis. Slice SiO2 Es un compuesto muy abundante en la corteza terrestre (sial - silicatos de aluminio; sima - silicatos de magnesio) Forma parte del cuarzo, arena y muchos silicatos. As se explica su presencia en las aguas naturales, sobre todo en aguas volcnicas, su concentracin oscila 1-30mg/l. Se pueden alcanzar valores de hasta 100mg/l e incluso en aguas saladas 1000mg/l Produce problemas de formacin de placas de slice o silicatos en concentraciones elevadas en algunos equipos industriales. Son difciles de eliminar. El mtodo de anlisis es el espectrofotomtrico. La toma de muestras debe hacerse en recipientes de plstico (el vidrio puede falsear los resultados) El fundamento de la tcnica es que la slice reacciona con molibdato en medio cido y da un cido de coloracin amarilla que se reduce a xido y da coloracin azul. Se mide a = 610nm

CO2 su contenido influye en el poder corrosivo del agua. Hay dos formas de estar en el agua:

CO2 libre: corresponde al cido carbnico. CO2 combinado: corresponde al que esta formando carbonatos y bicarbonatos.

Las aguas superficiales pueden tener menos de 10mg/l de CO2 libre. Las aguas subterrneas fcilmente tienen concentraciones ms altas. La determinacin debe hacerse in situ. Se valora con volumetras e neutralizacin. El CO2 libre se valora con NaOH utilizando fenolftalena como indicador, el viraje es de incoloro a rosa. El CO2 combinado se valora con HCl utilizando como indicador naranja de metilo, el viraje es de amarillo a rojo. Metales los habituales en el agua son: calcio, magnesio, sodio, potasio, aluminio (en aguas potables) El resto de los metales son considerados por la RTS o bien sustancias no deseables o bien como sustancias txicas. Son txicos an a muy bajas concentraciones: plomo, cromo, vanadio, mercurio, selenio, nquel, antimonio, berilio y cadmio. Algunos son necesarios en la dieta en concentraciones nfimas: cinc, cobre, selenio y vanadio. La fuente fundamental de metales en el agua son los vertidos industriales: cromado, galvanizado, niquelado, industria metalrgica. Sus concentraciones se suelen expresar en g/l. Mtodos de determinacin: Oficiales absorcin - emisin atmica y PAI (plasma de acoplamiento inductivo) El mtodo de absorcin-emisin atmica. Se hace con un espectrofotmetro de absorcin atmica. El material general del laboratorio debe de estar perfectamente limpio. Generalmente se lava con disoluciones de cido ntrico, (HNO3), 10-25% v/v y aclarado con agua destilada. Se usan pipetas mecnicas. Se hace una disolucin madre del para ello se coge 1g del metal y se disuelve con cido clorhdrico (HCl) o cido ntrico y se enrasa a 1 l con agua destilada o disolucin diluida de HCl. Se elabora la recta de calibrado con las disoluciones patrn y se mide la absorbancia de la muestra y extropla el dato a la grfica y damos el resultado en g/l Otros mtodos test analtico para realizar in situ, tiras reactivas, colorimetra en tubo, reflectometra. Para todos los metales existen test de estos tipos preparados. No hay: - Tiras reactivas: Cd, Cr, Mg, Ag. - Colorimetra en tubo: Co, Sn, Mo, K. - Reflectometra: Cd, Cr, Sn, Mg. Aluminio es el tercer elemento en abundancia en la corteza terrestre. Por eso, esta presente en casi todas las aguas naturales. Tambin aparece en las aguas residuales al utilizarse como tratamiento coagulante materiales de aluminio, Al2(SO4)3. Adems en las modernas potabilizadoras se trata el agua por filtracin a travs de arena y se obtiene aguas con menos de 50g/l

En el laboratorio vamos a realizar una tcnica espectrofotometrica basada en la formacin de unas sales de aluminio con aluminn de color rojo. Se mide a = 525nm Potasio slo se puede determinar por espectrofotometra en concentraciones elevadas. Se precipita el K+ en forma de un complejo nitrocobaltico. Ese precipitados se disuelve luego con agua y se determina aprovechando la coloracin azul que el cobalto origina en presencia de sulfocianuro. Se lee a = 590nm Sodio es el sexto elemento ms abundante en la naturaleza. Se encuentra en la mayora de las aguas naturales de 1-500mgl En concentraciones elevadas lo podemos encontrar en salmueras y en aguas duras que han sufrido un proceso de ablandamiento mediante resinas de intercambio inico. La RTS establece como nivel gua 20mg/l y como mximo admisible 150mg/l. Es importante la concentracin de los otros cationes para estudios de patologa humana y agricultura. Ej. Muchas personas con determinadas enfermedades deben beber aguas bajas en sodio. Para aguas utilizadas en calderas de alta presin se recomienda que la concentracin de sodio este 2-3mg/l Se puede determinar por espectrofotometra si su concentracin es mayor de 10mg/l Las muestras deben tomarse en recipientes de plstico de polietileno para evitar interferencias. El fundamento de la tcnica es precipitar una sal triple, lavar el precipitado y solubilizarlo con agua, dando coloracin amarillenta que una vez estabilizada se mide a = 420nm Cinc es una sustancia no deseable en el agua. La RTS establece para el cinc un nivel gua de 100g/l y un mximo admisible de 5.000g/l (5mg/l) ms concentracin da problemas de sabores desagradables y turbidez. El cinc reacciona con el ferrocianuro dando un precipitado que se puede medir en el espectrofotmetro a = 650nm Hierro es una sustancia no deseable en el agua. La RTS establece como nivel gua 50mg/l y un mximo admisible de 20mg/l. Niveles altos de hierro producen sabores metlicos en el agua, producen incrustaciones en la red, da compuestos coloreados con el cloro y adems produce manchas en la ropa al lavarla. Pero no son perjudiciales para la salud. La tcnica de anlisis consiste en liberar los iones de hierro con HCl en ebullicin, se reduce a Fe2+ (in ferroso) con cido ascrbico y se forman sales ferrosas con ortofenaltrolina que son rojas y se determinan a = 510nm VI. ANLISIS DE AGUAS RESIDUALES En general se analizan los parmetros que hemos visto hasta ahora usando los mismos mtodos con ligeras modificaciones. La principal suele ser disminuir la carga de materia en suspensin de la muestra mediante filtracin o decantacin.

Tambin existen algunos parmetros que se miden casi exclusivamente para aguas residuales: pH, O2 disuelto, conductividad, slidos varios (totales, en suspensin, voltiles...), DQO, DBO, COT (carbono orgnico total), dosificacin de coagulantes, % de humedad en fangos y toxicidad de fangos.

Anlisis de slidos

Uno de los principales objetivos de las plantas depuradoras es la eliminacin de los slidos contenidos en un agua residual. Clasificacin de slidos de aguas residuales: - Disueltos propiamente - Slidos disueltos (SD) - Coloidales Slidos totales (ST) - Sedimentables - Slidos en suspensin (SS) - No sedimentables: coloides Slidos totales, ST: es el residuo seco que permanece tras someter un volumen conocido de muestra a evaporacin (105C hasta que se obtiene un peso constante) Slidos disueltos, SD: aquellos slidos que cuando se filtra la muestra (filtro de membrana de dimetro de poro de 0,5m) atraviesan el filtro. Slidos en suspensin, SS: es la fraccin de slidos totales que quedan retenidos en el filtro. Los slidos disueltos pueden ser coloidales que son aquellos que necesitan coagulacin y oxidacin biolgica para su eliminacin, y disueltos propiamente dichos. Los slidos en suspensin pueden ser sedimentables cuando se eliminan por decantacin, y no sedimentables cuando no se eliminan por decantacin. Otra clasificacin de los slidos totales es en funcin de su capacidad de volatizacin. Se someten a 550C en horno o mufla. Slidos totales:

Voltiles: son los compuestos orgnicos que se calcinan y originan CO2 No voltiles: son los compuestos inorgnicos que no se calcinan a esa temperatura.

Sedimentabilidad se valoran los slidos sedimentables de la muestra de agua. El procedimiento usa los llamados cono de Imhoff que tienen una escala graduada en ml. Se llenan con un litro de muestra y se dejan reposar: V60 y V30 para los parmetros ms comunes.

V60 se deja reposar 45 minutos, se agitan las paredes y se deja reposar 15 minutos, se mide la altura de los slidos obtenidos. Se expresa en ml/l V30 pero se deja reposar 30 minutos. Es un parmetro interesante para disear las estaciones depuradoras, los sedimentadores y las lagunas anaerobias. Tambin en las plantas depuradoras es un parmetro interesante que se mide en el agua bruta (la que entra en la planta) y en el licor de mezcla del tratamiento biolgico pudiendo an evaluar la evolucin del tratamiento realizado. Slidos en suspensin se determinan por filtracin de un volumen conocido de muestra y posterior pesada una vez seco el filtro. Los slidos en suspensin se determinan en distintas fases del tratamiento del agua: agua bruta, agua decantada, agua aireada, aguas de recirculacin y finalmente agua de salida. Material necesario: filtro de fibra de vidrio de dimetro de poro de 1,2m o filtro de membrana de dimetro de poro de 0,45m, equipo de filtracin con bomba de vaco, estufa u horno, desecador para enfriar y balanza apara pesar. Procedimiento: se tasa el filtro y la cpsula de porcelana. Se realiza la filtracin de un volumen conocido de muestra; es inversamente proporcional a la carga esperada. Se seca el filtro en estufa a 105C (1h) Se saca al desecador y se pesa cuando se enfra (10 minutos) la diferencia de pesada es la fraccin de slidos en suspensin. La unidad de medida es mg/l Slidos voltiles indican la materia orgnica presente en la muestra. Se suelen determinar sobre la muestra de licor de mezcla (alimentan las lagunas de lecho bacteriolgico) y sobre fangos. Procedimiento: se filtra un volumen conocido de muestra en un filtro previamente tarado. El filtro se somete a evaporacin en estufa a 105C. Se lleva al horno se calcina a 550C (1h o 24 h segn la muestra a analizar) La diferencia de pesada entre el tratamiento en estufa a 105C y el del horno a 550C me da los slidos voltiles.

Anlisis de la materia orgnica

La eliminacin de la materia orgnica es otro de los principales objetivos en el tratamiento de las aguas residuales. La materia orgnica es la responsable en gran medida de la degradacin que sufren los cauces receptores de aguas residuales. La materia orgnica suele ser biodegradable y los microorganismos que la utilizan como nutriente suelen requerir oxgeno disminuyendo as su concentracin hasta alcanzar niveles de anaerobiosis. Es entonces cuando aparecen los problemas de olores desagradables y coloraciones no deseadas (gris, negro) y los organismos superiores no pueden sobrevivir. La materia orgnica puede tener origen animal o vegetal y normalmente se aporta al agua como desecho de la actividad humana. En el estudio de la materia orgnica se utilizan parmetros que dan una idea acerca del oxgeno necesario para estabilizarse: DBO, DQO y COT. DBO til para valorar la materia orgnica que es biodegradable. Junto con DQO y slidos en suspensin, SS, se usa para valorar como es el rendimiento del tratamiento de depuracin.

DBO5 mide el oxgeno consumido en la degradacin de materia orgnica por la accin microbiolgica durante 5 das y en condiciones normalizadas. Las unidades de medida son mg O2/l Se determina sobre: agua bruta, agua decantada procedente de tratamiento primario, y agua tratada ya del todo. Existen dos formas de medirla:

midiendo con un manmetro de mercurio la variacin de presin provocada al consumir el O2 y cambiarlo por CO2 (No muy utilizada) utilizando un mtodo electrnico mediante un aparato denominado Oxitop

Oxitop

Material, aparato y reactivos necesarios:

Oxitop Armario termostarizado Botellas de vidrio mbar para las muestras Tapn de goma negra con deposito (contener NaOH) Sistema de agitacin magntico Recomendables usar matraces de rebose o en su defecto probetas. Reactivos: NaOH, Aliltiourea (inhibidor de las bacterias nitrificantes)

Procedimiento:

Tomar un volumen de muestra en funcin de la DBO5 esperada (tablas)

Se usan matraces de rebose para coger la muestra o probetas. Enjuagar los frascos de anlisis con la muestra al menos una vez.

Se introduce el agitador magntico. Poner en el tapn de goma 2 lentejas de NaOH. Aadir unas gotas de Aliltiourea a la muestra. Poner el tapn de plstico sin que toque la muestra. Enroscar fuerte el tapn. Colocar la botella en el soporte magntico Se empieza a medir el tiempo (5 das) Se presionan a la vez S y M del Oxitop hasta valor 00 (2 segundos) Se borran los valores almacenados.

Mantener en el armario termostarizado a 20C con agitacin constante 5 das. El aparato registra valores cada 24 h (se recuperan con la tecla M) El resultado final se lee punzadlo S.

La muestra debe estar entre 15-21C El dato de la pantalla debe multiplicarse por el correspondiente valor de f segn el volumen de muestra (mg O2/l) Interferencias: - existencia real de estos bajos valores - fugas en el tapn - insuficiente volumen de la muestra - temperatura de la muestra menor de 15C - volumen de muestra excesivo Valores - no aadir inhibidor o que resulte insuficiente altos - para valores de DBO superiores a 2.000mg O2/l se recomienda la dilucin Limpieza y mantenimiento del Oxitop: Frascos no usar desinfectantes que pueden atacar a los grmenes de las siguientes muestras. Si se laven con detergentes aclarar varias veces. Eliminar los residuos de las paredes y fondo del frasco con escobillas de laboratorio y se enjuagan bien. Oxitop con un pao suave y agua jabonosa. No usar alcohol, ni acetona ni disolventes. DQO demanda qumica de oxgeno. Para valorar la DBO5 se puede medir antes la DQO. DQO BBO5 DQO La DQO mide oxgeno consumido en la oxidacin de la muestra con un oxidante fuerte como el dicromato de potasio (K2Cr2O7) Mide la materia orgnica y compuesto inorgnicos que se pueden oxidar: NO2-, Fe2+ (catin ferroso o hierro II), NH3, S2-, Cl-. Siempre el valor de DQO es mayor que DBO El fundamento de la medida es someter la muestra a oxidacin con el dicromato potsico a una temperatura de 150C durante 2 horas. Despus se puede medir el K2Cr2O7 que ha reaccionado de dos formas:

valorando su exceso mediante una volumetra normal con sulfato amnico ferroso (sal de Mohr)

valorar con espectrofotometra el color producido en la oxidacin. Kit de trabajo. Este mtodo esta desplazando a la valoracin tradicional en las plantas depuradoras.

Para el tratamiento del agua residual es interesante la relacin entre DBO5 y DQO: > 0,5 - agua biodegradable 0,2-0,5 - agua que requiere lechos bacterianos ms eficientes y activos. < 0,2 agua no biodegradable (tratamientos qumicos) COT carbono orgnico total. Requiere instalaciones complejas para determinarlo. Aunque en la normativa no se establece ningn mtodo como oficial, se suele medir por espectrofotometra de IR para determinar el CO2 producido tras un ataque energtico de las muestras. Ej. Calor (T950C), condiciones oxidantes, UV o combinaciones de estos mtodos. Normalmente se suele determinar carbono total y carbono inorgnico total. El COT se determina por diferencia de estos valores. Dosificacin de coagulante y floculantes. Jar test La finalidad de este ensayo es determinar la cantidad ptima de coagulantes para precipitar y sedimentar las sustancias coloidales. Coagulantes cloruros y sulfatos de hierro y aluminio. Cuando son sales de hierro se tiene que trabajar en un rango de pH entre 4-12, es menos critico. Con aluminio hay que ajustar el pH de la muestra. Floculantes son compuestos orgnicos, suelen ser polmeros con carga elctrica (aninicos) que tiene nombres comerciales. Se preparan varios vasos o conos de Imhoff con medio litro de muestra y diferentes concentraciones del coagulante, se agitan fuertemente para que coagulante se distribuya y se deja decantar 15 minutos. Entonces lo que se miden ensayos de turbidez, de sedimentabilidad, DQO en aquellas disoluciones que quedan ms transparentes y con todos estos se determina la concentracin ptima de coagulante. Siempre se deja un blanco sin nada de coagulante pa1ra compara resultados. Orientacin: dosis habituales: Coagulante - 50-500ppm Floculante - 1-5ppm % de humedad en fangos informan sobre la cantidad de agua presente en un fango y de cmo se desarrolla el proceso de deshidratacin. Slo se determina sobre muestras de fangos deshidratados. Se determina por gravimetra (diferencia de pesada)

Cogemos una cpsula y la taramos: P1 Aadimos el fango: P2 Se mantiene en estufa a 105-11C durante 24 horas.

Se saca a un desecador. Se enfra y se pesa: P3

% humedad fango = Toxicidad en fangos Se realizan para determinar la reutilizacin de esos fangos. Ej. uso agrcola. Son bioensayos en los que se pone en contacto los fangos con organismo vivos especialmente sensibles a sustancias txicas. Se determina la falta de movilidad o la falta de luminiscencia o la tasa de mortalidad de estos organismos. En la normativa se especifican dos bioensayos:

inhibicin tasa de mortalidad, pulga de agua, daphnia. CL50 750mg/l luminiscencia disminucin de la luminiscencia, photobacterium phosphoreum, se consideran txicos EC50 3.000mg/l

Valores bajos

Anlisis fsico - qumico y bacteriolgico de aguas Agua Potable: Significa que debe estar libre de microorganismos patgenos, de minerales y sustancias orgnicas que puedan producir efectos fisiolgicos adversos. Debe ser estticamente aceptable y, por lo tanto, debe estar exenta de turbidez, color, olor y sabor desagradable. Puede ser ingerida o utilizada en el procesamiento de alimentos en cualquier cantidad, sin temor por efectos adversos sobre la salud (Borchardt and Walton, 1971). Segn el Art. 982 CAA (modificado por Resoluc. 494/94). Con las denominaciones de Agua potable de suministro pblico y agua potable de uso domiciliario, se entiende la que es apta para la alimentacin y uso domstico: no deber contener sustancias o cuerpos extraos de origen biolgico, orgnico, inorgnico o radiactivo en tenores tales que la hagan peligrosa para la salud. Deber presentar sabor agradable y ser prcticamente incolora, inodora, lmpida y transparente. El agua potable de uso domiciliario es el agua proveniente de un suministro pblico, de un pozo o de otra fuente, ubicada en los reservorios o depsitos domiciliarios. Ambas debern cumplir con las caractersticas fsicas, qumicas y microbiolgicas que cita el Art. 982 CAA. Anlisis fsico - qumico Volumen de agua a extraer:

No es posible fijar de una manera general el volumen de agua a extraer para el anlisis qumico, pues variara segn las determinaciones a efectuar entre 1 a 5 litros. Examen fsico Color:

El color de las aguas naturales se debe a la presencia de sustancias orgnicas disueltas o coloidales, de origen vegetal y, a veces, sustancias minerales (sales de hierro, manganeso, etc.). Como el color se aprecia sobre agua filtrada, el dato analtico no corresponde a la coloracin comunicada por cierta materia en suspensin. El color de las aguas se determina por comparacin con una escala de patrones preparada con

una solucin de cloruro de platino y cloruro de cobalto. El nmero que expresa el color de un agua es igual al nmero de miligramos de platino que contiene un litro patrn cuyo color es igual al del agua examinada. Se acepta como mnimo 0,2 y como mximo 12 mg de platino por litro de agua. Olor:

Est dado por diversas causas. Sin embargo los casos ms frecuentes son: debido al desarrollo de microorganismos, a la descomposicin de restos vegetales, olor debido a contaminacin con lquidos cloacales industriales, olor debido a la formacin de compuestos resultantes del tratamiento qumico del

agua. Las aguas destinadas a la bebida no deben tener olor perceptible. Se entiende por valor umbral de olor a la dilucin mxima que es necesario efectuar con agua libre de olor para que el olor del agua original sea apenas perceptible. Se aceptan como valores mximos para un agua optima 2 a 10 unidades. Sabor:

Est dado por sales disueltas en ella. Los sulfatos de hierro y manganeso dan sabor amargo. En las calificaciones de un agua desempea un papel importante, pudiendo ser agradable u objetable. Determinacin de pH:

El pH ptimo de las aguas debe estar entre 6,5 y 8,5, es decir, entre neutra y ligeramente alcalina, el mximo aceptado es 9. Las aguas de pH menor de 6,5, son corrosivas, por el anhdrido carbnico, cidos o sales cidas que tienen en disolucin. Para determinarlo usamos mtodos colorimtricos o potenciomtricos. Para poder decidir sobre la potabilidad del agua se requiere el control de un nmero elevado de parmetros qumicos y determinados parmetros bacteriolgicos. Dentro de los primeros cobra especial importancia el amonio, los nitratos y nitritos, indicadores de contaminacin por

excelencia. Amonio :

Este ion tiene escasa accin txica por s mismo, pero su existencia an en bajas concentraciones, puede significar contenido aumentado de bacterias fecales, patgenos etc., en el agua. La formacin del amonio se debe a la descomposicin bacteriana de urea y protenas, siendo la primera etapa inorgnica del proceso. Nitritos:

Estos representan la forma intermedia, metaestable y txica del nitrgeno inorgnico en el agua. Dada la secuencia de oxidacin bacteriana: protenas - amonio - nitritos-- nitratos, los nitritos se convierten en importante indicador de contaminacin, advirtiendo sobre una nitrificacin incompleta. Nitratos:

La existencia de stos en aguas superficiales no contaminadas y sin aporte de aguas industriales y comunales , se debe a la descomposicin de materia orgnica (tanto vegetal como animal) y al aporte de agua de lluvia ( 0,4 y 8 ppm ). Cloruros:

Todas las aguas contienen cloruros. Una gran cantidad puede ser ndice de contaminacin ya que las materias residuales de origen animal siempre tienen considerables cantidades de estas sales. Un agua con alto tenor de oxidabilidad, amonaco, nitrato, nitrito, caracteriza una contaminacin y por lo tanto los cloruros tienen ese origen. Pero si estas sustancias faltan ese alto tenor se debe a que el agua atraviesa terrenos ricos en cloruros. Los cloruros son inocuos de por s, pero en cantidades altas dan sabor desagradable. Valor mximo aceptable: 350 mg/l. Mtodo de Mohr Generalidades:

Si se agregan iones de plata a una solucin de pH entre 7 y 9 que contenga cloruros y cromato, la precipitacin del cloruro de plata est prcticamente terminada cuando se comienza a precipitar el cromato de plata. Este hecho permite considerar la aparicin de un

precipitado rojo de cromato de plata, como indicador del punto final. Reactivos:

Solucin 0,00282 N de nitrato de plata Cromato de potasio 5 % Tcnica:

Se filtra el agua si contiene materias en suspensin. Se toman 100 ml de la muestra (si el pH es inferior a 7 se aade 1 gramo de bicarbonato), se agrega 1 ml de cromato de potasio y se valora aadiendo gota a gota la solucin de nitrato de plata hasta coloracin apenas rojiza. Se resta 0,2 al nmero de ml empleados ( gasto correspondiente al ensayo en blanco). Clculo:

n= es el nmero de ml de la solucin de nitrato de plata usada en la valoracin V= volumen de muestra original Determinacin de Cloro Libre en aguas:

La ortotoluidina en medio clorhdrico y en presencia de cloro libre se oxida, dando un compuesto de coloracin amarilla. Como la intensidad de la coloracin aumenta por concentraciones crecientes de cloro libre se puede determinar por colorimetra, utilizando una serie de patrones de concentracin conocida. Reactivo:

Solucin de ortotoluidina. Tcnica:

Se utilizan tubos de ensayo donde se enfrentan 10 ml de agua y 0,2 ml de reactivo se deja en reposo 5 o 10 minutos, en oscuridad. Se compara la coloracin obtenida con los patrones permanentes. Valor mnimo aceptable de cloro activo residual: 0,2 mg/l.

Residuos por evaporacin (Slidos Disueltos)

Se denomina as al peso de las sustancias disueltas en 1 litro de agua, no voltiles a 105 C. Se consideran disueltas aquellas que no son retenidas por filtracin. Tcnica:

Se tara una cpsula de porcelana que se coloca sobre Bao Mara, se miden 100 ml de agua y se vierte sobre la cpsula hasta evaporacin. Se coloca luego en estufa a 105 C y se deja durante 2 horas. Se retira, se deja enfriar en desecador sulfrico y se pesa. El aumento de peso es el residuo por evaporacin correspondiente al volumen de agua tomado. Los resultados se expresan en mg/l. Valor mximo aceptable: 1.500 mg/l. Dureza:

Se habla de aguas duras o blandas para determinar calidad de las mismas. Las primeras

tienen alto tenor de sales de calcio y magnesio disueltas. Las blandas son pobres en estas sales. Bicarbonato de calcio y magnesio: Dureza Temporal Sulfato y cloruro de calcio y magnesio: Dureza Permanente

Puede haber tambin nitratos, fosfatos, silicatos, etc. (dureza permanente). El agua debe tener una dureza comprendida entre 60 y 100 mg/l. no siendo conveniente aguas de dureza inferiores a 40 mg/l, por su accin corrosiva. valor mximo aceptable de Dureza Total (CaCO3) 400 mg/l. Alcalinidad: Esta representada por sus contenidos en carbonatos y bicarbonatos. Eventualmente se puede deber a hidrxidos, boratos, silicatos, fosfatos. Las soluciones acuosas de boratos tienen un pH 8,3 y las de cido carbnico 4,3. Por estas razones se toman estos pH como puntos finales. Como indicadores de estos puntos se utilizan fenolftaleina (pH 8,3) y heliantina (pH 4,2). Reactivos:

cido sulfrico 0,02 N Fenolftaleina 0,5 % Heliantina 0,05 % Tcnica:

Se aade 0,2 ml de fenolftaleina a 100 ml de agua. Coloracin rosada indica presencia de carbonato, en este caso se agrega gota a gota solucin de cido sulfrico 0,02 N hasta desaparicin de color. Se designa como F la cantidad de ml gastados. A la misma muestra se le agregan 2 gotas de heliantina y se aade gota a gota cido sulfrico 0,02 N hasta color salmn. Se designa por H la cantidad de ml usados en esta ultima determinacin. Expresin de resultados: Alcalinidad de carbonatos en mg/l= 2 x F x 10 Alcalinidad de bicarbonatos en mg/l= (H - F) x 10

Anlisis Bacteriolgico de aguas

Generalidades: Existe un grupo de enfermedades conocidas como enfermedades hdricas, pues su va de transmisin se debe a la ingestin de agua contaminada. Es entonces conveniente determinar la potabilidad desde el punto de vista bacteriolgico. Buscar grmenes como Salmonella, Shigella, trae inconvenientes, pues normalmente aparecen en escasa cantidad. Por otra parte su supervivencia en este medio desfavorable y la carencia de mtodos sencillos y rpidos, llevan a que su investigacin no sea satisfactoria, mxime cuando se hallen en nmero reducido. En vista de estos inconvenientes se ha buscado un mtodo mas seguro para establecer la calidad higinica de las aguas, mtodo que se basa en la investigacin de bacterias coliformes como indicadores de contaminacin fecal. El agua que contenga bacterias de ese grupo se considera potencialmente peligrosa, pues en cualquier momento puede llegar a vehiculizar bacterias patgenas, provenientes de portadores sanos, individuos enfermos o animales. Principales enfermedades de origen hdrico y sus agentes responsables

Enfermedad Origen bacteriano Fiebres tifoideas y paratifoideas Salmonella typhi Salmonella Paratyphi A y B

Agente

Disentera bacilar Shigella

Clera Vibrio cholerae

Gastroenteritis agudas y diarreas Escherichia coli ET

Campylobacter jejuni Campylobacter coli Yersinia enterocolitica Salmonella sp Shigella sp

Origen viral Hepatitis A y E Virus de la hepatitis A y E

Poliomielitis Virus de la polio

Gastroenteritis agudas y diarreas Virus Nortwalk Rotavirus Astrovirus Calicivirus Enterovirus Adenovirus Reovirus

Origen parasitario Disentera amebiana Entamoeba histolytica Giardia lambia Cristosporidium Toma de muestra:

La muestra para anlisis bacteriolgico debe efectuarse con el mayor cuidado Envase:

Se deben utilizar frascos esterilizados y con envoltura externa. La capacidad debe ser de 200 a

250 cc. Envo de muestras:

Debe transcurrir el menor tiempo entre la extraccin y la llegada al laboratorio, y que durante ese tiempo se mantenga entre 4 y 10 C. De lo contrario se producen modificaciones cuali cuantitativas de la flora bacteriana. Toma de muestra de un grifo en una caera de agua corriente:

1. 1. Se elige un grifo que este conectado directamente con una caera de distribucin,
es decir, que el ramal del grifo no este comunicado con tanques domiciliarios, filtros, ablandadores u otros artefactos similares. Tampoco conviene extraer muestras de grifos colocados en puntos muertos de la caera.

2. 2. Estas precauciones no se tienen en cuenta cuando se desea conocer la calidad del


agua que suministra un determinado grifo, en lugar de la que conduce la caera principal.

3. 3. Se quitan del grifo los dispositivos destinados a evitar salpicado. Luego se limpia la
boca del grifo, cuidando de eliminar la suciedad que a veces se acumula en la parte interna del orificio. Despus se deja salir agua en forma abundante durante 2 o 3 minutos y se cierra perfectamente el grifo para esterilizarlo.

4. 4. Se esteriliza el grifo calentndolo durante un par de minutos con un hisopo


embebido en alcohol.

5. 5. Se abre con cuidado y se deja salir agua durante medio minuto en forma tal que el
chorro no sea intenso y se llene el envase. Anlisis bacteriolgico Caractersticas microbiolgicas segn Art. 982 del C.A.A. (modificado por resolucin 494/94) Limites permisibles para aguas de consumo

1. 1. Bacterias mesfilas viables: en agar Plate Count 24 hs. a 37C, no mas de 500
UFC/ml

2. 2. Bacterias coliformes: NMP a 37C 48 hs. (Caldo Mc Conckey o Lauril Sulfato), en


100 ml; igual o menor a 3.

3. 3. Ausencia de Escherichia coli: en 100 ml 4. 4. Ausencia de Pseudomona aeruginosa: por 100 ml de muestra

Determinacin del nmero de bacterias aerobias mesfilas por el Mtodo de recuento en placa Generalidades:

El agua contiene bacterias cuyas necesidades nutritivas y de temperatura ptima de desarrollo son variables. Ordinariamente esta determinacin se efecta sembrando en medio slido un volumen conocido de la muestra de agua. Se incuba durante un tiempo y a determinadas temperaturas y se cuenta el nmero de colonias que se obtienen. El medio utilizado es agar nutritivo o agar Plate Count (aproximadamente 15 ml por placa). Diluyentes:

Es importante usar un lquido de dilucin desprovisto de accin bactericida. En la mayora de los casos puede utilizarse agua corriente, agua destilada o solucin fisiolgica o agua peptonada 0,1 % con pH ajustado a 7. Preparacin de las diluciones:

Se preparan tubos estriles con 9 ml de diluyente. Para hacer las diluciones se agita, repetidas veces, la muestra. Luego se flamea la boca del frasco, se destapa, se vuelca un poco de contenido y, tapado nuevamente, se agita 10 - 15 veces para asegurar la distribucin uniforme de las bacterias del lquido. Luego mediante una pipeta esterilizada, se toma 1 ml de muestra que se pasa a un tubo con 9 ml de diluyente. Se tiene as la muestra diluida 10 veces. Se agita esta aspirando y expeliendo el liquido de la pipeta repetidas veces, y luego, mediante otra pipeta esterilizada, se toma 1 ml del liquido diluido, el cual se pasa a un nuevo tubo con solucin diluyente, esta operacin se repite hasta que se estime conveniente. Segn la naturaleza del agua se sembrar directamente o diluida. Las muestras de aguas superficiales purificadas o profundas se sembraran directamente y diluidas 1/10, para las aguas superficiales no purificadas se emplearan diluciones 1/10, 1/100, 1/1000. Incubacin:

Luego se incuban las muestras a 32 - 35 C durante 24 horas. Se realiza la siembra en profundidad. Recuento de colonias en placas: Seleccionar dos placas correspondientes a una dilucin que contenga entre 30 y Tomar la media aritmtica de los 2 recuentos y multiplicar por el factor de dilucin

300 colonias. (recproco de la dilucin utilizada). Informar segn el caso, el resultado como nmero de microorganismos aerobios mesfilos por ml gramo . Ejemplo: dilucin 1/100. Placa 1: 72 colonias x 100 = 7200 Placa 2: 77 colonias x 100 = 7700 Se promedia = (7200 + 7700) = 7450 2 Se informa: 7.450 UFC/ ml En la evaluacin de la potabilidad del agua ubicada en reservorios de almacenamiento domiciliario deber incluirse entre los parmetros microbiolgicos a controlar el recuento de bacterias mesfilas en agar (APC 24 hs. a 37 C); en el caso de que el recuento supere las 500 UFC/ml y se cumplan el resto de los parmetros indicados, slo se deber exigir la higienizacin del reservorio y un nuevo recuento.

2. 2. Determinacin del Nmero Ms Probable(NMP) / 100 ml de bacterias de coliformes


totales (Mtodo de Wilson) Bacterias coliformes: Son bacterias aerobias o anaerobias facultativas, Gram negativas, no esporuladas, que fermentan la lactosa con produccin de cido y gas. A) Ensayo presuntivo: Siembra:

Se puede hacer por triplicado en tubos que tengan caldo Mc Conckey o Lactosa bilis verde brillante (LBVB), con la Campana de Durham. De la muestra de agua se sembrarn: 3 tubos de caldo Mc Conckey o LBVB 2% doble concentracin: 10 ml 3 tubos de caldo Mc Conckey o LBVB simple concentracin: 1 ml 3 tubos de caldo Mc Conckey o LBVB simple concentracin: 0,1 ml

Incubar los tubos a 32 - 35 C durante 48 horas. Determinar con los tubos positivos (cido y gas) el NMP utilizando la tabla de Hoskins. La formacin de gas a las 48 horas se considera evidencia suficiente de la presencia de coliformes.

B) Ensayo confirmativo: Diferenciacin de bacterias coliformes.

1. 1. Pasadas las 48 horas, de los tubos positivos de la prueba presuntiva se siembran


con ansa, en tubos con caldo Mc Conckey o LBVB de simple concentracin, y en tubos con caldo Triptonado (para realizar la prueba del Indol), que se incuban durante 48 horas en un bao de agua regulado a 44,5 C 0,5 C Test de Eikman). Sembrar a su vez en tubos con medio Citrato de Koser o Simmons que se incuban a 32 C durante 48 horas. Esta ltima siembra se realiza mediante el alambre recto, con el objeto de no llevar a los tubos con citrato el material nutritivo del cultivo original. Se consideran positivos los tubos que dieron turbiedad en Citrato Koser o cambio de color en Citrato

de Simmons, lo que es originado por el desarrollo de bacterias I.A.C.. En casos dudosos se puede dilucidar agregando gotas del indicador Azul de Bromotimol al medio Citrato de Koser, que carece del mismo. El lquido permanece verde claro si no ha habido desarrollo, virando al azulado si el citrato ha sido utilizando por las bacterias. Simultneamente con el desarrollo se produce cambio de pH.

2. 2. Confirmar con los tubos de caldo Mc Conckey o LBVB seleccionados que son
positivos de organismos coliformes, sembrando por estras una ansada de ellos en agar Endo o Eosina azul de metileno (EMB). Incubar las placas invertidas a 32 - 35 C examinarlas a las 24 - 48 horas. Observar en estos medios slidos de confirmacin si existen colonias tpicas de coliformes. La formacin en el agar EMB de colonias negras o con el centro negro, con la periferia transparente incolora o la formacin en el agar Endo de colonias rojas rodeadas de un halo rojo, confirma la presencia de coliformes. Tabla de Hoskins Nmero de tubos positivos del total de:

3 tubos de 10 ml 0 0 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 3 3 3

3 tubos de 1 ml 0 1 0 0 1 1 2 0 0 1 1 2 2 0 0 0

3 tubos 0,1 ml 1 0 0 1 0 1 0 0 1 0 1 0 1 0 1 2

ndice del NMP/100 ml 3 3 4 7 7 11 11 9 14 15 20 21 28 23 39 64

3 3 3 3 3 3 3 3 3

1 1 1 2 2 2 3 3 3

0 1 2 0 1 2 0 1 2

43 75 120 93 150 210 240 460 1100

C) Prueba de identificacin de organismos coliformes mediante los ensayos del IMVIC (indol, rojo de metilo, Voges Proscauer, citrato).

3. 3. Investigacin de Escherichia coli 1. 1. Escoger tubos gas positivos del caldo Mc Conkey o Lactosa bilis verde brillante
(Brila) procedentes del recuento de bacterias coliformes (NMP/100ml).

2. 2. Inocular una ansada de caldo de los cultivos seleccionados positivos en tubos de: 1. 1. Caldo Mc Conkey o Brila. 2. 2. Una ansada a caldo de peptona. 3. 3. Incubar los tubos de caldo Mc Conckey o Brila a 44,5 C 0,5 C y ver si son
positivos de formacin de gas a las 24 hs. y a las 48 hs.

4. 4. Los tubos de caldo Mc Conckey o Brila que presenten gas son positivos tambin de
organismos coliformes fecales ya que a esta temperatura solo el bacilo coli fecal produce cido y gas.

5. 5. Despus de 24 hs. de incubacin de los tubos de agua de peptona aadir 0,2 0,3
ml del reactivo del Indol. Agitar los tubos y dejarlos en reposo 10 minutos. La prueba positiva de produccin de Indol se manifiesta por una coloracin rojo oscura, en la prueba negativa se conserva el color original del reactivo. Los cultivos gas positivos en Mc Conckey o Brila a 44,5 C 0,5 C, y que produzcan indol en agua de peptona, pueden considerarse como positivos de coliformes fecales.

3. 3. Aislamiento e Identificacin de Pseudomona aeruginosa


La muestra de agua se siembra en caldo triptena soya - tripticasa soya o caldo nutritivo. Se incuba a 37 C por 24 horas. Transcurridas las mismas se repica con ansa al medio de Levine. Las colonias asiladas se repican al medio agar Cetridime, en pico de flauta o en placa, incubndose 24 a 48 horas a 37C. Si el aislamiento se realiza a partir de tubos de Mc Conckey (utilizados en el aislamiento de coliformes) con desarrollo de velo en superficie, se repica tambin a agar Cetrimide. ya sea si se observa desarrollo y/o pigmentacin se procede a efectuar las siguientes pruebas:

1. 1. Prueba de oxidasa 2. 2. Prueba de reduccin de nitrato 3. 3. Prueba de licuefaccin de la gelatina 4. 4. Prueba de gluconato

5. 5. Prueba de Citrato
Pseudomona aeruginosa es un bacilo Gram negativo, oxidasa positivo, mvil, produce dos tipos de pigmentos (piocianina y fluorescena), aunque existen clases no pigmentadas, reduce nitratos a nitrito y produce gas (esto ltimo no siempre es positivo), lica la gelatina en forma rpida, reduce el gluconato.

Gram Pseudomona aeruginosa -

Oxidasa +

Nitrato +

Gluconato +

Gelatina +

Exmenes para determinar organismos patgenos Si bien la bsqueda directa de bacterias patgenas especficas no forma parte de los exmenes bacteriolgicos habituales a los que se someten las muestras de agua, habr casos en que ser necesario efectuar exmenes para la determinacin de grmenes patgenos intestinales; por ejemplo, durante una epidemia o cuando se est evaluando una nueva fuente. Las posibilidades de obtener buenos resultados sern entonces mayores si se analizan volmenes

grandes de agua y si se usan medios selectivos para determinados grmenes patgenos intestinales. Los anlisis incluirn algunas, sino todas, de las etapas siguientes: concentracin de los microorganismos en la muestra, inoculacin en un caldo de abono; subcultivos en medios de agar selectivos, y anlisis bioqumicos y serolgicos de las colonias sospechosas. En vez de basarse en un mtodo nico, conviene utilizar el mayor nmero posible de mtodos a fin de que no se pierda ninguna oportunidad de detectar a un germen patgeno. Esto es especialmente vlido para la deteccin de Salmonella, puesto que no existe un solo mtodo que se adapte a todos los serotipos. Concentracin de las muestras La tcnica que se emplee depender en gran parte de la cantidad de partculas presentes en el agua. En las aguas de baja turbiedad, la muestra puede pasarse a travs de filtros de membrana. Debido a que la turbiedad aumenta en las aguas naturales, se puede recurrir a la filtracin a travs de tierras diatomceas o con filtros de cartucho o vela, con lo cual se incrementar la filtracin y podrn tratarse volmenes de muestras ms grandes. Como alternativa, se puede utilizar la tcnica de la almohadilla de gasa, especialmente cuando el nmero de grmenes patgenos son pocos o su presencia no es permanente. Salmonella Es probable que los concentrados de muestras necesiten ser enriquecidos previamente en agua de peptona amortiguada, para luego ser enriquecidos en caldo que contenga ya sea tetrationato, selenito, cloruro de magnesio o verde de malaquita. Estos, a su vez, pueden ser sometidos a subcultivo en medios como el verde brillante, sulfito de bismuto, agar de desoxicolata xilosa-lisina (DXL), citrato de desoxicolata o agar de MacConkey, examinndose luego las colonias sospechosas tanto bioqumica como serolgicamente. Entre las pruebas de depuracin bioqumica se deber incluir: agar triple de azcar y hierro, produccin de indol, decarbosilasa y actividad de -galactosidasa. En las pruebas serolgicas se incluir la aglutinacin con sueros polivalentes anti-o, anti-H y anti-Vi. Es imprescindible la eliminacin previa de cepas autoaglutinables. Cuando el anlisis se realiza para detectar las S. typhi , el medio de cultivo aconsejado es la selenita F. El procedimiento de los tubos mltiples se utilizar para calcular el nmero de Salmonella presentes en el agua. Shigella Debido a que las bacterias coliformes y la mayora de cepas de Proteus vulgaris son antagnicas a la Shigella, es aconsejable elegir medios enriquecidos selectivos que reduzcan al

mnimo las acumulaciones de compuestos voltiles y de los subproductos obtenidos a partir de estos microorganismos antagnicos. Se puede usar caldo nutriente con un pH ajustado de 8,0 (es el nivel de pH que menos favorece el crecimiento de bacterias coliformes). Tambin es posible obtener un buen enriquecimiento de Shigella con un medio de cultivo autocitotxico con base en caldo de tripticasa de soja conteniendo 1 mmol/litro de 4-cloro- 2-ciclopentilfenil -D-galactopiranosida, 2,5 g/litro de lactosa y sustancia amortiguadora de citrato a un pH de 6,2. La incubacin debe hacerse durante 6-18 horas, a una temperatura de 35C. Estrense las culturas en agar DXL cuando hayan transcurrido 6 y 18 horas. Somtanse las colonias sospechosas a pruebas de seleccin bioqumica y confrmese las colonias sospechosas con antisueros de Shigella (sueros polivalentes y de tipo especfico). Vibriones del clera y de otro tipo Como forma de enriquecimiento primario se utiliza principalmente el agua alcalina de peptona y el agua de taurocolato telurita de peptona, los subcultivos se harn utilizando como medios selectivos un agar de tiosulfato, citrato, bilis, sal y sucrosa o un agar de gelatina de taurocolato y telurito. Los cultivos que sean sospechosos se inocularn en agar de hierro Kligler. Despus de 18 horas de incubacin, los V. cholerae producen un caracterstico color amarillo, sin ninguna produccin de gas. Estos cultivos se depurarn despus para determinar la actividad de ureasa y oxidasa; las cepas que demuestren ser negativas respecto a rea y positivas en cuanto a oxidasa debern ser remitidas a un laboratorio de referencia para que se realicen otras pruebas bioqumicas y de agrupamiento serolgico. Coli enteropatgenos En este caso se utilizan las tcnicas para la deteccin de bacterias coliformes fecales en el agua. Las colonias se confirmarn como E. coli y si la evidencia epidemiolgica as lo garantiza, los subcultivos pueden ser remitidos a un laboratorio de referencia para agrupamiento serolgico y, en caso necesario, para realizar las pruebas que determinan la enterotoxigenicidad. Yersinia enterocolitica Se ha encontrado que el agar M-Endo es el medio de cultivo ms conveniente y de mltiple utilidad debido a las distintas caractersticas morfolgicas de las colonias cuando se incuban tanto a 25 como a 35C. Despus de transcurridas 72 horas de incubacin, las colonias aparecern bien definidas y con una coloracin roja oscura. Tambin da buenos resultados para el desarrollo bacteriano utilizar agar de MacConkey, siempre que la incubacin se haga a

25C. Todos los grupos aislados que resulten sospechosos debern ser depurados bioqumicamente a 25C y 35C utilizando ramnosa, rafinosa y melibiosa. Si existe evidencia epidemiolgica que lo garantice, debern enviarse los subcultivos a un laboratorio de referencia para formar los grupos serolgicos y efectuar las pruebas de susceptibilidad a los antibiticos. Campylobacter fetus Existe una tcnica de membrana filtrante que ha dado buenos resultados para aislar este germen patgeno, y en la cual se emplea un agar sanguneo que contiene vancomicn, polimixin y trimetoprim. Los cultivos se incuban a 42-43C, bajo tensin reducida de oxgeno, en una jarra anaerbica durante 3 das e inspeccionadas diariamente para detectar las colonias mucoideas grises no hemolticas (con dimetro de 1-2 mm). Las colonias sospechosas son teidas con Gram para detectar las formas tpicamente curvas y en S, y sometidas a prueba para determinar la reaccin positiva a la oxidasa y la catalasa, la motilidad y la incapacidad para desarrollarse aerbicamente a una temperatura de 36C. Los subcultivos deben ser remitidos a un laboratorio de referencia para mayores pruebas de tipo bioqumico. No sera prctico que los elementos aislados de brotes espordicos fueran serotipificados, debido a la heterogeneidad de este organismo; por ahora, tampoco resulta prctico el uso de un antgeno comn o de un conjunto de serotipos diferenciales.

Bibliografa

http://www.vet.unicen.edu.ar/prodyserv/labaacui.htm http://edicion-micro.usal.es/web/educativo/m_especial/29ctexto3.htm