Metabolismo celular Bioqumica Contedo

Gliclise e o catabolismo das hexoses Princpios de regulao metablica: glicose e glicognio O ciclo do cido ctrico O dao Oxidao dos c dos g a os cidos graxos Oxidao dos aminocidos e produo da uria Fosforilao oxidativa e fotofosforilao Biossntese de carboidratos Bi t d b id t Biossntese de lipdeos Biossntese de aminocidos nucleotdeos e molculas relacionadas Integrao do metabolismo

Universidade Federal de Gois Instituto de Cincias Biolgicas Departamento de Bioqumica e Biologia Molecular

METABOLISMO DE CARBOIDRATOS

Prof. Dr. Alexandre Melo Bailo

Goinia, 2009

BIOENERGTICA E METABOLISMO
Introduo

GLICLISE E CATABOLISMO DAS HEXOSES

Biomolculas mais abundantes; Funes: energtica, reserva, reconhecimento, estrutural, proteo, coeso entre as clulas e lubrificantes; Poli-hidroxialdedos ou cetonas; Trs classes principais: monossacardios, oligossacardios e polissacardios.

Monossacardeos
Duas f li D famlias: cetoses e aldoses (3 a 7 carbonos) t ld b )

Gliceraldedo Glicose

Dihidroxiacetona

Frutose

Dissacardeos
Maltose (glicose+glicose) M lt ( li li ) Sacarose (glicose+frutose) Lactose (galactose+glicose) Ligao glicosdica

lcool glicose hidrlise condensao glicose

-D-glicopiranosil-(1 4)-D-glicopiranose

Polissacardeos
Polmeros que contm mais de 20 unidades monossacardicas Armazenamento
Grnulos de amido

Homopolissacardeos

Grnulos de glicognio

Estrutura

Celulose

Exoesqueleto de quitina

ETAPAS DE OXIDAO DA GLICOSE

Gliclise

Citoplasma

Ciclo de Krebs Ci l d K b Fosforilao Oxidativa

Mitocndria

Dependente de d O2

Independente de O2

GLICLISE
Via metablica para obteno de energia qumica a partir da glicose; Ocorre no citosol de todas as nossas clulas; Processo anaerbio; Possui duas fases: preparatria e de pagamento; Em algumas clulas a nica forma de obteno de energia clulas, (glbulos vermelhos, microrganismos anaerbios).

Fase preparatria

Fase de pagamento

Porque o processo de quebra de 1 molcula de 6 C e duas molculas de 3 C to complexo?

Os intermedirios metablicos so matrias primas necessrios nos processos biossintticos Otimizao da produo de energia

Destinos do piruvato
glicose

2 ATP

Coenzimas NADH

piruvato O2 Ciclo de Krebs e Fosforilao oxidativa

O2

lactato etanol

32 ATP

A gliclise estreitamente regulada: Para manter constante os nveis de ATP e intermedirios glicolticos Ajustes na velocidade da gliclise via regulao de atividades enzimticas de enzimas como fosfofrutoquinase-1 e piruvato quinase Estas enzimas so reguladas pela flutuao de certos metablitos chave que refletem as necessidades metablicas do momento celular

Destinos do piruvato sob condies anaerbicas

O C C O CH3
2 NAD+ Desidrogenase lctica l NADH + H+ NAD+ 2 Piruvato 2 NADH 2 Lactato

O-

Piruvato

Glicose Gli

O C

OLactato
G0 = -25.1 KJ/mol

HO C H CH3

Fermentao alcolica
Piruvato

O C

Glicose + 2ADP + 2Pi

2 etanol + 2CO2 +2ATP +2H2O

C O CH3
CO2 Piruvato descarboxilase

O C

O-

NADH + H+

NAD+

OH CH2 CH3
Etanol

HO C H CH3
Acetaldedo Desidrogenase alcolica

As fermentaes microbianas rendem produtos finais com valor p comercial metanol; propanol, c. frmico, butanol, glicerol, c. actico

Balano Balano energtico da gliclise

Ganho lquido de 2ATPS + 2piruvatos + 2NADH Condies aerbias completa oxidao do piruvato produo de ATPs + oxidao do NADH na cadeia de transporte de eltrons ATPs Condies anaerbias 2piruvato/etanol produo lquida de 2 ATPs +

Vias afluentes da gliclise

Degradao do glicognio e do amido; Hidrlise de dissacardeos ( Hid li d di d (sacarose); ) Diversos monossacardoes entram em outros pontos na gliclise (frutose).

GLICONEOGNESE
Animais, plantas, fungos e outros Animais, plantas, microrganismos produo de um novo acar acar Precursores: piruvato, Precursores: piruvato, lactato e alguns aa Altamente conservada Ocorre no fgado e crtex renal Funo: sangue Funo: outros tecidos fgado em glicose glicerol, glicerol, l l

Exerccio Lactato glicose sangue Plantas gorduras

Glicose um precursor parede celular, nucleotdeos, coenzimas, celular, nucleotdeos, coenzimas, glicoprotenas e glicolpdios glicolpdios

No so apenas duas vias p metablicas fluindo em direes contrrias!!!! contrrias!!!! Molcula inicial/final

Duas vias ocorrem no citosol e necessitam de regulao de regulao recproca e coordenada Produtos/precursores

Gliclise neoglicognese irreversveis

e so

Uma das vias de converso de piruvato em PEP

Ciclo de Cori

Vias alternativas de converso de piruvato em PEP

Transporte do oxaloacetato para o citosol via malato importante??? importante??? [NADH]/[NAD+] 8 x 104 no citosol 105 vezes menor que na mitocondria!!! mitocondria!!!

Necessidade de reciclagem dos equivalentes redutores

Move equivalentes redsutores da mitocondria para o citosol balanceamento do NADH produzido e consumido na gliconeognese

Desvios adicionais da gliconeognese em relao gliclise

Gliconeognese energicamente dispendiosa

Os intermedirios do ciclo do cido ctrico e alguns aminocidos so gliconeognicos

Via das pentoses fosfato para oxidao da glicose

Glisose6P apresenta Glisose destinos catablicos Principais produtos: produtos: ribose 5P outros

NADPH e

NADPH agente redutor nas vias anablicas e protege contra danos oxidativos do H2O2 Tecidos com alta taxa de sntese de cidos graxos (fgado, adiposo, fgado, adiposo, glndulas mamrias) mamrias) ou colesterol e hormnios esterides (fgado , glndulas adrenais e gnodas) gnodas) requerem NADPH produzido por esta via. via.

Fase oxidativa da via das pentoses fosfato

Proteo contra estresse oxidativo - NADPH

Clulas da crnea e eritrcitos so constantemente expostas ao oxignio radicais livres Manuteno de uma atmosfera redutora preveno de danos oxidativos de lipdeos, protenas, c. lipdeos, protenas, c. nucleicos Reduo do H2O2 glutationa reduzida, reduzida, glutationa peroxidase Reduo da glutationa oxidada em reduzida glutationa redutase e NADPH

Fase no-oxidativa da via das pentoses fosfato no Catalisada por trs enzimas: epimerase, transaldolase e transcetolase enzimas: epimerase, sem consumo de ATP e

Converso da ribose5P em glicose6P ribose glicose equivalentes redutores 6 molculas de 5C produz 5 molculas de 6C

Destinos da glicose-6P gliclise e via das pentose fosfato glicose Depende da necessidade celular e da disponibilidade de NADP+ Altos nveis de NADPH gliclise via

Niveis de NADP+ aumentam (tecidos com alta atividade biossinttica) biossinttica) das pentoses fosfato

a produo de glicognio no fgado a partir de cido ltico estabelece uma conexo importante entre os metabolismos muscular e h ti O glicognio muscular t b li l heptico. li i l tornase disponvel como accar sanguneo atravs da interveno do fgado, e a glicose sangune , ento, convertida em glicognio muscular. Existe, portanto, um ciclo completo da molcula da glicose no corpo A epinefrina acelera este ciclo na sentido msculo fgado fgado Por outro lado, a insulina acelera o ciclo na direo sangue msculo
C.F.CoriandG.T.Cori,articleinJournalof C F Cori and G T Cori article in Journal of Biological Chemistry,1929

PRINCPIOS DE REGULAO METABLICA: GLICOSE E GLICOGNIO

Regulao metablica tema central na bioqumica Caractersticas mais interessantes da clula Milhares de enzimas tipo de regulao Diviso em vias provvel que nenhuma escape de algum

conveniente (mas essencial) para a compreenso essencial) l

Cada via metablica est conectadas com as outras vias em uma rede metablica multidimensional Glicose6P Glicose metablito compartilhado por vrias vias metablicas

Clula decide destino da glicose6P glicose afeta todas as outras vias nas quais este metablito um intermedirio Direcionamento metablito efetuado por meio de mecanismos de regulao g reguladores g afetam a atividade enzimtica ligando ou desligando vias metablicas especficas desligando

 A alocao de metablitos Pasteur Mudana leveduras: leveduras: Aerbica anaerbica

Louis

consumo de glicose (10x) 10x) sem notveis alteraes nas [ATP] ou outros vrios metablitos celulares

A clulas tem a capacidade de gerenciar i todos t d os processos metablicos simultaneamente obtendo cada produto na quantidade necessria, necessria, no tempo correto, em p correto, condies adversas, e sem gerar adversas, vestgios o que uma realizao espantosa. espantosa.

Metabolismo do glicognio
E Excesso d glicose de li glicognio/amido glicognio/ id li i Fgado/msculo 10%/12% Fgado/ 10% Polmero reduo da osmolaridade da glicose no citoplasma celular 0.4M 0.01uM 01uM Partcula de glicognio 55. 55.000 glicose 2.000 extremidades redutoras

Associam 20 a 40 partculas Visveis microscopias eletrnica aps 24h jejum. 24h jejum. animais alimentados ausentes

Hidrlise do glicognio
A hidrlise do glicognio gliclise glicose para

Gli i Glicognio f f il , enzima d fosforilase, fosforilase i de desramificao do glicognio e fosfoglicomutase Ligaes (1 4) e (1 6)

 Converso da glicose1P em 6P glicose Msculo gliclise

Fgado aumentar os nveis de glicose sangunea RE fgado e rins fosfatase glicose 6

Sntese de glicognio
fosfoglicomutase

Grupo doador de glicose UDPglicose UDP Tamb utilizado Reao irreversvel Nucleotdeo interagir com vrios sitios nas enzimas timo grupo doador M Marcao d d i d acar do destino do deoxiribose e c. Ascrbico c.

 Ocorre em todos os tecidos esquelticos Precursor: glicose6P Precursor: glicose

predominante no fgado e msculos

Fosfoglicomutase, Fosfoglicomutase, UDP UDPglicose pirofosforilase, pirofosforilase, glicognio sintase (1 4) e glicosil (4 6) transferase

Glicosil (4 6)transferase

Como iniciada a sntese de uma nova molcula de g g glicognio? glicognio?

Glicognio sintase monmeros necessita de um polmero (1 4) iniciador de 8

Cadeia inicial de poliglicose: poliglicose: GLICOGENINA

Partcula de glicognio at 12 camadas de fileiras

Regulao de vias metablicas

As vias metablicas de carboidratos mecanismos regulatrios complexos essenciais para sobrevivncia Garantido fluxo de metablitos atravs de um via, na direo correta e na taxa correta para responder as circunstncias celulares de um momento As circunstncias celulares podem mudar drasticamente E Exerccio, composio e quantidade d di t i i tid d da dieta Combustveis (glicose) entram na clula e produtos(CO2) deixam a clula entretanto a massa e a composio no variam Clulas esto em estado de equilbrio dinmico

quando v1 = v2, [S] constante

Estado de equilbrio perturbado os fluxos de vias temporariamente perturbados desengatilha mecanismos regulatrios de cada via retorno da clula ao estado de equilbrio homeostase

 Evoluo organismos adquiriram uma coleo de mecanismos regulatrios para manuteno da homeostase em nveis molecular, celular e organismo importncia dos mecanismos regulatrios genes regulatrios (aprox. 4000 homem) (aprox. refletida no alto nmero de

Agem em diferentes escalas de tempo; diferentes sensibilidades tempo; A manuteno da concentrao de ATP essencial Hormnios

 Enzimas regulatrias respondem a mudanas nas concetraes de metablitos Fluxo atravs de uma via bioqumica depende da atividade das enzimas que catalisam cada passo naquela via. via.

A atividade enzimtica pode ser alterada de diversas maneiras

Regulao coordenada e recrpoca da gliclise e da gliconeognese

As isoenzimas hexoquinase do msculo e fgado so diferencialmente afetadas por seus produtos

Hexokinase IIII ki msculo l Alta afinidade; Km=0.1mM afinidade; Km=0 Inibida pelo substrato Hexokinase IV fgado

10mM Km 10mM > sangue 4 a 5mM Regula a [glicose] sangunea glicose] No inibida pelo substrato p Inibio por sequestro

A fosfofrutoquinase1 sofre regulao alostrica complexa fosfofrutoquinase

Glicose6P Glicose

diferentes destinos: destinos:

Pentose fosfato Gliclise Sntese de glicognio PFK1 PFK gliclise condena a glicose atravs da

Regulao da atividade da piruvato quinase

Inibida por ATP acetilC e . G ibid acetilCoA c Graxos d cadeia l il c. de d i longa A do fgado inibida por fosoforilao Glucagon adenilato ciclase dependente de cAMP No msculo cAMP (adrenalina) adrenalina) preparo para reao de lutaoufuga. lutaoufuga. cAMP protena quinase

quebra do glicognio e gliclise

A gliconeognese regulada em vrios passos

Piruvato precursor da neoglicognese Ponto de partida carboxilase definio do destino piruvato

Altos ndices de AcetilCoA Acetil Degradao de c. Graxos g c. Altos ndices de NADH Krebs inibio do ciclo de

INIBIO DA PIRUVATO CARBOXILASE

A FBPase1 o segundo ponto de regulao da gliconeognese FBPase

A frutose 2,6bifosfato um potente regulador da gliclise e da gliconeognese

Mediador da resposta hormonal da glicose/gliconeognese glicose/ Reflete o nvel de glucagon no sangue

A frutose 2,6bifosfato um potente regulador da gliclise e da gliconeognese

Niveis controlados por fosfofrutoquinase2 e frutose 2,6bifosfatase fosfofrutoquinase nica enzima com as duas atividades Glucagon reflete baixa glicose sangunea gliconeognese

Regulao coordenada da stese e do consumo do glicognio

Mobilizao do glicognio glicognio fosforilase Regulao da mobilizao sobre esta enzima A glicognio fosforilase ilustra como as izoenzimas desempenham seus papis tecidoespecfico tecido

Regulao da glicognio fosforilase nomsculo nomsculo

Regulaoalostrica Regulaoalostrica g

Regulaocovalente

Regulao da glicognio fosforilase heptica

O stio alostrico da regulao por glicose permite a ao da enzima como um sensor de glicose respondendo apropriadamente a glicose sangunea

Cascata domecanismos deao doglucagoneda epinefrina domecanismos deao doglucagoneda

Aglicognio sintasetambm regulada Aglicognio sintasetambm regulada por fosforilao/defosforilao fosforilao/defosforilao

A glicognio sintase quinase 3 ptn regulatria mais importante

Aglicognio sintasequinase 3mediaasaes Aglicognio sintasequinase 3mediaasaes da insulina

Controledasntesedoglicognioapartirdaglicosesanguneanos micitos

Afosfoprotena Afosfoprotena fosfatase 1centralnometabolismo doglicognio 1centralnometabolismo doglicognio

PP1 PP1 remove grupos fosforil de todas as 3 enzimas fosforiladas em resposta ao glucagon e epinefrina: glicognio sintase, glicogenio fosforilase e epinefrina: fosforilase quinase Insulina estimula a sntese do glicognio ativando PP1 e PP1 inativando GSK3 GSK3 No existe livre no citosol direcionamento ao glicognio fortemente ligada a protena de

Sinais hormonais ealostricos ealostricos coordenam ometabolismo de ometabolismo carboidratos

Diferena na regulao dometabolismo decarboidratos entreos dometabolismo decarboidratos entreos tecidos musculareheptico musculareheptico
Msculo: Msculo: O msculo utiliza seu estoque de glicogenios somente para sua prpria demanda Produo de ATP controlada pela gliclise

A maquinaria da gliconeognese ausente no tecido muscular