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Galerie API RapiD 20E

Principe : La galerie API RapiD 20E est constitue dune galerie de 20 microtubes contenant les substrats dshydrats pour la mise en vidence dactivits enzymatiques ou de la fermentation de sucres. La suspension bactrienne rpartie dans les tubes dissout les substrats. Les mtabolites produits au cours des 4 heures dincubation sont mis en vidence par des ractions colores spontanes ou rvles par laddition de ractifs. La lecture de ces ractions se fait laide du Tableau de lecture et lidentification est obtenue laide du tableau didentification.

Technique : Prparation de la galerie :

Runir fond et couvercle dune bote dincubation et rpartir de leau dans les alvoles pour crer une atmosphre humide. Dposer strilement la galerie dans la bote dincubation. Prparation de linoculum :

Faire une suspension bactrienne, dans une ampoule de NaCl 0,85% Medium ou dans un tube deau distille physiologique, de turbidit gale celle de ltalon 0,5 Mcfarland. Inoculation de la galerie : - Introduire la suspension dans les tubes de la galerie en viter la formation de bulles. - Pour le caractre CIT, dposer deux gouttes de suspension. - Pour les autres caractres, seuls le tube doit tre rempli. - Pour les caractres LDC, ODC, URE, remplir les cupules dhuile de paraffine. - Incuber 4 heures 37C

Lecture : Aprs incubation, la lecture de la galerie doit se faire en se rfrant au Tableau de Lecture. Raliser les tests ncessitant laddition de ractifs : voir tableau de rsultats.

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Arnaud Delahaye

Identification : Avec le tableau didentification :

Comparer les ractions notes sur la fiche de rsultats avec celle du tableau ; Avec le catalogue analytique :

Les tests sont regroups en groupe de 3, et une valeur (1,2 ou4) est indique pour chacun. Additionner lintrieur de chaque groupe les nombres correspondants aux tests positifs. On obtient un nombre 7 chiffres qui sert de code didentification. Avec un logiciel didentification.

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Tableau de lecture de la galerie miniaturise Api RapiD 20E Tests ONPG LDC ODC URE CIT PPA MNT ESC ARA XYL ADO RHA CEL MEL SAC TRE RAF GLU IND VP Ox Substrat Ortho-nitro-phenylgalactoside Lysine Ornithine Ure Citrate de sodium Phnylalanine Malonate Esculine Arabinose Xylose Adonitol Rhamnose Cellobiose Melibiose Saccharose Trehalose Raffinose Glucose Tryptophane Pyruvate Sur papier filtre Caractre recherch Beta-galactosidase Lysine dcarboxylase Ornithine dcarboxylase Urase Utilisation du citrate Phnylalanine dsaminase Utilisation -glucosidase Ngatif Incolore Jaune/gris Jaune/gris Jaune Vert ple/jaune Incolore Jaune Incolore Rsultats Positif Jaune Bleu/violet Bleu/violet Rose/violet Bleu-vert/vert Brun/jaune Vert bleu Gris noir

Acidification

Bleu

Vert jaune

Formation dindole Production dactone Cytochrome-oxydase

James / immdiat Vert ple/jaune Rose VP 1 + VP 2 / 5-10 mn Incolore rouge Ox / 5 mn Incolore Violet

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