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Projecto piloto educativo

Material Didctico Multimdia de Gentica e Biotecnologia Vegetal

www.institutovirtual.pt/edu-agri-biotec

Projecto integrado no "Programa de Apoio a Projectos de Pesquisa no Domnio Educativo 2001", do Servio de Educao e Bolsas da Fundao Calouste Gulbenkian.

Cada espcie de organismo, representada por um determinado cdigo gentico, uma experincia bem sucedida de adequao ao ambiente, que necessariamente posta em causa quando esse ambiente alterado de forma no transitria ou quando o cdigo gentico sofre qualquer agresso que o modifica. Isto , especiao biolgica, cdigo gentico (ADN) e ambiente esto necessariamente ligados. Frasto da Silva (2001)

Notas

Ficha temtica n.1 ABC da Gentica


Breve viso panormica e evolutiva Assim como um gelogo se pode referir a vulces, a lava e magma nos seus relatos, tambm um bilogo descreve o que estuda referindo-se a clulas, membranas e genes, entre outros termos. De facto, na Biologia, saber o que uma clula permite enquadrar e ajudar a entender o que um gene. Os conhecimentos actuais dos processos biolgicos foram resultando de uma caminhada de descobertas, feita ao longo de vrios anos. Se percorrermos os marcos histricos compreenderemos melhor alguns conceitos importantes. A teoria celular, segundo a qual todos os seres vivos (sejam animais, vegetais ou, de outros grupos) so constitudos por clulas, atribuda a M. Schleiden (1938) e a T. Schwann (1939), mas muitas observaes e ideias sobre a sua estrutura so anteriores: em 1665, R. Hooke usa o termo clula em observaes da textura de cortia ao microscpio; em 1672, N. Grew apresenta ilustraes de material vegetal que revelam uma noo de estrutura celular e A. van Leeuwenhoek em 1674 (e durante vrios anos) realiza a descrio de muitos microorganismos e clulas com bastante pormenor. A organizao das clulas em tecidos parece ter sido reconhecida por vrios bilogos, como Wollf (1759) e, entre 182430, os trabalhos de outros bilogos apoiavam a existncia de um padro ou esquema geral para a constituio/forma das clulas (universalidade da estrutura celular) mas indicavam-na como independente ou individual nas suas formas e funes (autonomia celular morfolgica e fisiolgica). Em 1831, R. Brown descobria o ncleo, como parte importante das clulas, embora existam clulas que no o possuem. Um aspecto da organizao das clulas num corte transversal de caule de girassol est ilustrado na figura 1. Dado que todas as clulas de um organismo pluricelular provm de uma nica clula (designada clula-ovo ou zigoto) as tentativas de explicao da formao de novas clulas foram variando ao longo dos anos. Para Schleiden as novas clulas formavam-se dentro das antigas a partir do ncleo, ideia aceite entre 1840-60; apesar de na mesma altura (1840) H. von Mohl e K. Nageli, defenderem uma ideia diferente, a qual era a correcta: ocorria formao de novas clulas atravs dum processo de diviso. Em 1880, Flemming descrevia, com pormenor (apoiado em observaes suas e nas de outros investigadores), a diviso da clula somtica e designava-a por Mitose (Cd-rom Descobrir a clula). Numa dada espcie, entre sucessivas geraes, sabemos existir uma transmisso de instrues para as caractersticas anatmicas e funcionais - dos seres vivos. H uma herana. H transmisso. Temos a hereditariedade. Ela est associada a uma caracterstica dos seres vivos - a reproduo - que permite perpetuar uma espcie no tempo. Os pedigree so esquemas de cruzamentos e respectivas descendncias ao longo de diversas geraes e revelam as vias ou rotas da hereditariedade. Em 1865, comearam a ser desvendados os mecanismos da hereditariedade nos estudos realizados por Gregor J. Mendel, botnico e monge do Mosteiro de Brno. Ele fez cruzamentos experimentais entre ervilheiras-de-cheiro (Pisum sativum, L.) que diferiam entre si em caractersticas como a cor da flor ou a forma das sementes e registou os resultados que observou nas sucessivas geraes. Verificou que uma caracterstica podia ser determinada por dois factores, cada um proveniente de cada progenitor. Num par de factores, um era geralmente capaz de mascarar o outro - era dominante. O factor escondido ou mascarado - era recessivo (ele no desaparecia, e podia revelar-se em geraes posteriores, sempre que o outro factor no fosse de tipo dominante). Verificou que os factores antagnicos, por exemplo para o tamanho: gigante/ ano; ou para a pigmentao: vermelha/ branca; envolvidos num dado cruzamento eram distribudos na descendncia segundo regras matemticas simples. As Leis da Hereditariedade de Mendel, foram por ele apresentadas em 1865, mas apenas lhes foi dada a devida importncia por volta de 1900, altura em que trs botnicos (Correns, deVries e von Tschermark) as redescobriram e confirmaram (Redescoberta das Leis de Mendel). Nessa altura, por volta de 1903, eram descritas, por vrios investigadores (Flemming, Boveri, Sutton, e outros), as principais caractersticas da Meiose (Cd-rom Descobrir a clula).
Clula - (do grego kytos) no sentido biolgico um sistema em modificao contnua constituindo a unidade bsica dos seres vivos. Na sua organizao, distinguem-se, de modo simples, as que possuem um ncleo (clulas eucariticas) das que no o tm (clulas procariticas). Conforme o seu nmero os seres so unicelulares (1) ou pluricelulares (>1). Elas possuem formas distintas em diferentes tecidos. Clulas somticas - todo o conjunto das clulas dum ser vivo, exceptuando as clulas gamticas (ou gmetas).

Figura 1 - (topo)Campo de girassis.(baixo)Seco tranversal de caule de girassol, com distintos tipos de clulas. (Resoluo: 500x332x256).

Figura 2 - Aspectos de Microscpio (do grego mikros, pequeno, e skopein, ver, examinar). O primeiro ter sido construdo por Z. Janssen (1590). Mitose - Processo de diviso de 1 clula somtica, que origina 2 'clulas-filhas, regra geral, com a mesma constituio gentica da clula inicial.

Tipos de Reproduo (de modo simples): assexuada por oposio sexuada (a qual envolve gmetas). H plantas, como a batateira, que se podem reproduzir dos dois modos. Factores de Mendel - designam as entidades celulares com informao hereditria, e que se transmitiam entre sucessivas geraes filiais (F1, F2, F3,). Meiose - Processo de diviso limitado s clulas germinais para formao de clulas gamticas ou gmetas, com diferente constituio gentica; dado que a quantidade de material gentico reduzida a metade (Meioum; do grego, diminuir); e durante o processo h um mecanismo de troca e recombinao gentica (os pontos de quebra e troca de material gentico visualizveis so os quiasmas), permissor de variabilidade gentica entre os diversos gmetas resultantes. Gentica - termo usado em 1906, por Bateson, para o ramo da biologia dedicado s investigaes experimentais de hereditariedade.

Notas

A ponte entre duas geraes entre pais e filhos ou seja, entre a gerao P e a gerao F1 - era assim, feita por clulas: ou os gmetas formados por meiose (em seres com reproduo sexuada); ou clulas, formadas por mitose (em seres com reproduo assexuada, como certas algas). Sendo sabido dar-se entre geraes (de pais para filhos) uma transmisso de instrues para algumas caractersticas, o desafio era procurar que material possua essas instrues ou informaes! As pistas sobre esse material indicavam-no dever ser capaz de comandar o funcionamento celular e de, pelo menos, fazer rplicas (ou cpias) de si prprio que fossem separveis, de modo a existirem em toda e qualquer clula dum ser vivo, que sofre divises (por mitose ou por meiose). Era necessrio espreitar para dentro das clulas e a ajuda foi dupla: o uso de microscpios (cada vez mais potentes, figura 2) ampliavam o que vista desarmada no se via, e o uso de vrias solues de corantes (tinturas) apropriadas (figura 3 a) para certos constituintes da clula, originava contrastes teis na distino dos constituintes (entre vrias tcnicas de colorao, foi desenvolvida em 1924, por Feulgen, a tcnica chamada Reaco de Feulgen importante porque permitia corar apenas o ncleo das clulas, que assim se destacava das zonas incolores da clula) (Figura 3 b). Os bilogos visualizavam o interior das clulas e viram nos seus ncleos umas estruturas longas e finas, em forma de bastonete (figura 4) a que deram o nome de cromossomas. H geralmente duas cpias de cada tipo numa clula, excepto nos gmetas que tinham uma s cpia. O seu nmero era o mesmo em diferentes clulas somticas dum ser vivo pluricelular (nmero diplide caracterstico; por exemplo 28 cromossomas, 2n=28, agrupados em 14 pares de cromossomas homlogos), excepto nos gmetas que tinham metade (nmero haplide; n=14, com 1 cromossoma de cada par). A fuso de dois gmetas (cada um com metade do nmero de cromossomas) originava o zigoto ou clula-ovo (em que o nmero de cromossomas caracterstico era restabelecido). Ao relacionar os factores hereditrios de Mendel com estes, e outros aspectos dos cromossomas, tornava-se bvio que esses factores podiam ser os cromossomas ou estar neles localizados. A demonstrao experimental de que o material hereditrio existia nos cromossomas foi conseguida por Morgan e seus colaboradores (Teoria Cromossmica da Hereditariedade). Sabido o local das instrues hereditrias ou factores de Mendel, faltava saber qual a constituio destas instrues: de que substncia eram feitas? A resposta surgia com a descoberta, feita em 1869, por Miescher (bioqumico e mdico) de uma substncia complexa no ncleo de algumas clulas de sangue. Semelhante substncia era depois encontrada em clulas diferentes e em seres vivos distintos. Pouco a pouco, os estudos sobre os constituintes qumicos da clula iam evoluindo e, a substncia que tinha as instrues ou informaes hereditrias foi identificada: era uma substncia cida do ncleo, incluvel nos cidos nucleicos e identificada como cido desoxirribonucleico (ADN). Outro cido nucleico com funes celulares importantes o cido ribonucleico (ARN). A procura de pistas sobre o ADN prosseguia. O estudo da sua estrutura evoluiu com os trabalhos de Rosalind Franklin, fsica, que sugeriu apoiada nos seus resultados, um aspecto helicoidal para o ADN (1952). No ano seguinte, J. Watson e F. Crick descrevem a estrutura correcta do ADN: uma dupla hlice (Figura 5). Esta estrutura pode ser mais facilmente entendida se a imaginarmos assim: ela uma escada torcida para dar uma espiral. Cada degrau da escada feito de 2 blocos diferentes que emparelham (num total de 4 blocos, que na realidade so as bases A, T, C, G). Os lados que so o suporte (ou viga) so na realidade, unidades de aucar (desoxirribose) e de fosfato alternadas. a sequncia de degraus diferentes numa escada (por exemplo para quatro degraus: \ A-T, A-T, C-G, A-T\ou \C-G, A-T, A-T, C-G\) a que, na realidade correspondem diferentes informaes genticas. Um gene assim, na realidade, uma dada sequncia do ADN, com informao para uma dada caracterstica, ou funo. Diferentes sequncias tm diferentes informaes genticas! Sempre que uma clula se vai dividir esta informao geralmente duplicada, para que depois exista em cada clula a mesma informao - o processo de replicao; mais facilmente entendido se o imaginarmos assim: Quando o ADN vai ser duplicado a escada em espiral destorcida, para ficar com uma posio plana e, s ento, e de modo gradual, cada degrau da escada abre pelo meio (e os dois blocos desemparelham), enquanto os lados da escada se afastam.

Figura 3 a - Os estudos bioqumicos, realizam-se em laboratrios.

Constituintes qumicos celulares: inorgnicos (gua e sais minerais) e orgnicos (protenas, hidratos de carbono, cidos ncleicos, lpidos, etc.).

Figura 3 b - Seco transversal de uma zona de Pteridium, (gnero de planta pertencente ao grupo dos Fetos), mostrando diversos contrastes e coloraes (Resol. 500x321x256). Cromossomas - descobertos por volta de 1876, sendo as estrutruras das clulas que tm informao gentica. So de tipos diferentes, com forma e tamanho variados.

Figura 4 - Aspecto de observaes de cromossomas (tcnicas de colorao diferentes)ao microscpio. (Ampliaes variadas, permissoras de vizualizao da estrutura bsica dos cromosomas).

ADN - macromolcula que funciona como 'depsito' de informao gentica. Localiza-se fundamentalmente no ncleo (cromossomas) mas tambm existe em pequenas quantidades em mitocndrias e em cloroplastos, que existem no citoplasma.

Figura 5 - Aspecto esquemtico da estrutura em dupla hlice da cadeia de ADN, mostrando em pormenor as mleculas de aucar (desoxirribose) e fosfato. As 4 bases esto representadas por diferentes cores e so A, T, C , G (adenina, timina, citosina e guanina) cuja regra de emparelhamento : A-T e C-G.

A maioria dos genes uma sequncia de ADN destinada a codificar somente uma protena, mas nem sempre assim e, nalguns casos, uma dada sequncia pode codificar mais do que uma protena. portanto uma simplificao a frase: um gene, uma protena!

Notas

genes

Entretanto, novos blocos surgem para emparelhar com estes, formando degraus encadeados ao longo de vigas novas, para que surjam duas escadas novas. Feitas a partir do molde da escada inicial, so dela cpias fiis, excepto quando h erros. Esses erros que alteram e mudam a sequncia do ADN: so mutaes, que podem ser benficas ou prejudiciais, designando-se mutantes as estruturas biolgicas (gene, clula, indivduo) portadoras duma mutao.

ADN
As mutaes so classificadas segundo vrios critrios: tamanho; origem, grandeza ou magnitude do efeito fenotpico e do tipo celular afectado. Quanto a este ltimo distinguem-se entre as que so mutaes somticas (do-se e afectam clulas do corpo ou somticas) e as mutaes gamticas, que se do e afectam as clulas sexuais ou gmetas, produzindo neste caso alteraes hereditrias.

hereditariedade

A descoberta da estrutura do ADN (figura 6) por J. Watson e F. Crick, em 1953, foi muito importante para a Biologia e til, na Medicina e noutras reas, tendo aos seus autores sido atribudo um Prmio Nobel em 1962. Esta descoberta foi complementada pelos estudos de Sanger em protenas. Durante algum tempo pensou-se que os aminocidos se enfileiravam desordenadamente nas cadeias de protena, ideia que Sanger mostrou ser errada, dado que a cada protena correspondia uma dada e nica sequncia. Depois, Crick e colegas seus, repararam que devia existir uma correspondncia qualquer entre a sequncia das bases do ADN (A, T, C, G ) e a sequncia de aminocidos duma protena. Para decifrar estas mensagens entre cidos ncleicos e protenas, foi desenvolvido, uma vez mais, baseado em resultados experimentais, um cdigo: lido em grupos de 3 bases no ADN -codes- era transcrito (dado que usa ainda as bases A, T, C, G) em 3 bases nos ARN: mensageiro ARN-m e de transferncia- ARN-t, tripletos neste caso designados -anticodes- para depois ser traduzido (dado haver passagem da linguagem de bases noutra) em aminocidos. Este o cdigo gentico. Um resumo do rumo ou caminho da informao gentica , ento: replicao ADN transcrio ARN traduo Protena, tendo este ordenamento (feito por Crick) ficado conhecido por: Dogma central da biologia molecular. Nessas passagens da informao gentica esto envolvidas vrias protenas funcionais: as enzimas, que coordenam as funes vitais. O dinamismo, movimento, organizao e complexidade das clulas so, por vezes, descritos com terminologia engraada, como: ballet macromolecular, maquinaria e orquestra - a qual nos deve ajudar a imaginar o funcionamento das clulas como filmes com movimento, em vez de fotografias. Tambm a ideia de que os genes esto alinhados nos cromossomas como se fossem prolas num colar no deve ser generalizada, pois h genes que podem no se manter fixos e, portanto, terem a alcunha de genes saltitantes e o nome de transposes. Esta descoberta foi feita em milho pela geneticista Barbara McClintock na dcada de 1940 (e a sua importncia reconhecida, 43 anos depois, pelo Prmio Nobel recebido em 1983). Ela ficara fascinada com o aspecto de maarocas de milho com gros de diversas cores e tonalidades e estudou a hiptese de a cor dada por um gene poder ou no ser perturbada por outro gene, que saltava para junto dele e o inactivava. Este aspecto multicolorido das maarocas de milho (figura 7) interessou tambm, em 1588, Jacob Theodor, (de Bergzabern -aldeia a Sul de Estrasburgo), que descreveu com detalhe estes fentipos multicolores! Tambm h transposes em moscas-da-fruta (Drosophila) e em bactrias. Sabemos que as centenas ou milhares de genes e seus produtos - ARN (cido ribonucleico) e protenas - funcionam de forma ordenada num organismo vivo de modo a manter em funcionamento as clulas. O genoma duma espcie corresponde ao conjunto de toda esta informao. obteno do conhecimento de sequncias genticas correspondentes a essa informao, por meio de vrias tcnicas, chama-se sequenciamento do genoma. A figura 8 mostra uma imagem obtida numa anlise ao ADN, com distino das suas diferentes bases. Entre alguns dos genomas j sequenciados contam-se, entre os procaritas, algumas dezenas de espcies de bactrias e incluem para os eucaritas, por exemplo: S. cerevisiae; C. elegans; A. thaliana e muito recentemente o do Homem -Homo sapiens!
Para saber mais:
! sobre genes em plantas e outros seres vivos - www.tigr.org ! sobre biologia molecular www.ergito.com (inscrio para acesso gratuito) ! sobre a importncia de estudar o que no se v, mas que existe, e que influencia o que se v, sobretudo em aspectos ligados ao mundo dos micrbios e Medicina, ver vdeo (ingls: 'When Worlds Collide: Micro Versus Macro') em: www.hhmi.org/biointeractive/museum/exhibit99/video2.html

Protenas - so formadas por cadeias de unidades qumicas designadas Aminocidos (AA), cujo nmero total de 20. A sequncia destes AA caracterstica de cada protena. A primeira sequncia proteica conhecida foi a da insulina. Se a informao gentica est nos cromossomas, a sntese das protenas d-se no citoplasma, mais concretamente numas pequenas estruturas chamadas ribossomas.

Figura 6 - Modelo da macromolcula do cido desoxirribonucleico: aspecto de estrutura molecular e conformao espacial. Enzimas - so protenas essenciais no metabolismo celular, designadas como 'catalizadores biolgicos'.

Figura 7 - Aspecto de maarocas de milho com gros de mltiplas cores na zona esquerda da figura. Os genomas de todos os seres vivos consistem de ADN. Mas como excepo regra: os vrus tm genomas que consistem de ADN ou de ARN.

Figura 8 - Aspecto de arranjo de ADN, (em ingls: DNA array) com as diversas bases coloridas, fazendo lembrar missangas. Mais dados em: www.ornl.gov/hgmis/publicat/tko/tko.pdf

Fontes consultadas CD-Rom Descobrir a clula, Porto Editora Multimedia (http://www.portoeditora.pt); De Robertis y De Robertis(h) (1981). Biologia Celular e Molecular.(10 ed.). Ed. El Ateneo, Barcelona. Enciclopdia Visual da Cincia Vida, 16, Ed. Verbo. Frasto da Silva, J.J.R. (2001). A evoluo do uso de elementos qumicos por sistemas biolgicos. Qumica 80: 12-26. Gura, T. (2000). Reaping the Plant Gene Harvest. Science 287: 412-4. (http://www.sciencemag.org) Saedler, H.; Starlinger(1996). Preface, i-iv, in Transposable Elements, Eds Saedler, H.; Gierl, A.; Springer-Verlag, Berlin-Heidelberg. Stansfield, W. D.(1985). Gentica. (2 ed.), Schaum series, Ed. McGraw-Hill, Inc.

Imagens: www.freefoto.com http://biodidac.bio.uottawa.ca www.webshots.com www.loats.com Poema disponvel na internet, juntamente com outros poemas em: www.isr.ist.utl.pt/~cfb/VdS/especial.gedeao.txt

Escolas Participantes
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Escola Profissional de Desenvolvimento Rural de Serpa Escola Profissional do Alto Minho Interior Escola Profissional Agrcola do Rodo Rgua Escola de Viticultura e Enologia da Bairrada Anadia Escola Profissional Agrcola de Torres Vedras Runa

Contedo Cientfico Dr. Maria Alexandra Viegas Abreu Lima - Departamento de Proteco de Plantas EAN-INIA Concepo Grfica Daniela Parchow Figueiredo - Centro de Edio - ISQ