Mtodos Instrumentais de Anlises Qumicas Cromatografia Clssica

Amanda Manzato Carolini Matos Eduardo Margato Rafael Alexandre

Introduo A cromatografia um mtodo empregado de forma ampla e que permite a separao, identificao e determinao de componentes qumicos em misturas complexas. Nenhum outro mtodo de separao to poderoso e de aplicao to generalizada como a cromatografia.7 O restante deste captulo dedicado aos princpios gerais que se aplicam a todos os tipos de cromatografia. O termo cromatografia difcil de ser definido rigorosamente porque o nome tem sido aplicado a diversos sistemas e tcnicas. Todos esses mtodos, contudo, apresentam em comum o uso de uma fase estacionria e de uma fase mvel. Os componentes de uma mistura so transportados atravs da fase estacionria pelo fluxo da fase mvel e as separaes ocorrem com base nas diferenas de velocidade de migrao entre os componentes da fase mvel. Cromatografia planar A cromatografia em papel (CP) uma tcnica de partio lquidolquido, estando um deles fixado a um suporte slido. Baseia-se na diferena de solubilidade das substncias em questo entre duas fases imiscveis, sendo geralmente a gua um dos lquidos. O solvente saturado em gua e a partio se d devido presena de gua em celulose (papel de filtro). Este mtodo, embora menos eficiente que a CCD, muito til para a separao de compostos polares, sendo largamente usado em bioqumica. . A fase mvel migra por capilaridade e os componentes movem-se a diferentes velocidades. Tcnica: uma mancha de amostra depositada perto da base de um pedao de papel de filtro e o papel colocado numa cmara de desenvolvimento . Nesta tcnica os compostos hidrossolveis so separados Exemplificando: a mistura aplicada no papel e mergulhada na mistura das fases lquida e estacionria. A tira de papel de suporte colocada em um cuba contendo o eluente. Esta fase mvel (solvente) sobe por capilaridade e arrasta a substncia pela qual tem mais afinidade, separando-a das substncias com maior afinidade pela fase estacionria. Como a maioria das substncias separadas so incolores, utiliza-se um revelador. As manchas podem ser reveladas por meio de luz UV, vapores de iodo, solues de cloreto frrico e tiocianoferrato de potssio, fluorescncias, radioatividade, etc. Cromatografia lquida clssica uma tcnica muito utilizada para isolamento de produtos naturais e purificao de produtos de reaes qumicas. As fases estacionrias mais utilizadas so slica e alumina, entretanto estes adsorventes podem servir simplesmente como suporte para uma fase estacionria lquida. Fases estacionrias slidas levam separao por adsoro e fases estacionrias lquidas por partio. Suportes quimicamente modificados tambm tm sido usados, sendo o processo de separao misto neste caso. Esses suportes so acondicionados em tubos cilndricos geralmente de vidro, de dimetros variados, os quais possuem uma torneira em sua extremidade inferior.

Objetivo Este relatrio tem como objetivo apresentar os princpios da cromatografia clssica, determinando a presena de analtos.

Procedimento Cromatografia em papel Em uma cuba, colocou-se aproximadamente 1 cm do eluente (fase mvel (lquido). A sua funo mover-se atravs da fase estacionria (papel) arrastando consigo os diversos componentes da mistura a analisar), preparado anteriormente, tampou-se e deixo a cuba climatizar por cerca de 15 minutos. Fez-se um trao, a lpis, a aproximadamente 2 cm da base e com o auxlio de capilares, aplicaram-se (5 vezes), em pontos diferentes do trao, a soluo contendo a mistura de ctions, e cada um dos ons de referencia, (Mn, Co, Ni, Zn e a mistura de todos eles). A mancha deve ter dimetro aproximado de 5 mm. Coloca-se rapidamente o papel na cuba, de maneira que o mesmo no fique encostado nas paredes da cuba. Quando a frente do solvente chega a cerca de 2 cm da extremidade superior remove-se o papel, marca-se a posio do solvente e deixe secar no ar. Expe-se o papel aos vapores de um frasco de amonaco concentrado, para neutralizar o cido. Reveo: Com um vaporizador, borrifa-se o papel com um revelador preparado anteriormente e remove-se o excesso do mesmo, lavando o papel por imerso em cido actico diludo. Assim sendo , os ons ficam visveis como manchas coloridas, onde o ons Ni adquire cor azul-cinzento, o ons Mn azul violceo, o on Co, Marrom e o on Zn , vermelho. Eluente: Misture 43,5 ml de acetona com 4 ml de HCl conc. ( com cuidado, na capela) e 2,5 ml de gua destilada. Revelador: Dissolva 0,7g de pentacianoamino ferrato de sdio em 20 ml de gua destilada. Junte a soluo resultante em uma soluo de 0,25 g de cido rubinico em 10 ml de etanol. Agite a mistura por 15 minutos e filtre. A Soluo filtrada est pronto para uso. Cromatografia em coluna de corantes lipfilos Coloca-se na coluna cromatogrfica ( ou bureta previamente preparada), uma suspenso homognea de cerca de 10g de slica gel com 10 ml de hexano, preparada em um bquer. Espera-se at que as partculas de slica gel sedimentem e o nvel do lquido esteja a 0,5 cm do adsorvente, fecha-se nesse instante a torneira da coluna. Coloca-se cuidadosamente 0,5 ml de mistura de corantes lipfilos ( azul de indofenol, sudan G, 4 dimetilaminoazo-benzeno) na superfcie do solvente ( sem tocar na parede). Abri-se ento a torneira e deixa-se que a mistura penetre no adsorvente. Adiciona-se aos poucos o solvente, abrindo-se a torneira que deve gotejar lentamente. necessrio que o nvel de solvente seja sempre superior 0,5 cm da resina. Deve-se coletar o eluato em tubo de ensaio, quando o primeiro corante estiver prximo da extremidade inferior da coluna, deve-se coletar o eluato em tubo de ensaio. Repetir para cada corante.

Resultados / Discusso O procedimento foi bem sucedido, pois foi possvel a observao do experimento em suas diferentes etapas, possibilitando as anlises necessrias e aplanando os conhecimentos a cerca das tcnicas e teorias utilizadas, assim, atingindo o objetivo da aula prtica. Devemos levar em conta alguma consideraes: quanto mais rapido o gotejar menor ser o numero de pratos teoricos, dificultando assim a seprao , evidente pela n separao das cores.

Anexos

Figura 1 Cromatografia em papel

Figura 21 Papel cromatogrfico aps revelao

Figura 3 Ilustrao de uma coluna cromatogrfica

Figura 4 Alunos fazendo a separao

Figura 5 Corantes separados por cromatografia

Bibliografia

Skoog, D. A., West, D. M., Holler, F. J., & Crouch, S. R. (2010). Fundamentos de Qumica Analtica. Cengage Learning.

Documentos Digitais http://t1.gstatic.com/images? q=tbn:ANd9GcTgbxilnUg_2EZ4unk_6xRKjUysU5lggq8pZUT53q05IL56IJzjIjsOLm0