Medios de cultivo

Segn su estado fsico: Lquidos, solidos o semislidos. Segn los nutrientes: Definidos: medios de los cuales conocemos su composicin qumica exacta. Se obtienen de extractos puros. Complejos: medios de los que no conocemos su composicin qumica exacta ya que se obtienen de extractos naturales.

Segn el tipo de cultivo: GENERALES: Cultivos para el crecimiento de una amplia variedad de m.o.. No son selectivos, pero pueden estar enriquecidos con sangre,suero hemoglobina

Agar infusin cerebro-corazn (BHI) Agar sangre (AS) Agar chocolate (si aadimos antibiticos obtenemos el medio selectivo de Thayer Martin)

Medio muy nutritivo con extractos de buey, glucosa y peptona. Sirve para el cultivo de bacterias aerobias y anaerobias exigentes como estreptococos, neumococos y otros de difcil desarrollo.

Medio en el que crecen la mayora de los m.o. Es un medio compuesto por extractos de cerebro, corazn y el 5-10% de sangre(cordero,caballo,conejo). Permite visualizar reacciones de hemolisis.
Este medio utiliza la misma base que el gar Sangre. Antiguamente se aadan los hematies a la base fundida y se elevaba la temperatura (65-80) para lisarlos parcialmente y que soltasen al medio sus componentes. Esto daba al medio su habitual color pardo chocolate.El Agar chocolate es un medio destinado principalmente al aislamiento de gonococos y meningococos, pero en el que pueden crecer muchos otros microorganismos exigentes.La siembra de lquidos cefalorraqudeos, pus, resiembra de hemocultivos, etc., es favorable en este medio, pero est particularmente indicado para aislamiento de las Neisserias patgenas y de los Haemophilus.

Agar Schaedler

Schaedler + 5% sangre de cordero. Este medio reductor est particularmente adaptado al cultivo de los grmenes anaerobios.La presencia de factores de crecimiento tales como el extracto de levadura, la hemina y la vitamina K, as como la adicin de la sangre de cordero, permiten el crecimiento de especies exigentes

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SELECTIVOS: Permite el crecimiento de unos m.o. mientras suprime el de otros y asi aislar especies particulares a partir de mezclas complejas.

Agar Gardnerella Legionella (BCYE) Lowestein-Jensen Sabouraud Glucosa Agar Thayer-Martin

Agar nutritivo con sangre humana y antibiticos (ac. Nalidixico y colistina). Permite el crecimiento de Gardnerella vaginalis inhibiendo el de la microflora genital.Se visualiza reacciones de hemlisis. Permite el aislamiento de Legionella spp a partir de muestras respiratorias. El tipo mas usado es el BCYE que contiene suplementos y antimicrobianos contra flora acompaante. Medios destinados al aislamiento, cultivo y diferenciacin de micobacterias. Contiene glicerol, sales, patata y huevo que solidifica el medio. Tambin contiene verde de malaquita para inhibir el crecimiento de m.o. acompaantes. Medio enriquecido para el crecimiento de hongos saprofitos y patgenos. Contiene peptona y dextrosa y un pH ligeramente acido (5.6). Si aadimos cloranfenicol se inhibe el crecimiento bacteriano y con cicloheximida el de hongos saprofitos. Medio selectivo para el aislamiento de neisserias patgenas. Las dificultades que presenta la recuperacin de N. gonorrhoeae y N. meningitidis de los materiales clnicos, se deben a las exigencias nutricionales de estos microorganismos, y en los materiales de origen genital, oral o anal, al desarrollo invasor de la abundante flora saprfita. El medio de Thayer-Martin permite el correcto aislamiento y recuperacin de las neisserias patgenas dentro de las 24 h, con una ausencia casi total de contaminantes. El medio de cultivo se prepara a partir del Agar Base GC, con el agregado de hemoglobina, un suplemento de enriquecimiento (Britalex) y una mezcla antimicrobiana (VCNT: Vancomicina, colistina, nistatina y trimetoprima).

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SELECTIVO-DIFERENCIALES: ponen de manifiesto caractersticas distintivas de las colonias. CARACTERISTICAS Este medio es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rpido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.La eosina y el azul de metileno inhibe el crecimiento de Gram positivos.La fermentacin de la lactosa precipita ambos colorantes cuando acidifican. Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo. ASPECTO DE LAS COLONIAS - E.coli: oscuras con brillo metlico verdoso. - Klebsiella, Enterobacter y Serratia aparecen moradas - Salmonella, Yersinia y Shigella transparentes.

MEDIO Agar Lebine o EMB

Agar McConkey

En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.Los que si aparecen rojas o rosas. Resultados Colonias Microorganismos Escherichia coli Rojas con halo turbio Klebsiella Rosadas mucosas Salmonella Incoloras, transparentes Shigella Incoloras, transparentes Proteus Incoloras, transparentes Yersinia Incoloras

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MEDIO Agar Hektoen entrico (HE)

Agar bismuto-sulfito (BS)

CARACTERISTICAS Aislamiento selectivo de Salmonella y Shigella spp., a partir de heces y alimentos. El medio de cultivo contiene sales biliares que inhiben el desarrollo de la flora acompaante, y un sistema indicadore: azul de bromotimol y fucsina cida como indicadores de la fermentacin de carbohidratos.(vira a amarillo a pH acido) El desarrollo de Shigella spp. es adecuado debido a que la inhibicin de estos microorganismos por las sales biliares est disminuida por la adicin de cantidades relativamente elevadas de peptona y carbohidratos. El medio de cultivo, permite una buena diferenciacin de las colonias e inhibe el desarrollo de algunos coliformes y otras bacterias no fermentadoras de lactosa, facilitando as la identificacin de Salmonella y Shigella a partir de la muestra. Es un medio selectivo utilizado para el aislamiento de Salmonella typhi y otros bacilos entricos. El sulfato ferroso acta como indicador en la produccin de sulfuro de hidrgeno que se manifiesta en el centro de la colonia por un precipitado negro y un halo negro grisceo con brillo metlico por la reduccin de los iones bismuto en presencia del sulfuro de hidrgeno. El sulfito de bismuto y el verde brillante inhiben considerablemente el crecimiento de bacterias contaminantes.

ASPECTO DE LAS COLONIAS Microorganismos Colonias Verdes, sin centro negro Verde-azuladas, con centro negro Pequeas, transparentes Rosa salmn rodeadas en algunas ocasiones por un precipitado biliar Rosa salmn rodeadas en algunas ocasiones por un precipitado biliar

Shigella Salmonella Proteus Escherichia coli coliformes Klebsiella

Las colonias aparecen en forma de ojo de pez: centro negro por el SH2 con el borde claro y halo metlico.

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MEDIO Agar telurito

CARACTERISTICAS El telurito potsico inhibe las bacterias gram negativas y diversas gram positivas y permite detectar la reduccin de telurito, que se encuentra por lo general en las corinebacterias

ASPECTO DE LAS COLONIAS Las colonias aparecen de color gris oscuro-negro.

DE ENRIQUECIMIENTO: Se aaden aditivos para favorecer el crecimiento de algunos m.o. y neutralizantes para inhibir el de otros.

Medio Hajna para Gram (-)

Es un medio de transporte para el aislamiento de Salmonella y Shigella.

Caldo de Tetrationato

Medio de cultivo utilizado para el enriquecimiento selectivo de Salmonella spp

Caldo de peptona alcalino

Medio de enriquecimiento utilizado para la bsqueda de Vibrio cholerae

El Manitol y la Dextrosa son los carbohidratos fermentables aportan carbono y energa. El Manitol est en concentracin ms alta lo que favorece el crecimiento de las especies fermentadoras de manitol como Salmonella y Shigella, y limita el crecimiento de Proteus y otras bacterias fermentadoras de dextrosa. El Desoxicolato sdico y el citrato sdico inhiben el crecimiento de organismos Gram-positivos. La selectividad est dada por la presencia de tiosulfato de sodio, tetrationato (generado en el medio por el agregado de la solucin iodoiodurada) y sales biliares, los cuales permiten el desarrollo de bacterias que contienen la enzima tetrationato reductasa, como ser la Salmonella spp. inhibiendo Gram (+) y coliformes. Vibrio cholerae crece normalmente en medios alcalinos en los cuales no crece el resto de bacterias.