EQUIPOS Y MATERIALES UTILIZADOS EN EL LABORATORIO DE PARASITLOGIA

Los equipos bsicos para un Laboratorio de parasitologa son los siguientes: Microscopio compuesto binocular Centrfuga Elctrica Bao Maria Balanzas de precisin y analtica Incubadora Esterilizador elctrica a calor seco Autoclave Espectrofotmetro Rotador elctrica Potencimetro Refrigeradora, Congeladoras, etc. 5. Instrumentos: Tubos de ensayo diferentes medidas Lminas porta objetos 76x 26 mm Laminillas cubre objetos 22 x 22 mm Matraces (matraz erlenmeyer y matraz de fondo plano) Placas Petri Beakers Frascos goteros (mbar y blanco) Probetas para diferentes capacidades (10, 50, 100, 500, 1000 ml.) Pipetas volumtricas diferentes tamaos (1, 2, 3, 5, 10 ml.). Pipetas automticas de rangos regulables. Cepillos

 Asa de siembra Morteros Esptulas Friotas Mechero Bunsen y Mechero de alcohol Lminas excavadas Pipetas de Pasteur, etc.

DESCRIPCIN TCNICA DE EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO

1. MICROSCOPIO.- El microscopio es un instrumento ptico de gran aumento que sirve para observar objetos muy pequeos, se compone de dos lentes convergentes llamados objetivos y oculares. El objetivo es un lente convergente de pequea distancia focal, la imagen que se forma es real, invertida y ms grande que el objetivo enfocado; esta imagen queda colocada delante del lente ocular y va producir una imagen de mayor aumento que es derecho con respecto a la imagen que dio el objetivo pero invertido con respecto al objeto enfocado. a). Partes del Microscopio.- El microscopio esta compuesto de dos partes: 1. Parte Mecnica: Pie o soporte del Microscopio Brazo Asa Platina Tubo ocular Revolver Tornillo Micromtrico Tornillo Micromtrico Subplatina

 Espejo o Luz incorporado 2. Parte ptica Los lentes oculares Los lentes objetivos, secos y de inmersin, La Resolucin El condensador y diafragma b). Manejo del Microscopio: Se recomienda seguir los siguientes pasos: Colocar la lmina sobre la platina, enfocar con el objetivo de menor aumento utilizando el macro y el micromtrico, adems acomodando el condensador para obtener iluminacin adecuada. Cambiar a los objetivos de mayor aumento segn sea necesario enfocando adecuadamente. Si se utiliza el objetivo de inmersin (100x), echar una gota de aceite de inmersin sobre la lmina seca y observar. Despus de acabado el trabajo limpiar con papel para lentes los objetivos y oculares sucios. Finalmente tapar con una funda el aparato.

2. CENTRIFUGA.- Es un instrumento que utiliza la fuerza centrfuga para lograr separar estratos (capas) de diferente densidad, ejemplo: suero de glbulos rojos en la sangre. Existen de diversos modelos, las ms usadas son, las clsicas de mesa para 4 a 8 tubos, los de pie o de mayor capacidad que pueden ser de 36 tubos, que emiten mayores de 1000 RPM hasta 6,000 RPM. los de microhematocrito para colocar tubos capilares, son de cabezal plana, que tienen capacidad mayor de 10,000 rpm. y los de pie refrigeradas para centrifugar bolsas de sangre con alta velocidad de acuerdo a la necesidad, Tambin existen centrifugadoras de uso industrial para mayores capacidades.

Descripcin de la Centrfuga clsica.- Consta de las siguientes partes: 1. Cabezal.- Es un sistema de brazo metlico simtricos colocados horizontalmente sobre el eje del instrumento y sostiene en sus extremos los porta tubos. 2. Motor.- Se halla en la base del instrumento, moviliza un eje de tal forma que el cabezal gira horizontalmente a una determinada velocidad y tiempo que son graduados de acuerdo a la necesidad.

3. Envoltura y tapa.- Todo el aparato se halla cubierto por una envoltura de material resistente, generalmente metal, solo existe una abertura superior por donde se coloca los tubos, que se cierra con una tapa hermtica antes de prender el motor.

Manejo de la Centrfuga.- Se recomienda lo siguiente: 1. Tomar por pares los tubos que se van a colocar, con sus respectivas portas tubos y equipararlos, de tal forma que ambos tubos pesen o midan igual. Esto es importante para evitar ruptura de tubos y desperfecto del aparato. 2. Colocar los pares de tubos contrapesados frente a frente en el cabezal de la centrfuga. 3. Cerrar bien la tapa del aparato. 4. Marcar el tiempo que se desea centrifugar y la velocidad requerida.

3. BAO MARIA.- Es un aparato de forma cuadrangular con tapa, que contiene agua a determinada temperatura standard, graduado por un termostato y controlado por un termmetro, pudiendo ser regulados a partir de 37C en horas, das y semanas a una temperatura standard, tambin se puede regular a temperaturas mayores de acuerdo a la necesidad del Laboratorio y la complejidad. Manejo del bao Mara.- Su funcionamiento es la siguiente: 1. Echar agua destilada en cantidad necesaria y prender el aparato. 2. Graduar a temperatura de 37C. o temperatura deseada y sumergir en el agua una gradilla porta tubos inoxidable. 3. Con el termmetro o en indicador del equipo, verificar que el agua alcance la temperatura deseada. 4. Una vez encontrado la temperatura deseada, recin colocar los tubos en la gradilla que se halla dentro del agua y empezar a contabilizar el tiempo requerido.

4. ESTUFA O INCUBADORA.- Es un aparato elctrico que produce calor seco, tiene forma cuadrangular encerrado un espacio donde el ambiente alcanza determinada temperatura, regulado por un termostato y controlado por un termmetro, alcanza temperaturas Standard requeridas de acuerdo a la necesidad, ejemplo 37C., tambin puede regularse a temperaturas mayores dependiendo de la necesidad del servicio y la complejidad del Laboratorio.

MANEJO: 1. Prender el instrumento y graduar la temperatura deseada 2. Verificar con el termmetro que se haya alcanzado la temperatura indicada. 3. Colocar en el interior del aparato el material que se desea incubar y marcar el tiempo necesario.

5. ESTERILIZADOR DE CALOR SECO (HORNO).- Son aparatos muy semejantes a las estufas pero alcanzan temperaturas hasta de 240C.. Se utiliza para esterilizar o secar material de vidrio, no sirve para lquidos y material de jefe a altas temperaturas, sino es necesario regular las temperaturas de acuerdo a la necesidad del Laboratorio clnico. Manejo.- Considerar los siguientes: 1. Para esterilizar los materiales de cristalera que tiene resistencia a altas temperaturas como los pirex, deben ser seleccionados, para graduar la temperatura y el tiempo necesario. 2. Los materiales que no resisten altas temperaturas deben ser seleccionados aparte, para regular la temperatura deseada y el tiempo. 3. Los materiales que resisten bajas temperaturas, como los guantes quirrgicos y material de Jebe, tambin requiere las temperaturas adecuadas y el tiempo requerida.

6. AUTOCLAVE.- Es un aparato que produce calor hmedo en la forma de vapor a presin para lograr esterilizar. Los ms utilizados tienen un cuerpo cilndrico con tapa hermtica, presentando en su exterior una escala de temperatura y presin (libras/pulg.2), adems una vlvula de evacuacin y otra de seguridad. MANEJO.- Seguir las instrucciones del fabricante. Usualmente se realiza los siguientes pasos. 1. Llenar con agua destilada hasta la marca indicada y colocar los objetos que se quiere esterilizar. 2. Colocar la tapa cerrando hermticamente, verificar que funcione la vlvula de seguridad y prender el aparato colocando el interruptor en el nivel ms alto. 3. Dejar abierta la vlvula de evacuacin para que al calentar el aparato se expulse todo el aire existente en la cmara de esterilizacin, entonces recin cerrarla. Esto es importante por que de quedar aire a determinada presin, la temperatura ser inferior.

4. Esperar que la escala de temperatura y presin marque 121c y 15 libras/pulg.2, entonces bajar el interruptor a nivel medio y esperar 20 a 30 minutos para despus apagar el aparato. 5. Dejar que enfre bien, luego abrir la vlvula de evacuacin y despus recin la tapa.

7. ESPECTROFOTOMETRO.- El espectrofotmetro es un aparato que tiene la capacidad de medir la concentracin de una solucin coloreada. Se fundamenta en el hecho de que la luz blanca (compuesta por todos los colores del espectro visible) al atravesar una solucin transparente o no coloreada, ejemplo agua, es absorbida en muy pequea cantidad, pero casi toda es transmitida a travs del lquido. Si esta Luz incide sobre una clula fotoelctrica conectada a un instrumento registrador puede medirse la cantidad de luz transmitida en porcentaje, es decir, casi 100( y la absorbancia ser casi 0 (. Las partes de este aparato son esencialmente semejante al fotmetro de filtros, solo que a diferencia de ste utiliza un espectroscopio, bajo la forma de una rejilla de difraccin o un prisma para obtener luz monocroma de una sola longitud de honda. El medidor presenta una doble escala paralela, transmitanca de 0 100( y absorbancia de 0 a 2. En la actualidad son los aparatos ms utilizados por su exactitud y versatilidad como los Spectronic 20D Milton Roy digital, y los equipos de ltima generacin y ltima tecnologa de mayor precisin y exactitud los Spectronic 20 GENISIS. PARTES DEL ESPECTROFOTMETRO.- Consiste en los siguientes partes: 1. Fuente de Luz: Lmpara de Tungsteno. 2. Los filtros: Son cristales coloreados intercambiables que seleccione el Rango de longitud de onda de 340 a 950 nm. y los equipos de ltima generacin tienen un rango de longitud de onda de 340 a 1,100 nm 3. Cubeta: Es el tubo donde se coloca la solucin coloreada motivo del examen. 4. Detectores Fotosensibles: son sistemas que convierten las ondas luminosas. 5. Medidor: Es el sistema que registra la energa elctrica, para realizar las lecturas en escalas. MANEJO DEL ESPECTROFOTOMETRO.- En cada caso se debe seguir las instrucciones del fabricante, usualmente se realiza los siguientes pasos: Prender el aparato y esperar que caliente. Llevar el aparato a 0 de absorbancia 100 ( de Transmitanca, utilizando como blanco una cubeta con agua destilada o con reactivo solo. Depositar en otra cubeta la solucin problema y colocar en lugar de la cubeta blanca.

 Observar el desplazamiento del indicador del medidor y anotar la absorbancia o transmitancia sealada.

8. POTENCIMETRO Se les utiliza para medir el pH de las soluciones buffer y medios de cultivo. Constituido de un par de electrodos sensibles a concentraciones de hidrogeniones, conectado a un potencimetro que indique las mediciones. Los potencimetros emplean un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estndar El electrodo de vidrio vara con los cambios de pH de la solucin problema debe tenerse extremo cuidado con el manejo de electrodos, especialmente con la membrana del electrodo de vidrio que es muy delicado y se rompe al primer contacto con punzo cortantes. El electrodo de calomel debe estar siempre lleno de solucin adecuada de sal (usualmente cloruro potsico saturado). Luego de cada medicin deben lavarse los electrodos y sumergirlos en agua cuando no se use el aparato.

9. REFRIGERADORAS Y CONGELADORAS Son incubadoras de temperaturas fras. Se requiere para almacenar medios de cultivo, sueros y reactivos perecederos. Las congeladoras se requieren para almacenamientos ms prolongados de sueros, enzimas, etc. Deben localizarse lejos de los hornos de aire caliente, de radiadores de tuberas de agua caliente.

10. BALANZAS.- Suele usarse balanzas de dos platillos para contrapesar tubos o para pesos groseros, cuando se realizan determinaciones finas se utiliza la balanza analtica, que puede ser mecnica o elctrica. MANEJO.- Seguir estrictamente las instrucciones de cada fabricante, tener sumo cuidado para no alterar la precisin de estos delicados aparatos, debiendo evitar vibraciones, suciedades por restos de reactivos y siempre desconectar la balanza despus de cada pesada.

11. MECHEROS.- Existen dos modelos clsicos: El mechero de alcohol, que consiste en un depsito de alcohol con una mecha y su tapa para apagar, es porttil, prctico, pero produce una llama slo de moderada intensidad.

 El mechero de Bunsen, consiste en un tubo metlico en cuyo base presenta una ruedecilla que grada la entrada del gas, el cual llega al mechero a travs de una manguerilla conectada a un fuente de gas tiene la ventaja de producir una llama azulada y potente. 12. TUBOS DE ENSAYO.- Existe una gran variedad, pero deben ser de vidrio neutro, paredes gruesas de preferencia sin rebordes para facilitar el taponamiento. Para pruebas serolgicas, tubos con tapa rosca o tapones de goma. Se usan de 13 x 100 mm y de l0 x 75 mm. Para cultivos microbianos puros y para diluciones de anlisis cuantitativos se usan de 16 x 150 mm. y de 15 x l25 mm. Para hemlisis, estudios de fermentacin y caracteres de cultivos bioqumicos se usan de 13 x l00mm. 13. LMINAS Y LAMINILLAS.- Las lminas portaobjetos miden 3 pulgadas de largo por 1 pulgada de ancho (76 x 26 mm) y pueden tener los extremos biselados. Las Laminillas cubreobjetos son cuadrados de vidrio delgada y existen de diversos tamaos, las ms usados son de 18 x 18 mm y 22 x 22 mm. 14. MATRACES.- Son recipientes que tienen un cuello y un cuerpo que de acuerdo a este ltimo se clasifica en: Cnicos (Erlenmeyer), tiene graduaciones, pero la capacidad total indicada solo es aproximadamente. Redondos.- Pueden ser de fondo plano o redondo, tiene una marca en el cuello (aforo) que indica con exactitud la capacidad total. 15. PLACAS PETRI.- Son recipientes planos de forma circular con rebordes elevados y tapa, que sirven para colocar medios de cultivo slidos o muestras. 16. FRASCOS GOTEROS.- Son frascos transparentes o de color mbar, con tapa la cual presenta una ranura que sirve de gotero. Se utiliza para colocar reactivos o colorantes. 17. PROBETAS.- Instrumento de Laboratorio que se utiliza, sobre todo en anlisis qumico, para contener o medir volmenes de lquidos de una forma aproximada, es un recipiente cilndrico con una base ancha, que generalmente lleva en la parte superior un pico para verter el lquido con mayor facilidad. Las probetas suelen ser graduadas, es decir, llevan grabada una escala por la parte exterior, que permite medir un determinado volumen, aunque sin mucha exactitud. Hay de capacidades de 10 ml hasta 2,000 ml. Las ms utilizadas son las de 100, 250, 500 y 1000 ml.

18. BEKER.- Su forma es cilndrica de boca ancha y con pico para verter lquidos presenta una graduacin aproximada.

19. PIPETAS.- Existen de diversos tamaos y medidas de acuerdo al modo de utilizacin pueden ser: Las que tienen las abreviaciones TC (To.Container) contienen determinado volumen, pero al vaciar no suministra todo el lquido, porque parte de ste queda adherida a las paredes de la pipeta. Las que tienen las letras T.D (To Deliver) al vaciar la pipeta suministrar todo el volumen especificado, quedando siempre lquido adherido a la pared y en la punta. Se utilizan de dos tipos: Volumtricas de Transferencia: Slo tienen una graduacin indicadora que su capacidad total y nicamente deben emplearse para la transferencia a medida del volumen correspondiente. Presentan una dilatacin bulbosa central con una marca de aforamiento conocida, en el extremo prximal angosto de la pipeta, se les llama tambin pipetas de bola. Las medidas ms conocidas son de 10, 25,50 y l00ml. Serolgicas o de medida: Con subdivisiones de su capacidad total, se calibran en ml a 20C. las ms conocidas son PYREX, NORMAX, EXAX, CORNING, IVA, etc. Las pipetas NORMAX se usan para trabajos de precisin, son contrastadas una por una por la Oficina Nacional de Patrones en Norteamrica y tienen las siglas NBS y ao de control de la pipeta. Por ejemplo una pipeta NORMAX serolgica de 1ml de capacidad tiene un error tolerable de 0.01 (1 %), mientras que una pipeta PYREX del mismo volumen tiene un ET de 0.02 (2 %). Para medir un volumen determinado de lquido es preferible y ms exacto elegir una pipeta de capacidad idntica al volumen que pretendemos medir, que escoger una de capacidad inferior y realizar mltiples medidas. Estas pipetas son terminales y con capacidad de 0.1 a 25ml. y las de mayor uso son: Pipetas de 10 ml 0.1 ml Pipetas de 5ml - 0.1ml Pipetas de l ml 0.1 y 0.01 ml Pipetas de 0.1 ml - 0.1 y 0.001 ml Pipetas de Dham de 0.125 - 0.0125 ml Pipetas de Dham de 0.250 - 0.0250 ml Pipetas de Bang de 0.2 - 0.08 - 0.005 ml Para serologa para medir lquidos pequeos volmenes