Taller 1: Nitrgeno Fijacin de Nitrgeno Andrs Tolosa Diaz1, Jinner Sanchez Rodriguez1, Jackeline Camero Roriguez1 1 Estudiantes de Microbiologa

Industrial, Facultad de Ciencias, Pontificia Universidad Javeriana, Bogot D.C; Colombia 1. Qu metodologas se han desarrollado para determinar la cantidad de nitrgeno fijado a partir de muestras de suelo? Cul es el fundamento? Respuesta: Teora: Las metodologas que se han desarrollado para determinar la cantidad de nitrgeno fijado a partir de muestras de suelo se presentan en negrita(1). Los mtodos ms confiables son aquellos que permiten diferenciar las cantidades o proporciones del Nitrogeno (N) de la planta, proveniente de la fijacin atmosfrica, del N suministrado por el suelo y del N aplicado como fertilizante. La tcnica de reduccin del acetileno que ha probado ser til para detectar sistemas de fijacin de N, tambin tiene limitaciones debido a que mide la actividad de la enzima ntrogenasa en un corto perodo de tiempo o en un solo momento dado(1). Las tcnicas isotpicas del 15N para medir Fijacin Biolgica del Nitrgeno (FBN) se consideran como las nicas que ofrecen cuantificaciones integrales de la FBN, que permiten distinguir la proporcin de N en la planta que procede del suelo, de un fertilizante o de la atmsfera y entregan valores de FBN integrados para todo un ciclo de crecimiento de un sistema Leguminosa - Rhizobium dado (2, 3). Dilucion Isotopica de 15N: El principio en que se basa el mtodo es que las plantas fijadoras de N 2 se desarrollan en un suelo que posee una proporcin de 15N 14N-1 diferente de aquella casi constante proporcin de 15N 14N-1 de 0.3663% presente en el N2 de la atmsfera. As, la incorporacin de N, proveniente de la FBN determinar una proporcin diferente de 15N 14N-1 en el tejido de la planta respecto de aquella del suelo en donde crece la planta. Su cuantificacin se realiza mediante la cromatografa de gases para isotopos 14N y 15N. Masa nodular Actividad de reduccin de acteileno (ARA) Contenido de ureidos Mtodo del "valor A".

2. De qu manera afecta la contaminacin de una suelo con metales pesados en el proceso de fijacin de nitrgeno? El suelo puede contaminarse con metales pesados (Zn, Pb, Co, Cd, Ni, Cr) a partir de una variedad de fuentes antropognicas, tales como las fundiciones, la minera, la industria de la energa y la estacin de aplicacin de metal que contienen plaguicidas, fertilizantes y los lodos de depuradora. Estos metales en concentraciones superiores a los requeridos normalmente por los animales, plantas y microorganismo generan toxicidad y sino tambin genera inmovilizacin irreversible en los componentes del suelo. El Cd, Hg y Pb no se conoce funcin biolgica o fisiolgica. Estudios han demostrado el efecto que tienen estos metales pesados en el suelo, demostrando la influencia de estos en los microorganismos fijadores de nitrgeno en su crecimiento, morfologa y en la actividades, incluyendo la la fijacin simbitica del nitrgeno. Estos metales ejercen una presin selectiva sobre los microorganismos, correspondiente de las poblaciones microbianas con mayor tolerancia a los metales, pero con menor diversidad, cuando se compara con zonas no contaminadas. Uno de los efectos ms sorresalientes que tiene los metales pesados en los microorganismo fijadores de nitrgenos son en la expresin de protenas en donde generalmente hay disminucin o interrupcin de metabolismo y un estrs en los microorganismo afectando negativamente la microflora del suelo. Tambin se ha visto una disminucin de ndulos en las races de las plantas por parte de los metales pesados(4, 5). 3. Cules seran las implicaciones del proceso de fijacin de nitrgeno en ecosistemas hdricos? Teora: Implicaciones de importancia en el proceso de fijacin de nitrgeno: 1. Aumenta la concentracin de iones de hidrgeno en los ecosistemas de agua dulce resultando la acidificacin de los sistemas hdricos; 2. estimular o/y potencializa el desarrollo, el mantenimiento y la proliferacin de los productores primarios, dando lugar a la eutrofizacin de los ecosistemas acuticos en los ecosistemas; 3. alcanza niveles txicos que alteran la capacidad de los animales acuticos para sobrevivir, crecer y reproducirse. La contaminacin por nitrgeno inorgnico de las aguas subterrneas y superficiales tambin puede inducir efectos adversos en la salud humana y la economa(6). Tabla 1. Implicaciones de los productos de fijacin del nitrgeno por Dinoflagelados, diatomeas y cianobacterias que generan contaminacin por nitrgeno inorgnico causando un efecto en los sistemas hdricos. Ecosistemas hdricos Productos Implicaciones Efecto Mar NOx, HNO3, HN3 Acidificacin, toxicidad, eutroficacion Efectos ecolgicos y toxicolgicos Ros NOx, HNO3, NH3 Acidificacin, Hipoxia, toxicidad, Empobrecimiento bitico, Eutroficacion eutroficacion Lagos NOx, HNO3, NH3 Acidificacin, Hipoxia, toxicidad, Sobre los productores primario y

eutroficacin

secundarios, Eterificacin

4. Mediante un diagrama, explique la relacin existente entre el proceso de fijacin del nitrgeno, fertilidad del suelo y rendimiento de un cultivo de soya.

Oxidacin y Reduccin Disee una solucin (fertilizacin qumica, fertilizacin orgnica, fertilizacin qumica-orgnica) para combatir las deficiencias de nitrgeno experimentadas en un cultivo de maz, en el departamento de Boyac. Es importante mencionar y discutir ventajas y desventajas sobre las soluciones brindadas por cada uno de los grupos. Para disear las soluciones se deber tener en cuenta: El cultivo de maz, se encuentra ubicado en una zona donde la temperatura promedio es de 10 oC y la precipitacin anual es de 2000 mm. Los suelos segn los anlisis previos realizados por el agricultor presentan 0,1% de materia orgnica y los promedios de nitrgeno total (NH4, NO3, N org. ) son bajos arrojaron valores de 15 kg/ha, los cuales se consideran bajos para obtener ptimos rendimientos de biomasa. De otro lado , el pH del suelo est entre 5 -6 y la textura del suelo es franco arenosa.

Variables: pH: 5-6, To 10 oC, precipitacin anual es de 2000 mm, MO 0.1%, Nitrogeno total 15 kg/ha (bajos), suelo franco arenosa.

Figura 1. Obtenida de la FAO. La solucin para el cultivo de maz en Boyaca seria de la siguiente manera: 1. Alcalinizar el suelo obteniendo valores entre 6.5 y 7.3 pH, esto con el fin de minimizar la volatilizacin del nitrgeno y tambin la precipitacin y lixiviacin de dichos compuestos nitrogenados, por tal motivo se debera controlar esta variable en las zonas antes de fertilizar. 2. Realizar labores de labranza e incorporacin de enmiendas (combinaciones entre suelos arcillos-humus, de tal manera estabilizar el nitrgeno del suelo y la materia orgnica) que conducen a mejorar las condiciones qumicas, fsicas y biolgicas del suelo, es decir a

favorecer la movilidad y permanencia del agua, del aire y nutrientes en el suelo, esto con el fin de aumentar las condiciones de humedad y el proceso de humificacin del suelo, es importante en el mantenimiento de los niveles de materia organica. 3. Aumentar la materia orgnica en relacin C/N, lo norma en cultivos de maz son 170 Kg. de nitrgeno, 60 Kg. de P2O5 y 140 Kg. /ha
de K2O, sin embargo esto valores van a depender de las necesidades de produccin (7).

4. 1. Fertilizacin qumica Con base en anlisis previos del suelos, labores de labranza e incorporacin de enmiendas que conducen a mejorar las condiciones qumicas, fsicas y biolgicas del suelo, es decir a favorecer la movilidad y permanencia del agua, del aire y nutrientes en el suelo. En trminos generales, se busca dejar el terreno apropiado, con una mayor capacidad productiva que favorezca la penetracin de las races en el suelo. Por otro lado, se debe suministrar fuentes de nitrgeno, fsforo y elementos menores. Sin embargo, se recomienda una fertilizacin bsica, aplicando 170 Kg. de nitrgeno (Nitrato de amoniaco de calcio), 60 Kg. de P2O5 y 140 Kg. /ha de K2O. Se recomienda aplicar la mitad de la dosis de nitrgeno y de potasio 15 das despus de la siembra y la segunda mitad 25 das despus de sembrar, siempre incorporados al suelo, acompaado del suministro de agua en cantidad y oportunidad(8). 2. Fertilizacin orgnica La materia orgnica mejora la estructura del suelo, reduce la erosin del mismo, tiene un efecto regulador en la temperatura del suelo y le ayuda a almacenar ms humedad, mejorando significativamente de esta manera su fertilidad. Adems la materia orgnica es un alimento necesario para los organismos del suelo, la aplicacin de la materia orgnica del estircol, urea con tratamientos previos, especialmente a suelos arenosos y arcillosos, tiene los siguientes efectos:(9, 10). 1. Mejora la tasa de infiltracin de agua. 2. Reduce la prdida de agua y genera un sistema tampn al suelo manteniendo el pH ideal para el crecimiento de la planta. 3. Reduce la prdida de suelos por erosin. 4. Mejora el rebrote de las semillas. 5. Facilita la liberacin lenta de nutrientes por el suelo y contiene . 6. Solubiliza los minerales del suelo.

3. Fertilizacin qumica-orgnica La combinacin de abono orgnico / materia orgnica y fertilizantes minerales (Sistema Integrado de Nutricin de las Plantas, SINP) ofrece las condiciones ambientales ideales para el cultivo, cuando el abono orgnico / la materia orgnica mejora las propiedades del suelo y el suministro de los fertilizantes minerales provee los nutrientes que las plantas necesitan, esto ayudando a mejorar el intercabio catinico en el suelo, mantiene la humedad en el suelo y crea un microclima ideal tanto para los microorganismo como para las races del maiz(9).

FERTILIZACION ORGANICA VENTAJAS Previene la acumulacin de metales pesados y otros contaminantes. Aumenta el rendimiento de los cultivos de maiz con altos contenido de materia orgnica y nitrgeno.

FERTILIZACION QUMICA DESVENTAJAS Perdida de nutrientes lixiviacin Contaminacin de las aguas.

DESVENTAJA VENTAJAS Contaminacin por microorganismo Los elementos (P, Na, N y K) patgeno. son asimilados ms rpidamente. Estar atento con los cambios La materia inorgnica fisicoqumicos de la materia orgnica permiten aproximar las estos podra disminuir su eficiencia dosis de cada nutriente a los nutricional a la cosecha. requerimientos deseados del terreno. Mejor asimilacin de elementos Tienen un bajo nivel de disponibilidad Poseen concentraciones qumicos (N, P, K) elementos para la planta. altas por lo que la cantidad que se usa es menor Mejora las propiedades Cuando la fertilizacin organiza esta fisicoqumicas del suelo (pH, certificada su costo son elevados.

por

Reduccin Biolgica

de

la

actividad

Minimiza las nutrientes

prdidas

de

No es costoso Eleva el contenido de materia orgnica del suelo (microorganismo)

No presenta en su totalidad todos los elementos necesarios para una planta, en este caso la papa. Como no contiene componentes orgnicos, un uso frecuente puede empobrecer el suelo y disminuir la porosidad, capacidad de amortiguamiento y friabilidad del suelo. Disminuyen la fauna bacteriana del suelo.

Formacin de complejos arcillo y hmicos, que retienen los macro y micronutrientes.

Referencias

1. CAMPILLO R, URQUIAGA C, PINO N, Ins.R.C. FIJACIN BIOLGICA DE NITRGENO EN TRBOL BLANCO MEDIANTE TCNICAS ISOTPICAS DEL 15N, EN UN SUELO DERIVADO DE CENIZAS VOLCNICAS. . Suelo Nutr Veg. 2002;2(1):25-34. 2. BAREA J, Olivares J. Cuantificacin de la fijacin biolgica de N mediante el uso de 15N. Fijacin de N y micorrizas. Consejo Superior de Investigaciones Cientficas. 1991;2:105-24. 3. LEDGARD SF, STELEE, K.W. Biological nitrogen fixation in mixed legume/grass pastures. Plant and Soil. 1992;141:137-53. 4. Sofia Isabel Almeida Pereira AIGL, Figueira EMdAP. Heavy metal toxicity in Rhizobium leguminosarum biovar viciae isolated from soils subjected to different sources of heavy-metal contamination: Effects on protein expression. Applied Soil Ecology. 2006;33:28693. 5. Broos K UM, Mertens J, Smolders E. A survey of symbiotic nitrogen fixation by white clover grown on metal contaminated soils. Soil Biology & Biochemistry. 2004;36:63340. 6. Camargo JA, Alonso . Ecological and toxicological effects of inorganic nitrogen pollution in aquatic ecosystems: A global assessment. Environment International. 2006;32:83149. 7. Campuzano F NA. Cultivo de Maiz Corpoica. 2008. 8. http://www.infoagro.com/herbaceos/cereales/maiz2.htm. 9. FAO. Los fertilizantes y su uso. 2002. 10. Echeverri Z RF, Parra J. Evaluacin comparativa de los parmetros productivos y agronmicos del pasto kikuyo Pennisetum clandestinum bajo dos metodologas de fertilizacin. REVISTA LASALLISTA DE INVESTIGACIN. 2010;7(2):94-100.