Efecto de La Suplementación Nitrogenada de Bagazo de Caña de Azucar Sobre El Incremento de Los Rendimientos Del Hongo Ostra

Y
Efecto de la Suplementacin Nitrogenada de

Bagazo de Caa de Azcar sobre el Incremento
de los Rendimientos del Hongo Ostra Pleurotus
ostreatus (AGARICALES:
TRICHOLOMATACEAE)
Edwin Gudiel Morales Cutzal
Proyecto de Graduacin
para obtener el ttulo de
Ingeniero Agrnomo
con el grado acadmico de
Licenciatura en Ciencias Agrcolas
Gucimo, Limn, Costa Rica
2009
iii
La Universidad EARTH certifica que el Proyecto de Graduacin titulado
Efecto de la Suplementacin Nitrogenada del Bagazo de Caa de
Azcar sobre el Incremento de los Rendimientos del Hongo Ostra
Pleurotus ostreatus (AGARICALES: TRICHOLOMATACEAE)
Presentado por
Edwin Gudiel Morales Cutzal
Rene las condiciones para obtener el ttulo de Ingeniero Agrnomo
con el grado acadmico de Licenciatura
Decano de Asuntos Acadmicos
Manuel Cerrato, Ph.D.
Asesor
Fritz Elango, Ph. D
Diciembre 2009
v
Dedicatoria
Este documento se lo dedico al seor Jesucristo, ser maravilloso y el motivo de mi vivir. A mi
querida madre Francisca Cutzal y hermanos que han sido mi inspiracin para luchar cada da.
Agradecimiento
Agradezco al seor todopoderoso, quin por su gracia me ha dado esta vida y de permitirme
lograr mis sueos, a l le agradezco infinitamente todo.
Al Grupo Cristiano de la EARTH (JOCRER) por darme la oportunidad de convivir y aprender
sobre la vida y desarrollar mi vida espiritual.
A mi querida madre, por haberme apoyado en todo momento en mi vida acadmica, en lo
emocional y espiritual.
Agradezco a mis hermanos que me han enseado a vivir y aprender de ellos.
Agradezco a mi asesor Fritz Elango quien me brind incondicionalmente su apoyo durante la
investigacin.
A mis amigos, amigas, compaeros y compaeras de la EARTH por apoyarme en diferentes
momentos de mi vida en la universidad.

vii
Resumen
Con el propsito de mejorar el rendimiento (eficiencia biolgica) del hongo ostra Pleurotus
ostreatus producido a partir del bagazo de caa de azcar, el presente estudio evalu
diferentes niveles de suplementacin nitrogenada orgnica (semolina de arroz) e inorgnica
(nitrato de amonio). En la primera prueba, se compar la eficiencia biolgica (E. B.) de 4 niveles
de semolina de arroz y cuatro del nitrato de amonio. Los rendimientos no demostraron
diferencias estadsticamente significativas entre los diferentes niveles de ambos suplementos.
La segunda prueba evalu tres niveles de ambos tipos de suplementos en bagazo de caa
composteado y no composteado. No se encontr diferencias estadsticamente significativas con
sustratos composteados, a diferencia del sustrato no composteado que si present diferencias
entre los niveles de suplementacin. 20 % de semolina en bagazo de caa no composteado
aument los rendimientos con una eficiencia biolgica de 50,5 %, pero con ms altos niveles de
contaminacin por el hongo Trichoderma sp.,y Neurospora spp., principalmente. Por otro lado,
el 0,5 % de nitrato de amonio present una E. B. significativa de 46,6 %.
Palabras clave: Hongo ostra, bagazo de caa, suplementacin, nitrato de amonio, semolina de
arroz, eficiencia biolgica, sustrato composteado.

viii
Abstract
With the aim of increasing oyster mushroom yields produced from sugarcane bagasse, the
present study evaluated different levels of organic (rice bran) and inorganic (ammonium nitrate)
nitrogen supplements. The first trial evaluated four levels of rice bran and four levels of
ammonium nitrate supplements. No statistically significant yield differences were obtained by
both types of supplements. The second trial evaluated levels of both types of supplements in
composted and non-composted sugarcane bagasse. No statistically significant differences were
found among the treatments of the composted substrate, whereas statistically significant yield
differences were obtained in the non-composted treatments. The non-composted bagasse
supplemented with 20 % rice bran gave the highest yield increases with a biological efficiency
(B. E.) of 50,5 %, but the inorganic supplement caused an increase in fungal contamination by
Trichoderma sp., and Neurospora spp. On the other hand, a 0,5 % of ammonium nitrate
supplement gave the highest statistically significant yield increase with a biological efficiency of
46,6 %.
Key words: Oyster mushroom, sugarcane bagasse, supplements, ammonium nitrate, rice bran,
biological efficiency, composted substrate.

ix
Lista de Contenido
Pgina
Dedicatoria ................................................................................................................................... v
Agradecimiento ............................................................................................................................ v
Resumen ..................................................................................................................................... vii
Abstract ..................................................................................................................................... viii
Lista de Contenido ..................................................................................................................... ix
1 Introduccin ........................................................................................................................... 1
2 Objetivos ................................................................................................................................. 7
2.1 Objetivos Especficos ................................................................................................... 7
3 Materiales y Mtodos ............................................................................................................. 8
3.1 Ubicacin del Proyecto ................................................................................................ 8
3.2 Obtencin y Preparacin del Cultivo Puro ................................................................... 8
3.3 Preparacin de la Semilla del Hongo o Spawn ............................................................ 8
3.4 Obtencin y Preparacin del Sustrato ......................................................................... 9
3.5 Pasteurizacin del Sustrato ....................................................................................... 11
3.6 Inoculacin de los Sustratos ...................................................................................... 11
3.7 Colonizacin y Fructificacin ...................................................................................... 12
3.7.1 Primera Prueba .............................................................................................. 12
3.7.2 Segunda Prueba ............................................................................................ 13
3.8 Recoleccin de Datos y Criterios de Evaluacin ....................................................... 14
4 Resultados y Discusin ...................................................................................................... 15
4.1 Resultados de la Primera Prueba .............................................................................. 15
4.2 Resultados de la Segunda Prueba ............................................................................ 17
4.2.1 Colonizacin de los tratamientos ................................................................... 18
4.2.2 Contaminacin de los tratamientos ................................................................ 21
4.2.3 Eficiencia biolgica de los tratamientos ......................................................... 22
4.2.4 Eficiencia biolgica entre los tratamientos composteados y no composteados
....................................................................................................................... 24
4.3 Conclusiones y Recomendaciones Finales ............................................................... 25
5 Lista de Referencias Bibliogrficas ................................................................................... 27
6 Anexos .................................................................................................................................. 29
6.1 Anexo 1. Termmetro de Mximos y Mnimos Usado para la Medicin de la
Temperatura ............................................................................................................... 29
6.2 Anexo 2. Medidor de Humedad y Temperatura Modelo TH4-7F, de la Marca
DICKSON Utilizado para la Medicin de la Humedad y Temperatura del Cuarto de
Produccin de Hongos ............................................................................................... 29
x
6.3 Anexo 3. Datos Utilizados para el Anlisis Estadstico de la Eficiencia Biolgica (%)
de los Tratamientos de la Primera Prueba ................................................................. 29
6.4 Anexo 4. Datos Utilizados para el Anlisis Estadstico de la Colonizacin (%) a los 6
Das de los Tratamientos Composteados de la Segunda Prueba ............................. 30
Das de los Tratamientos Composteados de la Segunda Prueba ............................. 30
Das de los Tratamientos No Composteados de la Segunda Prueba ........................ 30
Das de los Tratamientos No Composteados de la Segunda Prueba ........................ 31
6.8 Anexo 6. Datos Utilizados para el Anlisis Estadstico de la Eficiencia Biolgica (%)
de los Tratamientos de la Segunda Prueba ............................................................... 31
6.9 Anexo 7. Resultado de los anlisis de varianza de las variables evaluadas ............. 32
6.10 Anexo 8. Test de tukey para las medias de la variable eficiencia biolgica de los
tratamientos no composteados .................................................................................. 32

Efecto de la Suplementacin Nitrogenada del Bagazo de Caa de Azcar sobre los Rendimientos del
Hongo Ostra
1
1 Introduccin
El cultivo de los hongos comestibles se ha venido desarrollando desde ms de 200 aos en
Europa con el cultivo del champin Agaricus bisporus y en Asia con la especie Lentinula
edodes y Auricularia spp. En Amrica fue iniciado como una actividad de inters durante la
segunda mitad del siglo XX (Snchez y Royse, 2001).
A nivel mundial la produccin de hongos comestibles se ha incrementado ms de 35 veces,
desde las 24 000 t en 1962 a 8 500 000 t en el 2002. Adems, se han observado cambios en
las especies cultivadas. En 1997 la especie ms cultivada fue el champin A. bisporus que
representaba el 31,8 % de la produccin mundial, siguiendo la especie L. edodes con un 25,4 %
y P. ostreatus representando el 14,2 % de la produccin mundial de hongos comestibles
(Rodrguez, 2007).
En 1994 China era el pas de mayor productor de Pleurotus spp., representando el 82,0 % de la
produccin mundial de esta especie. Mientras que en los pases de Amrica en 1998 el mayor
productor era Mxico con un 47,53 % de la produccin de Pleurotus spp., siguiendo Estados
Unidos, Canad y Brasil con 23,65 %, 14,79 % y 11,72 % respectivamente (Snchez y Royse,
2001). El Pleurotus ostreatus es uno de los hongos mas cultivados, sus caractersticas
nutricionales lo hacen importante por presentar un contenido rico en protenas, fibra, hidratos de
carbono, vitaminas y minerales, adems de poseer un sabor y olor nicos. En general el hongo
ostra se considera de importancia medicinal por llevar a cabo actividades antibacteriales,
antiviral, anti tumores, hematolgicas y ayuda a la reduccin de los niveles de colesterol
(Rodrguez, 2005).
Snchez y Royse (2001) afirman que el hongo ostra, es un cultivo con una ventaja apreciable
por crecer en una amplia variedad de materias primas; por ejemplo, en el trpico se utiliza el
aserrn, rastrojo de arroz, aserrn mezclado con hojas de guaje Leucaena spp., y combinaciones
de olote de maz, cscara de semilla y ramas de algodn, bagazo y hojas de caa, tallos y
hojas de maz, pastos, cascara de arroz, lirio acutico y entre otros como la pulpa de caf que
es utilizado en pases cafetaleros tal es el caso de Mxico (Chang y Quimio, 1982 ), su
capacidad de crecer en una amplia biodiversidad de materiales y por las propiedades
medicinales son razones por la que es una de las especies ms producidas a nivel mundial.
Los hongos pertenecen al grupo de los microorganismos hetertrofos que no poseen clorofila y
no son capaces de sintetizar los hidratos de carbono para su nutricin. Sin embargo, los
obtienen a partir de los organismos muertos, razn por la cual son llamados tambin
organismos saprofitos (Vedder, 1991). La base de obtener los nutrientes de los organismos
muertos es la capacidad oxidativa e hidroltica que les confiere la secrecin de un amplio
espectro de enzimas. As es como el sustrato escogido para la produccin de hongos
comestibles debe contener una fuente de carbono y una fuente de nitrgeno que suplan las
necesidades nutritivas para el desarrollo del hongo.
Hongo Ostra
2
Debido a la diversidad de materiales que se pueden utilizar como substrato, el material a usar
depender de la disponibilidad en el lugar de produccin. Costa Rica es un pas con una
produccin de caa para la fabricacin de azcar de aproximadamente 56 200 hectreas y se
asegura que se siembra este cultivo casi en todo el pas, el bagazo de caa como residuo de la
industria azucarera es utilizada tambin para diversos motivos como; produccin de
biocombustible, alimentacin animal, abonos y entre otros (Chaves, 2008).
Snchez y Royse (2001) estiman que de 1000 kg de caa de azcar se genera 231 kg de
bagazo, tomando en cuenta la alta produccin de caa de azcar en Costa Rica, existe una
gran oportunidad de utilizar este residuo para la produccin de hongos comestibles, dando de
esta forma un valor agregado a un material que podra ser desechado por los productores
azucareros y adems se contribuye a evitar problemas ambientales. Es as como el bagazo de
caa es un material de inters para la produccin del hongo P. ostreatus.
Chang y Quimio (1982) confirman que un proceso de compostaje de los sustratos que se
utilizan para el crecimiento y produccin de los hongos pueden dar mejores resultados. Sin
embargo, menciona tambin que para el caso del bagazo de caa de azcar, este puede ser o
no ser composteado.
Mientras Snchez y Royse (2001) de igual manera mencionan que para la produccin del
hongo ostra no se requiere de un proceso de composteo complejo y prolongado. Sin embargo,
afirman buenos resultados al tratar al bagazo de caa alrededor de 15 das de fermentacin
(Cuadro 1), mientras otros materiales como la pulpa de caf que tambin muestra rendimientos
aceptables si se hacen mezclas con materiales orgnicos con 2 % de cal y de 2 a 3 das de
composteo a una temperatura de 50
o
C a 60
o
C.
En general, Chang y Quimio (1982) afirman que los sustratos pueden ser composteados de 6 a
30 das y para una descomposicin rpida se le puede dar de 3 a 4 das, dependiendo del tipo
de sustrato. Adems, encontraron que en Puerto Rico utilizaban el bagazo de caa sin ningn
proceso de composteo.
Moda et al. (2005) evaluaron el lavado de bagazo de caa en agua con flujo continuo durante
una hora como reemplazo del proceso de compostaje y pasteurizacin en agua caliente a 80
o
C
durante dos horas del bagazo. Los resultados dieron que para el lavado del bagazo se
encuentra una eficiencia biolgica de 19,6 % y 44 % de contaminacin, para el caso de la
pasteurizacin del bagazo la eficiencia biolgica fue de 13,86 %, con 70 % de contaminacin.
Moda et al. (2005) concluyeron que no hay diferencias estadsticas entre ambos resultados, por
lo tanto recomiendan utilizar el lavado en agua a temperatura ambiente del bagazo para reducir
costos. Adems que, el grado de contaminacin result ser menor en comparacin al mtodo
de pasteurizacin.
En el Cuadro 1 se muestra la eficiencia biolgica (E. B.) que representa la mediacin porcentual
del rendimiento fresco de carpforos a partir del peso seco del sustrato pasteurizado (Stamets,
2000) en algunas mezclas de sustratos de bagazo de caa con otros materiales. As como la
eficiencia biolgica de otros sustratos. Snchez (1997) demostr que el bagazo de caa dio
Hongo Ostra
3
mejores resultados que el desecho de palmito y paja de arroz, dando como rendimiento un
promedio de 15,5 Kg/m
2
de sustrato, sin sealar la E. B. de los materiales.
Cuadro 1. Ejemplos de la eficiencia biolgica de algunas mezclas de sustrato a base de bagazo
de caa y otros tipos de sustratos para P. ostreatus.
Sustrato Eficienciabiolgica(%)
Bagazodecaadeazcar(50%)
PulpadeCaf(50%) 96,9
Bagazodecaadeazcar(50%)
Pajadecebada(50%) 66,0
Bagazodecaadeazcar(66,6%)
(15dasfermentado)
Espigademaz(33,3%) 105,0
Cascarilladearroz
Harinadeavena(2%) 38,0
Pajadearroz 79,2
Cascarilladearroz 56,1
Aserrndepino(suplementados
consalvadodearroz) 44,8
Residuodealgodn 92,0
Pulpadecaf(5dasdefermentacin) 175,8
Jacintodeagua 125,7
Snchez y Royse (2001).
Snchez y Royse (2001) sealan al bagazo de caa como un subproducto de la industria
azucarera mus utilizado para la produccin de hongos, presentando un contenido de 0,18 % de
nitrgeno y una relacin C:N (carbono:nitrgeno) de 314:1 (Snchez y Royse, 2001.),
encontrndose este ultimo valor por arriba de 40:1 que es la relacin optima determinado por
estos mismos autores.
Por otro lado, Arias y Flores (2006) confirman que la relacin de C:N entre 30:1 a 300:1 en los
sustratos son aceptables para la colonizacin del micelio, y que adems, confirman que
notificaron por medio de colonizacin in vitro (en cajas petri de cristal) que las relaciones C:N
entre los 100 a 200 fueron los que presentaron mejores resultados de colonizacin en
comparacin con los de baja relacin de C:N.
Se ha observado que para la especie Pleurotus ostreatus, es muy frecuente utilizar en el
bagazo de caa de azcar algn tipo de suplemento nitrogenado para aumentar el nivel de este
elemento y adems para mejorar la relacin carbono-nitrgeno en la mezcla. En otras
investigaciones aseguran que la suplementacin de harinas de girasol, algodn y soja en paja
de arroz ha incrementado de 50 % a 100 % los rendimientos en comparacin de los sustratos
no suplementados (Snchez y Royse, 2001).
Moda et al. (2005) evaluaron el bagazo de caa para el cultivo de Pleurotus sajor caju con dos
tipos de suplementos nutricionales. El primero consisti en harina de maz (suplemento
orgnico), aplicando un 10 % del peso hmedo del sustrato. El segundo fue una aplicacin de
Hongo Ostra
4
un suplemento mineral, obtenido de un cultivo hidropnico de lechuga con la siguiente
composicin en 200 mL de agua destilada: 7,5 nitrato de calcio, 5,0 g de nitrato de potasio; 1,5
g de fosfato mono amonio; 4,0 g de sulfato de magnesio, 0,25 mL de hierro EDTA; y 1,0 mL de
una solucin de micronutrientes. La aplicacin de esta solucin mineral se realiz 10 das
despus del inicio de la incubacin a una concentracin de 10 mL por bolsa de sustrato que
contiene 465 g de bagazo de caa hmedo.
El resultado favoreci a la suplementacin mineral ya que dio una diferencia estadstica a
comparacin a la suplementacin orgnica, al dar una eficiencia biolgica de 30,03 %, mientras
que para la suplementacin orgnica se encontr una eficiencia biolgica de 15,66 %. Adems,
hubo un tercer tratamiento (control) sin ninguna suplementacin, dando como resultado un
26,62 % de eficiencia biolgica. Los datos obtenidos para determinar la eficiencia biolgica fue
de la recoleccin de datos durante un perodo de 50 das de cosecha (Moda et al., 2005).
El uso de los suplementos nutricionales fortalece el contenido de grasa y fibra, pero se usa
principalmente por el aumento del contenido de nitrgeno en los sustratos (Cuadro 2), entre
ellos estn los suplementos orgnicos, llamados de liberacin lenta y los suplementos
inorgnicos.
Existe comercialmente un suplemento nutricional de liberacin lenta, compuesta por soya
entera con una cobertura de parafina o soya desnaturalizada y harinas de plumas. Estas son
agregadas en rangos de 3 % a 6 % del peso del sustrato seco. El uso de este suplemento han
demostrado que al utilizar el rango de 6 %, el rendimiento aumenta arriba del 90 %, adems su
aplicacin en rango de 3 % durante la colonizacin del sustrato permite que la produccin
reduzca de 2 a 3 das. Confirman adems que el uso de suplementos nutricionales puede
causar sobrecalentamiento de los sustratos. Sin embargo, para evitar problemas en el sustrato
como contaminacin, los productores necesitan tener un sistema adecuado de aeracin o
regulacin de temperatura (CAS, 2003).
Tomando en cuenta que en costa Rica hay una produccin considerable del cultivo de arroz, de
la cual como producto secundario se obtiene la semolina o harina a partir del proceso industrial
de este producto, se hace fcil la disponibilidad de este material para usarse como suplemento
nutricional para la produccin de hongos, siendo este un producto orgnico que se considera
que el efecto de la liberacin de los nutrientes actuar lentamente a lo largo del proceso de
colonizacin y fructificacin del hongo. La cantidad de este material a utilizar depende del tipo
de sustrato que se est utilizando. En el bagazo de caa es muy comn utilizar semolina de
arroz desde un rango de 10 % a 20 % sobre el peso seco del sustrato (Chang y Quimio, 1982).
Resultados obtenidos por Viteri (2003) al evaluar la semolina de arroz en bagazo de caa
encontr que, una combinacin del 80 % de bagazo y un 20 % de semolina de arroz se obtiene
una eficiencia biolgica de 7,37 %.

Hongo Ostra
5
Cuadro 2. Composicin qumica del salvado de arroz (%, sms).
Material
Materia
Orgnica
N
Total
Grasa
Bruta
Fibra
Bruta
Extracto
libredeN
Cenizas
C:N
Salvadode
arroz(entero) 88,5 2,32 18,3 11,8 43,9 11,5 22,1
Snchez y Royse (2001).
Por otro lado, para determinar el efecto de un suplemento de liberacin lenta, se evala tambin
el comportamiento del nitrato de amonio (NH
4
NO
3
) como suplemento inorgnico de liberacin a
corto plazo.
Zadrazil (1980) demostr en una investigacin el efecto del nitrato de amonio como suplemento
del sustrato de paja de trigo para la especie Pleurotus sajor caju, comprobando tres niveles de
nitrato de amonio en solucin con agua, siendo estos; 0,75 %, 2,25 % y 3,75 % del peso seco
de la paja de trigo, dando como resultado en los dos primeros niveles rendimientos por encima
del control (sustrato sin nitrato de amonio), mientras que el nivel ms alto de nitrato de amonio
dio un rendimiento por debajo del control. Los rendimientos encontrados para los tres niveles de
nitrato de amonio son; 4,69 %, 5,03 % y 2,93 %, respectivamente.
En la misma investigacin, Zadrazil (1980) demostr que la suplementacin de la paja de trigo
con material orgnico (Harina de soya y harina de alfalfa) aumenta la eficiencia biolgica en un
300 % y con la suplementacin inorgnica (nitrato de amonio) incrementa un 50 %.
Es importante considerar que las fuentes de nitrgeno puede influir en el cambio del pH del
medio, en el caso del genero Pleurotus spp., acidifica el medio al degradar el amonio presente
en el sustrato, tomando en cuenta que el hongo Pleurotus spp., se desarrolla adecuadamente
entre pH 5 y 6. Adems, la mayora de los contaminantes que se encuentran durante el proceso
del cultivo de hongos encuentran condiciones adecuadas para su desarrollo en valores bajos de
pH.
El Trichoderma hamatum es uno de los principales contaminantes del Pleurotus spp., ste
reduce notablemente su crecimiento a pH 7, y es totalmente inhibida a pH de 8,5 (Snchez y
Royse, 2001). Considerando estos puntos, parte de la evaluacin del nitrato de amonio en el
bagazo de caa fue determinar su efecto sobre la contaminacin del sustrato.
Diferentes tcnicas y tipos de materiales que se utilizan para la produccin del cultivo del hongo
ostra han sido mencionados anteriormente, de tal forma que existe informacin que sirve como
gua a los productores de hongos para trabajar con el cultivo. Sin embargo, se cree que algunos
mtodos como por ejemplo la pasteurizacin, la forma de empleo y cantidad de suplementos
nutricionales, compostajes y entre otras tcnicas, pueden ser un factor importante para los
costos de produccin, adems de que algunos mtodos de produccin que utilizan equipos
difcilmente disponibles para pequeos productores pueden afectar sus crecimientos en el
mbito empresarial (Chang et al., 1993).
El cultivo de ostra es considerablemente fcil de producir, es tercero a nivel mundial en
produccin, pero los rendimientos no siempre son rentables (Chang et al., 1993). Adems,
Hongo Ostra
6
seala que las producciones de algunos sectores de Europa no han tenido aumentos
considerables en su produccin, y se cree que es por los bajos rendimientos encontrados y el
costo principalmente de labores, materiales y el uso de la energa que se emplea durante los
procesos de produccin. Por lo que se cree que an existe la forma de mejorar tcnicas de
produccin, tomando en cuenta que en cada regin existen factores ambientales, disponibilidad
de materias primas y de equipos que pueden influir sobre los mtodos de produccin a utilizar
en el cultivo.

Hongo Ostra
7
2 Objetivos
Evaluar el efecto de la suplementacin nitrogenada del bagazo de caa para el incremento de
la productividad del hongo ostra.
2.1 Objetivos Especficos
Evaluar niveles de suplemento nutricional orgnico e inorgnico sobre la colonizacin,
contaminacin y rendimiento en el cultivo del hongo P. ostreatus.
Determinar el efecto del composteado del bagazo de caa sobre la produccin del hongo P.
ostreatus.

Hongo Ostra
8
3 Materiales y Mtodos
3.1 Ubicacin del Proyecto
La evaluacin de los mtodos de produccin del hongo Pleurotus ostreatus fue realizado en las
instalaciones de la universidad EARTH, ubicada en Las Mercedes, Gucimo, Limn, Costa
Rica. El clima de la regin es de Trpico Hmedo y la zona de vida, de acuerdo con el Sistema
de Holdridge, es Bosque Hmedo Tropical, con una temperatura promedio anual de 27
o
C, con
86 % de humedad relativa en promedio y la precipitacin media anual es de aproximadamente
3400 mm.
3.2 Obtencin y Preparacin del Cultivo Puro
El cultivo puro de P. ostreatus proveniente de Sara Buri, Tailandia fue extrada de un medio
inclinado de Agar Papa Dextrosa (APD) para ser transferido y multiplicado por medio del tejido
micelial a cajas petri que tambin contenan medios de APD (Figura 1). Este proceso se llev a
cabo en el Laboratorio de Ciencias Naturales de la Universidad EARTH, con la debida asepsia
que se debe controlar para evitar las posibles contaminaciones del medio de cultivo. Desde el
momento de la transferencia del cultivo puro a las cajas petri con APD, se esperaron 7 das y el
micelio fue utilizado en la inoculacin del sustrato para la obtencin de la semilla del hongo.

Figura 1. Medios de agar papa dextrosa con el micelio del hongo ostra.
3.3 Preparacin de la Semilla del Hongo o Spawn
La semilla del hongo que comnmente llamado Spawn fue preparada en el Laboratorio de
Ciencias Naturales de la Universidad EARTH, en esta fase se prepar semilla de grano a base
de sorgo, para ello fue necesario limpiar y lavar debidamente la semilla y darle un proceso de
coccin durante 25 minutos, aproximadamente. Despus de la coccin de la semilla, se escurri
el agua por un minuto por medio de un colador de plstico, enseguida se extendi sobre papel
Hongo Ostra
9
peridico, se secaron las semillas durante una hora para darle la humedad adecuada (60% a
70%) que requiere el hongo para desarrollarse adecuadamente en el sustrato.
Despus del secado de la semilla, se le mezcl 1 % de carbonato de calcio (CaCO
3
) y 1 % de
yeso (CaSO
4
) del peso total del grano. Se procedi a embolsar semilla en bolsas de polietileno
de alta densidad, de 25 cm de ancho por 35 cm de largo, con una cantidad de 200 g de semilla
de sorgo por bolsa. Estas bolsas fueron dobladas y engrapadas para asegurar que estn bien
cerradas, posteriormente se procedi a autoclavarlas por 25 minutos, a 121
o
C y una presin de
1,05 kg/cm
2
.
Al encontrarse la semilla de sorgo a temperatura ambiente (27
0
C) despus de la esterilizacin
en el autoclave, se procedi a inocular con el micelio del hongo reproducido anteriormente en el
medio de cultivo APD, colocando en la semilla de sorgo esterilizado de 4 a 5 porciones de
aproximadamente 1 cm
2
del micelio del hongo (Figura 2). Quince das despus de la
inoculacin del hongo a la semilla de sorgo, el spawn con un 100 % de colonizacin qued listo
para ser utilizado en la inoculacin del sustrato en bagazo de caa. Durante este tiempo, el
spawn fue incubado en el laboratorio de Ciencias Naturales de la Universidad EARTH, a una
temperatura promedio de 28
o
C, estando dentro del rango 24
o
C a 29
o
C recomendado por Arias
y Flores (2006) para la fase de incubacin.

Figura 2. Preparacin del spawn con semilla de sorgo.
3.4 Obtencin y Preparacin del Sustrato
El bagazo de caa evaluado fue obtenido en dos diferentes lugares, que para el caso de la
primera prueba, el bagazo de caa se obtuvo de los ingenios azucareros de la zona de
Hongo Ostra
10
Guanacaste. Mientras para la segunda prueba de la investigacin, el bagazo de caa de azcar
fue adquirido de la Hacienda Juan Vias, de la zona de Turrialba de Costa Rica.
Segn el Cuadro 3, el bagazo de caa de azcar se evalu en dos condiciones, el primero sin
ningn proceso de composteo, mientras la segunda con un proceso de composteo que dur 6
das. El composteo que se le dio al bagazo de caa fue un proceso simple y corto, que
bsicamente consisti en el humedecimiento del material hasta llevarla a un porcentaje de
humedad alrededor del 70 %, posteriormente dicho material fue amonticulado sobre un piso de
concreto bajo techo, y con una cobertura plstica durante los 6 das. Adems, durante este
tiempo el montculo recibi dos volteos, para su debida homogenizacin.
Despus de compostear el sustrato, se procedi a hacer las mezclas tanto del material
composteado como del no composteado. Las mezclas fueron hechas segn los niveles de
suplementacin que se observa en el Cuadro 3, en este proceso el nitrato de amonio fue
aplicado en el materia en solucin con agua, de tal forma que este ingrediente fuese
homogneo en todas las partes. Las diferentes mezclas fueron llevadas a una humedad
aproximado de 70 %, con el fin de darle las condiciones adecuadas al hongo para su
crecimiento y desarrollo. En este proceso un tratamiento como testigo fue importante tomar en
cuenta durante el proceso de evaluacin, es por eso que se dej un control para el material
composteado y uno para el material no composteado, teniendo como resultado dos
tratamientos de control.
Con el sustrato ya preparado, se procedi a llenar las bolsas de polietileno de alta densidad (25
cm X 35 cm), resistentes al calor, asegurando que el sustrato quede bien compactado para no
dejar espacios vacios, ya que esto puede impedir la buena colonizacin del hongo en el
sustrato. La bolsas fueron cerradas con una boquilla de PVC de un largo de 3 cm, que a la vez
es asegurada con una liga de hule para evitar la remocin de la misma, finalmente se coloc
dentro del tubo PVC una porcin de algodn para sellar la bolsa. El proceso de preparacin del
sustrato se puede ver en la Figura 3.

Figura 3. Preparacin de los tratamientos.
Hongo Ostra
11
3.5 Pasteurizacin del Sustrato
La pasteurizacin del sustrato es importante para evitar posible desarrollo de algn
microorganismo presente en el sustrato que pueda competir con el hongo P. ostreatus, por tal
razn este proceso es clave para el xito del cultivo. Para la pasteurizacin (Figura 4), se
utilizaron estanes de metales con un aproximado de 15 % de agua con respecto al volumen
total del estaon (calderas), esto con el fin de que el vapor del agua calentado por medio de
madera pasteurice el sustrato contenido en ello, proceso que llev alrededor de 3 horas donde
logr elevar la temperatura interna a 90
o
C, la cual fue medida por medio de un termmetro de
suelo.

Figura 4. Proceso de la pasteurizacin de los sustratos.
3.6 Inoculacin de los Sustratos
La actividad seguida de la pasteurizacin consiste en la inoculacin de los sustratos
pasteurizado, estos, se inocularon con el spawn preparado anteriormente en el laboratorio con
21 das de preparacin previa, almacenadas a temperatura de ambiente (26
o
C a 28
o
C). Cada
unidad experimental o bolsas de sustrato fueron inoculadas con el spawn a razn de 2 % a 3 %
del peso del sustrato pasteurizado. El algodn que tapaba el orificio del tubo PVC fue quitado
para la incorporacin del spawn de semilla de sorgo colonizado por el micelio de hongo,
quedando as esta semilla por encima del sustrato donde el hongo empieza la fase de
colonizacin, al finalizar la inoculacin se procede nuevamente a tapar el orificio con la misma
porcin de algodn.
Durante el proceso de inoculacin se utilizaron guantes, mascarilla, mechero y una tijera
debidamente esterilizadas con alcohol al 70 %, siendo este un proceso que necesita de la
mayor asepsia posible para evitar cualquier fuente de contaminacin.
Hongo Ostra
12
3.7 Colonizacin y Fructificacin
La metodologa y condiciones de la fase de colonizacin y fructificacin se describirn segn la
prueba, debido a que para la obtencin de resultados se realizaron dos experimentos en
diferentes tiempos que a continuacin se detallan.
3.7.1 Primera Prueba
Se realizo una primera prueba de los tratamientos para tomar los primeros datos a analizar. Y
adems, tomando en cuenta los resultados de la primera prueba se diseo el experimento de la
segunda prueba. Para ello, se tomaron en cuenta los siguientes factores.
Niveles de suplementacin orgnica e inorgnica.
Comportamiento del nitrato de amonio como factor de contaminacin de otros tipos de
hongos.
Dosis de agua utilizada en el momento de la mezcla del sustrato para una humedad
aproximado de 70 %.
La primera prueba consisti en la evaluacin del sustrato de bagazo de caa no composteado
en 4 niveles de concentracin de nitrato de amonio y 4 niveles de semolina de arroz (Cuadro 3),
mas el control (sin suplementacin) siendo en total 9 tratamientos con 6 repeticiones.
Desarrollando un diseo experimental de bloques completamente al azar. Siendo la unidad
experimental una bolsa con 1000 g de sustrato hmedo. El anlisis de los resultados se realiz
con la ayuda de un software estadstico, en la que se incluy un anlisis de varianza para
determinar diferencias significativas entre medias utilizando la prueba de Tukey (Grupo InfoStat,
2009).
Esta primera prueba fue realizada en el cuarto de produccin de hongos de la Finca Orgnica
de la Universidad EARTH. En dicho lugar fueron colocadas las bolsas para el proceso de
colonizacin hasta la cosecha.
Ya con el sustrato debidamente inoculado, las bolsas fueron colocadas al cuarto de
colonizacin donde se brindaron las condiciones apropiadas de luz, temperatura y humedad. La
temperatura se mantuvo a lo largo del periodo de colonizacin aproximadamente entre 25
o
C a
30
o
C, y con una humedad relativa alrededor del 75 %. Estas condiciones permite la
colonizacin adecuada del hongo del gnero Pleurotus, ya que se desarrolla a una temperatura
entre 0
o
C a 35
o
C y un optimo de 30
o
C. Por otro lado, este hongo se desarrolla a una humedad
entre 60 % a 100 %, aunque la humedad optima encontrada para este gnero es de 85 % a 100
% (Snchez y Royse, 2001).
En promedio el tiempo de colonizacin de los sustratos fue llevado a cabo durante 20 das.
Despus de este perodo de tiempo, las bolsas fueron colocadas en el cuarto que cuenta con
sistema de riego, la cual fue importante para regular la temperatura y humedad durante la fase
de desarrollo de primordios y produccin. La temperatura medida a travs de un termmetro de
mnimos y mximos (Anexo 1) mostr una temperatura que va desde 25
o
C a 28
o
C y una
Hongo Ostra
13
humedad relativa muy variada que va desde los 80 % al 100 %, tomando en cuenta que el
sistema de riego se activaba durante 15 a 30 minutos, dos veces por da.
Cuadro 3. Tratamientos de la primera prueba del bagazo de caa con suplementacin orgnica
e inorgnica.
Tratamiento Componentes del sustrato de bagazo de caa no composteado
T1 (control) Bagazo de caa de azcar + sin suplemento
T2 Bagazo de caa de azcar + 0,5 % de NH
4
NO
3

T3 Bagazo de caa de azcar + 1 % de NH
4
NO
3

4
NO
3

4
NO
3

T6 Bagazo de caa de azcar + 5 % de Semolina de arroz
3.7.2 Segunda Prueba
Segn los resultados generados en la primera prueba de esta evaluacin, se realiz una
segunda prueba tomando en cuenta las variables y factores analizados anteriormente. La
segunda prueba consisti en 14 tratamientos con 7 repeticiones cada uno, tal como se puede
apreciar en el Cuadro 4. En este experimento se utilizaron 4 niveles de suplementacin
correspondientes a materiales orgnicos e inorgnicos, utilizando para ello 0 %, 10 %, 15 % y
20 % de semolina de arroz y 0 %, 0,5 %, 1 % y 1,5 % de nitrato de amonio, respectivamente,
siendo estos porcentajes en base al peso seco del bagazo de caa.
A diferencia de la primera prueba, esta segunda vara en que cada tratamiento se evalu el
bagazo en dos diferentes condiciones, siendo el primero en un sustrato composteado y el
segundo en un sustrato no composteado.
Esta segunda prueba fue hecha en un cuarto diferente a la primera prueba; esta fue, bajo las
instalaciones hecha de madera y cubierta con material de sarn, ubicada en el jardn de plantas
ornamentales de la Universidad EARTH.
La temperatura y humedad del cuarto de produccin durante la fase de colonizacin estuvo
entre 24
o
C a 32
o
C y de 80% a 95 % de humedad relativa. Esta fase de colonizacin dur en
promedio 18 das. Enseguida de esta fase, al mismo cuarto se le dio las condiciones de
temperatura y humedad adecuada para el inicio de la productividad. En la fase de cosecha la
temperatura estaba entre 23
o
C a 32
o
C, y una media de 29
o
C, mientras la humedad relativa
variaba de 75 % a 100 %. Estas condiciones ambientales se aproximan del rango recomendado
por Snchez y Royse (2001), donde el rango de temperatura para Pleurotus es de 0
o
C a 35
o
C,
y una humedad entre 85 % a 100 %.Tanto la temperatura como la humedad fue medida a
travs de un lector de temperatura y humedad modelo TH4-7F, de la marca DICKSON
(Anexo 2).
Hongo Ostra
14
Cuadro 4. Tratamientos de la segunda prueba del bagazo de caa con suplementacin
orgnica e inorgnica.
Tratamiento Componentes del sustrato de bagazo de caa composteado
T1 (Control 1) Bagazo de caa de azcar + sin suplemento
4
NO
3

4
NO
3

4
NO
3

Tratamiento Componentes del sustrato de bagazo de caa no composteado
T8 (Control 2) Bagazo de caa de azcar + sin suplemento
4
NO
3

4
NO
3

4
NO
3
3
3.8 Recoleccin de Datos y Criterios de Evaluacin
Los indicadores para determinar el efecto de los factores sobre los tratamientos son las
siguientes variables: porcentaje de contaminacin del sustrato, tiempo de colonizacin del
sustrato y la eficiencia biolgica (rendimiento en peso del hongo comestible sobre el peso seco
del sustrato pasteurizado)
La recoleccin de los datos se realiz durante la fase de colonizacin y fructificacin del hongo,
los datos recolectados para este proyecto se encuentran las siguientes variables:
Colonizacin de los sustratos por tratamiento (%)
Contaminacin de los sustratos (%)
Eficiencia biolgica (%)
Para la eficiencia biolgica, se utiliz la siguiente ecuacin para su determinacin:
Eficiencia biologica (%) =j
RcndImIcnto totaI (g)
Pcso scco dcI sustrato pastcurIzado (g)
[ 1uu (1)

Hongo Ostra
15
4 Resultados y Discusin
4.1 Resultados de la Primera Prueba
Los resultados obtenidos de la primera prueba fueron principalmente de la eficiencia biolgica
de cada uno de los tratamientos y repeticiones (Cuadro 3), Los resultados obtenidos fueron
convertidos a eficiencia biolgica segn la Ecuacin 1.
Cuadro 5. Eficiencia biolgica de los tratamientos.
Tratamiento Componentes del sustrato de bagazo de caa sin compostear
E. B.
(%)
T1 Bagazo de caa de azcar + sin suplemento
0,00
4
NO
3

0,00
4
NO
3

C
4
NO
3

C
4
NO
3

C
30,93
44,15
60,67
47,34
Tratamiento contaminado.
Los resultados mostrados en el Cuadro 5 son las cosechas realizadas en un perodo de 30
das. Adems, el perodo de cosecha se inici 2 semanas despus de la colonizacin de los
sustratos. Los tratamientos T3, T4, y T5 que consiste en los niveles altos de nitrato de amonio
tuvieron una contaminacin en un 100 %, principalmente del hongo Trichoderma sp y
Neurospora spp., dicha contaminacin fue observada entre la primera y segunda semana de
haber inoculado los sustratos, por lo tanto estos tratamientos fueron retirados del cuarto de
produccin, por esta razn no hubo cosecha en estos tratamientos.
En el Cuadro 5 se observan las variaciones de eficiencia biolgicas entre tratamientos, es
notable segn esta grfica, la no presencia de produccin de los tratamientos 1 y 2, que
corresponden a 0 % y 0,5 % de suplemento inorgnico (nitrato de amonio). Ambos tratamientos
tuvieron una colonizacin total, con cero contaminacin. Sin embargo, durante el tiempo de
toma de datos, estos tratamientos no tuvieron produccin de hongos.
Segn Snchez y Royse (2001), la relacin de carbono nitrgeno del bagazo de caa es de
314:1, y el optimo para el hongo ostra es de 40:1. Por lo tanto, al no haber suplementado el
bagazo de caa o suplementar con nitrato de amonio un nivel bajo (0,5 %), siendo estos
suplementos para enriquecer el contenido de nitrgeno en el sustrato y mejorar las relacin
carbono nitrgeno, estos tratamientos pudieron no haber mejorado estas condiciones, dando
como resultado dificultades para el desarrollo de primordios y por ende las produccin de
hongos en el sustrato.
Hongo Ostra
16

Figura 5. Eficiencia biolgica de los tratamientos evaluados en la primera prueba.
Por otro lado, los tratamientos de 6 a 9, que corresponden a los sustratos con suplementacin
orgnica (semolina de arroz), presentaron variaciones en eficiencia biolgica segn se muestra
en el Cuadro 5. Adems, estos mismos valores se pueden apreciar de mejor manera en la
Figura 5, donde los tratamientos 1 a 5 no presentan ninguna barra en la grafica debido a que no
hubo produccin en estos, mientras los tratamientos 6 en adelante presentan claramente su
produccin expresado en eficiencia biolgica. Sin embargo, el anlisis estadstico entre los
tratamientos 6 a 9 (Cuadro 6), indica que no existen diferencias significativas de las medias de
los tratamientos, ya que el anlisis de varianza indica que el valor p de los tratamientos es
mayor a 0,05 (p > 0,05).
Cuadro 6. Anlisis de varianza (SC tipo III) de la eficiencia biolgica de la primera prueba.
F.V. SC gl CM F p-valor
Modelo 1975,90 8 246,99 0,34 0,9385
Tratamiento 998,76 3 332,92 0,45 0,7196
Repeticin 977,15 5 195,43 0,27 0,9251
Error 11046,01 15 736,40
Total 13021,91 23
Grupo InfoStat (2009).
A partir de los resultados de la primera prueba se concluye lo siguiente:
Segn los resultados de los tratamientos T3, T4 y T5, que son suplementados por altas
concentraciones de nitrato de amonio pudo haber influido en el 100 % de la contaminacin
del sustrato.
El factor pasteurizacin, en este caso no se considera haber influido en la contaminacin,
debido a que este factor fue constante en cada una de los tratamientos, y por no haber
Hongo Ostra
17
encontrado contaminacin en los dems tratamientos, se omite el efecto de esto en el
resultado sobre la contaminacin. Adems, Quimio et al. 1990., indica una duracin de
pasteurizacin de 4 a 6 horas, con una temperatura de 65
o
C, de tal forma que, la
temperatura de 90
o
C durante ms de 3 horas que se le dio al sustrato utilizado en esta
prueba, pudo haber sido suficiente para la descontaminacin.
Adems, en esta primera prueba la aplicacin del nitrato de amonio en el sustrato no fue
hecha en dilucin con agua, sino fue aplicada en forma de grano en el material, por lo tanto
se considera que no se logr una mezcla totalmente homognea en el sustrato, es decir,
que fue posible que en algunas partes de la mezcla tuvieron altas concentraciones de nitrato
de amonio que pudo haber influido en el crecimiento de otros microorganismos, adems
estos tipos de suplementos pueden causar calentamiento en el sustrato y la contaminacin
del mimo (CAS, 2003).
A partir de la contaminacin de los tratamientos mencionados, en la segunda prueba se
tom los niveles 0,5 %, 1 % y 1,5 % de nitrato de amonio para realizar la segunda
evaluacin de estos tratamientos, de esta manera el 2 % de nitrato amonio que es el nivel
ms alto de este material fue excluido del experimento.
Tambin a partir de estos resultados, la aplicacin del nitrato de amonio en la segunda
prueba se realiz por medio de la dilucin de este suplemento inorgnico en agua, con el fin
de ver el efecto de una mayor homogenizacin del nitrato de amonio en el sustrato.
Parte de los tratamientos y mtodos considerados en la segunda prueba se debe a los
resultados obtenidos en esta primera prueba.
4.2 Resultados de la Segunda Prueba
En la segunda prueba, el bagazo de caa composteado durante un perodo de 6 das tuvo un
cambio de pH de 6,04 a 5,80. De acuerdo con Snchez y Royse (2001), Los resultados estn
dentro del rango ptimo de pH requerido por el gnero Pleurotus, que va de un pH de 6 a 7.
El pH de la mezcla de los sustratos de cada tratamiento fue determinado antes de la inoculacin
del hongo y despus de la cosecha. Los resultados obtenidos indican que el pH de todos los
tratamientos se situaron entre los 5,5 a 6,1. Tomando en cuenta lo recomendado por Snchez y
Royse (2001), estos valores estn dentro del rango optimo; Adems, el hongo puede tambin
tolerar un rango mayor a este, que est entre 4 y 7 (Snchez y Royse, 2001). De tal manera,
que este factor no tuvo efecto sobre la colonizacin y fructificacin del hongo en ninguno de los
tratamientos.
Una de las variables a evaluar tal como se describi anteriormente, es la colonizacin de los
sustratos, del cual en esta segunda prueba se encontraron resultados de colonizacin a los 6
das y 12 das despus de inoculacin o de haber iniciado el proceso de colonizacin. As
tambin, la contaminacin de las repeticiones en los tratamientos fueron evaluados, y el
rendimiento de la produccin de hongo en el sustrato representado en porcentaje de eficiencia
Hongo Ostra
18
biolgica (% E.B.) fue determinado para cada uno de los tratamientos. Los resultados de las
variables mencionados se observan en el Cuadro 7, segn tratamiento y variable.
Cuadro 7. Resultados de las variables medidos durante el perodo de evaluacin de los
tratamientos.
Tratamiento
Colonizacin A
los 6 das (%)
Colonizacin a los 12
das (%)
Contaminacin
(%)
Eficiencia
biolgica
(%)
T1 (Control 1) 33,5 88,6 28,6
24,10
T2 37,7 76,6 28,6
30,70
T3 38,2 93,4 28,6
43,62
T4 30,5 81,0 0,0
38,77
T5 45,7 98,1 0,0
30,11
T6 41,9 86,5 14,3
40,85
T7 35,7 85,5 0,0
41,67
T8 (Control 2) 37,4 77,7 14,3
15,70
T9 36,8 83,9 14,3
46,60
T10 33,9 73,8 0,0
36,75
T11 22,1 61,0 14,3
26,21
T12 28,9 75,8 0,0
28,52
T13 35,8 71,4 0,0
32,77
T14 31,6 74,3 28,6
50,48
4.2.1 Colonizacin de los tratamientos
A los 6 das y 12 das de haber inoculado los tratamientos con el hongo ostra, se procedi a la
toma de datos para determinar el porcentaje de colonizacin de cada repeticin, dando los
resultados mostrados en el Cuadro 7, as tambin la colonizacin se puede observar en la
Figura 6.
El tiempo en promedio encontrado para todos los tratamientos incluyendo el sustrato
composteado y no composteado fue de 18 das, despus de este perodo los tratamientos
fueron manejados segn la condiciones de la fase de fructificacin.
Hongo Ostra
19

Figura 6. Colonizacin de los tratamientos evaluados a los 6 y 7 das despus del inicio de la
colonizacin o spawn run.
En la Figura 6, estn distribuidos todos los tratamientos, incluyendo los diferentes niveles de
suplementacin orgnica e inorgnica, y tambin los tratamientos composteados y no
composteados. Adems, la grafica muestra los resultados del porcentaje de colonizacin a los 6
y 12 das despus de la inoculacin del hongo.
Tanto a los 6 das como a los 12 das, los tratamientos varan entre s en cuanto al porcentaje
de colonizacin. Sin embargo, para visualizar diferencias estadsticas significativas entre
tratamiento, fue necesario realizar un anlisis de varianza para su determinacin.
Segn los anlisis de varianza para los tratamientos composteados (Cuadro 8), el valor de p
es mayor a 0,05 (p > 0,05), por lo que se considera que no existe estadsticamente diferencias
significativas en el porcentaje de colonizacin entre los tratamientos evaluados a los 6 das.
Esto indica que las condiciones tanto ambientales como de manejo fueron homogneos para
todos los tratamientos. Y que adems, el factor suplementacin tuvo un efecto igual en los
diferentes niveles aportados.
Cuadro 8. Anlisis de varianza (SC tipo III) para la variable colonizacin a los 6 das de los
tratamientos composteados.
Modelo 3070,46 12 255,87 0,92 0,5365
Tratamiento 1086,22 6 181,04 0,65 0,6884
Repeticin 1984,24 6 330,71 1,19 0,3333
Error 9998,22 36 277,73
Total 13068,68 48
Hongo Ostra
20
El porcentaje de colonizacin a los 12 das despus de la inoculacin del hongo de los
tratamientos composteados, no tuvieron diferencias estadsticamente significativas, ya que
segn el Cuadro 9, el valor de p es mayor a 0,05 (p > 0,05).
Cuadro 9. Anlisis de varianza (SC tipo III) de la colonizacin a los 12 das de los tratamientos
composteados.
Modelo 4784,48 12 398,71 1,51 0,1654
Tratamiento 2192,03 6 365,34 1,38 0,2474
Repeticin 2592,45 6 432,07 1,64 0,1653
Error 9499,89 36 263,89
Total 14284,37 48
El Cuadro 10 muestra el anlisis de varianza de la colonizacin a los 6 das para los
tratamientos no composteados, encontrando un valor de p mayor a 0,05 (p > 0,05), indicando
de esta manera que no existe diferencias estadsticamente significativas del porcentaje de
colonizacin entre tratamientos a los 6 das de colonizacin. Por lo tanto se considera que los
tratamientos composteados en esta prueba aportaron las mismas condiciones al hongo para su
desarrollo durante la fase de colonizacin.
Cuadro 10. Anlisis de varianza (SC tipo I) para la variable colonizacin a los 6 das de los
tratamientos no composteados.
Modelo 3891,71 12 324,31 1,50 0,1720
Tratamiento 1109,97 6 185,00 0,86 0,5366
Repeticin 2781,74 6 463,62 2,15 0,0733
Error 7347,02 34 216,09
Total 11238,73 46
Por otro lado, los porcentajes de colonizacin a los 12 de das de los tratamientos no
composteados tambin fueron evaluados por un anlisis de varianza (Cuadro 11), dando un
valor de p mayor a 0,05 (p > 0,05). Por lo tanto, se considera que estadsticamente no hay
diferencias significativas entre los tratamientos para esta variable.
Cuadro 11. Anlisis de varianza (SC tipo III) para la variable colonizacin a los 12 das de los
Modelo 6120,34 12 510,03 1,97 0,0594
Tratamiento 1858,06 6 309,68 1,20 0,3306
Repeticin 4262,28 6 710,38 2,75 0,0275
Error 8782,08 34 258,30
Total 14902,42 46
Hongo Ostra
21
4.2.2 Contaminacin de los tratamientos
La contaminacin se evalu entre la semana 1 y 2 despus del inicio de la colonizacin del
hongo, es representado por medio de la Figura 7, donde se pueden observar los 14
tratamientos, incluyendo el tratamiento control del bagazo de caa composteado y el control del
bagazo de caa no composteado.

Figura 7. Contaminacin de los tratamientos a los 15 das del inicio de la colonizacin.
Segn la Figura 7, los tratamientos T1 control (tratamiento composteado sin suplementacin),
T2 y T3, tuvieron el porcentaje de contaminacin ms alto, que corresponde a un 28 % (2 de 7
repeticiones) de contaminacin, mientras que los tratamientos T6, T8 control 2, T9 y T11
tuvieron una sola contaminada, es decir un 14 % de contaminacin en estos tratamientos.
La contaminacin en esta segunda prueba no presenta el mismo efecto de contaminacin como
en la primera prueba, ya que en este caso el porcentaje de contaminacin para los tratamientos
contaminados fueron menores; adems, la contaminacin ocurri tanto en tratamientos
suplementados con nitrato de amonio, as como en tratamientos suplementados con semolina
de arroz. A diferencia de la primera prueba, donde la contaminacin ocurri en un 100 %
nicamente en los tratamientos suplementados con nitrato de amonio.
Una de las razones por la cual se cree que los tratamientos con nitrato de amonio no tuvieron
altos porcentajes de contaminacin y que adems en esta segunda prueba la contaminacin
ocurri tambin en la suplementacin orgnica, es que en esta prueba, a diferencia de la
primera, se aplic el nitrato de amonio en solucin con agua. Por lo tanto, realizando este
proceso, el nitrato de amonio tuvo una mejor distribucin en el sustrato, evitando de esta
Hongo Ostra
22
manera altas concentraciones en partes especficas del sustrato y por ende se evita el
calentamiento de esas zonas de acumulacin, impidiendo as, posibles contaminaciones del
sustrato (CAS, 2003).
Por otro lado, es importante mencionar que el proceso de pasteurizacin que se le dio a cada
tratamiento, fue homogneo y suficiente, debido a que en este proceso se logr una
temperatura alrededor de 90
o
C, durante un periodo de 3 o 4 horas, siendo una temperatura
adecuada ya que est por encima de lo recomendado por Quimio et al., 1990, donde
recomiendan de 4 a 5 horas y una temperatura mayor a 65
o
C.
4.2.3 Eficiencia biolgica de los tratamientos
En la eficiencia biolgica se tomo en cuenta la ecuacin que considera el peso seco del sustrato
y el peso de la produccin del hongo (Ecuacin 1) El resultado encontrado est descrito para
cada uno de los tratamientos en el cuadro 8 y representados en la Figura 8. En esta ltima, se
observan grficamente las medias de las 7 repeticiones de cada tratamiento, mostrando de esta
manera variaciones entre tratamientos. Sin embargo, fue necesario el anlisis estadstico para
determinar diferencias significativas.

Figura 8. Eficiencia biolgica de los tratamientos composteados y no composteados.
Se realiz el anlisis de varianza de los tratamientos composteados y no composteados en los
diferentes niveles de suplementacin con nitrato de amonio y semolina de arroz. Sin embargo,
se realiz un anlisis de varianza por aparte para todos los tratamientos composteados y por
aparte los tratamientos no composteados.
Hongo Ostra
23
Para el caso de los tratamientos composteados, el anlisis de varianza descrita en el
Cuadro 12, demuestra un valor de p mayor a 0,05 (p > 0,05). Por lo tanto, considerando este
resultado, los tratamientos con diferentes niveles de suplementacin con nitrato de amonio y
semolina de arroz con un proceso de compostaje, no presentan diferencias estadsticamente
significativas.
Cuadro 12. Anlisis de varianza (SC tipo I) para la variable eficiencia biolgica para los
tratamientos composteados.
Modelo 7353,55 12 612,80 2,94 0,0087
Tratamiento 1770,22 6 295,04 1,42 0,2427
Repeticin 5583,33 6 930,55 4,46 0,0026
Error 6046,67 29 208,51
Total 13400,22 41
Segn el anlisis estadstico para la variable eficiencia biolgica para los tratamientos no
composteados (Cuadro 13), existen diferencias estadsticas entre los tratamientos evaluados,
ya que para los resultados de los tratamientos se encontr un valor de p mayor a 0,05 (p >
0,05), indicando de esta forma que existe al menos un tratamiento con diferencia
estadsticamente significativa con otros tratamientos.
Cuadro 13. Anlisis de varianza (SC tipo I) para la variable eficiencia biolgica para los
Modelo 5608,21 12 467,35 1,91 0,0710
Tratamiento 5004,79 6 834,13 3,41 0,0102
Repeticin 603,41 6 100,57 0,41 0,8658
Error 7819,96 32 244,37
Total 13428,17 44
A partir del resultado encontrado segn el Cuadro 13, el cual indica que existe diferencia
estadsticamente significativa entre los tratamientos evaluados para la variable eficiencia
biolgica, se hizo un anlisis de varianza para las medias para determinar cual o cuales
tratamientos fueron estadsticamente diferentes.
De acuerdo a los resultados mostrados en el Cuadro 14, del anlisis de varianza de las medias
de la variable eficiencia biolgica, indica que existe diferencias estadsticamente significativas
entre el tratamiento T8 con los tratamientos T9 y T4, mientras entre los tratamientos restantes
no existe diferencias significativas.
Hongo Ostra
24
Cuadro 14. Anlisis estadstico de las medias (Test: Tukey) de la eficiencia biolgica de los
Tratamiento Medias n
T8 15,70 6 A
T11 26,21 7 A B
T12 28,52 7 A B
T13 32,77 7 A B
T10 36,75 7 A B
T9 46,60 6 B
T14 50,48 5 B
Letras distintas indican diferencias significativas (p<= 0,05).
El T8 corresponde al tratamiento con sustratos no composteados y con 0 % de suplementacin
(control), que aunque este tratamiento no tuvo diferencias significativas con los dos tratamientos
con niveles ms altos de nitrato de amonio (1,0 % y 1,5 %) y tampoco con los dos tratamientos
con los niveles ms bajo de semolina de arroz (10 % y 15 %), si lo tuvo con el tratamiento con el
nivel ms bajo de nitrato de amonio (0,5 %) y con el nivel ms alto de semolina de arroz (20 %).
Con estas diferencias estadsticamente significativas encontradas, se analizan algunos posibles
factores que afectaron los tratamientos para este resultado. Para ellos es importante recordar
que altos contenidos de suplementos inorgnicos pueden causar otros efectos, principalmente
el sobrecalentamiento del sustrato (CAS, 2003). Este efecto pudo haber influido en los
tratamientos evaluados, ya que los tratamientos con mayor contenido de nitrato de amonio no
dieron mayores rendimientos, tomando en cuenta que el menor nivel de suplemento si logr un
mayor resultado.
Por otro lado, los tratamientos con semolina de arroz (suplemento orgnico) tuvo mayor efecto y
con diferencias estadsticamente significativa con el control (sin suplementacin), en este caso
el efecto fue contrario a la de nitrato de amonio, ya que fue el tratamiento con mayor nivel de
suplementacin (20 %) el que tuvo diferencia con el control. Indicando de esta forma que el
suplemento orgnico puede comportase de manera diferente con respecto a suplementos
inorgnicos en cuanto a los rendimientos del hongo.
4.2.4 Eficiencia biolgica entre los tratamientos composteados y no composteados
Tomando los mismos promedios de la eficiencia biolgica de los tratamientos evaluados
(Cuadro 7), se calcul el promedi general de los tratamientos composteados y no
composteados, dando como resultado un promedio de 36,92 % de eficiencia biolgica para los
tratamientos composteados, siendo este un valor mayor a 33,10 % de eficiencia biolgica que
corresponde al promedio de los tratamientos no composteados (Cuadro 15).
Hongo Ostra
25
Cuadro 15. Promedio de la eficiencia biolgica de los tratamientos composteados y no
composteados.
Tratamiento Eficiencia biolgica (%)
Composteado 36,92
no composteado 33,10
Para los tratamientos composteados y no composteados, se procedi a realizar el anlisis de
varianza (Cuadro 16), dando como resultado que para los tratamientos el valor de p es mayor
a 0,05 (p > 0,05), determinando de esta manera que no existe diferencias entre ambos
tratamientos, por lo que se considera que el efecto de los 6 das de compostaje no tuvo
mayores efectos estadsticos sobre el rendimiento del hongo, aun cuando este diera una
eficiencia mayor a la eficiencia de los sustratos sin ningn proceso de compostaje.
Cuadro 16. Anlisis de varianza (SC tipo I) de la eficiencia biolgica de los tratamientos
composteados y no composteados.
Modelo
19121,08 47 406,83 1,98 0,0154
Tratamiento
317,94 1 317,94 1,55 0,2213
Repeticin
18803,14 46 408,76 1,99 0,0151
Error
8025,25 39 205,78
Total
27146,33 86
Tomando en cuenta estos resultados y segn lo que mencionan Chang y Quimio (1982) que los
sustratos composteados pueden mejorar el rendimiento del hongo, y para el caso del bagazo de
caa este puede ser o no composteado. No existe en realidad necesidad de compostear este
material, ya que tambin esto implica costos en mano de obra y materiales. Aunque es
importante considerar que el proceso de compostaje puede recibir otro tipo de manejo para
mejorar los diferentes contenidos y condiciones del sustrato, principalmente en la relacin de
carbono nitrgeno, ya que este componente del sustrato es mejorado cuando se le hace un
proceso de compostaje, teniendo a principio un valor alto y logrando obtener al final del proceso
una relacin ms baja (Vedder, 1991).
4.3 Conclusiones y Recomendaciones Finales
Los resultados de la variable eficiencia biolgica de los tratamientos no composteados en la
primera prueba con la segunda prueba, fueron diferentes, ya que en la primera no hubo ningn
tratamiento estadsticamente diferente y significativo, mientras en la segunda prueba si
hubieron diferencias significativas, por lo que indica que esta diferencia entre pruebas puede
haber sido por el manejo de algn factor determinante como; mtodo de aplicacin de los
suplementos, calidad de la semilla de hongo, calidad del bagazo de caa o las diferencias entre
Hongo Ostra
26
condiciones climticas (temperatura y humedad). Por lo tanto, se recomienda seguir realizando
pruebas con los mismos tratamientos evaluados en la segunda prueba
La contaminacin que es un factor importante para lograr rendimientos altos en la produccin
de hongos, fueron evaluados en las dos pruebas realizadas. En la primera prueba el nitrato de
amonio mostr un efecto directo sobre la contaminacin de los sustratos. Sin embargo, se
considera que el mtodo de aplicacin de este suplemento no fue la ms apropiada, ya que al
realizar la segunda prueba, el nitrato de amonio fue diluido en agua antes de aplicarlo, dando
este mtodo mejores resultados, de tal manera que se recomienda para otras pruebas, el uso
del nitrato de amonio en dilucin con agua, para lograr una mayor homogeneidad en el sustrato.
Se recomienda utilizar un 20 % de semolina de arroz como suplemento orgnico, ya que los
resultados de la segunda prueba para los tratamientos no composteados el tratamiento con
este porcentaje de semolina de arroz dio el mayor promedio de eficiencia biolgica y
estadsticamente diferente a los dems tratamientos, con excepcin al tratamiento con 0,5 % de
nitrato de amonio.
El compostaje da mayor rendimiento (36,92 % de E. B.) que el sustrato no composteado (33,10
% de E. B.). Sin embargo, no es significativamente diferente segn el anlisis estadstico, por lo
cual, se recomienda continuar realizando pruebas con estos tratamientos con el fin de seguir
analizando mayores resultados.
Un alto contenido de nitrato de amonio puede arriesgar a generar efectos secundarios en el
sustrato, principalmente en la contaminacin de los sustratos. Adems, menor concentracin de
este suplemento, es capaz de mejorar el rendimiento que los niveles altos. Por otro lado, en la
segunda prueba donde los tratamientos no fueron composteados, el contenido alto de semolina
de arroz (20 %) logr buenos resultados a pesar de haber encontrado uno de los niveles altos
de contaminacin (28,6 %) con relacin a los otros tratamientos con semolina.
De tal manera que es posible realizar combinaciones de suplementos (orgnicos con
inorgnicos) para mejorar las condiciones y disponibilidad de nutrientes en el sustrato, por lo
que se recomienda realizar estas pruebas como parte del objetivo que trata de incrementar el
rendimiento del hongo ostra, utilizando el bagazo de caa, como materia reutilizable con un
gran potencial para su uso en el cultivo de hongos comestibles.

Hongo Ostra
27
5 Lista de Referencias Bibliogrficas
Arias, N. y Flores, JC. 2006. Efecto de microorganismos eficaces (EM) sobre la produccin de
hongo ostra Pleurotus ostreatus (Agaricales: tricholomataceae) a partir de remanentes
agrcolas. [Proyecto de Graduacin Lic. Ing. Agr.], Gucimo (CR) : Universidad EARTH. 55
p.
CAS (College of Agricultural Sciences, US). 2003. Cultivation of oyster mushrooms [en lnea].
Estados Unidos de Amrica [consultado 4 agosto 2009], 11 p. Disponible en el World Wide
Web: < http://pubs.cas.psu.edu/freepubs/pdfs/UL207.pdf>
Chaves Solera, M. 2008. Uso de la caa de azcar como forraje [en lnea]. Costa Rica
[consultado 5 junio 2009], 12 p. Disponible en el World Wide Web:
<http://www.corfoga.org/images/public/documentos/pdf/uso_cana_azucar_como_forraje.pdf
>
Chang, S. y Quimio, T. 1982. Tropical mushrooms: biological nature and cultivation methods. 1a
ed. Hong Kong (HK) : Chinese University Press. 493 p. ISBN 962-201-264-7.
Chang, S.; Buswell, JA. y Chiu, S. 1993. Mushroom biology and mushroom products. 1
a
ed.
Hong Kong (HK) : The Chinese University Press. 370 p. ISBN 962-201-610-3.
Grupo InfoStat. 2009. InfoStat, versin 2009: software estadstico [programa de computacin].
Crdoba (AR): Universidad Nacional de Crdoba. Disponible para descarga en
<http://www.infostat.com.ar/>
Quimio, T.; Chang, S. y Royse, D. 1990. Technical guidelines for mushroom growing in the
tropics. 1a ed. Roma (IT) : FAO. 155 p. ISBN 92-5-103026-x.
Moda, EM.; Horii, J. y Fillet Spoto, MH. 2005. Edible mushroom Pleurotus sajor-caju production
on washed and supplemented bagasse. Sci. Agric [en lnea]. Abril, vol.62, no. 2 [Consultado
24 mayo 2009] p. 127-132. Disponible en el World Wide Web:
<http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0103-90162005000200006&script=sci_arttext>
Rodrguez Rosario, KJ. 2005. Eficacia del hongo Pleurotus ostreatus como Bio-rremediador de
suelos contaminados con metales pesados [Tesis Maestro en Ciencias en Biologa]. Puerto
Rico (PR) : Universidad de Puerto Rico. 83 p.
Rodrguez, G. 2007. Cultivo de hongos comestibles [en lnea]. Argentina [consultado 2 junio
2009]. 15 p. Disponible en el World Wide Web:
<http://www.inta.gov.ar/altovalle/info/biblo/rompecabezas/pdfs/fyd52_hongos.pdf>
Snchez, F. 1997. Produccin de Pleurotus ostreatus a partir de bagazo de caa, desecho de
palmito y paja de arroz [Proyecto de Graduacin Lic. Ing. Agr.] Gucimo (CR) : Universidad
EARTH. 40 p.
Snchez, J. y Royse, D. 2001. La biologa y el cultivo de Pleurotus spp. 1a ed. Chiapas (MX) :
ECOSUR. 290 p.
Stamets, P. 2000. Growing gourmet and medicinal mushrooms. 3a ed. Berkeley (US) : Ten
Speed Press. 574 p. ISBN 1-58008-175-7.
Vedder, P. 1991. Cultivo moderno del champin. Traducido por J. Galindo Martinez. 3 ed.
Madrid (ES) : Mundi-Prensa. 369 p. ISBN 84-7114-074-8.
Viteri, J. 2003. Produccin de hongos ostra (Pleurotus sajor-caju), a partir de remanentes
agroindustriales en el trpico hmedo [Proyecto de Graduacin Lic. Ing. Agr.] Gucimo (CR)
: Universidad EARTH. 47 p.
Hongo Ostra
28
Zadrazil, F. 1980. Influence of ammonium nitrate and organic supplements on the yield of
Pleurotus sajor caju (Fr.) Sing. European Journal of Applied microbiology and biotechnology.
[en lnea]. Septiembre, Vol. 9 [consultado 15 Junio 2009] p. 31-35. Disponible en el World
Wide Web: http://www.springerlink.com/content/ug70125867313850/
Hongo Ostra
29
6 Anexos
6.1 Anexo 1. Termmetro de Mximos y Mnimos Usado para la Medicin de la
Temperatura

6.2 Anexo 2. Medidor de Humedad y Temperatura Modelo TH4-7F, de la Marca
DICKSON Utilizado para la Medicin de la Humedad y Temperatura del Cuarto
de Produccin de Hongos

6.3 Anexo 3. Datos Utilizados para el Anlisis Estadstico de la Eficiencia
Biolgica (%) de los Tratamientos de la Primera Prueba
Tratamientos
Repeticiones
1 2 3 4 5 6
T6 29,60 40,80 50,52 64,68 45,60 48,20
T7 26,40 25,98 55,72 52,05 33,60 71,16
T8 76,78 73,92 106,80 21,60 34,09 50,82
T9 20,68 41,80 4,68 66,34 87,44 63,13
Hongo Ostra
30
6.4 Anexo 4. Datos Utilizados para el Anlisis Estadstico de la Colonizacin (%) a
los 6 Das de los Tratamientos Composteados de la Segunda Prueba
Tratamientos
Repeticiones
1 2 3 4 5 6 7
T1 42,1 50,0 18,2 18,2 40,0 30,9 34,8
T2 47,6 20,0 35,0 35,0 31,6 52,4 42,1
T3 0,0 10,0 42,1 55,0 50,0 50,0 60,0
T4 0,0 31,8 38,9 33,3 12,0 55,6 42,1
T5 75,0 36,8 21,1 35,0 37,5 44,4 70,0
T6 47,4 33,3 33,3 55,0 46,0 33,3 45,0
T7 30,0 63,6 0,0 31,8 40,9 38,1 45,5
los 12 Das de los Tratamientos Composteados de la Segunda Prueba
Tratamientos
Repeticiones
1 2 3 4 5 6 7
T1 100,0 100,0 90,9 61,8 90,0 100,0 77,4
T2 71,4 70,0 80,0 80,0 94,7 100,0 94,7
T3 73,7 100,0 100,0 100,0 80,0 100,0 100,0
T4 42,9 72,7 72,2 100,0 85,0 94,4 100,0
T5 100,0 100,0 91,6 100,0 100,0 100,0 95,0
T6 81,1 100,0 57,1 90,0 82,0 100,0 95,0
T7 85,0 100,0 63,6 54,5 95,5 100,0 100,0
los 6 Das de los Tratamientos No Composteados de la Segunda Prueba
Tratamientos
Repeticiones
1 2 3 4 5 6 7
T8 54,5 26,1 31,8 C 39,1 29,6 43,5
T9 61,9 30,0 29,4 10,0 46,7 36,0 43,5
T10 52,4 30,0 22,7 0,0 36,4 28,2 67,8
T11 0,0 31,8 26,1 0,0 48,7 26,1 C
T12 41,7 14,3 26,1 28,0 37,4 23,6 31,3
T13 58,3 18,2 63,6 27,3 25,0 27,2 31,3
T14 43,5 33,3 13,0 52,0 26,1 26,1 27,3
Hongo Ostra
31
los 12 Das de los Tratamientos No Composteados de la Segunda Prueba
Tratamientos
Repeticiones
1 2 3 4 5 6 7
T8 81,8 80,0 100,0 C 65,2 65,2 73,9
T9 95,2 92,0 100,0 35,0 100,0 65,0 100,0
T10 95,2 65,0 54,5 33,0 81,8 100,0 87,0
T11 47,3 56,4 76,5 36,0 78,3 71,3 C
T12 87,5 66,7 87,0 68,0 60,9 100,0 60,9
T13 77,1 75,5 59,1 68,2 87,5 76,0 56,5
T14 60,9 100,0 87,0 56,0 73,9 71,3 70,9
Sustratos eliminados por contaminacin.
6.8 Anexo 6. Datos Utilizados para el Anlisis Estadstico de la Eficiencia
Biolgica (%) de los Tratamientos de la Segunda Prueba
Tratamientos
Repeticiones
1 2 3 4 5 6 7
T1 18,00 C 15,54 C 25,00 37,82 35,00
T2 13,22 C 32,16 C 19,93 18,58 69,60
T3 C 40,00 C 61,37 11,62 41,40 68,35
T4 39,00 39,76 42,00 27,10 29,12 32,35 81,29
T5 19,56 27,71 26,04 23,16 27,00 20,01 69,39
T6 28,00 27,55 C 59,23 15,58 65,60 52,00
T7 38,00 42,00 49,92 46,20 20,91 65,52 29,10
T8 10,50 19,20 13,60 C 17,60 15,34 14,90
T9 48,80 43,60 56,80 C 46,00 11,05 70,31
T10 23,36 21,72 26,32 34,00 38,00 37,80 76,02
T11 20,20 20,40 29,50 32,50 29,50 28,40 23,00
T12 25,00 28,60 33,20 54,16 28,00 9,58 21,09
T13 32,00 34,20 34,00 23,87 23,36 45,48 36,44
T14 50,40 28,39 C 45,43 C 94,66 33,06
Sustratos eliminados por contaminacin.
Hongo Ostra
32
6.9 Anexo 7. Resultado de los anlisis de varianza de las variables evaluadas
Variable para el anlisis de varianza N R R Aj CV
Eficiencia biolgica de la primera prueba 24 0,15 0,00 54,62
Colonizacin a los 6 das de los tratamientos
composteados 49 0,23 0,00 44,34
composteados 49 0,33 0,11 18,65
no composteados 47 0,35 0,12 45,25
no composteados 47 0,41 0,20 21,67
Eficiencia biolgica para los tratamientos
composteados 42 0,55 0,36 39,11
Eficiencia biolgica para los tratamientos no
composteados 45 0,42 0,20 47,23
Eficiencia biolgica de los tratamientos
composteados y no composteados 87 0,70 0,35 41,05
6.10 Anexo 8. Test de tukey para las medias de la variable eficiencia biolgica de
los tratamientos no composteados
Variable Alfa DMS Error gl
Eficiencia biolgica de los tratamientos
no composteados 0,05 27,52295 244,3739 32

Efecto de La Suplementación Nitrogenada de Bagazo de Caña de Azucar Sobre El Incremento de Los Rendimientos Del Hongo Ostra

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