AISLAMIENTO DE ENTEROBACTERIAS

2010-35142

Aislar entero bacterias en medios adecuados y desarrollar y desarrollar la prueba de IMVIC

Estufa Autoclave Mechero bao Mara Asas bacteriolgicas Placas Petri con medios de cultivo (EBM, BPLS, VRBA, VRBA GLUCOSADO Y SS) Tubos con caldos de enriquecimiento Brilla y tetrationato inoculados. Medios de cultivo para la prueba de IMVIC.

Pamela Conde Pumarimay

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Sembrar en estra del Caldo Brilla al VRBA y EBM Sembrar en estra del caldo tetrationato al BPLS y SS De ambos caldos puede sembrar al VRBA Glucosado Luego de incubar a las temperaturas y tiempos adecuados realizar la prueba de IMVIC para una colonia representativa de E. coli.

LISTA DE PRUEBAS

Prueba de Indol:

Inocular en tubos con caldo peptonado o triptosa Incubar por 24 horas de 2 a 3 gotas de reactivo las paredes Dejar los tubos en reposo y observar la formacin de un anillo de color rojo negativo para el resultado positivo, o anillo color amarillo para el de kovacs por

Prueba del rojo de metilo:

Inocular los tubos conteniendo caldo MRVP Incubar a los tubos por 72 horas a 37C

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Despus de las 72 horas adicionar a 5 gotas de solucin rojo de metilo y agitar Anotar como el rojo de metilo positivo, la aparicin de un color roja y como negativo la aparicin de un color amarillo

Prueba de Vogues-Proskauer:
Inocular los tubos del caldo MRVP Incubar a 37 por 48 horas A 1 ml de cultivo aadir 0,6 ml de solucin de -naftol y 0,2 ml de solucin KOH al 40 % Agitar. Dejar reposar de 2 a 4 horas Reaccin positiva: coloracin rosada a carmes

Prueba de citrato:
Inocular los tubos de citrato de Simmons Incubar a 37C por 24 horas Anotar como positivo un crecimiento visible, acompaado de un cambio de color del verde al azul

EMB agar- eosina azul de metileno- lactosa - sacarosa:

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Colonias
Transparentes, de color ambarino Verdosas con brillo metlico a la

Microorganismos
Salmonela y Shigella luz Escherichia coli

reflejada, con el centro negro azulado a la luz transmitida Mas grandes que las de E. Coli mucosas, Enterobacter, klebsiella y otros confluentes, con el centro pardo grisceo a la luz transmitida

VRBA agar- violeta cristal-rojo neutro-bilis

Colonias
1-2 mm de dimetro Colonias como puntas de alfiler rosadas Incoloras

Microorganismos
lactosa positivas: Coliformes, E.coli Enterococos, eventualmente Klebsiella Enterobacterias lactosa negativas

Rojos con halo de precipitacin rojizo: de Enterobacterias

BPLS agar-verde brillante- rojo de fenol- lactosa sacarosa

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Colonias
Rojo-rosadas con halo rojo

Microorganismos
Lactosa negativos y sacarosa negativos, salmonella y otros

Verde

amarillentas

con

halo

verde Lactosa positivos o sacarosa positivos: e.coli, Citrobacter, Proreus vulgarius,

amarillento

Klebsiella y otros. No obstante a veces

inhibicin completa

SS agar para Salmonella y Shigella

Colonias
Incoloras, transparentes

Microorganismos
Shigella y la mayora de salmonella

Transparentes con centro negro Rosadas hasta rojas

Proteus y algunas salmonellas E. coli

Mayores que las de e. coli rosadas hasta Enterobacter aergenas

color cremoso-blanquecinas opacas y mucosas

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AISLAMIENTO DE ENTEROBACTERIAS Hay dos grupos:

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Lactosa +(gram -)
E.coli: Crece en el Caldo Brilla, consume lactosa y cambia a color verde

Lactosa (gram +)
Salmonella

cuando hay crecimiento, de verde

botella a verde claro y gas. Por 48 horas a 37C Aerobacter o citrobacter: Shigella

Se sembrara de la muestra fecal de nio sano sin enfermedades, en los cultivos siguientes:

BPLS
Muy comn no especifico

EMB
Colonias verdes De mayor inters, por 24 horas y a 37 C

SS
Como chiquitas transparentes rosadas o con colonias y

punto negro
Lactosa + Lactosa Crecen los dos

Lactosa +

Lactosa -

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Caldo peptonado triptfano : degrada y convierte en indol, cuando hay crecimiento de E. coli. Se le agrega reactivo de IMVIC: Prueba de Indol, metilo, goves y

kovacs y

tiene que resultar

citrato

un anillo rojo.

Los medios de cultivo ambos estuvieron por 24 a 48 horas a 37 C

EMB
Verde fosforescente por las e. coli, con cierto azulado

BPLS y SS
Verde brillante. No se detecto Salmonela

Pamela Conde Pumarimay

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Caldo

brilla:

Turbio,

Caldo

tetrationato:
de las lactosa ,

crecimiento de coliformes, formacin crecimiento de espuma y gas , las lactosa +

como la shigela.

Pamela Conde Pumarimay