Valeria Herrera-Lasso Regs

P03 RECUENTO CELULAR SANGUNEO

Objetivos de la prctica. Conocer el concepto de hemograma. Conocer los valores normales del hemograma. Conocer los mtodos bsicos de recuento celular. Realizar un recuento celular con la cmara de Neubauer y anotar los resultados. Conocer los valores patolgicos de Leucocitos y hemates y su importancia clnica. Familiarizarse con la nomenclatura de estos transtornos (anemia, poliglobulia, leucopenia y leucocitosis). Habilidades a adquirir.Realizar un recuento celular con cmara cuenta glbulos. Conceptos bsicos.El recuento celular es la determinacin del nmero de clulas sanguneas (hemates, leucocitos, plaquetas y reticulocitos) por unidad de volumen sanguneo. Se realiza tradicionalmente mediante mtodos pticos con cmara cuentaglbulos. Recuento de hemates.Mtodo ptico: se realiza una dilucin sangunea con una pipeta dilutoria y posterior recuento de las clulas con una cmara cuentaglbulos y un microscopio convencional. Material. Sangre capilar Lquido de dilucin (Solucin salina fisiolgica) Pipetas dilutorias o microcapilar calibrado Cmara cuentaglbulos Microscopio La pipeta dilutoria tiene una dilatacin proximal que permite realizar una dilucin 1/100. Si solo se enrasa la pipeta hasta 0,5 el valor de dilucin ser 1/200. La cmara de Neubauer.La cmara cuentaglbulos presenta un portaobjetos de vidrio grueso que lleva grabados en su superficie tres prismas paralelos. El prisma central est dividido en dos por un surco transversal. Sobre las dos mitades se han trazado unos retculos. Los dos prismas laterales estn elevados 0,1 mm con lo que al colocar un cubreobjetos queda constituido un espacio entre el prisma central y el cubreobjetos y es donde se colocar la muestra de sangre diluida para efectuar el recuento. El retculo de Neubauer delimita 400 cuadraditos pequeos con una superficie de 1/400 mm2.

Mtodo de recuento hemates.1. 2. 3. 4. 5. 6. Pinchar con la microlanceta. Se enrasa la pipeta hasta 0,5 con sangre del pulpejo del dedo pinchado. Se sigue aspirando con lquido de dilucin hasta el enrase. La dilucin conseguida ser 1/200 PBS. Se homogeniza el contenido del bulbo por agitacin suave y se desechan las 3 primeras gotas. Se procede al llenado de la cmara de Neubauer y se le aade el cubreobjetos. Habr capilaridad. Observacin por el microscopio. El recuento se realiza contando los hemates depositados sobre 80 cuadraditos pequeos, siguiendo 5 grupos de 16 cuadraditos. [16 x 5 = 80 cuadraditos.]

Valeria Herrera-Lasso Regs

Retculo de Neubauer

Recuento de eritrocitos en zonas rojas. Recuento de leucocitos en zonas beige.

Recuento de leucocitos. Sangre capilar Lquido de dilucin (Lquido de Trck) Pipetas dilutorias o microcapilar calibrado Cmara cuentaglbulos Microscopio Mtodo.-

Se utiliza lquido de Trck que tie los ncleos (cidos) con azul de metileno. Contiene, adems, cido actico para destruir a los eritrocitos y centrarse, nicamente, en leucocitos. 2. Se pincha con una microlanceta, como en el caso anterior y se aspira la sangre con una pipeta hasta el enrase de 0,5. Continuar con el lquido de Trck hasta 11. 3. Recuento (con objetivo de x10). Contar el nmero de leucocitos depositados en os 4 cuadrados grandes. 4. Clculo del resultado: La altura de la cmara es de 0,1mm x (superficie de los cuadrados grandes; 4mm2) = 0,4 mm3. Por lo tanto, para calcular los leucocitos presentes en 1mL de sangre, debemos multiplicar a la cifra de recuento x 0,4 (Trck) x 20 (factor de la disolucin). Factor de la disolucin: 1/20

1.

Valeria Herrera-Lasso Regs

Recordamos: Hemograma; serie blanca; Leucocitos totales: 5.000 - 10.000/mm3 Resultado Valeria: 10.200 leucos/mm3.

Importancia clnica.El recuento de hemates es fundamental para el diagnstico de las causas de las anemias, hay anemias que cursan con disminucin de la cifra de hemates (como las aplasias de mdula sea), las hemorragias internas tambin se reflejan en bajadas de del nmero de hemates. Un exceso de hemates (poliglobulia) puede ser indicio de policitemia. El aumento de leucocitos en sangre perifrica (Leucocitosis) sirve para el diagnstico y seguimiento de infecciones, y puede ser el primer signo en las leucemias. La ausencia de leucocitos se da en aplasias sanguneas. NOTAS.Los alumnos deben anotar el valor hemates por mm3. Los alumnos debern anotar el valor de leucocitos por mm3.