Estudo dirigido de microbiologia

1. O que fisso binria?

Fisso binria, em biologia celular, o o nome dado ao processo de reproduo assexuada dos organismos unicelulares que consiste na diviso de uma clula em duas por mitose, cada uma com o mesmo genoma da clula-me (com o mesmo DNA ou material gentico da "clula-me") O processo inicia-se com a replicao do DNA, em que cada nova cadeia se liga membrana celular que, ento se invagina e acaba por dividir a clula em duas, num processo chamado citocinese. Os organismos que se reproduzem por fisso binrina incluem: As bactrias; Os protozorios; A Pyrodictium abyssi, uma arquebactria anaerbica das nascentes hidrotermais das profundezas do oceano (e outros organismos do mesmo reino); As leveduras Tambm fala-se em cissiparidade no caso de organismos pluricelulares bastante simples que so capazes de regenerar partes divididas (o exemplo clssico a planria).

2. Quais so os fatores responsveis pela reproduo bacteriana?

A influncia de fatores ambientais, como a disponibilidade de alimentos, presso osmtica, temperatura, os gases do meio, e o pH, so fatores que influenciam diretamente a reproduo bacteriana,

3. Quais so as fases tpicas de uma curva padro de crescimento bacteriano?

Adaptao, onde h intensa atividade metablica e ausncia de diviso, conhecida como fase latente, desenvolvimento (crescimento), conhecida como fase logartmica ou exponencial, onde h mxima multiplicao do micro organismo, extino de nutrientes, tambm conhecida como fase estacionria, onde ocorre a escassez de alimentos, acumulo de metablicos e as bactrias crescem muito lentamente ou o nmeros de novos indivduos igual ao de mortes e morte, ou fase de declnio.

4. Como so classificadas as bactrias quanto utilizao do oxignio?

Aerbios: so os microrganismos que normalmente requerem oxignio para crescer. Facultativos: so os microrganismos que crescem na presena de oxignio ou na ausncia dele (anaerobiose). Anaerbios: so os microrganismos que ou crescem na presena de baixas concentraes de oxignio, os chamados de anaerbios facultativos, ou morrem quando esto na presena deste gs; estes so os chamados de anaerbios estritos. Microaerfilos: so organismos aerbios, porm somente crescem em concentraes de oxignio menores que a do ar (entre 1% e 15%).

5. Quais so os elementos quantitativos mais importantes para as bactrias?

Para a renovao da matria viva, os elementos quantitativamente mais importantes so o carbono, o hidrognio, o oxignio, o nitrognio, o enxofre e o fsforo.

6. O que so meios: a) Sintticos

Meios de cultura cuja composio qumica perfeitamente conhecida.

b) Complexos
Meios de cultura cuja composio exacta desconhecida. Como componentes apresentam ingredientes como peptonas, cuja formula no conhecida. Um exemplo deste tipo de meios o meio LB que um meio rico apropriado ao cultivo de diversos microrganismos, em particular de bactrias.

c) Seletivos
Contm substncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros. Exemplo: meios com telurito de potssio (para isolamento de Corynebacterium diphtheriae), gar Salmonella-Shigella (SS) e gar MacConkey, meios com sais biliares e verde brilhante para isolamento seletivo de Salmonella, meios com 7,5% de cloreto de sdio, meio Baird-Parker, para isolamento de Staphylococcus aureus, meios com antibiticos para isolamento de diversos microrganismos (TSC, SFP, , meio de Blaser, meio de Skirrow, etc.).

d) De transporte
Consiste em um meio isento de nutrientes, contendo um agente redutor (Tioglicolato ou cistena). Geralmente mantm o pH favorvel, previne a desidratao de secrees durante o transporte e evita a oxidao e auto-destruio enzimtica dos patgenos presentes. Ex.: Meio de Stuart, Meio de Cary-Blair e Caldo Tioglicolato.

e) De enriquecimento
Quando proporcionam nutrientes adequados ao crescimento de microrganismos presentes usualmente em baixos nmeros ou de crescimento lento, bem como microrganismos exigentes e fastidiosos. Esses meios tm a propriedade de estimular o crescimento de determinados microrganismos, mas existem alguns que tambm podem inibir o crescimento de outros. Ex. Caldo Tetrationato e Selenito-Cistina para cultivo de Salmonelas (lquidos), Caldo Tioglicolato para Clostridium perfringens.

f) Diferenciais
Quando contm substncias que permitem estabelecer diferenas entre microrganismos muito parecidos, tais como meio de Teague ou Eosina Azul de Metileno (diferencial para coliformes), gar MacConkey para a diferenciao de enterobactrias, gar sangue, agar Baird-Parker para isolamento e diferenciao de cocos Gram positivos (slidos).

7. O que cultura pura?

Aquela que se origina do crescimento de uma nica clula (pureza gentica).

8. Como so classificadas as bactrias quanto temperatura?

Bactrias mesfilas Bactrias mesfilas apresentam crescimento timo em temperaturas variando entre 25C e 40C, ou seja, a faixa de temperatura mais comum na superfcie da Terra e nos organismos animais. A maioria dos patgenos humanos apresenta crescimento timo em temperaturas prximas de 37C. Bactrias termodricas, tais como Bacillus cereus, Clostridium botulinum e Listeria monocytogenes, geralmente vivem como mesfilas, mas podem suportar temperaturas elevadas por curtos perodos de tempo. Bactrias psicrfilas obrigatrias Bactrias psicrfilas obrigatrias requerem baixas temperaturas para seu crescimento; o crescimento timo se d abaixo de 15C. Algumas espcies marinhas toleram temperaturas negativas uma vez que a gua do mar permanece lquida em temperaturas abaixo de 0C. Tais organismos morrem quando expostos temperatura ambiente. Sua adaptao a baixas temperaturas devido ao alto contedo de cidos graxos insaturados em suas membranas. Bactrias psicrfilas facultativas Bactrias psicrfilas facultativas ou psicrotrficas apresentam crescimento timo em temperaturas abaixo de 20C, mas podem crescer, embora mais lentamente, em temperaturas de refrigerador e tm alta probabilidade de contaminar e estragar produtos resfriados tais como alimentos (por exemplo, Bacillus cereus) e sangue. Bactrias termfilas Bactrias termfilas so aquelas cujas taxas de crescimento timo esto entre 50C e 60C; so encontradas em pilhas de adubo orgnico. Algumas espcies toleram temperaturas de at 110 C em fontes termais. As enzimas dos organismos termfilos apresentam propriedades de termo-estabilidade que lhes permitem atingir um pico de atividade entre 60C e 80C.

Dentro dessa categoria encontram-se os organismos termfilos obrigatrios que s crescem em temperaturas acima de 37C e os termfilos facultativos que podem crescer em temperaturas abaixo de 37 C. A bactria Bacillus stearothermophillus cresce otimamente entre 65 e 75C, mas pode apresentar um pequeno crescimento e deteriorar alimentos em temperaturas em torno de 30C. Os esporos dessa bactria so utilizados para controlar o funcionamento de autoclaves em laboratrios de microbiologia. Dentre os termfilos obrigatrios encontram-se as bactrias hipertermfilas que apresentam crescimento timo em temperaturas em torno e acima dos 85C. H apenas trs gneros de bactrias hipertermfilas: Aquifex, Thermocrinis eThermotoga.

9. Como so classificadas as bactrias quanto morfologia?

Cocos: so clulas bacterianas, esfricas no-perfeitas, quando esto associadas, recebem outro nome de acordo o seu arranjo Assim temos os cocos isolados, diplococos (Neisseria, pneumococos), tetracocos, sarcinas (cubos contendo 8 clulas), estreptococos (cocos em cadeia) e estafilococos (cocos formando massas irregulares). Bacilos: so clulas cilndricas, em forma de bastonete, em geral se apresentam como clulas isoladas porm, ocasionalmente pode-se observar bacilos aos pares (diplobacilos) ou em cadeias (streptobacilos). Espiraladas: so bactrias de forma espiralada podendo ser classificadas em: Vibrio: possui a forma de sabonete curvo ou de virgula. Espirilo: forma helicoidal e corpo rgido Espiroquetas: forma helicoidal e corpo flexvel.

10. Para que serve a colorao de Gram? E a Colorao de Ziehl-Neelsen?

A colorao de Gram um mtodo de colorao de bactrias desenvolvido pelo mdico dinamarqus Hans Christian Joachim Gram (1853 - 1838), em 1884, e que consiste no tratamento sucessivo de um esfregao bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol, etanol-acetona e fucsina bsica. Essa tcnica permite a separao de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas e a determinao da morfologia e do tamanho das amostras analisadas. O mtodo da colorao de Gram baseado na capacidade das paredes celulares de bactrias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactrias Gram-negativas no o fazem. A colorao de Gram um dos mais importantes mtodos de colorao utilizados em laboratrios de microbiologia e de anlises clnicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterizao de amostras de bactrias. A tcnica tem importncia clnica uma vez que muitas das bactrias associadas a infeces so prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaos de pus ou de fluidos orgnicos. Essa informao permite ao clnico monitorar a infeco at que dados de cultura estejam disponveis. possvel a anlise de vrios esfregaos por lmina, o que facilita a comparao de espcimes clnicos. As lminas podem ser montadas de forma permanente e preservadas como documentao. A Tcnica de Ziehl-Neelsen uma tcnica de colorao de bactrias mais agressiva que a tcnica de Gram. Ela usada em bactrias que coram mal com o Gram, como os bacilos da Lepra e da tuberculose, entre outros. Tcnica de Ziehl-Neelsen

H bactrias que so resistentes colorao, mas que uma vez coradas vo resistir fortemente descolorao, mesmo por cidos fortes diludos e lcool absoluto. s bactrias que possuem esta propriedade dizemos que so cido-lcool resistentes(gneros Mycobacterium e Nocardia). Esta carcaterstica devida ao elevado teor de lipdios estruturais (ex. cido miclico) na parede celular destas bactrias, que provoca uma grande hidrofobicidade, dificultando a ao dos mordentes e diferenciadores de corantes aquosos. A tcnica de Ziehl-Neelsen evidencia esta cido-lcool resistncia.

11. O que permite diferenciar as bactrias quanto a colorao de Gram?

Esta diferenciao baseia-se na diferente estrutura e composio, nomeadamente no diferente teor lipdico, da parede celular de bactrias Gram positivas e Gram negativas. A parede celular das bactrias Gram negativas tem um teor em lpidos elevado na sua membrana externa, para alm de uma camada fina de peptidoglicano que circunda a membrana plasmtica. Em consequncia, durante o passo de diferenciao pelo alcool, parte dos lpidos so dissolvidas pelo alcool, formando-se poros na parede por onde o corante primrio (violeta de cristal) sai das clulas. Estas clulas ficam transparentes aps o passo de diferenciao pelo lcool, sendo posteriormente coradas com o corante secundrio (safranina). A parede celular das bactrias Gram positivas constituda principalmente por uma camada grossa de peptidoglicano e o seu teor em lpidos nulo ou muito baixo (em poucas espcies bacterianas). A camada de peptidoglicano actua, assim, como uma barreira impedindo a sada do corante primrio e estas clulas ficam coradas de violeta escuro.

12. Qual a importncia mdica dos flagelos?

13. Qual a importncia da membrana plasmtica?

14. Qual a funo do pilus?

Os pili so microfibrilas proteicas que se estendem da parede celular em muitas espcies Gram-negativas. Tm funes de ancoramento da bactria ao seu meio e so importantes na patognese. Um tipo especial de pilus o pilus sexual, estrutura oca que serve para ligar duas bactrias, de modo a trocarem plasmdeos. (Pilus vem do Latim, que significa plo, cabelo. Pili Plural; Pilus - Singular)

15. Qual a importncia da cpsula para a bactria?

A cpsula bacteriana a camada rgida com fronteira definida formada por uma srie de polmeros orgnicos que nas bactrias se deposita no exterior da sua parede celular. Geralmente contm glicoprotenas e um grande nmero de polissacridos diferentes, incluindo polilcoois e aminoacares. A cpsula uma camada rgida organizada numa matriz impermevel que exclui corantes como a tinta da china. A camada de material extracelular que se deforma com facilidade, incapaz de excluir partculas e no tem um limite definido, denominase glicoclice. Ambas podem ser detectadas com diversos mtodos de colorao. A cpsula permite s bactrias terem uma camada protectora resistente fagocitose. Tambm utilizada como depsito de alimentos e como lugar de eliminao de substncias. Protege da desidratao, j que contem uma grande quantidade de gua disponvel em condies adversas. Evita tambm o ataque dos bacterifagos e permite a adeso da bactria s clulas animais do hospedeiro.

16. Diferencie eucarionte de procarionte.

As clulas procariontes ou procariotas so diferentes das eucariontes . Sua maior diferena que as clulas procariontes no possuem carioteca. A carioteca uma membrana que separa o material gentico do citoplasma. As clulas eucariontes ou possuem a carioteca, individualizando o material nuclear da clula.

Veja bem: em ambas clulas existe o material gentico, mas nas procariontes este est boiando no citoplasma. E na clula eucarionte, o material gentico est no ncleo separado pela carioteca do restante da

17. O que biofilme? Como ele formado?

Biofilme microbiano uma colnia de microrganismos envolvida e associada a uma matriz extracelular de natureza polissacardica ( glicocalix like). A matriz polissacardica responsvel pela adeso entre as clulas, pela adeso a superfcies moles e duras e pela proteo dos microrganismos contra fagcitos, anticorpos ( imunoglobulinas ) complemento e agentes antimicrobianos, incluindo antibiticos e medicao intracanal. Biofilme se forma em qualquer superfcie mida exposta a microrganismos: dentes, prteses, restauraes, canos de esgoto, cascos de navio, caixas de gua, encanamentos de piscina e de equipamento odontolgico. Trata-se de um consrcio de clulas microbianas associadas a glicoproteinas formando uma colnia mista e complexa, sendo aerbia no exterior e anaerbia no interior.

18. Cite as classificaes para os seguintes meio de cultura: a) gar chocolate Enriquecimento (meio nutritivo maioria bactrias) b) gar sangue Enriquecimento (meio no seletivo, de crescimento de bactrias gram e +) c) gar MacConkey Diferencial (Seletivo gram -, inibe crescimento bactrias gram+) d) Tioglicolato - Transporte e) Stuart - Transporte f) Cary-Blair - Transporte g) gar Salmonela-Shiguella - seletivo e diferencial isolamento 19. Qual a estrutura que determina a forma da bactria?
O peptidoglicano a estrutura que confere rigidez parede celular de bactrias, determina a forma da bactria e a protege da lise osmtica, quando em meio hipotnico